我国动物实验存在的问题和对策
发扬人道关怀,探求科学真理
在生物学与医学的发展过程中，动物实验是不可或缺的一种研究途径。人们通过解剖实验来了解动物体本身的形态和结构，通过受控的动物实验来了解各种外界因子对动物生理及行为的影响，并从而为将这些因子作用于人和其他动物而做好前期的工作。随着动物保护运动的广泛开展及伦理学视野的扩大，动物实验的正当性和必要性，实验动物的福利及其保护等问题逐渐凸现出来，成为学术界和公众讨论的焦点。
一、我国动物实验领域存在的问题
1、饲养和实验环境落后,导致动物大脑与心理不健康
我国许多大学一级动物实验室建设已有较高水平和规模．但是动物实验室的发展还比较滞后，房舍陈旧．设施更显落后，有的七八年竟未填置过仪器设备。实验动物不达标，饲养员也未经专业训练．大多是雇来的临时工，给实验动物喂多喂少、营养搭配随意性根大，根本谈不上科学性。
研究表明动物的生活环境会影响到其大脑发育。在老鼠身上做实验时,科学家发现，生活在空间较大并且笼子里附加了迷宫、梯子、海绵等刺激物的老鼠，它们大脑中乙酰胆碱的含量相对较高，而通过这种酶可以看出神经系统的活动情况。
实验证明，不同的居住环境会改变神经细胞体的大小和突触接触的数量。而使用那些神经系统有问题的动物做实验，无论是涉及行为
科学、神经科学还是神经解剖学，研究者都可能被引入歧途,影响到研究所得出的数据的有效性和准确性。这意味着,疾病模型的设计、药剂研究和化学毒性检测的结果都将受到影响。
2、动物实验的操作情况不佳,实验中进行动物虐待
在一份对医学生的调查[1]中，实验前对实验操作步骤“非常熟悉”的人仅占l0%,“熟悉”的占52．99%,而“不是很熟悉，需要一边看步骤一边实验”的达到36．51 %。
动物实验大部分是活体实验，学生在实验前对实验步骤及注意事项不清楚，会延长实验时间，延长动物的痛苦，甚至导致实验失败，动物也就白白做了牺牲。这说明部分学生缺乏严谨的科学态度。这也表现在动物的麻醉给药上，约10%的学生对动物进行麻醉给药时是“只凭估计给药”或“随便给药”。这种不科学的给药方式是对动物痛苦的无视和对动物生命的淡漠。缺少严谨的科学态度，一切实验结果就有可能失真，在动物实验上就成了对动物的虐待。
3、我国动物实验替代方法(3R)研究存在问题
所谓3R理论，即在动物实验中遵循减少(reduction)、替代(replacement)和优化(refinement)的原则。“减少”就是要求在实验中尽可能减少实验动物的使用数量，提高实验动物的利用率和实验的准确性；“优化(精细)”即是确保动物在麻醉、镇痛、镇静或其他适当的手段作用下进行实验，不使其遭受不必要的伤害或痛苦。“替代”就是不再利用活体动物进行实验而是以组织细胞培养、各种活体外试验或计算机模型以及统计分析等方法来加以替代。
3.1 从科研管理角度讲，没有建立起统一的规划指导
我国目前还没有专门的法规，在应用动物进行实验的各个不同领域缺乏有关规定和法律，可以说，实验动物替代方法在我国的实验动物和有关动物实验的法规建设中还处在比较薄弱的位置上，与较发达国家相比，差距较大。
3.2 研究经费明显不足
我国开展“3R”研究的科研经费主要来自政府管理部门，因科研发展水平以及其他各方面原因，“3R研究还不可能作为科研体系中的主项，没有稳定的经费渠道支持相应研究工作，经费支持力度也无法与其他领域的研究计划和科研项目相比较。
二、针对我国动物实验问题的对策
1、注意在动物实验过程中动物福利伦理的实施
改善实验动物的饲养环境, 对实验动物房进行了重新设计和建设,解决以往普通级动物房排风不畅，易留死角，温、湿度难以控制的问题。减少了动物房内的异味，大大改善了动物的生存环境，保障实验动物在饲养过程中能够得到相应的福利待遇。
为了尽量减少动物在实验过程中的痛苦和惊恐，我们严格按照操作规程的要求，对动物轻拿轻放，实验中注意对动物进行抚慰，待动物安静后方进行备皮、染毒等操作。进行动物保定时，尽量使动物保持相对舒适的姿势，一旦实验结束，迅速解除保定，从而最大限度地减少了动物的不适。
2、加强动物实验伦理教育，培养敬畏生命的意识
医药学院校虽普遍开展了生命伦理教育系列活动，但很少有专门针对动物实验的主题活动。在伦理学课堂上教师很少系统讲授动物实验的伦理问题，再加上操作实验前任课教师也很少主动强调,从而导致了学生在动物实验中得到的相关人道主义教育严重缺失。实验室是医学生成长的第一步。医学专业教师与伦理学老师需要共同努力，从细小处着手才能达到医德培养的最佳效果，为此，医学院校应重视3R理论基础上的动物实验伦理教育：在伦理学的教学方面可增加动物实验伦理专题，让学生从理论上有深入了解与思考；在组织生命伦理主题活动时，可组织类似珍爱实验动物的活动，让学生从实践中体会敬畏生命的医学人文内涵。
3、努力实践3R，完善相关法律法规
在西方一些国家，动物实验替代方法的研究已达到较高的水平，专门的研究机构、多种渠道的资金来源、不同层次的学术刊物都为3R 研究和应用的进一步深入和广泛开展打下了良好的基础。
据此,我们应该积极学习西方一些国家,建立专门的基金会和研
究机构，用于3R理论的普及、教育和3R技术的研究、验证和应用。以3R所提倡的指导性原则成为国家立法和科研工作的基础。
生命科学的研究者们对待动物的要发扬人道主义精神。在科学研究上，求真是非常重要的一个目标，但求善也是绝对不可以被忽略的。在客观的基础上激发科学家的人文情感，才能在寻求真理的道路上走得更好。
实验动物房的设计
实验动物房的设计 根据实验动物微生物控制标准，可将实验动物分为四级： 一级普通动物（CV），系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和极少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病，在实验动物饲养和繁殖时，要采取一定的措施，应保证其用于测试的结果具有反应的重现性（即无论不同的操作人员，在不同的时间，用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验，都能获得几乎相同的结果）。 二级清洁动物（CL），要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。 三级无特殊病原体动物（SPF），要求到二级外，还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法，可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。 四级无菌动物（GF）或栖生动物（GN），无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。栖生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。 在病理学检查上，四类实验动物也有不同的病理检查标准。 一级外观健康，主要器官不应有病灶。 二级除一级指标外，显微镜检查无二级微生物病原的病变。 三级无特殊病原体动物。无二、三级微生物病原的病变。 四级不含二、三级微生物病原的病变，脾、淋巴结是无菌动物组织学结构。 综合上述，对不同级别的实验动物在动物房设计上和管理上则有不同的要求。 无菌、已知菌以及无特殊病原体动物都需要在无菌或尽可能无菌的环境里饲养，这种环境，目前国际上通用称为屏障环境，即用一道屏障把动物与周围污染的环境隔开，就如胎鼠在母鼠子宫内一样。这种环境从控制微生物的角度分为隔离系统、屏障系统、半屏障系统、开放系统和层流架系统等五大类。 A 隔离系统是在带有操作手套的容器中饲养动物的系统，用于饲养无菌动物和栖生动物。内部保持按微生物要求的100级的洁净度，但其设置的房间及操作人员不必按无菌室考虑。 B 屏障系统把10000～100000级左右的无菌洁净室作为饲养室，主要用于无特殊病原体动物的长期饲养和繁殖。入室施行严格管理，如淋浴、换贴身衣服等。 C 半屏障系统放宽对屏障系统中人及物出入房间时的管理，平面组成大致与屏障系统相同。 D 层流架系统笼具放在洁净的水平层流空气中。常用于小规模饲养，但在一般房间进行饲
实验动物的营养需要特点与饲养标准
实验动物的营养需要特点与饲养标准 动物为了维持生命及生长、繁殖等，需要各种营养物质。由于动物的不同，生长、妊娠、泌乳等生理状态的不同，以及温度、湿度等气候条件，耐受实验刺激、感染等外部条件的不同，动物对营养物质的需要都会有所差异。因此，研究动物所需要的各种营养物质种类，研究不同种类的动物在不同生理条件、不同环境条件及不同生产水平下各种营养素的需要量，研究不同营养素之间相互的作用等，是为不同种类的动物制定营养素的供给水平，制定动物配合饲料的重要依据。 一、动物所需营养素的种类及影响营养需要量的因素 实验动物和其他动物一样所需的营养物质根据化学组成的不同共有约50种，就其主要功能可大略分为以下三大类：a.作为能量来源：脂肪、碳水化合物、蛋白质；b.作为身体构成成分：蛋白质、矿物质；c.调节身体功能：维生素、矿物质。 各种实验动物对以上所提到的营养素的需要量是不同的，除受到遗传因素影响而有存在的明显的种间差异外，还因性别、年龄、生理状况而不同。 1.动物维持的营养需要:维持是指健康动物体重不发生变化，不进行生产，体内各种营养物质处于平衡状态。维持需要量是指动物处于维持状态下对能量、蛋白质等营养素的需要。从生理角度来讲，维持状态的动物体内的养分处于合成代谢与分解代谢速度相等的“平衡”状态。维持需要就是用来满足这个动态平衡的需要，动物只有在维持需要得到满足之后，多余的营养物质才能用于生产。 2.动物生长的营养需要:生长是指动物通过机体的同化作用进行物质积累、细胞数量增多和组织器官体积增大，从而使动物的整体体积及重量增加的过程。从生物化学角度看，生长是体内物质的合成代谢超过分解代谢的结果。从解剖学和组织学角度来看，即使同一动物由于在不同生长阶段由于不同组织和器官的生长不同，在不同的生长时期对营养的需要也不同。 3.动物繁殖的营养需要:动物的繁殖过程包括两性动物的性成熟、性机能的形成与维持，受精过程、妊娠及哺育后代等许多环节，要求在不同的繁殖过程提供适宜的营养物质。
实验动物学总结
进行实验研究的基本要素AEIR：动物、设备、信息、试剂。1．实验动物：是指经过人工定向培养、对其携带的微生物和寄生虫实行控制，其遗传背景明确，来源清楚，并在相应的环境设施内饲养，用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。 2实验用动物：所有用于科学实验的动物统称为实验用动物。包括实验动物、野生动物、经济动物和观赏动物。 3实验动物和实验用动物的区别：实验动物具有一下特点：1实验动物是遗传限定的动物；2对其携带的微生物、寄生虫实行人工控制；3实验动物的目的用于科学研究。 4实验动物学：是研究实验动物和动物实验的科学。前者是以实验动物为对象研究其驯养、育种、繁殖、饲养、管理、解剖、生理及动物各种疾病的表现和防治，以及对野生动物的开发和应用；而动物实验则是应用实验动物进行生命科学的研究，包括各种实验方法、技术操作及人类疾病的动物模型复制等。 5实验动物的研究方向： 1推广“3R”实验（替代replacement、减少reduction、优化refinement）2转基因动物研究；3动物疾病模型的开发和利用；4动物组织器官的克隆研究；5实验动物福利。 1动物福利：就是让动物在康乐的状态下生存，其标准包括动物无任何疾病、无行为异常、无心理紧张压抑和痛苦等。基本原则包括：让动物享有不受饥渴的自由、生活舒适的自由、不受痛苦伤害的自由、生活无恐惧感和悲伤感的自由以及表达天性的自由。 动物福利包括物质（身体）和精神2个方面。物质方面很简单，一般指食物和饮水，只要供给及时、量足、营养丰富、清洁卫生就可以了。精神方面包括：适宜的生活环境，免受疼痛之苦，免受惊吓、不安和恐惧等精神上的刺激。当必须处死时，采用安乐死的措施等。 2动物福利的“五项基本福利”，“五大自由”，“五项标准”： 1为动物提供适当的清洁饮水和保持健康和精力所需要的食物，使动物不受饥渴之苦（免受饥饿的自由）。 2为动物提供适当的房舍或栖息场所，能够舒适地休息和睡眠，使动物不受困顿不适之苦（生活舒适的自由）。 3为动物做好防疫，预防疾病和给患病动物及时诊治，使动物不受疼痛、伤病之苦（免受痛苦伤害和疾病的自由）。 4保证动物拥有良好的条件和处置（包括宰杀过程），使动物不受恐惧和精神上的痛苦（免受恐惧和不安的自由）。 5为动物提供足够的空间、适当的设施以及与同类动物伙伴在一起，使动物能够自由表达习性（免受身体热度不适的自由；表达所有自然行为的自由）。 实验动物微生物学分类、概念、环境要求和应用范围： 1普通动物CV；2清洁动物CL；3无特殊病原体动物SPF； 4无菌动物GF和悉生动物GN。 1无菌动物GF：是指现有的检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。饲养条件：无菌隔离器内（隔离系统）。应用：在生物医学研究中有较独特的作用；微生物学研究、免疫学研究、放射医学研究、营养代谢研究、老年病学研究、药理和毒理学研究、心血管病研究、肿瘤、寄生虫学、口腔医学研究。 2悉生动物GN：也称已知菌动物，指在动物体内带有明确的微生物种类的动物。饲养条件：无菌隔离器内（隔离系统）。应用：在多种研究中可代替无菌动物。微生物、免疫、微生物和寄生虫相互关系等的研究。 3无特殊病原体动物SPF：指动物机体内无特定的微生物和寄生虫存在，但带有非特定的微生物和寄生虫的动物。饲养条件：屏障环境。应用：适用于所有科研实验，是目前国际标准级的实验动物。各种疫苗生产所采用的动物应为SPF动物。 4清洁动物CL：除普通的动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体，是根据我国国情而设定的等级动物。饲养条件：屏障系统。应用：在我国已经成为用于科学研究的标准的实验动物；国际上仅用于短期试验或部分科学研究实验。 5普通动物CV：是在微生物学和寄生虫学控制上要求最低的动物，它要求不携带人兽共患病和动物烈性传染病的病原体。饲养条件：开放系统。应用：生物医学教学示教，预试验，不可用于科研、生产和检定。 无菌动物的形态学特点： 1消化系统：盲肠肥大，比普通动物的要大5-10倍；肠道肌层薄，肠绒毛变细变短；肝脏重量下降。2循环系统：心脏相对变小；白细胞数变少，且数量波动范围小。 3免疫系统：免疫机能基本处于原始状态。胸腺、淋巴组织、网状内皮系统发育不良；脾脏缩小，无二级滤泡，网状内皮细胞功能下降。 无菌动物的生理学特点1寿命：比普通动物长。2代谢和营养：武军动物血中含氮量少，肠管对水的吸收率低，代谢周期比普通动物长；体内不能合成维生素B和维生素K。 3生长率：不同种属生长率不同。无菌禽类生长率高于普通动物；无菌大、小鼠与普通动物差不多；无菌豚鼠、兔比普通慢。4生殖：无菌条件对动物生殖影响不大。大、小鼠因出生无感染，身体较好，其繁殖率高于普通大、小鼠；无菌豚鼠、兔比普通者低。5抗辐射能力强，抗实验性烫伤和抗休克死亡能力也强。6免疫功能：血清中IgM、IgG 水平低，免疫功能处于原始状态；应答速度慢；过敏反应，对异体移植的排斥反应以及自身免疫现象消失或减弱；血清中几乎不存在丙种球蛋白和特异抗体。 微生物学特点：在现有条件下检测不到任何微生物。 实验动物遗传学分类： 近交系动物、封闭群动物、杂交一代动物（F1代）。 1近交系动物：经至少连续20代以上全同胞兄妹交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先，该品系称为近交系动物。 特征：1基因位点的纯合性2遗传组成的同源性3表型一致性4遗传组成独特性5长期遗传稳定性6遗传特征的可辨性7国际分布的广泛性8背景资料完整性。 缺点：1近交衰退；2生产饲养成本高；3对外界环境敏感。 普交系应用： 1节省样本量。2组织细胞或肿瘤移植,个体间相容性一致。 3隐性纯合基因的暴露，获得先天性畸形及先天性疾病的动物模型，如糖尿病、高血压等。4某些品系自发或诱发肿瘤，成为肿瘤病因学，肿瘤药理学模型。5多个近交系同时使用，分析不同的遗传组成对某项实验结果的影响，或观察实验结果是否具有普遍意义。 重组近交系应用 重组近交系对祖系间有差异的性状和基因进行遗传分析是非常 有用的实验材料。如：分离分析，连锁分析，功能分析等 同源近交系的应用： 1在同一遗传背景下比较某基因位点上不同等位基因的遗传效应。2在不同遗传背景中研究同一基因与遗传背景及其它基因的关系。3消除杂合遗传背景对某些突变基因表达的影响，以获得更为稳定的实验动物模型4对复杂的多基因性状进行遗传分析。主要的近交系动物： C57BL/6、BALB/c、DBA/2、C3H、CBA、F344、SHR。 2封闭群动物： 以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个种群，在不从外部引入新的血源条件下，至少连续繁殖4代以上称为封闭群。 封闭群的特点和应用： 1封闭群动物具有杂合性并避免了近交，从而避免了近交衰退的出现，所以其生活力、生育力都比近交系强，具有繁殖力高，疾病抵抗力强的特点，可大量生产。 2封闭群就整体而言，由于没有引进新的血源，其遗传特性及其他反应性能保持相对稳定。但就群体个体而言，因其具有杂合性，所以个体间的反应性具有差异，因此，个体间的重复性和一致性没有近交系、系统杂交动物F1好。 根据这些特点，封闭群一般适用于药物筛选，毒理安全试验和教学。 常用的封闭群动物有：青紫蓝兔、新西兰兔、昆明小鼠（KM）、NIH小鼠、Wistar大鼠、SD大鼠、LACA封闭群小鼠等。 3杂交一代动物（F1代）： 根据科学研究的需要，有计划将2个不同近交系动物之间交配所获得的第一代动物，称为杂交一代动物，简称F1动物。特征及
如何设计动物实验
如何设计动物实验 一般来说，动物实验的研究工作应该明确描述，研究的目的和/或者需要验证的假说。1、选择特定动物模型的原因。2、动物种、品系、来源和类型。3、每个独立实验步骤的详细描述，包括研究设计和使用动物数量。4、数据分析所用的统计学方法。动物实验设计有重要的意义的意义1、正确的动物实验设计对提高科学研究质量、发表高水平的学术论文非常重要2、目前许多动物实验质量不高。3、一个好的实验设计，对统计学分析来说帮助很大，可以使问题变得更加容易解决4、一个不正确的实验设计，导致结果信息无用。实验设计的主要目的一是保证所测变量的任何差异是由处理造成的，而不是其他非对照变量引起；另一个目的是通过控制确定的变量在尽可能小的范围内，减少所测反应的变异性，这样对处理效应的评介更准确。我将它分为以下几个步骤 一、实验设计的最初步骤 1、查阅文献 A: 明确研究焦点B：明确方法 C：明确模型D：评估实验 2、科研方法 A：观察和描述科研中的现象B：系统的陈述问题和解释问题的假说C：利用假说预测新的观察结果D：验证假说 3、问题的陈述、研究的目标和提出假说 ?问题提出：实验将说明的问题是什么，意义 ?研究目标：总目标，特殊问题 ?假说：对每一个至少给出两个预计结果 ４、动物模型的确定 ?使用系统发育水平最低的动物，符合３Ｒ原则 ?使用的动物具有研究要求种属或品系专一特点，特定研究目的必须特点?实验期间动物模型维持条件 ?动物模型来源渠道 ?最终确定动物模型前征询实验动物兽医意见 ５、实验合作者的确定 ?在研究的过程中，明确应用的试验技术操作，并确认具有相应操作专长的人员来完成。 ?让合作者了解实验：设计、计算、样品收集．．．． ?实验动物中心可以提供动物实验有关技术操作培训及昂贵设备服务 二、动物实验设计 １、研究方案 根据问题、目标、假说，提出实验操作安排的计划并文字化 考虑的方面： A：动物模型持续时间B: 模型中预期疾病的进程（决定测定的最适时间点） Ｃ：人员参加的时间，实验花费Ｄ：给药方法 Ｅ：风险评估Ｆ：统计学方法选定 ２、实验单元 可以是一个动物，也可以是一组动物群体
动物实验室设计规范
动物实验室的设计布局是规范工作流程和人员、动物、物品等相互关系和移动，并确保实验室安全，此外，对形成屏障结构具有重要意义。本文将从三个防护区（外围防护区、建筑防护区、饲养防护区）和四条控制路线（人员控制路线、动物控制路线、物料控制路线、废物控制路线）等方面详细介绍。 动物实验室 1.外围防护区 外围防护区主要指建筑外围的区域。鉴于实验动物饲养的特殊性，外围可能需要设监控设备、人员进出的控制、卫生防护带等。如果设施内从事涉及高致病性病原微生物的动物实验活动，须考虑设施的安保要求，以及一旦发生意外事故后对周围控制区域、疏散和救援的需求。外围的防护主要通过设置栅栏、围墙等方式实现。鉴于景观的需求，使用栅栏更显人性化。栅栏不应低于2米，栏杆的间距不大于10厘米，栏杆要坚固、易于清洁。 此外，需要设置照明系统、报警系统和视频监控系统，更高级别的防护包括地下的电磁场报警、红外线报警和运动物体报警、低压电击等措施。防护区内一般不布置绿化，以免影响监控，同时也可减少昆虫、老鼠等。为保证正常的外来服务，如邮件、送货、访客等，通过风险评估决定是否需要建设安检、特殊通道、中转站等措施。对控制区域应设置警示牌，避免无意闯入。对防护要求高的设施，
应保证外来车辆不能靠近设施，距离保持至少30米。在外围防护区，宜设专用的外部人员和车辆入口。 2.建筑防护区 建筑防护区主要指动物实验室所在的建筑。建筑内有动物设施和其它设施之分，其它设施可以与动物设施有关，也可以无关;动物设施可以就是建筑的主体，也可以是其部分。需要考虑的主要问题是动物设施环境与建筑物内其它区域环境的相互隔离与相互关系，人员、动物、物料和废物的进出路线。使用时，动物设施及其相关的设施宜集中布置，从事感染动物活动的设施需要单独布置。建筑除主入口外，要考虑设置动物、大型设备和废物的出口和入口。 出于安全考虑，必须评估和明确对门窗的性能要求。在合理控制数量的前提下，对门窗的大小、形状、耐冲击能力、耐火性、保温性、光学特性等均要有要求。可能的风险来自于异常的气候、自然灾害、人为破坏、设备异常等，如，通风系统的异常可造成室内压力急剧变化，造成门窗损坏。 3.饲养防护区 饲养防护区设施基本的形态是由入口、走廊(或通道)、功能间和出口组成。走廊是连接各功能区的纽带，各种通道发挥快捷、隔离、消毒等作用。实验动物设施的特点是不相容的因素多，需要利用走廊和通道对不相容的因素作合理的安排。走廊的形式包括双走廊、单走廊、U型走廊、环廊等。设施内部的安排应根据工作流程和利于控制风险的原则确定，此外，还要考虑工程可行性和日常维护的方便性，可以组成相对独立的单元。 1.人员控制路线 进出动物实验室的人员主要包括动物管理人员、动物实验人员和清洁人员。此外，还有送货人员、维护人员、来访人员、检查人员、安保人员等。为保证各类人员的进出有序，需要合理设计路线和设置不同级别的物理限制。人员的移动具有主动性，可以到达任何区域，要通过SOP和物理控制措施管理人员的移动。
动物实验方案申请书
动物实验方案申请书 中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所（实验动物管理委员会批准不超过两年期的《动物实验方案申请书》）动物实验方案名称: 动物实验方案编号(由实验动物管理委员会填写) : 动物实验方案研究期限: 动物实验方案首次提交日期: 动物实验方案更新日期（方案到期前个工作日内）: 以下内容由实验动物管理委员会填写 实验动物管理委员会审查意见： 实验动物管理委员会决定: 实验动物管理委员 兽医（签章）：日期: 实验动物管理委员会（签章）: 日期:
★如实验动物管理委员会在审批过程中发现，该实验中有涉及生物安全及伦理审查方面的内容，则由实验动物管理委员会各成员在充分讨论后填写本页内容送生物安全与伦理委员会进行审批： 实验方案中涉及到生物安全及伦理审查方面的内容是： 该内容可能带来的潜在的生物安全风险及伦理考虑点主要是: 如该问题未能得到有效的管理监督及控制,可能的严重后果是: 基于以上原因,可采取的应对方式包括有: *** 动物实验方案参与人员*** 研究组长 姓名: 单位： 办公电话: 移动电话： 电子邮件：传真：
学位：职位： 请在下列方框内填写是或否 [] 是否有参加过实验动物及动物实验的相关培训？ [] 是否有从事动物实验或动物模型的工作经历、经验？ [] 是否有参加过实验动物导致的意外伤害及生物安全培训？ 请简要描述本人与该实验方案中所用的实验动物及动物模型有关的工作经验或培训经历： 紧急联系人 姓名: 单位： 办公电话: 移动电话： 电子邮件：传真： 学位：职位： 请在下列方框内填写是或否 [] 是否有参加过实验动物及动物实验的相关培训？ [] 是否有从事动物实验或动物模型的工作经历、经验？ [] 是否有参加过实验动物导致的意外伤害及生物安全培训？ 请简要描述本人与该实验方案中所用的实验动物及动物模型有关的工作经验或培训经历： 其他人员(如涉及多于一人参与本实验方案，请按需要拷贝并增加本页，至完成所有实验人员信息的填写) 姓名: 单位： 办公电话: 移动电话： 电子邮件：传真： 学位：职位： 请在下列方框内填写是或否 [] 是否有参加过实验动物及动物实验的相关培训？ [] 是否有从事动物实验或动物模型的工作经历、经验？ [] 是否有参加过实验动物导致的意外伤害及生物安全培训？
实验动物房总体建筑设计原则SICOLAB
医学实验动物房设计（详细）SICOLAB 实验动物房总体建筑设计原则 根据国家科委《实验动物管理条例》、国家卫生部《医学实验动物管理实施细则》的具体要求，结合广西的具体情况，目前广西尚未有能够提供合格的ＳＰＦ级实验动物的单位，而我所是药品检验单位，国家科委要求2000年底前药品检定应使用清洁级实验动物。因此，我所新建的实验动物中心设计的原则是以建立动物饲养繁殖和实验饲养相结合的综合基地，该工程的环境与设施要求达到ＳＰＦ级标准。该中心的设计具有小规模、起点高、设计完善、布局设置合理，可使用面积大，利用率高，具有节能、节资等特点 平面布局设计加层新建的十层楼长48ｍ，宽103ｍ，楼层高为38ｍ;其中十楼西侧长24ｍ暂作普通级设施使用，十楼东侧长24ｍ为ＳＰＦ级设施即ＳＰＦ级实验动物中心，十一楼为饲料加工房和空调、风机机房。SPF级实验动物中心内设置有货物电梯、淋浴室1间，2套更衣1、更衣2和风淋室，洁净物品储藏室1间，洗刷消毒室1间，清洁走廊和亚清洁走廊，隔离观察室(检疫室)1间，饲育室6间及实验室2间，平面布局采用三走廊方式，中间走廊为清洁走廊，二边走廊为亚清洁走廊，清洁真走廊与亚清洁走廊之间为饲育室和实验室。饲育室区和实验室区各走廊均有密封门严格隔开，饲育室区和实验室区分别设置有独立的更衣1、更衣2和风淋室，以便各区域的人员运行各行其道，防止交叉感染。 3 空调通风系统 31 空调系统 311 空调设计及ＳＰＦ级环境设施设计的主要参数：温度：夏季24℃±2℃，冬季22℃±2℃;湿度：ＲＨ(50±10)%;光照度：不小于300～350ＬＸ，明暗比12∶12ｈ，日光灯照明，且设紫外灭菌灯;通风：采用全新风，顶棚送风，四角回风;净化度：1万级(每立升空气中粒径大于05μｍ的尘埃粒子数小于或等于350个);噪音：低于50ｄＢ;氨浓度：低于20ｐｐｍ;正压控制：清洁走廊、饲育室(或实验室)、亚清洁走廊、外环境的压力梯度20Ｐａ。 312 空调系统的设计和选用空调系统是实验动物屏障设施中重要设备，主要起调温调湿作用。由于ＳＰＦ级实验动物中心采用全新风，屏障系统内部与外环境之间换气量大，空调系统在运转时消耗能源相当大，因此，在设计ＳＰＦ级实验动物设施时必须考虑设备的一次性投资和运转的维持费用两方面问题。我所经过大量调查，采用清华同方股份有限公司生产的ＦＳＬＲ60型风冷模块式冷热水机组空调2台，每台机组制冷量为66ｋＷ，输入功率为231ｋＷ。2台机组可依据使用情况自动控制十楼普通级环境(约24ｍ2)和ＳＰＦ级实验动物中心环境(约250ｍ2)的温度和湿度。该机组具有以下优点： ①无需专用机房和水塔，使用方便 ②节省能源，降低维持费用。 ③管理方便。空调机组的工作状态及送风状态都在远程控制上显示及控制，利于使用和管理。 ④维修方便。该机组为模块式组合，可以在工作状态不断电情况下进行维修，更换元件简易，方便;且主要元件均为美国进口元件，不易损坏。 32 通风系统送风系统采用清华同方股份有限公司生产的变频风机，通过该机设置的集成模块可以调节风速和风量，节省运转费用。全新空气经空调净化箱初效、中效过滤、恒温后，由变频风机加压，通过送风管道从各室顶部中央600ｍｍ×600ｍｍ或400ｍｍ×400ｍｍ高效过滤器送入各室内、清洁走廊和亚清洁走廊等。排风系统由2台排风机(其中一台为备用机)组成，在各室四角壁及清洁走廊、亚清洁走廊与各室隔墙处均设置回风口，废气从回风口经排风管道在机房排风箱内集中外排。4 建筑室内净化装饰工程及电气设备工程 41 建筑室内净化装饰工程室内四壁墙体和吊顶顶壁均采用50ｍｍ厚保温泡沫夹心彩钢板，其外形美观，隔音、保温、阻燃、密闭性能较好。室内竖角和横角选中100铝合金圆弧。进气、排气管道位于技术杂层，室内装饰高23ｍ，技术夹层高15ｍ;内门均采用彩钢夹心板密封推开门，门上设置观察窗，各室内隔墙之
实验动物证试题库--环境与营养
环境与营养考试题 1、一种会引起动物心跳、呼吸次数及血压增加，血糖值出现明显不同，白细胞数、免疫机能变化，大鼠出现高血压，心脏肥大的环境因素是A。 A 噪音 B 温度 C 湿度 D 光照 2、一种会引起动物的姿式、摄食量、饮水量、母性行为、心跳。呼吸、新陈代谢等出现相应改变的环境因素是B。 A 噪音 B 温度 C 湿度 D 光照 3、一种对动物的散热率有显著影响的环境因素是C。 A 噪音 B 温度 C 湿度 D 光照 4、能控制垂体中促性腺激素和肾上腺皮质激素的分泌的环境因素是D。 A 噪音 B 温度 C 湿度 D 光照 5、与体热的发散有关的环境因素是A。 A 风速 B 氨浓度 C 饲养密度 D 粉尘 6、一种引起呼吸器官粘膜异常，发生流泪、咳嗽、粘膜发炎，肺水肿和肺炎且是动物室中臭气物质主要来源的环境因素是B。 A 风速 B 氨浓度 C 饲养密度 D 粉尘 7、一种引起动物群体增重慢、饲料报酬低，肠内异常菌丛增加，并导致传染病的发生率增加、动物寿命缩短的环境因素是C。 A 风速 B 氨浓度 C 饲养密度 D 粉尘 8、能形成气溶胶，不仅刺激动物机体产生不良反应，也是各种病原微生物的载体，人类变态反应的变应元的环境因素是D。 A 风速 B 氨浓度 C 饲养密度 D 粉尘
9、光照对动物的生殖影响很大，其关键在于每日光照的D。 A 光通量 B 波长 C 强度 D 明暗周期 10、动物饲养室中的空气含有大量的粉尘，它们悬浮在空气中，这种浮游的粉尘微粒与空气的组合称之为B。它能引起人的变态反应和导致疾病的传播。 A 气流 B 气溶胶 C 乱流 D 层流 11、光照对动物的生殖影响很大，其关键在于每日光照的D。 A 光通量 B 波长 C 强度 D 明暗周期 12、动物实验可用R=（A＋B＋C）*D＋E公式表示，其中R表示在动物实验中实验动物的总反应而D表示C。 A 动物种间的共同反应 B 动物的品种品系特有反应 C 环境因素 D 实验误差 13、屏障环境饲育室应安装低效、中效、高效三级过滤器，三级过滤器的位置分别是B。 A 低效在机房，中、高效位于饲养室 B 低、中效在机房，高效位于饲养室 C 中、高效在机房，低效位于饲养室 D 高效在机房，低、中效位于饲养室 14、根据我国国家技术监督局发布的实验动物环境设施监测标准，屏障环境空气洁净度指标是C。 A 100级 B 1000级 C 1万级 D 10万级 15、一种可置于开放式实验动物饲育室，配有空气过滤装置和送风设备，空气净化等级达到10000级，适合于清洁级大、小鼠作实验的饲养设备，称之为C。 A 平板式鼠架 B 悬挂式鼠架 C 独立通风换气笼具IVC D 隔离器 16、一种可置于开放式实验动物饲育室，配有空气过滤装置和送风设备，空气净化等级达到100级，器内外完全隔断，适合于无菌级动物繁殖的设备，称之为D。 A 平板式鼠架 B 悬挂式鼠架 C 洁净层流架 D 隔离器
动物实验室设计方案
动物实验室设计布局要求与规范 动物实验室包括普通的动物实验室规划设计和洁净动物实验室规划设计，一般由前区、饲养区、动物实验室、辅助区组成。 1.动物实验室布局的设计:计符合实验室标准和使用要求的产品布局规划;确定实验室内产品的类别规格数量。 2.水电预留位置的设计:在确定了平面布局后，提供全面水电位置图，方便客户工程精准施工。 3.通排风系统的设计:在实验室新建或改造项目中，在规划阶段就参与其中，派专业的工程师到现场与相关的人员联系，根据实验室内通风载体的数量(如通风柜、集气罩、排气罩)设计出完整的通风方案;方案内容包括：建筑内预留排风管井的位置及尺寸，管道的分布及规格。确保通风的载体使用时的风速、排风量、噪声等指标符合国家标准，并与建筑内的空调、消防、照明等线路互不干绕。 4.气路管道系统的设计:根据实验对气体供应的需要，结合现场布局，提供供气系统设计方案，在保证气体纯度的同时，精密调控气体的压力和流量。 5.环保的设计:提供完善的废气净化处理解决方案，使实验中产生的废气得到有效的解决，符合环保的排放指标。 6.产品个性设计:根据实验流程及人员的特殊要求，调整产品结构和功能，设计出个性的产品以满足不同用户的需要。 7.安全设施的设计:按照国际标准，在实验室合理配置安全柜、毒品柜及紧急事故淋洗器，急救洗眼器等安全设施。 动物实验室的级别： 一级普通动物(CV)，系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和积少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病，在实验动物饲养和繁殖时，要采取一定的措施，应保证其用于测试的结果具有反应的重现性(即无论不同的操作人员，在不同的时间，用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验，都能获得几乎相同的结果)。 二级清洁动物(CL)，要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。 三级无特殊病原体动物(SPF)，要求到二级外，还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法，可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。 四级无菌动物(GF)或悉生动物(GN)。无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。悉生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。 在病理学检查上，四类实验动物也有不同的病理检查标准。 一级外观健康，主要器官不应有病灶。 二级除一级指标外，显微镜检查无二级微生物病原的病变。 三级无特殊病原体动物。无二、三级微生物病原的病变。
动物营养试题及答案
《动物营养学》 一、名词 1、必需脂肪酸：凡是动物体内不能合成，必需由饲粮供给，或者通过体内特定先体物形成，对机体正常机能和健康具有保护作用的脂肪酸称为～。 蛋白质的周转代谢：机体蛋白质是一个动态平衡体系，在合成机体组织新的蛋白质的同时，老组织的蛋白质也在kj不断更新，被更新的组织蛋白降解为氨基酸，而又重新用于合成组织蛋白质的过程称为～。 3、美拉德反应：还原性糖与蛋io白质之间发生的缩合反应，产生动物自身分泌的消化酶不能降解的氨基－糖复合物，影响氨基酸的吸收利用，降低饲料营养价值。这一反应称为～。 4、瘤胃的氮素循环：瘤胃液中ioi多余的氨会被瘤胃壁吸收，经血液运输到肝脏，并在肝中转变成尿素，生成的尿素一部分可经唾液和血液返回瘤胃，这种氨和尿素的生成和不断循环，称为瘤胃中的氮素循环。 5、饲养标准：根据大量饲opij养实验结果和生产实践的经验总结，对各种特定动物所需要的各种营养物质的定额作出规定，这种系统的营养定额及有关资料称为～ 二、填空题（20×1`） 1、营养物质的利用先经过o消化才能吸收，不同消化器官消化方式不同，有些器官存在几种消化方式，口腔的消化包括物理消化，化学消化；小肠的消化属化学消化；马结肠的消化属微生物消化。
2、饲料中含有很多抗营养因子影响动物对营养的利用，花生中主要的抗营养因子为抗胰蛋白酶，棉粕中的主要抗营养因子为棉 酚。 3、支链氨基酸在母猪中的营养具有非常重要的作用，支链氨基酸包括亮氨酸，异亮氨酸，缬氨酸3种； 4、酮病是指高产奶牛碳水化合物摄入不足时，导致脂肪氧化产生过多酮体过多引起的疾病，酮体包括：丙酮，β-羟丁酸，乙酰乙酸，3种物质。 5、与造血有关的微量lk元素包括铁，铜，钴。 6、饲料添加剂中有很多pp;非营养性添加剂具有促进动物饲料利用，提高动物生产性能的功能，请列举5类具有促生长作用的无食品安全问题的非营养性添加剂，酶制剂，益生素，寡糖，酸化剂，大蒜素； 三、单项选择题（20×1`） 1、维生素A是动物必不io可少的一种维生素，植物体内不含有维生素A，但含有维生素A的先体物（C）。 A. 胆钙化醇 B.生育酚 C. 胡萝卜素 D.甲萘醌 2、使用禾谷类及其它植物性饲料配制家禽饲料时，（A）常为第一限制性氨基酸。 A.蛋氨酸 B.赖氨酸 C.色氨酸 D.苏氨酸
动物实验设计
口服避孕药预防化疗对大鼠卵巢损伤的研究 研究背景 卵巢早衰(premature ovarian failure POF)系指妇女在40岁以前绝经，常表现为雌激素水平降低引起的月经紊乱、不孕、围绝经期综合征等一系列症状。POF病因复杂，目前仍不清楚，化疗远期毒副作用是其中之一。随着化学毒性药物在肿瘤及自身免疫疾病的广泛应用，其导致的性腺功能损害成为研究新热点，其中以环磷酰胺(cyclophosphamide，crx)为代表的烷化剂引起的卵巢功能损害研究较多，但其作用机制仍不清楚。一些研究显示，CTX可直接损伤卵巢颗粒细胞，并主要作用于有丝分裂活跃的卵泡，而静止的生殖细胞呈低度敏感。另有学者提出，化疗期间应用口服避孕药抑制卵泡发育，能够减少化疗对卵巢的损害，依据是化疗药物损伤卵巢的机制和口服避孕药的作用机理，即通过雌孕激素负反馈抑制下丘脑．垂体一卵巢轴，从而抑制卵泡发育，储存原始卵泡，保护卵巢储备功能，减少卵巢损伤。相关研究也证实口服避孕药能够降低及预防化疗对卵巢的损伤，促进化疗后卵巢功能甚至是生殖功能的恢复。但也有学者持不同观点，结论尚有争议。本研究旨在探讨化疗期间应用口服避孕药能否保护卵巢功能，以确定口服避孕药的有效性。 目的 本文采用阴道涂片法监测大鼠动情周期，放射免疫法和组织切片法，检测大鼠血清雌二醇(E2)水平、卵泡刺激素(FSH)水平、卵巢重量及卵泡数量，并通过统计学分析，比较实验前后各组实验指标变化，探讨口服避孕药在化疗期间有否起到保护卵巢的作用及其相关机制。 材料与方法 1．SPF级近交系雌性Wistar大白鼠，3月龄，体重1 809～2009。喂食SPF级鼠饲料及净化水，室温20℃~25℃，相对湿度450／0-．55％，每日光照12h，饲养1周熟悉环境后，每日清晨9：00行阴道细胞涂片，显微镜下观察动情周期，选用有正常动情周期的大鼠进入实验。口服避孕药(OC>．—-．达英一35(35pg炔雌醇／2mg醋酸环丙孕酮)。环磷酰胺(CTX)，规格0．29x10支。 2．动物实验：75只Wistar雌性大鼠随机分为5组： ①空白对照组：不予任何药物处理； ②CTx组：负荷剂量50 mg／kg腹腔注射，之后8 mg／(kg·d)腹腔注射，连续14d； ③oc组：8．7599炔雌醇／0．5mg醋酸环丙孕酮(溶于lml生理盐水)，灌胃，连续25d； ④联合治疗I组：同时给予CTX和OC，连续15d，给药方法同②、③组； ⑤联合治疗II组：先连续10d给予OC灌胃，用药剂量同③组；第11d起加用CTX，给药方法、时间及剂量同④组。3．采用阴道涂片法监测大鼠动情周期，放射免疫法测定E2、FSH浓度。所有卵巢标本均经石蜡包埋，连续切片，苏木素．伊红(HE)染色。 从实验开始到结束，各组大鼠每天行阴道涂片，并于给药结束前，每隔5天(相当于大鼠1个正常动情周期)，于动情间期测定各组E2、FSH浓度；停药后第15、30天(相当于3及6个正常动情周期)，测定各组E2、FSH浓度。另外，停药当天、第15、30天，分别处死各组1／3大鼠，比较卵巢重量、卵泡数量变化。 4．统计学处理采用SPSSl0．0软件包检验分析，数据以均数士标准差表示，采用的具体统计学方法有单向方差分析、重复测量、析因分析，两两比较采用SNK及LSD法，所有结果均P<0．05具有统计学意义。 数据记录与结果分析 1．各组大鼠E2、FSH浓度及动情周期变化 (1)大鼠E2、FSH行重复测量分析，分别比较各组、各时间点E2、FSH，分析差异是否有统计学意义，实验分组和时间是否有交互作用。 (2)空白对照组：于动情间期测定E2和FSH。观察阴道涂片是否呈正常大鼠的动情周期改变。 (3)CTX组：观察从给药第5天至实验结束，E2和FSH的变化情况，与同期其余4组E2、FSH分别比较，并分析计算差异是否有统计学意义。记录阴道涂片该组大鼠在给药的第几天出现持续不排卵现象，停药多少天后恢复正常动情周期。 (4)OC组：观察并比较从给药第5天至停药第15天，以及停药第30天，该组E2、FSH浓度与同期空白对照组的高低，计算差异是否有统计学意义。记录阴道涂片该组大鼠在给药的第几天出现持续不排卵现象，停药多少天后恢复正
动物心梗实验设计方案
联系个人所学专业，选取某种或某类疾病，设计相关实验的动物模型，详细描述其方法及步骤，并阐述所选动物种类和级别的理由以及该动物日常生活和实验的环境要求（包括进出该环境的顺序），实验过程中的注意事项 MicroRNA-378(miR-378)在心肌肥厚中的研究 一、实验原理： microRNA(miRNA)是一类小分子非编码单链RNA，长约22个碱基，能通过与靶mRNA3’非翻译区(3’UTR)互补配对，使其翻译受到抑制，从而在转录后水平对生物体内基因时序性表达起到精细调节作用。miRNA的表达变化与心肌肥厚的发生、发展密切相关。本实验通过异丙肾上腺素和去甲肾上腺素诱导实验动物心肌肥厚，然后用PCR技术测定心肌细胞中miRNA 的变化。 二、实验目的： 通过统计学方法观察miRNA在正常心肌细胞和心肌肥厚的心肌细胞中的差异，从而将miRNA作为诊断心肌肥厚的潜在的生物学标志。 三、实验材料及步骤：Wistar雄性大鼠30只（200～250g/只，SPF级别），异丙肾上腺素（ISO），去甲肾上腺素（NE），生理盐水。 3.1 分组及造模 3.1.1采用随机数表的方法讲30只wistar大鼠随机分成三组，每组10只，分别为对照组、ISO处理组、NE组。 3.1.2 ISO处理组：10只大鼠连续7天背部皮下注射ISO（4 mg/kg/天），制成心肌肥厚模型。 NE处理组：10只大鼠连续7天背部皮下注射NE（4 mg/kg/天），制成心肌肥厚模型。
对照组：10只大鼠同法背部皮下注射生理盐水（4 mg/kg/天），制成心肌肥厚模型。 3.2检测造模是否成功 3.2.1高频超声检测 分别于造模后第2周，称取大鼠质量，10％水合氯醛麻醉大鼠后，仰卧固定，将其胸前部剃毛，应用TOSHIBA-6000超声诊断仪，频率为7.5 MHz的探头置于其胸左侧，取径(LVEDD，LVESD)。左室射血分数(EF，%)、左室短轴缩短率(FS，%)、计算左室左室长轴切面，图像深度调至3.0 cm，由二维超声引导，将M型超声取样线置于二尖瓣腱索水平，垂直于室间隔及左室后壁，经M型超声曲线进行测量，每一超声测定值取3个连续心动周期测量均值。超声测量指标：舒张末期及收缩末期室间隔厚度(IVSTd，IVSVTs)、舒张末期及收缩末期左室后壁厚度(LVPWTd，LVPWTs)、舒张末期及收缩末期左室内质量(LVM，mg)。 3.2.2大鼠心肌质量指数的测定 称取大鼠体质量（body weight, BW），摘眼球取血备用，脱颈椎处死，快速打开胸腔取心脏，去除心房组织，分离左、右心室，生理盐水漂洗去血，用滤纸吸干表面水分，电子天平准确称取左心室质量（left ventricle weight, LVW）和全心质量（heart weight, HW）。计算左心室质量与体质量的比值（LVW/BW）、全心质量与体质量的比值（HW/BW），分别记为左心室质量指数（left ventricular weight index , LVWI）和全心质量指数（heart weight index, HWI）。 3.2.3心肌细胞横断面面积测定 每组随机取3只大鼠，取左心室中段，10%福尔马林液固定的心肌组织经乙
原生动物实验报告
动物实验（小鼠）的一般操作技术 一目的和要求： 通过实际操作，使学生掌握实验的一般操作方法，包括动物的抓去和固定、编号被毛的 去除给药途径麻醉采血和处死等方法。 二实验内容： 1 实验动物的抓取 2 实验动物性别、发情和配种的鉴定 3 实验动物编号的标记方法 4实验动物被毛的去除术 5 实验动物的给药途径和方法 6 实验动物的麻醉 7实验动物的采血 8 实验动物的处死方法 9 雄性不育小鼠的制备 三实验的方法 1 小鼠的抓取： 抓取时先用手将鼠尾提起，放在实验台上，轻轻拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠两耳 和头颈部皮肤，将鼠置于左手中心，用左手无名指和小指按住尾巴和后肢，即可做其他实验 操作作用。 2 实验动物性别、发情和配种的鉴定： 1抓取小鼠后，观察动物肛门与生殖器之间的距离。距离远的为雄性，距离性别鉴定： ○ 近的为雌性。成熟的雄性小鼠可看到小鼠睾丸的轮廓, 雌性肛门与生殖器之间有一无毛 2 动物仰卧保定，观察乳头。雄性乳头不能明显，雌性乳头明显。小沟。○ 发情鉴定（阴道分泌物检查） 材料：生理盐水，蒸馏水，显微镜，载玻片，细棉签，性成熟小鼠 原理：哺乳类雌性动物性成熟后出现情动周期，啮齿类动物在动情周期不同阶段，阴道 膜发生典型的变化。 操作: . 用左手拇指和食指固定小鼠的颈部，将小鼠倒放在手掌上，用左手小指固定小 鼠尾巴，然后用适宜大小的移液器吸取20至30ul生理盐水于小鼠阴道内反复抽吸5次。 2. 将抽吸得到的液体滴在用多聚赖氨酸预先处理过（防止脱片）的载玻片上，用移液 器吸头将其均匀涂抹开。 3. 涂片自然干燥后，用甲醇固定3分钟。 4. 待其干燥后， 先用瑞氏染液染色5至8分钟，冲洗后立即吉姆萨染液染色5至8分钟，用水漂洗后自然干 燥，待检。 5. 显微镜下观察阴道涂片的变化，见下图。附：小鼠发情周期阴道细胞的 变化小白鼠性周期4～5天，发情持续时间大约9～12小时或20小时，排卵是在发情开始后 2～3小时。 配种鉴定：○1 阴道栓法 ○2 涂片检查法。 3 小鼠编号的标记方法： 用被毛染色法做小鼠编号。用苦味酸（黄色），一般左前肢为1，左侧腹部为2，左后肢 为3，头颈部为4，背部为5，尾根部为6，右前肢为7，右腹部为8，右后肢为9。用两种颜 色可以染到99。 4 小鼠被毛去除： 给药途径和方法：有剪毛法，拔毛法，剃毛法，用硫化钠脱毛法。 5
影响实验动物的环境因素
影响实验动物的环境因素 摘要实验动物在生命科学研究领域中的应用不断发展,其饲养环境问题已越来越被国际所关注。实验动物几乎终身被限制在一个有限的环境中生活，这种环境就成了实验动物赖以生存的条件。良好的实验动物环境不仅是对动物本身的保护,更重要的是对动物试验结果的保证。本文详细论述了气候因素(温度、湿度、通风等方面)、理化因素(噪音、粉尘、光照)、居住因素（饲养器具、垫料）、生物因素（饲养密度）及营养因素（饲料、矿物质、维生素）对实验动物的影响。 关键词实验动物环境；影响因素 实验动物(Laboratory animals)是指经人工培育，对其携带的微生物和寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚的，用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。实验动物生长发育、繁殖交配所赖以生存发展的特定场所和外在条件，称为实验动物的环境。可将其分为外部环境(OutsideEnvironment)（指实验动物和动物实验设施以外的环境）和内部环境(Inside Environment)（指实验动物和动物实验设施内部，即动物直接生活的场所）。影响实验动物的环境因素有：气候因素、理化因素、居住因素、生物因素和营养因素。 1.气候因素影响实验动物的环境因素 气候理化居住生物营养
影响实验动物的气候因素主要有温度、湿度、气流、风速、换气次数等，本文主要叙述以下几种： 1.1温度 外环境温度随季节交替而变动，并与设施所处的地理位置相关联，即使在一昼夜内温度也有很大变化。温度是影响动物代谢和行为的最主要的环 境因素，温度同时影响实验数据的可靠性，实验动物设施建立精确的温度 控制是必要的，不同动物的环境温度应该保持在不同的范围还应该强调的 是标准给出的温度只适合成年的普通的动物，新生的、幼小的、无毛的、 刚做过手术的、生病的或者受伤的动物一般情况下要求更高的温度水平， 确定温度控制的前提是要依据动物体温的变化、动物特殊的生理状态或者 实验步骤要求。 1.2湿度 外环境空气中含有水汽，因而为湿空气。湿空气中含水汽的多少用绝对湿度和相对湿度来表示。绝对湿度是指每立方米空气中实际的含水量；相对湿度是把湿空气中的实际水蒸气分压与该温度状态下能够存在的最大水蒸 气压之比，用“％”表示。湿度过高或过低都会影响实验动物生长发育及 健康状况。一般认为在40％～70％相对湿度范围内，实验动物能很好适应。某些物种，例如大鼠和沙鼠，相关的湿度需要控制在相当窄的范围内来减 少可能出现的健康或福利问题。有一些物种，例如狗，可以忍耐很大的湿 度范围。欧洲啮齿类动物饲养设备内的相对湿度要求保持在45%～ 65%之间。但是沙鼠的相对湿度应该保持在35% ～ 55% 之间，兔子饲养设备内的相对湿度应该不少于45% ，猫可以在一个很宽的相对湿度波动范围内生活而不 会产生不良影响[1]。 1.3通风 通风的主要目的是提供充足的质量符合的新鲜空气以及将气味、有毒 气体、粉尘和传染源控制在最低水平，同时消除热量和湿气[2］。动物饲养 间里的空气最好是不间断地更新。动物饲养间必须有足够通风，如果周围 空间使用机械通风并过滤进入室内的空气，或者其他类型的对周围空间设 置特殊的独立空气供应( 即，供应空气并非来自室内) 时，不对动物饲养