实验11-抗生素的抑菌试验
实验十一抗生素的抑菌试验
一目的要求
1、掌握纸片法测定抗生素抗菌作用的基本方法
2、了解抗生素的抗菌谱
二实验原理
抗生素是某些植物与微生物生长到对数期前后所产生的次生代谢产物，其在低浓度下可其它微生物生长具抑制作用或杀死作用的物质。抗生素对敏感微生物的作用机理分为抑制细胞壁的形成、破坏细胞膜的功能、干扰蛋白质合成及阻碍核酸的合成。
由于不同微生物对不同抗生素的敏感性不一样，抗生素的作用对象就有一定的范围，这种作用范围成为抗生素的抗菌谱，作用对象广的抗生素称为广谱抗生素，作用对象少的抗生素称为窄谱抗生素。而且当某种抗生素长时间用于敏感微生物生长后，即使同一种菌的不同菌株对不同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生抗性菌株，则抗生素将失去对抗性菌株生长的抵制，只以采用新的抗生素才可能控制抗性菌株的生长与繁殖，因而不断开发新的抗生素是保健人类身体健康的重要工作。新抗生素产生菌的分离筛选应通过拮抗菌发酵，然后以发酵产物进行抗菌活性实验，根据实验结果而获得产新抗生素的菌株。微生物代谢产物的抗菌活性常以管碟法与纸法进行检测，根据透明抑菌圈的有无与大小作为依据。
三实验器材
1、菌种枯草杆菌、大肠杆菌。
2、培养基MH（Mueller-Hintion）琼脂。
3、试剂青霉素、链霉素。
四方法步骤
1、无菌滤纸片以孔径6mm打孔器将滤纸打为圆形纸片，放入培养皿内，121℃蒸汽湿热灭菌，100℃烘干2h。
2、抗生素溶液制备将取适量青霉素、链霉素，以无菌水溶解。
3、指示菌悬浮液的制备枯草杆菌、大肠杆菌斜面菌种分别以无菌水洗下菌苔细胞，到入无菌三角瓶内，制备适宜浓度的细胞悬浮液。
4、混菌平板制备取批示菌细胞悬浮液1mL加入无菌培养皿内，再加入温度为43~45℃的PDA培养基或牛肉膏蛋白胨琼脂培养基20mL，立即振荡使细胞与培养基混合均匀，静置冷凝。
5、平板加抗生素溶液将滤纸片在抗生素溶液中充分浸泡2min以上，然后将纸片放于混菌平板上，每皿呈三角形放3点，每点贴放纸片2张。
6、培养与观察将平板放于33℃左右的温度培养，每24h测量一次透明抑菌圈直径，共测量3次。
五结果
1、实验结果
测量每个平板3个抑菌圈直径，计算每次测量各平板3个抑菌圈直径的平均值，结果填于表内。
表1 青霉素对供试菌的抑菌效果（抑菌圈直径：mm）
培养时间
菌种名
244896120144168
表2 链霉素对供试菌的抑菌效果（抑菌圈直径：mm）
培养时间
菌种名
244896120144168
2、结果分析
1 菌液制备
1）对数生长法：从琼脂平板上选取至少3~5个形态特征一致的菌落，用接种环转移至含4~5ml的肉汤培养管（如胰酶消化大豆肉汤）中，35℃培养2~6h。用无菌盐水或肉汤调整菌液浊度相当于麦氏标准。
2）直接菌落法：从培养18-24h的非选择性培养基（如血琼脂）平板上，挑取单个菌落，直接用肉汤或无菌盐水制成麦氏标准浊度的悬液。
2 接种
细菌悬液制备后15min内接种至MH琼脂平板。用无菌棉拭醮取菌悬液，在管内壁液面上方旋转紧压，将多余菌液挤去，最后沿平板内缘涂抹一周。
3 贴药敏纸片
涂布后的平板在室温下干燥3~5min，用纸片分配器或无菌镊子将纸片贴于琼脂表面并轻压，使纸片与琼脂表面完成接触。各纸片中心相距应大于24mm，纸片贴上后就不能再移动位置。
4 培养
将平板倒置放入35℃孵箱（厌氧菌敏平板应放置于5%~10%CO2环境中），16~18h读取结果，葡萄球菌和肠球菌必须培养24h以检测对苯唑西林和万古霉素的耐药性。
5 结果判断
抑菌圈的直径（包含纸片的直径），以毫米数报告（取整数）。根据CLSI判定标准测量抑菌圈直径大小可以判断细菌对该抗生素是敏感、中介还是耐药，如下图。
敏感（S）：表示常规剂量的测定药物在体内所达到的浓度能抑制或杀灭待测菌。
中介（I）：不是敏感性的度量，而是一个“缓冲区”，用以防止因微小的技术因素失控导致的结果偏差，因而其临床意义是不确定的，故不应作临床报告。
耐药（R）：表示常规剂量的测定药物在体内达到有效浓度时不能抑制待测菌生长。
五、结果与思考题
1、记录各菌对不同药物的敏感程度
2、思考题
（1）圆纸片药敏试验操作时应注意什么事项
（2）试述药敏试验的意义
实验十二细菌对抗生素的药物敏感试验
各种微生物对化学药物、抗生素等敏感性各异，即使同一种菌的不同菌株对不同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生耐药性变异。因此，测定细菌对药物的敏感程度，对于临床治疗中选择用药，及时控制感染具有重要意义。
常用方法有纸片弥散法和试管稀释法。
实验目的
一、纸片法
材料
1．菌种：枯草杆菌、大肠杆菌。
2．培养基：普通琼脂平皿培养基。
3．抗菌药物：青霉素、链霉素
、氯霉素、庆大霉素纸片。
4．其他：无菌棉棒、镊子、酒精缸等。
方法
1．用灭菌棉棒分别沾取金黄色葡萄球菌1号和2号及痢疾杆菌肉汤培养物，分别涂布在琼脂表面，每种菌涂一个平皿(沾菌棉棒用后，放入消毒缸中，勿乱丢)。
2．用小镊子沾酒精烧灼消毒，待冷后镊取一种药物纸片，贴在涂有细菌的平皿上，然后将镊子再沾酒精烧灼后，镊取另一种药物纸片，贴布于琼脂平皿另一处，如此将几种药物纸片贴完，各纸片距离要大致相等。
3．将已做好的药敏琼脂平皿，置37℃培养18～24小时，观察各药物纸片的抑菌效果。即观察药物纸片周围有无抑菌圈，如有，在平皿底面用尺量其直径大小，测定药物敏感程度。各种抗生素抑菌圈直径与敏感标准见表12-1。
食品安全检测实验室必备设备
食品安全检测实验室必备设备 一、无菌室和超净工作台 是实验室的核心部分，主要为样品提供保护，保证实验结果的准确和人员的安全。 （一）无菌室 无菌室通过空气的净化和空间的消毒为微生物实验提供一个相对无菌的工作环境。无菌室的主要组成设备的空气自净器，传递窗，紫外线灯等。严格的无菌室可能还装备风彬室等。（二）超净工作台 超净工作台作为代替无菌室的一种设备，使用简单方便，为实验的开展提供一个相对无菌的操作台。超净工作台湾队根据风向分为水平式和垂直式。 二、培养箱 主要用于实验室微生物的培养，为微生物的生长提供一个适宜的环境。 （一）普通培养箱：一般控制的温度范围为：室温＋５～６５度，又分为电热恒温培养箱和隔水式恒温培养箱。 （二）生化培养箱：一般控制的温度范围为：５～５０度。 （三）恒温恒湿箱：一般控制的温度范围为：５～５０度，控制的湿度范围为：５０～９０％。可作为霉菌培养箱。 （四）厌氧培养箱：适用于厌氧微生物的培养。 三、电热干燥箱：用于吸管，平皿类玻璃器皿的干热、灭菌和烘烤。 四、高压蒸汽灭菌器（又叫高压灭菌锅）：物品的灭菌。
五、天平：一般要求具备精度达到万分之一的分析天平。 六、显微镜：观察细菌形态和动力、微生物和微小物品结构的必备仪器。 七、分光光度计：在ＱＳ中用于生产方便面，茶饮料，肉制品，乳制品，棉白糖的企业。 八、酸度计：在ＱＳ中用于生产果蔬罐头，白沙糖，饮用水类的企业。 九、电导率仪和浊度仪:在ＱＳ中用于生产饮用水的企业。 十、折光仪:在ＱＳ中用于生产果蔬罐头，饮料类的企业。 十一、恒温水温浴锅:在ＱＳ中用于部分培养温度需要水浴（如大肠杆菌检验）生产方便面，速冻面米食品企业。 十二、定氮装置:在ＱＳ中用于生产乳制品，含蛋白质饮料的企业。 杂质度过滤机:在ＱＳ中用于生产乳品企业。 均质器：用于均质样品，有旋转刀片式和拍击式可以选择。 冰箱 常规玻璃器皿 一、吸管：用于吸取少量液体，常用的吸管为刻度1mL及刻度的10mL吸管。 二、培养皿：为硬质玻璃双碟，常用于分离培养，盖与底大小应合适，常用规格为90mm。 三、三角烧瓶与广口瓶：多用于盛培养基及配制溶液，常用的规格有250mL、500mL、 1000mL。 四、烧杯：供盛液或煮沸用，常用的规格为100mL、250mL、500mL、1000mL 五、量筒：用于液体测量，常用规格为100mL、250mL、1000mL 六、试管：用于细菌培养，有多种规格。 七、载玻片盖玻片：细菌涂片观察用。 八、试剂瓶：装试剂用，常用棕色避光 九、其它，如试管架、毛刷、酒精灯、接种针、接种环等
县级食品药品检验检测中心仪器清单
食品药品检验检测能力建设分析报告根据山东省食品药品监督管理局《关于加强食品安全检验检测能力建设的指导意见》（鲁食药监发[2014]44 号）的精神，对其中县级综合性检验检测机构中食品检验检测能力建设分析报告如下：一、我县食品检验能力现状食品检验是食品药品监管工作的重要组成部分。目前，我县级食品药品监管机构的质量检验检测能力基本处于空白，所有样本都到省、市送检，根本达不到监管要求。食品药品质量关系人民群众饮食用药安全，没有必需的食品药品监管基础设施，无法保证基本的食品药品安全监管。二、我县食品药品监管对象现状。食品生产企业家，小作坊家；食品流通企业家；餐饮企业家；农贸市场个。综上所述，食品药品监管对象达家以上。药品企业产值万元，食品工业产值万元。为了更好的对全县食品药品进行有效及时的监督，需要成立一支检验能力较为齐备、检验技术较为专业的食品药品检验检测队伍。三、建设县级食品药品检验检测中心的法律基础2 《食品安全法》第六十条和《药品管理法》第六十五条均规定：县级以上食品药品监督管理部门应当对食品和药品质量进行定期或不定期的抽样检验。《食品安全法实施条例》第二条规定：县级以上地方人民政府应当履行食品安全法规定的职责；加强食品安全监管能力建设，为食品安全监管工作提供保障。四、县级食品检验检测机构检验能力及现场快速检验检测能力按照文件要求，在食品检验检测方面，应具备常见食品微生物、重金属、理化指标等的实验室检验能力及现场快速检验检测能力，能够完成检验检测任务和基础技术保障工作。根据文件要求和我县食品生产、流通、餐饮等环节的特点，我们制定了本县检验检测机构食品检验检测能力建设检验项目计划（共131 个参数），申请进行资质认定，大力开展快速检测项目的开展，快速检测项目涉及微生物、有毒有害物质的现场检测。序号项目名称序号项目名称序号项目名称序号项目名称1 PH 值37 感光黄素73 溶解度109 亚油酸2 氨基态氧38 KMnO4 消耗量74 溶解指数110 盐白度3 包装外观39 谷氨酸钠75 熔点111 盐粒度4 苯甲酸钠40 固形物76 乳分散度112 盐筛余度5 比容41 过氧化值77 乳化剂113 盐松散剂6 比旋光度42 过氧化值78 乳溶解度114 游离脂肪7 比重43 浊度79 乳酸根115 杂醇油8 不溶于水杂质44 还原糖80 乳糖结晶颗粒116 杂质度9 炽灼残渣45 黄曲霉素B1 81 色度117 皂化价3 10 粗蛋白46 灰分82 蔗糖118 皂化值11 粗灰分47 挥发性盐基氮83 色素119 脂肪12 粗细度48 混浊度84 砂分120 脂肪酸13 粗纤维49 甲醇85 膳食纤维121 大肠菌群14 粗脂肪50 酒精度86 砷（砷斑法）122 螨虫15 胆固醇51 可溶性固形物87 砷（银盐法）123 霉菌、酵母16 蛋白质52 磷88 食品标签124 商业无菌17 氮53 硫酸灰分89 食用香精125 细菌总数18 导电灰分54 硫酸盐90 水分126 致病菌19 碘55 馏程91 酸度127 镉20 碘价56 氯化物92 酸价128 汞21 碘值57 总二氧化碳93 总酸129 铅22 电导率58 总能94 总糖130 铜23 淀粉59 锰95 酸值131 重金属24 二氧化硫60 面筋质96 碎糖量25 余氯61 凝点97 糖精钠26 二氧化碳62 牛磺酸98 甜味剂27 芳香油63 农药残留99 铁28 防腐剂64 泡特性100 铁盐29 复水时间65 烹调性101 透光性30 钙、镁66 膨胀度102 维生素Vc 31 干浸出物67 膨胀率103 硒32 干燥失重68 品尝104 钾、钠33 感官69 羟基值105 硝酸盐34 感官（酒）70 氰化物106 锌35 全乳固体71 旋光度107 总硬度36 溶化油72 亚硝酸盐108 总脂五、食品检验检测需装备的仪器设备按照《关于加强食品安全检验检测能力建设的指导意见》、《保健食品检验机构装备基本标准》和《关于印发餐饮服务食品安全检验机构技术装备基本标准和现场快速检测设备配备基本标准的通知》国食药监食[2011]130 号等文件的要求，结合现场检验和实验室检验能力建设情况，所需检验仪器设备共计98 台套，具体目录如下：4 序号设备分类仪器设备名称用途数量总估价（万元）1 前处理设备冷藏箱试剂、样品保存4 3 2 冰箱试剂、样品保存2 1 3 电子分析天平称样、试剂称量3 7.5 4 旋转蒸发仪样品浓缩处理1 2 5 水浴恒温振荡器（恒温水浴锅）样品前处理2 2 6 电热鼓风干燥箱水分检测1 1 7 马弗炉灰分检测和样品处理2 4 8 电热板样品消解1 1 9 真空泵样品处理1 0.5 10 前处理设备超声波清洗机实验器皿、器具清洗2 1 11 纯水/超纯水系统实验用水1 5 12 高速冷冻离心机样品处理设备1 8 13 微波消解仪理化检测1 15 14 真空干燥箱水分检测1 2 15 碎花制冰机样品储存条件设备1 7 16 氮吹仪样品浓缩处理1 1 17 单道可调移液器加样10 2 18 微生物检测设备生物安全柜实验安全1 2 19 高压灭菌器微生物样品处理2 1.5 20 超净工作台微生物2 1 21 全自动菌
食品安全检测
食品安全检测 实验项目: 食品安全快速检测 一、实验目的和要求 1(了解食品安全快速检测的方法。 2(掌握检测的原理及流程。 3(根据国家食品检测标准，对食品样品中的浓度指标含量进行检测，看是否超标，给出结论。 二、实验原理 被检食品与检测夜在一定条件下发生特异反应，反应后生成不同颜色深度的产物，这些产物对不同波长可见光会产生有选择性吸收，通过颜色深浅即吸光高低反应样品中该指标成分的浓度。因此检测的吸光度值经仪器内置的标准曲线软件自动计算可得出样品中该指标成分的准确浓度及是否超标的结果。 三、仪器和试剂 1.仪器:食品安全快速检测仪、微型电子秤、移液枪、量筒、比色皿、样品杯、剪刀、药勺。 2.试剂:测试液 四、实验步骤 1(开机/关机 开机:接通电源，仪器有蜂鸣声并显示开机画面，仪器自检(约需5秒)结束后按任意键，仪器进入待检测状态。关机:请确认取出所有比色皿，将电源按到“?”的位置。调零与检测 调零:在检测状态下调零。在相应比色孔中放入相应对照液，将光标移至对应项目，按“调零”键，屏幕显示调零完成，表示完成本项目的调零。 2(检测流程
亚硝酸盐 取10 g左右样品剪碎混合后，称取2 g于样品杯中，加入18 mL去离子水，放置10-15分钟，其间振荡数次，得到样品处理液; 在干净比色皿中加入2 mL去离子水，以及样品处理液0.5 mL，然后加入3滴绿盖检测液，混匀，放入相应通道调零; 调零后取出，加3滴蓝盖检测液B，摇匀;静置3分钟后，震荡混匀，放入仪器相应的通道中检测。 各食品中亚硝酸盐(以亚硝酸钠计)限量标准及依据 样品名称样品含量mg/kg 限量标准mg/kg 限量标准依据 GB 2714-2003 酱腌菜 腊肠 GB 2760-2011 香肠 二氧化硫 取20 g左右样品剪碎混合后，称取2 g于样品杯中，加入18 mL去离子水，放置10-15分钟，提取过程尽量不要振荡，得到样品处理液; 在比色皿中加入2 mL去离子水，以及样品处理液0.5 mL，然后加入3滴绿盖检测液，混匀后放入相应通道调零; 调零后取出，再加入3滴蓝盖检测液，摇匀; 静置5分钟后，震荡混匀，放入仪器相应的通道中检测。 各食品中二氧化硫限量标准及依据 样品名称样品含量mg/kg 限量标准mg/kg 限量标准依据 啤酒 蘑菇 GB2760-2011《食品添加剂使
食品安全快速检测知识测试题
食品安全快速检测知识测试题 一、单项选择题 1、下列类农药不是农药速测卡的常检农药种类? A、有机磷 B、有机氯 C、氨基甲酸酯 2、试剂保管时应注意以下因素？ A、高温热源 B、潮湿 C、阳光照射 D、密封 E、以上都是 3、具有很好的漂白、抗氧化和防腐等作用，还能掩盖发霉的蜜栈半成品、银耳和虾仁等霉斑。 A、二氧化硫 B、二氧化碳 C、硫化氢 4、酱腌菜由于腌制、储存或加工不当，会含有高浓度的。 A、亚硝酸盐 B、硝酸盐 C、亚硫酸盐 5、甲醛检测时，以下食品应作为最重点的检测与监管对象？ A、水发品、血制品 B、鲜香菇 C、干香菇 D、豆制品； 6、硫磺燃烧时可产生气体，可使食品表面颜色显得白亮，鲜艳，有漂白和保鲜食品作用。 A、二氧化碳 B、二氧化硫 C、硫化氢 7、以下样品浸泡液不需再处理就可直接用于检测？ A、有明显可见色泽 B、混浊或有悬浮物； C、澄清透明 D、以上都不是。 8、下列物质中属于食品添加剂的是。 A、甲醛 B、二氧化硫 C、硼砂 D、吊白块 9、食品加工添加吊白块是利用其分解产生的具有增加食品弹性，亚硫酸盐有漂白食品的作用。 A、甲醛 B、二氧化硫 C、亚硫酸盐 10、以下食品用工业双氧水处理后，对人体危害最大的是。 A、干果类； B、干制水产； C、病死禽畜肉； D、牛奶 11、鱼丸、肉丸比较可能还有的含有的有毒物质是。 A、甲醛 B、二氧化硫 C、硼砂 D、亚硝酸盐 12、国家标准肉肠的亚硝酸盐含量为≤ mg/kg。 A、30 B、70 C、10 D、50 13、食品检测采样时，根据样品作用可以分为试验样品、复验样品、。 A、原始样品 B、平均样品 C、保留样品 14、仪器快速检测西式火腿样品的亚硝酸盐含量为98mg/kg时，适宜的处理方法为。
武威市食品药品检验所2012年实验室质量管理基础知识考试题
武威市食品药品检验所2012年实验室质量管理基础知识考试题 姓名成绩 一、名词解释: 1.周期检定：按时间间隔和规定程序，对计量器具定期进行的一种后续检定。 2.期间核查：指使用简单适用并具相当可信度的方法，对可能造成不合格的测量设备或参考标准、基准、传递标准或工作标准以及标准物质（参考物质）的某些参数，在两次相邻的校准时间间隔内进行检查，以维持设备校准状态的可信度，即确认上次校准时的特性不变。 3.预防措施：为了防止潜在的不合格、缺陷或其他不希望情况发生，消除其原因所采取的措施。 4.纠正措施：为了防止已出现的不合格、缺陷或其他不希望的情况的再次发生，消除其原因所采取的措施。 5.量值溯源：是通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或标准的值能够与规定的参考标准，通常是国家的或国际标准联系起来的一种特性。 二、填空题： 1.强制检定的仪器检定周期为 1 年，非强制性检测的仪器设备自检周期为 1 年。 2.有-50ml用于酸性溶液的容量瓶自检周期为3年，若用于碱式溶液，则该容量瓶自检周期为 1 年。 3.在滴定管检定中，有-B级50ml碱式滴定管，其检定点分别是12.5ml、25ml 、37.5ml 、50ml 。 4.在仪器设备标识中，其中绿色标签表示该仪器合格，黄色标签表示该仪器准 用，红色标签表示该仪器停用。 5.试验时的温度，未注明系指在室温10-30摄氏度以下进行；若温度高低对试验结果有显著影响者，除另有规定外，应以25±20摄氏度为准。 6.留样检品保存 1 年、进口检品保存 2 年、中药材保存半年、医院制剂保存 3 月。 7.计量认证证书的有效期为 5 年。 8.滴定液标定工作应由两人同时操作，在同一条件下，每人平行试验三份，每人三份测试结果的相对偏差不得大于0.1% ，两人的相对偏差不得大于0.15% 。 9.工作用菌种应有专人保管，置冰箱中4-8 摄氏度保存。 10.修约前的数字为4.16584，修约后要求保留三位有效数字为4.16 。 三、判断题 1.菌种接种后，原有的菌种应灭菌后废弃。( √） 2.试验室有毒化学试剂用完后应无害化处理后排入下水道。（√） 3.标准规定中水分不得过10%，测得结果为6.4%。（×） 4.直接配制滴定液时，应采用基准试剂。（√） 5.当标定与使用时的室温相差超过10摄氏度，应加温度校正值或重标定。（√） 6.按操作规程检验结果可疑，经别人复核未发现异常，发出报告后经委托单位等提出后才发现的， 按检验差错事故分类应定为事故。（×） 7.“精密称定”系指称取重量应准确至所取重量的万分之一。（×） 8.当事人对药检机构的检验结果有异议时，可以自收到药品检验报告书7个工作日内提出复
药物的体外抑菌试验
实验五药物的体外抗菌试验 药物的抗菌试验是为了检查药物的抗菌能力。该项试验方法已广泛应用于新药研究和指导临床用药。如抗菌药物的筛选，提取过程的生物追踪、抗菌谱的测定、耐药谱的测定、药敏试验、药物血浓度测定等各个方面。 药物的体外抗菌试验在实验室进行，优点是方法简便、需时短、用药量少，不需要活的动物、实验条件容易控制。因此，药物的体外抗菌试验已广泛应用各种测定了。 药物的体外抑菌试验是常用抗菌试验方法，其中最常用的方法用系列稀释法和琼脂扩散法。 （一）稀释法（结果示教） 稀释法有液体培养基连续稀释法和固体稀释法（斜面法）两种。这两种方法都可以用来测定药物的最小抑菌浓度（MIC）：是指该药物能抑制细菌生长的最低浓度，通常用μg∕ml或U/ml表示。 （二）琼脂扩散法 它是将抗菌药物加至接种试验菌的平板表面，抗菌药物在琼脂胶内向四周自由扩散，其浓度随扩散距离增大而降低，在药物一定的扩散距离内，由于药物的抗菌效应，试验菌不能生长，此无菌生长的范围称为抑菌圈，抑菌圈的大小与药物的抑菌效应成正比。琼脂扩散法常有纸片法、管碟法、打洞法和挖沟法。 滤纸片法（K-B纸片法）－学生操作 滤纸片法是最常用的方法，适用于新药的初筛试验（初步药物是否有抗菌作用）及临床的药敏试验（细菌药物第三性试验、以便选择用药）。滤纸片分湿、干两种，可以在试验时用无菌纸片沾取药物溶液放在含菌的平板表面，也以预先做成一定浓度的干燥纸片。一般来说预先做成的干燥纸片实用一些而且准确一些。 至于干燥纸片的制备方法：选用吸水力强而且质地均匀的滤纸，用打洞机制成6mm直径的圆纸片，120℃干燥灭菌2小时。然后把配制好的各种适宜浓度的抗生素溶液，每100张纸片加入0.5ml药液，使它均匀浸润，放在无菌平皿中，
食品安全快速检测实验综述
食品安全快速检测实验综述 -标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII
食品安全快速检测部分项目实验------综述应091-4 1428 任晓洁第九组 内容摘要：本文介绍了食品安全快速检测的意义，食品安全快速检测技术的原理和研究进展，探讨食品安全快速检测技术的发展趋势。简单介绍几种食品中常见物质的快速检测方法， 关键词：食品安全；快速检测；应用现状 前言：民以食为天，食以安为先。食品安全关系到民生、民心、社会的稳定与经济的发展。随着近几年食品安全问题事件的出现，食品安全成为人们关心的重要事件，然而检测的方便以及速度问题是制约食品检测的一大问题，然而快速检测是食品安全监管人员的有利工具：在日常卫生监督过程中，除感官检测外，采用现场快速检测方法，及时发现可疑问题，迅速采取相应措施，这对提高监督工作效率和力度，保障食品安全有着重要的意义。 正文： 一．什么是快速检测： 快速检测即在短时间内，如几分钟、十几分钟，采用不同方式方法检测出被检物质是否处于正常状态，检测得到的结果是否符合标准规定值，被检物质本身是不是有毒有害物质，由此而发生的操作行为称之为快速检测。 二．快速检测的意义： 1、快速检测是食品安全监管人员的有利工具：在日常卫生监督过程中，除感官检测外，采用现场快速检测方法，及时发现可疑问题，迅速采取相应措施，这对提高监督工作效率和力度，保障食品安全有着重要的意义。 2、快速检测是实验室常规检测的有益补充: 为了保障食品安全，需要检测的产品、半成品以及生产环节有很多，一一采集样品送实验室检测是不现实的。采用快速检测，可使食品安全预警前移，可以扩大食品安全控制范围。对有问题的样品必要时送实验室进一步检测，既提高了监督监测效率，又能提出有针对性的检测项目，达到现场检测与实验室检测的有益互补。 3、快速检测是大型活动卫生保障与应急事件处理的有效措施：在大型活动卫生保障中，为了防止发生群发性食物中毒；在应急事件处理中，快速筛查食物中毒可疑因子，快速检测方法有其特殊的作用可以发挥。 4、快速检测是中国国情的一种需要：中国近30年来经济快速发展，社会处于转型时
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食品药品检测领域实验室信息管理系统 （LIMS） 行业标杆竞品分析 ⅹⅹⅹⅹ有限公司 ⅹⅹⅹⅹ年ⅹⅹⅹⅹ月
目录 1行业背景分析 (3) 2行业内标杆企业 (4) 2.1北京三维天地科技股份有限公司 (4) 2.1.1企业概述 (4) 2.1.2企业资质 (5) 2.1.3成功案例 (6) 2.1.4核心功能 (6) 2.1.5系统优势、亮点 (7) 2.2杭州立方检测科技有限公司（杭州立方科技） (7) 2.2.1企业概述 (7) 2.2.2企业资质 (7) 2.2.3成功案例 (8) 2.2.4核心功能 (9) 2.2.5系统优势、亮点 (9) 2.3深圳市中卫信息技术有限公司 (9) 2.3.1企业概述 (9) 2.3.2企业资质 (10) 2.3.3成功案例 (10) 2.3.4核心功能 (10) 2.3.5系统优势、亮点 (11) 2.4郑州榕盛信息技术有限公司 (11) 2.4.1企业概述 (11) 2.4.2企业资质 (12) 2.4.3成功案例 (13) 2.4.4核心功能 (13) 2.4.5系统优势、亮点 (13)
1行业背景分析 据赛迪顾问《中国农产品与食品安全检测行业战略研究》显示，中国农产品与食品安全检测行业基本已形成环渤海、长三角和珠三角区域聚集发展的格局，区域分布呈现“以重点城市为发展轴心，辐射三大区域"的特征，即高度集中于北京、上海、深圳和广州四大节点，同时对周边有较大的辐射效应。 环渤海区域以北京为核心，汇聚了国内重要的国家级检测机构、检测技术研究中心、内资仪器生产企业。山东、天津均为国内重要的农产品与食品生产加工基地，企业对检测服务、仪器设备的需求比较集中，形成了完善的产业链布局。 长三角地区是外资检测仪器生产商、第三方检测企业中国区总部聚集地，同时也是内资检测仪器生产商拓展融资渠道、谋求资本上市发展的发源地。长三角经济区外资第三方检测。机构实力雄厚，处于全国领先水平，英国天祥检测认证集团、美国胜邦检测公司、德国莱茵检测公司将总部设立于上海，所以长三角经济区在外贸出口检测领域拥有绝对实力。 珠三角地区主要以民营仪器生产商和民营第三方检测机构为主。由于珠三角地区中小企业相对活跃，广州、深圳等地的检测仪器生产商更侧重于中低端检测仪器以及快速检测试剂盒，并且珠三角的外向型经济特征带动了民营第三方检测服务的繁荣，以深圳华测为代表的民营第三方检测机构获得了前所未有的行业发展机遇。 食品药品检验守护着人民群众的食药安全科学、准确便捷、高效的检验举措一直是食药检验人员追求的目标。然而我国传统的检验方式是以手工数据录入为基础，所录入的数据不够真实，可靠，因此难以达到新时期对于食品药品检测的具体要求。而信息化管理系统引入到食品药品检验中实现了食品药品检验的全过程管理、全过程溯源在很大幅度上提高了检验能力和检验效率。 近几年来，国家发展与改革委员会、卫生部、国家食品药品监督管理总局对当前我国食品药品安全工作高度重视。在2018年全国人大和政协全国会议上，许多代表和委员提出了加强和改进药品安全监测与监管工作的意见和建议，广大人民群众也通过多种方式表达了确保食品药品安全的强烈愿望。 食品药品安全事关广大人民群众的身体健康和生命安全，关系到国民经济健
抗菌肽体外抑菌实验方法
微量肉汤稀释法（borth microdilution method） 实验方法： 1.用无菌蒸馏水在聚丙烯离心管中将抗菌肽和抗生素溶解制成1280 g/L的储 备液，然后用等量无菌的0.02%乙酸（含0.4% BSA）稀释，在用0.01%乙酸（含0.2% BSA）溶液对等量稀释后的溶液在进行一系列的双倍稀释，得到质量浓度为640，320，160……1.25 mg/L的共10个梯度的系列稀释液， 4 ?C下保存备用。 2.将待测细菌在灭菌MH肉汤琼脂平板上过夜培养，挑取菌落接种于灭菌试管 中的MH肉汤，37 ?C，180 r/min过夜培养。将培养后的菌液稀释至2*10^5-7*10^5 CFU/mL，向无菌的96孔平板中的1-11孔各加入100 μL的菌液，12孔不加入菌液而加入100 μLMH肉汤，然后从1～10孔逐一加入相应的待测抗菌肽，11孔作为扫描对照组不加肽。37 ?C，90 r/min培养18-24 h，这样待测抗菌肽的终质量浓度分别为64，32，16，……0.125 mg/L。（不知道待测抗菌肽添加量是多少，最终抗菌肽的终浓度怎么缩小了10倍） 3.最小抑菌浓度MIC（mininmal inhibitory concentration）就是能阻止50%以 上细菌生长的最小肽浓度。用酶标仪在490 nm下对平板进行扫描，肽的MIC 的确定按照比对照孔（11孔）的浑浊程度低50%以上的最小质量浓度计算。 4.最小杀菌浓度MBC（minimal bactericidal concentration）就是能抑制任何残 余菌落生长的肽的最低浓度。从没有细菌生长的平板孔中的内容物中取10 μL涂布到MH琼脂平板上，37 ?C培养18 h，以此来确定肽的MBC。 参考文献： 【1】汪以真，抗菌肽与抗生素的体外抗菌效果比较[J].中国兽医学报，2004，24（3）：270-273. 抗菌肽的体外抑菌实验（平板法） 1.稀释：将一定效价的抗菌肽做6个浓度的稀释，将抗生素按正常使用剂量同 样做6个浓度的稀释 2.指示菌：指示菌用液体LB培养基培养24 h后稀释至10^6 CFU/mL
食品药品检测中心建设有关要求
食品药品检测中心建设有关要求 1．实验室选址应避让饮用水源保护区；避开化学、生物、噪声、振动、强电磁场等污染源及易燃易爆场所。 2.应采用框架结构，便于实验室合理布局。 3.建筑耐火等级不应低于二级，消防设施的设置应符合国家有关建筑防火设计规范的规定。 4.实验室建筑的抗震设防类别不应低于乙类建筑。 5.实验楼应设置完善的防雷系统。二级以上生物安全防护实验室、计算机网络机房、大型仪器分析室等有特殊要求的场所宜设置独立的防雷系统。 6.实验楼不得采用可造成不同实验室之间空气交换的中央空调系统。具有洁净度、温湿度、压力梯度要求的不同功能类别的实验室，应采用独立新风、回风与排风通风系统。实验室通风柜的排风系统宜独立设置，即一柜一管一风机系统，不宜共用风道，不得借用消防风道。实验用房在外墙上应预留潜藏的侧送侧排风。 7．设置采暖及空气调节的，在满足采光要求的前提下，应减少外窗面积，外窗应具有良好的密闭性及隔热性，且宜设不少于窗面积 1/3的可开启窗扇。底层、半地下室及地下室的外窗应采取防虫及防啮齿动物的措施。
8、实验室开间模数应大于3.5米。对设有地下停车场的实验楼，应同时兼顾柱网与停车的关系。进深宜为6.0米～9.0米。实验室建筑层高宜为3.7米～4.0米；净高宜为2.7米～2.8米；有洁净度、压力梯度、恒温恒湿等特殊要求的实验室净高宜为2. 5米～2.7米。在确定建设高度时，应尽量扩大技术夹层的高度。 9.实验室走廊净宽宜为2.0米～2.5米，净高不应低于 2.2 0m。有缓冲间的实验室（包括无菌室、洁净实验室、生物安全实验室等结构复杂的实验用房），应留有隐蔽的设备门，供实验设备，尤其是大型设备的进出。 10．由 1/2个标准单元组成的实验室的门洞宽度不应小于1m，高度不应小于 2.10m。由一个及以上标准单元组成的实验室的门洞宽度不应小于 1.20m，高度不应小于 2.10m。 11．实验室的墙面应采用表面吸附性小、清洗方便的建筑材料。实验室的地面应采用耐腐蚀、耐磨损、防滑、易冲洗的建筑材料。洁净实验室、生物安全防护实验室以及其它有特殊要求的实验室地面材料还应满足整体列缝隙的要求。 12．实验室外窗不宜采用有色玻璃，以免在实验时造成色觉判断误差。对有避光要求的实验室应另行采取物理屏障措施。 13．微生物实验室洗手水嘴宜使用非触摸式；实验室水槽、下水管道应耐酸、碱及有机溶剂，并采取防堵塞、防渗漏措施。存在生物危险因素的微生物实验室等不得设置地漏。
(完整)食品安全快速检测
(完整)食品安全快速检测 编辑整理： 尊敬的读者朋友们： 这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（(完整)食品安全快速检测）的内容能够给您的工作和学习带来便利。同时也真诚的希望收到您的建议和反馈，这将是我们进步的源泉，前进的动力。 本文可编辑可修改，如果觉得对您有帮助请收藏以便随时查阅，最后祝您生活愉快业绩进步，以下为(完整)食品安全快速检测的全部内容。
食品安全快速检测 实 验 报 告 指导老师:贺萍 班级：应091-4
组别：第十四组 组员:
实验目的 1、了解食品安全快速检测的定义以及快速检测的意义所在。 2、初步了解我国食品安全快速检测现状以及在当代食品速测的必要性。 3、明确各种食品添加剂的国家安全标准。 4、学会几种快速检测试剂的配制和使用. 5、掌握NaOH的标定方法. 6、掌握运用半微量的方法测定食醋的总酸含量。 实验原理 1、亚硝酸盐的快速检测 亚硝酸盐主要是指亚硝酸钠，亚硝酸钾，系白色至淡黄色粉末或颗粒状固体，味微咸，易溶于水。亚硝酸盐在工业、建筑业中广为应用,肉类制品中也允许作为发色剂而限量使用.但其毒性较强,能使人体血红蛋白氧化而失去运输氧的能力，造成慢性、急性中毒,还能与食品中、人体内的仲胺类化合物反应生成具有强致癌性的亚硝胺类化合物。因此，严格控制食品中的亚硝酸盐含量，是治理餐桌污染，保障消费者的健康权益的重要工作。 本速测试剂根据国家标准GB/T5009.33—2003研制而成,食品中的亚硝酸盐可迅速与本试剂反应生成紫红色产物，颜色越深,表示样品中亚硝酸盐的含量越高,与标准品比较，可以得出样品中亚硝酸盐是否超标的半定量结果。本方法适用于食物、水及中毒残留物中亚硝酸盐的快速检测。 2、碘盐的快速检测 碘遇淀粉呈蓝色，颜色深浅与碘含量成正比，与标准色卡比对确定碘含量。本方法适用于海盐经碘酸钾强化后食盐中碘的快速检测。 3、食醋总酸的快速检测 食醋中主要成分是乙酸，含有少量其他有机酸，用氢氧化钠标准溶液滴定，以指示剂显示终点,得出样品中总酸的含量.本方法适用于食醋中总酸的现场快速检测。 4、乳品蛋白的快速检测 蛋白质具有两个以上的肽键，具有双缩脲反应现象，在碱性溶液中,能与Cu+2形成紫红色络合物，颜色深浅与蛋白质浓度成正比，故可以用来测定蛋白质的含量。本方法适用于乳粉及液态奶中蛋白质含量的现场快速检测. 5、加碘精盐中碘含量的常规检测
食品药品检验检测中心实验室工程
１/36 孝感市食品药品检验检测 中心实验室 脚手架 专 项 施 工 方 案 编制单位：湖北远大建设集团有限公司 编制人: 审核人: 审批人： 编制时间:年月日
目录 第一章工程概况3? 一、工程概况--------------------------------------------------- 3 二、施工要求?３ 三、技术保证条件---------------------------------------------- 3第二章编制依据?４ 第三章施工计划--------------------------------------------------- 5 一、材料与设备计划?５ 第四章施工工艺技术---------------------------------------------- 7 一、技术参数7? 二、工艺流程--------------------------------------------------- 7 三、施工方法7? 四、检查验收------------------------------------------------- １4第五章施工安全保证措施------------------------------------------ 16 一、组织保障16? 二、技术措施------------------------------------------------- 18 三、监测监控-------------------------------------------------- 23 四、应急预案-------------------------------------------------- 25第六章劳动力计划----------------------------------------------- 26 一、专职安全生产管理人员-------------------------------------- 26 二、特种作业人员27? 第七章计算书及相关图纸2?７ 一、计算书--------------------------------------------------- ２7
食品安全小实验
实验主题：检测食品中是否含甲醛 实验背景：（可以在静置20分钟时介绍） 农产品市场上，经常有各种产品，特别是水产品，加入一些甲醛，以达到防腐、增白的效果。 甲醛对人体有不小的危害。它可对皮肤黏膜产生刺激性作用，可与蛋白质结合。高浓度吸入可能会出现水肿、眼部刺激、头痛、哮喘等；直接接触皮肤可能引起过敏性皮炎、色斑等；长期吸入可能导致失眠、体重减轻、记忆衰退、神经紊乱等。（我们熟悉的新房装修不久有一种特别的气味，就是含甲醛，因此新家一般要装修三个月以后再搬进去住）甲醛制作简单、价格低廉，在食品加工到销售的各个环节都可能被人为加入，很难全过程实时监控。现在一些大型市场将甲醛作为水产品的常规检测指标，各级监测机构也将甲醛列为重点监测指标，但很难保证对所有产品一一检测。所以，我们必须学会辨别甲醛的损害症状，同时也要多在正规厂家购买产品，才能最大程度地免受甲醛食品的危害。 实验仪器：500ml烧杯、蒸馏水、滴管、品红及亚硫酸溶液、市场出售的竹笋（经臭氧消毒的饮用水、鱿鱼、牛百叶、鸭肠、粉丝、肉干、鱼干等均可） 注：若有不含甲醛的新鲜产品对比更好 实验步骤： （1）将品红滴入亚硫酸溶液中，品红褪色。（此步骤也可实验前准备好） （2）取适量竹笋，放入500ml烧杯中，并加入200ml左右蒸馏水，稍微搅拌后，静置20分钟左右。 （3）向烧杯中滴加品红亚硫酸溶液。 （4）观察溶液颜色。若变为蓝紫色，则证明该产品中含甲醛；否则，不含甲醛。 实验原理：品红亚硫酸溶液遇甲醛生成蓝紫色物质。 拓展： 1.农副产品还有哪些违法添加物？ （三聚氰胺、硫磺等） 2.我们平时购买产品应该注意哪些事项？ （正规商场、正规厂家、生产日期等）
食品安全检测技术
第一阶段测试卷 考试科目:《食品安全检测技术》第一章至第五章（总分100分） 时间：90分钟 __________学习中心（教学点）批次：层次： 专业：学号：身份证号： 姓名：得分： 一、名词解释（每题2分，共20分） 1.随机抽样： 2.回收率： 3.准确度： 4.采样： 5.灰分： 6.酸不溶灰分： 7.基准物质： 8.酶联免疫吸附试验法： 9.结合水： 10.AOAC: 二、判断题（每题1分，共计10分） 1.水分含量一样的两个样品，它们的水分活度也是一样的。（） 2.饮食的风险不仅来自生产过程中人为施用的农药、兽药、添加剂等，还大量来自食品本身含有的某些成分。（） 3.放射免疫法可定量分析测出ng到pg含量的物质。（） 4.对于检验合格的样品检验结束后可以不予保留而直接销毁。（） 5.在某一仓库里面抽取小麦样品时，只需要在仓库的四个角落和中心最高点分别取样然后混合就可以了。（） 6.某些食品的安全性因人而异。（） 7.湿法灰化是一种比干法灰化更好的方法（） 8.食品中的水分分为自由水、亲和水、结合水三部分。（） 9.水与食品中成分结合程度越高，则水分活度值越高。（） 10.果糖含量较高的样品，所以在测定它的水分的时候应该用100℃常压烘箱干燥法。（）
三、填空题（每空1分，共计20分） 1.理化分析中，常用的样品预处理方法有：（）、（）、（）、（）化学分离法和浓缩法。 2.物质在任何条件下对有机体产生任何种类(慢性或急性)损害或伤害的一种能力，它包括（）、（）、（）。 3.样品预处理的原则有（）、（）、（）。 4.食品的水分活度Aw越（），食品越有利于保存。 5.一般根据食品的（）、（）选择检测水分的方法。 6.常压干燥法测定浓稠态样品的水分含量，需加入（），以增大样品蒸发面积；样品从烘箱取出后要放到（）中冷却。 7.测定灰分时，灰化的条件选择包括：（）、（）、（）、（）和（）等。 四：简答题（每题10分，共计40分） 1.论述食品安全检测的重要性？ 2.酶联免疫吸附(ELISA)的原理？ 3.用常压干燥法测定样品的水分时，对样品的性质有什么要求？ 4.改良的湿法-干法氧化法的具体操作是什么？ 五：计算题（每题10分，共计10分） 现有一样品要测其水分，已知恒重的玻璃称量瓶为31.2467g，玻璃称量瓶和样品的总重为36.9034g，烘至恒重后放在干燥器里冷却以后在称，质量为36.0141g，计算该样品的水分含量为多少？ 参考答案 一、名词解释 1.按照随机原则，从大批物料中抽取部分样品。 2.判断准确度的方法。加标量测定值与实际加标量的比值百分数。 3.是指测定值与真实值的接近程度。 4.从大量样品中按照一定规律抽取检样的过程。 5.食品经高温灼烧时，发生一系列物理和化学变化，最后有机成分挥发逸散，而则残留下来无机成分称为灰分。 6.不溶于酸溶液中的灰分，主要是环境污染混入产品中的泥沙及样品组织中的微量氧化硅含量。 7.直接用来配制标准溶液或者标定标准溶液浓度的物质。
食品检测实验室仪器配置明细
食品检测实验室仪器配置明细 企业实验室 企业实验室可根据生产的产品品种、检测项目的多少和生产规模的大小设置，实验室仪器设备的配置也可繁、可简。对于这样的实验室，仪器设备的配置能满足企业产品品质检测就行了。 食品检验可分为两大项，一是检测产品的品质项目；二是检测产品的卫生项目，这一类项目的检测相对难度大、投资高。 （1）品质项目 包括：水分、含盐量、含糖量、蛋白含量、脂肪含量、纤维含量、维生素含量、酸度等。对于这些项目的检测，如果经费有限，都可以采用化学法分析，只需配置最简单的烘箱、水浴、电炉、搅拌器、粉碎机、pH计等设备即可。 如果经费充足或检验批次较多，对应的检测项目都有对应的专用仪器可供选购。此外，也有一些通用的仪器可供选购，如：紫外/可见分光光度计、近红外分析仪、自动滴定仪等。检测维生素A、E等有时还需配置荧光光度计。检测营养元素，如钙、锌、铁等，可购置原子吸收仪-火焰检测器。 （2）卫生项目 包括：微生物、添加剂、有害元素、农药残留、兽药残留、毒素等。对于一般食品企业，微生物检测实验室应该建。 a）微生物 建微生物实验室要按照生物实验室规范标准要求进行布局。必要的设备有洁净台、培养箱、高压灭菌锅、电炉等，其它设备则根据具体检测项目配置。经费少可以买国产的，经费多可以考虑买进口的，两者的价钱相差很多。 b）添加剂和有害元素 有一部分项目可以用化学法，如亚硝酸盐、二氧化硫、重金属含量、总砷等。但要想满足现在国标的食品卫生要求，应该购置气相色谱-氢火焰检测器、液相色谱-紫外/可见光检测器，这样一般的防腐剂（苯甲酸、山梨酸等）、甜味剂（甜蜜素、糖精钠等）、色素（柠檬黄、胭脂红等）都可以检测了。购置原子吸收仪-石墨炉检测器，可以分别检测铅、铬、镉、铜、镍等有害元素，还需要一台原子荧光仪，用来检测砷和汞等。 c）残留农药 检测残留农药气相色谱是不能少的。检测有机氯农药，需配电子俘获ECD检测器；检测有机磷农药，需配火焰光度FPD检测器或氮磷NPD检测器。现在农残检测的项目越来越多，为提高通用性，建议配置毛细管柱分流/不分流进样口，安装毛细管色谱柱。与传统填充柱色谱柱相比，毛细管柱分析项目多，分离度好，可以减少频繁的更换色谱柱，提高分析效率。出口食品加工企业生产的产品在出口时需检测的农残项目越来越多，为了把好生产原料和产品质量关，可以配置气相色谱-质谱仪。一般只需配置电子轰击EI源，如果有必要可再配一个负化学NCI源。是选择四极质谱还是离子阱质谱，个人认为都可以，两种仪器各有优缺点。还是要看具体工作。 d）残留兽药
食品安全检测综合实验 实验1-6
实验一：食品中胆固醇的测定 一、实验目的 1．通过本实验的学习，使学生了解测定食品中胆固醇的意义。 2．通过本实验的学习，使学生掌握紫外－可见分光光度检测方法。 二、实验内容 1．样品制备。 2．分光光度法检测。 三、实验要求 采用集中授课形式组织教学。 四、实验准备 1．样品制备及操作。 2．紫外－可见分光光度仪的使用方法。 五、实验原理、方法和手段 1．实验原理 当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合发应，产生有颜色的物质。据此可先对食品样品进行提取和皂化，而后用硫酸铁铵试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。 2．实验方法和手段 食品样品的制备，分光光度计的使用。 六、实验条件 1．主要仪器 A．电子天平（1/10000） B．电热恒温水浴 C．电动振荡器 D．具塞比色管：10 mL、25 mL E．吸量管：2.0 mL 2．试剂 A. 石油醚 B. 无水乙醇 C. 浓硫酸 D. 冰乙酸：优级纯 E. 磷酸
F. 胆固醇标准物质 G . 胆固醇标准液。胆固醇标准储备液（1 mg/mL ）：准确称取胆固醇100 mg ，溶于冰乙酸中，并定容至100 mL 。此溶液至少在2个月内保持稳定。胆固醇标准使用液（100 μg/mL ）：吸取胆固醇标准储备液10 mL ，用冰乙酸定容至100 mL 。 此液用时临时配制。 H. 铁矾显色剂。铁矾储备液：溶解4.463 g 硫酸铁铵[FeNH 4(SO 4)2?H 2O]于100 mL 85％磷酸中，贮于干燥器内，此液在室温下稳定。铁矾显色液：吸取储备液10 mL ，用浓硫酸定容至100 mL ，贮于干燥器内，以防吸水。 I. 氢氧化钾溶液（500 g/L ）：称取50 g 氢氧化钾，用蒸馏水溶解，并稀释至100 mL 。 J. 氯化钠溶液（50 g/L ）：称取5 g 氯化钠，用蒸馏水溶解，并稀释至100 mL 。 K. 钢瓶氮气：纯度99.99％ 3. 测定食品 食品。 七、实验步骤 1． 胆固醇标准曲线 吸取胆固醇标准使用液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0 mL 分别置于10 mL 比色管内，在各管内加入冰乙酸使总体积皆达4 mL 。沿管壁加入2 mL 铁矾显色液，混匀，在15 min ～90 min 内，在560 nm ～575 nm 波长下比色。用胆固醇标准浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标做标准曲线。 2． 样品处理 食品样品用索氏提取法提取脂肪，并计算出每100 g 食品中的脂肪含量。将提取的油脂3滴～4滴（约含胆固醇300 μg ～500 μg ），置于25 mL 比色管内，准确记录其质量。加入4 mL 无水乙醇和0.5 mL500 g/L 氢氧化钾溶液，在65℃恒温水浴中皂化1 h 。皂化时每隔20 min ～30 min 振摇一次使皂化完全。皂化完毕，取出比色管，冷却。加入3 mL 50 g/L 氯化钠溶液，10 mL 石油醚，盖紧玻塞，在电动振荡器上振摇2 min ，静置分层（一般约需1 h 以上）。 3． 样品中胆固醇的测定 取上层石油醚液2 mL ，置于10 mL 比色管内，在65℃水浴中用氮气吹干，加入4 mL 冰乙酸，2 mL 铁矾显色液，混匀，放置15 min 后在在560 nm ～575 nm 波长下比色，测得吸光度，在标准曲线上查出相应的胆固醇含量。 4． 测定结果的计算 按下式计算： 1000 121????=m V c V A X 式中： X -----试样中胆固醇含量，单位为毫克每百克（mg/100 g ）； A -----测得的吸光度值在胆固醇标准曲线上的胆固醇含量，单位为微克
药物的体外抗菌试验-第十九章
第十九章 药物的体外抗菌试验 教学要求 .（一）掌握常用的体外抑菌试验（连续稀释法、琼脂扩散法）。 .（二）熟悉杀菌试验（最低杀菌浓度、最低致死浓度的含义及测定的方法，活菌计数法，石碳酸系数测定法）；联合抗菌试验（纸条试验、梯度平板纸条试验、棋盘格法），协同、拮抗、无关、累加的概念。 .（三）了解体外抗菌试验的影响因素。 第一节 常用的体外抑菌试验 一、药物的体外抗菌试验 .又称药敏试验，主要用于筛选抗菌药物或测定细菌对药物的敏感性。 .最低抑菌浓度（MIC）：指药物完全抑制某种微生物生长的最低浓度。 .优点：方法简便、需时短、用药量少，不需要动物。 .缺点：不能根据体外试验结果肯定或否定一个药物的抗菌作用。试验菌 .细菌、霉菌和酵母菌常用 .标准菌株：来自专门机构，我国是卫生部生物制品检定所菌种保藏中心提供。 .临床分离株：经形态、生化及血清学等方面鉴定。不得有杂菌污染，不宜用传代多次的菌种，最好是重新活化的。控制培养时间。 .接种菌量的多少的计算培养基 .根据试验菌的营养要求进行选择 .培养基质量控制供试药物 .药物的浓度和总量要精确配制 .供试药物用适宜溶剂溶解并稀释至所需浓度，难溶药物加助溶剂。 .中草药或某些生药原粉的样品，应先提取，再浓缩至所需浓度对照试验 .试验菌对照：在无药情况下，应能在培养基内正常生长 .已知药物对照：已知抗菌药对标准的敏感菌株应出现预期的抗菌效应，对已知的抗药菌应不出现抗菌效应。 .溶剂及稀释剂对照：抗菌药物配制时所用的溶剂及稀释剂应无抗菌作用 （一）连续稀释法 .方法：液体法和固体法。 .用于测定药物的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。 .抑菌：药物可抑制微生物生长繁殖，但不杀死它，在药物除去后，微生物又可恢复生长 .杀菌：药物能杀死微生物，当药物去除后，微生物不再继续生长。 1、液体培养基稀释法 .方法：两倍稀释法 .步骤： 液体培养基稀释药物成系列递减的浓度每 管加入一定量试验菌24-48小时后肉眼观察试管浑浊情况，记录能抑制细菌生长的最低浓度（MIC）将未见细菌生长的各试管内的培养液（各吸取0.1ml）移种到新鲜的琼脂培养基上重新长出细菌的只具有抑菌作用，无菌生长（菌落数﹤5个）具有杀菌作用，记录最低杀菌浓度（MBC）。 液体稀释法图解 抗菌药物的浓度增加最低抑菌浓度移种平板