氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求艾威德

氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求艾威德
氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求艾威德

氨测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)

适用范围:用于体外定量测定人血清中氨的含量。

1.1 包装规格

a) 试剂1:1×25mL 试剂2:1×5mL

b) 试剂1:2×45mL 试剂2:1×18mL

c) 试剂1:4×50mL 试剂2:2×20mL

d) 试剂1:2×100mL 试剂2:2×20mL

1.2 主要组成成分

1.2.1试剂1主要组分

三羟甲基氨基甲烷缓冲液100 mmol/L α-酮戊二酸(α-KG)10 mmol/L 还原型辅酶II(NADPH)0.1 mmol/ L 乙二胺四乙酸二钠(EDTANa

) 5.3 mmol/ L

2

表面活性剂及稳定剂适量

1.2.2试剂2主要组分

三羟甲基氨基甲烷缓冲液100 mmol/L 谷氨酸脱氢酶(GLDH)100 KU/L

表面活性剂及稳定剂适量

2.1 外观

试剂1应为无色澄清液体;试剂2应为无色澄清液体。

2.2 试剂装量

应不低于试剂瓶标示装量。

2.3 试剂空白

2.3.1试剂空白吸光度

在340nm波长处测定试剂空白吸光度,应≥1.0。

2.3.2试剂空白吸光度变化率

在340nm波长处测定其空白吸光度变化率|△A/min|<0.05。

2.4 分析灵敏度

测定AMM含量为88 μmol/L样本时,其|△A/min|应≥0.005。

2.5 线性范围

2.5.1在(2,300)μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990;

2.5.2测试浓度在(2,30] μmol/L范围内,线性绝对偏差应不超过±3 μmol/L;测试浓度在(30,300)μmol/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%。

2.6 测量精密度

2.6.1重复性:用三个水平质控血清重复测试其变异系数(CV)应不超过5%。

2.6.2批间差:抽取3个不同批号试剂,对同一份样本进行重复测定,相对极差≤10%。

2.7 准确度

在样本中加入一定量的纯品,计算回收率,应在85%~115%范围内。

2.8 稳定性

取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月的试剂进行检测,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

腺苷脱氨酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求lepu

腺苷脱氨酶测定试剂盒(过氧化物酶法) 适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中腺苷脱氨酶的活性。 1.1 规格 试剂盒是由试剂1和试剂2组成的液体双试剂,校准品和质控品均为冻干粉。规格及装量见表1。 表1 规格及装 量

1.2 主要组成成分试剂1主要组分: 试剂2主要组分: 校准品主要组分: 质控品主要组分:

2.1 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1:无色或淡黄色透明溶液;试剂2:无色或淡黄色透明溶液;校准品:白色至浅黄色冻干粉,复溶后为无色至浅黄色透明液体;质控品:白色至浅黄色冻干粉,复溶后为无色至浅黄色透明液体。外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 2.3.1 试剂空白吸光度 在546nm(540nm-550nm)处测定试剂空白吸光度,应≤0.3; 2.3.2 试剂空白吸光度变化率 试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.1。 2.4 分析灵敏度 测试100U/L的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0065 。 2.5 准确度 使用国际参考品(BCR647)对试剂(盒)进行测试,相对偏差应不大于±15%。 2.6 重复性 变异系数(CV)应不超过10%。 2.7 线性 2.7.1在(0,150]U/L区间内,线性回归的相关系数r应不低于0.990;

2.7.2(0,40)U/L区间内绝对偏差不超过±6U/L;[40,150]U/L区间内相对偏差不超过±15%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定,相对极差<15%。 2.9校准品批内瓶间差 变异系数(CV)应≤10%。 2.10 质控品批内瓶间差 变异系数(CV)应≤10%。 2.11溯源性 根据GB/T 21415-2008的规定,本试剂盒内校准品溯源至国际参考物质BCR647。 2.12质控品赋值有效性 质控品测值应在靶值范围内。 2.13 稳定性 2.1 3.1效期稳定性 原包装的试剂盒在2℃~8℃条件下贮存达到18个月后的试剂进行检测,应符合2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.12之规定。 2.1 3.2复溶稳定性 a)校准品复溶后在2℃~8℃密闭避光保存,稳定期为7天,稳定期满后1天内,性能应符合2.5之规定。 b)质控品复溶后在2℃~8℃密闭避光保存,稳定期为7天,稳定期满后1天内,性能应符合2.12之规定。

了解蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA—2A)与谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)在1型糖尿病(DM)中的检出率及

龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/2d15658358.html, 了解蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA—2A)与谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)在1型糖尿病(DM)中的检出率及其诊断价值 作者:薛勇 来源:《饮食与健康·下旬刊》2015年第10期 【摘要】目的:分析探讨蛋白酪氨酸磷酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体在1型糖尿病中的检出率及其诊断价值。方法:选择我院收治的1型糖尿病患者120例作为研究对象,收治时间在2013年3月至2014年3月期间,使用数字抽签法对这120例患者进行分组,分别为A组、B 组和C组,每组各40例,A组采取蛋白酪氨酸磷酸酶抗体检测,B组采取谷氨酸脱羧酶抗体检测,C组采取白酪氨酸磷酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体联合检测,并在检测结束后,对比三组的检出率。结果:A组的检出率为87.50%,B组的检出率为80.00%,C组的检出率为 100.00%,C组患者的检出率明显高于A、B两组,P 【关键词】白酪氨酸磷酸酶抗体;谷氨酸脱羧酶抗体;1型糖尿病 谷氨酸脱羧酶(GAD)是将谷氨酸转化成抑制性神经递质γ氨基丁酸(GABA)的限速酶,在胰岛β细胞中存在GAD,并也合成、分泌GABA。本文就蛋白酪氨酸磷酸酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体在1型糖尿病中的检出率及其诊断价值进行了研究分析,将我院确诊的120例1型糖尿病患者作为研究对象,并分别给予蛋白酪氨酸磷酸酶抗体检测、谷氨酸脱羧酶抗体检测及酸磷酸酶抗体检测联合谷氨酸脱羧酶抗体检测,现报告整理完毕,具体陈述如下。 1 研究资料和方法 1.1 研究资料 选择我院收治的1型糖尿病患者120例作为研究对象,收治时间在2013年3月至2014年3月期间,使用数字抽签法对这120例患者进行分组,分别为A组、B组和C组,每组各40例。

腺苷脱氨酶ADA测定

腺苷脱氨酶ADA测定 1检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。 2原理 ADA 腺苷+H2O 肌苷+NH3 PNP 肌苷+Pi 次黄嘌呤+1-磷酸核糖 XOD 次黄嘌呤+2 H2O+2O2尿酸+2 H2O2 POD H2O2 +4-AAP+EHSPT 4H2O+苯醌类 3标本要求 3.1使用新鲜血清,不使用血浆. 3.2在采集血液后2h分离血清.

3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次. 3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定. 4试剂 4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司ADA试剂盒(沪食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014)4.1.1试剂组成 试剂1 60 ml,试剂主要成分如下: Tris—HCL缓冲液(PH8.0)50.0mmol/L XO 0.2u/ml 4-AAP 2.0mmol/L POD 0.6u/ml PNP 0.1u/ml NaN3 0.2g/L 试剂2 60 ml,试剂主要成分如下: Tris—HCL缓冲液(PH4.0) 50.0mmol/L EHSPT 2.0 mmol/L 腺苷 10.0mmol/L

4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存:2~8℃避光、密封的储存条件下,试剂(盒)自生产之日起有效期为12个月。试剂1 与试剂2 启用后,在2~10℃避光的条件下可稳定20天。 4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。 4.2 校准品: 4.2.1采用以检测用水为空白的方式进行校准。 4.2.2校准及校准频次的要求:正常情况下,应每周至少对测定进行一次校准。当发生下列情况时(如:使用的试剂批号发生改变时、使用的仪器进行维修、保养或关键部件进行更换后、质控品的测定结果发生漂移或超出规定的范围等),应重新对测定进行校准后再对患者的样本进行检测。 5 仪器 AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪

糖尿病抗体

糖尿病抗体四项检测的临床意义 1、抗谷氨酸脱羧酶抗体GAD-Ab 谷氨酸脱羧酶是抑制性神经递质γ氨基丁酸的关键限速酶,由GAD65和GAD67两种异构体所组成,其中抗GAD65抗体为1型糖尿病中抗GAD抗体主要的靶抗原。抗GAD抗体是胰岛素依赖型糖尿病(1型糖尿病)的重要免疫标志。抗GAD抗体在糖尿病前驱阶段和1型糖尿病中的阳性率为70-90%,在大龄儿童和迟发的1型糖尿病中的阳性率更高。 对于成人潜伏型自身免疫性糖尿病(LADA),因其起病隐匿,进展缓慢,尚存部分胰岛β细胞功能,口服降糖药有效,易被误诊为2型糖尿病。联合检测抗谷氨酸脱羧酶抗体和抗胰岛细胞抗体,有助于早期识别LADA。 此外抗GAD抗体还与僵人综合征相关,该抗体在此病症中的阳性率为60-100%。 参考值:<10.0IU/ml 2、抗酪氨酸磷酸酶抗体 IA2-Ab 抗酪氨酸磷酸酶抗体(IA2)是与1型糖尿病相关的抗体,在糖尿病前驱阶段和1型糖尿病中的阳性率为50-75%,是胰岛自身免疫活动的早期标志物,其出现通常预示着病情进展迅速。在年轻初发病者中的阳性率更高,与初发病进展速度有关。 参考值:<10.0IU/ml 3、抗胰岛素抗体IAA 1型糖尿病因内源性胰岛素分泌量的绝对不足,故需注射外源性胰岛素治疗。经常会刺激机体产生抗胰岛素抗体。检测抗胰岛素抗体可指导胰岛素的用量,为耐药性糖尿病治疗提供了依据。抗体滴度高时,可适度增加速效胰岛素,抗体滴度低时,则改用长效胰岛素。判断预后,胰岛素释放曲线低下而检测胰岛素抗体滴度偏高,说明患者不是胰岛功能衰竭,提示病情稳定。相反则表明胰岛素功能衰竭,预后较差。 参考值:阴性 4、抗胰岛细胞抗体ICA 抗胰岛细胞抗体属器官特异型抗体,抗原为胰岛细胞浆成分或微粒体组分,主要为lgG类,是胰岛细胞中β细胞损伤的标志物,是诊断胰岛依赖性糖尿病高敏感性和高特异性的指标。早期1型糖尿病患者ICA阳性率可达60%~80%,治疗数周后阳性率迅速下降至50%以下,2~3年后,约20%的患者仍为阳性,提示ICA的出现可能是暂时现象,似与1型糖尿病的起病时间紧密相关,可作为其早期诊断指标;少数患者ICA滴度可持续维持很高,数年不变;有个别患者起病时为阴性,以后转为阳性;糖尿病近亲阳性率可达19%,预示其家族成员患病的危险性较大。高效价ICA与胰岛β细胞功能破坏有关,可作为评价疾病严重程度的标志。 参考值:阴性 联合检测上述四项,有助于鉴别诊断1型糖尿病,判断疾病预后,并评估1型糖尿病的发病风险。

内科学名词中英文对照表

★肺炎 pneumonia ★肺血栓栓塞症 pulmonary thromboembolism ★PTE ★★严重急性呼吸综合征 severe acute respiratory symptom ★SARS ★★慢性阻塞性肺疾病 chronic obstructive pulmonary diseases ★★COPD ★长期家庭氧疗 long-term domiciliary oxygen therapy ★LTOT ★支气管哮喘 bronchial asthma BA 寂静胸沉默胸 silent chest ★支气管激发试验 bronchial provocation test BPT ★支气管舒张试验bronchodilatation test BDT 特发性间质性肺炎 idiopathic interstitial pneumonia IIP ★肺出血-肾炎综合征Goodpasture syndrome 胸腔积液 pleural effussion ★原发性支气管肺癌 primary bronchogenic carcinoma 肺癌 lung cancer ★类癌综合征 carcinoid syndrome ★肺上沟癌 pancoast cancer ★睡眠呼吸暂停综合征 sleep apnea syndrome SAS ★★呼吸衰竭respiratory failure RF 通气/血流比例失调 ventilation-perfusion mismatch ★★肺性脑病 pulmonary encephalopathy 动脉血气分析 arterial blood gas analysis 科赫现象 Koch phenomenon 霍纳综合征 Horner syndrome 胸膜反应 pleura reaction 比奥呼吸 Biot's respiration 无创正压通气 non-invasive positive pressure ventilator NIPPV 耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌methicillin resistant staphylococcus aureus MRSA 肺脓肿 lung abscess 支气管扩张 bronchiectasis 肺结核 pulmonary tuberculosis ★TB ★全程督导短程化学治疗 directly observed treatment short-course DOTS 纯蛋白衍化物 purified protein derivative PPD 异烟肼 Isoniazid ★INH H 利福平 Rifampicin ★RFR R 吡嗪酰胺 Pyrazinamide ★PZA Z

ADA 酶比色法

腺苷脱氨酶(ADA )测定试剂盒 (酶比色法) 使用说明书 【产品用途】 本试剂用于测定血清、胸腹水、脑脊液中的腺苷脱氨酶活性。 【临床意义】 肝脏疾病时,本酶活性往往升高,有助于黄疸的鉴别诊断。在阻塞性黄疸时,此酶活性升高很少,而在肝实质性损伤时,此酶和转氨酶往往同时升高,特别在慢性活动性肝炎和肝硬变时,转氨酶阳性率较低,增高幅度也不明显,而ADA 活性的阳性率可达90%左右,增高程度也较明显。同时ADA 检测对白血病、伤寒、出血热也有辅助诊断作用。 测定胸腹水及脑脊液标本中的ADA 活性,有鉴别诊断价值。结核性胸腹水中ADA 活力显著高于癌症及炎症胸腹水中ADA 活力,对早期诊断结核性胸、腹膜炎有较高的敏感性和一定的特异性。此外,脑脊液ADA 检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标,结核性脑膜炎ADA 活性升高,病毒性脑膜炎不升高。 【适用范围】 液体双试剂,即开即用,自动化分析仪用。 【产品规格】 R 1 50ml ×2 R 2 50ml ×1 【试剂成份】 R 1 Tris-HCl pH8.0 50mM 4-AA 2mM PNP 0.1kU/mL XOD 0.2kU/mL POD 0.6kU/mL 稳定剂 R 2 Tris-HCl ph4.0 50mM 腺苷 10mM EHSPT 2mM 【检测原理】 腺苷在腺苷脱氨酶作用下脱氨基形成次黄苷,次黄苷在PNP 作用下生成次黄嘌呤,次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶(XOD )作用下转化为尿酸和过氧化氢(H 2O 2),H 2O 2与EHSPT 和4-氨基安替比林(4-AA )反应生成醌色物,显色强度与ADA 活性成正比。 腺苷?? ?→?ADA 次黄苷 + NH 3 次黄苷 + Pi ??→?PNP 次黄嘌呤 + 核酸-1-磷酸 次黄嘌呤 + 2H 2O + 2O 2???→?XOD 尿酸+ 2H 2O 2 2H 2O 2 + 4-AA + EHSPT ??→?POD 醌亚氨染料+ H 20 【样本采集】 新鲜非溶血血清或血浆,ADA 在4℃时可稳定1周。 【测定方法】 1.试剂1、2在使用前恢复到37℃。 2.180μl R 1与5μl 血清(浆)样品混合,在37℃孵育3min-5min 。 3.加入90μl R 2孵育3min ,在540nm 或546nm 处测2分钟,计算每分钟平均光度变化△A/min 。 【参考范围】 血 清:4~24U/L 胸腹水:0~35 U/L 脑脊液:0~6 U/L 各实验室应建立自己的参考范围; 【产品性能】 1.试剂空白吸光度:A 340nm(1cm) ≥0.800 2.本试剂线性范围:0-150 U/L 3.精密度:批内CV ≤5% 批间相对极差CV ≤8% 4.准确度:相对偏差≤±10% 【试剂保存】 R 1、R 2为液体试剂,直接使用。2-8℃避光稳定1年。 【注意事项】 1.本方法特异测定ADA ,其它核苷与本方法不发生反应。 2.血清胆红素达20mg/dL ,血红蛋白100mg/dL ,甘油750mg/dL ,抗坏血酸4mg/dL 对实验无干扰。 【单位意义】 在37℃条件下,每分钟用于产生1 umol 次黄苷的量定义为一个单位的ADA 。 【生产许可证】 【注册标准号】 【注册证号】

血清腺苷脱氨酶

一、血清腺苷脱氨酶(ADA)临床意义: 血清ADA活性增高见于: ①肝脏疾病:急性黄疸性肝炎,肝细胞出现损伤,在黄疸尚未出现前,可见增高,因ADA分子量较ALT小,当肝细胞轻度受损时ADA比ALT先释入血内,慢性肝炎活动期,慢性迁延性肝炎升高明显;肝硬化,原发性肝癌时,ADA活性也升高。 ②肿瘤引起的阻塞性黄疸,前列腺癌和膀胱癌,网状细胞瘤,淋巴瘤,溶血性贫血,风湿热,伤寒,痛风,重症地中海贫血,骨髓性白血病,结核,自身免疫性疾病,传染性单核细胞增多症和心力衰竭等均可引起此酶升高。 ③结核性胸腹水ADA活性显著增高,癌性胸腹水不增高,而血清中ADA活性二者无明显差别,故测定胸腹水中ADA活性有助于将两者鉴别。 ④结核性脑膜炎ADA显著增高,而病毒性脑膜炎则不增高,颅内肿瘤及中枢神经系统白血病稍增高,所以脑脊液ADA检测可以作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。 血清ADA活性降低见于:见于重度免疫缺陷症状。 二、血清单胺氧化酶(MAO)临床意义 血清中MAO和结缔组织中的MAO性质相似,能促进结缔组织的成熟,在胶原形成过程中,参与胶原成熟的最后阶段架桥形成,使胶原

和弹性硬蛋白结合。临床上测定血清MAO主要用于诊断肝硬变。肝硬变时,血清MAO活性常明显增高,阳性率可高达80%以上。 三、前白蛋白(PA) 临床意义 PA 降低: 1.诊断和监测营养不良:血清PA在无感染情况下,是儿童营养不良的灵敏指标,在蛋白质-热卡不足型营养不良(PCM)中随着营养状况的改善,多数病人血清PA水平显著升高而血清TP、Alb未见明显升高。 2.诊断肝病:肝脏疾病时血清PA变化较Alb早,有30%肝病患者血清Alb正常而PA降低。各型肝炎患者(病毒性肝炎、乙醇性肝炎和药物性肝炎)血清PA水平均有不同程度降低,以肝硬化和重症肝炎降低最著。对重型肝炎预后有较大的参考价值,PA明显上升,预后良好,PA持久降低者,预后险恶。 3.诊断急性时相反应,PA可作为癌症的筛选指标。 PA升高: 肾病综合征 >500 mg/L (此时ALB<30g/L),发作期 PA ↑ ALB ↓,恢复期 PA ↓ ALB ↑。 四、血清5’-核苷酸酶(5’-NT)临床意义 血清5’-NT活性升高主要见于肝胆胰系统疾病及某些恶性肿瘤,故有较特异的诊断价值。胆管结石或肿瘤所致之肝外胆管阻塞,以及氯

Hcy测定试剂盒设计方案

1 产品概述、处方及规格 1.1产品概述 本试剂通过测定人体液中同型半胱氨酸(Hcy)的浓度,主要是用于诊断心肌功能疾病。 产品测定原理: 同型半胱氨酸被转化为游离型后,通过与共价底物反应,循环放大,同时产生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤,氨在谷氨酸脱氢酶的作用下,使β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性(NADH)转化为NAD+,样本中的同型半胱氨酸的浓度与NADH的变化成正比。 1.2产品处方 1.2.1 试剂为液体双试剂。校准品可使用朗道、罗氏等复合定标液。 1.2.2 产品所用主要原材料为S-腺苷甲硫氨酸(SAM)、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性(NADH)、三(2羧乙基)磷氯化氢(TCEP)、α- 酮戊二酸、Hcy甲基转移酶(HMTase)、谷氨酸脱氢酶(GLDH)S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)水解酶及腺苷脱氨酶(ADA)等。根据文献资料选用适当的缓冲液和稳定剂。 1.3 产品规格 产品包装规格制定要考虑不同适用机型和不同客户需求,根据以往经验,拟制定规格: R1-8 ml、R2-2 ml;R1-16 ml、R2-4ml;R1-20 ml、R2-5ml;R1-32 ml、R2-8ml;R1-40 ml、R2-10 ml; R1-2×40 ml、R2-2×10 ml;R1-4×40 ml、R2-4×10 ml;R1-2×40 ml、R2-20 ml;R1-4×40 ml、R2-2×20 ml;R1-8×40 ml、R2-8×10 ml;R1-80 ml、R2-20 ml;R1-2×80 ml、R2-2×20 ml; R1-4×80 ml、R2-4×20 ml;R1-8×80 ml、R2-8×20 ml ;R1-60 ml、R2-15 ml;R1-2×60 ml、R2-2×15 ml;R1-3×60 ml、R2-3×15ml;R1-8×50 ml、R2-2×50ml;R1-6×70 ml、R2-3×35ml; R1-5×40 ml、R2-50ml;R1-4×50 ml、R2-50ml;R1-3×60 ml、R2-45ml;R1-8×20 ml、R2-8×5 ml。 2 产品质量标准 根据《临床化学体外诊断试剂(盒)通用技术要求》,应对试剂外观、净含量、试剂空白、灵敏度、准确度、批内精密性、批间精密性、线性范围和稳定性等做出要求和规定。 应参考已上市产品并满足临床使用要求。 2.1外观 R1、R2均为无色至浅黄色透明液体。 2.2净含量 不少于标示值。 2.3试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度变化率 以蒸馏水为检测样本时,每分钟吸光度变化值(△A/min)的绝对值应不大于0.100A。

胸腔积液中腺苷脱氨酶的临床检测意义分析

胸腔积液中腺苷脱氨酶的临床检测意义分析 目的探讨胸腔积液中腺苷脱氨酶的临床检测意义。方法选择本院结核性胸腔积液患者共35例,作为结核组;同时选择本院肿瘤性胸腔积液患者共30例,作为肿瘤组。取两组患者胸腔积液,测定腺苷脱氨酶活性。结果结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶活性显著高于肿瘤组,差异有统计学意义(P <0.05);结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶阳性检出率显著高于肿瘤组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论胸腔积液患者中行胸腔积液腺苷脱氨酶活性检测有助于结核性胸腔积液和肿瘤性胸腔积液鉴别诊断,检测意义重要,值得借鉴。 标签:胸腔积液;肿瘤;结核;鉴别诊断;检测意义 胸腔积液在临床症状中很常见,导致胸腔积液的病因较多,在临床上主要有肿瘤性胸腔积液及结核性胸腔积液。对于胸腔积液来说,明确病因对正确诊断和治疗至关重要。但胸腔积液的早期诊断较为困难。部分患者采用常规的方法不能明确胸腔积液的性质。本文探讨腺苷脱氨酶在胸腔积液中的检测意义。现报道如下: 1 资料与方法 1.1 一般资料 选择本院2009年10月~2011年10月结核性胸腔积液患者共35例,作为结核组,男19例,女16例,年龄最小为18岁,最大为63岁,平均(38.1±4.6)岁。结核性胸腔积液诊断条件:所选患者有结核中毒症状表现;合并有肺结核,痰涂片检测到抗酸杆菌;胸腔积液为渗出性改变;结核菌素试验阳性;血沉加快;抗结核药物治疗有效。上述5条中具备3条即可诊断为结核性胸腔积液。同时选择本院肿瘤性胸腔积液患者共30例,作为肿瘤组,男21例,女9例,年龄最小为18岁,最大为67岁,平均(40.1±6.1)岁。肿瘤组患者中,14例纤维支气管镜取组织行病理检查,6例患者经肺活检确诊,10患者胸腔积液中发现癌细胞。 1.2 方法 取两组患者胸腔积液,操作步骤如下:患者坐位,面向椅背,两前臂置于椅背上,前额伏于手臂上;选择肩胛下角线或腋后线7~8肋间作为穿刺点;常规消毒;2%利多卡因局部逐层浸润麻醉;左手固定穿刺部位皮肤,右手持穿刺针沿麻醉部位经肋骨上缘垂直缓慢刺入,当有突破感时停止;接上注射器后;注射器抽满后再次用血管钳夹闭胶管才能取下注射器;抽完液后拔出穿刺针,再次消毒皮肤,覆盖无菌纱布;用胶布固定。胸腔积液均为患者入院后第一次抽取的,离心后取上清液2 mL置于管中待测。腺苷脱氨酶检测采用酶法,检测步骤严格根据说明书提供的步骤进行。当腺苷脱氨酶活性大于19.6 U/L为诊断结核阳性界值。 1.3 统计学处理 采用统计学软件SPSS 14.0进行统计学分析,均数比较采用t检验,率的比较采用卡方检验,P <0.05,显示差异有统计学意义。 2 结果 结核组和肿瘤组胸腔积液中腺苷脱氨酶活性检测结果显示,结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶活性显著高于肿瘤组,差异有统计学意义(P <0.05);结核组胸腔积液中腺苷脱氨酶阳性检出率显著高于肿瘤组,差异有统计学意义(P <0.05)。

谷氨酸脱羧酶抗体

谷氨酸脱羧酶抗体 文章目录*一、谷氨酸脱羧酶抗体的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、谷氨酸脱羧酶抗体的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、谷氨酸脱羧酶抗体的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、谷氨酸脱羧酶抗体的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状* 五、谷氨酸脱羧酶抗体的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群 2. 不良反应 谷氨酸脱羧酶抗体的基本信息 1、定义谷氨酸脱羧酶(GAD)是将谷氨酸转化成抑制性神经递质γ氨基丁酸(GABA)的限速酶,在胰岛β细胞中存在GAD,并也合成、分泌GABA。谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)是1型糖尿病发病初期的免疫标志,也作为1型糖尿病患者接受治疗时的疗效监测指标。 谷氨酸脱羧酶(GAD)是将谷氨酸转化成抑制性神经递质γ氨基丁酸(GABA)的限速酶,在胰岛β细胞中存在GAD,并也合成、分泌GABA。谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)是1型糖尿病发病初期的免疫标志,也作为1型糖尿病患者接受治疗时的疗效监测指标;1型糖尿病合并Graves病的患者GADA阳性率明显高于不伴有Graves 病的1型糖尿病患者,Graves病患者GAD水平可明显升高,非糖尿病患者GADA的出现并不总是预测1型糖尿病的发生。

2、专科分类神经 3、检查分类免疫检查 4、适用性别男女均适用 5、是否空腹非空腹 谷氨酸脱羧酶抗体的正常值和临床意义 1、正常值ELISA法:阴性。 2、临床意义异常结果: 阳性:GADA在1型糖尿病发病的早期阳性率为38-76%,I级亲属中的阳性率达78-81%,几乎都是GADA65。而GADA67分布很少,2型糖尿病阳性率仅0-4%。 需要检查的人群:若患突然间患有糖尿病“三多一少”的症状,建议去医院检查谷氨酸脱羧酶抗体。 谷氨酸脱羧酶抗体的检查过程及注意事项 1、检查过程备齐用物,标本容器上贴好标签,核对无误后向患者解释以取得合作。露出患者手臂,选择静脉,于静脉穿刺部位上方约4~6cm处扎紧止血带,并嘱患者握紧拳头,使静脉充盈显

腺苷脱氨酶测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求首医

腺苷脱氨酶测定试剂盒(过氧化物酶法) 适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中腺苷脱氨酶的活性浓度。 1.1产品规格 1.2产品组成 试剂1:PNP 1.5U/mL,XOD 1.0U/mL。 试剂2:腺苷10mmol/L,TOOS 2mmol/L。 2.1 外观 试剂1、2为无色或略带黄色透明溶液;试剂盒各组分齐全、完整,液体无渗漏,包装标签文字符号清晰牢固不易脱落,外包装完整无破损。 2.2 装量 液体试剂的净含量应不少于标示量。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度 在37℃、540nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.20。2.3.2 试剂空白吸光度变化率 在37℃、540nm波长、1cm光径条件下,用生理盐水作为样品加入试剂测试时,试剂空白波光度变化率(ΔA/min)应不大于 0.005/min。 2.4分析灵敏度 测定80U/L腺苷脱氨酶时,吸光度变化率在(0.04±0.02)/min范围内。 2.5 准确度

采用比对试验,相关系数r≥0.98;[1.0,30]U/L区间内,线性绝对偏差不超过±3U/L;(30,200]U/L区间内,线性相对偏差不超过±10% 。 2.6 精密度 2.6.1 重复性 用血清样品或质控样品重复测试所得的变异系数(CV)应不大于5.0%。 2.6.2 批间差 试剂(盒)批间相对极差应不大于7.0%。 2.7 线性区间 试剂线性在[1.0,200]U/L(37℃)区间内: a) 线性相关系数|r|应不小于0.990; b) [1.0,30]U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±3U/L;(30,200]U/L 区间内,线性相对偏差应不超过±10%。 2.8稳定性 原包装试剂2~8℃避光保存有效期12个月,到效期后的样品检测试剂空白、分析灵敏度、准确度、重复性、线性区间应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7 的要求。

腺苷脱氨酶(ADA)

腺苷脱氨酶(ADA) 参考值:0-15U/L 海丰参考区间4~24U/L 介绍:腺苷脱氨酶(ADA)为一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶,其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。ADA广泛存在于各组织中,以盲肠、小肠黏膜、脾脏、胸腺中含量最高,肝脏、肺、肾、心脏、骨骼肌、神经组织等处含量较低,肝脏含量约为小肠的7%~10%。肝内ADA90%存在与细胞浆水溶性部分,其余在细胞核内。此外,血细胞(红细胞、粒细胞、淋巴细胞)内ADA活性约为血液中40倍~70倍,因此测定ADA时应避免溶血。血清中的ADA主要来自肝脏,所以肝细胞损伤或膜通透性增强,均可使血中酶活性增高,故可依据该酶活性增高或降低反映肝细胞损伤和恢复程度。 血清腺苷脱氨酶(ADA)正常值: (1)酶速率法(37℃):健康成年人:7.7-19.3 U/L (2)分光光度法:<25 U/L (3)比色法:健康成年人为:5~25 U/L 诊断参考: 肝脏疾病: ADA活性是反映肝损伤的敏感指标,可作为肝功能常规检查项目之一,与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。 一.ADA活性是反映肝损伤的敏感指标,可作为肝功能常规检查项目之一,与AIT或GGT等组成肝酶谱。 (1)用于判断急性肝损伤及残留病变急性肝炎时ALT明显升高。ADA仅低度,中度升高。但重症肝炎发生酶胆分离时,尽管ALT不高,而ADA常明显升高。 而ALT恢复正常,ADA持续升高者,常易复发或易迁延为慢性肝炎。 (2)协助诊断慢性肝病在反映慢性肝损伤时ADA较ALT为优。慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高,因而可判断慢性肝病的程度。另外, 慢性活动性肝炎活性明显高于慢性迁延性肝炎。故可用于二者的鉴别诊断。 (3)有助于肝纤维化的诊断ADA活性差异与肝细胞损害关系不大,与肝纤维化程度相关。肝纤维化程度增加,ADA活性增加。 (4)有助于黄疸的鉴别据文献报道,阻塞性黄疸血清ADA活性明显低于肝细胞性黄疸及肝硬化伴黄疸。 二.肿瘤引起的阻塞性黄疸,前列腺癌和膀胱癌,网状细胞瘤,淋巴瘤,溶血性贫血, 风湿热,伤寒,痛风,重症地中海贫血,骨髓性白血病,结核,自身免疫性疾病,传染性单核细胞增多症和心力衰竭等均可引起此酶升高。 3.结核性胸腹水ADA活性显著增高,癌性胸腹水不增高,而血清中ADA活性二者无 明显差别,故测定胸腹水中ADA活性有助于将两者鉴别。 4.结核性脑膜炎ADA显著增高,而病毒性脑膜炎则不增高,颅内肿瘤及中枢神经系统

胸腔积液的产生机制及治疗

胸腔积液 胸腔指的是由膈肌和胸廓围成的总腔,胸膜腔是由脏壁两层胸膜在左右两肺周围围成的一个完全封闭的潜在性腔隙,腔内含少量浆液,起到润滑作用。正常人胸膜腔内有3~15ml液体,在呼吸运动时起润滑作用,正常人,每24小时亦有500~1000ml的液体形成与吸收。胸膜腔内液体自毛细血管的静脉端再吸收,其余的液体由淋巴系统回收至血液,滤过与吸收处于动态平衡。若由于全身或局部病变破坏了此种动态平衡,致使胸膜腔内液体形成过快或吸收过缓,临床产生胸腔积液(P leural effusion,简称胸液)。 产生机制: 胸腔积液 健康人的胸膜腔为负压(呼吸时平均为-5cmH2O,1cmH2O=98Pa),胸液中含蛋白质,具有胶体渗透压(8cmH2O)。胸液的积聚与消散亦与胸膜毛细血管中渗透压、静水压有密切关系。壁层胸膜由体循环供血,毛细血管静水压高(30cmH2O);脏层胸膜则由肺循环供血,静脉压低(1 1cmH2O)。体循环与肺循环血膜以相等速度被吸收。胸液中的蛋白质主要经由淋巴管进入胸导管。 病因及发病机制 一、胸膜毛细血管内静水压增高 如充血性心力衰竭、缩窄性心包炎、血容量增加、上腔静脉或奇静脉受阻,产生胸腔漏出液。 二、胸膜毛细血管通透性增加 如胸膜炎症(结核病、肺炎)结缔组织病、胸膜肿瘤、肺梗死、膈下炎症,产生胸腔渗出液。 三、胸膜毛细血管内胶体渗透压降低 如低蛋白血症、肝硬化、肾病综合征、急性肾小球肾炎、粘液性水肿等,产生胸腔漏出液。 四、壁层胸膜淋巴引流障碍癌症 淋巴管阻塞、发育性淋巴管引流异常等,产生胸腔渗出液。 五、损伤所致胸腔内出血:主动脉瘤破裂、食管破裂、胸导管破裂等。 症状: 积液量少于0.3L时症状多不明显;若超过0.5L,患者渐感胸闷。积液量增多后,两层胸膜隔开,不再随呼吸摩擦,胸痛亦渐缓解,但呼吸困难亦渐加剧;大量积液时纵膈脏器受压,心悸及呼吸困难更加明显。 诊断

腺苷脱氨酶(ADA)测定试剂盒(过氧化物酶法)产品技术要求sainuopu

腺苷脱氨酶(ADA)测定试剂盒(过氧化物酶法) 适用范围:用于体外定量测定人体血清中腺苷脱氨酶的活性。 1.1 试剂盒包装规格 试剂1:1×15ml,试剂2:1×5ml;试剂1:2×54ml,试剂2:2×18ml; 试剂1:3×45ml,试剂2:3×15ml;试剂1:4×54ml,试剂2:4×18ml; 试剂1:2×300ml,试剂2:1×200ml;试剂1:1×9L,试剂2:1×3L;试剂1:2×30ml,试剂2:2×10ml。 质控品(选配,冻干品):1×1ml。 1.2试剂盒主要组成成分

2.1 外观 液体双试剂:试剂1无色至浅黄色澄清液体,试剂2无色至浅黄色澄清液体。质控品:冻干品,溶解后为无色至淡黄色液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度:在37℃、546nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.3。 2.3.2试剂空白吸光度变化率:在37℃、546 nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度变化率(ΔA/min)应不大于0.005。

2.4 分析灵敏度 测定活性为25U/L样本时,吸光度变化率(ΔA/min)应不小于0.009。 2.5 线性范围 在(2,180)U/L线性范围内,线性相关系数r不小于0.996。在(60,180)U/L 区间内线性相对偏差不大于±10%;在(2,60]U/L区间内线性绝对偏差不大于±6U/L。 2.6 重复性 重复测试两份高低浓度的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于5%。 2.7 批间差 不同批号试剂测试同一份样本,测定结果的批间相对极差应不大于10%。 2.8 准确度 相对偏差:相对偏差应不超过±10%。 2.9 质控品赋值有效性 测定结果在靶值范围内。 2.10瓶间差(均一性) 质控品的瓶间变异系数(CV)应不大于5%。 2.11含水量(冻干品) 质控品水分含量应不大于8%。 2.12稳定性 2.12.1复溶稳定性 质控品开瓶复溶后,复溶物在10℃~30℃室温密封避光保存,可以稳定4小时,在第5小时检测,测量结果应在其靶值范围内。质控品开瓶复溶后,复溶物在2℃

腺苷脱氨酶

腺苷脱氨酶 定义:催化腺苷水解脱氨成肌苷的氨基水解酶,是嘌呤代谢的必需酶。 腺苷脱氨酶作用机理 腺苷脱氨酶(EC:3.5.4.4 adenosine deaminase ADA)是嘌呤核苷代谢中重要的酶类,属于巯基酶,每分子至少含2个活性巯基,其活性能对氯汞甲酸完全抑制。ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷,再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤,其代谢缓和终产物为尿酸。 人体分布情况 ADA广泛分布于人体各组织中,以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高,肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。血液中ADA主要存在于红细胞

腺苷脱氨酶作用图 、粒细胞和淋巴细胞,其活性约为血清的40~70倍,T淋巴细胞比B淋巴细胞该酶活性更高。人ADA基因位于第20对染色体上,并呈现出遗传多态性现象,其同工酶有3种,分别为ADA1,ADA1+CP和ADA2。ADA1分子量为35kD,为一种单链蛋白质;ADA1+CP分子量为280kD,实际上是由2条单键的ADA1分子和人个不具酶活力的200kD结合蛋白结合而成;ADA2分子量为100kD。3种同工酶具有不同的动力学性质:ADA1和ADA1+CP最适PH为5.5~8.0,对腺苷的Km值为 50umol/L。对2’-脱氧腺苷与腺苷的活性之比为0.8,两者均对红-9-(2-羟基-3-壬烷基)腺嘌呤[erythro-9- (2-hydroxyl-3-nonyl)adenine(EHNA)]抑制作用敏感。

ADA2相对于前两种同工酶具有较低的最适PH、较高的催化腺苷Km值(2000umol/L)以及较低的2’-脱氧腺苷与腺苷的活性之比值(0.2),对EHNA抑制作用不敏感。ADA同工酶在各类组织和细胞中的分布不同,ADA1在脾脏、红细胞、淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞中占优势,ADA1+CP在肝脏、肺、胰、肾组织和骨骼中占优势,ADA2只存在于单核细胞,目前在其他组织细胞中尚未检出。 临床意义 腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶。测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研究日趋受到临床重视。 肝脏疾病: ADA活性是反映肝损伤的敏感指标,可作为肝功能常规检查项目之一,与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。 用于判断急性肝损伤及残留病变 急性肝炎(AH)时ALT几乎明显升高,ADA仅轻、中度升高,且阳性率明显低于AST和ALT。因此ADA在诊断急性肝损伤时有一定价值,但并不优于ALT。重症肝炎发生酶胆分离时,尽管ALT不高,而ADA明显升高。AH后期,ADA长高率高于

腺苷脱氢酶(ADA)

腺苷脱氢酶(ADA) 一、定义 腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase)是一种参与嘌呤代谢作用的酶。它是用作拆解食物组织中的核酸中的腺苷。在人体中,它主要参与了免疫细胞的制造;若该酶突变,会造成T细胞、B细胞、自然杀伤细胞皆无法表现的严重复合型免疫缺乏症(SCID) 二、异构体 有两种ADA同种型:ADA1和ADA2。 (一)ADA1存在于大多数体细胞中,特别是淋巴细胞和巨噬细胞中,它不仅存在于胞质溶胶和细胞核中,而且还存在于与二肽基肽酶-4(aka,CD26)连接的细胞膜上的外胚层中。ADA1主要参与细胞内活动,并且以小形式(单体)和大形式(二聚体)存在。小型到大型的相互转换受肺中“转换因子”的调节。 (二)ADA2首次在人类脾脏中发现。随后在包括巨噬细胞在内的其他组织中发现它与ADA1共存。这两种同种型调节腺苷与脱氧腺苷的

比例,增强了寄生虫的杀灭。ADA2主要存在于人血浆和血清中,并且仅作为同型二聚体存在。 三、临床意义 (一)、用于肝胆疾病的诊断 1.急性肝炎患者ADA与ALT均显著升高。乙型肝炎患者ALT的升高大于ADA,而非甲非乙肝炎病人ADA的升高大于ALT,非甲非乙肝炎患者ADA活性极度升高者多易转变为迁延性肝炎。 2.慢性肝炎患者ADA活性均升高,慢性活动型肝炎比非活动型升高更甚。 3.肝纤维化、肝硬化及慢性肝炎患者ADA活性显著升高而ALT 不升高,所以同时测定ALT和ADA更具有临床价值。 4.阻塞性黄疸ADA不升高,而肝细胞性黄疸ADA活性升高,因此测定血清ADA有助于黄疸类型的鉴别诊断。 (二)、用于结核性胸膜炎及结核性腹膜炎的诊断

临床生化检验中常见检验项目套餐组合模式

临床生化检验中常见检验项目套餐组合模式 肝功能检测项目: 肝功能五项:谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、r-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶 肝功能十四项:谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、r-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶、总蛋白、白蛋白、球蛋白、白/球比、直接胆红素、间接胆红素、腺苷脱氨酶、总胆汁酸、胆碱脂酶 肝功能十八项:谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、r-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶、总蛋白、白蛋白、球蛋白、白/球比、直接胆红素、间接胆红素、腺苷脱氨酶、总胆汁酸、前白蛋白、甲胎蛋白、5-核苷酸酶、胆碱脂酶、a-L-岩藻糖苷酶 肾功能检测项目: 肾功能五项:肌酐、尿素氮、尿酸、二氧化碳、β2-微球蛋白 肾功能九项:肌酐、尿素氮、尿酸、二氧化碳、β2-微球蛋白、胱胺酸蛋白酶抑制剂C、尿微量白蛋白、视黄醇结合蛋白、a1微球蛋白。 血脂检测项目: 血脂七项:甘油三酯、胆固醇、血糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A、载脂蛋白B。 血脂八项:甘油三酯、胆固醇、血糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A、载脂蛋白B、脂蛋白a。 心血管疾病检测项目: 血管紧张素转换酶、全量C反应蛋白、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶、α-羟丁酸、肌红蛋白、肌钙蛋白、同型半胱胺酸。 血脂类及心血管类检测项目: 甘油三酯、胆固醇、血糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A、载脂蛋白B、脂蛋白a、全量程c反应蛋白、同型半胱胺酸、血管紧张素转换酶。 糖尿病检测项目: 葡萄糖、果糖胺、糖化血红蛋白、β-羟丁酸。胰腺疾病检测项目: 淀粉酶、脂肪酶血栓与止血检测项目: D-二聚体 风湿三项: 抗‘O’、类风湿、C-反应蛋白 微量元素及电解质: 铜、铁、锌、无机磷、镁、钙、CO2-CP 其他项目: 免疫球蛋白IgG、免疫球蛋白IgM、免疫球蛋白IgA、补体C3、补体C4

糖尿病抗体三项临床意义

糖尿病抗体三项 糖尿病抗体三项分为:胰岛素自身抗体(IAA)、抗胰岛细胞抗体(ICA)和血清抗谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)三个项目。 1、抗胰岛素自身抗体(IAA): IAA应为未曾用过外源性胰岛素的病人体内检出可与胰岛素相结合的自身抗体。IAA的产生与I型糖尿病的发生有显著相关性。 2、抗胰岛细胞抗体(ICA): 在胰岛素依赖型糖尿病患者中,抗胰岛细胞抗体的发生率在90%以上。通常在确诊一年后该抗体水平下降。ICA可更早期发现I型糖尿病。非胰岛素依赖型糖尿病患者出现抗胰岛细胞抗体阳性,可能以后会发生胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)。胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)或称I~型糖尿病是一种渐进的慢性疾病,IDDM具有一个独特的无症状糖尿病前期,该期甚至可持续多年,在此期间,患者胰岛素的早期释放在静脉注射或口服葡萄糖时表现较弱。对于多数病例来说,这些患者血液中含有胰岛细胞自身抗体(ICA)及/或是胰岛素自身抗体(IAA)。ICA能够在临床表现IDDM症状八年前被检测,所以它可作为IDDM的早期指标及防治手段。ICA阳性的患者表明胰岛功能呈进行性下降,当胰岛素早期释放过程完全终止时,临床出现IDDM病症。在IDDM高发病率的人群中及IDDM患者的亲属中进行ICA的早期检

测是非常重要的。 3、血清抗谷氨酸脱羧酶抗体(GAD): GAD是使谷氨酸转变为神经质γ-氨基丁酸的生物合成酶,广泛存在于动物及人的脑和胰岛组织中,并认为GAD可能是糖尿病自身免疫反应的始动靶抗原,用于Ⅰ型糖尿病的鉴别诊断和预测。 总之糖尿病为β细胞群高危人群做这三种自身抗体(ICA、IAA和GAD)的筛查,有助于防止或减慢该疾病的发生,血清GADA、ICA和IAA的联合检测对早期、准确诊断1型糖尿病,及时规范治疗、预测B 细胞功能衰竭、预测疗效及在高危人群中筛查1型糖尿病有重要临床意义。

重组植物乳杆菌谷氨酸脱羧酶活力测定实验

重组植物乳杆菌谷氨酸脱羧酶活力测定实验 一、实验目的 了解原核表达系统 熟悉并掌握粗酶液的制备方法 熟悉并掌握谷氨酸脱羧酶活力的测定方法 熟悉并掌握超声破碎仪及U-V1100紫外可见分光光度计使用方法 二、实验原理 γ-氨基丁酸(GABA)作为一种非蛋白氨基酸,是目前研究较为深入的哺乳动物脑组织一种重要的抑制性神经递质,具有一系列的生理功能,例如降血压功能、治疗癫痫、抗疲劳、提高免疫力等。 谷氨酸脱羧酶(GAD,EC4.1.1.15)是一种磷酸吡哆醛(PLP)类酶,能专一催化L-谷氨酸脱羧成为γ-氨基丁酸(GABA)和CO2。催化效率——即酶的活力是酶的重要参数,研究酶的活力是研究酶性质及应用的基础。本实验通过测定谷氨酸脱羧酶催化产物γ-氨基丁酸产率来定义谷氨酸催化活力。谷氨酸脱羧酶催化反应式如下: L-谷氨酸谷氨酸脱羧酶(GAD)γ-氨基丁酸(GABA)GAD现行测定方法及优缺点 测定方法优点缺点 HPLC法准确灵敏度高操作复杂、测定时间较长氨基酸自动分析仪法稳定操作简单仪器使用复杂、昂贵 纸层析和薄层层析法方便简单稳定性差、适合定性测量 Berthelot比色法灵敏度高、方便简单有游离氨干扰 毛细管电泳法耗材少,环境污染小重现性较差 根据样品的特性及实验的需要,本实验采用Berthelot法测定反应液中GABA。 GABA的测定方法 采用Berthelot法,该方法利用苯酚和次氯酸钠与氨基反应生成蓝绿色物质(次氯酸钠氧化苯酚生成醌,醌和氨基反应生成蓝绿色物质)。Berthelot法对GABA(ω-氨基酸)的响应高,而对L-谷氨酸(α-氨基酸)响应低,所以用Berthelot法可以快速、高灵敏度测定出催化反应产物中的GABA。通过测定一定时间反应液中的GABA的吸光度值从而得到GABA的浓度,最终计算出谷氨酸脱羧酶的活力。 三、实验材料和主要仪器 1、仪器 MIKRO 220R 2205型低温冷冻离心机

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