血栓弹力图实用标准操作规程

目录

一. 方法原理 (2)

二. 方法确认可（包括线性、不精密度、检出限、灵敏度和特异性） (6)

三. T EG?实验检测取血要求 (11)

四.仪器和试剂 (12)

五.TEG?质控检测操作流程 (13)

六.T EG?普通杯检测操作流程 (18)

七. T EG?血小板图检测操作流程 (21)

八. 参考区间(高岭样品) (25)

九. 临床意义 (26)

十．TEG 日维护 (31)

十一．TEG 月维护 (33)

一方法原理

承载血标本的测试杯以作4°45'的角度和每9 秒一周的速度均速转动，一旦血栓形成，置于血标本检测杯中的金属探针受到标本形成的切应力作用，随之出现左右旋动，金属针在旋动过程中由于切割磁力线

而产生电流，给电脑软件处理后，便形成TEG 曲线。

TEG参数图解凝血弹性描记仪（TEG）参数解析

SP时间（测量从反应开始到弹力图曲线出现分叉的时间）

1、SP=Split time

2、纤维蛋白原未被激活前的时间。

R时间（从血样开始检测至描记图幅度达2mm所需的时间）：

1、R 时间是血样放在 TEG 分析仪内到第一块纤维蛋白凝块形成之间的一

段潜伏期。

2、R 时间因使用抗凝剂或凝血因子缺乏而延长，因血液呈高凝状态而缩

短。

3、R 延长能通过注射 FFP（新鲜的冰冻血浆）而纠正。（FFP 含有丰富

的凝血蛋白）

K时间（从R时间终点至描记图幅度达20mm所需的时间）：

1、评估血凝块强度达到某一水平的速率（20mm 幅度）；

2、通过高纤维蛋白原水平和较小程度地通过血小板功能来缩短 K，而影

响血小板功能及纤维蛋白原的抗凝剂能延长 K；

3、K 时间延长通过注射 cryo（冷沉淀）与 FFP 来纠正；

? Alpha角度（从血凝块形成点至描记图最大曲线弧度作切线与水平线的夹角）：

1、血凝块动力学特性；

2、影响 Alpha 角度的因素与 K 时间相同（见上）；

3、参数 Alpha 角度与 K 时间密切相关，两者都是反映血凝块聚合的速率。但两

者之间又存在区别，在凝血处于极其低凝状态时，血凝块强度的最终强度是幅度达不到 20mm，此时 K 不能被定义。因此，Alpha 角度比 K 时间更全面、更易理解。

4、6 个单位的 cryo 使α增加9.4°。

最大幅度MA（描记图上的最大幅度，即最大切应力系数）：

1、MA 反映了正在形成的血凝块的最大强度或硬度及血凝块形成的稳定性；

2、

MA 主要受纤维蛋白原及血小板两个因素的影响，其中血小

板的作用要

比纤维蛋白原大，血小板质量或数量的异常都会影响到 MA 值；

3、10 个单位血小板可使血小板计数增加40,200±31,400/mm3, MA 增加了

13.2mm。

A（任一时刻描记图曲线两点间的距离）：

1、用来监测任一时刻曲线两点间的扫描宽度，是血凝块强度或弹性函数，A值用

单位 mm 来计量；

2、MA 值在确定前与 A 值相等；

3、MA 值确定后 A 值测量血凝块溶解的信息。

TMA时间（从凝血开始至MA值确定所需用的时间）：

1、TMA=Time To MA，血凝块动力学特性的综合测量；

2、TMA 包含血凝块的形成速率，评估形成稳定血凝块所需用的时间。

G（血凝块强度，即最大切应力强度）：

1、将 A 值进行转换使其能实际测量血凝块强度（G），用单位 d/sc 来计量；

2、G 值在 MA 值确定后的同时也被确定。

3、G = 5000A/（100-A），描述 Clot firmness.

EPL（预测在MA值确定后30分钟内血凝块将要溶解的百分比）

1、EPL=Estimate Percent Lysis;

2、EPL=100(MA-A30)/MA;

CL30（测量在MA值确定后30分钟内血凝块溶解剩余的百分比）：

1、CL30＜85%意示处于高纤溶状态，即纤溶亢进；应使用抗纤溶药来纠正。

2、CL30=100X(A30/MA)

LY30（测量在MA值确定后30分钟内血凝块幅度减少速率）

1、LY30＞7.5% 意示处于高纤溶状态. 即纤溶亢进；应使用抗纤溶药来纠正。

CI(凝血综合指数)

＜-3 低凝 -3＜正常＜+3 ＞+3 高凝

? E（弹性常数）

1、E 是标准化的 G，作为一个弹性常数；

2、EMX 是最大振幅时的 E；EMX=（100 X MA）/（100-MA）；

TPI（血小板动力学指数）

1、TPI=EMX/K

2、TPI = Thrombodynamic Potential Index，血凝块动力潜能指数；

＜6 低 6＜正常＜15 ＞15 高

CLT时间(测量从MA值确定后A值达到2mm的时间)

1、CLT=Clot lysis time（也称为 TTL=Time to lysis）血块溶解时间。

LTE时间（CLT的估计值）

LTE=Lysis time estimate

估计的血块溶解时间（CLT）。在 MA 出现后 30 秒电脑开始计算 LTE，并不断更新直到 MA

出现后 60 分钟。如果血块在 60 分钟之前已溶解，此时 LTE 为实际血块最终溶解时间。

如果 LTE 大于 3 小时，该值显示“>3hrs”。LTE 是根据弹力图的斜率并外推到振幅为 2mm

计算得到。

AA%INHIBITION

判断血小板血栓素受体抑制剂对血小板抑制的百分比,如阿司匹林等.

ADP%INHIBITION

判断血小板 ADP 受体抑制剂对血小板抑制的百分比,如氯吡格雷等

二方法确认可

（包括线性、不精密度、检出限、灵敏度和特异性）准确度

为求证TEG的测量准确度，Haemoscope公司进行了一项评估，将TEG5000型分析仪和TEG3000型分析仪的测量性能表现进行对照。

准备40种冷冻干血样。每种血样被分为两份，同时装载到一校准后的5000型分析仪和3000型TEG仪上。然后在37摄氏度下，按本手册介绍的检测步骤，用相同的TEG软件同时对两份血样进行测试。以下四参数就是经这种标准检测测定的。

R(mm) = 从血凝开始的距离（时间，以2mm/分钟的速度）

K(mm) = 从标准血凝块强度的距离（时间，以2mm/分钟的速度）（20mm

振幅）

MA(mm) = 血凝块强度最大值（振幅，单位mm）

Angle(deg) = 血凝块增长率的斜率

用t 测试对检测得到的数据进行分析，这是一种建立在两样本零差别假设基础上，将接受测试的两个相同样本的测试结果进行对照的统计学检验方法。

测验结果证明5000系列TEG 的样本测量性能与3000系列分析仪一致。分析显示，5000系列和3000系列结果在P< 0.05，TEG 参数R ，K ，MA 和角度没有实际的统计学意义。并且，两相等血样间的绝对差(见下表)没有超出仪器精确程度允许的误差范围，±1个单位。

下表列出，两种型号仪器的两相等血样的测量结果及标准偏差，两相等血样的差别及标准偏差，t 值和2-tail 的概率。

参数测量对照同一型血样分成的两相等血样的测量结果对照（血样类型=40）

参数 R(mm) K(mm)

Angle(deg) MA(mm)

5000型（血样1量结果±标准偏） 11.5625±1.178 2.1500±0.379 73.9625±2.382 30.6250

±

1.036 3000型（血样2测量结果±标准偏差） 11.7500±1.276

2.2750±0.423 7

3.3750±3.06

30.4010±1.261

血样间差别 （血样±标准偏差） 0.1875±0.354 0.1250±0.090 0.5875±0.613 0.2240±1.498

T 值 0.68 1.39

0.96 0.87

精准度为验证使用

本手册推荐的激活剂（Celite,组织因子，凝血酶，DAPTTIN,高岭土--由Haemoscpe公司

提供）进行检测的测试精确度，Haemoscpe公司做了以下评估：

按照TEG用户手册介绍的步骤，从5位未发生凝血问题的健康人每人抽取10立方厘米血样。将

每份血样分为8份，使用4台TEG仪器，测试的时间跨度为两天；对加入Haecomscope高岭土的血样，测试时间跨度5天。对每种活化剂来说，需要被用来处理40个血样。

基于TEG 测量数据，对不同活化剂处理的血样来说，TEG参数的精确度可以用变化系

数(CV)百分比表示如下：

硅颗粒（品牌名称：Celite；Haemoscope公司提供）

R 8.7%

K

7.6%

ANG

2.4%

MA

4.1%

组织因子（品牌名称：Hemoliance；制造商：Ortho）

R K ANG MA 1 3 . 1 %

1

DF 78 78 78 78

2-TAIL P值0.497 0.168 0.341 0.388

2.9% 2.3%

3.3%

凝血酶(品牌名称：Thrombin Sigma，制造商：Sigma)

R K ANG MA

13.2% 13.4% 3.5% 3.8% 高岭土/Sulphatide/磷脂混合物(品牌名称：DAPTTIN；制造商：Immuno)

R 12.7%K

17%

ANG

2.8%

MA

5.0%

高岭土H/Sulphatide/磷脂混合物(品牌名称：Kaolin；Haemoscope公司提供) R K ANG MA

13.4% 4.4% 2.8% 6.3%

比较而言，TEG测量的参数CV值相对较小，而其他多数凝血测量仪器，CV值要高一些。正常值范围

Haemoscope在软件中提供了正常值范围参考，在下述表格里可以看到。

样本类型R K ANG MA 样本量

Celite 10.0—

14.0 3.0—6.0 53.0—

67.0

59.0—68.0 132

Sodium Clitrate +Celite 7.0—

13.0

3.0—5.0 61.0—

73.0

55.0—65.0 98

原血31.0—

46.0 11.0—

21.0

22.0—

38.0

47.0—58.0 132

枸橼酸化原血28.0—

46.0

7.0—

14.0

31.0—

49.0

49.0—59.0 132

组织因子（TF）4.0—

6.0

2.0—4.0 62.0—

73.0

61.0—69.0 178

Sodium Clitrate +TF 1.5—

3.5

2.0—7.0 59.0—

75.0

53.0—65.0 41

功能纤维蛋白原水平测试

有20位病人同意加入了这一项研究计划。这20位病人年龄在22到62之间(平均年龄= 34.9±11.9 )，其中，10位男性，10位女性。他们的实验室纤维蛋白原水平在34.5和862毫克/分升之间。这些研究对象不包括已知患有血凝因子不足或血凝缺陷，肝病，或需血液稀释或心肺支路的病患。在静脉插入导管，将静脉血收集到两个含3.

8%柠檬酸纳的4.5cc硅化试管(BectonDickinson，Rutherford, NJ)

中。在37摄氏度温度下将样本在TEG分析仪上运行45分钟。从第一个试管中取出0.

33立方厘米血样，混合20ul的.2M CaCl2对其进行重新钙化，10ul的重组人体组织因

子(加快获得MA参数)和4ul的ReoPro(2 mg/ml)(Eli Lilly, Indianapolis,IN)成一个血样，

进行MA测量。重复进行这些分析，最终的MA值(以ReoPro表现的MAR)是多次分析

结果的均值。试管中血样剩余部分用于进行纤维蛋白原水平（使用克劳斯照片光学

方法，纽约，长岛，医学实验室自动控制，MLA Electra 1600c分析仪）的实验室检

测。

对第二个试管中的血样，连续进行两次通常的盐稀释，为的是获得更广范围的纤维

蛋白原水平。按前面描述的方法对稀释过的样本进行相同的样本准备和TEG测试，

随匹配样本送实验室分析纤维蛋白原。

最小平方线性回归被用来确定TEG MAR值和测量出的纤维蛋白原水平间的关系。画出一条回归线对应计算95%的斜角置信区间。当P<0.05时记录统计学差别。

目前研究证明，通过对经ReoPro处理的血样MA值的测量，能提供对功能性纤维蛋白原的定量评估。

精确度

为证明TEG仪MA值的精确度，Haemoscope公司对经ReoPRo处理的血样MaR进行

了以下评估：

按照TEG步骤，从5位未发生凝血问题的健康人每人抽取10立方厘米血样。按

前面介绍的程序，将每份血样分为8份，使用4台TEG仪器进行试验。这样接收评估

试验的ReoPro处理血样共有40个。

基于TEG 测量数据，平均值和标准差, 95%C.I.及以变化系数(CV)百分比表示的

TEG参数MaR精确度表示如下：

均值±标准差别95%C.I. CV

22.8±1.1 21-25 4.5%

三TEG?实验检测取血要求

备注：枸橼酸（蓝盖）抗凝管要求枸橼酸浓度 3.2%，肝素化（绿盖）抗凝管要求肝素浓度>14.5IU, 每周二、四上午抽血（不需要空腹）

TEG ?血栓弹力图实验血样准备描述1 枸橼酸化全血血样程序：备两个注射器，戴上手套，在安静环境下，用一根19G 蝶形针，一针见血吸取样血，最初1ml 弃用。另外吸取足量血放在蓝瓶盖的聚丙烯试管内(含有浓度为3.2%的枸橼酸钠），待采血量达到试管要求的刻度时，停止吸取。将试管封口后上下轻轻翻转3次（切勿用力摇晃），使血与枸橼酸钠混合。称为枸橼酸化的全血2 肝素化化全血血样程序：备两个注射器，戴上手套，在安静环境下，用一根19G 蝶形针，一针见血吸取样血，最初1ml 弃用。另外吸取足量血放在绿瓶盖的聚丙烯试管内(含有肝素浓度>14.5IU ），待采血量达到试管要求的刻度时，停止吸取。将试管封口后上下轻轻翻转3次（切勿用力摇晃），使血与肝素混合。称为肝素化的全血

四 仪器和试剂

TEG 检测需要TEG 血栓弹力图仪-5000和配套的试剂（Kaolin ，AA 和ADP ）,加样枪（需要10ml,20ml,50ml,100ml,340ml,360ml 和1000ml 的规格）

TEG 血栓弹力图仪结构

序号 检测项目 开单类型 取血种类 取血要求 采血管

采血量

1 普通检测

血栓弹力图实验——高岭土 静脉或动脉全血

安静环境，一针见血

枸橼酸（蓝盖）抗凝管

按刻度要求抽满

2

血小板图检测 血栓弹力图实验——高岭土 静脉或动脉全血

安静环境，一针见血

枸橼酸（蓝盖）抗凝管肝素化（绿盖）抗凝管各一份

按刻度要求抽满

血栓弹力图实验——氯吡格雷 血栓弹力图实验——阿司匹林

1．水平仪：调平血栓弹力图仪的标准。2．电源按钮：打开或关闭电源。3．加温线：传递温控模块的信号。4．杯槽：装载样品并进行加热。5．水平调节支撑：旋转以调平血栓弹力图仪。6．马达按钮：按压后马达运行，并有黄灯显示。7．控制杆：可移动到LOAD、TEST、EJECT 三个位置。8．杯架：用来上下移动样品。9．平台：用来弹出样品。

五TEG?质控检测操作流程

一．调节水平仪

参照分析仪顶部的水平仪中水泡位置，调节分析仪底部的三个支撑脚（前面两个，后面一个），直到水泡居于中间。

电机指示灯

杯架

平台

水平调节支撑

杯井 lever 杆在test 位置 温度读数

水平仪（顶部）

杯架

lever 杆在Load 位置

温度读数

二．基线测试eTest

1）在主界面上点击“TEG”按钮，这是唯一能开始运行样品的界面。如果这是一天中的第一个样品，一

个“Maintenance check”栏会随即出现，提示你以下要做的事情：·调平·运行基线测试eTest·运行LevelⅠ和LevelⅡ质控品

2)点击“Check now”，出现“Maintenance”对话框。“Daily maintenance”子菜单中会出现测出的基线

值，可接受的范围为1800～2300。

3)将Lever杆移到Test位置，选择通道，点击“eTest”。可以选择所有的通道同时进行检测。

4)如果出现信息“Channel not at equilibrium”或“eTest value off center”，则将Lever杆移到Load位置，待

分析仪稳定后再进行测试。

5)一旦出现“eTest value OK”后，将Lever杆移到Load位置。如果不能出现该字样，请及时与销售商联系。

6)在TEG 1 分析仪电源打开的同时，进行其它几台TEG分析仪的基线测试。

7)点击“Done”，然后点击“OK”。

三．运行质控

1对质控品【包括质控1（蓝瓶）和蒸馏水（绿瓶）】进行复温，保证十分钟以上温时间；

2打开电脑及TEG主机的“POWER”键，电脑桌面上双击TEG图标进入TEG专用分析软件；

3下拉菜单中输入默认用户名Site Administrator，输入密码teg（小写），点击OK，弹出选择操作者对

话框

4点击Temporary Operator（选中变成蓝色），点击Logon，进入TEG主界面

5点击右上角TEG图标，进入操作界面。弹出对话框

6查看TEG主机顶部水平仪，将水平仪内的气泡至于中央。若不在中央，可以调节主机底部三个支脚；

7点击Check now，进入eTest界面

8将测试杆移到test位置，每个通道分别运行eTest测试，出现“eTest value is OK”表明测试通过后，

点击Done，弹出对话框，

把测试杆移回Load位置，点击确定。

注意：如果不通过可以使用调节笔，调节通道后对应的BASE旋钮，增减基线值，使测试通过。

9上杯操作：将杯架沿着杯杆往下滑到平台上。测试杆必须位于Load位置。将普通杯置于杯架上，将杯架滑到杯杆上部，将一只手放在分析仪顶部，另一只手按住杯架底部的按钮，按压三次，确保金属针已经插入杯盖。将杯架往下滑到杯杆一半时，两手扶住杯架，用大拇指将杯子压回杯槽中，上杯完成；（质控操作需要在每个通道进行上杯。）

10向已经上好的杯子中加入20ul的氯化钙；

11在主界面的“QC”菜单下选择批号Lot number。

点击“Add”按钮。

12在中键入质控1的批号、有效期后点击Normal values按钮，在中按照质控品包装盒盖背后的数值填写，然后点DONE。

13选择一通道，选择样本类型L1，在病人名字处选择质控批号。其他通道重复相同操作。

14将蒸馏水与质控品瓶盖打开，将蒸馏水全部倒入质控品瓶中，小心不要将水溅出来。

15重新盖上瓶盖，摇晃使其充分溶解后静置5分钟。注意每个制成的试剂，在室温下最多保存一小时。16将重构后的质控品，上下颠倒5次，打开瓶盖吸取340μl沿杯内壁向杯中缓缓注入，上升杯架至顶端；

17将Lever杆移到Test位置。选中加样的通道，按下“Start”或F10。

18其他通道按相同步骤进行；

19点击Done回到TEG主界面，查看描记图形；

20双击描记图形小图可以最大化图形，直到MA值参数值两面没有星号表示描记已经结束，可以停止。

21点击Stop或F11停止描记，弹出对话框，选择“是”

22将测试杆从Test位置移回Load位置后，向下压到Eject位置，下滑杯架至台面，再用力压到底，弹出使用后的杯子。取出扔至黄色垃圾袋中。

23通过观察参数值与正常值区间，判断仪器是否正常运转。

24按上述流程开始下一个通道质控

25质控完成后正常操作样本。

六TEG?普通杯检测操作流程

1复根据患者要进行的测试，对高岭土试剂（紫色）和肝素酶杯（蓝色）进行复温，保证十分钟以上温时间；

2打开电脑及TEG主机的“POWER”键，电脑桌面上双击TEG图标进入TEG专用分析软件；

3下拉菜单中输入默认用户名Site Administrator，输入密码teg（小写），点击OK，弹出选择操作者对话框；

4点击Temporary Operator（选中变成蓝色），点击Logon，进入TEG主界面

5点击右上角TEG图标，进入操作界面。弹出对话框

6查看TEG主机顶部水平仪，将水平仪内的气泡至于中央。若不在中央，可以调节主机底部三个支脚；

7点击Check now，进入eTest界面

8将测试杆移到test位置，每个通道分别运行eTest测试，出现“eTest value is OK”表明测试通过后，点击Done，弹出对话框，

把测试杆移回Load位置，点击确定。注意：如果不通过可以使用调节笔，调节通道后对应的BASE旋钮，增减基线值，使测试通过。

9上杯操作：将杯架沿着杯杆往下滑到平台上。测试杆必须位于Load位置。将普通杯和肝素酶杯分别置于两通道杯架上，将杯架滑到杯杆上部，将一只手放在分析仪顶部，另一只手按住杯架底部的按钮，按压三次，确保金属针已经插入杯盖。将杯架往下滑到杯杆一半时，两手扶住杯架，用大拇指将杯子压回杯槽中，上杯完成；

10向已经上好的杯子中加入20ul的氯化钙；

11选择病人名字或建立新病历：在工具栏上点击“Case”，选择Add case，点击“Done”输入入病人ID号以及姓名，点击“Done”

12选择一通道和二通道，选定样品类型（CK），在下拉菜单中选定病人名字，填写简单说明（也可不填）；13将高岭土试剂瓶盖摘下，向瓶中注入1ml血。盖上瓶盖后上下颠倒5次。注意不要剧烈摇晃；

14将高岭土激活的血样静置三到五分钟，保证高岭土充分激活血样。

15打开高岭土瓶盖，吸取340μl血，沿杯内壁向普通杯中缓缓注入，上升杯架至顶端；

16将Lever杆移到Test位置。选中加样的通道，按下“Start”或F10。

点击Done回到TEG主界面，查看描记图形；

17双击描记图形小图可以最大化图形，直到MA值参数值两面没有星号表示描记已经结束，可以停止。

18点击Stop或F11停止描记，弹出对话框，选择“是”

19将测试杆从Test位置移回Load位置后，向下压到Eject位置，下滑杯架至台面，再用力压到底，弹出使用后的杯子。取出扔至黄色垃圾袋中。

20按上述流程开始下一个样本

21不需要使用后按仪器Power关机。

血栓弹力图普通杯测试注意事项1 装杯时注意请勿触碰杯子和针的接触面2 请勿在Test位置上进行装杯。3 eTest结束后，一定要将Lever杆移回Load位置；

七TEG?血小板图检测操作流程1对血小板聚集功能检测试剂盒进行复温，保证十分钟以上温时间；