免疫器官与免疫细胞考试试题
免疫器官与免疫细胞考试试题
一、A1型题（本大题50小题．每题1.0分，共50.0分。每一道考试题下面有A、
B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。）
第1题
能够与肥大细胞结合的Ig是
A IgG
B IgA
C IgM
D IgD
E IgE
【正确答案】：E
【本题分数】：1.0分
第2题
CD4阳性T细胞的主要功能是
A 特异性杀伤作用
B 吞噬作用
C 辅助作用
D 抑制作用
E 抗原呈递作用
【正确答案】：C
【本题分数】：1.0分
第3题
能够产生抗体的结构是
A T细胞
B 未活化的B细胞
C 浆细胞
D NK细胞
E B细胞
【正确答案】：C
【本题分数】：1.0分
第4题
B细胞能识别特异性抗原，因其表面有
A Fc受体
B C3受体
C IPS受体
D E受体
E Smlg
【正确答案】：E
【本题分数】：1.0分
第5题
含T细胞百分率最高的部位是
A 胸腺
B 脾脏
C 淋巴结
D 扁桃体
E 外周血
【正确答案】：A
【本题分数】：1.0分
第6题
具有特异性杀伤作用的细胞是
A NK细胞
第三章 免疫器官的结构和功能
第三章免疫器官的结构和功能 第一部分：学习习题 一、填空题 1．免疫器官按其功能不同，可分为 ________和_______，二者通过_________和_______ 互相联系。 2．中枢免疫器官是免疫细胞发生、分化、发育、成熟的场所，包括________和_______； 外周免疫器官包括_______、_______、_______和_______ 3．胸腺是 _______细胞分化、成熟的场所，骨髓是_______细胞分化发育的场所。 4．_______是成熟T细胞、B细胞等免疫细胞定居的场所，也是产生_______的场所。 5．淋巴结的浅皮质区称为_______,是_______定居的场所；深皮质区为_______,是_______ 定居的场所 二、多选题 [A型题] 1．人类的中枢免疫器官是： A．淋巴结和脾脏 B．胸腺和骨髓 C．淋巴结和胸腺 D．骨髓和粘膜相关淋巴组织 E．淋巴结和骨髓 2．人体中体积最大的免疫器官 A．胸腺 B．法氏囊 C．脾脏 D．淋巴结 E．骨髓 3．免疫细胞产生、发育、分化成熟的场所是： A．淋巴结和脾脏 B．胸腺和骨髓 C．淋巴结和胸腺 D．骨髓和粘膜相关淋巴组织 E．淋巴结和骨髓 4．周围免疫器官是 A．淋巴结、脾脏、胸腺 B．胸腺、淋巴结、粘膜组织 C．脾脏、淋巴结、粘膜相关淋巴组织 D. 骨髓和粘膜相关淋巴组织 E. 扁桃体、淋巴结和骨髓 5．周围免疫器官不包括： A．骨髓 B．淋巴结 C．粘膜免疫系统 D．胸腺 E．脾脏 6．T细胞分化成熟的场所是 A．骨髓 B．胸腺 C．法氏囊 D．脾脏 E．淋巴结 7．B细胞定主要居于淋巴结的哪个区域 A．皮质区 B．副皮质区 C．深皮质区 D．浅皮质区 E．髓窦 8．T细胞和B细胞定居的场所是： A．骨髓 B．周围免疫器官 C．中枢免疫器官 D．胸腺 E．腔上囊 9．T细胞和B发生免疫应答的场所是： A．骨髓 B．周围免疫器官 C．中枢免疫器官 D．胸腺 E．血流 10．切除胸腺的新生鼠的淋巴结中缺乏何种细胞 A．巨噬细胞 B．B淋巴细胞 C．T淋巴细胞
免疫细胞分离及检测技术
第十三章免疫细胞分离及检测技术 本章考点 1.免疫细胞的分离 2.淋巴细胞表面标志的检测 3.淋巴细胞功能检测技术 4.免疫细胞检测的临床意义 第一节免疫细胞的分离 一、外周血单个核细胞的分离 1.原理：外周血中单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）的比重与红细胞、多核白细胞及血小板不同，介于1.075～1.090之间，红细胞及粒细胞在1.092左右，血小板在1.030～1.035之间。因而可利用一种比重介于1.075～1.092之间，而近于等渗的溶液作密度梯度离心，使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。 2.试剂：常用的分层液有Ficoll与Percoll两种 （1）Ficoll分层液法：主要用于分离外周血中单个核细胞，是一种单次密度梯度离心分离法，其分布由上到下依次为：稀释的血浆层，单个核细胞层，粒细胞层和红细胞层。Ficoll分层液即聚蔗糖-泛影葡胺，是一种较理想的细胞分层液，其主要成分是一种合成的蔗糖聚合物，具有高密度、低渗透压、无毒性的特点。操作时，将分层液置于试管下层，然后将肝素化的全血或白细胞悬液以Hanks或PBS液稀释后，轻轻铺于分层液面上，经2000rpm15-20min离心后，红细胞与粒细胞因比重大于分层液，故较快沉于管底。血小板则比重小于分层液而悬浮于血浆中。唯有与分层液比重相当的单核细胞和淋巴细胞密集于血浆层和分层液的界面中。其分布由上到下依次为：稀释的血浆层，单个核细胞层，粒细胞层和红细胞层。见下图。 图聚蔗糖-泛影葡胺分层液密度梯度离心法外周血小分布示意图 引自陶义训主编：免疫学和免疫学检验，人民卫生出版社1995年9月第1版第4次印刷 （2）Percoll分层液法：是一种连续密度梯度离心分离法，其分布由上至下依次为：死细胞层，富含单核细胞组分层，富含淋巴细胞的组分层及红细胞与粒细胞组分层。 图连续密度梯度离心法分离单个核细胞中各细胞成分的分布示意图 引自陶义训主编：免疫学和免疫学检验，人民卫生出版社1995年9月第1版第4次印刷
免疫细胞的分离及其表面标志检测技术题库1-0-8
免疫细胞的分离及其表面标志检测技术题 库1-0-8
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]从单个核细胞中去除单核细胞最便捷的方法是（） A.E花环沉淀法 B.尼龙棉吸附法 C.亲和板结合法 D.黏附贴壁法 E.免疫磁珠 单核细胞具有黏附玻璃、塑料、尼龙毛的特性，通过黏附贴壁法可去除单个核细胞中的单核细胞，从而获得纯淋巴细胞。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]能长期保存分离细胞的方法是（） A.含10%～20%灭活小牛血清的Hanks B.液氮深低温（-196℃）保存 C.Tc-199 D.RPMI1640 E.4℃保存 液氮深低温-196℃能长期保存分离细胞，需加入二甲亚砜作为保护剂。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]哪一种分化抗原又称作绵羊红细胞受体（） A.CD2 B.CD3 C.CD4 D.CD8 E.CD28 CD2表达于全部人T细胞和NK细胞表面，因其能与绵羊红细胞结合，又称绵羊红细胞受体。https://www.360docs.net/doc/3214217505.html,/ 英超直播
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]细胞毒T细胞的标志性抗原为（） A.CD3+、CD4+、CD8+ B.CD3+、CD4+、CD8- C.CD3+、CD4+、CD25+ D.CD3-、CD4-、CD8+ E.CD3+、CD4-、CD8+ CD3+、CD4-、CD8+为细胞毒T细胞；CD3+、CD4+、CD8+为辅助性T细胞；CD3+、CD4+、CD25+为调节性T细胞。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]单核巨噬细胞的典型的表面标志是（） A.CD2 B.CD3 C.CD14 D.CD16 E.CD28 单核巨噬细胞的典型的表面标志是CD14。
第2章 免疫组织和器官
第二章免疫器官和组织 免疫系统（immune system）是机体执行免疫应答及免疫功能的一个重要系统。免疫系统由免疫器官和组织、免疫细胞（如造血干细胞、抗原提呈细胞、淋巴细胞、NK细胞、粒细胞、肥大细胞、红细胞等）及免疫分子（如免疫球蛋白、补体、各种细胞因子和膜分子等）组成。本章重点介绍免疫器官和组织的结构与功能，免疫细胞和免疫分子将在后续相关章节介绍。 免疫组织（immune tissue）又称为淋巴组织（lymphoid tissue）。淋巴组织在人体内分布广泛，其中胃肠道、呼吸道、泌尿生殖道等黏膜下含有大量非包膜化的弥散淋巴组织（diffuse lymphoid tissue）和淋巴小结（lymphoid nodule），在黏膜局部抗感染免疫中发挥主要作用。淋巴组织是胸腺、脾、淋巴结等包膜化淋巴器官（lymphoid organ）的主要组分。淋巴器官因具有免疫功能，又被称为免疫器官（immune organ）。 免疫器官按其发生和功能不同，可分为中枢免疫器官和外周免疫器官（图2-1），二者通过血液循环及淋巴循环互相联系。中枢免疫器官发生较早，由骨髓和胸腺组成，多能造血干细胞在中枢免疫器官发育为成熟免疫细胞，并通过血液循环输送至外周免疫器官。外周免疫器官发生相对较晚，由淋巴结、脾及黏膜相关淋巴组织等组成，成熟免疫细胞在这些部位定居，并在接受抗原刺激后产生免疫应答。 淋巴细胞和单核细胞经血液循环和淋巴循环进出外周免疫器官和组织，构成免疫系统的完整网络，既能及时动员免疫细胞，使之聚集于皮肤及内脏各处病原体等抗原存在部位，又能使这些部位的抗原经抗原提呈细胞摄取并携带至相应外周免疫器官或组织，进而活化T细胞或B细胞，从而发挥适应性免疫应答及效应作用。 第一节中枢免疫器官和组织 中枢免疫器官（central immune organ）或称初级淋巴器官（primary lymphoid organ），是免疫细胞发生、分化、发育和成熟的场所。人或其他哺乳类动物的中枢免疫器官包括骨髓和胸腺。鸟类的腔上囊（法氏囊）是B细胞分化发育的场所。 一、骨髓 骨髓（bone marrow）是各类血细胞和免疫细胞发生及成熟的场所，是机体重要的中枢免疫器官。 （一）骨髓的结构与造血微环境 骨髓位于骨髓腔中，分为红骨髓和黄骨髓。红骨髓具有活跃的造血功能，由造血组织和
免疫器官的结构 细胞(结构基础)
层次一：免疫器官的结构与功能
层次二：免疫细胞（immunocyte）：是指所有参与免疫应答或与之有关的细胞。广义的免疫细胞包括所有参与免疫应答和免疫效应的细胞,均来自于造血干细胞 淋巴细胞归巢与再循环
层次三：免疫分子——根据其存在的状态可以分为膜分子及分泌性分子 T淋巴细胞 T细胞来源于骨髓，成熟于胸腺。 T淋巴细胞在胸腺中经历阳性选择与阴性选择，获得MHC限制性识别能力和自身耐受性。
双阴性细胞（CD4-CD8-)(DN） 双阳性T细胞(CD4+CD8+)(DP) 阳性选择positive selection——获得限制性识别能力 MHC-I(CD8)/MHC-II(CD4)——存活 单阳性T细胞(CD4+或CD8+)(SP）【胸腺皮质】 阴性选择negative selection——获得（中枢）自身耐受性 MHCI自身肽MHCII自身肽——凋亡 成熟T细胞【胸腺皮髓交界处】 血液循环——【外周免疫器官】 ▲过程：双阴性细胞→双阳性细胞→阳性选择→阴性选择→成熟的单阳性细胞 ▲意义：胸腺细胞分化发育为成熟T细胞，表达功能性TCR；属CD4或CD8单阳性细胞；具有MHC限制性识别能力；具免疫耐受 T细胞表面分子及其作用 T细胞重要的表面标志包括：TCR-CD3、CD4、CD8、CD28、丝裂原受体等。参与T 细胞识别抗原，T细胞活化，增殖分化，以及效应功能的发挥。根据其中一些膜分子作为区分T细胞及T细胞的亚群的标志。 TCR-CD3复合物T细胞识别抗原和转导信号主要单位。TCR特异识别是由MHC分子提呈的抗原肽，CD3是转导T细胞活化第一信号 TCR是T细胞特有的表面标志，属IgSF成员。根据TCR异二聚体的不同组成，可将其分为TCRαβ和TCRγδ两种类型。 CD3由五种肽链组成，即γ、δ、ε、ζ、η，均能转导TCR的信号（胞浆区内均有ITAM）。 CD4和CD8分子CD4和CD8分子属T细胞辅助受体（co-receptor）,IgSF成员。 分别与MHCⅡ类和MHC-Ⅰ类分子非多态区结合，这既加强了T细胞与APC 或者与靶细胞的相互作用，又参与了抗原刺激TCR-CD3信号转导。此外，参与T细胞在胸腺内的发育成熟及分化。 协同（辅助）信号分子
免疫功能评估报告
免疫功能评估 解读 重庆斯德姆生物技术有限公司干细胞与再生医学技术研究院重庆再生医学与健康技术研究院
2018 年美国免疫学家詹姆斯·艾利森(James P.Alison) 和日本免疫学家本庶佑 (Tasuku Honjo) 因为在抑制消极免疫调节机制的研究 中发现了新癌症疗法作出的贡献，荣获年度诺贝尔生理学或医学奖。 詹姆斯·艾利森发现阻断CTLA-4 能够激活免疫系统的T 细胞，激活的 T 细胞会重新攻击癌细胞。 本庶佑首先鉴定PD-1 为活化 T 淋巴细胞上的诱导型基因，这一发现为 PD-1 阻断建立癌症免疫治疗原理作出了重大贡献。曾在201 3 年被《 Science 》评为年度十大科学突破之首。
2011 年美国免疫学家和遗传学家布鲁斯·博伊特勒(Bruce A.Be utler) 、卢森堡科学家朱尔斯·霍夫曼 (Jules A.Hoffmann) 和加拿大生 物学家拉尔夫·斯坦曼(Ralph M.Steinman) 三名科学家发现免疫系统 激活的关键原理，革命性地改变人们对免疫系统的理解，从而分享年 度诺贝尔医学奖。 布鲁斯·博伊特勒和朱尔斯·霍夫曼发现了关键受体蛋白质， 称为Toll 样受体（ Toll-like receptors ， TLR ）。 拉尔夫·斯坦曼在上世纪 70 年代第一个发现 DC(树突状细胞 )。D C 是目前已知功能最强大的专职抗原递呈细胞，具有强大的活化T 细胞能力，在获得性免疫启动中发挥重要的“信使”作用，从而引起一系列反应，制 造出抗体和“杀手”细胞等“武器”杀死被感染的细胞以及入， 侵的病原体。
〉〉〉安全防御系统 居家地点不同，保护住家安全的方法就不同。有些公寓有看门卫，有些房子建有栅栏，如果你有城堡，就需要配备一条护城河和一支弓箭部队，或者你可以选择其他一些特殊的家庭防御装置，比如安装锁、电子安全系统，养一只狗。 无论你选择的防御方法是什么，输入通行密码也好，用链条拴门也罢，还是要那种看门护院狗，其中的原因都在于你想要一个的安全 系统来保护你家里所有有价值的东西，从相册、立体声音响设备到传 家宝以及孩子们。 你的身体内也有自己的安全体系来抵御入侵者。皮肤和骨骼能在车祸中或是遇到打偏的高尔夫球时保护体内器官，头发保护头皮不受 紫外线侵害，眼睑保护眼球以防伸向眼睛的指头，但是你体内最重要 的安全系统是一个隐形的系统，你无法感觉或是看见它，而它却承担着抵御入侵病原体和帮助你康复的重任，这个系统就是人体的防御系统。 〉〉〉人体防线 人体有三道防线构成的防御系统，主要功能是抵御病原体的攻击。是由皮肤、黏膜、黏膜分泌物、杀菌物质 (如溶菌酶 )、免疫器官、免疫细胞、免疫活性物质等构成。 第一道防线 是由皮肤和黏膜构成的，他们不仅能够阻挡病原体侵入人体，而
免疫细胞的分离和保存技术
免疫细胞的分离和保存技术 用体外方法对机体各种具有免疫反应的细胞分别作鉴定、计数和功能测定，是观察机体免疫状态的一种重要手段。为此，须将各种参与免疫反应的细胞从血液或脏器中分离出来。参与免疫反应的细胞主要包括淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等。由于检测的目的和方法有同，分离细胞的需求和技术也异。有的仅需分离白细胞，有的则需分离单个核细胞（mononuclearcell），其中含淋巴细胞和单核细胞（monocyte），有的则需分离T细胞和B细胞以及其亚群。分离细胞选用的方法应力求简便可行，并能获得高纯度、高获得率、高活力的细胞。现用分离细胞群的原则，一是根据各类细胞的大小、沉降率、粘附和吞噬能力加以组分，另一则按照各类细胞的表面标志，包括细胞表面的抗原和受体加以选择性分离。 一、白细胞的分离 （一）血液中红细胞与白细胞比例约600～1000:1，两者的比重不同其沉降速度亦异，通常用两种方法加以分离。 本法是利用血细胞自然沉降率的分离法，采集血液后应及时抗凝，通常选用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血酶原转化为凝血酶，从而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白而防止血液凝固。操作原则是将含抗凝血的试管直立静置室温30～60min 后，血液分成明显三层，上层为淡黄色血浆，底层为红细胞，紧贴红细胞层上面的灰白层为白细胞，轻轻吸取即得富含白细胞的细胞群，离心洗涤后加入少量蒸馏水或含氯化铵的Gey溶液，经短时间的低渗处理，使红细胞裂解，经过反复洗涤可得纯度较高的白细胞悬液。 （二）聚合物加速沉淀法 本法是利用高分子量的聚合物如明胶、右旋糖酐、聚乙烯吡喀烷酮（polyvinylpyrolidone，PVP）等使红细胞凝集成串，加速红细胞沉降，使之与白细胞分离。本法的细胞获得率比自然沉降法高。 二、外周血单个核细胞的分离 外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞密度较大，为1.090左右，而淋巴细胞和单核细胞密度为 1.075～1.090，血小板为 1.030～1.035。为此利用一种密度介于1.075～1.092之间而近于等渗的溶液（分层液）做密度梯度离心，使一定密度的
医学免疫学考试题库重点带答案_第2章免疫器官和组织
第二章免疫器官和组织 一、单项选择 1. 属于人类中枢免疫器官的是： A．阑尾B．淋巴结C．骨髓D．脾E．扁桃体 2. 人类B 淋巴细胞分化成熟的部位是： A．胸腺B．淋巴结C．骨髓D．法氏囊（腔上囊）E．脾脏 3. 人类T 淋巴细胞分化成熟的部位是： A．骨髓B．胸腺C．法氏囊（腔上囊）D．淋巴结E．脾脏 4. 人体免疫细胞产生、发育、分化成熟的场所是： A. 胸腺和淋巴结 B. 骨髓和黏膜免疫系统 C. 淋巴结和脾 D. 胸腺和骨髓 E. 脾和胸腺 5. 人类B 淋巴细胞是在下列哪种免疫器官发育成熟的： A. 脾脏 B. 骨髓 C. 法氏囊 D. 胸腺 E. 卵黄囊 6. 属于人造血干细胞标记之一的是： A. CD16 B. CD2 C. CD3 D. CD21 E. CD34 7. T 细胞分化发育的中枢免疫器官是： A．淋巴结B．胸腺C．脾脏D．法氏囊E. 黏膜相关淋巴组织 8. T 细胞分化、发育、成熟的场所是： A. 骨髓 B. 黏膜免疫系统 C. 淋巴结 D. 胸腺 E. 脾 9. 与脾脏不相关的是： A. T、B 细胞定居的场所 B. 合成某些生物活性物质 C. 过滤作用 D. 存在M 细胞 E. 免疫应答发生的场所 10. 新生儿先天性胸腺缺陷时： A. 细胞免疫功能正常,体液免疫功能正常 B. 细胞免疫功能缺陷,体液免疫功能升高 C. 细胞免疫功能缺陷,体液免疫功能正常 D. 细胞免疫功能缺陷,体液免疫功能下降 E. 细胞免疫功能正常,体液免疫功能下降 11. 实验发现鸡切除腔上囊后： A. 细胞免疫功能缺陷,体液免疫功能正常 B. 细胞免疫功能正常,体液免疫功能正常 C. 细胞免疫功能正常,体液免疫功能升高 D. 细胞免疫功能缺陷,体液免疫功能下降 E. 细胞免疫功能正常，体液免疫功能下降 12. 哺乳类动物的中枢免疫器官包括： A. 淋巴结和脾脏 B. 胸腺和骨髓 C. 腔上囊和胸腺 D.骨髓和黏膜相关淋巴组织 E. 淋巴结和骨髓 13. 外周免疫器官包括： A. 骨髓、淋巴结、脾脏Ｂ. 胸腺、脾脏、黏膜相关淋巴组织 Ｃ. 腔上囊、扁桃体、淋巴结Ｄ. 脾脏、淋巴结、黏膜相关淋巴组织 Ｅ. 扁桃体、骨髓、淋巴结 14. 绝大多数T 细胞分化成熟的场所是： A. 骨髓 B. 腔上囊 C. 脾脏 D. 胸腺 E. 淋巴结 15. 人类B 细胞分化成熟的场所是： A. 骨髓 B. 腔上囊 C. 脾脏 D. 胸腺 E. 淋巴结 16. 成熟免疫细胞寄居的场所是： A. 胸腺 B. 胰腺 C. 腔上囊 D. 卵黄囊 E. 脾脏
免疫器官的结构 细胞(结构基础)
层次二：免疫细胞（immunocyte）：是指所有参与免疫应答或与之有关的细胞。广义的免疫细胞包括所有参与免疫应答和免疫效应的细胞,均来自于造血干细胞 淋巴细胞归巢与再循环
分泌性分子由免疫细胞合成并分泌于胞外体液中的免疫效应分子，包括抗体分子、补体分子和细胞因子等 膜分子 存在细胞膜表面的抗原或受体分子免疫细胞间或免疫系统与其它系统（如神经系统、内分泌系统等）细胞间信息传递、相互协调与制约的活性介质，包括TCR、BCR、MHC分子、CD分子及细胞粘附分子（AM）等 T淋巴细胞T 骨髓（生发）胸腺（成熟）淋巴结，脾 （胸腺依赖区）发挥效应（效应T细胞，记忆T细胞） 祖T细胞→胸腺细胞→成熟T细胞→周游全身（淋巴细胞再循环） 双阴性细胞（CD4-CD8-)(DN） 双阳性T细胞(CD4+CD8+)(DP) 阳性选择positive selection——获得限制性识别能力 MHC-I(CD8)/MHC-II(CD4)——存活 单阳性T细胞(CD4+或CD8+)(SP）【胸腺皮质】 阴性选择negative selection——获得（中枢）自身耐受性 MHCI自身肽MHCII自身肽——凋亡 成熟T细胞【胸腺皮髓交界处】 血液循环——【外周免疫器官】 ▲过程：双阴性细胞→双阳性细胞→阳性选择→阴性选择→成熟的单阳性细胞 ▲意义：胸腺细胞分化发育为成熟T细胞，表达功能性TCR；属CD4或CD8单阳性细胞；具有MHC限制性识别能力；具免疫耐受 T细胞表面分子及其作用 T细胞重要的表面标志包括：TCR-CD3、CD4、CD8、CD28、丝裂原受体等。参与T细胞识别抗原，T细胞活化，增殖分化，以及效应功能的发挥。根据其中一些膜分子作为区分T细胞及T细胞的亚群的标志。 TCR-CD3复合物T细胞识别抗原和转导信号主要单位。TCR特异识别是由MHC分子提呈的抗原肽，CD3是转导T细胞活化第一信号TCR是T细胞特有的表面标志，属IgSF成员。根据TCR异二聚体的不同组成，可将其分为TCRαβ和TCRγδ两种 类型。 CD3由五种肽链组成，即γ、δ、ε、ζ、η，均能转导TCR的信号（胞浆区内均有ITAM）。 CD4和CD8分子CD4和CD8分子属T细胞辅助受体（co-receptor）,IgSF成员。 分别与MHCⅡ类和MHC-Ⅰ类分子非多态区结合，这既加强了T细胞与APC或者与靶细胞的相互作用，又参与了抗原 刺激TCR-CD3信号转导。此外，参与T细胞在胸腺内的发育成熟及分化。 协同（辅助）信号分子 CD28 B7-1/B7-2 结合后由CD28转导为第二活化信号 LFA—2即CD2分子，又名绵羊红细胞（SRBC）受体LFA—3（CD58） CD59和CD48 CD2分子既能介导T细胞旁路激活途径，又能介导效应阶段激活途径 CTLA—4（CD152）CD80（B7.1） CD86（B7.2）由活化的T细胞表达，其结构与CD28分子高度同源，CD28和CTLA—4的天然配体均为。CTLA—4与CD80/CD86的亲和力显著高于CD28，因其胞浆内区有ITIM，给予已活化T细胞抑制信号 CD40L（CD154）其配体为CD40 属Ⅱ型跨膜蛋白，主要表达于活化的CD4+T细胞和CD8+T细胞 功能：①作为协同信号参与对B细胞的应答，参与TD—Ag诱发的免疫应答；②诱 导记忆性B细胞形成；
第二十四章免疫细胞的分离与检测Chapter24SeparationandAssays
第二十四章免疫细胞的分离与检测 Chapter 24 Separation and Assays for Immunocyte 第一部分教学内容和要求 一、目的要求 ·掌握：Ficoll-hypaque分层液分离PBMC的原理、方法，淋巴细胞亚群分离的原理、方法及应用，T细胞增殖试验的方法，B细胞的数量及功能的检测，NK细胞的活性、中性粒细胞、巨噬细胞功能的检测方法；熟悉：T细胞功能的体内试验、T细胞介导的细胞毒检测的方法；了解：淋巴细胞的纯化与亚群分离的方法、吞噬细胞的分离方法、溶血空斑试验。 二、教学内容 1。免疫细胞的分离与纯化：细胞的分离，外周血单个核细胞的分离，淋巴细胞的纯化与亚群分离，吞噬细胞的分离。 2。淋巴细胞的数量检测：T细胞数量检测，B细胞数量检测。 3。淋巴细胞的功能检测：T细胞功能检测，B细胞功能检测，NK细胞活性测定。 4．吞噬细胞功能检测：中性粒细胞功能检测，巨噬细胞功能检测。 第二部分测试题 一、选择题 （一）单项选择题（A型题） 1．外周血中的单个核细胞主要是指 A．淋巴细胞B．嗜酸性粒细胞C．单核细胞-淋巴细胞 D．单核细胞E．中性粒细胞 2．分离人外周血淋巴细胞分层液的最佳密度为 A．1.030 B．1.035 C．1.092 D．1.020 E．1.077 3．用Ficoll-hypaque分层液分离PBMC，分离的PBMC层位于试管的 A．血浆层之上B．血浆层之中C．血浆层与分层液之间 D．分层液之中E．试管底部 4．用玻璃纤维或葡聚糖凝胶Sephadex-G10柱分离细胞时，从柱上洗脱下的细胞主要是A．粒细胞B．淋巴细胞C．单核细胞D．T细胞E．B细胞 5．能与SRBC结合形成E花环的细胞主要是 A．T细胞B．B细胞C．单核细胞D．粒细胞E．血小板 6．用小鼠抗人CD3单克隆抗体检测T细胞，其结果代表的是 A．T细胞总数B．Th细胞数C．Ts细胞数D．CD4+细胞数E．CD8+细胞数 7．用尼龙棉柱分离细胞时，不易黏附尼龙棉纤维而被洗脱的细胞是： A．粒细胞B．B细胞C．单核细胞D．T细胞E．血小板 8．表示淋巴细胞的活力常用 A．活淋巴细胞占总淋巴细胞的百分比B．活细胞浓度C．淋巴细胞浓度 D．活细胞和总细胞的比值E．T细胞和B细胞的比例
第二章免疫器官
一、填空题 1．免疫器官按其功能不同，可分为 ________和_______，二者通过_________和_______互相联系。 2．中枢免疫器官是免疫细胞发生、分化、发育、成熟的场所，包括________和_______；外周免疫器官包括_______、_______、_______和_______ 3．胸腺是 _______细胞分化、成熟的场所，骨髓是_______细胞分化发育的场所。 4．_______是成熟T细胞、B细胞等免疫细胞定居的场所，也是产生_______的场所。 5．淋巴结的浅皮质区称为_______,是_______定居的场所；深皮质区为_______,是_______ 定居的场所 二、多选题 [A型题] 1．人类的中枢免疫器官是： A．淋巴结和脾脏 B．胸腺和骨髓 C．淋巴结和胸腺 D．骨髓和粘膜相关淋巴组织 E．淋巴结和骨髓 2．人体中体积最大的免疫器官 A．胸腺 B．法氏囊 C．脾脏 D．淋巴结 E．骨髓 3．免疫细胞产生、发育、分化成熟的场所是： A．淋巴结和脾脏 B．胸腺和骨髓 C．淋巴结和胸腺 D．骨髓和粘膜相关淋巴组织 E．淋巴结和骨髓 4．周围免疫器官是 A．淋巴结、脾脏、胸腺 B．胸腺、淋巴结、粘膜组织 C．脾脏、淋巴结、粘膜相关淋巴组织
D. 骨髓和粘膜相关淋巴组织 E. 扁桃体、淋巴结和骨髓 5．周围免疫器官不包括： A．骨髓 B．淋巴结 C．粘膜免疫系统 D．胸腺 E．脾脏 6．T细胞分化成熟的场所是 A．骨髓 B．胸腺 C．法氏囊 D．脾脏 E．淋巴结 7．B细胞定主要居于淋巴结的哪个区域 A．皮质区 B．副皮质区 C．深皮质区 D．浅皮质区 E．髓窦 8．T细胞和B细胞定居的场所是： A．骨髓 B．周围免疫器官 C．中枢免疫器官 D．胸腺 E．腔上囊 9．T细胞和B发生免疫应答的场所是： A．骨髓 B．周围免疫器官 C．中枢免疫器官 D．胸腺 E．血流 10．切除胸腺的新生鼠的淋巴结中缺乏何种细胞 A．巨噬细胞 B．B淋巴细胞 C．T淋巴细胞 D．干细胞 E．粒细胞 11．胸腺细胞是指 A ．胸腺中未成熟的前T细胞 B．胸腺上皮细胞 C．巨噬细胞 D．胸腺树突状细胞E．成纤维细胞
小鼠免疫组织及免疫细胞的观察
小鼠免疫组织及免疫细胞的观察 【实验原理】 免疫器官、组织及细胞是机体免疫系统的重要组成部分。中枢免疫器官包括胸腺和骨髓，是T淋巴细胞及其他各类免疫细胞发生、发育和分化的场所，外周免疫器官包括脾胀、淋巴结和粘膜相关淋巴组织是免疫应答的场所。各类免疫细胞直接参与免疫系统对抗原类物质的免疫应答，完善的免疫器官组织结构和正常的免疫细胞种类和数量是机体免疫功能发挥正常的基本条件。 【试剂和器材】 小鼠、棉签、解剖台、平皿、大头针、手术剪子、手术镊子、载玻片、瑞士染液、细胞筛 【操作方法】 1.取一只小鼠，采用颈部脱臼法处死，将小鼠放到解剖台上，沿腹中线剪开皮肤且不破坏腹膜和胸膜，剪开腹膜，打开腹腔和胸腔，观察胸腺所在的位置和形状。 2.分离脾细胞：取出脾胀，去除其周围的脂肪组织，用剪子剪碎脾脏，放入细胞筛中，用载玻片清研脾胀，滴加生理盐水，使脾细胞分散成细胞悬液。 3.脾细胞染色观察：取少量细胞悬液置于载玻片上，与室温晾干，加瑞士染色液甲染色1min，甩掉染液，用瑞士染色液乙染色5min，用自来水冲洗，让染液漂走，置于光学显微镜
下观察染色脾细胞。 【结果观察】 小鼠脾细胞瑞士染色镜下观察 【注意事项】 1.正确抓取小鼠，防止被鼠咬伤。 2.脾脏分离完整，清研轻柔。 3.染色时间不宜过长或过短。. 【讨论】 脾脏具有多种重要的生理功能, 参与并调节血液、免疫、内分泌系统的运转, 绝非可有可无;脾脏功能在疾病的不同阶段扮演不同的角色,有时甚至完全相反, 即具有双向性、时向性的特点。 1.脾切除术后暴发性感染全脾切除术后OPSI 的发生率约为1 %～ 2.4 %。虽然OPSI的发生率不是很高,但脾脏
免疫检测点介绍
（一）免疫检测点简介 “免疫检验点”，为抑制受体和抑制信号通路，这些“检验点”在正常情况下能抑制T 细胞的功能，同时在肿瘤组织中可能被肿瘤利用形成免疫逃逸。 PD-1 、PD-L1、CTLA-4、B 和T 细胞衰减器（B and T cellattenuator，BTLA）、T 细胞免疫球蛋白以及Tim-3 等分子均属于“检验点”分子，在肿瘤组织中可能被肿瘤利用形成免疫逃逸，它们通过控制胞外以及胞内信号来控制细胞周期进程。 淋巴细胞活化基因3（LAG-3）是表达在活化T细胞、NK细胞及 B细胞上的免疫抑制检验点分子。目前已知的唯一配体是MHC-II分子。 NK细胞表面存在杀伤抑制受体（KIRs，可抑制NK细胞的杀伤作用），在肿瘤微环境中可能会被诱导表达，从而抑制NK细胞的杀伤功能。因此，KIRs也被认为是免疫抑制检验点，通过阻断其信号可增强NK细胞的杀伤肿瘤的功能[53]。目前已有针对KIRs单抗进入临床实验（lirilumab单抗治疗急性粒细胞白血病已进入I期临床实验）很多免疫抑制检验点在肿瘤细胞中与PD-1/PD-L1共表达，另一方面，免疫抑制检验点的联合阻断中可供选择的目标增多有利于筛选出最佳组合从而达到最佳效果。 （二）临床常用的检测点 “程序性死亡分子1”（programmed deah-1，PD-1）和“细胞毒T淋巴细胞相关抗原4”（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4，CTLA-4）表达在T细胞表面，同属于抑制性共刺激分子，在免疫系统
中扮演着类似“刹车”的角色。 CTLA的配体（即CD80和CD86）只表达在抗原递呈细胞上，而非肿瘤细胞表面，因此CTLA-4抑制T细胞活化发生在次级免疫器官（淋巴结）内，而不是肿瘤微环境中。同时CTLA-4主要表达在CD4+ T细胞而非CD8+ T细胞，CTLA-4单抗的抗肿瘤作用可能是通过增强CD4+ T细胞间接促进CD8+ T细胞的功能。 不同于CTLA-4的是，PD-1的配体PD-L1在肿瘤细胞及肿瘤浸润淋巴细胞上均有表达，而不是在抗原递呈细胞上，因此PD-1/PD-L1抑制T细胞活化主要在肿瘤微环境中[5-7]。目前，在肺癌领域研究得比较多的免疫检验点抑制剂有抗PD-1（Nivolumab，Pembrolizumab）和PD-L1单抗（MPDL3280A和MEDI-4736）。 PD-L1仍然是现阶段PD-1/PD–L1类药物最有前景的预测疗效的生物标记物之一 在黑色素瘤相关研究中发现，抗PD-1抗体的疗效要好于抗CTLA-4抗体。在NSCLC，CTLA-4抗体单药治疗鲜有疗效，而PD-1/PD-L1阻断剂的单药均表现出肿瘤活性。 PD-1有两个配体，PD-L1和PD-L2；PD-L1有两个受体PD-1和CD80（B7.1）。所以，尽管抗PD-1抗体和抗PD-L1抗体都作用于PD-1/PD-L1信号轴，但阻断PD-1并不等同于阻断PD-L1。抗PD-1抗体能阻断PD-1与PD-L1、PD-L2结合，却不能阻断PD-L1与CD80相互作用，而抗PD-L1抗体能阻断PD-L1与PD-1、CD80结合，却不能阻断PD-1与PD-L2的结合。
细胞免疫功能测定
项目14：细胞免疫功能测定 【目的要求】 1、熟悉非特异性免疫细胞功能的测定方法 2、了解特异性免疫细胞的测定方法和应用 【实验内容】 一、吞噬细胞吞噬功能测定 【原理】 具有吞噬功能的细胞称为吞噬细胞，包括小吞噬细胞和大吞噬细胞二类。小吞噬细胞一般指血液中的中性粒细胞，大吞噬细胞则是存在于组织中的巨噬细胞和血液中的大单核细胞。 病原微生物、红细胞等异物侵入机体或在体外与吞噬细胞接触，吞噬细胞即进行吞噬。取细胞作涂片，镜检计算吞噬百分率和吞噬指数，可估计吞噬细胞的吞噬功能。吞噬细胞（巨噬细胞）在体液免疫和细胞免疫中均起着重要作用，吞噬细胞（巨噬细胞）与抗肿瘤免疫也有重要的关系。因此，测定吞噬细胞的吞噬和消化功能，可在一定程度上反映机体的免疫状态，也可作为判断疗效的指标之一。 【实验动物与试剂】 1、实验动物：小白鼠 2、实验试剂：无菌生理盐水、5%无菌可溶性淀粉溶液、瑞氏染液、白色葡萄球菌培养物 3、实验器材：无菌注射器、吸管、载玻片、解剖器械、显微镜等。 【方法】 1、试验前3天，小鼠腹腔注射5%无菌可溶性淀粉溶液1ml。 2、试验当天，小鼠腹腔注射1mL白色葡萄球菌悬液。 3、注射后30min，断颈处死小鼠，仰位固定小鼠，正中剪开腹部皮肤，吸出腹腔液制定涂片，自然干燥后瑞氏染液染色。 4、瑞氏染液染色：在涂片上滴3~5滴瑞氏甲液，30~60sec后,滴加瑞氏乙液,并用洗耳球吹数下,将乙液与甲液充分混均,5~10min后,水洗,干燥,镜检. 5、镜检：低倍对光，用油镜下观察巨噬细胞吞噬细菌的情况。 【结果观察】 1、吞噬细胞吞噬现象镜下观：如染色结果正确，可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色，而白细胞浆则为淡红色。 2、吞噬细胞吞噬功能的测定 （1）吞噬百分率：观察100个吞噬细胞，计数被吞噬百分率以表示吞噬