虾青素试验方法
虾青素试验方法
警告----本产品对光敏感，在操作过程中应避光操作。三氯化锑-三氯甲烷溶液有强腐蚀性，在操作过程中应注意避免与皮肤接触，如不慎接触到皮肤，应立即用清水冲洗。
本标准所用的试剂和水，除非另有说明，均指分析纯试剂和符合GB/T6682中规定的三级水。
4.1 试剂和溶液
4.1.1 三氯甲烷。
4.1.2 无水乙醇。
4.1.3 BHT（2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚）。
4.1.4 三氯化锑-三氯甲烷溶液：称取1g三氯化锑用4ml三氯甲烷溶解即得（现配现用）。
4.2 仪器和设备
4.2.1 紫外-可见分光光度计。
4.2.2 分析天平。
4.2.3 超声波清洗器。
4.2.4 恒温水浴装置。
4.2.5 离心机（离心试管体积大于20ml）。
4.2.6 氮气吹干装置。
4.2.7 孔径为0.84mm的分析筛。
4.2.8 孔径为0.425mm的分析筛。
4.3 鉴别
4.3.1 取试样约10mg于试管中，加50℃-60℃热水1ml，于50℃-60℃热水浴中超声5min。冷至室温后，加入三氯甲烷（4.1.1）10ml并振摇30s，静置分层后，取三氯甲烷层溶液3ml与三氯化锑-三氯甲烷溶液（4.1.4）1ml反应，溶液应立即显蓝紫色。
4.3.2 取含量测定项（4.4.1）下的待测液，以三氯甲烷为空白，使用1cm的比色皿，于分光光度计上扫描波长200nm-600nm之间的吸收光谱，其最大吸收波长应在波长 484nm-490nm之间，光谱图参见附录A。
4.4 含量
4.4.1 测定
待测液：称取试样0.15g（精确至0.0002g），置于250ml棕色容量瓶中，加入BHT（4.1.3）约10mg，加入蒸馏水10ml，在50℃-60℃热水浴中超声5min，流水冷却至室温，加入无水乙醇（4.1.2）100ml和三氯甲烷100ml，于室温水浴中超声5min，用三氯甲烷稀释至刻度摇匀。取该溶液适量，置于具塞离心管中离心5min（转速为3000r/min），精密称取上层清液2ml于50ml棕色容量瓶中，将容量瓶置于约45℃的水浴中，用氮气流吹干，用三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，即为待测液，应立即测定（于20min内完成测定）。
以三氯甲烷为空白，使用1cm的比色皿，在分光光度计上测定待测液在487nm 附近最大吸收波长处的吸光度。
4.4.2 计算
试样中虾青素的含量X
以质量分数（%）表示，按式（1）计算：
1
×6250
A
max
X
=────── (1)
1
m
×1830
1
式中：
A
─待测液在487nm附近最大吸收处的吸光度；
max
6250─试样稀释的总体积，单位为毫升（ml）；
─称取试样的质量，单位为克（g）；
m
1
1830─试样中虾青素的标准百分消光系数（E1%
）；
1cm
4.4.3 允许差
取两次测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果相对偏差应不大于3%。
4.5 粒度
4.5.1 试验
称取试样50g，倾入分析筛中，振摇5min，取筛下物称量。
4.5.2 计算和结果的表示
以筛下物占试样的质量分数（%）表示，按式（2）计算：
粒度X
2
M
2
X
=────×100 (2)
2
M
3
式中：
─筛下物的试样质量，单位为克（g）；
M
2
─称取试样的质量，单位为克（g）。
M
1
4.6干燥失重
干燥失重按GB/T 6435规定的方法测定。
4.7重金属
按GB/T 5009.74规定的方法测定。
4.8 总砷
按GB/T 13079规定的方法测定。
虾青素知识介绍
虾青素知识介绍 虾青素 它是1938年从龙虾中首次被分离出来的一种超强的天然胞外抗氧化剂。它可以淬灭单形态氧，清除自由基以及有效的结束过氧化链式反应，防止氧原子作用于细胞膜、亚细胞膜上的不饱和脂肪酸，从而保护细胞及DN A免受氧化反应的伤害。由于他的脂溶性特性，可以中和细胞内（尤其是线粒体内）由新陈代谢产生的自由基，保护细胞内的蛋白质，使细胞更有效的新陈代谢，使细胞内的蛋白质更好的酶反应和参与运输功能。 虾青素，3，3′-二羟基-4，4′-二酮基-β，β′-胡萝卜素，分子式C40H52O4，分子量596.86，是一种萜烯类不饱和化合物，呈粉红色，是600多种类胡萝卜素中的一种。虾青素易溶于氯仿、丙酮、苯和二硫化碳等有机溶剂。虾青素易于氧化，氧化后变为虾红素(astacene)。 由于虾青素不是维生素A原，所以以前认为它不具备生理活性。然而近年的研究表明，虾青素具有抗氧化、抗肿瘤和增强免疫力等许多重要的生理和生物学功能。因而在食品添加剂、水产养殖、化妆品、保健品和医药工业方面有广阔的应用前景。 人工合成的虾青素不但价格贵($2000/kg)，而且大多数为顺式结构。美国FDA已批准人工合成的反式结构的虾青素用作水产养殖的添加剂。瑞士F Hoffman-La Roche已成功合成全反式虾青素。生物合成的虾青素大多数为反式结构，因此开发虾青素的生物来源成为虾青素研究的一项重要课题。本文将介绍虾青素的生物学功能、生物来源及应用等方面的研究进展。 虾青素的生物学功能 抗氧化性能 虾青素是海洋动物中主要的类胡萝卜素之一，具有极强的淬灭单线态氧和清除自由基能力。Lee等人研究了叶黄素、玉米黄素、番茄红素、异玉米黄素和虾青素(双键数分别是10，11，11，11和13)等五种类胡萝卜素在豆油光氧化作用中淬灭活性氧能力。它们淬灭单线态氧速率常数分别为5.72×109，6.79×109，6.93×1 09，7.39×109和9.79×109。表明它们淬灭活性氧能力随着共轭双键数的增加而增加，以虾青素的淬灭能力为最强Miki研究了叶黄素、玉米黄素、金枪鱼黄素、角黄素、β-胡萝卜素、α-生育酚和虾青素等类胡萝卜素淬灭单线态氧和清除自由基能力。各类胡萝卜素和α-生育酚清除自由基的半数效应剂量如表1所示。研究结果表明，类胡萝卜素具有清除自由基和淬灭活性氧的活性，这种活性与维生素E相似，其中以虾青素活性最强，比维生素E强百倍以上，作者将其称为“超级维生素E”。同时还发现虾青素具有抑制脂过氧化的作用。Woodall等人也发现虾青素具有降低脂质过氧化作用，能保护磷脂酰胆碱脂质免受氧化。Nakagawa等人也发现虾青素具有显著降低脂质过氧化物累积的作用。 类胡萝卜素和α-生育酚作为自由基清除剂的ED50值 清除剂ED50(nM) 虾青素200 玉米黄素400 角黄素450 叶黄素700
冷冻法施工作业指导书
武汉长江隧道工程 冷冻法施工作业指导书 编制： 审核： 批准： 中铁隧道股份有限公司武汉长江隧道工程 项目经理部 二零零六年七月 一、编制依据 1.1《地下铁道工程施工及验收规范·GB50299-1999》； 1.2《盾构法隧道工程施工及验收规范·DGJ08-233-1999》；
1.3《地下防水工程施工及验收规范·GBJ208-83》； 1.4《煤矿井巷工程施工及验收规范·GBJ213-90》； 1.5本工程投标文件。 二、编制目的 规范操作程序，指导现场施工。 三、适用范围 武汉长江隧道盾构隧道联络通道冷冻施工。 四、作业概述 该工法是在地层中按预定间隔埋设冻结管（Φ100mm的管径），冷却液在冻结管上循环，则管周围地层中的孔隙水以管为中心生成年轮形状冻土。邻近的冻土柱连接在一起，形成止水墙。 本工程用冷冻机把盐水溶液冷却到-20～-40℃，由循环泵送至冻结管冷却地层，盐水吸收地层的内热后，温度上升，经由盐水冷却泵，返回冷却机降温后，再次进入冷却管，如此反复循环。 五、人员机械配置 机械设备配置表
六、部门职责 1、工程部： ①、负责冻结帷幕设计计算、冻结孔布置及制冷设计； ②、冻结施工过程现场监督，冻结效果检查。 2、设物部： ①、负责冷冻设备的维修、保养； ②、保证电力持续、足量供应。 3、操作班组： ①、严格按照冷冻设计布孔、埋管； ②、钻机、冷冻机械操作。 七、作业流程 作业流程见下图。 7.1 施工准备 7.1.1在隧道内敷设一条120mm2动力电缆，用于冻结钻孔施工及隧道内冻结
作业流程图 系统安装供电。 7.1.2利用隧道内清水、排污管道，用于冻结孔打钻和冻结站运转的供水和排污。 7.1.3在旁通道施工工作面两端砌高约0.5m的泥浆挡墙，以免冻结孔钻进时泥浆四溢影响隧道内环境整洁。 7.1.4用厚4～6cm的木板在旁通道处铺设冻结施工场地，按不同位置的冻结孔钻进要求，用φ1.5″钢管搭建冻结孔施工脚手架。 7.2冻结孔定位与管片开孔 根据冷冻设计计划的基准点，按冻结孔施工图进行冻结孔孔位放线，提请注意的是：孔位布置首先要依据管片配筋图和钢管片加强筋的位置，在避开主筋的前提下可适当调整，一般不应大于100mm。 7.2.1在正式开孔前，利用检查孔，即隧道管片上的补浆孔钻Ф38mm小孔径探孔，检查地层稳定性。 7.2.2开孔选用J-200型金刚石钻机，配φ130mm金刚石取芯钻头进行钻孔，深度约300mm，以不钻穿管片控制。用钢楔楔断岩心、取出后，打入加工好的孔口管，并固定，每个孔口管要至少有4个固定点固定在管片上。 7.2.3开孔顺序 根据旁通道施工的孔位，采用由上向下的顺序施工：即先施工穿透孔，根据穿透孔的偏差，进一步调整有关的钻进参数，再按由上向下的顺序施工，这样可防止因下层冻结孔的施工引起上部地层扰动，减小钻孔施工时的事故发生率。 7.2.4钻孔偏斜和终孔控制 钻孔的偏斜应控制在1%以内，在确保冻土帷幕厚度的情况下，相邻终孔间距不得大于1.0m，否则应补孔。 冻结孔钻进深度应不小于设计深度，不大于设计深度0.2m（钻头碰到隧道管片者除外）。 7.3冻结孔钻进与冻结管设置
虾青素检测方法
虾青素分析方法 1.仪器：Agilent 1100 旋转蒸发器超声波 2.试剂：无水乙醇三氯甲烷正己烷（HPLC）丙酮（HPLC） 3.检测方法： 色谱柱：ZORBAX RX-SIL 4.6×250mm,5um 流动相：正己烷：丙酮=86：14 柱温：25℃ 检测波长：470nm（VWD） 流速：1.2ml/min 进样体积：20ul 4.溶液配制 供试品溶液： 精密称取虾青素（微粒）样品100mg，置于250ml容量瓶中，加5ml水，50℃水温超声10min，使样品完全溶解。冷却到室温，加100ml无水乙醇，用三氯甲烷定容。取一定量的溶液离心，转速2500/min，5min。移取上清液5ml于蒸馏烧瓶中，50℃旋转蒸发，残渣用4ml三氯甲烷溶解，移入50ml容量瓶中，并用正己烷定容。此溶液为供试品溶液。 标准品溶液： 精密称取虾青素对照品10.0mg，置于100ml容量瓶中，加10ml三氯甲烷，冷水超声溶解，加正己烷稀释至刻度，摇匀。移取此溶液5ml于50ml容量瓶中，加4ml三氯甲烷，用正己烷稀释至刻度，摇匀，此溶液为标准品溶液。 5.计算 虾青素含量＝样品峰面积×标准品质量×250×10×标准品含量×100％÷标准品峰面积÷样品质量÷100÷10
10%虾青素干粉的紫外检测方法 1.样品液配制 取待测样品100毫克干粉至250毫升棕色容量瓶中，加5毫升去离子水，在50摄氏度条件下超声溶解5min，冷却后，加100毫升无水乙醇摇匀，再用氯仿定容，过滤。取5毫升上述溶液至50毫升容量瓶中，再用氯仿定容至刻度。 2.虾青素空白溶液 用氯仿做空白。在474nm处测最大吸收值。 3.结果计算 C=A*2500/（1830*W） A为吸光系数 W为样品重量 虾青素晶体、油悬检测方法 1.样品液配制 取待测样品20毫克晶体（或油悬液60毫克）至100毫升棕色容量瓶中，加入10毫升氯仿溶解，加正己烷定容，摇匀，取1毫升上述溶液至100毫升容量瓶中，再用正己烷定容至刻度。 2.虾青素空白溶液 用正己烷做空白。在470nm处测最大吸收值。 3.结果计算 C=A*10000/（2100*W） A为吸光系数 W为样品重量
虾青素的功能及应用
虾青素的功能及应用进展 李兆华 （山东省环科院，济南，250013） 摘要：虾青素是一种极具潜力的类胡萝卜素，具有抗氧化、增强免疫和预防癌症等功效。本文主要综述了国内外在虾青素的功能及应用方面的进展。 关键词：虾青素，类胡萝卜素，抗氧化， 1 虾青素的结构 虾青素，是一种氧化型的类胡萝卜素，化学名称为3,3'-二羟基-4,4'-二酮基-β,β’-胡萝卜素，分子式为C40H52O4。在某些绿藻、细菌和某些酵母菌中，作为次生类胡萝卜素积累。在虾青素分子中，不仅同其他类胡萝卜素一样具有很长的共轭双键，而且在共轭双键链的末端还有不饱和酮基和羟基，羟基和酮基又构成α-羟基酮（见图1）。这些结构都具有比较活泼的电子效应，能向自由基提供电子或吸引自由基的电子，使其极易与自由基发生反应而清除自由基，从而起到抗氧化作用。因而，虾青素不仅具有一般类胡萝卜素的生理功能，而且，由于它特有的结构赋予的超强抗氧化特性，使其具有更为突出的生理功能[1]。 图1 虾青素的分子结构 Figure 1 Molecular structure of astaxanthin 2 虾青素的功能 2.1 虾青素的抗氧化能力 虾青素同其他类胡萝卜素一样具有抗氧化活性，在生物体中表现为猝灭单线态氧[2]，清除自由基，阻止脂质过氧化[3-6]等功能。并且越来越多的证据显示虾青素的抗氧化特性强于β-胡萝卜素[7]、玉米黄素（zeaxanthin, 3,3'-二羟基-β-胡萝卜素）[8]、角黄质（4,4'-二酮基-β-胡萝卜素）、维生素C和维生素E[9]。 虾青素是一类断链抗氧化剂，它特有的结构使其具有比其他类胡萝卜素更强的抗氧化特性。Di等[10]研究了多种类胡萝卜素猝灭分子氧的能力，发现猝灭分子氧的能力为：虾青素﹥α-胡萝卜素﹥β-胡萝卜素﹥红木素﹥玉米黄质﹥黄体素﹥胆红素﹥胆绿素。Terao等[7]利用测定甲基亚麻酸氢过氧化物的生成来测验类胡萝卜素的抗氧化功能，发现虾青素由于在α-羟基酮环的C-4和-4’位置上含有氧基团，可有效地延缓氢化过氧化物的形成，而且虾青素的自催化氧化速度比β-胡萝卜素和玉米黄素慢得多，虾青素是比β-胡萝卜素更有效的抗氧化剂。Lee 等[8]比较了包括虾青素在内的共轭双键数不同的5种类胡萝卜素在豆油光氧化作用中猝灭活性氧的作用，发现此作用随类胡萝卜素共轭双键数增加而增加，以虾青素的作用为最强。Miki[11]以含亚铁粒子的血红蛋白作为自由基产生者，用硫代
虾青素禁忌是什么
虾青素禁忌是什么 虾青素是众多营养保健品当中的一种类型，它拥有抗皱、抗氧化、预防心血管疾病等功效，有着很不错的市场。但是，任何营养保健品即使有着再好的功效也并非适用于每一个人，虾青素禁忌是什么呢？这个作为众多女性和老年人信赖的保健产品也 有着讲究的食用方法，让我们一起来看一看虾青素的禁忌是什么，以便更好的进行身体的保健。 虾青素是一种天然色素的一种，能够有效的产生氧化剂，是一种天然抗氧化剂，而且是一种能够溶于水的溶剂，他主要是类胡萝卜素的一种，虾青素的话一般含有丰富的都是在海鲜里面，比如说一些新鲜的虾仁儿，，或者是一些螃蟹，元鱼，还 有一些海产品里面也是有的比如说木耳，海带，在吃这些含有虾青素的食物的时候要注意不能吃橙子，不能吃消炎药物。 尽管虾青素对人体健康是有一定的好处的，但是有些 人群也不适合吃。首先，如果平时吃海鲜都过敏的人，那么就不能吃虾青素。因为虾青素都是从海产品当中提取粗来的，因此可
以看作是一种海产品，所以对海鲜过敏的人不能吃。其次，尿酸比较高的人也不能吃，因为虾青素可以影响到一个人的酸碱平衡，所以，尿酸特别高的人不能吃海鲜，也不能吃虾青素。 虾青素是蟹，虾等海产品的提取物质，由于其具有抗 氧化的特点，所以在被往往用于抗衰老、防止胶原蛋白流失、避免黑色素皮肤堆积。虽然虾青素的好处很多，但是虾青素的副作用也不容忽视，特备是不适宜虾青素的人群服用了虾青素更容易导致各种身体不适。所以如果对海鲜过敏、痛风、尿酸高的人群是绝对不能吃虾青素的，否则往往加重病情，而且其功效和作用也不能发挥，所以对虾青素的食用应特别注意。 这些便是关于虾青素禁忌的相关资料了。使用虾青素 能够有效的改善我们身体的一些亚健康症状，但保健品和药品是不能划等号的，在食用的时候我们不能把它当做药物看待，即便它能够改善不少症状，但始终与药物有着本质上的区别，这些我们也要格外注意。
胰岛素
胰岛素 科技名词定义 中文名称：胰岛素 英文名称：insulin 定义：胰腺朗格汉斯小岛所分泌的蛋白质激素。由A、B链组成，共含51个氨基酸残基。能增强细胞对葡萄糖的摄取利用，对蛋白质及脂质代谢有促进合成的作用。 应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；激素与维生素（二级学科） 以上内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布 胰岛素是由胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。胰岛素是机体内唯一降低血糖的激素，同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成。外源性胰岛素主要用来糖尿病治疗，糖尿病患者早期使用胰岛素和超强抗氧化剂如（注射用硫辛酸、口服虾青素等）有望出现较长时间的蜜月期，胰岛素注射不会有成瘾和依赖性。 目录 简介 显微镜下的胰岛 beta 细胞 〖化学本质〗蛋白质 〖分子式〗C257 H383 N65 O77 S6 〖分子量〗5807.69 〖性状〗白色或类白色的结晶粉末 〖熔点〗233℃（分解） 〖比旋度〗-64°±8°(C=2,0.003mol/L NaOH) 〖溶解性〗在水、乙醇、氯仿或乙醚中几乎不溶；在矿酸（无机酸）或氢氧化碱溶液中易溶 〖酸碱性〗两性，等电点pI5.35-5.45
〖英文缩写〗INS. 发现过程 胰岛素于1921年由加拿大人F.G.班廷和C.H.贝斯特首先发现。1922年开始用于临床，使过去不治的糖尿病患者得到挽救。中国科学院肾病检测研究所主治直至80年代初，用于临床的胰岛素几乎都是从猪、牛胰脏中提取的。不同动物的胰岛素组成均有所差异，猪的与人的胰岛素结构最为相似，只有B链羧基端的一个氨基酸不同。80年代初已成功地运用遗传工程技术由微生物大量生产人的胰岛素，并已用于临床。 1955年英国F.桑格小组测定了牛胰岛素的全部氨基酸序列，开辟了人类认识蛋白质分子化学结构的道路。1965年9月17日，中国科学家人工合成了具有全部生物活力的 结晶牛胰岛素，它是第一个在实验室中用人工方法合成的蛋白质。稍后美国和联邦德 国的科学家也完成了类似的工作。70年代初期，英国和中国的科学家又成功地用X射线衍射方法测定了猪胰岛素的立体结构。这些工作为深入研究胰岛素分子结构与功能 关系奠定了基础。人们用化学全合成和半合成方法制备类似物，研究其结构改变对生 物功能的影响；进行不同种属胰岛素的比较研究；研究异常胰岛素分子病，即由于胰 岛素基因的突变使胰岛素分子中个别氨基酸改变而产生的一种分子病。这些研究对于 阐明某些糖尿病的病因也具有重要的实际意义。 品种分类 1.按来源不同分类 1、动物胰岛素：从猪和牛的胰腺中提取，两者药效相同，但与人胰岛素相比，猪胰岛素中有1个氨基酸不同，牛胰岛素中有3个氨基酸不同，因而易产生抗体。 2、半合成人胰岛素：将猪胰岛素第30位丙氨酸，置换成与人胰岛素相同的苏氨酸，即为半合成人胰岛素。 3、生物合成人胰岛素（现阶段临床最常使用的胰岛素）：利用生物工程技术，获得的高纯度的生物合成人胰岛素，其氨基酸排列顺序及生物活性与人体本身的胰岛素 完全相同。 2.按药效时间长短分类 1、超短效：注射后15分钟起作用，高峰浓度1~2小时。 2、短效(速效)：注射后30分钟起作用，高峰浓度2~4小时，持续5~8小时。 3、中效(低鱼精蛋白锌胰岛素)：注射后2~4小时起效，高峰浓度6~12小时，持续24~28小时。
ORAC法测定虾青素抗氧化能力实验
ORAC法测定虾青素抗氧化能力实验 1.实验目的 1.1 了解多功能酶标仪的应用范围和基本结构及其操作方法 1.2 掌握ORAC法测定虾青素抗氧化能力实验原理 2 实验原理： 2.1 仪器基本原理 酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计。光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本，该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上。光电检测器将透射过待测标本后强弱不同的光信号转换成相应的电信号，电信号经前置放大、对数放大、模数转换等处理后，送入微处理器进行数据处理，转换成相应的浓度，最后由显示器和打印机输出结果。 2.2 ORAC实验原理 ORAC是氧自由基吸收能力（oxygen radical absorbance capacity）的缩写，也被称为抗氧化能力指数，ORAC分析法中的自由基主要来源于偶氮化合物2，2'-偶氮-双-（2-脒基丙烷）氯化二氢[2，2'-azobis（2-amidinopropane）dihydrochloride，AAPH]热分解产生的过氧化氢自由基，也可以是芬顿( Fenton) 反应过程中产生的羟自由基，以荧光素钠（sodium flourescein，FL）为荧光探针，观察自由基与荧光探针作用后，探针荧光强度的衰退过程，以水溶性维生素E类似物( 6-hydro-2，5，7，8-tetramethylchroman-2-carboxylic acid，Trolox) 作为抗氧化标准物质，检测体系中各种抗氧化剂延缓探针荧光强度衰退的能力，以此评价抗氧化剂的抗氧化能力。 3 仪器及试剂 3.1 仪器及配件 Enspire 多功能酶标仪，96孔荧光板 3.2 试剂 3.2.1 磷酸盐缓冲液的制备：精密量取适量磷酸，以高纯水稀释得到75 mmol/L 磷酸溶液；称取8.56 g磷酸氢二钾以高纯水500mL溶解，以磷酸溶液调pH 7.4，即得75 mmol/L pH 7.4的磷酸盐缓冲液。 3.2.2 AAPH溶液的制备：精密称取AAPH 207mg，以磷酸盐缓冲液溶解并定容至5 mL量瓶，即得浓度为153 mmol/L的AAPH溶液。 3.2.3 FL溶液的制备：精密称取FL 40 mg，以磷酸盐缓冲液溶解，制成4125 mmol/L的FL 溶液，记为FL母液a。精密吸取FL母液a 50uL置50 mL量瓶中，以上述缓冲液定容至刻度，记为FL母液b；FL母液a，b均于4℃冷藏。实验时精密吸取FL母液b500uL置25 mL 量瓶中，以上述缓冲液定容至刻度，即得8*10-5mmol/L的稀释液。 3.2.4 样品溶液的制备：精密称取虾青素样品适量，以甲醇溶解，配制成1mg/mL的化合物母液，继而以缓冲液稀释制成10，50，100ug/mL的化合物溶液。 4 实验内容 4.1 样品量效曲线的确定：精密吸取FL稀释液100uL于96孔荧光板中，随后加入不同浓度样品溶液50uL振荡5 min，37℃温育10min后迅速加入AAPH液50uL启动反应。以激发波长485 nm，发射波长535 nm进行测定并记录荧光值，反应过程中每隔1.5min测定一次荧光值（记为Fn）。以测定时间为横坐标，荧光值为纵坐标绘制不同浓度虾青素荧光衰变曲线。
虾青素——最强的抗氧化剂
虾青素——最强的抗氧化剂 虾青素（Astaxanthin）是一种脂溶性类胡萝卜素（也是一种红色素，分子3,3'-二羟基-β,β-胡萝卜素-4,4'-二酮），作为天然虾青素是一种超强抗氧化剂，其抗氧化能力是普通维生素E的550倍（浙江大学汪振诚等的动物试验达到1000倍），天然β－胡萝卜素的10倍，据报道抗氧化剂已发展成为近30亿美元的市场需求。权威人士预言“如果说20世纪是维生素的世纪，那么21世纪将是抗氧化剂的世纪。”天然虾青素是迄今为止自然界中发现的最强的抗氧化剂。 人们日常膳食中三文鱼肉的红色物质即是虾青素，天然虾青素对人体绝对安全。所谓的抗氧化就是抗衰老，美国著名皮肤美容学家佩里肯教授曾经在《泰晤士报》发表一篇“怎样让你年轻十岁”的文章极具震撼力（《环球时报?生命周刊》20030923№l），推荐食用野生三文鱼，称其中独特的脂肪酸有显著的抗衰除皱作用，其成分就是天然虾青素。 天然虾青素目前主要作为人类高级保健食品、药品的原料；水产养殖（目前主要是大马哈鱼和鳟鱼、三文鱼）、家禽养殖的饲料添加剂；化妆品添加剂。 1、它能显著提高人体的免疫力，由于其能与骨骼肌非特异结合（三文鱼肉即是），可有效清除肌细胞中因运动产生的自由基，强化需氧代谢，因此具有显著的抗疲劳作用； 2、它是唯一能通过血脑屏障的类胡萝卜素，具有真正的抗衰老作用； 3、有效抗氧化是一切美容活动的基础，由于其超强的抗氧化作用：可以有效除皱抗衰、防晒美白以及除去因年龄所致的黄褐斑，在预防和治疗“年龄相关性黄斑变性”、改善视网膜功能方面具有良好效果，以上均在美国得以明确证实。 从美国几家生产虾青素保健品公司的财务报告来看，这一块的市场年增长率29%以上。对于治疗心血管疾病美国已经推出相关产品（Salmon Essentials“三文鱼精华”）上市。至于老年痴呆、哮喘方面的功效，美国正在临床试验阶段。目前纯天然虾青素国际市场价格3500美元/kg以上（NatuRose (astaxanthin) powder）。2004年7月4日含虾青素1.5%藻粉报价已达$18/4OZ。 虾青素是一种非维生素A原的类胡萝卜素，具有超强的抗氧化性，动物实验表明它有抑制肿瘤发生、增强免疫功能等多方面的生理作用。目前在食品、医药、化妆品及养殖行业得到了广泛的应用。 用于保健食品及药品，有以下生理功能： 1、抗癌作用：虾青素对人大肠癌SW116细胞的增殖有明显抑制作用，对膀胱癌、肝癌、口腔癌、肺癌和由紫外线引起的皮肤癌有一定的抑制作用。 2、抗氧化作用：虾青素具有超强的抗氧化作用，其抗脂肪氧化的能力比?-胡萝卜素高10倍，比维生素E高1000倍，是OPC的20倍，故称为超级抗氧化剂。
(冷冻法施工)解析
地铁施工技术交流材料 冷冻法联络通道施工技术及风险控制措施 一、冻结法的基本原理与特点 采用冻结法对地层土体进行加固，是指利用人工制冷技术,使地层中的水结冰,把天然岩土变成冻土,增加其强度和稳定性,隔绝地下水与地下工程的联系,以便在冻结壁的保护下进行地下工程掘砌施工的特殊施工技术。其实质是利用人工制冷临时改变岩土性质以固结地层。 1、岩土冻结实质 岩土冻结性质的改变，即将含水地层（松散土层或裂隙岩层）冷却至结冰温度下，使土中孔隙水或岩石裂隙水变成冰，岩土的性质发生重要变化，形成一种新的工程材料——“冻土”。 2、冻土结构特点 而冻土结构具有较高的强度和绝对的封水性。 3、冻土结构功能 冻土结构的承载功能和封水的不承载功能。 4、制冷方法 其制冷技术方法，通常使用制冷设备，利用物质由液态变为气态,即气化过程的吸热现象来完成的。 4.1、有两种类型：⑴、冷媒剂(盐水)吸热：氨 (-33.4℃)；干冰(-78.5℃)；⑵、直接气化吸热：液氮(-19 5.8℃)；干冰(-78.5℃) 4.2、冻结系统常有两种类型：⑴、封闭系统（盐水冻结）；⑵、开放系统（液氮冻结） 5、冻结法的适应性 冻结法加固与其它加固方法相比，其适应性更强，能够适应粘土、粉土、砂层以及砾石、卵石等任何地层。
6、冻结法的特点 6.1、冻土帷幕的变化性：⑴、冻土范围可变；⑵、冻土温度可变；⑶、冻土强度可变（强度是温度的函数） 6.2、冻土帷幕的连续性：水在负温下结冰的必然性； 6.3、冻土帷幕的可知性：通过温度测试可判断冻结范围、冻土强度 7、冻结法施工的优点 7.1、安全性好：⑴、冻土强度较高；⑵、冻土连续性可靠、封水性好 7.2、适用性强：⑴、适用于几乎所有具有一定含水量的松散地层（包括岩石）； ⑵、复杂地质条件可行（流砂、大深度、高水压） 7.3、灵活性高：⑴、冻土帷幕性状（范围、形状、温度、强度）可控 8、冻结法施工缺点 由于冻结法所形成的冻土帷幕其范围、温度、强度具有变化性，其冻结范围、强度随温度的变化而变化，如果供冷不足或外部热源可导致冻土帷幕性能（范围、强度）退化，安全性能降低，施工风险增大。众所周知，上海地铁4号线联络通道施工时，其冻结帷幕失效，发生重大工程风险事故，给国家造成严重的经济损失。 8.1、冻胀融沉：⑴、对环境有一定的影响，严重时具有一定的破坏力； ⑵、融沉控制不当可导致结构差异沉降和长期沉降； 8.2、风险性：⑴、供冷不足或外部热源可导致冻土帷幕性能退化（范围、强度）； ⑵、流水作用下冻土可快速消融 8.3、局限性：⑴、地下水流速影响冻结效果；⑵、地层含盐影响冻结效果； ⑶、含气地层可影响冻结效果 9、冻结法的应用 通过冻结法加固所形成的冻土帷幕，其形状、范围、温度、强度完全可以受控，且通过温度测试可判断冻结范围、冻土强度。因此，人工冻结地层加固方法被广泛用于需要进行地层加固和封水（冻土帷幕）要求工程施工领域。特别是随着我国城市地铁轨道交通的发展，软土隧道盾构的进出洞、联络通道等风险性较高的工程项目，常
超声波诱变筛选虾青素高产菌株_刘艳
生物技术 虾青素（astaxanthin），是一种类胡萝卜素，化学名称为3，3′－二羟基－4，4′－二酮基－β，β′－胡萝卜素，又名虾黄素，虾黄质或龙虾壳色素。天然虾青素于自然界广泛的存在，尤其是在海洋环境中。大量研究证明，虾青素具有增强免疫力；抗衰老；降低心血管疾病和由化学因素诱发的癌症发病率；增加对有害生物的抵抗力；维护眼睛和中枢神经健康；抗氧化能力极强，增强肌肉力量和耐受力等重要的生理功能，而且对人体绝对安全。因此，虾青素在食品工业、饲料工业、化妆品工业、保健品和医药工业等方面具有广阔的应用前景[1-2]。本论文以CTD004为出发菌株，对其进行超声波诱变，提高了该菌生产虾青素的能力，采用这种传统的生物物理学方法，不但生产出的产品安全无毒副作用，而且可以提高虾青素产量。 １ 材料与方法 １．１ 材料与试剂 1.1.1 菌株 CTD004菌株（自命名，经初步鉴定属于假单胞菌属）：吉林农业大学发酵工程实验室。 1.1.2 培养基及试剂 1.1. 2.1 基础培养基 蛋白胨10.0 g，葡萄糖10.0 g，KH2PO4 1.0 g，MgSO4·7H2O 1.0 g，酵母膏2.0 g，定容至1 L蒸馏水中，pH 7.2～7.5，121℃，灭菌20 min。 1.1. 2.2 发酵培养基 蛋白胨10.0 g，可溶性淀粉10.0 g，KH2PO4 1.0 g，MgSO4·7H2O 1.0 g，酵母膏2.0 g，定容至1 L蒸馏水中，pH 7.2～7.5，121℃，灭菌20 min。 虾青素标准样品（购于Sigma公司），二甲基亚砜、氯仿、甲醇、冰醋酸、蛋白胨、葡萄糖、可溶性淀粉、酵母膏、KH2PO4、MgSO4·7H2O均为进口分装或国产分析纯。 １．２ 方法 1.2.1 菌种超声波驯化和筛选 1.2.1.1 菌悬浮液的制备 将出发菌株接种于固体培养基上，32℃培养16 h（种龄处于对数期），用接种环移一个虾青素菌落至无菌试管中（9 mL装有玻璃珠的生理盐水），振荡10 min 过滤，即得菌体悬浮液。 1.2.1.2 超声波驯化 取菌体悬浮液15 mL在20kHz，200 w，工作电压200 v的超声条件照射不同时间（2 min，1 min，30 s），按10倍系列稀释法稀释，分别取稀释倍数为l0-5、10-6、10-7 3个稀释度0.1mL涂布于平板上，培养120 h，挑取颜色较深的菌落扩大培养，重复上述操作3轮。 1.2.2 诱变筛选方案 第一轮诱变：以CTD004为出发菌株，经超声波诱变，在初筛平板上选出200株颜色较深的菌株，进行摇瓶复筛，选出5株发酵产青素良好的菌株进行第二轮诱变。 第二轮诱变：以第一轮所选5株为出发菌株，经超生波诱变，在初筛平板上，每株选出40株颜色较深的菌株，共200株颜色较深的菌株，进行药瓶复筛，选出5株发酵产青素良好的菌株进行第三轮诱变。 第三轮同上。 1.2.3 分析测定 标准曲线的绘制：精确称取0.1g虾青素样品，用混合破壁提取试剂定容至100 mL，分别取1 mL，2 mL，3 mL，4 mL，5 mL，6 mL，7 mL，8 mL 加入8个100mL容量瓶内，定容摇匀，配置成浓度为0.01、 0.02、 0.03 、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08 mg/mL，在480 nm下测定配制溶液的吸光度。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作曲线图，所得曲线即为虾青素的标准曲线，其标准曲线的方程为（Y=1.2786X-0.0088）。 胞内虾青素含量测定[3]：发酵液中虾青素的含量采用分光光度法进行测定，由于虾青素是一种细胞内色素，需要混合破壁提取试剂提取。甲醇与氯仿按体积比5：1配成试剂Ⅰ，冰醋酸与二甲基亚砜按体积比5：1配成试剂Ⅱ，将试剂Ⅰ与试剂Ⅱ按体积比3：1配成混合破壁试剂。50 mL发酵液经8 000 r/min离心10 min后，用蒸馏水洗两遍，离心得鲜菌体，搅拌后加入混合破壁试剂，环境温度为30℃。搅拌，于8 000 r/min离心10 min 得提取液，480 nm下，以混合破壁试剂作为参比液调零，测定其OD值。将OD值代入虾青素的标准曲线，即可算出发酵液中虾青素的含量。 ２ 结果与分析 ２．１ 不同超声波处理时间的诱变效应筛选 超声波对菌株CTD004有明显的致死效应，致死率随照射剂量增大而增大，短时间超声波处理会给筛选带来大量的工作量，而负突变较多的出现在偏高的剂量中，为保证有较高的筛选机率，因此选择死亡率在85%左右的超声波处理：处理时间为1 min。 超声波诱变筛选虾青素高产菌株 刘 艳1 李 佳2 冯 印1 （1 长春科技学院，长春 130000； 2 辽宁省粮食科学研究所，沈阳 110000） 摘 要 以CTD004为出发菌株，经超声波诱变，获得一株高产虾青素菌株，结果显示：此菌株在用20 kHz，200 w，工作电压200 v条件下处理30 s，虾青素的产量明显提高，诱变后虾青素产量为190.6 mg/L，比出发菌株增加了126.0 mg/L。经5次传代培养，虾青素产量稳定。 关键词 虾青素；超声波；诱变 中图分类号 Q 93 文献标志码 B 作者简介：刘艳（1981-），讲师，主要从事发酵工程方面的研究。 收稿日期：2013-09-12
虾青素的九种功能
虾青素的生理功能 1 虾青素的抗氧化作用 生物体内细胞生物氧化产生的氧自由基和H 2O 2 等活性氧，易通过脂肪酸自由 基将细胞膜上的不饱和脂肪酸氧化，打破生物体抗氧化剂和自由基的平衡，易导致风湿性关节炎、心脏病等症状或疾病。虾青素是一种链断裂型抗氧化剂，具有极强的抗氧化作用，能有效清除活性氧。天然虾青素是人类发现自然界最强的抗氧化剂，其抗氧化活性远远超过现有的抗氧化剂。Hix等首先提出在高压氧的条件下，类胡萝卜素可加强氧化剂的氧化性，虾青素比类胡萝卜素抗氧化能力强。虾青素有“超级VE”之称，是α-生育酚抗氧化性的百倍，能阻断不饱和脂肪酸降解降低或防止自由基的生成，也能通过长链的共轭烯烃结构阻止单线态氧对其它分子或组织造成氧化伤害。研究发现虾青素可通过淬灭单线态氧，清除自由基，降低膜通透性限制氧化剂渗透进细胞内，能够维持膜稳定。McNulty等用X射线衍射分析实验也发现虾青素能稳定膜结构，展现出强大的抗氧化活性。曹秀明等研 究发现虾青素能对H 2O 2 引起的质膜氧化损伤具有明显的抗氧化保护作用。虾青素 还可减少DNA的氧化损伤，抑制脂质过氧化，增加蛋白质表达和抗氧化酶活性。裴凌鹏发现摄入10 mg Pkg剂量虾青素即可显著降低机体各脏器组织MDA的产生， 增强SOD和GSH 2P x 酶活性，提高超氧化物歧化酶一1(SOD一1)的蛋白表达，表明虾 青素具有抗氧化作用。虾青素能使动物细胞内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的蛋白表达及活性均提高。裴凌鹏等研究发现虾青素可通过激活细胞内抗氧化系统保 护成骨细胞免受H 2O 2 诱导的氧化损伤。 2 虾青素的免疫调节作用 虾青素能明显促进抗原存在时脾细胞抗体产生，刺激体内免疫球蛋白的产生，增强T细胞的作用，对机体免疫能力具有调节作用。Jyonouchi等研究表明虾青素比类胡萝卜素在对小鼠淋巴细胞体外组织培养系统表现出更强的免疫调节作用，同时还发现虾青素能提高人体免疫球蛋白的产生，进一步证实了虾青素对机体免疫能力的调节作用。体外实验表明，虾青素可提高依赖于T专一抗原的体液免疫反应，显著促进小鼠脾细胞对胸腺依赖抗原（TD—Ag)反应中抗体的产生，研究发现虾青素能显著促进分泌IgG和IgM的细胞数增加，促进TD—Ag刺激时的抗体产生。研究表明在抗原入侵初期，虾青素能通过增加小鼠体内的IgM、IgA和IgG增
虾青素对于人体健康的作用
虾青素对于人体健康的作用 发表时间：2019-08-15T09:35:24.327Z 来源：《医师在线（学术版）》2019年第11期作者：叶月恒龚洋洋李建东刘香[导读] 虾青素（astaxanthin）是类胡萝卜素的一种，属于脂溶性的红色素。虾青素广泛存在于虾、蟹和鲑科鱼类体内，也存在于火烈鸟的羽毛中。 浙江新和成股份有限公司浙江绍兴 312500 什么是虾青素 虾青素（astaxanthin）是类胡萝卜素的一种，属于脂溶性的红色素。虾青素广泛存在于虾、蟹和鲑科鱼类体内，也存在于火烈鸟的羽毛中。对于人类来说，虾青素是目前已发现的最强抗氧化剂，其线粒体脂质抗氧化活性是维生素E的1000倍，被赞誉为“超级维生素E”。近十年来，国内外大量科学研究包括临床试验都证实虾青素对人体健康具有积极的促进作用。 虾青素促进人体的氧化平衡 人体的代谢和运动都会产生自由基，而日常生活中的许多环境因素，如环境污染，吸烟，紫外线以及饮用酒精等都会进一步增加人体内的自由基数量。这些自由基具有高度不稳定性，会导致脂肪酸的氧化、蛋白质的降解和DNA的损伤等多种细胞伤害，最终引起氧化应激。过多的自由基也打破了生物体自由基与抗氧化剂的平衡，从而引起多种炎症反应，影响免疫系统。虾青素由于其独特的分子结构可以跨越细胞双层膜结构，中和细胞膜内外的自由基，以此巩固细胞膜和线粒体，促进机体的氧化平衡。 虾青素的美白、防晒和保湿功效 皮肤是人体最大的器官，一个成年人的皮肤面积可达1.5-2m2，体重占到人体重量的10%。皮肤的结构复杂，包括了表皮层、真皮层和皮下组织，每一层都具有特殊并且相当重要的功能。而真皮层中的胶原蛋白、弹力蛋白和网状纤维则构成了支持皮肤的骨架。内在和外在的因素都会产生大量的自由基和基质金属蛋白酶并造成对皮肤的损害，如紫外线可以导致表皮的晒伤以及胶原蛋白和弹性蛋白的损伤，引起皮肤形成斑点和皮肤的皱纹。研究表明，虾青素作为口服或者外用对皮肤健康有以下四个方面的作用：1. 通过加强胶原蛋白层而提高皮肤弹性；2. 增加皮肤水分含量；3. 淬灭自由基，阻止对皮肤的伤害；4. 减少色素沉着。 虾青素提高肌肉耐力和能量代谢 人体的剧烈运动会产生大量的自由基和活性氧。这些活性的分子会导致机体抗氧化体系的失衡，即氧化应激。氧化应激可以破坏肌肉的蛋白质，脂肪和DNA。这些会引起肌肉的疲劳和酸痛以及肌肉炎症。研究表明，虾青素可抑制自由基对肌肉的氧化损伤。口服虾青素可以提高肌肉的耐力和恢复力，抑制乳酸的形成、缓解肌肉疲劳，减少肌肉损伤和炎症反应，保护线粒体、提高肌肉的能量代谢。虾青素预防心血管疾病 根据世界卫生组织定义，心血管疾病是心脏和血管疾患引起的，包括冠心病（心脏病发作）、脑血管疾病（中风）、高血压（血压升高）、周围血管疾病、风湿性心脏病、先天性心脏病、心力衰竭以及心肌病。临床研究证明虾青素在预防动脉硬化方面有显著功效，主要体现在以下几个方面：1. 改善血脂的组成（如提高高密度脂蛋白HDL胆固醇水平，降低甘油三酯含量，降低脂肪过氧化反应）；2. 降低氧化应激和炎症反应；3. 促进毛细血管中的血液流动； 4. 减轻低密度脂蛋白LDL的氧化。 虾青素维护眼睛的健康 据美国国家职业安全和卫生研究所统计，超过88%的办公室人员经常感觉眼睛疲劳。在我国 13亿人口中，近视的发生率高达25%。虾青素对眼睛的作用主要体现在减缓慢性氧化损伤方面，以及有效缓解眼睛疲劳方面。虾青素也可以推迟与年龄有关的视力退化。通过口服虾青素可以舒缓长期遭受压力的睫状体肌肉，改善眼球的调焦功能，提升微血管的血液循环，促使更多养分输送至睫状体和视网膜，从而改善视觉疲劳综合症。 虾青素提高免疫力、缓解炎症反应 炎症是机体对于刺激的一种防御反应，包括急性炎症和慢性炎症。慢性炎症会加速机体老化，同时也与多种疾病的发生密切相关，如慢性心脏病、关节炎和过敏。慢性炎症的主要特点是相关细胞因子和炎症因子如TNF-α,C-反应蛋白的过度表达。而虾青素可以显著降低这些炎症因子的表达和传递，从而对机体提供重要的抗炎症保护。虾青素也可以保护免疫细胞免受氧化应激，从而提高机体的免疫力。虾青素抑制健忘，提高记忆力 人体的大脑只有1130平方厘米，体重1.5公斤，但却包含了1000亿个神经元。可以说大脑是我们身体的司令部，每天指挥和控制着身体的各个部位，对人体有着举足轻重的作用。然而，大脑也是脆弱的，每天遭受着自由基的攻击。对于50岁以上的人来说，本身体内的抗氧化酶活已经失去了原先的功效。过度并持续的氧化应激和慢性炎症反应是导致神经退行性疾病如阿尔茨海默病、帕金森病以及脑血管疾病（缺血性中风、老年痴呆）的主因之一。大量的临床和科学实验研究表明，虾青素可以改善老年人的认知功能，降低血细胞的氧化水平，提高微血管的血液流动以及血液的抗氧化能力，稳定脑部的血压，降低中风的风险。 参考文献： 1. Tominaga, K.T etal., Protective effects of astaxanthin on skin deterioration. Journal of Clinical Biochemistry and Nutrition.2017, 61(1):33-39. 2. Katagiri et al., Effects of astaxanthin-rich Haematococcuspluvialis extract on cognitive function: a randomised, double-blind, placebo-controlled study. J ClinBiochemNutr. 2012, 51(2):102-7. 3. Park, J.S., et al.,Astaxanthin decreased oxidative stress and inflammation and enhanced immune response in humans.
生物钟之秘密
生物钟之秘密 生物钟又称生理钟。它是生物体内的一种无形的“时钟”，实际上是生物体生命活动的内在节律性，它是由生物体内的时间结构序所决定。通过研究生物钟，目前已产生了时辰生物学、时辰药理学和时辰治疗学等新学科。可见，研究生物钟，在医学上有着重要的意义，并对生物学的基础理论研究起着促进作用。 目录 基本简介 概述 定义 褪黑素 虾青素（ASTA） 四点功能 概述 提示时间 提示事件 维持状态 禁止功能 特征 人体的生物钟 生物钟研究 概述 有趣的生物钟现象 人体内的“隐性时钟” 生物钟：人的第三只眼 12个生物钟基因 研究表明人类生物钟一天慢18分 动物皮肤里藏着生物钟 生物钟规律 生物钟调整 冬季如何调整生物钟 高考考生如何调整生物钟 合理安排作息 与体温变化 节律 “洞窟实验” 皮肤美容 养生法 前言 人体一天中的各种生理波动如下 生物钟养生要采取三大措施 定位的计算方法 前言 一、简单笔算法
二、计算器计算法 与松果体的关系 展开 基本简介 概述 定义 褪黑素 虾青素（ASTA） 四点功能 概述 提示时间 提示事件 维持状态 禁止功能 特征 人体的生物钟 生物钟研究 概述 有趣的生物钟现象 人体内的“隐性时钟” 生物钟：人的第三只眼 12个生物钟基因 研究表明人类生物钟一天慢18分动物皮肤里藏着生物钟 生物钟规律 生物钟调整 冬季如何调整生物钟 高考考生如何调整生物钟 合理安排作息 与体温变化 节律 “洞窟实验” 皮肤美容 养生法 前言 人体一天中的各种生理波动如下生物钟养生要采取三大措施 定位的计算方法 前言 一、简单笔算法 二、计算器计算法 与松果体的关系 展开 编辑本段基本简介
虾青素试验方法
虾青素试验方法 警告----本产品对光敏感，在操作过程中应避光操作。三氯化锑-三氯甲烷溶液有强腐蚀性，在操作过程中应注意避免与皮肤接触，如不慎接触到皮肤，应立即用清水冲洗。 本标准所用的试剂和水，除非另有说明，均指分析纯试剂和符合GB/T6682中规定的三级水。 4.1 试剂和溶液 4.1.1 三氯甲烷。 4.1.2 无水乙醇。 4.1.3 BHT（2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚）。 4.1.4 三氯化锑-三氯甲烷溶液：称取1g三氯化锑用4ml三氯甲烷溶解即得（现配现用）。 4.2 仪器和设备 4.2.1 紫外-可见分光光度计。 4.2.2 分析天平。 4.2.3 超声波清洗器。 4.2.4 恒温水浴装置。 4.2.5 离心机（离心试管体积大于20ml）。 4.2.6 氮气吹干装置。 4.2.7 孔径为0.84mm的分析筛。 4.2.8 孔径为0.425mm的分析筛。 4.3 鉴别 4.3.1 取试样约10mg于试管中，加50℃-60℃热水1ml，于50℃-60℃热水浴中超声5min。冷至室温后，加入三氯甲烷（4.1.1）10ml并振摇30s，静置分层后，取三氯甲烷层溶液3ml与三氯化锑-三氯甲烷溶液（4.1.4）1ml反应，溶液应立即显蓝紫色。 4.3.2 取含量测定项（4.4.1）下的待测液，以三氯甲烷为空白，使用1cm的比色皿，于分光光度计上扫描波长200nm-600nm之间的吸收光谱，其最大吸收波长应在波长 484nm-490nm之间，光谱图参见附录A。 4.4 含量 4.4.1 测定 待测液：称取试样0.15g（精确至0.0002g），置于250ml棕色容量瓶中，加入BHT（4.1.3）约10mg，加入蒸馏水10ml，在50℃-60℃热水浴中超声5min，流水冷却至室温，加入无水乙醇（4.1.2）100ml和三氯甲烷100ml，于室温水浴中超声5min，用三氯甲烷稀释至刻度摇匀。取该溶液适量，置于具塞离心管中离心5min（转速为3000r/min），精密称取上层清液2ml于50ml棕色容量瓶中，将容量瓶置于约45℃的水浴中，用氮气流吹干，用三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，即为待测液，应立即测定（于20min内完成测定）。 以三氯甲烷为空白，使用1cm的比色皿，在分光光度计上测定待测液在487nm 附近最大吸收波长处的吸光度。 4.4.2 计算
虾青素
虾青素 虾青素（英语：Astaxanthin，又称变胞藻黄素或虾红素），是类胡萝卜素的一种，为一种较强的天然抗氧化剂。与其他类胡萝卜素一样，虾青素属于一种脂溶性及水溶性的色素，在虾、蟹、鲑鱼、藻类等海洋生物中均可找到。虾青素的抗氧化能力强，为维他命E的550倍、β-胡萝卜素的10倍。因此，虾青素被包装为保健食品在市场发售。 虾青素 - 简介 虾青素（英文astaxanthin简称ASTA，在香港和台湾地区又称为虾红素）是一种青素，可以赋予观赏鱼、三文鱼、虾和火烈鸟粉红的颜色。其化学结构类似于β-胡萝卜素。虾青素是类胡萝卜组的一种。也是类胡萝卜素合成的最高级别产物，β- 胡萝卜素、叶黄素、角黄素、番茄红素等都不过是类胡萝卜素合成的中间产物，因此在自然界，虾青素具有最强的抗氧化性。 虾青素 - 存在的形式 虾青素是由几种藻类和浮游生物产生的。一些水生物种，包括虾在内的甲壳类动物都食用这些藻类和浮游生物，然后把这种色素储存在壳中，于是它们的外表呈现粉红色。这些贝壳类动物又被鱼（三文鱼，鳟鱼）和鸟（火烈鸟，朱鹭）捕食，然后把色素储存在皮肤和脂肪组织中。这就是三文鱼和其他一些动物呈现红色的原因。 不同的动物种属不同的组织器官虾青素分布不同，三文鱼的皮肤、鱼鳞、鱼籽以酯化态的虾青素为主，游离态的虾青素主要
分布在肌肉、血浆和内脏器官。小虾体内以酯化虾青素为主。海鲤主要以酯化虾青素为主，主要在皮肤上。酯化的虾青素是储存在体内的更加稳定未被氧化过的虾青素。 雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)中主要就是酯化的虾青素，被公认为自然界中生产天然虾青素最好的生物。天然虾青素虽然存在多种生物体内，如虾壳、蟹壳、红色酵母菌内但含量均很低，提取工艺复杂。 虾青素 - 获取途径 虾青素的来源有4条途径： 1.虾壳粉碎提取，含量太低80-200ppm，添加饲料灰分太多； 2.人工合成，50000-80000ppm，仅有国际化学巨头Roche、BASF公司能合成，主要为3R，3'S顺式结构，是一种石化产品，仅用于动物染色，在美国已禁止使用在保健品市场。 3.红酵母菌发酵法，3R,3'R结构， 800-4000ppm，仅有Igene 和ADM公司可以生产，产品含糖量过高对动物和人都有潜在危险。 4.红球藻法养殖，3S,3'S结构，15000-40000ppm，主要有BioReal(Sweden) AB、Aquasearch、Cyanotech公司。最接近自然的天然虾青素食物链。生物利用度最高，风险最小。 5.植物培养法，2012年，中科院昆明植物所黄俊潮研究组与北京大学、香港大学合作，培育出世界首例能高产虾青素的工程番茄新品种，其果实能累积与雨生红球藻相近含量、高达1.6% 的虾青素。 虾青素 - 颜色改变