TRUST试验不宜作为入出境人员梅毒诊断的血清筛查试验
TRUST试验不宜作为入出境人员梅毒诊断的血清筛查试验
作者：赵建;殷竹君;田玲玲;杨启生;赵久红;轩芳
作者机构：江苏出入境检验检疫局,南京,210001;江苏出入境检验检疫局,南京,210001;江苏出入境检验检疫局,南京,210001;江苏出入境检验检疫局,南京,210001;江苏出入境检验检疫局,南京,210001;江苏出入境检验检疫局,南京,210001
来源：临床检验杂志
ISSN：1001-764X
年：2006
卷：024
期：004
页码：269-270
页数：2
中图分类：R446.6
正文语种：chi
关键词：梅毒;TRUST试验;TPPA试验;TP-ELISA试验
摘要：目的控制出入境人员梅毒血清筛查试验的假阴性,提高梅毒感染的诊断水平.方法通过对部分TRUST试验筛查阴性血清样品进行TPPA验证试验,最大限度发现梅毒患者.结果在400份TRUST试验阴性血清样本中,进行TPPA试验,检出4份阳性样品.结论TRUST试验不宜作为入出境人员梅毒诊断的血清学筛查试验,应探讨合适方法加以改进.
梅毒血清学检测策略
1.非梅毒螺旋体抗原血清学试验： ? 原理：梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体细胞表面释放的类脂物质，刺激机体产生抗类脂抗体（反应素）。在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应，形成凝集反应。?方法：VDRL (venereal disease research laboratory test) USR (unheated serum reagin test ) RPR (rapid plasma reagin circle card test) TRUST (tolulized red unheated serum test)特点：非特异性反应， 一、梅毒血清试验 2、梅毒螺旋体抗原血清试验 基于TP特异性抗原，检测TP抗体
TPPA TPPA 物，荧光镜下，TP呈苹果绿色荧光。 阴性 弱阳性 阳性 图18-1 TP抗体酶联免疫法试验 双抗原夹心一步法原理 图18-2 TP抗体酶联免疫法试验 双抗原夹心二步法原理
?电化学发光(ECLIA)免疫检测原理 亲和素 5）TP-RT胶体金法： ?临床：用于梅毒筛查 ?注意： 高敏感性，特异较？
特异性总抗体 特异性IgG 抗体特异性IgM 抗体 5-7周 反应素 抗体变化规律
Comparison of three syphilis serodiagnosis algorithms and clinical 665 RPR-/TPPA+ patients were excluded from positive serodiagnosis due to a missed diagnosis rate of 24.2% (665/2,749). Man-Li Tong, et al. Analysis of three algorithms for syphilis serodiagnosis and implications for clinical management. Clinical Infectious Diseases 2014;58:1115-1124 . The traditional algorithm ?One lab ： ?98%EIA +/PRP+→ ?TP-PA+ ?CDC. Discordant results from reverse sequence syphilis screening--five laboratories ，United States ，2006-2010. MMWR. Morbidity and mortality weekly report ，2011，60(5): 133.
梅毒实验室诊断方法
梅毒实验室诊断 梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。 一、显微镜检查法 （一）暗视野显微镜检查 【基本原理】 梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片，以及淋巴结穿刺液涂片等，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 【仪器材料】 1．暗视野显微镜。 2．钝刀（刮勺）、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。 【标本采集】 1．皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。 2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检。 【操作步骤】 1．加镜油：在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。 2．聚光：将标本玻片臵载物台上，上升聚光器使镜油接触载玻片底面。 3．镜检：在镜下观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。 【结果判读】 梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长5～20μm，直径小于0.2μm，有6～12个螺旋，具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方式。暗视野显微镜下发现有上述特征的螺旋体为阳性结果。 【结果报告】 1．阳性：见到上述特征的梅毒螺旋体。 2．阴性：未见到上述特征的梅毒螺旋体。 【临床意义】 1．暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。 2．螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。 3．如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，应复查和血清学检查。 【注意事项】 1.取材时尽量避免出血，以免影响镜下观察。 2.取材后应立即臵暗视野显微镜下观察。 3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。 （二）镀银染色检查 【基本原理】 梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。 【仪器材料】 1．显微镜。 2．罗吉氏固定液、鞣酸媒染剂、Fontana氏银溶液。 【标本采集】
梅毒trust tppa tpha
>梅毒螺旋体血球凝集试验(trepomema palidum hmagglutination assay,TPHA) 利用间接血凝法测定人血清或血浆中的梅毒螺旋体的特异性抗体，只要有微量的抗体(血清通常用作1∶80以上稀释)就可使致敏的红细胞发生凝集作用。试验方法中，试剂盒配置的血清吸收剂可消除试验中的生物学假阳性反应，提高试验的特异性。此试验用于确诊梅毒，具有快速、简便、敏感和特异等特点。 梅毒螺旋体明胶凝集试验(treponema pallidum particle assay,TPPA)的试验原理与TPHA基本相同。TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒替代TPHA试验中致敏的红细胞，此致敏颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝集反应，具有较高的敏感性。明胶颗粒为洋红色，在操作步骤上也较为方便，出结果较快。梅毒快速检测试纸条是根据双抗原夹心免疫层析原理，在硝酸纤维素膜上包被TP重组抗原，在玻璃纤维上吸附胶体金标记TP重组抗原，样品中的TP抗体首选与金标抗原结合形成复合物，顺膜渗透至包被反应区，与包被TP抗原结合，形成由胶体金抗原-TP抗体-抗原组成的紫红色反应带。本法简单，无需特殊设备，全部试验过程可在30分钟内完成，故特异性好。 TPHA梅毒螺旋体抗原血清试验其敏感性和特异性高，主要被用于梅毒确诊试验，但对疗效观察意义不大。TPHA是目前梅毒诊断的确诊试验，一旦试验呈阳性反应后，即使经过治疗，也终身不会转阴。TPPA是在TPHA基础上建立的一种新试剂，具有操作简便、不需其他仪器、操作中无需等待血液吸收、2小时读结果的优点。 甲苯胺红不加热血清试验（tolulized red unheated serum test,TRUST）是一种非梅毒螺旋体抗原血清试验，主要用于梅毒的筛选和疗效观察。 梅毒螺旋体感染人体后，宿主迅速对螺旋体表面的脂质作出免疫应答，在3~4周产生抗类脂质抗原的抗体（反应素），此时TRUST试验可呈阳性。 2原理编辑本段 用正常牛心肌的心类脂（Cardiolipin 二磷酸酰甘油衍生物）作为抗原，而不是用螺旋体作为抗原，来测定病人血清中的反应素（非特异性抗体---抗心磷脂抗体）。用来初步筛查
梅毒血清学试验四种方法的比较
梅毒血清学试验四种方法的比较 发表时间：2012-10-25T14:28:14.670Z 来源：《医药前沿》2012年第19期供稿作者：唐玉秀[导读] 比较4种常用的梅毒血清学试验方法，观察各种方法的优缺点，为实验室和临床提供参考。唐玉秀（广西全州县人民医院检验科广西全州541500） 【摘要】目的比较4种常用的梅毒血清学试验方法，观察各种方法的优缺点，为实验室和临床提供参考。方法梅毒酶联免疫吸咐试验（TP-ELISA）,梅毒血浆反应素环状卡片试验（RPR），胶体金快速检测试验（SYP），梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）。结果RPR 和SYP两种方法对梅毒检出率明显低于TP-ELISA和TPPA法。结论 SYP法，ELISA法是实验室初筛梅毒的最佳方法，如果要确诊梅毒要用TPPA法，疗效观察用RPR法。 【关键词】梅毒TP-ELISA RPR SYP TPPA 梅毒是由梅毒螺旋体（苍白螺旋体）感染引起的一种慢性全身性传播疾病。该病病程长，危害大，临床表现复杂，呈多样性，几乎可以累及全身各个器官，早期主要侵犯皮肤，黏膜；晚期可累及心血管及中枢神经系统等器管[1-3]。近年来，梅毒的发病率呈增加趋势，因此对梅毒的早期诊断和及时治疗成为关键问题，防止梅毒的蔓延是重中之重。实验室如何更好的选用哪种检测方法，避免漏诊，误诊，错诊而产生的医疗隐患等。目前用于梅毒血清学检验的方法较多，通过各种方法的比较，从而选择更合适的试验方法，对梅毒的诊断和治疗方面提供更好的科学依据。 1 选择的对象，试剂和仪器，检测的方法 1.1选择的对象选用2011年1月至2011年12月期间住院和门诊检测梅毒项目的患者。大约12400份标本，其中有125例确诊病人，大多数病例无临床症状。 1.2使用的试剂和仪器 （1）试剂：SYP使用艾康生物技术（杭州）有限公司提供的试剂盒。ELISA和RPR由上海科华生物有限公司提供的试剂盒。TPPA是使用日本富士公司试剂盒。 （2）仪器深圳雷杜RT-3100洗板机，上海新波SYM-810酶标仪，XK96-8型梅毒旋转振荡器。 1.3方法严格按照说明书进行操作，先用SYP，TP-ELISA法初筛，检出阳性和弱阳性标本后再用RPR滴渡法和TPPA检测法。 2 结果 SYP和ELISA法初筛结果表1 由SYP和ELISA法筛检阳性标本中，再进行RPR和TPPA检测。先做RPR原倍，阳性者，再做生理盐水稀释滴度1:2,1:4,1:8,1:16 阳性符合率见表2 从表2可得知TPPA为确诊试验，SYP和ELISA法为初筛试验，RPR为疗效观察试验。 3 讨论 由于梅毒感染后，抗心磷酯抗体出现晚于特异性螺旋体抗体，而且梅毒晚期又可能转阴，故RPR，SYP不适宜一期梅毒早期和三期梅毒诊断，对潜伏期和神经梅毒也不敏感。[4]而且SYP，RPR不易于自动化，结果的判断也存在主观性，已不是很适合梅毒的筛检法，但RPR滴度法可作为临床疗效观察的指标。 梅毒酶联免疫吸咐试验（TP-ELISA）是一种基于基因工程的特异性检测技术，灵敏度和特异性均较高，特异性抗体在梅毒的潜伏期即产生，对梅毒的早期辅助诊断较好。TP-ELISA法，操作简单，成本较低，适合医院大批量检测。但存在的缺点是该方法检测的是梅毒IgG 和IgM的混合抗体，IgG抗体治愈后相当长的时间仍然存较高的阳性率，甚至终身阳性，因此TP-ELISA阳性只说明正在感染或者曾经感染过，不能判断梅毒疾病活度与否，所以不能作为疗效监测手段[5]。当然，ELISA法本身也存在不足，这与检测的标本，操作人员的操作有关（如放置时间过长，显色未避光等）导致假阳性。 TPPA的灵敏度和特异性比前三种方法都高，是临床常用的梅毒确诊试验，也可以进行效价测定。但是成本高，操作复杂，耗时较长，不太适合大批量标本的检测。适合用于前三种方法测定阳性后的确诊试验。由于该法检测同样是梅毒IgM的IgG的混合抗体[6]，存在与TP-ELISA相类似的不足。 综上所述四种梅毒学血清方法比较，TP-ELISA法的特异性和灵敏度明显高于SYP，但不能取代SYP法，但两种方法可以互补，结合两种方法更能更好的检测梅毒。对于TP-ELISA和SYP法阳性者，应用TPPA法作确诊试验，RPR作滴度检测，才能更好的为临床提供诊治意见。 参考文献 [1]郭兑山，宁平，方德强,等，梅毒螺旋体抗体IgG ELISA和RPR试验的比较[J].中国输血杂志，2005，14（2）：88. [2]龚向东，叶顺章，张国成等，2000年全国性病流行病学分析[J].中国性病艾滋病防治，2001,7(3):131. [3]刘鹏，梅毒螺旋体的检测技术与应用现状[J].实用医药杂志，2005，22（10）：939-941 [4]黄永梅，ELISA,TPPA和TRUST,RPR梅毒检测方法的比较[J].国际医药卫生导报，2006，12（8）：88-89. [5]王培华，输血技术学[M].北京；北京人民出版社，1998，102-105. [6]何旭东，李龙，ELISA法检测梅毒特异性抗体[J].中国输血杂志，2001，14（增刊）：33.
(推荐)梅毒实验室诊断标准
一、梅毒分类诊断标准 （一）一期梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现：具有符合相应特征的硬下疳、腹股沟淋巴结肿大。 3、实验室检查：硬下疳组织渗出液或淋巴结节穿刺液：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性和TPPA（或TPHA 或TP-ELISA）阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA或TP暗视野检查）或结果为阴性的为疑似病例。 （二）二期梅毒的诊断标准 1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史。 2、临床表现：病期2年内，多为无症状性、暗红色、符合相应特征的多形性皮损，尤其掌趾部位的暗红斑或鳞屑性丘疹，也可出现其它损害（关节、眼、内脏等）。 3、实验室检查：皮损如扁平湿疣、湿丘疹、粘膜斑等：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，
未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）的为疑似病例。
（三）三期梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史或一、二期梅毒史。 2、临床表现：病期2年以上。有如下特征中的任一项表现，包括皮肤黏膜损害如结节梅毒疹、树胶肿，上腭、鼻中隔等穿孔性损害；骨、眼损害，其它内脏损害；神经梅毒；心血管梅毒。 3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性；或脑脊液检查：WBC≥10×106/L，蛋白>500mg/L，并排除其它引起这些异常的原因。或三期梅毒组织病理变化。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）脑脊液检查或组织病理检查的为疑似病例。 （四）隐性梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现：无任何梅毒症状与特征。有明确的2年内梅毒接触史或梅毒发病史为早期，病期超过2年或无法判断病期者均为晚期。 3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性（无梅毒史者阳性，滴度
梅毒甲苯胺红不加热血清试验TRUST
梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）1. 测定原理：采用VDRL抗原等特制的甲胺红溶液制成悬液。若样本含有梅毒螺旋体抗体，抗原抗体反应形成肉眼可见的红色凝集块。 2. 标本要求 2.1 血液:血浆（EDTA抗凝）血清。 2.2 测定量：50ul血清或血浆 3.试剂： 3.1 上海荣盛试剂盒（供梅毒血清学试验用） 3.2 试剂盒组成；TRUST抗原悬液 2.5mL×1瓶阴性对照血清1ml×1支阳性对照血清1ml×1支专用滴管及针头1套试验专用卡片120人份 3.3 保存条件：2-10℃ 4.质控；梅毒抗体质控血清，保存条件-15－-20℃，使用前放置室温（18-25℃），颠倒混匀。 5.操作程序 5.1 标本测定 5.1.1 分别吸取50ul梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。 5.1.2 取待测血清或血浆50ul（不需失活）置于纸卡的另一圆圈中。 5.1.3 用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂一滴于上述圆圈中。 5.1.4 按每分钟100转摇动8分钟。肉眼观察结果。
5.2 注意事项； 5.2.1 本实验在23-29℃环境下进行。 5.2.2 TRUST试剂使用前应充分摇匀。 5.2.3 如做定量试验，可将待检血清用生理盐水作倍比系列稀释，然后按上述定性方法进行试验，以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。 5.2.4 本试验系非特异性反应，需结合临床进行综合分析，必要时需作特异性密螺体试验。 6.结果判断。 6.1 阳性（+++~++++）：可见中等或较大的红色凝集物。 6.2弱阳性（+~++）：可见较小的红色凝集物。 6.3阴性（—）：可见均匀的抗原颗粒而无凝集物。
梅毒实验室测试题
梅毒实验室测试题 一、单选题 1、梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法： A 革兰染色 B 美兰染色 C 镀银染色 D 伊红染色 2、非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法： A TPPA B ELISA C RPR D FTA-ABS 3、TPPA只能检测到： A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA等混合抗体 D IgM 4、梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本： A 皮肤溃疡组织液 B 羊水 C 血液 D 脑脊液 5、RPR检测不能采用下列标本：
A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 6、ELISA检测不能采用下列标本： A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 7、梅毒螺旋体病原学检测方法不包括： A 暗视野显微镜检查 B 镀银染色 C 培养基培养 D 核酸检测 8、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的转速是： A （100±2）转/分B（100±10）转/分 C （120±2）转/分 D （120±10）转/分 9、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的旋转直径是： A 25±2mm B 18±2mm C 20±2mm D 30±2mm 10、RPR/TRUST试验在水平旋转仪上旋转反应时间
A 5分钟 B 8分钟 C 10分钟 D 12分钟 11、TRUST试验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 12、前带现象主要出现在下列哪一种方法中： A ELISA B RPR C TPPA D FTA-ABS 13、RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 14、下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体： A RPR B ELISA C VDRL D TRUST 15、TPPA试验结果判读孔的血清稀释倍数是：
3种梅毒血清学诊断试验的临床应用价值
3种梅毒血清学诊断试验的临床应用价值 目的比较3种梅毒血清学检测方法在临床中的应用价值。方法采用梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA），梅毒甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST），梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验（TPPA）3种方法检测231例血清标本。结果TPPA、ELISA、TRUST敏感性分别为96.30%、98.52%、82.96%，特异性分别为96.88%、92.71%、82.29%。结论ELISA可作为输血和手术前检测的一种理想筛查方法，TRUST法适用于判定病情及疗效观察，有助于判断梅毒复发及再感染，TPPA法有极高的敏感性和特异性，可作为梅毒血清抗体检测的确证方法。 标签：梅毒；血清学诊断；梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验；甲苯胺红不加热血清反应素试验；梅毒螺旋体颗粒凝集试验 梅毒（syphilis）是苍白螺旋体（Treponema pallidum）（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性性传播疾病，临床表现呈多样性，可累及多组织和器官，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命，可长期处于潜伏状态，严重影响患者的身心健康，因此，早发现，早诊断和早治疗具有非常重要的临床意义[1]。实验室可以通过检测血液中的非特异性抗体和特异性抗体，判断是否感染梅毒螺旋体，血清学检测是实验室诊断梅毒的重要依据之一，所以选择好的检测方法有利于梅毒早期的诊断和及时治疗。本文采用TP-ELISA、TRUST 和TPPA 3种检测方法进行检测，对结果进行了比较，现报告如下。 1资料与方法 1.1一般资料本组资料选择2012年5月～2014年3月本院门诊及住院确诊的梅毒患者135例，男78例，女57例；梅毒潜伏期或既往感染者48例，现症者87例。另选择96例非梅毒患者，均为本院住院患者，其中自身免疫性疾病患者43例，妊娠孕妇27例，健康对照26例。 1.2试剂与主要仪器ELISA试剂由厦门新创科技公司提供，TRUST试剂由上海荣盛生物技术公司提供，TPPA试剂由日本富士株式会社提供，上述试剂均在有效期内使用。主要仪器为酶标仪、洗板机、离心机、微量振荡器、加样器和恒温水浴箱等。 1.3方法采用TP-ELISA、TRUST和T PPA对258例标本进行检测，3种方法均严格按照试剂盒说明书步骤操作。 1.4统计学方法数据采用SPSS16.0软件包进行统计分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。 2结果
我院梅毒血清学检测结果解释
梅毒血清学检测结果解释 第一种结果：TRUST（十）、TP （一）或TPPA（一） 生物学假阳性。假阳性结果常见于部分自身免疫性疾病患者：类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、干燥综合征及风湿性心脏病等，还有麻风、吸毒（海洛因）成瘾者也会阳性、少数孕妇及老人也会出现阳性。有报道急性或慢性疾病如病毒性肝炎、风疹、传染性单核细胞增多症病患者TRUST滴度可出现假阳性反应。非梅毒病人，不报病。第二结果：TRUST（十）、TP （十）或TPPA（十） A,首诊病人，双阳，根据临床表现分别诊断为一期、二期、三期、隐性。必须报病。 B、复诊病人，TRUST低滴度，考虑血清固定，不用治疗，不用报病。 TRUST高滴度（高于原滴度四倍），考虑复发，再次治疗，不用报病。 C、复诊病人，有一期或二期梅毒临床表现，结合近期有不洁性接触史，要考虑重复感染。再次治疗，必须报病。 第三种结果：TRUST（一）、TP （十）或TPPA（十） A、早期梅毒病人。有硬下疳症状，有不洁性接触史，梅毒螺旋体暗视野检查阳性，梅毒可以诊断，必须报病。
B、复诊病人。梅毒病人TP、TPPA终生阳性，不用治疗，不报病。 C、初诊病人。无任何临床症状和体征，既往无梅毒诊疗史，仅TP、TPPA阳性，TRUST阴性者，该病例暂不报病，需要在1～3 个月后随访复查，如果TRUST转阳则要报病（如果随访病例仍然无任何症状和体征，报告为隐性梅毒确诊病例；如果出现临床表现，按临床表现特征对梅毒病例进行分期报告）。如果仍为阴性不报病。建议预防性、规范性治疗。 D、前带现象。首诊病人，非梅毒螺旋体特异性试验（TRUST）中，有时血清中存在高浓度的抗体时出现的弱阳性或阴性反应结果，而临床上又像二期梅毒，此时，将血清稀释后再进行试验，出现了阳性结果，该现象称之为"前带现象"。原因是此血清中抗体的量多于抗原，使抗原抗体量的比例不合适，抑制了阳性反应的出现。 第四种结果：TRUST（一）、TP （一）或TPPA（一） 不是梅毒病人，不报病。
特异性梅毒快速血清学试验
特异性梅毒快速血清学试验（TP）标准操作规程 1、目的 作为血清学确证实验，对梅毒诊断有非常重要的意义，梅毒是国家法定的传染病之一，必须保证该项检测的质量。 2、适用范围 适用于检验科实验室检测梅毒螺旋体IgG、IgM抗体血清学试验（TP）的质量控制。 3、职责 3.1检测人员必须执行本规程。 3.2监督员负责对本规程的执行情况进行检查监督。 3.3科室主任负责对违规情况进行查处，并进行跟踪纠正。 3.4检测人员做好个人防护非常重要，应遵循普遍性防护原则，戴手套谨慎操作。 4、原理 将梅毒的抗原成分固定在结果显示窗上，人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体在移动到该窗口时与固定抗原特异性结合，产生肉眼可见的红色条带，该试验具有较高的敏感性和特异性。方法简便、快捷。 5、仪器 定量架器 6、试剂与材料 6.1试剂盒组成：梅毒TP快速检测试纸条，100人份/包 6.2一次性吸头 7、操作程序 7.1标本的采集： 7.2确保冻融的待检血样充分混匀。 7.3检测程序：撕开试纸条上的盖膜，加质控品和血清或血浆样本50微升分别于试纸条的加样孔内，15分钟后观察结果，最迟不超过2小时。 8、结果的判定 阴性：质控窗口出现条带，样本窗口不出现条带。 阳性：质控窗口出现条带，样本窗口出现条带。 无效：质控窗口不出现条带。 9、注意事项 9.1试剂保存：应保存于2-30℃，在有效期内使用。 9.2判读结果时要保证足够的光线和充足的时间。 9.3确保实验的有效性。试剂在使用前需要进行预评价，检测过程中设置外部对照，观察质控窗条带是否出现，综合判断实验的有效性、确保检测质量。 10、支持性文件 10.1《中华人民共和国传染病防冶法》规定管理的传染病诊断标准
梅毒实验室诊断标准
一、梅毒分类诊断标准 (一)一期梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现:具有符合相应特征的硬下疳、腹股沟淋巴结肿大。 3、实验室检查:硬下疳组织渗出液或淋巴结节穿刺液:TP 暗视野检查阳性;或RPR(或TRUST)阳性与TPPA(或TPHA 或TP-ELISA)阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未做TPPA(或TPHA或TP-ELISA或TP暗视野检查)或结果为阴性的为疑似病例。 (二)二期梅毒的诊断标准 1、病史:有性接触史或性伴感染史或输血史。 2、临床表现:病期2年内,多为无症状性、暗红色、符合相应特征的多形性皮损,尤其掌趾部位的暗红斑或鳞屑性丘疹,也可出现其它损害(关节、眼、内脏等)。 3、实验室检查:皮损如扁平湿疣、湿丘疹、粘膜斑等:TP 暗视野检查阳性;或RPR(或TRUST)阳性,同时TPPA(或TPHA或TP-ELISA)阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未
做TPPA(或TPHA或TP-ELISA)的为疑似病例。 (三)三期梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史或输血史或一、二期梅毒史。 2、临床表现:病期2年以上。有如下特征中的任一项表现,包括皮肤黏膜损害如结节梅毒疹、树胶肿,上腭、鼻中隔等穿孔性损害;骨、眼损害,其它内脏损害;神经梅毒;心血管梅毒。 3、实验室检查:RPR(或TRUST)阳性,同时TPPA(或TPHA 或TP-ELISA)阳性;或脑脊液检查:WBC≥10×106/L,蛋白>500mg/L,并排除其它引起这些异常的原因。或三期梅毒组织病理变化。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未做TPPA(或TPHA或TP-ELISA)脑脊液检查或组织病理检查的为疑似病例。 (四)隐性梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现:无任何梅毒症状与特征。有明确的2年内梅毒接触史或梅毒发病史为早期,病期超过2年或无法判断病期者均为晚期。 3、实验室检查:RPR(或TRUST)阳性(无梅毒史者阳性,
梅毒血清学实验分两类
梅毒血清学实验分两类： 1、非梅毒螺旋体抗原血清试验：用心磷脂做抗原，检查血清中的抗心磷脂脂抗体，即反应素，属于这一类的试验的VDRL试验，USR试验及RPR（快血清反应素）试验，可作定量测定，可用于观察疗效，判断是否复发及再感染， 2、梅毒螺旋体特异性抗原血清试验：用活的或死的梅毒螺旋体或其成份来测抗螺旋体抗体，属于这一类的试验有荧光螺旋体吸收试验FTA-ABS;梅毒螺旋体血凝试验TPHA：这类试验的特异性强，可用作证实试验，但不能用作观察疗效，判断复发及再感染。 当感染梅毒后，人体内会产生两类抗体，类是直接针对梅毒螺旋体的抗体，另一类则是针对类脂质的抗体。针对类脂质的抗体因不直接针对梅毒螺旋体，因此无特异性，除感染梅毒外，患另外一些疾病以及生理状况的改变，体内也可能产生低滴度的抗类脂质抗体。诊断梅毒时，所做的梅毒血清学检查即检测这两类抗体。前面提到的RPR试验，即为检测类脂质抗体的实验；而TPHA则为直接检测梅毒螺旋体的实验。因RPR是检测类脂质抗体，而不是直接检测抗梅毒螺旋体抗体的实验，因而无特异性，凡能导致产生类脂质抗体的疾病，均能使RPR阳性。除梅毒外，患上呼吸道感染、肺炎、活动性肺结核、风湿性心脏病、亚急性细菌性心内膜炎、传染性肝炎、肝硬化、慢性肾炎、钩端螺旋体病、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及海洛因成瘾等，都可导致RPR阳性。 梅毒以外其他原因造成的RPR阳性有一个特点，滴度一般较低，小于1：8。RPR实验容易出现假阳性，医生常同时做特异性较强的TPHA实验来证实梅毒诊断。值得一提的是，TPHA等直接针对梅毒螺旋体的特异性实验，在一般人中也有1%的假阳性。国内曾报道某医院内科住院患者中，TPHA阳性者竟有一半是假阳性。已知可造成TPHA阳性的疾病有：类风湿性关节炎、红斑狼疮、糖尿病、结肠癌、淋巴肉瘤、丙型肝炎、肝硬化、AIDS、麻风、生殖器疱疹、海洛因成瘾等。 除疾病外，某些生理状况的改变，如妊娠，也可导致RPR及TPHA阳性。特别值得一提的是，老年人梅毒血清学检查，假阳性率较一般人高，有报道可达2%。许多老年人患常见的内科疾病，也可导致梅毒化验阳性。不久前，国内某医院报道，他们收治的5例63~80岁老年内科疾病患者，分别患冠心病、脑血管疾病、糖尿病及白血病，住院期间，均出现过RPR和TPHA阳性。 梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要依据，但不是唯一依据。诊断梅毒，除依据化验结果外，更重要的依据是详细了解患者的生活史和既往病史，以及详细的体查。综合分析后慎重作出判断，才能避免梅毒化验结果假阳性造成的误诊。
梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)
梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） 1. 测定原理： 采用VDRL抗原等特制的甲胺红溶液制成悬液。若样本含有梅毒螺旋体抗体，抗原抗体反应形成肉眼可见的红色凝集块。 2. 标本要求 2.1 血液:血浆（EDTA抗凝）血清。 2.2 测定量：50ul血清或血浆 3. 试剂： 3.1 上海荣盛试剂盒（供梅毒血清学试验用） 3.2 试剂盒组成； TRUST抗原悬液 2.5mL×1瓶 阴性对照血清 1ml×1支 阳性对照血清 1ml×1支 专用滴管及针头 1套 试验专用卡片 120人份 3.3 保存条件：2-10℃ 4. 质控；梅毒抗体质控血清，保存条件-15－-20℃，使用前放置室温（18-25℃），颠倒混匀。 5. 操作程序 5.1 标本测定 5.1.1 分别吸取50ul梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。 5.1.2 取待测血清或血浆50ul（不需失活）置于纸卡的另一圆圈中。 5.1.3 用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂一滴于上述圆圈中。 5.1.4 按每分钟100转摇动8分钟。肉眼观察结果。 5.2 注意事项； 5.2.1 本实验在23-29℃环境下进行。 5.2.2 TRUST试剂使用前应充分摇匀。 5.2.3 如做定量试验，可将待检血清用生理盐水作倍比系列稀释，然后按上述定性方法进行试验， 以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。 5.2.4 本试验系非特异性反应，需结合临床进行综合分析，必要时需作特异性密螺体试验。 6. 结果判断。 6.1 阳性：可见中等或较大的红色凝集物。 6.2弱阳性：可见较小的红色凝集物。 6.3阴性：可见均匀的抗原颗粒而无凝集物。
梅毒检测方法的选择与梅毒血清学试验解读
梅毒检测方法的选择 1．国内梅毒血清学试验的传统程序是：先以非梅毒螺旋体抗原血清试验（如RPR、TRUST、VDRL等）进行初筛，再以梅毒螺旋体抗原血清试验（如TPPA、TPHA、FTA-ABS等）进行确认。美国、法国和比利时也采用类似的程序。该程序的优点是排除了大多数感染过梅毒但经过充分治疗的病人，从而使临床更易决定是否需要进行抗梅治疗。但该程序也存在明显的缺陷。一方面非梅毒螺旋体抗原血清试验易出现前带现象，使早期梅毒及合并感染HIV时高滴度的血清样品呈现假阴性反应；另一方面，对于一期梅毒早期、隐性梅毒，尤其是晚期梅毒，非梅毒螺旋体抗原血清试验缺乏足够的敏感性。因此，仅以RPR或TRUST进行初筛，会造成相当比例的漏检，这不符合初筛方法高敏感性的要求。近年来，美国已将梅毒螺旋体抗原血清试验（TPPA）引入到血站系统的初筛检测中，临床上仅以非梅毒螺旋体抗原血清试验作为筛查的状况也在逐渐改变。 2．将梅毒螺旋体抗原血清试验和非梅毒螺旋体抗原血清试验组合在一起（如RPR+TPHA或TPPA）作为初筛试验可以最大限度地检出各期梅毒病例（除一期梅毒的极早期），同时保证了敏感性和特异性，是最为理想的梅毒初筛方案。这是世界卫生组织（WHO）推荐的方案，英国等一些欧洲国家也已采用多年。其缺点是费时费力，实验室的工作量较大。
3．在德国和荷兰等国，则仅以梅毒螺旋体抗原血清试验作为初筛方法，这比仅以非梅毒螺旋体抗原血清试验进行初筛在敏感性上有了明显提高。虽然效果略差于上述的组合方案，但工作量也相应减小。 4．梅毒的确认必须采用梅毒螺旋体抗原血清试验，最常用的是TPPA或TPHA，也可采用ELISA。FTA-ABS仍被认为是梅毒血清学测定的“金标准”，但使用上有很大限制。多数实验室无法常规开展，因此一般只用于对有争议标本的检测。如果仅使用非梅毒螺旋体抗原血清试验进行初筛，则可以用任意一种梅毒螺旋体抗原血清试验做确认；如果在初筛时已使用了梅毒螺旋体抗原血清试验，则可以考虑选用另一方法学的梅毒螺旋体抗原血清试验进行确认（例如在初筛时使用了TPPA或TPHA，则可用ELISA进行确认，反之亦然）。 5．梅毒螺旋体抗原血清试验检测的是IgM和IgG的混合抗体，不能区分梅毒的现症感染和既往感染，也不能用做疗效监测。一般认为，IgM型抗体和反应素在感染梅毒螺旋体后出现，经正规、足量抗梅治疗后其滴度会逐渐下降直至消失。因此，以ELISA检测抗螺旋体
梅毒螺旋体检测(TRUST)
梅毒螺旋体（TP ）抗体检测（TRUST ） 【检测用途】 本试剂采用VDRL 抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成。供在白色卡片上 进行试验，以检测血清或血浆中反应素用。可作为梅毒病人的诊断和疗效之参考。 【检测原理】 梅毒非特异抗体检测是采用抗原抗体凝集反应。其原理如下：采用VDRL 抗原（牛心磷脂、 卵磷脂及胆固醇）重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成，供在白色卡片上进行实验，以检 测血清或血浆中反应素用。 【试剂组成】 【储存条件及有效期】 试剂盒于2°C ?8°C 保存，有效期为12个月 【使用方法】 1. 定性试验 （1） 分别吸取50微升梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。 （2） 取待检血清或血浆50微升（不需灭活）置于纸卡的另一圆圈中。 （3） 用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST 试剂1滴于上述血清中。 （4） 按每分钟100转摇动8分钟，肉眼观察结果。 2. 定量试验 将待检血清用生理盐水作倍比稀释，然后按上述定性方法进行试验，以呈现明显凝集反应的 最高稀释度作为该血清的凝集效价。 【结果判断】 1 ?阳性反应（+++?++++）：可见中等或较大的红色凝聚物。 2?弱阳性反应（+! ++）:可见较小的红色凝聚物。 3?阴性反应（一）:可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。 【注意事项】 1. 本试验在23、29°C 条件下进行。 南三医检验 免疫作业指导书 梅毒螺旋体（TP ）抗 体（TRUST 文件编号：NSYJ-S0P-MY-066 版本：A/0 生效日期:2010-01-01
2.TRUST试剂使用前充分摇匀。 3?本试验系非特异性反应，需结合临川进行综合分析，必要时需做梅毒螺旋体抗体特异性试验。
梅毒诊断标准
梅毒诊断标准 1 1 范围 本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。 本标准适用于全国各级各类医疗、疾病预防控制机构及其工作人员对梅毒的诊断和报 告。 2 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 梅毒syphilis 梅毒是苍白螺旋体( Treponema pallidum )（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可引起人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2 前带现象prozone phenomenon 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例 不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称为“前带现象”。 3 3 缩略语 下列缩略语适用于本标准。 VDRL venereal disease research laboratory 性病研究实验室（玻片试验） USR unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验） FTA-ABS fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验） TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 ELISA enzyme-linked immuno-sorbent assay 酶联免疫吸附试验 4 4 诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为；或性伴有梅毒感染史。 4.1.2 临床表现： 4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2周～4周。一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭 圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，呈软骨样的硬度；无明显疼痛或触痛。多见于外生殖器部位。 4.1.2.2 腹股沟或患部近卫淋巴结肿大：可为单侧或双侧，无痛，相互孤立而不粘连，质硬，不化脓破溃，其表面皮肤无红、肿、热。 4.1.3 实验室检查： 4.1.3.1 暗视野显微镜检查：皮肤黏膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体(见附录A)。
梅毒TRUST和TPPA解读
TRUST和TPPA，怎么看梅毒检验结果？ 梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种危害人类健康的性传播疾病，临床表现复杂，呈多样性，容易出现漏诊和误诊。目前，梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要依据，对梅毒早期诊断，发现传染源及控制梅毒传播具有重要意义。因此，全面的认识和了解梅毒抗体检测对指导临床诊断和疗效观察具有重要意义。 梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种危害人类健康的性传播疾病，临床表现复杂，呈多样性，容易出现漏诊和误诊。目前，梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要依据，对梅毒早期诊断，发现传染源及控制梅毒传播具有重要意义。因此，全面的认识和了解梅毒抗体检测对指导临床诊断和疗效观察具有重要意义。 梅毒螺旋体侵入人体后可刺激机体产生两类抗体：一类为抗密螺旋体的特异性抗体，而另一类抗体是一种非特异性抗体。为了提高梅毒的诊断率，通常结合甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)及梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)两种方法进行检测。 TRUST即通常所说的梅毒非特异性抗体检测，该抗体是针对梅毒螺旋体损害机体组织后释放出的物质而产生的自身抗体，称为反应素，该抗体的出现要较特异性抗体晚(约迟2周)，主要测定血清中的心磷脂抗体。梅毒感染发病时该抗体可呈阳性，治愈后转阴，可指示病情的严重程度、治疗效果、疾病转归，是梅毒螺旋体感染的筛查试验。TRUS T越高，说明病情可能相对比较严重，或者是处于早期。
TPPA即通常所说的梅毒特异性抗体检测，在梅毒的潜伏期即可产生(约感染后2周)，常用作梅毒螺旋体感染的确证试验，部分患者治愈后仍可终生阳性。滴度的高低对于判断梅毒的病情无较大意义，而是梅毒感染的证据。 这两个检测需要结合来看： 第一种情况：TRUST试验阳性，TPPA试验阳性，为正在感染梅毒。 第二种情况：TRUST试验阴性，TPPA试验阳性。分析如下：①多数为既往感染梅毒，现已治愈或自愈，当前无传染性无需治疗，观察半年后进行复查;②感染梅毒的非常早期，TRUST还测不到，TPPA产生时间较早，该种情况需复查;③机体本身存在免疫缺陷，感染梅毒后抗体产生有问题，故需排除艾滋病毒感染及其他对抗体生成有影响的疾病; ④假阳性结果，可通过荧光密螺旋体抗体吸附实验(FTA-ABS)进行确认。 第三种情况：TRUST试验阳性，TPPA试验阴性。表明从未感染过梅毒，TRUST可能为假阳性，建议一个月后再复查TPPA。 总之，TPPA是判断是否感染过梅毒的重要检测指标。TRUST试验一般用于梅毒的诊断筛选，阳性时应做TPPA试验加以确诊。而对于感染后的病情程度，治疗的效果的观察则以TRUST结果为重要参考。两者联合检测对于做好早发现，早诊断，早治疗，切断传染途径，有效地控制梅毒流行蔓延尤为重要。
梅毒诊断标准(WS273—2007)修订版
WS 273--2007梅毒诊断标准 1 范围 本标准规定了梅毒的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 梅毒Syphilis 梅毒是苍白螺旋体（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可累及人体多系统多脏器的损害，产生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命。 2.2 前带现象Prozone phenomenon 非梅毒螺旋体抗原试验（如RPR试验）中，有时由于血清抗体水平过高，抗原抗体比例不合适，而出现弱阳性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做血清学试验，出现了阳性的结果，称为“前带现象”。 3缩略语 下列缩略语适用于本标准。 VDRL Venereal Disease Research Laboratory 性病研究实验室（玻片试验） USR Unheated serum reagin 血清不需加热的反应素（玻片试验） TRUST Toluidine red unheated serum test 甲苯胺红血清不需加热试验 RPR Rapid plasma reagin 快速血浆反应素（环状卡片试验） FTA-ABS Fluorescent treponemal antibody-absorption 荧光螺旋体抗体吸收（试验） TPHA Treponema pallidum hemagglutination assay 梅毒螺旋体血凝试验 TPPA Treponema pallidum particle agglutination assay 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 4 诊断依据 4.1 一期梅毒 4.1.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史。 4.1.2 临床表现： 4.1.2.1 硬下疳：潜伏期一般为2～4周。一般为单发，但也可多发；直径约1cm～2cm，圆形或椭圆形浅在性溃疡，界限清楚、边缘略隆起，疮面清洁；触诊基底坚实、浸润明显，呈软骨样的硬度；无明显疼痛或触痛。多见于外生殖器部位。 4.1.2.2 腹股沟或患部近卫淋巴结肿大：可为单侧或双侧，无痛，相互孤立而不粘连，质硬，不化脓破溃，其表面皮肤无红、肿、热。 4.1.3 实验室检查： 4.1.3.1 暗视野显微镜检查：皮肤黏膜损害或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体（见附录A）。 4.1.3.2 非梅毒螺旋体抗原血清学试验：阳性。如感染不足2～3周，该试验可为阴性，应于感染4周后复查（见附录A）。 4.1.3.3 梅毒螺旋体抗原血清学试验：阳性（见附录A）。 4.2 二期梅毒 4.2.1 流行病学史：有多性伴，不安全性行为，或性伴感染史，或有输血史（早期梅毒病人为供血者）。 4.2.2 临床表现： 可有一期梅毒史，病期在2年以内。 4.2.2.1 皮损呈多形性，包括斑疹、斑丘疹、丘疹、鳞屑性皮损、毛囊疹及脓疱疹等，常泛发对称。掌跖部易见暗红斑及脱屑性斑丘疹。外阴及肛周皮损多为湿丘疹及扁平湿疣。皮损