实验方案
实验方案
繁殖障碍类病毒病(PR、PP、PRRS)弱毒疫苗的研制
1. 病毒的克隆
1.1 细胞制备原种细胞系（MARC－145，IBRS－2）复苏、传代
1.1.1复苏
（a）取液氮冻存的Marc-145(34代)细胞1支，立即置37℃水浴中不断摇晃，待融化后，将细胞倒入25mL的克氏瓶中，加入含10％BCS的MEM生长液，37℃培养，5－6h后换液以倾去死亡细胞, 37℃培养。待长成单层后，进行传代培养。
（b）取液氮冻存的Marc-145(34代)细胞1支，立即投入37－38℃水浴中，待融化后（约1min），室温下在5min内用25℃左右的血清营养液稀释至原体积的4倍，500r/min离心10min，弃上清，加新鲜营养液悬浮细胞，并将细胞转入25mL的克氏瓶中补足营养液，37℃培养。
1.1.2传代
取长满单层后的细胞（约72h），倾去原来的营养液，用Hank’s液冲洗一次，加入0.25%的胰酶(或是0.5%的胰酶和0.04%EDTA的等量混合液)，其加入量以能在细胞上形成1mm 厚的液层为宜。置室温或37℃温度中消化，当细胞层开始由瓶壁脱离时（眼观可见细胞面呈毛玻璃样，镜下观察可见细胞圆缩，间隙增大，即将脱落），将消化液倾出，加入少量营养液，轻晃冲洗细胞层后倾弃，再加入相同于原营养液量的新营养液，以大口径吸管充分吹打，直到细胞完全分散，再加同量营养液，吹打数次后即可分瓶。（为便于吹打和分散细胞，开始时可以少加一些营养液，吹打分散后再逐步追加营养液至需量。）其分种率为1：2或1：3，37℃培养。
1.2 病毒培养种毒（PRRSV[欧美株]、PRV、PPV）复壮、病毒增殖
1.2.1种毒复壮（PRRSV[欧美株]、PRV）
(1) 取刚长成单层的Marc-145细胞，倾弃营养液后，加入不含血清的维持液[1％Gln，2％NaHCO3(7.5%),1%双抗的MEM]，洗2－3遍，倾弃清洗营养液；
(2) 接毒冻干毒种（原装量为2mL，湿毒1mL，保护剂1mL），以无血清MEM恢复为原装量，每瓶（100mL瓶）接毒1mL；
(3) 吸附37℃吸附1h，其中每20min轻轻晃一次，以使接种毒液能与细胞层更好地接触以利病毒吸附。吸附1h后，倒出接种病毒液，再加入含3％BCS的维持液，置37℃培养。
(4) 收获每日观察细胞的CPE。接毒后24h、36h、48h各观察一次CPE，或根据CPE 的形成情况，适当缩短观察间隔时间，待细胞形成80％的CPE时，冻融三次后－20℃冻存。
1.2.2 病毒增殖
(1) 取刚长成单层的Marc-145细胞，倾弃营养液后，加入不含血清的维持液，洗2－3
遍，倾弃清洗维持液；
(2) 接毒冻融湿毒1mL以无血清MEM做10-100倍稀释，每瓶（100mL瓶）接毒1mL；
(3) 吸附37℃吸附1h，其间每20min轻轻晃动一次，以使接种液能与细胞层更好地接触以利病毒吸附。
(4) 补充维持液吸附1h后，补足维持液或倒出接毒液再加入足量的维持液，37℃培养。
(5)．收获每日观察细胞的CPE。接毒后24h、36h、48h各观察一次CPE，或根据CPE 的形成情况，适当缩短观察间隔时间，待细胞形成80％的CPE时，冻融三次后－20℃冻存。
1.3. 增殖病毒TCID50测定（Reed-Muench法）
(1) 细胞板的制备
取长成单层的细胞，倾弃营养液，冲洗2－3次，加入0.25%的胰酶消化，制备细胞板（96孔板）。制板时每孔加100u L，37℃培养。
(2) 接毒吸出细胞板中的营养液，取待测湿毒1ml在试管中用无血清维持液做10×连续稀释，每稀释度接种8孔，每孔接种100ul，接种7－8个稀释度，同时另用8孔,每孔只加入100ul维持液做对照。37℃培养。
(3) 结果判定37℃培养48h后开始观察CPE，至120h。记录每一稀释度出现明显CPE 的孔数，根据Reed-Muench公式计算TCID50值。
1.4. 病毒克隆PRRSV、PRV采用蚀斑克隆、PPV采用终点稀释法克隆
1.4.1 PRRSV、PRV蚀斑克隆
(1) 在细胞培养扁瓶或平皿中使细胞长成密集的单层，不能有空隙（细胞接种浓度不能低于1×106/ml）。
(2) 吸去生长液，用MEM维持液将细胞单层洗一次。
(3) 病毒检样用MEM液（pH7.2-7.4）作连续10倍稀释。要能检出孤立可数的空斑，病毒浓度最好在100-500 TCID50/ml，稀释时要注意。每一稀释度接种4个培养瓶（3瓶用于覆盖MEM营养琼脂，1瓶只加维持液用于对照）。接种剂量随容器大小而异。25mL的培养瓶接种量约为0.3ml,以此类推。同时设立不接毒的空白对照（1瓶覆盖MEM营养琼脂，1瓶只加MEM维持液）。
(4) 将培养瓶放在37℃吸附60min，使病毒吸附于细胞，每15min将培养瓶轻轻转动，使接种液分布均匀。
(5)加入适量维持液，37℃培养约12-24h。
(6) 将培养瓶放在水平桌面上。按照3所设计的方案加入融化后冷却到42-44℃的不含中性红的MEM营养琼脂覆盖层，厚度约3mm，约10mL。
如果用培养瓶，只需将瓶塞塞紧即可；如果是平皿，应将其放在CO2培养箱中培养，以保持适宜的CO2浓度和湿度
(7) 琼脂凝固后将培养瓶瓶或平皿翻转，在37℃继续培养24-48h。
(8) 加入融化后冷却到42-44℃的含0.1g/L中性红的MEM营养琼脂覆盖层,约5mL。37℃继续培养，观察CPE并天后计数空斑数形成单位（PFU）。空斑应为淡白色，背景呈淡红色。
(9) 为了分离病毒克隆株，在培养瓶内出现清晰的蚀斑时，即可进行挑斑。最好选择蚀斑数较少，各斑间的距离不小于10mm小而孤立的空斑(或挑选大、中、小不同斑径及不同形态的蚀斑（主要根据斑径选择）。先在选定的蚀斑部位的瓶壁上做好标志，随后应用带有橡皮乳头的弯头吸管或巴斯德吸管连同琼脂一块吸出选定的蚀斑。如系平皿内的蚀斑，则可直接用吸管吸取。
将吸取的蚀斑琼脂糖放入含有0.5～l ml营养液的Eppendorf管内，反复冻融三次，使病毒充分释放，3 000r/min离心10min，取上清,用于接种敏感细胞，待其充分增殖以后，挑选斑径、形态稳定，产斑数高，细胞病变明显的蚀斑克隆进行下一轮的蚀斑纯化。如此操作2~3次后，滴定克隆病毒的毒价（TCID50）并进行鉴定。
1.4.2 PPV终点稀释法克隆或是采用对带毒细胞进行终点稀释法细胞克隆
方案A：PPV终点稀释法克隆
(1) 制备96孔细胞板。
(2) 接毒吸出细胞板中的营养液，取湿毒1ml在试管中用无血清维持液做10×连续稀释，每稀释度接种8孔，每孔接种100ul，接种7－8个稀释度，同时另用8孔,每孔只加入100ul维持液做对照。37℃培养。（或者是从开始接种，每个稀释度接种至少48孔）
(3) 37℃培养48h后开始观察CPE，至120h。记录每一稀释度出现明显CPE的孔数，根据Reed-Muench公式计算TCID50值。
(4) 以TCID50值的稀释度或更高的倍数稀释病毒并接种96孔细胞板。培养至出现适当病变时，刮下（或用胰酶消化）有病变孔内的细胞，连同本孔内的营养液一起冻融3次，20℃冻存。或经适当增殖后再次进行克隆。
方案B：带毒细胞进行终点稀释法细胞克隆
(1)营养液的条件化取新培养而即将长成单层的IBRS-2细胞，倾弃原来的营养液，加入新鲜营养液（含20％的犊牛血清），37℃培养1天后，吸出营养液，经微孔滤膜或以3 000 r/min的速度离心30min，除去可能混悬其中的细胞，取上清液装瓶备用，应用时要加入1％葡萄糖，并将pH调到7.0-7.2，保存备用。
(2) 倾弃处于旺盛生长期的单层细胞（分瓶后刚刚贴壁的细胞瓶）生长液，用不含血清的维持液清洗一遍后，加入接种量（按TCID50的倍数稀释接种）的病毒吸附1h后，倾弃接种液，加入生长液于37℃培养12~24 h后（视试验情况而定），胰酶消化，用前述条件化了的营养液作高倍稀释（10－1－10－7左右），然后从10－5开始分别接种96孔,微量细胞培养板，每个稀释度至少接种50孔，最好是一板（96孔），从培养48~72h后开始，逐日在倒置显微镜下观察，取最高稀释度有细胞增殖的孔，胰酶消化并适当扩增培养后，冻融3次后，再盲传，观察是否有细胞病变。收获有病变的培养再次进行克隆二次后进行的TCID50测定。
1.5.克隆毒的增殖培养
2.1. 克隆毒的形态和主要理化特性
2.1.1 纯化病毒的形态学观察病毒纯化、电镜下的形态学观察
(1) PRRSV的纯化收获病毒经3次冻融处理后，8 000r/min 4℃离心15min，取上清，45 000 r/min离心2h，用原体积1／20的TE缓冲液(10 mM Tris-HCl pH8.0 ,1.0mM EDTA)稀释沉淀，-20℃保存备用。
(2) PPV的纯化
方案A：将收获的病毒液经氯仿处理两次，水相加等量TES（Tris.Cl, 20mmol/L EDTA, pH 8.0, 0.5mol/L NaCl）,6000r/min 离心20 min,上清液中缓缓加入40%聚乙二醇(PEG6000),使其终浓度达到6%,4℃条件下磁力搅拌过夜,6000r/min 离心30 min,沉淀用TES稀释,超声波打碎沉淀块,再次用氯仿处理。在浓缩的病毒液中加入CsCl（终浓度达到35%）混均，37500r/min 离心22 h，分管收集离心管中液体（200μL/管），测定各管密度。收集密度在1.35～1.42g/mL的病毒液，混合后于40000r/min 离心4h，再用适量TES溶解沉淀，-20℃保存备用。
方案B：收获病毒经3次冻融处理后，8 000 g 离心30min，取上清，上清液中缓缓加入1/5体积20%聚乙二醇(PEG8000，含2.5M NaCl),4℃条件下磁力搅拌过夜,30 000g(6 000r/min?) 离心30 min,沉淀用1×TE缓冲液(10 mM Tris-HCl pH8.0 ,1.0mM EDTA)稀释沉淀，-20℃保存备用。
(3) PRV的纯化收获病毒经3次冻融处理后，6 300r/min 4℃离心30min，取上清，27 000 r/min 4℃离心2h，用原体积1／20的TE缓冲液(10 mM Tris-HCl pH8.0 ,1.0mM EDTA)稀释沉淀，-20℃保存备用。
(4) 形态学观察将收获的细胞培养液、冻融后的培养液及纯化的病毒经磷钨酸负染后，在透射电镜下观察病毒形态。
2.1.2. 克隆毒主要理化特性
主要测定克隆病毒对乙醚和氯仿等脂溶剂、酸碱度、温度、胰酶等理化因素的敏感性和耐受性试验。
2.2血清学鉴定
PRV拟采用病毒中和试验鉴定（固定病毒－稀释血清法），或以琼脂间接免疫凝集试验（AGID）进行鉴定。
PPV拟采用血球凝集试验（HA）及血球凝集抑制试验（H1）进行鉴定，可参照中国兽药监察所《猪细小病毒血球凝集、抑制试验方法》进行。
PRRSV拟采用间接免疫荧光试验（IFA）进行血清学鉴定。对于PRV与PRRSV也可采取酶联免疫吸附试验（EL1SA）或血清中和试验（细胞中和试验[β法]）进行鉴定。
2.3 PCR鉴定其中PRRSV使用RT－PCR法
2.4 不同细胞的敏感性试验
3.1 外源病毒的检验应用荧光抗体技术或PCR证实不含有其它外源病毒：如猪传染性胃肠炎病毒、猪腺病毒、猪血凝性脑炎病毒、牛病毒性腹泻病毒和狂犬病毒病毒等。
根据已发表的各种病毒的基因序列设计引物或引用他人发表的引物序列进行PCR鉴别。
3.2. 克隆毒的毒力与安全性试验
3.2.1 PRRSV
(a) 乳鼠接种试验取3日龄乳鼠6只，将克隆毒培养液做1：10稀释后脑内接种0.1mL；另取2只同窝乳鼠脑内接种0.1mL正常细胞培养液做对照。分开同等条件饲养，连续2周观察发病情况。
(b) 乳猪接种试验取3日龄乳猪12只，颈部肌肉接种未经稀释的克隆毒原液1mL，另取2只同窝乳猪同法接种1mL正常细胞培养液做对照。两组在同等条件政下分开饲养，连续2周观察发病情况。
(c) 妊娠母猪接种试验用怀孕30~40d、75~80d和100d的妊娠母猪各两头，分别在颈部肌肉接种未经稀释的克隆毒原液2mL，另用怀孕60d妊娠母猪猪同法接种2mL正常细胞培养液做对照，观察克隆毒对妊娠母猪的影响。当试验组母猪分娩后，取未吃初乳的新生乳猪的肺、肝、脾等组织进行病毒分离。同时也可采血分离血清做血清学检查。
3.2.2 PRV（规程）
(a) 仔猪接种试验用PBS将克隆病毒培养液做10倍稀释，肌肉接种7-10日龄健康易感仔猪2头，每头5mL，观察14天。
(b) 家兔接种试验用PBS将克隆病毒培养液做10倍稀释，肌肉接种1.5kg左右家兔4只，每只0.2mL，观察14天。
3.2.3 PPV
(a) 以1－4ml剂量接种PPV阴性猪四批共8只，检查其排毒、病毒血症及同居感染的发生情况。
(b) 以4毫升量接种怀孕母猪( 孕龄38—40天)二批4只，检查其排毒、病毒血症、同居感染和胎盘感染情况。
3.3. 克隆毒的遗传稳定性
3.4. 克隆毒免疫特性
3.4.1克隆毒的免疫原性试验
为了对克隆毒的细胞培养毒是否可作为疫苗生产用种毒作出评估，进行以下的免疫原性试验。（方案见5中有关内容）
(a) 冻干毒对猪的最小免疫剂量的确定。
(b) 免疫产生期的测定。
(c) 免疫持续期的测定。
(d) 免疫效力的测定。
3.4.2 干扰试验
克隆毒的细胞培养毒两两配伍以及三联时对猪免疫产生期、持续期和效力的测定。
3.5 免疫程序的建立
3.6 毒种保存试验：保存方式的比较，干与湿毒、保存时间对免疫力的影响。
4. ELISA 的建立
4.1. 抗原制备病毒的培养与纯化
4.2. 抗体制备
用纯化后的PPV、PRV免疫家兔制备多抗、PRRSV免疫BALb/c小鼠制备mAb。4.3 最佳工作浓度的确定以交叉连续稀释法确定最佳试剂工作浓度
4.4 间接ELISA法检测免疫猪的抗体滴度(免疫后15、30、45、60、75、90、105、
120d采血分离血清)
4.5 血清中和抗体的测定（中和试验）采用血清稀释法
PRRSV、PRV在MARC－145细胞上进行，PPV在IBRS－2上进行
4.6 相关性分析？
5. 疫苗的制备与相关指标的测定
5.1 佐剂的选择
5.2疫苗的制备
根据各病毒的TCID50确定各病毒毒液之间，病毒液与佐剂之间的比例，配制PRV、PPV、PRRSV三种单苗及PRV、PPV、PRRSV二联或三联弱毒疫苗。
5.3最佳免疫剂量的确定
设置不同的剂量梯度，每个剂量肌肉接种免疫PRV、PPV、PRRSV抗体均为阴性的后备母猪5头，两周后以相同方法重复免疫一次，同时设置非免疫对照猪3头，免疫后11周检测血清抗体。在母猪妊娠后30－40天分别肌肉注射三种强毒各106.0TCID50。攻毒后第2、5、10天检测病毒血症。攻毒后第20－28天剖腹检查胎儿感染情况。综合试验结果确定最小免疫剂量和最佳兔疫剂量。
附：(1) 病毒血症的检测取血样，离心取上清，分别接种于IBRS-2细胞（PPV）和Marc-145细胞（PRRSV、PRV），逐日观察CPE，第一代无反应者，以盲传三代结果做为有无病毒血症的依据。
(2) 胎内感染的检测以胎儿键活、发育正常、体表及内赃无病变、分离不到病毒判为无胎内感染。
5.4免疫产生期与持续期测定（含兔疫程序的制定）
将实验室试制的三联疫苗以最佳免疫剂量肌肉接种免疫PRV、PPV、PRRSV抗体阴性育肥猪5头。免疫后第三天起每隔三天，到两周后每周检测一次血清抗体。确定免疫产生期与持续期。
依据免疫产生期与免疫持续期制定合理的免疫程序。
5.5安全性试验
以5倍最佳免疫剂量接种育肥猪5头，同时设置对照猪3头与实验猪同居，观察15－30天，实验猪与同居猪均应无异常临床反应，实验猪抗体应转阳，同居对照猪始终保持抗体阴性。
同时以家兔或豚鼠做平行试验。
5.6效力试验
以最佳免疫剂量免疫PRV、PPV、PRRSV抗体均为阴性后备母猪10头，同时设置非免疫对照猪3头。免疫程序参照7.2制定的结果。免疫后第1、2、4周检测血清抗体水平，并于首免后30天左右配种，怀孕30－50天时对免疫母猪人工攻击强毒，攻毒方法与剂量见7.1。攻毒后逐日观察临床反应，一周后进行病毒血症、排毒情况的检测。
以最佳免疫剂量免疫阴性猪四批11只，每批2—4只，每批设对照2只。。免疫后1、5、7 个月攻毒，攻毒后逐日观察临床反应，一周后进行病毒血症、排毒情况的检测。
同时免疫实验家兔或豚鼠，进行平行试验。
5.7保存期试验
将疫苗三批分别保存于2～8℃和18~22℃，7个月和12个月时分别接种PRV、PPV、PRRSV抗体阴性猪，每批各免疫3头，设置非免疫对照猪2头。免疫方法、剂量同效力试验。兔疫后第2、第4周检测血清抗体，以抗体水平低于效力试验2~3个滴度判为无效。以此确定疫苗的保存期。
5.8 物理性状试验
对疫菌进行外观、水分、真空度等物理形状进行观察判定；同时用电子显微镜观察病毒粒子与佐剂的作用状态。
6 田间试验
实验室生产单苗、二或三联疫苗三批，选取非疫区猪场进行免疫试验，观察其安全性及免疫效力。
7 中间试制
在生物制品厂生产车间试制5～10批产品，定型生产工艺，制定生产质量及检验标准。
8 区域试验
取三批以上中试产品进行较大范围内的免疫试验，进一步观察制品的安全性和免疫效力。
PRV、PPV、PRRSV保护性抗原基因的克隆与表达载体的构建
1. 病毒培养
2. 病毒的纯化与DNA、RNA制备
2.1 PRRSV的纯化与RNA制备
病毒提纯方案
A: 收获病毒经3次冻融处理后，8 000r/min 4℃离心15min，取上清，45 000 r/min离心2h，用原体积1／20的TE缓冲液(10 mM Tris-HCl pH8.0 ,1.0mM EDTA)稀释沉淀，-20℃保存备用。
B: 收获病毒经3次冻融处理后，8 000r/min 4℃离心15min，取上清，在上清液中缓缓加入1／3体积的20％聚乙二醇(PEG8000，含2.5M NaCl),使其终浓度达到6%,4℃条件下磁力搅拌过夜,6 000r/min (或30 000g)离心30 min,沉淀用1×TE缓冲液(10 mM Tris-HCl pH8.0 ,1.0mM EDTA)稀释沉淀至376ul，-20℃保存备用。
C：病毒培养到80％CPE时收获，弃去培养液，用胰酶消化后用吸管将消化液吸入7mL 或10mL离心管中收集细胞沉淀，PBS[或1×TE缓冲液(10 mM Tris-HCl pH8.0 ,1.0mM EDTA)]悬浮沉淀，－20℃冻融三次，8 000r/min 4℃离心15min，取上清，在上清液中缓缓加入1／2体积的20％PEG8000,4℃条件下磁力搅拌过夜,6 000r/min （或30 000g）离心30 min,沉淀用1×TE缓冲液(10 mM Tris-HCl pH8.0 ,1.0mM EDTA)稀释沉淀至376ul，-20℃保存备用。
RNA制备
将纯化的PRRSV 376ul与蛋白酶K 2ul、10％SDS 20ul、0.5M EDTA 3.2ul混匀，37℃水浴2h，取上清用酚－氯仿－异戊醇（25:24:1）抽提2次，分离上层水相，按总量加入0.1体积2.5M 醋酸钠和2.5体积的冷无水乙醇，-20℃20~30min, 15 000r/min离心15min，沉淀用70%的冷乙醇洗一次，凉干，加无RNA酶纯水(DEPC处理)10ul溶解-20℃保存备用。
2.2 PPV的纯化与DNA制备
(a) 将收取的病毒液经氯仿处理两次，水相加等量TES（Tris.Cl, 20mmol/L EDTA, pH 8.0,
0.5mol/L NaCl）,6000r/min 离心20 min,上清液中缓缓加入40%聚乙二醇(PEG6000),使其终浓度达到6%,4℃条件下磁力搅拌过夜,6000r/min 离心30 min,沉淀用TES稀释,超声波打碎沉淀块,再次用氯仿处理。在浓缩的病毒液中加入CsCl（终浓度达到35%）混均，37500r/min 离心22 h，分管收集离心管中液体（200μL/管），测定各管密度。收集密度在1.35～1.42g/mL 的病毒液，混合后于40000r/min 离心4h，再用适量TES溶解沉淀，-20℃保存备用。
(b) 收获病毒经3次冻融处理后，8 000 g 离心30min，取上清，上清液中缓缓加入1/5体积20%聚乙二醇(PEG8000，含2.5M NaCl),4℃条件下磁力搅拌过夜,30 000g 离心30 min,沉淀用1×TE缓冲液(10 mM Tris-HCl pH8.0 ,1.0mM EDTA)稀释沉淀，用于抽取病毒DNA，或-20℃保存备用。
2.3 PRV的纯化与DNA制备
方案A:
PRV 接种于BHK21或PK15或MRAC-145上,待细胞出现50%CPE时,吸出上清液,用预冷的PH7.2的PBS洗两次，用细胞消化液把细胞分散或用细胞刮子将细胞刮政，离心收集细胞。细胞冻融三次，加九倍体积细胞裂解液（10mM Tris pH7.6, 10mM EDTA, 0.25% Triton）室温作用10min，加NaCl至终浓度为0.2 M，立即4℃1000g离心10min，小心倾出上清4℃保存。
方案C:
收获病毒经3次冻融处理后，6 300r/min 4℃离心30min，取上清，27 000 r/min 4℃离心2h，用原体积1／20的TE缓冲液(10 mM Tris-HCl pH8.0 ,1.0mM EDTA)稀释沉淀，用于抽取病毒DNA，或-20℃保存备用。
方案D:
收获病毒经3次冻融处理后，6 300r/min 4℃离心30min，取上清，在上清液中缓缓加入1/3.5体积的30%聚乙二醇(PEG8000，含3.75M NaCl[21.0g/100mL]),至终浓度为7％[1体积PEG：3.5体积上清]，4℃条件下磁力搅拌过夜7 000 r/min 4℃离心30min，用原培养体积1／20的TE缓冲液(10 mM Tris-HCl pH8.0 ,1.0mM EDTA)稀释沉淀，用于抽取病毒DNA，或-20℃保存备用。
DNA的制备
在适量的纯化病毒液中加蛋白酶K至100ug／mL 和SDS 终浓度0.2%，37℃水浴作用2h，等体积异丙醇室温沉淀10min，离心取上清，等体积的酚／氯仿反复抽提，直至为可见蛋白沉淀，两倍体积乙醇沉淀，70％乙醇漂洗，抽干，加适量水溶解病毒DNA，RNA酶37℃水浴消化1-2h。加1／100 体积3 mol/L NaAc，混合均匀后，加2倍体积冷无水乙醇，混匀后-20℃置30min，4℃12 000r/min离心10min。弃上清，沉淀用70%冷乙醇洗涤一次，室温干燥，溶于TE（pH 8.0）中，贮存于-20℃。
3 保护性抗原基因的克隆及其载体构建
3.1 PRRSV M、N基因的克隆及其载体构建
其中：M基因（ORF6）的转录本大小为1.1kb, ORF6 CDS=525bp(VR),522(LV)编码aa: 174（VR），173（LV）表达蛋白分子量为19KD。
N基因（ORF7）的转录本大小为0.7kb, ORF7 CDS=372bp(VR),387(LV),编码aa: 123
（VR），128（LV）表达蛋白分子量为15KD。
M、N基因是交叉的，其ORF总共为885bp。
3.1.1 RT-PCR引物设计包含整个E、M、N基因序列
3.1.2 RT-PCR 条件优化
3.1.3 RT-PCR 扩增E、M、N基因
3.1.4 PCR扩增产物的比较（VR2332、LV）
3.1.5 E、M、N基因重组质粒的构建
PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳－回收纯化后，与pMD18-T载体连接，转化DH5α，
提取质粒鉴定，测序，进行序列比较（原毒或参考毒株VR－2332、LV、respPRRS MLV）。
3.1.6 原核表达载体的构建
根据VR－2332、LV、respPRRS MLV的已知序列设计E基因或M、N基因引物，利用PCR调取E基因或M、N基因，琼脂糖凝胶电泳－回收纯化E基因或M、N基因。
方案(a)：回收纯化的E基因或M、N基因与pET-20b(+)载体连接，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
方案(b) 回收纯化的E基因或M、N基因与pET-28a~c(+)载体连接，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
3.1.7 核酸疫苗重组质粒的构建
回收纯化的E基因或M、N基因，与pIRES1 neo载体连接，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
！！考虑将E或M、N基因与IL-2基因连接后构建真核表达载体（核酸疫苗重组质粒）！！
3.2 PPV VP2基因的克隆及其载体构建
其中：VP2基因（PT40）的CDS=1.74kb编码aa: 580,表达蛋白分子量为62~76 KD,具有血凝活性。
3.2.1 PCR引物设计包含整个VP2基因序列
3.2.2 PCR 条件优化
3.2.3 PCR 扩增VP2基因
3.2.4 VP2基因鉴定
3.2.5 VP2基因重组质粒的构建
PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳－回收纯化后，与pMD18-T载体连接，转化DH5α，提取质粒鉴定，测序并进行序列分析.
3.2.6 原核表达载体的构建
方案(a) 酶切重组质粒、琼脂糖凝胶电泳－回收纯化VP2基因，与pET-20b(+)载体连接，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
方案(b) 酶切重组质粒、琼脂糖凝胶电泳－回收纯化VP2基因，与pET-28a~c(+)载体连接，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
3.2.7 核酸疫苗重组质粒的构建
酶切重组质粒、琼脂糖凝胶电泳－回收纯化VP2基因，与pIRES1 neo载体连接，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
3.3 PrV gp50基因的克隆及其载体构建
其中：gp50基因（gD [PT40]）的CDS≈1.2 kb编码aa≈400 ,表达蛋白分子量为60 KD,具有中和抗体活性。
3.3.1 PCR引物设计包含整个gp50基因序列
3.3.2 PCR 条件优化
3.3.3 PCR 扩增gp50基因
3.3.4 gp50基因鉴定
3.3.5 gp50基因重组质粒的构建
PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳－回收纯化后，与pMD18-T载体连接，转化DH5α，提取质粒鉴定，测序并进行序列分析.
3.3.6 原核表达载体的构建
方案(a) 酶切重组质粒、琼脂糖凝胶电泳－回收纯化gp50基因，与pET-20b(+)载体连接，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
方案(b) 酶切重组质粒、琼脂糖凝胶电泳－回收纯化gp50基因，与pET-28a~c(+)载体连接，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
3.3.7 核酸疫苗重组质粒的构建
酶切重组质粒、琼脂糖凝胶电泳－回收纯化gp50基因，与pIRES1 neo载体连接，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
3.4 IL-2-E－VP2二价表达载体构建
3.4.1 相关基因的回收
将IL-2-E基因、VP2基因分别从相应的载体质粒中酶切、琼脂糖凝胶电泳回收纯化相应片段。
3.4.2 原核表达载体的构建
方案(a) 将IL-2-E基因与VP2基因连接后再与pET-20b(+)载体连接，或插入相应的质粒载体，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
方案(b) 将IL-2-E基因与VP2基因连接后再与pET-28a~c(+)载体连接，或分别插入相应的质粒载体，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
3.4.3 核酸疫苗重组质粒的构建
将IL-2-E基因分别与VP2基因连接后再与pIRES1 neo载体连接，或插入相应的质粒载体，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
3.5 IL-2-E－gp50二价表达载体构建
3.5.1 相关基因的回收
将IL-2-E基因、gp50基因分别从相应的载体质粒中酶切、琼脂糖凝胶电泳回收纯化相应片段。
3.5.2 原核表达载体的构建
方案(a) 将IL-2-E基因与gp50基因连接后再与pET-20b(+)载体连接，或插入相应的质粒载体，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
方案(b) 将IL-2-E基因与gp50基因连接后再与pET-28a~c(+)载体连接，或插入相应的质粒载体，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
3.5.3 核酸疫苗重组质粒的构建
将IL-2-E基因分别与VP2基因连接后再与pIRES1 neo载体连接，或插入相应的质粒载体，转化DH5α，筛选阳性重组子提取质粒，进行酶切鉴定。
4. 原核表达载体重组质粒的诱导表达
用原核表达载体质粒pET-20b(+)、pET-28a~c(+)作对照，与鉴定正确的原核表达重组质粒同步转化BL21(DE3)，培养并用IPTG进行表达诱导。取培养液或沉淀菌体裂解后进行SDS-PAGE电泳，以考马斯亮蓝染色或蛋白印迹检测蛋白的表达情况。
5. 核酸疫苗重组质粒的在细胞中的表达
(a) 核酸疫苗重组质粒的细胞转染（MARC-145或IBRS-2），争取各种载体使用同一细胞系）采用脂质体法转染
(b) 核酸疫苗表达产物的检测收获转染后的细胞，将沉淀细胞裂解，SDS-PAGE 电泳，以考马斯亮蓝染色或蛋白印迹检测蛋白的表达情况。
6. 表达产物的检测
6.1 考马斯亮蓝染色
6.2 蛋白印迹(Western blot)
SDS-PAGE电泳后，切出待转移的凝胶，用硝酸纤维素膜进行电转移。转移结束后将硝酸纤维素膜进行封闭、加第一抗体浸附、酶标二抗、加酶底物反应液温育显色。同时将转移后的凝胶染色以检查蛋白是否完全转移。
6.3 表达量的测定
7. 表达产物免疫原性的测定
8. 质粒遗传稳定性的测定
9. 动物免疫试验及后继工作。
小学科学创新实验设计方案
小学科学创新实验设计方案 《空气占据空间》的实验创新 西海小学王绍亭 一．实验设计意图 1.《空气占据空间》是教科版小学科学三年级上册《认识空气》中的教学活动。通过实验，变看不见的空气为看的见，变摸不着的空气为摸得着，让学生在探究过程中认识到、感受到空气确实存在，空气和其他物质一样，能够占据空间。并为后面学习《空气的质量》打下基础。 2.通过尝试设计与完成实验过程，培养学生的科学探究精神，发展学生的科学素养。 二、实验原型的不足之处 教材上安排的实验为几个小实验：一是将吸管伸向水里，用嘴吹，有气泡产生；二是用橡皮泥堵塞瓶口，并插吸管，让学生向瓶内吹气，使水流出来；三是杯底塞入纸团，将杯子竖直压入水底，看纸团会不会湿。仔细分析，不难看出实验原型的不足之处有： 1.实验材料橡皮泥有毒；操作中容易出现橡皮泥堵塞吸管的失误，从而导致实验失败。 2.一次性吸管学生反复吹，不够卫生，用后丢弃造成环境污染和资源浪费。
3.学生气息不足，很难将水顺利吹出来，现象不明显。
4.如果杯子接触水面时没有垂直，很难达到理想的效果。 5.三年级的学生在操作时很容易把纸团掉入水中，浪费纸张，不利于环保。 三．实验创新与改进之处 创新实验一： 1.用橡胶塞替代有毒橡皮泥，安全、环保。 2.用玻璃管替代塑料吸管，消除浪费，减少了污染。 3.用推注射器活塞代替用嘴吹气实验，安全可靠更加卫生。 创新实验二： 用乒乓球代替纸团，节约用纸，实验更加绿色环保。 创新实验三： 1.在水槽壁粘贴刻度尺，在水面放一乒乓球，可以更直观地观察水位的升降变化。 2.用推拉注射器活塞来控制瓶内空气的流动，操作方便，现象明显。 四．创新实验所需器材 玻璃水槽、去底矿泉水瓶（底部缠铁丝）和完整矿泉水瓶各一个。玻璃管、橡胶管、带孔橡胶塞、乒乓球、注射器（或打气筒）、红墨水等。 五、实验过程 （一）自制小喷泉
试验专项技术方案
专项试验计划和方案 1、本项目建设单位为XX。现XX公司应邀参加该工程的项目招标，根据收到的工程图纸。招标文件及以往类似工程施工经验，结合本工程特点等编写该工程的施工组织设计。 2、试验是验证现场实物质量的必要手段，同时也是保证工程实物质量的有力手段。根据本合同工程特点，拟定本公司将建立工地实验室，投入足够的试验检测设备，在总工程师的领导下，开展检验、测试工作。通过工艺试验，选定最佳工艺参数，指导施工，同时对现场工艺参数进行检测控制，并及时反馈各种数据。 试验人员全员持证上岗，试验仪器必须由国家有关部门标定认可、并定期检定。实验室负责根据我公司《质量手册》及《程序文件》，对检验、试验设备进行日常管理并定期送检，以保证测量设备满足工程精度的要求。实验室主任要求检验和试验设备的具体情况提出设备周检计划，报项目总工审批，周检计划要比周检日期提前一个月上报，凡设备计划上报、审批不及时的，对相关负责人进行重罚。 3、合理配备测量、检测（验）人员 （1 ）、配备责任心强，现场施工经验丰富，资历较深的人员负责测量、检测（验）工作，杜绝测量放样事故的发生。 （2 ）、实行换手复测、复检制度。 （3）、实行内业资料的复核制度，无复核人签字的内业资料当事故 处理 （4）、配备足够的现场测量、检验、试验人员，对现场测试项目及时
测量、取样，对不负责任的人员进行重罚。 (5 )、根据公司《质量手册》、《程序文件》，对现场材料及时标识，发现使用没有标识的材料，对现场试验人员进行处罚 4、在工地建立自己的实验室，配备足够的人员和设备，按合同规定和监理人的指示进行各项材料试验，并为监理人进行质量检查和检验提供必要的试验资料和原始记录. 5、预控计划： 根据该工程的工程量，依据图纸要求，依照有关档、法规、原材试验及施工试验的规程、规范要求，对现场的试验做出一个预控计划，以便有条不紊的做好试验工作，真正做到把好原材料及其制品的质量关，防止不合格材料用于工程上，以保证工程质量。 (1 )有见证试验工作 该工程实行有见证试验，有见证取样和送检是在监理人员的见证 下，由施工人员在现场取样，送至指定的试验室进行试验。有见证取样和送检次数，不得少于试验总次数的30 %，试验总次数在10次以下的不得少于2次，工程的重要部位须增加有见证取样和送检次数，送检试样在现场施工试验中随机抽取，不得另外进行。施工过程中，见证人按照有见证取样和送检计划，对施工现场的取样和送检进行见证，并在试样或其包装上做出标识、封志。标识和封志标明工程名称、取样名称、部位、日期及样品数量，并有取样人和见证人签字，见证人制作见证记录，见证记录应列入施工技术档案。检 (2)混凝土部分 本工程所用的混凝土全部为商自拌混凝土
小学科学创新实验设计方案
小学科学创新实验设计 一、实验课题名称 小学科学五年级下册《下沉的物体会受到水的浮力吗》 二、正文 （一）、实验设计意图 1、该实验的设计便于学生直观、形象地感知和理解什么是“撩排开的水量”。 2、能有助于让学生进一步理解浮力的大小与排开的水量之间的关系。 （二）、实验所需器材 弹簧测力计、溢水杯、量筒（量杯）、圆柱体、大小不同的三个铁块、盛水容器、接水桶、红墨水。 （三）、实验创新之处 1、原教材中是以物体放入烧杯前后两次液面之差来理解物体“排开的水量”（见教材上一节），由于小学生形象思维太差，这样一方面对于基础较差的学生来讲就很难理解“排开”二字的含义；另一方面如果物体太小，或浸入水中太少，那么物体排开的水量就不是很明显，再加之烧杯底面较大，导致液面高度差的变化就很小，不便于学生观察。这样实验的直观效果就会差一些，对于实验结论的得出，有部分学生就会感到有难处。 2、制作的简易溢水杯，对于学生理解“排开的水量”以及与浮力大小的关系起到了一个很好的桥梁作用。首先，该装置能让物体浸入水中时溢出（排开）的水缓缓地流入烧杯中，让学生直观亲历、形象感知，从而简单明白易懂，不仅能激起学生的动手兴趣，而且能增强学生进行科学探究的欲望，为下一步理解浮力与排开的水量之间的关系作好了准备。其次是通过量筒（量杯）测出每次实验排
开的水量具体是多少毫升，而不是用“少”、“多”、“较多”等模糊语言，让学生对实验数据进行分析，不仅体现了自然科学的严谨性和科学性，还能更进一步促进学生理解浮力秘“排开的水量”之间的关系，为今后学习阿基米德原理打下了一个坚实的基础。 （四）、实验步骤 1、组装实验器材： （1）溢水杯装满水； （2）接水桶放在溢水管口下方； 2、测出圆柱体在空气中的重力，填入记录表格中。 3、将圆柱体分别以三分之一、三分之二、全部（分两次，只是深度不同）浸入溢水杯中，读出每次测力计的读数，填入表中；并用量筒测出每次排开的水量，填入记录表中。 4、引导学生分析表中数据，并讨论： （1）圆柱体浸入水中时测力计示数减小是什么原因？怎样计算圆柱体受到的浮力？ （2）下沉的物体在水中受到的浮力大小会变吗？ （3）如果不相同，是什么原因造成的？ （4）物体排开的水量与物体深入水中的深度到底是什么关系？ 5、先测出大小不同的三个铁块的重力，填入表格中；再将三个铁块分别浸没在水中，读出每次测力计的读数，填入表中；再用量筒测出每个铁块排开的水量，填入表中。 6、求出三个铁块在水中各自受到的浮力大小，引导学生讨论：
水利水电工程试验检测技术方案编制指南
水利水电工程试验检测技术方案编制指南 前言：编制本指南的目的：是为从事水利水电试验检测技术人员 编制试验检测技术方案时，提供个编写的准则和格式；本指南的内容是指一个完整水电工程的可能涉及到的试验检测任务。 在编制交通工程、核电工程等试验检测技术方案时，可供参考。 1、概要 编制水利水电工程试验检测技术方案前，应获得设计文件、招投标文件、工程承包合同、质量计划以及经过批准的全部施工图纸，掌握其工程规模、设计标准、合同工期、工程量、检测项目、标准等相关信息。 2、编制说明 2.1 编制目的 阐述编制本工程试验检测技术方案的目的。 2.2应具备的基本技术文件、设计文件、招投标文件、工程承包合同、施工组织设计、质量计划 应认真阅读上述技术文件和设计图纸，对其中与试验检测有关的内容要摘录备用，熟知其有关规定。 2.3引用标准和规程规范 应从设计文件、招标文件、施工图纸中，获取适用于该工程的各项试验检测项目及标准所涉及到的相关规程规范，以其所规定的各项 试验检测报告（成果）的格式及有关记录的表格形式。
3、试验检测组织机构 3.1项目试验室组织机构 通过熟读设计文件、招标文件，掌握该工程的混凝土工程（沥青混凝土工程）、钢筋工程、预应力工程、土石方填筑等的工程量和总进度计划、分部分项工程进度计划等相关资料；了解试验检测的工作量、进度安排、设备、器具及试验检测人员配置要求，建立能够满足工程试验检测任务的项目试验室检测机构。并按项目所在地主管部门要求、登记注册、取证。 3.2 项目试验室布置 项目试验室布置应考虑以下几个方面： 3.2.1工程施工总平面布置中所安排的试验检测机构占地面积、建筑面积，所处位置是否与工程实际相适应。 3.2.2掌握工程试验检测任务和涉及到的各项试验检测参数，拟定项目试验室各试验间的布置，包括办公室、资料室、样品间、粉状材料间、砂石间、土工间、力学间、拌和成型间、标准养护间。 3.2.3响应招标文件中对试验室平面布置的要求，结合本工程试验检测项目、强度的要求，确定各试验间的建筑面积，并用CAD 方式绘制项目试验室平面布置图。 3.3试验检测人员配备 3.3.1拟定试验检测人员配备计划时，应注意以下几个方面： 1）招标文件对试验检测人员配备数量和资格的要求； 2）工程特点和试验检测工作量对试验检测人员数量的要求； 3）工程施工需要和施工进度计划中在不同施工阶段对试验检测人员数量要求变化情况；
科学实验室活动方案
科学活动室活动方案 1 活动时间9.8 参加人员全体活动主题音乐门铃辅导教师马艳 活动简介1、初步了解音乐卡的基本结构，学会制作简易音乐门铃的方法。 2、了解音乐门铃的电路结构、功能与工作原理。 3. 通过制作活动，培养学生的动手操作能力，以小组合作的形式进行学习，培养学生团结协作的精神。 4、培养学生耐心细致的优秀品质，体会劳动和创新的快乐。 活动情况记录1.大多数学生能够正确的组装音乐门铃的电路结构。 2.老师巡视，了解学生制作情况，对学生的质疑和不良习惯给与解答和纠正。 2.学生动手能力有差异，以小组学习为单位，让已经学会的同学在小组中当小老师，实现分层教学。 4.强调安全意识。 科学活动室活动方案
2 活动时间9.15 参加人员全体 活动主题收音机辅导教师马艳 活 动 简 介 1.初步了解收音机的基本结构，学会制作简易收音机的方 法。 2.收音机的电路元器件的识别。 3.了解收音机的电路结构、功能与工作原理。 4.通过亲自动手活动，培养学生的动手操作能力，以小组 合作的形式进行学习，培养学生团结协作的精神。 活 动 情 况 记 录 1.教师巡视，了解学生制作情况，对学生的质疑和不良习 惯给与解答和纠正。 2.学生动手能力有差异，以小组学习为单位，让已经学会 的同学在小组中当小老师，实现分层教学。 3.大多数学生能够正确的组装收音机的电路结构。 4.强调安全意识。 科学活动室活动方案 3
活动时间9.22 参加人员全体活动主题无线话筒辅导教师马艳 活动简介1．初步了解无线话筒的基本结构，学会制作简易无线话筒的安装方法。 2．无线话筒的电路结构、功能与工作原理。 3．无线话筒电路元器件的识别与检测。 4．无线话筒电路常见故障现象分析与排除。 活动情况记录1.大多数学生能够正确的组装无线话筒的电路结构。 2.学生能通过小组合作的形式来解决遇到的问题。 3.学生能够在学习和交流的过程中体会到乐趣和完成作品的成就感。 科学活动室活动方案 4 活动时间10.13 参加人员全体
初中物理创新实验设计方案1
初中物理创新实验设计方案 一、实验课题名称：惯性定律演示仪 二、实验设计思路： 运用惯性定律（牛顿第一定律）：物体在不受任何外力作用的时候总保持静止或匀速直线运动（物体总保持原有在运动状态直到有外力迫使它改变为止） 三、实验或实验器材在教材中所处的地位与作用： 该实验是八年级物理第八章第二节内容，在已经学习了牛顿第一定律的基础上，研究所有物体都具有惯性，对于学生理解、学习、运用牛顿第一定律以及惯性的知识具有相当重要的作用。 可以说，这个实验是探究物体惯性的核心演示实验，一旦学生通过观察本实验仪的演示，必定会十分深刻在理解和掌握惯性在相关知识。 四、实验器材： 长木板、小车、弹簧、直塑料细管、漏斗、橡皮筋、细线、弹珠、铁钉 五、实验原型及不足之处: 传统的实验方法是使用控制变量法，使两种物质的质量相等，吸收的热量相同，通过观察温度计上示数的变化，得出结论：温度计示数上升较快的物质，升高1℃所需的热量较少，吸收热量的能力较小（即比热容较小）。它的不足之处： ⑴水和食用油吸收相同的热量用这套实验装置有较大的误差，容易受到外界环境的影响（如风向、石棉网的初温、两个酒精等的火焰有大小等）不便于控制； ⑵通过实验得出的结论是：吸热能力的大小与温度的变化成反比，学生要多转动一下思维才能理解，结论没有改进后的直接； ⑶所需要的实验器材也比较多，不利于实验的准备与操作。 ⑷所用烧杯体积过大，与空气的接触面积过大，所以散热过多，造成实验测量误差过大。 （如图） 六、实验创新与改进之处： ⑴将两套装置合二为一，减少了小组实验时对器材的需要；
⑵便于控制相同时间内吸收的热量相同这个变量，误差更小； ⑶两试管与空气的接触面更小，散热较少，误差较小； ⑷将烧杯较大的吸热面改为试管底部较小的吸热点（两试管型号相同、质量相等），就保证了相同时间内吸收的热量相同 ⑸实验中，将原实验观察温度计示数变化改为观察并记录两物质升高相同温度时的时间，这样做的好处是使实验结论更直接； （如图） 七、实验原理： 通过控制两物质质量相等、吸收热量相同、升高相同的温度等因素，来观察手中的秒表。升高相同温度时，所用时间较长的物质吸收的热量自然多一些，单位质量吸收热量的能力更强（即比热容更大一些）。 说明：完成实验时需控制的几个量 ⑴两试管型号相同、质量相等； ⑵试管中的水和食用油质量相等； ⑶试管中的水和食用油初温相同（可将两试管放入装有冷水的同一烧杯中1～2分钟）； ⑷相同时间内两试管吸收的热量相等； ⑸两试管中的液体升高相同的温度； 改变的量： ⑴升高相同温度时所需要加热的时间不同； ⑵升高相同温度时所吸收的热量不同。 八、实验操作步骤： ⑴将装有质量相等的水和食用油的试管插入事先准备好的同一烧杯的冷水中1～2分钟，保证两试管中液体的初温相同； ⑵将初温相同的两试管从冷水中拿出来同时放入正在加热的石棉网上，并放入温度计（同时按下秒表开始计时），观察通过热传递获得热量的两试管中温度计的变化； ⑶在温度计达到70℃时分别记下所用的时间； ⑷比较升高相同温度时所用时间的不同； ⑸得出结论：升高相同温度时，所用时间较长的物质吸收的热量较多，吸收热量的能力较强（比热容较大）。
风洞综述(实验流体力学课程设计)
实验空气动力学课程设计(风洞综述) .概念及原理 风洞(wind tunnel )，是能人工产生和控制气流，以模拟飞行器或物体周围气体的流动，并可量度气流对物体的作用以及观察物理现象的一种管道状实验设备，它是空气动力学实验最常用、最有效的工具。它不仅在航空和航天工程的研究和发展中起着重要作用在交通运输、房屋建筑、风能利用和环境保护等部门中也得到越来越广泛的应用。 原理: 用风洞作实验的依据是运动的相对性原理。为确保实验准确模拟真实流场，还必须满足相似律的要求。但由于风洞尺寸和动力的限制，通常只能选择一些影响最大的参数进行模拟。此外，风洞实验段的流场品质，如气流速度分布均匀度、平均气流方向偏离风洞轴线的大小、沿风洞轴线方向的压力梯度、截面温度分布的均匀度、气流的湍流度和噪声级等必须符合一定的标准，并定期进行检查测定。 .风洞发展简要回顾 风洞设备的发展大致经历了低速风洞发展阶段、超声速风洞发展阶段、跨声速风洞发展阶段、高超声速风洞发展阶段、风洞设备更新 改造和稳定发展阶段、风洞设备发展适应新需求、探索新概念风洞发展阶段。20世纪90年代，随着经济全球化和型号发展数量的减少，一方面，风洞设备在数量上呈现出过剩状态；另一方面，又缺少能满足未来型号精细化发展要求的高性能风洞。 三.近期风洞改造和建设 工业生产型风洞的更新改造最主要特点是风洞设计的多功能性、可扩展性、技术的先进性，风洞建设也呈现出创新的特点。主要包括：吸收试验段内的大部 分噪声, 提高风洞试验Re或模拟能力等。另外还有：感应热等离子体风洞（通
过高频电发生器以感应偶合的方式将亚声速或超声速射流加热到极高温度（5000C?10000C）,这种等离子风洞主要用于防热研究） 四.风洞发展的未来趋势 1）“安静”气流风洞 不仅气动声学风洞需要“安静”的风洞，高品质的任何类型风洞都 需要“安静”的风洞。 2）亚声速高升力飞行风洞风洞Re模拟能力直接影响试验数据的准确性。经过多年论证研究, NAS提出了高升力飞行风洞（HiLiFT ）的概念。它是利用磁悬浮推进技术推动试验模型在含有静止气体介质（空气或氮气）的管道中运动,
小学科学创新实验设计方案
小学科学创新实验设计方案 乐山市县街小学安琥 【教材内容】《义务教育课程标准实验教科书小学科学》（苏教版）四年级下册第四单元第4课《摩擦力的秘密》 一、实验名称： 研究摩擦力大小与物体运动的关系 二、实验设计思路： 通过本实验活动，让学生充分理解当物体的接触面的状态不同时产生的摩擦力也不同。因此指导学生认识摩擦力大小也可以以改变物体接触面的不同状态开始。使物体接触面变光滑和变粗糙，通过测量小车的运动（平行拉动和下降运动）形成数据，让学生更直观的认识到当接触面不同的时物体之间的摩擦力也会不同，物体运动的状态也会发生变化，从而使学生认识改变接触面的状态，可以增大或减小物体间的摩擦力。 三、实验目标： 利用教师提供的材料，改变物体的接触面状况，探究摩擦力大小与小车运动的关系。 四、实验器具 小车，木板，测力计，砂纸，尺子，书 五、实验操作： 小组活动一：探究如何减小摩擦力 材料：小车、一面光滑一面粗糙的木板（在木板一面粘上粗砂纸）
操作指南：把小车翻过来，连接上测力计，在木板的中间画上一条线，固定小车和测力计，拖动木板，让翻过来的小车分别在光滑板表面上，粗糙的表面上拖动，匀速拖到白线时读测力计的数字，并记录，再把小车放正（轮子朝下）再做一做。 相同的条件：小车测力计 不同的条件：光滑的表面粗糙的表面小车的正反面 实验结论： 1、接触面越粗糙，拉动小车所用的力越大，（摩擦力越大） 2、接触面越光滑，拉动小车所用的力越小，（摩擦力越小） 3、接触面能滚动时，所用的拉力更小（滚动摩擦时摩擦力更小） 小组活动二：改变小车的状况探究摩擦力。 （滚动摩擦与滑动摩擦的比较） 材料:小车、斜面。 操作指南：搭一个斜面，第一次让小车轮子朝上沿着斜面滑下去，第二次让小车轮子朝下沿着斜面滚下去，比较两次小车行驶的速度，说明什么道理？
体内小鼠实验方案
实验报告 抗肿瘤药物体内活性研究 一、实验原理 聚合物胶束的粒径约为0-200 nm，可以利用肿瘤组织的增强渗透保留效应(EPR)，选择性地透过肿瘤血管并积累在肿瘤组织，实现被动靶向；被特定官能团修饰的聚合物胶束则能响应部位的物理化学变化，实现靶向部位的载体聚集和药物定点释放。抗肿瘤药物的反复使用容易导致肿瘤细胞产生多药耐药性(MDR)，肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生耐药性后，对结构与作用机制不同的其它抗肿瘤药产生交叉耐药的现象极大的限制了化疗药物的疗效。纳米药物传递系统如脂质体、胶束、纳米粒等作为MDR逆转策略越来越引起关注。胶束能通过EPR效应使药物选择性地在肿瘤部位累积和释放，增加细胞内药物浓度，缓控释药物，并通过靶向细胞上特异受体对应的配体修饰，达到主动靶向，从而逆转肿瘤细胞耐药。 盐酸阿霉素(DOX·HCl)，属于蒽环类抗生素，能够抑制癌细胞遗传物质核酸的合成，具有广谱的恶性肿瘤的治疗效果，广泛用于宫颈癌细胞、卵巢癌、乳腺癌、恶性淋巴瘤、肺癌、肝癌等的治疗。然而，阿霉素的急性和慢性毒副作用限制了其在临床上的广泛应用，急性毒副作用包括恶心、呕吐、骨髓抑制和心率失常;慢性毒性表现为肝脏、大脑和肾脏的损伤，对心脏具有不可逆的剂量依赖性的损伤。用聚合物构建新型药物胶束传递系统，提高对疏水性药物的包载能力和药物稳定性;通过小分子修饰实现被动和主动靶向。此外,通过相关实验考察作为药物载体的聚合物胶束的耐药能力，以此来证明聚合物胶束的生物安全性好、稳定性高、载药量高、响应性强、靶向性准、缓控释性能好。 二、实验目的 1.运用抗肿瘤药物在小鼠体内评价方法，筛选出具有高表达、特异性、高亲和力的主动/被动靶向、无细胞毒性、抗肿瘤效果好的聚合物胶束。 2.动物体内抑瘤实验基于活体成像技术，建立药物抗肿瘤效果活体动物影响研究方法。 三、实验内容
浙师大附中新课程实验通用技术课程实施方案
浙师大附中新课程实验通用技术课程实施方案 一、课程指导思想 本课程是国家规定的必修课程，其课程标准的基本理念一是强调关注全体学生的发展，着力提高学生的技术素养；二是注重学生创造潜能的开发，加强学生实践能力的培养；三是立足科学、技术、社会的视野，加强人文素养的教育；四是紧密联系学生生活实际，努力反映先进技术和文化；五是丰富学生的学习过程，倡导学习方式的多样化。 我校以“一切为了学生的发展”为办学宗旨。通用技术课程以提高学生的技术素养、促进学生全面而又富有个性的发展为基本目标，它不仅仅注重学生学习符合时代需要、与学生生活紧密联系的基础知识与基本操作技能，更重要的是注重学生对技术的思想和方法的领悟与运用，注重学生对技术的人文因素的感悟与理解，注重学生技术学习中的探究、试验与创造，注重学生情感态度、价值观以及共通能力的发展，对学生应对未来挑战、实现终身发展奠定基础都具有重要意义。 二、课程实施（课程设置、师资培训建设、设施配备）方案 （一）课程设置 1.课程设置规划 年级段课程周学 时 设施配套师资 高二上学期技术与设计1 2 2个技术教室+ 1个操作大工场3人 高二下学期技术与设计2 2 3人
高二下学期或高三上学 期电子控制技术 或机器人技术 2 电子控制教室、 机器人工作室、 2人 家政与生活技 术 现代农业技术 2 家庭管理、理财讲 座； 锦林佛手栽培基地 2人 高二下学期或高三上学期开设选修模块的《电子控制技术》，《简易机器人制作》，《现代农业技术》，《家政与生活技术》供学生选修。《简易机器人制作》由信息学科教研组协助教学；《现代农业技术》暂设置品种资源的保护和引进、无土栽培二个研修专题，每个专题18课时，研修地点选择锦林佛手无土栽培基地，选修2个专题即可获得该模块学分。 选修模块供学生课程时间或周日假日探究活动时间学用（修满规定学时给学分）。活动可以同学校研究性学习活动结合，要充分运用浙师大良好资源。 2、操作性、活动性内容规划 基本完成浙江省教研室编制的配套《技术1.学生活动手册》的活动内容；根据教学需要，设计部分符合学生实际的活动项目。 （二）、师资、课程资源建设 1.建立综合实践活动与通用技术学科：（1）二学科统一办公：研究性学习与通用技术有共同之处，他们都注重于创新及探究。统一办公，有助于教学机具、教学场地等资源的整合，有助于教师的相互交流。(2)专业配置全面：通用技术设专职教师3人，其专业设置分别为工科1人，物理1人，计算机1人，满足了通用技术学科内容的综合性和专业性的特点。 2.选派专职老师参加课程培训：现在有1位老师参加了省级培训，1位老师参加了的市级培训。每学年按照省、市安排选配教师参加课程培训。 3.强化集体备课制度：
化学实验方案设计的基本要求
化学实验方案设计的基本要求
【同步教育信息】 一. 本周教学内容： 化学实验方案设计的基本要求 二. 重点、难点： 1. 了解化学实验方案设计的基本要求。 2. 培养学生分析、概括、总结、综合和归纳的能力，提高学生的思维能力。 三. 具体内容： 所谓实验设计，是用多种装置和仪器按某种目的进行串联组合完成某项实验，其类型较多，考查形式多样。解答这类题目，要求学生对所学过的物质的性质、制备和净化，常用仪器和装置的作用及使用时应注意的问题等知识融会贯通，要善于吸收新信息并且能加以灵活运用。 化学实验方案设计题具有较强的综合性，但一个化学实验，必须依据一定的实验原理，使用一定的仪器组装成一套实验装置，按一定顺序进行实验操作，才能顺利完成。据此，一道综合实验方案设计题，可以把它化解成几个相互独立又相互关联的小实验、小操作来解答。
由各个小实验确定各步操作方法，又由各个小实验之间的关联确定操作的先后顺序。 （一）化学实验设计的类型 根据不同的标准，可以将中学化学教学中的实验设计划分成不同的类型。 （1）根据实验在化学教学认识过程中的作用来划分。 ①启发性（或探索性）实验设计。由于这类实验是在课堂教学中配合其他化学知识的教授进行的，采取的又多是边讲边做实验或演示实验的形式，因此，在设计这类实验时，要注意效果明显、易操作、时间短、安全可靠。 ②验证性实验设计。由于这类实验的目的主要是验证化学假说和理论，又多采取学生实验课或边讲边做实验的形式，因此，在设计这类实验时，除了上述要求外，还要注意说服力要强。 ③运用性实验设计。这类实验的目的是综合运用所学的化学知识和技能，解决一些化学实验习题或实验问题。因此，在引导学生进行实验设计时，要注意灵活性和综合性，尽可能设计多种方案，并加以比较，进而进行优选。从课内、课外的角度来分，运用性实验设计又包括课内的实验习题设计和课外的生产、生活小实验设
荷载试验技术方案
静、动载试验 实 施 细 则 2015 年7 月9 日
目录 第一章工程概况 (2) 1.1 工程概况 (2) 1.2 主要技术标准 (2) 第二章静、动载试验的目的和依据 (4) 2.1 试验目的 (4) 2.2 试验的主要依据 (4) 第三章试验内容和方法 (5) 3.1 试验内容 (5) 3.2 试验方法 (5) 3.2.1 静载试验方法 (5) 3.2.2 动载试验方法 (7) 第四章试验要求 (8) 4.1 成桥恒载状态结构参数测定 (8) 4.2 静载试验要求 (8) 4.3 动载试验要求 (8) 第五章静载试验方案 (10) 5.1 概况 (10) 5.2 加载控制截面的选取 (10) 5.3 加载工况及相应的荷载效率系数 (11) 5.3.1 加载工况 (11) 5.3.2 加载效率系数及加载布置 (11) 5.4 测点布置 (20) 5.4.1位移测点布置 (20) 5.4.2主梁应变测点布置 (21) 第六章动载试验方案 (22) 6.1 动载试验的动应变测试断面及测点布置 (22) 6.2 动载试验的内容 (22) 6.2.1 跑车试验 (22) 6.2.2 跳车试验 (23) 6.2.3 刹车试验 (23) 6.3 试验工况 (23) 6.4 测量仪器 (24) 第七章成桥检测程序及工作流程...........................
25 7.1 进场 (25) 7.2 现场检测程序 (25) 7.3 检测结果整理 (25) 7.4 检测报告 (25) 第八章成桥检测措施 (26) 8.1 技术措施 (26) 8.2 安全措施 (26) 8.3 环保措施 (26) 第九章拟投入的检测仪器设备 (27)
风洞试验
什么是风洞 风洞一般称之为风洞试验。简单地讲，就是依据运动的相对性原理，将飞行器的模型或实物固定在地面人工环境中，人为制造气流流过，以此模拟空中各种复杂的飞行状态，获取试验数据。这是现代飞机、导弹、火箭等研制定型和生产的“绿色通道”。简单的说，风洞就是在地面上人为地创造一个“天空”。至于我们国家的风洞为什么会选择建在大山深处，那是历史原因造成的。 发达国家如何发展空气动力学 空气动力学是目前世界科学领域里最为活跃、最具有发展潜力的学科之一。世界各发达国家对空气动力学的发展都给予了高度重视，不惜花费巨额资金建设空气动力试验设施并开展研究工作。 美国早在80年代中期出台的震撼全球的超级跨世纪工程——“星球大战”计划中，就曾把作为基础学科的空气动力学放在非常突出的重要位置上。的确，如果不先在空气动力学上获得重大突破，这个将耗资1万亿美元的超级工程，很多关键技术将无法解决。紧接着在1985年发表的“美国航空航天2000年”中，也把空气动力学列为需要解决的七个问题中的第一个。而剩下的六个问题中还有四个与空气动力学有关。这使美国花费巨额投资研制了每秒20亿次的超级计算机专门为空气动力学研究服务。 前苏联在“十月革命”胜利后的第二年，列宁就下令组建了国家空气动力研究机构——中央流体动力研究院，并任命“俄罗斯航空之父”茹可夫斯基担任院长，这一决策为前苏联成为世界上另一个航天大国奠定了坚实的基础。二次大战之前，斯大林曾下令建造了世界上第一座可用于进行整架飞机试验的全尺寸风洞。与美国相比，前苏联在空气动力学的整体水平上毫不逊色，甚至在许多方面都领先于美国，它在航空航天领域取得的一系列成就足以说明这一点。 英、法两国在二次大战前均为名列前茅的老牌航空先进国家，然而战后他们突然发现自己比美、苏等国落后了一截，于是两国重振旗鼓、奋起直追。在战后第二年，法国政府便决定把因战争和被占领分散到全国各地的研究机构组织到一起，组建了国家空气动力研究机构，并在阿尔卑斯山腹地开始创建莫当试验中心，堪称世界一流的大功率空气动力试验风洞设备。曾经发明了世界上第一座风洞的英国人更是不甘落后，除了政府加强对空气动力学的领导规划之外，充分利用大学进行基础学科的研究。据有关资料透露，在英国的46所大学里，至少有30个以上高水平的空气动力研究试验室。 日本在战后受到限制的情况下，航空工业曾有过长达8年的空白。但在此期间，其基础研究——空气动力学则进展神速。仅60年代，就先后仿制出11种飞机，自行设计8种飞机。
幼儿科学小实验案例
幼儿科学小实验案例 科学实验：《不湿的手绢》 科学实验,不湿的,手绢 准备：两只杯子、两块手绢 玩法： 1.猜一猜。把两只里边塞着手绢的杯子采用不同的方式放入水中，哪快手绢会湿，那块不会湿？ 2.做一做。把手绢紧紧塞入杯中，使手绢不会掉下来。一只杯子采用垂直倒扣放入水中，另一只杯子斜放入水中。结果是垂直放入水中的手绢没有湿。 3.说一说。告诉孩子这是因为空气占据空间，水不能流入，所以垂直放入水中的手绢没有湿。 4.玩一玩。让孩子用塑料袋兜空气，然后把口系上，感觉空气的存在。获得经验，初步了解空气的作用。 提示：结合生活中的实例，随时告诉孩子空气的存在与作用。 科学小游戏：被缩短的勺子幼儿园庆六一儿童节主持词 平行看一只装满水的水桶水面，将一把勺子垂直插入水中。水中的勺子，一下子就变短了，这是怎么一回事？ 这个错觉的产生，主要是因为被插入水中的勺子所反射的光线，不是以直线的方式进入眼帘的。光线在水面上被折射成为一个角度，所以才看到勺子的尖端比实际大大靠上。水域的水由于光的折射，看起来总是比实际深度浅很多。印第安人对这一点就知道得很清楚。他们用
箭或矛在水中捕鱼时，总是向更深的地方瞄准。 幼儿科学实验：神奇的牙签 思考： 放在水里的牙签，会随着放在水里的方糖游动，还是随着放在水里的肥皂游动？ 材料： 牙签、一盆清水、肥皂、方糖 操作： 1. 把牙签小心地放在水面上。 2. 把方糖放入水盆中离牙签较远的地方。牙签会向方糖方向移动。 3. 换一盆水，把牙签小心地放在水面上，现在把肥皂放入水盆中离牙签较近的地方。牙签会远离肥皂。 讲解： 当你把方糖放入水盆的中心时，方糖会吸收一些水分，所以会有很小的水流往方糖的方向流，而牙签也跟着水流移动。但是，当你把肥皂投入水盆中时，水盆边的表面张力比较强，所以会把牙签向外拉。 创造：幼儿园教学活动设计反思 请你试一试，如果将糖和肥皂换成其它物质，牙签会向哪个方向游去。幼儿园科学小实验：烛火熄灭了 思考：蜡烛除了用口吹熄外，还可以用什么其他的方法呢？ 材料：蜡烛1支、小苏打若干、食用醋少许、火柴1盒、碗1个 流程：
亲子科学小实验活动方案
亲子科学小实验活动方案 参加科学试验活动的儿童，本身就是一个个天生的小“科学家”。当我们有目的指向地让他（她）们确立了生物学家、物理学家、化学家或者是地理学家的身份后，这些小“科学家”们：首先，理解了科学家——就是通过做实验来发现某些东西的人。下面是5068儿童网橙子整理的关于亲子的活动方案，供大家学习和参阅! 亲子科学小实验活动方案：谁能穿越管子 活动目标： 1、通过试验获得相关物体特性的经验。(如：光是直射的，先是柔软的，可以弯曲的等。) 2、在活动中提出自己的假设，并乐意通过实验来验证。 3、激发幼儿对科学的探究兴趣，提高幼儿的动手操作能力。 活动准备： 不同形状的白色弯管若干，一段既有螺帽的尼龙线、打气筒、铅笔、手电筒若干，直管弯管若干，幼儿实验记录表若干，教师实验记表一张。 活动过程： 1、出示直管。 师：这是什么?平时有什么东西可以穿越这根直管? 师：今天老师给你们带来了四样东西，它们分别是一端系由螺帽的线、打气筒、铅笔、会发光的手电筒，(一端系由螺帽的线、打气筒、铅笔、会发光的手电筒)你们来猜猜看，这些东西他们哪些能穿
越直管，哪些不能?(幼儿猜测) 师：让我们动手做个实验试一试吧!老师为你们准备了实验级路标，你们可以把实验中的发现记录下来，能穿越直管的，就在表格后面这里打个“勾”如果不能得就打个“叉”。 2、幼儿进行直管的实验。 师：谁愿意把实验中的发现和大家说一说?那些东西能穿越直管那些不能?(教师把有争议的实验再示范做一次，并在教师的试验记录表上做好记号) 提问：(1)为什么带有螺帽的线、打气筒里打出的气、铅笔、光都能穿越直管?(因为空启示流动的，线是柔软的可以弯曲的，铅笔是直的，光是直射的，所以能穿越弯管。) (2)这四样东西能穿越这样的管子吗?(出示弯管)哪些能哪些不能穿越?(幼儿猜测) 3、幼儿进行弯管的实验。 师：谁来说一说你在实验中的发现?教师把有争议的实验再示范做一次，并在教师的试验记录表上做好记号。 提问：为什么铅笔和光线能穿越直管却不能穿越弯管?(因为铅笔和直管一样是直的只能穿越直管不能穿越弯管，而光线是直射的所以也不能穿越弯管。) 教师总结：线是柔软的可以弯曲的所以它能穿越直管和弯管，打气筒里打出的气是流动的所以也能穿越直管和弯管，铅笔是直的不能弯曲所以它只能穿越直管不能穿越弯管，光是直射的所以也只能穿越
实验室综合废水处理技术方案
实验室综合废水50t/d处理项目设计方案 设计人：陈亮 2015年10月10日
1、目录 1、目录 (2) 2、公司介绍 (4) 2、设计规范、范围及原则 (4) 设计规范 (4) 设计范围 (4) 设计原则 (5) 3、处理工艺流程 (6) 设计水量与水质 (6) 污水处理工艺流程 (6) 污泥的处理与处置 (11) 4、处理工艺设计 (12) 主要处理构(建)筑物 (12) 主要处理构(建)筑物一览表 (13) 主要处理设备一览表 (13) 5、高程设计和总图设计 (14) 高程设计 (14) 总图设计 (14) 6、建筑、结构设计 (15) 建筑设计 (15) 结构设计 (15) 7、电气、仪表及控制系统 (16) 电气设计 (16) 照明系统 (16) 接地 (16) 仪表 (16) 控制方式 (16)
8、防腐、防渗设计 (17) 防腐 (17) 防渗措施 (18) 9、项目实施 (19) 工程内容 (19) 施工进度 (19) 10、工程管理 (20) 人员编制 (20) 主要管理设施 (20) 运行的技术管理 (20) 检修和维护 (21) 事故或事故处理措施 (21) 11、安全生产、消防和工业卫生 (22) 安全生产 (22) 消防 (22) 工业卫生措施 (23) 节能减耗措施 (23) 12、运行成本和效益分析 (24) 运行成本 (24) 效益分析 (24)
1、公司介绍
2、设计规范、范围及原则 设计规范 1、《环境空气质量标准》GB3095-96 2、《地方水污染物综合排放标准》DB11／307-2013 3、《工业企业厂界噪声标准》GB12348-90 4、《工业与民用供配电系统设计规范》GB50052-92 5、《低压配电装置及线路设计规范》GB50054-92 6、《建筑防雷设计规范》GB50057-92 7、《建筑结构荷载规范》GBJ9-87 8、《混凝土结构设计规范》GBJ10-89 9、《建筑抗震设计规范》GBJ11-89 10、《室外排水设计规范》(1997年修订)GBJ14-87 11、《建筑给水排水设计规范》GBJ15-88 12、《地下工程防水技术规范》GBJ16-87 13、《建筑结构设计统一标准》GBJ68-89 14、《给水排水工程结构设计规范》GBJ69-84 15、《工业自动化仪表工程施工及验收规范》GBJ93-86 16、《地下工程防水技术规范》GBJ108-87 17、《室外给水排水和热力工程抗震设计规范》TJ32-78 18、《建筑工程设计文件编制深度规定》DBJ08-64-97 19、《给排水设计手册》 设计范围 1、污水处理站的总体设计，包括工艺、建筑、结构、设备、电气、仪表设计等； 2、污水处理站的设计主要分为污水处理和污泥处理及处置两大部分。 1）污水处理 调查研究水量、水质变化情况，结合污水本身所特有的情况，选择技术成熟、经济合理、运行灵活、管理方便、处理效果稳定的方案。 2）污泥处理与处置 污水处理过程中产生污泥，应进行稳定处理，防止对环境造成二次污染，并妥善
小型车1：5模拟风洞试验室设计-任务书
毕业设计（论文）任务书 学生姓名系部汽车与交通工程学院专业、班级 指导教师姓名职称教授从事 专业 车辆工程是否外聘■否 题目名称小型车1：5模拟风洞试验室设计 一、设计目的、意义 全面训练资料查询能力和专业知识综合运用能力，综合训练独立设计能力和工程设计软件的应用能力，提高独立工作能力和素质。 进行汽车研究，汽车风洞是必不可少的试验设备。汽车风洞建设对汽车空气动力学发展意义重大，没有汽车风洞，也不能很好推动整个国家的汽车工业向前发展。而汽车风洞的主要任务是正确模拟气流流经汽车车体表面的流态以获得准确的实验数据，实验数据的精确与否决定了汽车气动外形设计的成败。因此，汽车风洞实验能促进汽车空气动力学研究，进行汽车空气动力学研究将能够给我国带来巨大的燃油节省，具有非常大的经济效益和社会效益。因此，本课题设计研究内容对于全面提高学生工程设计能力和素质，研究风洞试验室设计问题具有重要的现实意义和良好的实用意义。 二、设计内容、技术要求（研究方法） 主要技术指标、要求或生产纲领： 测试仓截面尺寸：宽1200×高1000(mm)；环状风道截面尺寸：宽800×高600(mm)； 最大稳定风速60m/s；采用P型循环风洞；前后仓栅稳速；弯道内半径400 mm；材料选用镀锌铁皮；测试台面高度600 mm；测试车模固定方便，现场风速可测，多点压力测试。 风力利用系数为0.8。除风速外，以上参数为初定。根据实际而定。 设计主要内容及分析、校核： 1、进行1：5小型车模拟风洞试验室平面布局设计； 2、进行风机选择和校核，前后稳速仓栅设计，测试仓设计，测试台设计，环状风道设计，P型引风 口设计等； 3、根据设计系统进行校核； 4、绘制设计系统总图和上述部分的结构装配图、部件图； 三、设计完成后应提交的成果 1、设计完整的整体装配图，零、部件图，折合 A0图纸至少3.5张； 2、设计计算说明书：1.5～2.0万字； 3、相关设计资料应齐全。
有趣的科学小实验
有趣的科学小实验 会跳远的乒乓球 思考：乒乓球放在高脚杯中，你怎样吹气，球才会跳出杯子呢？ 材料：高脚杯2个、乒乓球1个 1 把两个高脚杯并排放置 2 将乒乓球放在第一个杯子中。 讲解： 1、向球的侧面吹气，乒乓球不容易跳到第二个杯子里去（或跳出来） 2、向球的上方吹气，上方压力变小，乒乓球会浮起来，继续吹，就跳入第二个杯子去了 创造：换个新方法也能让乒乓球跳到下一个杯子里 会吹泡泡的瓶子 思考：你知道瓶子是怎样吹泡泡的吗？ 材料：饮料瓶1个、冷热水各1杯、彩色水一杯、大盘子1个、橡皮泥1块、吸管若干 操作： 1 将吸管逐一连接，形成长管（连接口用胶带封好）。 2 将吸管放入瓶中，并用橡皮泥密封住瓶口，然后把瓶子放置在盘子中。 3 弯曲吸管，使吸管另一端进入有色水的玻璃杯中。 4 向瓶子壁上浇热水，杯子中的吸管会排放大量气泡。 5 向瓶子壁上浇冷水。 6 玻璃杯中的水会经过吸管流入瓶中。 讲解： 1 因为塑料瓶很薄，于是热可以穿过瓶壁，进入瓶子中的空气里。 2 瓶子中的空气受热后会膨胀。 3 水中的气泡就是空气膨胀时，被挤出瓶子的空气。 4 瓶子中的空气遇冷时收缩。 5 瓶子中的空气收缩时，水便占据了剩余的空间。 创造：瓶子盖太紧时，你知道如何用最好的方法打开它吗？ 自己会走路的杯子 思考：杯子没有腿，它是怎样从上面走下来的 材料：杯子一个、蜡烛、火柴、玻璃、两本书、水 操作： 1、用一块玻璃板，放在水里浸一下 2、玻璃一头放在桌子上，另一头用几本书垫起来（高度约5厘米） 3、拿一个玻璃杯，杯口沾些水，倒扣在玻璃板上。 4、用点燃的蜡烛去烧杯子的底部，玻璃杯会自己缓缓地向下走去。 讲解： 当烛火烧杯底时，杯内的空气渐渐变热膨胀，要往外挤，但是，杯口是倒扣着的，又有一层水将杯口封闭，热空气跑不出来，只能把杯子顶起一点儿，在自身重量的作用下，就自己下滑了。 纸杯旋转灯 思考：蜡烛纸杯灯为什么会转动？ 材料：纸杯2个、牙签1支、蜡烛1支、胶带1卷、绳子1根、剪刀1把 操作： 1、取一纸杯，在杯身对称处各剪开一个方形大口，在杯底固定上蜡烛，作为灯的底座。 2、另一个纸杯则在杯身约等距离位置剪出三四个长方形的扇叶，在杯底中央处穿上绳子，并用牙签棒固定，作为
科学小实验活动方案
科学小实验活动方案 Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】
科学小实验活动方案 白山市浑江区第二实验小学一、指导思想 为了进一步推动我校科技教育，普及科学知识，培养学生的科学创新精神和科技创新能力，提高学生的综合科学素养，激发学生爱科学、学科学、用科学的热情，展示学生的创造能力和特长，推进素质教育的实施。 二、活动目的 1、让孩子们学的开心，玩的开心。在学习中培养兴趣，在游戏中学习科学。 2、培养学生独立思考、创新进取的科学素养。 三、活动时间及地点 时间：2014年3月 地点：科学实验室 四、活动对象 三年级到六年级学生科学教师 五、活动内容 选取比较简单的实验，准备好实验材料，创造机会让学生动手做实验，让学生参与到其中，亲历实验过程，真正经历科学学习过程。（具体内容见附件） 五、活动措施?
1．根据不同的实验内容，开展丰富多彩的实验活动。老师可减少不必要活动前准备，多让学生自己进行准备，选取最适合的实验材料进行活动，提高活动效益。? 2．活动时老师要作适当讲解，进行必要规范的演示，学生分组要团结合作。? 3．实验活动过程中，教师要加强巡视指导，以保证学生实验成功率达到100%。? 4、注意注重安全教育，对较危险的实验应多强调注意事项，要求学生严格规范操作。? 5、鼓励学生动手的同时多动脑，大胆地创新。引领学生实验胆大心细，在活动中满足孩子童真的天性和激发孩子对科学探究的兴趣。 五、预期成果 通过本次活动，激发学生探究科学活动的潜能，使他们能够在以后的教学活动中，乐于参与到实验活动中来，从而提升学生整体的科学素养。 六、附件： 1、带电的气球 2、有趣的微小世界 3、当小苏打遇到白醋后 4、走进丰富多彩的物质世界 2014年2月