E型可见光分光光度计操作规程

E型可见光分光光度计操作规程

721E型可见光分光光度计操作规程

一、仪器准备:

1 环境温度在5—35℃,相对湿度不大于85%

2 检查电源线是否连接良好,

3 检查样品室内光路上是否有物体遮挡,如有应取出、关闭样品室盖。

4 打开仪器电源开关,使仪器预热20分钟。

5 用“波长设置”旋钮将波长设置在将要使用的波长位置上。

6 打开样品室盖,将挡光体插入比色皿架,将其推入或拉入光路中。

7 盖上样品室盖,按“方式键”(mode)把测试方式设置为透射比方式(T方式)。

8 按“0%T”键,仪器自行调节透射比为“0”

9 取出挡光体,盖上样品室盖,按“100%T/0ABS”键,仪器自行调节透射比为100%。

注:在仪器不关机的情况下,仪器的“0%T”无需重复调节。

二、样品测试:

1 按“方式键”把测试方式设置为吸光度方式(abs模式)

2 把参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中,液面高度不低于25毫米。

3 打开样品室盖,把盛有溶液的比色皿分别插入比色槽中,盖上样品室盖。

4 把参比溶液推入光路,按“”键,仪器自行调整吸光值(abs)为“”。

5 把被测溶液推入光路中,显示器上所显示是被测样品的吸光值。6.在非测定状态,将挡光体推入或拉入光路中。

7、连续测定时,对样品可直接测定不必再次调节0%t、100%T/0ABS。

紫外可见分光光度计计量标准技术报告.docx

)))))))) 计量标准技术报告 计量标准名称紫外可见分光光度计检定装置 计量标准负责人 建标单位名称(公章)新月市质量技术监督检验测试中心填写日期

目录 一、建立量准的目的?????????????????????( 01 ) 二、量准的工作原理及其成??????????????( 01) 三、量准器及主要配套????????????????( 02 ) 四、量准的主要技指??????????????????( 03 ) 五、境条件?????????????????????????( 03 ) 六、量准的量溯源和框???????????????( 04 ) 七、量准的重复性???????????????????( 05 ) 八、量准的定性考核????????????????????( 06 ) 九、定或校准果的量不确定度定?????????????( 07 ) 十、定或校准果的???????????????????( 11 )十一、??????????????????????????( 12 )十二、附加明?????????????????????????( 12 )

一、建立计量标准的目的 紫外可见分光光度计属强制检定的计量器具,为了统一这些计量器具的量值,向企业提供全面可靠的计量 服务,确保该计量器具不影响我市的工业安全生产,卫生环境检测,建立了这一社会公用计量标准。 二、计量标准的工作原理及其组成 紫外可见分光光度计检定装置根据 JJG178-2007 《紫外、可见、近红外分光光度计检定规程》提供的方 法 , 紫外、可见分光光度计的主要检定项目是波长准确度和透射比准确度两项。 1、波长准确度检定: 在规定的条件下,用被测紫外可见分光光度计直接测标准滤光片(或溶液),测得的透射比波谷(波峰)所对应波长值,重复测量 3 次,其算术平均值与标准波长之差,即为波长示值误差。 2、透射比准确度检定: 用被测可见分光光度计在规定的波长处,以空气为参比,分别测(透射比标称值为10%、 20%、 30%)标准中性滤光片的透射比(示值),用被测紫外分光光度计在规定的波长处,以空白为参比,测重铬酸钾-高氯酸标准溶液的透射比(示值),重复测量 3 次,其算术平均值与相应下的透射比的标准值之差,即为透 射比的示值误差。 紫外可见分光光 氧化钬滤光片 镨铒滤光片 度计 镨钕滤光片 杂散光滤光片 干涉滤光片 低压汞灯 重铬酸钾 - 高氯酸标准溶液 标准中性滤光片

24.红外分光光度计的校准

二、范围:适用于本公司使用的红外分光光度计。 三、责任:计量校准人员对此表的检定负责。 四、内容: 1.校准人员必须为本公司授权的可开展校准红外分光光度计的校准人员。 2.校准此表时按杭州中美华东制药有限公司制订的《红外分光光度计校准规范》ZG08-2009执行。 3.校准步骤: 3.1校准环境温度:(15~30)℃;相对湿度:≤60%。 3.2依照中国药典2005版(ChP 2005)附录IV C 红外分光光度计。 3.2.1检查外观:外观与初步检查应正常。 3.2.2波数正确度的测量:取聚苯乙烯标准片校正仪器,绘制光谱图。红外分光光度计在3000cm-1附近的波数误差应不大于±5 cm-1,在1000cm-1附近的波数误差应不大于±1cm-1。 3.2.3分辨率的测量:仪器的分辨率要求在(3110~2850) cm-1范围内应能清晰地分辨出7个峰。 3.2.4透光率的测量:峰2851 cm-1与谷2870 cm-1之间的分辨深度应不小于18%透光率,峰1583 cm-1与谷1589 cm-1之间的分辨深度应不小于12%透光率。 3.3依照欧洲药典6.0版(EP 6.0)2.2.2 4.Absorption spectrophotometry,infrared 3.3.1检查外观:外观与初步检查应正常。 3.3.2波数正确度的测量:取聚苯乙烯标准片校正仪器,绘制光谱图。红外分光光度计扫描在3060.0cm-1,2849.5 cm-1, 1942.9 cm-1,1601.2 cm-1,1583.0 cm-1,115 4.5 cm-1,1028.3 cm-1有吸收。波数误差应不大于±1cm-1。 3.3.3吸光度的测量:峰2849.5 cm-1与谷2870 cm-1之间的分辨深度应不小于0.33的吸光度,

紫外-可见分光光度计计量实用标准技术报告材料.docx

标准实用 计量标准技术报告 计量标准名称紫外可见分光光度计检定装置 计量标准负责人 建标单位名称(公章)新月市质量技术监督检验测试中心填写日期

目录 一、建立量准的目的?????????????????????( 01 ) 二、量准的工作原理及其成??????????????(01) 三、量准器及主要配套????????????????(0 2 ) 四、量准的主要技指??????????????????( 03 ) 五、境条件?????????????????????????( 0 3) 六、量准的量溯源和框???????????????(04) 七、量准的重复性???????????????????(0 5) 八、量准的定性考核????????????????????(06) 九、定或校准果的量不确定度定?????????????(07)

十、定或校准果的???????????????????(1 1 )十一、??????????????????????????( 1 2 ) 十二、附加明?????????????????????????(1 2 )

一、建立计量标准的目的 紫外可见分光光度计属强制检定的计量器具,为了统一这些计量器具的量值,向企业提供全面可靠的 计量服务,确保该计量器具不影响我市的工业安全生产,卫生环境检测,建立了这一社会公用计量标准。 二、计量标准的工作原理及其组成 紫外可见分光光度计检定装置根据JJG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计检定规程》提供 的方法 , 紫外、可见分光光度计的主要检定项目是波长准确度和透射比准确度两项。 1 、波长准确度检定: 在规定的条件下,用被测紫外可见分光光度计直接测标准滤光片(或溶液),测得的透射比波谷(波峰)所对应波长值,重复测量 3 次,其算术平均值与标准波长之差,即为波长示值误差。 2 、透射比准确度检定: 用被测可见分光光度计在规定的波长处,以空气为参比,分别测(透射比标称值为 10% 、20% 、30% )标准中性滤光片的透射比(示值),用被测紫外分光光度计在规定的波长处,以空白为参比,测重铬酸钾-高氯酸标准溶液的透射比(示值),重复测量 3 次,其算术平均值与相应下的透射比的标准值之差,即为 透射比的示值误差。 紫外可见分光光 氧化钬滤光片 度计 镨铒滤光片 镨钕滤光片

原子吸收分光光度计检定规程

国家标准-原子吸收检定规程详文 目录 一 ?概述 二 ?技术条件 三 ?检定条件 四检定项目和检定方法 五检定结果处理和检定周期 附录检定用空心阴极灯稳定性(暂行)检测方法 原子吸收分光光度计检定规程 本规程适用于新制造、使用中和修理后的单、双光束原子吸收分光光度计(以下简称仪器)的检定。 一 ??概述 原子吸收分光光度计是根据被测元素的基态原子对特征辐射的吸收程度进行定量分析的仪器。其测量原理是基于光吸收定律: A=–lg I/I =–lg T =KCL 0? 式中A吸光度(其单位为A ); ??? ??????I入射光强度 ??? ??????I0透射光强度 T透射比 ???? K吸光系数 ???? C样品中被测元素的浓度 ??? ?L光通过原子化器的光程 仪器的主要结构如下:特征辐射光源---原子化器---单色仪---检测系统 按光束形式可将仪器分为单光束型和双光束型,原子化器可分为火焰原子化器及无火焰(石墨炉)原子化器等。

二 ?技术要求 1 ?外观与初步检查 ?仪器应有下列标志:仪器名称、型号、制造厂名、出厂编号与出厂日期等。 ?仪器及附件的所有紧固件应紧固良好;连接件应连接良好;运动部件应运动灵活、平稳;气路系统应可靠密封,不得泄露。 ?仪器的各旋钮及功能键应能正常工作;由计算机控制或带微机的仪器,当由键盘输入指令时,各相应的功能应正常。 2 波长示值误差与重复性 波长示差误差不大于±,波长重复性优于 3 分辨率 仪器光谱带宽为时,应可分辨和双线 4 基线稳定性 30min内静态基线和点火基线的稳定性应不大于表1所列指标。 表1????????????????? ??????????????????基线稳定性?????? ??????????????????????????(A) 5 边缘能量 在仪器波长处,应能对,铯谱线进行测定,其瞬时躁声应小于。 )和精密度(RSD) 6 火焰法测定铜的检出限(C L(K =3) 新制造仪器应分别不大于μg/ml和1%;使用中和修理后的仪器应分别不大于μg/ml和%。 ),特征量(C。M。)和精密度(RSD) 7 石墨炉法测定隔的检出限(C L(K =3)

紫外-可见光分光光度计

紫外-可见光分光光度法 一、技术原理 紫外-可见分光光度法是在190?800mn波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmix。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。 二、浓度测定基本原理 朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法的基本原理。当一束单色光通过一均匀的溶液时,一部分被吸收,一部分透过,设入射光的强度为I0,透射光强度为I,则I/I0为透光度,用T表示。 当溶液的液层厚度不变时,溶液的浓度越大,对光的吸收程度越大,则透光度越小。 即:-lgT=a1*c(式中a1为常数,c为浓度) 当溶液浓度不变时,溶液的液层厚度越大,对光的吸收程度越大,则透光度越小。

即:- lgT=a2*b(b为液层厚度) 将以上两式合并可用下式表示:lgT=a*b*c 研究表明:溶液对光的吸收程度即吸光度(A)又称消光度(E)或光密度(OD)与透光度(T)呈负对数关系,即:A=-lgT 故A=a3*b*c(a3为吸光系数)。 上式为朗伯比尔定律,其意义为:当一束单色光通过一均匀溶液时,溶液对单色光的吸收程度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。 三、仪器的矫正和检定 1.波长矫正 常使用高氣酸钦溶液校正双光束仪器,以10%高氯酸溶液为溶剂,配制含氧化钬(Ho2O3 ) 4 % 的溶液,该溶液的吸收峰波长为241. 13nm,278. 10nm,287. 18nm,333. 44nm,345. 47nm,361. 31nm,416. 28nm,451. 30nm,485. 29nm,536. 64nm和640. 52nm。仪器波长的允许误差为:紫外光区±1nm,500nm附近±2nm。 2.吸光度的准确度 可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg,精密称定,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000mL,在规定的波长处测定并计算其吸收系数,并与规定的吸收系数比较,应符合表中的规定。

可见分光光度计校准规程

MV_RR_CNG_0036可见分光光度计检定方法 1.可见分光光度计检定规程说明 编号 JJG 178—1996 名称(中文)可见分光光度计检定规程 (英文)Verification Regulation of Visible Range Spectrophotometer 归口单位浙江技术监督局 起草单位浙江省技术监督检测研究院 主要起草人王洁(浙江省技术监督检测研究院) 批准日期 1996年12月31日 实施日期 1997年6月1日 替代规程号 JJG 178—89 适用范围本规程适用于新制造、使用中和修理后、波长范围为360nm~800nm 或以此为主要谱区的可见分光光度计的检定。 主要技术要求1.稳定性 2.波长准确度 3.波长重复性 4.透射比准确性 5.透射比重复性 6.杂散辐射率 7.光谱带宽 8.τ- A换档偏差 是否分级分为 3 级; 检定周期(年) 1 附录数目 5 出版单位中国计量出版社 检定用标准物质 相关技术文件 备注 附录(本附录仅为技术文件的摘要,如需全文,请与出版发行单位联系)146

2.可见分光光度计检定规程摘要 一技术要求 1 外观与初步检查 1.1 样品室应密封良好,无漏光现象。样品架应推拉自如、正确定位。 1.2 仪器处于工作状态时,光源发光应稳定无闪烁现象。当波长置于580 nm处时,在样品室内应能看到正常的黄色光斑。 1.3 仪器光谱范围的两端(有灵敏度换档开关的仪器,可选在合适的灵敏度档次),光量调节系统应能使透射比超过100%。 1.4 吸收池的透光面应光洁,无划痕和斑点,任一面不得有裂纹。 2 稳定度 2.1 仪器零点在3 min内漂移引起的透射比示值变化应符合相应的要求。 2.2 光电流在3 min内漂移引起的透射比示值变化应符合有关要求。 2.3 电源电压220 V变动其±10%时,仪器透射比示值变化应符合有关的要求。 3 波长准确度与波长重复性 4 透射比准确度与透射比重复性 5 杂散辐射率(杂散光) 光栅型仪器在波长360 nm处,棱镜型仪器在波长420 nm处,杂散辐射率应不大于规定的技术指标。 6 光谱带宽 光栅型仪器光谱带宽应不大于规定的技术指标。 7 τ-A换档偏差 带有τ-A换档的仪器,选择开关(或按键)换档引起的吸光度示值偏差应符合要求。 8 吸收池的配套性 配套使用的同一光径吸收池间的透射比之差(在440 nm与700nm处)不得超过0.5%。 9 绝缘电阻 仪器的绝缘电阻应不小于5 MΩ。 二检定条件 10 检定环境条件 10.1 温度(10~30)℃;相对湿度小于85%RH。 10.2 电源电压 (220±22) V,频率(50±1) Hz。 10.3 仪器检定处不得有强光直射;放置仪器的工作台应平稳。周围无强磁场、电场干扰,无强气流及腐蚀性气体。 11 检定设备 11.1 调压变压器,规格为500 VA,输出0~250 V可变。 11.2 频率计,45~55 Hz,准确度0.5%。 11.3 交流电压表,准确度2.5 级。 11.4 兆欧表,试验电压500 V,准确度1.0 级。 * *12 标准器与标准物质 147

694-90原子吸收分光光度计检定规程

MV_RR_CNG_0167 原子吸收分光光度计检定规程 1.原子吸收分光光度计检定规程说明 2. 原子吸收分光光度计检定规程摘要 一 概 述 原子吸收分光光度计是根据被测元素的基态原子对特征辐射的吸收程度进行定量分析的仪器。其测量原理是基于光吸收定律:

https://www.360docs.net/doc/1d12064858.html, https://www.360docs.net/doc/1d12064858.html, https://www.360docs.net/doc/1d12064858.html, A =-1g l —l =-1g T =KCL (1) 式中 A ——吸光度 (其单位为A); I 0——入射光强度; I ——透射光强度; T ——透射比; K ——吸光系数; C ——样品中波测元素的浓度; 按光束形式可将仪器分为单光束型及双光束型;原子化器可分为火焰原子化器及无火焰 (石墨炉) 原子化器等。 二 技术要求 1 外观与初步检查 1.1 仪器应有下列标志:仪器名称、型号、制造厂名、出厂编号与出厂日期等。 1.2 仪器及附件的所有紧固件均应紧固良好;连接件应连接良好;运动部位应运动灵活、平稳;气路系统应可靠密封,不得泄漏。 1.3 仪器的各旋钮及功能键应能正常工作;由计算机控制或带微机的仪器,当由键盘输入指令时,各相应的功能应正常。 2 波长示值误差与重复性 波长示值误差不大于±0.5 nm,波长重复性优于0.3 nm。 3 分辨率 仪器光谱带宽为0.2 nm时,应可分辨锰279.5 nm和279.8 nm双线。 4 基线稳定性 30 min内静态基线和点火基线的稳定性应不大于表1所列指标。 表 1 基线稳定性 (A) 项 目 新 制 造 使用中和修理后 最大零漂 ±0.005 ±0.006 静态基线 最大瞬时噪声 0.005 0.006 最大零漂 ±0.006 ±0.008 点火基线 最大瞬时噪声 0.006 0.008 5 边缘能量 在仪器边缘波长处,应能对砷193.7 nm,铯852.1 nm谱线进行测定,其瞬时噪声应小于0.03 A。 6 火焰法测定铜的检出限 (C L(K = 3)) 和精密度 (RSD) https://www.360docs.net/doc/1d12064858.html, https://www.360docs.net/doc/1d12064858.html, https://www.360docs.net/doc/1d12064858.html, https://www.360docs.net/doc/1d12064858.html,

722可见光分光光度计操作规程

722可见光分光光度计操作规程 环境要求 1、仪器应安装在无震动,无强烈电磁场干扰、无强光照射的室内工作台上,避免灰尘及腐蚀性气体。 2、室内环境温度为5-35℃,相对湿度小于85%。 3、电源电压220V±22V,频率50HZ±1HZ。 操作要点: 1、插上电源,打开开关,打开试样室盖,按“A/T/C/F”键,选择“T%”状态,选择测量所需波长,预热20分钟。 2、调节波长旋钮至测定波长,并稍等几分钟。 3、开始测量前要先调节仪器的零点,方法为: 保持在“T%”状态,使光路通畅,当关上试样室盖时,屏幕应显示“100.0”,如否,按“T100%”键;打开试样室盖,屏幕应显示“000.0”,如否,按“0%”键,重复2-3次,仪器本身的零点即可调好,可以开始测量。 以标准对比法为例: 3、用空白溶液润洗一个比色皿,装样到比色皿的3/4处(必须确保光路通过空 白溶液中心),用吸水纸吸干比色皿外部所沾的液体,将比色皿的光面对准光路 放入比色皿架,用同样的方法将所测样品装到其余的比色皿中并放入比色皿架中。4、将装有待测溶液的比色皿拉入光路,关上试样室盖,按“A/T/C/F”键,调 到“Abs”,按“Abs0”键,屏幕显示“0.000”,将其余测试样品一一拉入光路,记下测量数值即可(不可用力拉动拉杆)。 5、测量完毕后,将比色皿清洗干净(最好用乙醇清洗),擦干,放回盒子,关 上开关,拔下电源,罩上仪器罩,并打扫卫生,才可离开。 6、本操作要点只针对测量吸光度而言。 注意事项: 1、仪器使用前需开机预热20分钟。 2、开关试样室盖时动作要轻缓。 3、不要在仪器上方倾倒测试样品,以免样品污染仪器表面,损坏仪器,一定 要将比色皿外部所沾样品擦干净,才能放进比色皿架进行测定。 4、每套仪器所配套的变色皿,不能与其它仪器上的比色皿单个调换。 5、如大幅度改变测试波长,在调整“0”和“100%”后稍等片刻,稳定后重新调整即可工作。 6、仪器表面宜用温水擦拭,请勿使用酒精、丙酮等溶剂清洁,不使用时请加防尘罩。比色皿每次使用后应清洗干净,并用镜头纸轻拭干净,存于比色皿盒中备用。 7、有任何疑问请报告指导老师。

2021新版使用分光光度计安全操作规程

( 操作规程 ) 单位:_________________________ 姓名:_________________________ 日期:_________________________ 精品文档 / Word文档 / 文字可改 2021新版使用分光光度计安全 操作规程 Safety operating procedures refer to documents describing all aspects of work steps and operating procedures that comply with production safety laws and regulations.

2021新版使用分光光度计安全操作规程 使用前应先检查电路接线是否正确,接地是否良好。 2.打开电源开关,打开样品池盖,预热二十分钟和方可使用。 3.不要长时间开机,让光电池疲劳,使测量结果有误差,一般开机2小时。 4.手指不能接触比色皿的透光面,以免影响测定结果,比色皿透光面要轻轻用擦镜纸擦拭。 5.测定高浓度溶液时,要将溶液稀释。 6.测量易挥发和有腐蚀性的样品溶液时,应在比色皿上加盖,认防样品液挥发或溢出。 7.测定完毕,关闭仪器电源开关,取出比色皿,清洗干净放入比色皿盆内,再切断电源。 8.为了避免仪器积灰和沾污,在停止工作的时间里,用防尘罩

罩住仪器,同时在罩子内放置干燥剂,以免灯室受潮、反射镜镜面发霉或沾污,影响仪器日后的工作,如果干燥剂变色要及时更换。 9.仪器工作数月或搬动后,要检查波长准确度,以确保仪器的使用和测定精度。 10.使用过程中出现异常,要停止使用,并通知维修人员进行修理。 云博创意设计 MzYunBo Creative Design Co., Ltd.

72型分光光度计工作原理

72型分光光度计工作原理 72型分光光度计是可见光分光光度计,波长范围为420nm~700nm,它由三大部分组成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。 72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律,它是根据相对测量原理工作的,即先选定某一溶剂作为标准溶液,设定其透光率为100%,被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的,即让单色光分别通过被测试样和标准溶液,二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率。如图所示,白色光源经入射狭缝、反射镜和透光镜后,变成平行光进入棱镜,色散后的单色光经镀铝的反射镜反射后,再经过透镜并聚光于出射狭缝上,狭缝宽度为0.32nm。反射镜和棱镜组装在一可旋转的转盘上并由波长调节器的凸轮所带动,转动波长调节器便可以在出光狭缝后面选择到任一波长的单色光。单色光透过样品吸收池后由一光量调节器调节为适度的光通量,最后被光电电池吸收,转换成电流后由微电计指示,从刻度标尺上直接读出透光率的值。 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。 分光光度计的简单原理 分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被

吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。 事实上,分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和精确度。如EppendorfBiophotometer的准确度≤1.0%(1A)。这样多次测试的结果在均值 1.0%左右之间变动,都是正常的。另外,还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值,离子浓度等:在测试时,离子浓度太高,也会导致读数漂移,因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液,如TE,可大大稳定读数。样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素:由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒,尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了最大程度减少颗

分光光度计检定规程详细

分光光度计检定规程详细 UV-2450简介V-2450是一款博得了用户高度评价的紫外可见分光光度计,性能卓越且操作简单方便,与功能强大的操作软件UVProbe结合,可以具备强大的功能。小光斑的光学系统使得微量的测定更为方便。 UV-2450紫外可见分光光度计特点1.高水平的超低杂散光 UV-2550采用优异的DDM(双闪耀衍射光栅、双单色器)技术实现了超低杂散光(0.0003%以下)和高光通量。UV-2450虽然采用单单色器,杂散光也在0.015%以下。低的杂散光可以对高浓度的样品不进行稀释而直接测定。 2.通用型的软件UVProbe UV-2450/2550通过新一代的中英文双语操作软件UVProbe控制,包含光谱测定、光度测定、动力学测定和报告处理四大模块,从基本的测定到研究解析都可以通过它实现。UVProbe实现了真正的QA/QC功能,完全支持GLP、GMP。另外还可以加载膜厚测定、色彩分析等软件。 3.丰富的附件选择和广泛的应用领域 生命科学领域:可对从生命体内得到的微量样品进行测试。积分球测试:可以对浑浊样品和粉末状的样品进行测试。反射附件:可以对光学材料进行相对反射和绝对反射的测定。 UV 2450紫外可见分光光度计检定规程本仪器工作波段为190~900nm,,将其分为190~340nm、340nm~900nm两段分别检定。 1、计量性能要求1.1波长最大允许误差:A段:0.5,B段:1.0 1.2波长重复性:A段:0.2,B段:0.5 1.3噪声与漂移:0%透射比:0.1;100%透射比:0.2;漂移:0.2 1.4透射比最大允许误差:A段:0.5,B段:0.5 1.5透射比重复性:A段:0.2,B段:0.2

分光光度计的原理分类

分光光度计的原理分类 一.分光光度计的一般原理是什么? 分光光度计是利用分光光度法,通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。 不同种类的分光光度计的基本原理相似,都是利用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源。光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,通过测量样品的吸光值,经过计算可以转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 二.分光光度计有哪些不同的类型,不同种类的应用领域有什么区别? 分光光度计有哪几种不同的分类方式: 1.分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为:(1)可见光分光光度计:测定波长范围为400~760 nm的可见光区;(2)紫外分光光度计:测定波长范围为200~400nm的紫外光区;(3)红外分光光度计:测定波长范围为大于760nm的红外光区;(4)荧光分光光度计:用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱;(5) 原子吸收分光光度计:光源发出被测的特征光谱辐射,被经过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收,通过测定特征辐射被吸收的大小,来求出被测元素的含量。 2.分光光度计按自动化程度分类:可分为手动、半自动、自动分光光度计。 3.分光光度计按软件可分为:带扫描、不带扫描。 三.分光光度计最常见的用途和常用波长有哪些? 1.核酸的定量 核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。利用260nm的波长可以定量测量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA的浓度。 除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度。如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

FAAS鉴定规程

MV_RR_CNG_0135 火焰光度计检定规程 1.火焰光度计检定规程说明 编号JJG630-1989 名称(中文)火焰光度计检定规程 (英文)Verification Regulation of Flame Photometer 归口单位黑龙江省技术监督局 起草单位黑龙江省计量科学研究所 主要起草人叶军安(黑龙江省计量科学研究所) 批准日期 1989年8月15日 实施日期 1990年6月15日 替代规程号 适用范围本规程适用于以滤光片获得单色光的、作非连续取样、对钾、钠等元素进行定量分析用的新制造、使用中和修理后的火焰光度计的检 定。 主要技术要求1 外观与初步检查 2 稳定度 3 定量检测下限 4 重复性 5 线性误差 6 干涉滤光片透光特性 7 响应时间 8 溶液耗量 9 绝缘电阻 是否分级 否 检定周期(年) 1 附录数目 3 出版单位中国计量出版社 检定用标准物质 相关技术文件 备注 2. 火焰光度计检定规程摘要 一概述 火焰光度计(以下简称仪器) 是根据某种元素的原子或离子受火焰激发后能发出其特征波长谱线的特性和JI OM a KNH (罗马金) 公式的原理,测量物质含量的分析仪器。 JI OM a KNH公式的数学表达式为: I=aC b 式中:I——谱线强度; a——与激发元素的特性及激发光源等有关的系数,在固定实验条件下a为常数; b——自吸系数;

C——标准溶液中元素的浓度。 当元素浓度较低时,b值接近于1,则有 I=aC 仪器主要由光源系统、单色系统及检测系统组成。 二技术要求 1 外观与初步检查 1.1 仪器应有下列标志:仪器名称、型号、编号、制造厂名、出厂日期、电源电压和许可证标志。 1.2 仪器应平稳地置于工作台上,各紧固件均应紧固良好。各调节旋钮、按键和开关均能正常工作,无松动现象。电缆线的接插件应接触良好,外观不应有明显的机械损伤。 1.3 指示器应工作正常。刻线应清晰、粗细均匀。指针的宽度不得大于刻线的宽度,并应与刻线平行,显示数字清晰、不缺笔划。 1.4 气路连接正确无误,开启空气压缩机不得有漏气现象。空气源压力应符合出厂说明规定的指标。 1.5 干涉滤光片透光面不得有灰尘、油污或影响透光特性的斑点、划痕存在。 2 稳定度 用标准溶液连续进样15 s,仪器示值变化量的相对误差不大于3%。 3 定量检测下限 用二次蒸馏水作空白溶液,测量0.004 mmol/L氯化钾和0.004 mmol/L氯化钠标准溶液时,仪器示值不小于10倍空白值的标准偏差。 4 重复性 用同一标准溶液重复测量7次,仪器的重复性不大于3%。 5 线性误差 测量钾元素时,在0.01~0.09 mmol/L浓度范围内,其线性误差不大于±5%。测量钠元素时,其误差要求见表1。 表 1 溶液浓度C (mmol/L)误差(%) 0.9<C<1.2 ≤±8 1.2≤C≤1.6 ≤±5 1.6<C<1.9 ≤±8 量程不同的仪器,使用的溶液与上面要求的溶液浓度相对应即可,误差要求相同。其它条款亦如此。 对指针式直读电表仪器,若配套指示仪表准确度低于0.5级,则此项可不检。 6 干涉滤光片透光特性 干涉滤光片透光特性应符合表2要求。 表 2 滤光片峰值波长(nm)半宽度(nm) 钾 766.5±7 ≦15

可见光分光光度计的操作方法

可见光分光光度计的操作方法 学时:2学时 一、实验原理 利用可见光等测定物质的吸收光谱,利用此光谱对物质进行定性定量分析和物质结构分析的方法,称为分光光度法,使用的仪器是分光光度计。分光光度计灵敏度高,测定速度快,应用范围广,是生物化学研究中必不可少的基本手段之一。 可见光光谱:光是电磁波,可用波长“λ”表示,电磁波谱是由不同性质的连续波长的光谱所组成,对于生物化学来说,最重要的波长区域是可见光和紫外光。光的波长是二个相邻的波峰之间的距离。λ=C/V 其中,λ-波长;C-光速;V-频率;单位时间要通过一个定点的波数。可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息。可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。 根据朗伯-比尔(Lambert- Beer)定律:A=εbc,(A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,b为液池厚度,c为溶液浓度)可以对溶液进行定量分析。ε越大,吸收光的能力越强,相应的分光光度法测定的灵敏度就越高。ε值越大,说明电子跃迁的几率越大,通常ε=10~105:一般认为ε>104为强吸收;ε=103~104为较强吸收;ε<102为弱吸收,此时分光光度法不灵敏。通常使用分光光度计可检测出的最小吸收度A=0.001,所以b=1cm,ε=105时,可检测的溶液最小浓度是C=10-8mol/L。 二、分光光度计的基本参数和组成与构造 1. 722S可见光分光光度计的基本参数 波长范围:340-1000nm 波长精度:±2nm(360-600nm) 表面刻度:(T)0-100%(A)0-2 2. 组成与结构 各种型号的分光光度计不论是何种型式,基本上都是由五部分组成:(1)

分光光度计校准规程

分光光度计操作及校准规程 1、基本操作 1.1、连接仪器电源,确保仪器供电电源有良好的接地性能。 1.2、接通电源,使仪器最好预热20分钟。 1.3、用“功能”键设置测试方式:透射比(T),吸光度(A),已知标准样品浓度值方式(C)和已知标准样品斜率(F)方式,可根据您的需要选择测试模式。 1.4、用波长选择旋钮设置您所需的分析波长。 1.5、将您的参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿中打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,再盖上样品室盖。(一般情况下,参比样品放在第一个槽位中。仪器所附的比色皿,其透射比是经过配对测试的,未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。比色皿透光部分表面不能有指印、溶液痕迹,被测溶液中不能有气泡、悬浮物,否则也将影响样品测试的精度。) 1.6、将参比样品推(拉)入光路中,盖上样品室盖,按“0ABS/100%T”键,此时显示器显示的“BLA ”直至显示“100.0”%T或“0.000”A为止。 1.7、调仪器0%,将0%T校具(黑体)置入光路中,盖上样品室盖,按“功能”键,将测试模式转换在T方式下,按“0%T”键,此时显示器应显示“000.0”T 后取出黑体。 1.8、当参比液(空白)调成“100.0”%T或“0.000”A后,将被测样品推(拉)入光路中,这时,您便可从显示器上得到被测样品的透射比值或吸光度值。 2、波长准确度校正 采用氧化钬玻璃滤光片361nm特征吸收峰通过逐点测试法来进行波长校正及检测。2.1、开机并使仪器预热二十分钟; 2.2、按[功能]键将测试方式置于透射比(%T)状态; 2.3、将波长设置在355 nm处,一般情况下,在标准物质吸收峰约±5 nm 附近由短波向长波方向每隔1 nm逐点测试; 2.4、打开样品室盖,将钬玻璃片插入样品槽中; 2.5、盖好样品室盖,将参比物(以空气作为参比)拉(推)光路中(一般情况下,第一个样品槽作为参比,第二个样品槽放置标准物质); 2.6、按[OABS/100%T]键调100%T;将钬玻璃片拉(推)入光路中; 2.7、观察并记录下此时钬玻璃片的透射比值;重复以上步骤进行逐点测试,直至找到最小读数为止。 2.8、当通过上述逐点测试法记录下波长与钬玻璃特征吸收波长值不一致并超出仪器技术指标规定的误差范围时(±2nm ),则可按下列方法进行校正。打开仪器外壳,松开波长刻度盘上的固定螺钉,转动刻度盘,使刻度指示与特征吸收峰的波长值之间的误差在允许范围内,旋紧固定螺钉,装上外壳,重复6.1中的1~8步骤,实测仪器波长精度在允许范围内即可。 2.9、校正周期每年一次。

可见光光度计光度准确度概念

光度准确度( Photometric Accur acy ) 是一个非常重要的技术指标。任何使用者买一台紫外可见分光光度计都是为了分析工作, 进行分析工作的目的是出数据, 其基本要求是数据要准确可靠, 这在很大程度上取决于仪器的光度准确度这个最重要的技术指标及其有关指标。 一、光度准确度的表示方法 目前, 国际上对紫外可见分光光度计光度准确度的表示方法主要有两种:一种是吸光度准确度( Absorbance Accuracy ) 或吸光度误差( Absorbance Er ror ) , 用AA (或ΔA) 表示; 另一种是透射比准确度( Transmittance Accuracy) 或透射比误差, 用TA ( 或ΔT) 表示。国外的紫外可见分光光度计制造商, 绝大多数都给出吸光度准确度或吸光度误差AA ( 或ΔA) , 并都指出在什么吸光度情况下测量。如美国Varian 公司的Cary500、美国P-E 公司的Lambda9、Lambda900 等仪器, 都给出在1. 0Ab s 时, 吸光度准确度或吸光度误差AA (或ΔA) 为±0. 003Ab s。但国外有少数仪器制造商在给出吸光度准确度或吸光度误差AA ( 或ΔA) 的同时, 还给出透射比准确度或透射比误差TA(或ΔT)。如日本岛津公司的UV-260、UV-2450PC、UV-2550PC 等仪器, 都给出在吸光度为0~0. 5A 时, 吸光度准确度或吸光度误差AA ( 或ΔA) 为±0. 002A; 吸光度为0. 5 ~1. 0A 时, 吸光度准确度或吸光度误差AA ( 或ΔA) 为±0. 004A。但同时又给出透射比准确度或透射比误差TA (或ΔT) 为±0. 3% T。我国生产紫外可见分光光度计的厂商, 很多都在给出吸光度准确度或吸光度误差AA ( 或ΔA) 的同时, 也给出透射比准确度或透射比误差TA(或ΔT)。如北京普析通用公司的TU-1901、T U-1800 系列, 北京瑞利公司的UV-2100 , 上海分析仪器总厂的760MC 等紫外可见分光光度计等, 在给出吸光度为0~0. 5A 时, 吸光度准确度或吸光度误差AA (或ΔA) 为±0. 002A;吸光度为0. 5 ~1. 0A 时, 吸光度准确度或吸光度误差AA ( 或ΔA ) 为±0. 004A。但同时又给出透射比准确度或透射比误差TA (或ΔT) 为±0. 3%T。

检定分光光度计作业指导书

检定分光光度计作业指导书 1、计量性能要求 为便于描述计量性能要求,将仪器的工作波长划分为三段,分别是A段(190nm—340nm)、B段(340 nm--900 nm)、C段(900 nm-- 2600nm)。按照计量性能的高低将仪器划分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ共4个级别。 1.1波长最大允许误差 仪器波长最大允许误差应符合表1的要求。 表1波长最大允许误差 级别 A 段 B 段 C 段Ⅰ±0.3 ±0.5 ±1.0 Ⅱ±0.5 ±1.0 ±2.0 Ⅲ±1.0 ±4.0 ±4.0 Ⅳ±2.0 ±6.0 ±6.0 1.2波长重复性 仪器波长重复性应满足表2要求。 表2波长重复性 nm 级别 A 段 B 段 C 段Ⅰ≤0.1 ≤0.2 ≤0.5 Ⅱ≤0.2 ≤0.5 ≤1.0 Ⅲ≤0.5 ≤2.0 ≤2.0 Ⅳ≤1.0 ≤3.0 ≤3.0 1.3噪声与漂移 仪器噪声与漂移应符合表3的要求。 表3仪器噪声与漂移的要求 % 级别透射比为0%噪声透射比为100%噪声漂移 ⅠⅡⅢⅣ≤0.05 ≤0.1 ≤0.2 ≤0.5 ≤0.1 ≤0.2 ≤0.5 ≤1.0 ≤0.1 ≤0.2 ≤0.5 ≤1.0 注:非扫描仪器不作漂移指标。 1.4最小光谱带宽 仪器的最小光谱带宽误差应不超过标称光谱带宽的±20%。 1.5透射比最大允许误差 仪器透射比最大允许误差应满足表4要求。 表4透射比最大允许误差 % 级别 A 段 B 段Ⅰ±0.3 ±0.3 Ⅱ±0.5 ±0.5 Ⅲ±1.0 ±1.0 Ⅳ±2.0 ±2.0 1.6透射比重复性 仪器透射比重复性应满足表5要求。 表5透射比重复性 %

级别 A 段 B 段Ⅰ≤0.1 ≤0.1 Ⅱ≤0.2 ≤0.2 Ⅲ≤0.5 ≤0.5 Ⅳ≤1.0 ≤1.0 1.7基线平直度 仪器基线平直度以吸光度表示,应符合表6要求。 表6基线平直度 级别 A 段 B 段 C 段Ⅰ±0.001 ±0.001 ±0.002 Ⅱ±0.002 ±0.002 ±0.005 Ⅲ±0.005 ±0.005 ±0.010 Ⅳ±0.010 ±0.010 ±0.020 1.8电源电压的适应性 电源电压波动为(220±22)V时仪器的透射比示值变化应满足表7要求。 表7电源电压的适应性 % 级别透射比示值变化 Ⅰ±0.2 Ⅱ±0.5 Ⅲ±1.0 Ⅳ±2.0 1.9杂散光 仪器杂散光应符合表8要求。 表8杂散光 % 级别A 段 B 段 C 段220nm 360nm 420nm 1420nm Ⅰ≤0.1 ≤0.1 ≤0.2 ≤0.2 Ⅱ≤0.2 ≤0.2 ≤0.5 ≤0.5 Ⅲ≤0.5 ≤0.5 ≤1.0 ≤1.0 Ⅳ≤1.0 ≤1.0 ≤2.0 ≤2.0 1.10吸收池的配套性 吸收池配套性应符合表9要求。 表9吸收池配套性要求 % 吸收池类别波长配套误差 石英220nm 0.5 玻璃440nm 0.5 2通用技术要求 2.1安全性能 仪器的绝缘电阻应不低于20MΩ。 2.2标志 仪器应有下列标志:名称、型号、编号、制造厂名、出场日期、工作电源电压、频率。国产仪器应有制造生产许可标志及编号。

紫外可见分光光度计标准操作规程

XXXXXXXXXX仪器设备标准操作规程 1目的:建立L5型紫外可见分光光度计使用标准操作规程。 2 范围:本标准适用于L5型紫外可见分光光度计。 3 责任:实验室操作者。 4 使用说明: 4.1 仪器上电:仪器接通电源,显示屏幕出现欢迎界面,稍后仪器进行系统自检,仪器进入初始化状态。初始化过程中请勿打开样品室门! 4.2 波长校正:在主菜单中选【光谱测量】功能,在光谱测量菜单中的测量模式项中选择【ABS】方式,扫描范围(350nm-650nm),记录范围 (0.0000A-1.2000A)中速扫描,采样间隔为0.1nm,扫描次数为1,全部设置完毕后,按【基线校正】键进行基线校正,把标准钬溶液放入光路中,按【开始】键后进行扫描,扫描结束后,按【峰谷显示】标签键,读取对应峰的波长值,其与标准钬溶液标准波长值之差应不超过0.5nm,如超过,则在【系统设置】菜单中修正波长值。 4.3 放置参比与待测样品:选择测试用的比色皿,把盛放参比和待测的样品放入样品架内,参比放入样品架R,待测的样品放入S1到S7位置。在自检通过后,如需要单灯工作,可在主菜单的【系统值设置】栏中,分别对氘灯或钨灯进行关闭或开启控制,以延长光源灯的使用寿命。 4.4 键盘操作:本系列的键盘操作是通过触摸显示屏弹出的键盘实现的。分

为数字键盘和字母键盘。 数字键盘:【CE】表示数字清零;【Cancel】取消本次输入;【Enter】确认此次输入数据。 字母键盘:【CE】表示数字清零;【Cancel】取消本次输入;【Enter】确认此次输入数据。【←】清除前面一格字符/退格。 4.4.1 光度测量:在屏幕右下方主功能区内选中【光度测量】后,即可进入此功能块。优先显示的是参数设置功能界面。 选中波长设定值后的□输入框;弹出数字键盘,键入所需测定的波长值,按【Enter】确定。若输入值不符合仪器参数,则屏幕提示:error,此时输入正确波长即可。设定完成后,仪器自动将波长移动到所需测定的波长值。 4.4.2 光谱测量:在屏幕右下方主功能区内选中【光谱测量】后,即可进入此功能块。优先显示的是参数设置功能界面。【光谱测量】的其他标签可以互相切换使用。 测量模式有三种选择:T(透射比)ABS(吸光度)E(能量)。如选择【E (能量)】项,连续按【E(能量)】键,就是调整前置放大器倍率:1 2 3 4 记录范围对应不同的测量模式,可根据用户的需要通过按选记录范围后的□进行输入和修改。字段左面为测量下限,字段右面为测量上限。其中:T%范围(-1.00%T—200.0%T),ABS范围(-0.301A—4.0000A),E范围(0.000E—300.0E)按选扫描范围后的□输入框,弹出数字键盘,直接输入起始波长和结束波长。波长值的定义顺序:从左至右为起始波长和结束波长。 扫描速度分为三档:快速、中速、慢速。 采样间隔分为五档:0.1nm,0.5nm,1nm,2nm,5nm 根据用户的不同需要选择扫描次数。按选扫描次数后的□输入范围(1—3)次。

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