酶工程习题96567

第一章

习题：

1、根据分子中起催化作用的主要组分的不同，酶可以分为_______和_______两大类别。

2、核酸类酶分子中起催化作用的主要组分是________，蛋白类酶分子中起催化作用的主要组分是___________。

3、进行分子内催化的核酸类酶可以分为_______，_______。

4、酶活力是_____的量度指标；酶的比活力是__________的量度指标；酶转换数是________的量度指标。

5、某酶的分类编号是EC2.2.1.10，其中EC是指_______。此酶属于_______类型。

6、醇脱氢酶参与的反应表明无氧气参与（）

7、酶工程是_____________的技术过程。

8、酶的转换数是指（）

A、酶催化底物转化为产物的数量

B、每个酶分子催化底物转化为产物的分子数

C、每个酶分子每分钟催化底物转化为产物的分子数

D、每摩尔酶催化底物转化为产物的分子数

9、酶的改性是指____________________________.

第二章

1、名词解释

转录、组成型酶、酶的反馈阻遏、分解代谢物阻遏、生长偶联型

2、微生物产酶模式可以分为同步合成型________、中期合成型、________。

3、可以通过添加（）使分解代谢物阻遏作用解除。

A、诱导物 B 激活剂 C、cAMP D、ATP

4、在酶发酵过程中添加表面活性剂可以

A、诱导酶的生物合成

B、阻遏酶的生物合成

C、提高酶活力

D、提高细胞通透性

5、为什么滞后合成型的酶要在细胞生长一段时间甚至进入平衡期以后才开始合成？

6、操纵子是由_________、_______和启动基因组成的。

7______________和______是影响酶生物合成模式的主要因素。

8、RNA前体的加工是指____________

6、从如下实验方法和结果分析酶生物合成的调节作用。

实验方法：将大肠杆菌细胞接种于营养肉汤培养基中，于37°C振荡培养，当OD550为0.3时，经培养液分装到4个小三角瓶中，每瓶17ml培养液。于4个三角瓶分别添加

（A）3ml无菌水

（B）1ml乳糖溶液（0.1mol/L）和2ml无菌水

（C）1ml乳糖溶液（0.1mol/L）、1ml葡萄糖溶液（0.1mol/L）和1ml无菌水

（D） 1ml乳糖溶液（0.1mol/L）、1ml葡萄糖溶液（0.1mol/L）和1mlcAMP 钠盐溶液

然后在相同的条件下于37°C振荡培养2h，分别取样测定β-

半乳糖苷酶的活力。

实验结果（A）和（C）瓶的β-半乳糖苷酶的活力为0，（B）瓶和（D）瓶β-半乳糖苷酶的活力为1000U/ml左右

第三章

1、名词解释：抗体酶、端粒、端粒酶、半抗原

2、半抗原（）

A、可以诱导抗体生成，但不能与抗体特异结合

B、可以与抗体特异结合，但不能诱导抗体生成

C、可以诱导抗体产生，也可以与抗体特异结合

D、不能与抗体特异结合，也不能诱导抗体产生

3、端粒酶是

A、催化端粒水解的酶

B、存在于端粒中的酶

C、催化端粒生成和延长的酶

D、催化抗体生成的酶

第四章

1、细胞破碎的主要方法有机械破碎法、物理破碎法___________、____________。

2、利用生物分子与配基之间所具有的____________，使生物分子分离纯化.

3、分配层析是利用各组分在两相中的__________不同，而使各组分分离

4、酶的提取是（）的技术过程

A、从含酶物料中分离获得所需酶

B、从含酶溶液中分离获得所需酶

C、使胞内酶从含酶物料中充分溶解到溶剂或溶液中

D、使酶从含酶物料中充分溶解到溶剂或溶液中

5、下列细胞的机械破碎的方法种效果最好的是（）

A、匀浆法

B、捣碎法

C、酶促破碎法

D、研磨法

第五章

1、通过______________修饰，往往可以显著提高酶的稳定性。

2、定点突变技术是在DNA序列的_________进行碱基的改变从而获得________________的操作技术

3、写出焦碳酸二乙酯修饰咪唑基的反应式

4、氨基修饰（）的分子修饰

A 、只能用于核酸类酶

B、只能用于蛋白类酶

C、可以用于核酸类酶和蛋白类酶

D、不能用于核酸类酶和蛋白类酶

5、什么是大分子结合修饰？有何作用

6、通过___________和_________这两种修饰方法可以降低或消除药用酶的抗原性。

7、下列哪种修饰剂是通常所说的双功能试剂（）

A、丙二醛

B、丁二酮

C、戊二醛

D、1，2-环己二酮

8、下列那类侧链基团是最难被修饰的（）

A、氨基

B、巯基

C、吲哚基

D、咪唑基

（）只有以金属离子为激活剂的酶，才可以进行金属离子置换修饰

（）通过改变酶分子的空间构象而改变酶的催化特性的修

饰方法称为物理修饰法

（）定点突变技术是氨基酸置换修饰和核苷酸置换修饰的主要方法

（）某些RNA分子，经过核苷酸剪切修饰，可以成为核酸类酶

第六章

1、固定化酶是固定在载体上并在一定的空间范围内进行的酶。

2、固定化细胞是固定在载体上并在一定的空间范围内进行的细胞。

3、固定化原生质体是固定在载体上并在一定的空间范围内进行的原生质体。

4、酶催化反应的产物为酸性时，固定化酶最适pH比游离酶的最适pH，产物为碱性时，固定化酶的最适pH比游离酶的最适pH，产物为中性时，最适pH。

5、酶电极是由与密切结合的传感装置。

6、微载体和转瓶相比其最大的优点是_________.

7、动物细胞固定化方法中，应用最多的方法是_______________。

8、血纤维蛋白包埋法是进行______________固定化的一种方法。

9、人工种子的制备采用的固定化方法是___________.

1、用带负电荷的载体制备的固定化酶后，酶的最适pH（）。

A、向碱性一侧移动

B、向酸性一侧移动

C、不改变

D、不确定

2、氨基酰化酶可以催化（）。

A、D，L-氨基酸生成D-氨基酸和L-氨基酸

B、D,L-乙酰氨基酸水解生成D,L-氨基酸

C、L-乙酰氨基酸水解生成L-氨基酸

D、D-乙酰氨基酸水解生成D-氨基酸

3、酶催化反应的产物为碱性时，固定化酶的最适pH（）

A、比游离酶的最适pH高一些

B、比游离酶的最适pH低一些

C、与游离酶的最适pH相同

D、随机变化

4、制备酵母原生质体时主要采用（）

A、溶菌酶

B、果胶酶

C、B-1，4葡聚糖酶

D、B-1，3葡聚糖酶

5、下列哪种方法不是结合法中活化载体的

方法（）

A、重氮法

B、溴化氰法

C、交联法

D、烷化法（）

6、下列哪种物质不适用于原生质体固定化

A、海藻酸钙凝胶

B、光交联树脂

C、硅藻土

D、中空纤维

7、下列那种凝胶属于合成凝胶（）

A、角叉菜胶

B、明胶

C、聚酰胺膜

D、光交联树脂

8、下列哪种方法不属于结合法中载体的活化方法（）

A、重氮法

B、热处理法

C、烷基化法

D、溴化氰法

（）1、包埋法可以用于酶、细胞和原生质体的固定化。

（）2、固定化原生质体由于细胞内的结构完整，可以保持细胞原有的生命活动能力。

（）3、延胡索酸酶是催化延胡索酸水合反应的酶。

（）4、采用共价结合法制备得到的固定化细胞具有很好的稳定性。

( )5、聚丙烯酰胺凝胶在酶的固定化、微生物细胞的固定化和动物细胞固定化中所起的作用相同。

（）6、合成凝胶往往比天然凝胶具有更高的强度

1、试分析固定化酶与固定原生质体有哪些异同点？

2、举例说明酶电极的作用原理

3、试通过举例分析固定化动物、植物、微生物细胞的特点。

4、固定化氨基酰化酶生产L-氨基酸的工艺流程图

第七章

1、与在水介质中相比，酶在有机介质中的稳定性，催化活性。

2、非水介质主要包括有机介质，气相介质，超临界流体介质，。

3、有机溶剂的极性系数lgP越小，表明其极性，对酶活性的影响。

4、化学组成相同，立体结构互为对映体的两种异构体化合物称为。

5、脂肪酶可以催化油脂与甲醇进行反应，生成生物柴油。

6、如某旋光性样品是由一个对映体R 和S -异构体组成，R -异构体含量为45％，S -异构体的含量为55％，其ee%值为则为___________

7、一般来说，在极性较强的有机溶剂中，亲水性较________的底物容易进行反应。

8、一般选用极性系数范围在__________的有机溶剂作为有机介质

1、必需水是指（）

A、维持酶催化反应速度所必需的水量

B、酶催化反应速度达到最大时所需的水量

C、与酶分子紧密结合的水量

D、维持酶分子完整的空间构象所必需的最低水量

2、有机介质中酶催化的最适水含量是（）

A、酶溶解度达到最大时的含水量

B、底物溶解度最大时的含水量

C、酶催化反应速度达到最大时的含水量

D、酶活力到最大时的含水量

3、天苯肽是由（）缩合而成。

A、L-天冬氨酸的a-羧基与L-苯丙氨酸甲酯的氨基

B、L-天冬氨酸的B-羧基与L-苯丙氨酸甲酯的氨基

C、L-天冬氨酸的氨基与L-苯丙氨酸的a-羧基

D、L-天冬氨酸的a-羧基与L-苯丙氨酸的氨基

（）1、有机溶剂的极性系数是指某种溶剂在正辛烷与水两相中的分配系数

（）2、在有机介质反应体系中，水活度越大，酶催化反应速度也越大。

（）3、酶在水溶液中催化的立体选择性通常比在有机介质中催化的立体选择性强。

（）4、酶在有机介质中催化的最适pH与在水溶液中催化的最适pH有较大差别。

（）5、有机溶剂中酶的热稳定性比水溶液中高

1、举例并简述手性药物两种对映体的药效差异.

2、生物法生产生物柴油原理和反应式

第八章

1、酶定向进化是在体外进行酶基因的人工随机突变，然后在人工控制条件的特殊环境下进行定向选择，而得到具有优良催化特性的酶的突变体。

2、PCR反应体系是由__引物_____、___DNA聚合酶____、模版______dNTP__________、和Mg2+构成的。

3、易错PCR技术是从酶的单一基因出发，在改变反应条件的情况下进行的聚合酶链反应，使扩增得到的基因出现剪辑配对错误，而引起基因突变的技术过程。

4、DNA重排技术将2种以上同源基因中的正突变结合在一起，通过DNA 的碱基序列的重新排布，形成新的突变基因，属于有性进

化。

5、要从突变基因文库中筛选得到人们所需的正突变基因，筛选工作量很大，必需采用各种高通量筛选技术。

6、插入B-半乳糖苷酶基因片段的噬菌体DNA，转染大肠杆菌细胞后，在含有诱导酶IPTG和底物X-gal的平板培养基上可以形成蓝色细菌斑。

1、在获得酶的单一基因以后，可以采用（A ）技术获得两种

以上同源正突变基因。

A、易错PCR

B、交错延伸PCR

C、DNA重排

D、基因组重排

2、在进行易错PCR时，提高镁离子浓度的作用是（ B ）。

A、稳定互补的碱基对

B、稳定非互补的碱基对

C、增强酶的稳定性

D、减弱酶的稳定性

3、在进行易错PCR时，添加一定浓度的锰离子，其作用是（ A ）。

A、降低DNA聚合酶对模板的特异性

B、提高DNA聚合酶对模板的特异性

C、增强DNA聚合酶的稳定性

D、提高DNA聚合酶的活力

( V )1、外源蛋白基因可以与噬菌体的外膜结构蛋白基因形成融合蛋白基因，在噬菌体表面展示

（ V ）2、重组质粒载体可以通过细胞转化方法将重组DNA 转入受体细胞

（ V ）3、通过DNA重排技术进行酶基因的体外随机突变，可以获得大量的正突变基因。

（ V ）4、基因家族重排技术需要经过不加引物的多次PCR循环，使DNA的碱基序列重新排布而引起基因突变。

1简述透明圈法进行高通量筛选的原理

2构建突变基因文库的主要过程

第九章

一、名词解释

搅拌罐式反应器鼓泡式反应器膜反应器

二、填空题

1、搅拌罐式反应器主要由反应罐，和温度调节装置组成。

2、填充床式反应器是通过的流动，实现物质的传递和混合。

3、鼓泡式反应器是的酶催化反应中常用的一种反应器。

4、膜反应器是将酶的与半透膜的组合在一起而成的反应器。

5、喷射式反应器是利用的喷射作用，实现酶与底物的混合，进行催化反应的一种反应器。

6、较高的温度可以提高酶的催化反应速度，从而增加产物的产率；但温度过高会加速___________、缩短__________。

7、在反应过程中有时必须加入EDTA等金属螯合剂，其目的是____________。

三、选择题

1、流化床反应器（）。

?A、适用于游离酶进行间歇催化反应

?B、适用于固定化酶进行间歇催化反应

?C、适用于游离酶进行连续催化反应

?D、适用于固定化酶进行连续催化反应

2、膜反应器是（）的酶反应器

?A、将酶催化反应与膜分离组合在一起

?B、利用酶膜进行反应

?C、利用半透膜进行底物与产物分离

?D、利用半透膜进行酶与产物分离

3、对于有产物抑制作用的酶，最好选用（）反应器

?A、搅拌罐式

?B、喷射式

?C、膜反应器

?D、鼓泡式

4、对于有气体参与反应的酶，通常采用（）反应器

?A、填充床式

?B、流化床

?C、鼓泡式

?D、搅拌罐式

四、判断题

?（ v ）1、填充床式反应器在任何一个横截面上的流体流动速度都相同，在同一个横截面上底物浓度与产物浓度也一致，又称为活塞流反应器。

?（ x ）2、需要小分子物质作为辅酶的酶催化反应，通常采用膜反应器。

?（ v ）3、鼓泡式固定化酶反应器又称为三相流化床式反应器。

?（ v ）4、采用膜反应器进行酶催化反应，可以明显降低小分子产物对酶的反馈抑制作用。

?（ x ）5、反应液的pH对酶催化反应有明显影响，故所有的反应都必须进行pH的调节

?年产5万吨葡萄糖车间糖化酶反应器的设计

?淀粉葡萄糖转化率95%；葡萄糖收得率:98%；糖化周期：48h；分批反应器；年生产300d。反应器的有效体积为80%；糖化酶与淀粉比例为0.02%；淀粉浓度为35%单个反应器体积为50m3

?（1）计算Pd

?（2）计算反应液有效体积

?（3）计算糖化酶数量

?（4）计算反应器理论数目

?（5）糖化酶属于六大类酶的哪种类型

第十章

1、酶的应用是通过获得或除去不良物质、得到所需信息的技术过程。

2、纤溶酶原激活剂是一种丝氨酸蛋白酶，可以催化水解生成。

3、青霉素酰化酶可以催化青霉素水解生成和。

4、溶菌酶是一种催化细菌细胞壁中的水解的水解酶。

5、利用丙烯氰为原料，在催化下，可以水合生成。

1、葡萄糖氧化酶可以用于食品保鲜，主要原因是通过该酶的作用可以（）。

?A、生成过氧化氢

?B、生成葡萄糖酸

?C、杀灭细菌

?D、除去氧气

2、亚硝酸还原酶是以催化亚硝酸还原生成（）的氧化还原酶。

?A、NO

?B、NO2

?C、N2

?D、HNO3

3、乳糖酶可以催化乳糖水解生成（）。

?A、二个半乳糖

?B、葡萄糖和果糖

?C、半乳糖和葡萄糖

?D、半乳糖和果糖

4、胆碱酯酶可以用于检测有机磷农药污染，是由于（）。

?A、有机磷农药是胆碱酯酶的一种激活剂

?B、有机磷农药是胆碱酯酶的一种抑制剂

?C、胆碱酯酶可以催化有机磷分解

?D、胆碱酯酶可以催化胆碱酯分解

?（）1、葡萄糖异构酶可以催化D-木糖可逆地转化为D-木酮糖。

?（）2、果胶酶是催化果胶水解生成聚半乳糖醛酸酶的一类酶的总称。

?（）3、DNA聚合酶可以催化DNA小片段聚合生成大分子DNA。

?（）4、青霉素酰化酶可以催化头孢霉素水解生成7-氨基头孢霉烷酸（7-ACA）

?（）1、葡萄糖异构酶可以催化D-木糖可逆地转化为D-木酮糖。

?（）2、果胶酶是催化果胶水解生成聚半乳糖醛酸酶的一类酶的总称。

?（）3、DNA聚合酶可以催化DNA小片段聚合生成大分子DNA。

?（）4、青霉素酰化酶可以催化头孢霉素水解生成7-氨基头孢霉烷酸（7-ACA）

?第一章

?掌握酶的基本概念、酶工程的主要内容及重要的历史事件。

?掌握酶的分类和命名的主要原则

?掌握影响酶作用的主要因素

?熟悉酶的活力测定中的相关概念

?了解酶的生产方法

?了解酶工程的历史进程

?第二章

?掌握微生物细胞中酶生物合成的调节?掌握酶生物合成的模式

?熟悉提高酶产量的措施

?第三章

?掌握动植物细胞中酶生物合成的调节?掌握端粒酶及相关概念

?第四章

?掌握细胞破碎的主要方法

?掌握酶的提取的概念和方法

?掌握常用的酶沉淀分离的方法

?掌握层析方法的分离依据

?了解酶的提取和分离纯化的技术路线?第五章

?掌握酶分子修饰的概念

?掌握酶分子修饰的意义与作用

?掌握酶分子修饰的方法及重点的反应式

?了解酶分子修饰的应用

?第六章

?了解酶固定化技术的作用和意义

?掌握酶的固定化方法

?掌握固定化酶的特性

?熟悉固定化酶的应用

?熟悉固定化细胞的特点和应用

?第七章

?掌握酶非水相催化的概念与意义

?掌握酶非水相催化的主要内容与特点

?熟悉水和有机溶剂对有机介质中酶催化的影响

?掌握酶在有机介质中的催化特性

?熟悉有机介质中酶催化的条件及其控制

?掌握酶非水相催化合成天苯肽、生物柴油的生产过程；了解有机介质中酶催化的其它应用

?第八章

?掌握酶定向进化的概念和内容

?了解酶定向进化的特点

?掌握酶基因随机突变的方法

?熟悉突变基因文库的构建

?掌握酶突变基因定向选择的方法

?了解酶定向进化的应用

?第九章

?掌握酶反应器的类型和适用的酶类型、操作方式?掌握酶反应器的设计计算

?熟悉酶反应器的操作