胰岛素和肾上腺素对血糖的调节

胰岛素和肾上腺素对血糖的调节（葡萄糖氧化酶法）

实验目的：

1.了解血糖浓度测定的原理和方法。

2.了解并验证胰岛素和肾上腺素对血糖的调节。

3.在实验中培养严谨的作风和准确进行实际操作的能力，提高分析问题的能力。

实验原理：

胰岛素和肾上腺素是体内对血糖调节的激素，胰岛素是唯一降低血糖的激素。通过对实验动物分别注射不同的激素，了解激素对血糖的调节影响。

测定血糖的原理：在PH7.0条件下,葡萄糖氧化酶可催化葡萄糖生成葡萄糖酸和H2O2，后者在H2O2酶的作用下与苯酚、4-氨基安替吡啉生成红色醌类物质，在505nm处有最大吸收峰,吸光度与葡萄糖含量成正比。

实验器材：

[器材]：10mm×100mm试管、试管架、恒温水浴、沸水浴、冰浴、蜡笔、721-分光光度计、兔台、注射器、手术刀片。

[试剂]

1.酶酚混合试剂主要成分：

①葡萄糖氧化酶②H2O2酶③苯酚④4-氨基安替吡啉

2.葡萄糖标准储存液（100mmol/L）

3.葡萄糖标准应用液（5mmol/L）取葡萄糖标准储备液5ml，置于100ml容量瓶中，加苯甲酸溶液至刻度。

4.胰岛素注射液

5.肾上腺素注射液

实验内容与方法：

一、注射药物并取血：

1.分别取2只兔子，称量体重，从耳缘静脉采血2ML。

2.2只兔子按体重分别注射肾上腺素和胰岛素，从注射药物时开始计时，每隔30分钟取血一次，一共取血4次，每次2ML。

二、血糖的测定

1．取16×150mm 试管3支按下表进行操作：

试剂（ml ） 测定管 标准管 空白管

血清或血浆 0.1 — —

葡萄糖标准应用液 — 0.1 —

蒸馏水 — — 0.1

酶酚混合试剂 3.0 3.0 3.0

2．将上述各管混匀放入37℃水浴中加热15分钟，用波长505nm 分光光度计进行比色，空白管调零点读取测定管与标准管吸光度。

3．计算

血糖（mmol/L ）= ×标准管浓度 4．计算注射药物前后血糖变化情况。

实验注意事项：

血清加量要准，否则会影响到结果的准确性。

实验报告：

思考题：

1．实验结果如何，分析结果。

2．讨论血糖升高和降低的临床意义及其维持恒定的因素？ 测定管吸光度 标准管吸光

度