肾上腺素类药物..

肾上腺素类药物

一、儿茶酚胺（CA）

1.简介

包括去甲肾上腺素（NA或NE）、肾上腺素(Ad或E)和多巴胺（DA）。交感神经节细胞与效应器之间的接头是以去甲肾上腺素为递质。儿茶酚胺是一种含有儿茶酚和胺基的神经类物质。儿茶酚和胺基通过L-酪氨酸在交感神经、肾上腺髓质和亲铬细胞位置的酶化步骤结合。通常，儿茶酚胺是指多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素。这三种儿茶酚胺都是由酪氨酸结合。血浆里儿茶酚胺水平的变化显示不同的病态情形。一般通过不正常儿茶酚胺水平能断定两个方面：第1点涉及到肾上腺髓质瘤，这些瘤结合大量的儿茶酚胺导致循环失常。第2点涉及到心血管系统。（儿茶酚胺）含量超标会引发高血压与心肌梗塞，含量过低时则通常导致低血压。儿茶酚胺含量水平的不同和心脏猝死及冠状心脏病和心脏不充血等也有潜在联系。

2.生理作用

儿茶酚胺的主要生理作用是兴奋血管的α受体，使血管收缩，主要是小动脉和小静脉收缩，表现在皮肤和黏膜比较明显；其次是肾脏的血管收缩，此外脑、肝、肠系膜、骨骼肌血管都有收缩作用；对心脏冠状血管有舒张作用，这是因为心脏兴奋、心肌代谢产物如腺苷增加，提高了冠状血管的灌注压力，使冠脉流量增加的原理。作用在心脏本身，体内儿茶酚胺释放增多时，心肌收缩力加强，心率加快，心搏出量增加，血压的收缩压增高，出现脉压变小的改变。

作用：1）对心血管系统的作用：儿茶酚胺通过β－受体作用于心脏，使心率加快，收缩力增强，传导速度增快，心输出量增加。

2）对内脏的作用：儿茶酚胺通过β－2受体使平滑肌松弛，通过α－1受体使之收缩。

3）对代谢的作用：儿茶酚胺参与生热作用的调节，通过β受体增加氧耗量而产热。并可促进机体内储备能量物质的分解。

4）儿茶酚胺对细胞外液容量和构成及水、电解质的代谢有重要的调节作用。

5）儿茶酚胺可引起肾素、胰岛素和胰高血糖素、甲状腺激素、降钙素等多种激素分泌的变化.儿茶酚胺浓度的测定血浆去甲肾上腺素正常值约为0.3～2.8nmol/L（15～475pg/ml），肾上腺素正常值约为170～520pmol/L（30～95pg/ml）。

3.分离方法

（1）高效液相色谱法

高效液相色谱法在儿茶酚胺类物质的分析中应用相当广泛，这与它的高分离效率密不可分.儿茶酚胺类物质虽然具有较强的结构相似性都具有邻苯二酚结构和烃氨基侧链，但其氨基侧链上取代基的差异可引起分子极性的改变，最终使得这类物质的色谱保留行为存在差异.目前常用的色谱分离固定相多为 C18，而流动相多为磷酸缓冲液，有机溶剂与离子对试剂的加入对于分离效果有很大的改善. 甲醇，乙腈

等有机溶剂的使用可大大缩短分离时间，提高分离效率.辛烷磺酸钠等离子对试剂的加入可改变弱碱类物质的保留情况，改善分离效果.

李新玲[6]等研究了儿茶酚胺类(CAs)在 Atlantis Cl8 和Novle pak C18 色谱柱的保留特性. 比较了流动相中离子对辛烷基磺酸钠(B8)浓度对 CAs 容量因子 k’的作用，确认采用 Atlantis Cl8 柱分离 CAs，色谱条件优化空间大.适于复杂生物样品分析.采用了Atlantis Cl8 反相色谱柱，成功地分离了去甲肾上腺素，肾上腺素，多巴胺等 CAs 类物质.勾凌燕[5]等建立了一种 Oasis HLB 固相萃

取 - 高效液相色谱(HPLC)电化学检测大鼠血浆儿茶酚胺(CAs)的方法.以Atlantis C18 色谱柱为固定相，确定了各种影响色谱的参数，如流动相中机溶剂比例与离子对试剂浓度，pH 范围及检测器的设定.儿茶酚胺所有组分肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)的平均提取回收率在 90％～95％之间.Moon Chul Jung[7]等以自制的C18 填充型毛细管色谱柱为固定相，连接新型高灵敏度的光致发光检测器，实现了大鼠脑纹状体透析液中相关儿茶酚胺类物质的分离与实时监测.通过优化流动相中有机溶剂的比例和离子对试剂的浓度，在10%乙腈，10mM 辛烷磺酸钠的条件下实现了 6 种生物胺类物质6min 之内完全分离.分离结果重现性良好，具有较低的检测限.

（2）毛细管电泳法

毛细管电泳作为一种新的分离分析技术迅速得到人们的青睐，特别在有关药物学的领域应用最为广泛，是儿茶酚胺分析的一个新手段.采用毛细管电泳法，分离时间短，样品不需衍生，快速简便，重现性

和线性良好，尤其表现在峰面积与浓度间的关系上，并且样品需求量低，一般仅需 nL 样品，适合微量样品的分析要求.干宁等[8]建立了一种毛细管区带电泳(CZE)分离 / 安培检测左旋多巴(DP)、多巴胺(DA)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、5- 羟色胺(5-HT)5 种儿茶酚胺类神经递质(CAs)药物的方法.通过用采用石英毛细管柱，含

8mM/L 对 -(季铵盐)杯[4]芳烃 (QAC4A) 的 125mM/L 磷酸氢二钠溶液(Na2HPO4，pH7.0)为缓冲液，分离电压 6kV，实现了儿茶酚胺类物质的分离并利用 Cu 微粒修饰碳纤维电极检测.应用该方法成功地测定了 5 种 CAs 注射液、正常人和嗜铬细胞瘤患者尿样.李欣欣[9]等利用毛细管电泳 - 化学发光联用技术分离测定了 3 种儿茶酚胺和儿茶酚，并优化了检测和分离条件.在最佳条件下,测得多巴胺、肾上腺素、去甲肾上腺素和儿茶酚的检出限分别为 0.33、1.8、2.4 和0.12μM/L. 此方法具有一定的选择性，也可用于医用注射液及尿样在未经预处理条件下的直接分离分析检测方法。

二、多巴胺(C6H3(OH)2-CH2-CH2-NH2)

1.简介

由脑内分泌，可影响一个人的情绪。它正式的化学名称为4-(2-氨基乙基)-1,2-苯二酚（4-(2－aminoethyl)benzene-1,2-diol）。Arvid Carlsson确定多巴胺为脑内信息传递者的角色使他赢得了2000年诺贝尔医学奖。多巴胺是一种神经传导物质，用来帮助细胞传送脉冲的化学物质。这种脑内分泌主要负责大脑的情欲，感觉将兴奋及开心的信息传递，也与上瘾有关。

多巴胺最常被使用的形式为盐酸盐，为白色或类白色有光泽的结晶。无臭，味微苦。露置空气中及遇光色渐变深。在水中易溶，在无水乙醇中微溶，在氯仿或乙醚中极微溶解。熔点243℃-249℃(分解)。

多巴胺也是大脑的"奖赏中心"，又称多巴胺系统。多巴(dopamine)是NA的前体物质，是下丘脑和脑垂体腺中的一种关键神经递质，中枢神经系统中多巴胺的浓度受精神因素的影响，神经末梢的GnRH和多巴胺间存在着轴突联系并相互作用，以及多巴胺有抑制GnRH分泌的作用。中脑的神经原物质多巴胺(Dopamine)，则直接影响人们的情绪。从理论上来看，增加这种物质，就能让人兴奋，但是它会令人上瘾。多巴胺在前脑和基底神经节(Basal Ganglia)出现，基底神经节负责处理恐惧的情绪，但由于多巴胺的缘故，取代了恐惧的感觉，因此有很多人的上瘾行为，都是因多巴胺而起的。

2.检测方法

（1）化学荧光法

CdTe 量子点由于其优良的荧光分析特性而作为荧光试剂应用在金属离子和生物活性物质的标记和高灵敏分析中。陈志兵等[8] 在温和的条件下制备 CdTe 量子点，研究表明，该量子点的荧光强度可强烈地被盐酸多巴胺增敏。据此发现并建立了以 CdTe 量子点作为荧光探针，基于荧光增敏测定有机药物成分中盐酸多巴胺含量的新方法。颜梅等[9] 制备了以二硫基琥珀酰亚胺丙酸酯，4- 巯基苯硼酸功能化CdTe 量子点探针，在 431 nm 激发波长下，对探针及加入多巴胺后进行发射光谱扫描，在最大发射波长处，多巴胺对合成的探针具有

猝灭效应，且多巴胺对体系的猝灭程度与多巴胺的量呈良好的线性关系，据此建立了一种基于双分子识别荧光猝灭法高选择性测定多巴胺的新方法。在最佳条件下，多巴胺的线性范围为 0.02~20.0 mmol/L，检出限为 4.9 nmol/ L。该方法已成功用于多巴胺注射液、血清及尿样中多巴胺的测定。陈亚红等[10] 研究发现，在碱性介质中，盐酸多巴胺对血红蛋白酶催化荧光体系具有强烈的猝灭作用 , 因此建立了酶催化荧光光谱法测定盐酸多巴胺的新方法。该方法的检出限为8.2 nmol/L。该法具有操作简单、灵敏度高、选择性好的特点，已成功地应用于药物制剂中盐酸多巴胺含量的测定。

（2）液相色谱法

高效液相色谱法（HPLC）也是通用的多巴胺检测方法。高效液相色谱法因其具有极高的分离率，所以在儿茶酚胺类物质的分析中受到极大重视。HPLC 法同荧光检测相结合是目前较为有效且常用的方法。儿茶酚胺类物质本身有自然荧光，经 HPLC 法分离后，可以利用它的荧光进行检测。吴予明等[11] 利用HPLC 和荧光检测器对嗜铬细胞瘤患者和正常人 24 h 尿中的去甲肾上腺素、肾上腺素和多巴胺进行了测定。结果可见，多巴胺浓度在 130.6~3 858.2 nmol/L 与色谱峰峰高的线性关系良好。测定结果显示此法简单、准确、特异性高。通过对正常人及嗜铬细胞瘤患者 24 h 尿样分析，二者儿茶酚胺类物质的含量有显著性差异。表明该研究可以为临床嗜铬细胞瘤诊断提供数据。乔坤云等[12] 采用与文献[11]不同的色谱柱，不同的前处理方法，用高效液相色谱法，荧光检测器检测儿茶酚胺含量。实验表明去

甲肾上腺素、肾上腺素和多巴胺三种组分的浓度与其峰面积均呈良好的线性关系。该方法可在临床推广使用。

四环素类抗生素

1.简介

四环素类抗生素在酸性和碱性条件下均不稳定，四环素类药物中含有许多羟基、烯醇羟基及羰基，在中性条件下能与多种金属离子形成不溶性螯合物。与钙或镁离子形成不溶性的钙盐或镁盐，与铁离子形成红色络合物，与铝离子形成黄色络合物。在体内药物与钙离子形成的络合物呈黄色沉积在骨骼和牙齿上，小儿服用会发生牙齿变黄，孕妇服用后其产儿可能发生牙齿变色，骨骼生长抑制。因此小儿和孕妇对此药因慎用或禁服。

2. 作用机理

除了常见的革兰阳性菌、革兰阴性菌以及厌氧菌外，多数立克次体属、支原体属、衣原体属、非典型分枝杆菌属、螺旋体也对本品敏感。本品对革兰阳性菌的作用优于革兰阴性菌，但肠球菌属对其耐药。其他如放线菌属、炭疽杆菌、单核细胞增多性李斯特菌、梭状芽孢杆菌、奴卡菌属等对本品敏感。多年来由于四环素类的广泛应用,临床常见病原菌包括葡萄球菌等革兰阳性菌及肠杆菌属等革兰阴性杆菌

对四环素多数耐药，并且,同类品种之间存在交叉耐药。

3.药理作用

1、用于恶性肿瘤的诊断：四环素对胃、肺、膀胱、口腔粘膜等部位的癌组织具有很强的亲和力，进入人体后迅速被癌细胞摄取蓄积，血液中浓度相对较低，且从尿中排泄较正常人延缓。利用四环素在紫外线激发下能发了荧光的特点，对上述恶性肿瘤进行辅助诊断，简便易行，病人痛苦小，阳性率达85%以上。

2、治疗支气管胸膜瘘：用生理盐水冲洗胸腔脓液，尔后以本品0．5克加入生理盐水30毫升，经导管注入，置6小时后排出，3天一次，直至痊愈。

3、治腋臭：一品局部注射可使汗腺及其周围组织萎缩变性，泌汗减少而使腋臭消失。方法为以含四环素3．3%－5%浓度的利多卡因溶液，剃光腋毛后在其分布区分两点以10－15度角进针至真皮和皮下浅筋膜内，扇形浸润注射，每侧注药15毫升，经300例观察，1次用药痊296例，2次用药痊愈4例。

4.鉴别

1.三氯化铁反应：具酚羟基和烯醇结构，与铁离子形成红色配合物。

2.高效液相色谱法：供试品与对照品保留时间一致。

3.红外分光光度法：测定最大吸收波长和相应吸收度。

4.氯化物鉴别反应。

5.含量测定——高效液相色谱法

试品制成0.01mol/L盐酸溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长280nm处检测盐酸四环素吸收值，计算出其含量。

β-内酰胺类抗生素

1.简介

β-内酰胺类抗生素是一种种类很广的抗生素，其中包括青霉素及其衍生物、头孢菌素、单酰胺环类、碳青霉烯和青霉烯类酶抑制剂等。基本上所有在其分子结构中包括β-内酰胺核的抗生素均属于β内酰胺类抗生素。它是现有的抗生素中使用最广泛的一类。此类抗生素具有杀菌活性强、毒性低、适应症广及临床疗效好的优点。本类药化学结构，特别是侧链的改变形成了许多不同抗菌谱和抗菌作用以及各种临床药理学特性的抗生素。

2.作用机制

各种β-内酰胺类抗生素的作用机制均相似，都能抑制胞壁粘肽合成酶，即青霉素结合蛋白，从而阻碍细胞壁粘肽合成，使细菌胞壁缺损，菌体膨胀裂解。除此之外，对细菌的致死效应还应包括触发细菌的自溶酶活性，缺乏自溶酶的突变株则表现出耐药性。哺乳动物无细胞壁，不受β-内酰胺类药物的影响，因而本类药具有对细菌的选择性杀菌作用，对宿主毒性小。近十多年来已证实细菌胞浆膜上特殊蛋白PBPs是β-内酰胺类药的作用靶位.各种细菌细胞膜上的PBPs数目、分子量、对β-内酰胺类抗生素的敏感性不同，但分类学上相近的细菌，其PBPs类型及生理功能则相似。例如大肠杆菌有7种PBPs，PBP1A，PBP1B与细菌延长有关，青霉素、氨苄西林、头孢噻吩等与PBP1A、PBP1B有高度亲和力，可使细菌生长繁殖和延伸受抑制，并溶解死亡，PBP2与细管形状有关，美西林、棒酸与硫霉素（亚胺培南）能选择性地与其结合，使细菌形成大圆形细胞，对渗透压稳定，可继续生几代后才溶解死亡。PBP3功能与PBP1A相同，但量少，与中隔形成，细菌分裂有关，多数青霉素类或头孢菌素类抗生素主要与PBP1和（或）PBP3结合，形成丝状体和球形体，使细菌发生变形萎缩，逐渐溶解死亡。PBP1，2，3是细菌存活、生长繁殖所必需，PBP4，5，6；与羧肽酶活性有关，对细菌生存繁殖无重要性，抗生素与之结合后，对细菌无影响。

3.耐药机制

细菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制可概括为：

①细菌产生β-内酰胺酶（青霉素酶、头孢菌素酶等）使易感抗生素水解而灭活；

②对革兰阴性菌产生的β-内酰胺酶稳定的广谱青霉素和第二、三代头孢菌素，其耐药发生机制不是由于抗生素被β-内酰胺酶水解，而是由于抗生素与大量的β-内酰胺酶迅速、牢固结合，使其停留于胞膜外间隙中，因而不能进入靶位（PBPs）发生抗菌作用。此种β-内酰胺酶的非水解机制又称为“牵制机制”

③PBPs靶蛋白与抗生素亲和力降低、PBPs增多或产生新的PBPs均可使抗生素失去抗菌作用。例如MRSA具有多重耐药性，其产生机制是PBPs改变的结果，高度耐药性系由于原有的PBP2与PBP3之间产生一种新的PBP2'（即PBP2a），低、中度耐药系由于PBPs的产量增多或与甲氧西林等的亲和力下降所致；

④细菌的细胞壁或外膜的通透性改变，使抗生素不能或很少进入细菌体内到达作用靶位。革兰阴性菌的外膜是限制β-内酰胺类抗生素透入菌体的第一道屏障。近年研究已证实抗生素透入外膜有非特异性通道与特异性通道两种。大肠杆菌K-12外膜有亲水性的非特异性孔道蛋白为三聚体结构，有二个孔道蛋白，即OmpF与OmpC，其合成由OmpB3基因调控。OmpF的直径为1nm，许多重要的β-内酰胺类抗生素大多经过此通道扩散入菌体内。鼠伤寒杆菌OmpF与OmpC缺陷突变株对头孢噻啶的通透性要比野生株小10倍，因而耐药。仅含微量OmpF与OmpC的大肠杆菌突变株，对头孢唑啉、头孢噻吩的透入也较野生株成倍降低，其MIC明显增高，也出现耐药。绿脓杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药性的产生已证明是由于外膜非特异性孔道蛋白OprF缺陷而引起的。革兰阴性外膜的特异性通道，在绿脓杆菌耐亚胺培南的突变株已证明系由于外膜缺失一种分子量为45～46kD蛋白OprD。如将此OprD重组于缺陷OprD的突变株外膜蛋白脂质体中，又可使亚胺培南透过性增加5倍以上，其MIC也相应地降低，于是细菌的耐药性消除.

⑤由于细菌缺少自溶酶而出现细菌对抗生素的耐药性，即抗生素具有正常的抑菌作用，但杀菌作用差。

胆碱类化合物

一、乙酰胆碱

1.简介

乙酰胆碱，分子式CH3COOCH2CH2N+（CH3）3，是一种神经递质，能特异性地作用于各类胆碱受体，在其作用广泛，选择性不高。临床不作为药用，一般只做实验用药。在神经细胞中，乙酰胆碱是由胆碱和乙酰辅酶A在胆碱乙酰移位酶（胆碱乙酰化酶）的催化作用下合成的。主流研究认为体内该物质含量与阿尔兹海默病（老年痴呆症）的症状改善显著相关。

在神经细胞中，乙酰胆碱是由胆碱和乙酰辅酶A在胆碱乙酰移位酶（胆碱乙酰化酶）的催化作用下合成的，主要存在于突触前的胆碱能神经末梢部位。。由于该酶存在于胞浆中，因此乙酰胆碱在胞浆中合成，合成后由小泡摄取并贮存起来。

2.生理功能

乙酰胆碱[分子式[CH3COOCH2CH2N（CH3）3]为中枢及周边神经系统中常见的神经传导物质，于自主神经系统及体运动神经系统中参与神经传导。乙酰胆碱由轴突末梢释出之后，会穿过突触间隙与突触后神经元或运动终板的细胞膜上的受体结合。在体运动神经系统，乙酰胆碱在神经肌肉连接处是起控制肌肉的收缩的作用；于副交感神经，乙酰胆碱为节前及节后神经释出的神经传导物质；于交感神经，乙酰胆碱则为节前神经释出的神经传导物质。乙酰胆碱的作用因被乙酰胆碱酯脢(acetylcholinesterase；AChE)分解而中止。

3.分析方法

离子色谱法；微透析技术；质谱法；荧光分光测定法；高效液相法；离子选择性微电极法；组织化学定位法；放射免疫法

二、卡巴胆碱

1.简介

卡巴胆碱（carbamylchocline,carbachol）作用与乙酰胆碱相似。其结构中的氨甲酰基使其不易被胆碱酯酶破坏，因此作用比乙酰胆碱持久。本品对膀胱和肠道作用明显，故可用于手术后的腹气胀和尿潴留，但仅用于皮下注射，禁用静脉注射给药．目前除了应用于治疗青光眼外，已不做全身用药。

2.药理作用

本品为拟胆碱药，是M-N受体激动剂，具有副交感神经兴奋样作用。对平滑肌兴奋作用强，对心血管作用较弱，使瞳孔缩小，眼压下降，最大缩瞳效果在注射后2-5分钟。用于青光眼，手术中眼内注射可缩小瞳孔。本品也可通过促进神经末梢释放乙酰胆碱而发挥作用，具有抗胆碱酯酶的作用，对胃肠及膀胱平滑肌兴奋作用较强。

3.分析方法：非水滴定法

人工合成抗菌肽

1.简介

抗菌肽是来自生物体内经诱导产生的一种具有抗菌活性的小分子多肽，能够高效杀灭多种革兰阴性、阳性菌，其作为抗生素的替代品，能有效解决耐药性等问题。由于天然产生的抗菌肽数量较少，往往很难大量获得，而通过人工合成方法，可解决表达量和所需成本等问题，也可在一定程度上进行抗菌肽抑菌功能上的改进。

2.合成方法

固相合成办法是1963年Merrifield首次发明使用其主要原理是通过固体树脂载体上的化学基团与氨基酸的梭基末端相连接，暴露氨基端连接肽，接着将需要连接的氨基酸用一定的方法，保护其氨基端和侧链基团，只暴露与活化它的羧基端，进而同连在树脂上的氨基端进行连接反应。通过脱去氨基保护，连接一个氨基酸，再脱去氨基保护，再接下一个氨基酸，通过重复以上过程，就可以得到所需要的肽段。合成与液相合成法相比，合成方便迅速，待要的肽段合成完毕后，再通过相应的化学试剂将多肽从树脂上切除下来，使用合适的试剂切割除掉多肽的侧链保护基团，这样就得到了与完整的生物体内的多肽完全一样的产物，而通常固相合成使用的树脂一般是交联度在1%左右使用聚苯乙烯-二乙烯苯材料, 目前广泛使用的树脂有：Rink-Amide-MBHA，PAM，MBHA，Wang等。

人工合成的抗菌肽在生活中已经运用于多个领域，在食物和饲料方面，利用转基因工程将其导入动植物体内，通过增强动植物的抗感染能力减少化学抗生素的使用，邢小萍等研究将抗菌肽转化入马铃薯增加了对病毒的抗性。贾士荣等将不同的抗菌肽基因转入马铃薯中，使得马铃薯青枯病发病延迟，植株死亡率降低。而将抗菌肽作为添加剂和保存动植物方面在国内外已有相关专利(专利号：JP 2008022704、US 20090036307、US 20090074864、CN 101294188)的申请，Dunhan等将惜古比天蚕的抗菌肽基因导入到斑点叉尾鮰中，获得的子代鱼抗病原菌能力明显增强。Wang等研究表明，通过饲喂猪肠抗菌肽能增强SPF鸡的粘膜免疫能力。黄永彤等发现，抗菌肽有

促进肉鸡生长和提高免疫力作用，陈晓生等研究发现，添加抗菌肽制剂能有效提高肉鸭的生产性能，提高产肉率，现在国内外的研究者已逐步将抗菌肽的应用转入到畜牧业和水产养殖业的发展中，作者所在团队也已于山东曹县进行了抗菌肽肥料的应用与研究。

苯二氮?类药物

1.简介

目前,国内外对于苯二氮?类药物的分析方法的研究已有一定的成果，主要有气相色谱法（GC）、气相色谱/质谱联用法（GC/MS）、高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱/质谱联用法（HPLC/MS）、薄层扫描法（TLC）、毛细管电泳法、紫外分光光度法、荧光分光光度法、电化学分析法、免疫分析法等。其中紫外分光光度法、荧光分光光度法、电化学分析法对样品的纯度要求比较高，对于组成复杂的生物样本或者自然水体样本适用性不是很好，因此更多使用高效液相色谱法、气相色谱质谱联用、液相色谱质谱联用法。

2.鉴别试验

（1）生物碱沉淀反应

阿普唑仑、氯氮卓、盐酸氟西泮和氯硝西泮的盐酸溶液（9：1000，遇碘化铋试液，生成橙红色沉淀。盐酸氟西泮

和氯硝西泮所生成的沉淀在放置后，颜色加深。阿普唑仑的

盐酸溶液（91000）中，加入硅钨酸试液，生成白色沉淀。

（2）水解后呈芳伯胺反应

氯氮卓、硝西泮和奥沙西泮的盐酸溶液（12），缓缓加热

煮沸，七元环发生开裂，生成芳伯胺类化合物。

（3）硫酸-荧光反应

苯二氮?类药物溶于硫酸后，在紫外灯（365nm）下，显不同颜色的荧光，可用于鉴别反应。

（4）分解产物的反应

药典中所列苯二氮?类药物多含有氯元素，可用氧瓶燃烧法破坏，将有机氯转化为无机氯，以5%NaOH溶液吸收，家

硝酸酸化后，呈氯化物反应。

（5）紫外特征吸收和红外吸收光谱

3. 含量测定

1.酸碱滴定法----非水溶液滴定法

由于本类药物显碱性，因此用非水溶液滴定法进行测定含量2.气相色谱法

气相色谱法适用于易气化、对热稳定的化合物的测定。如托烷类生物碱硫酸阿托品和人血浆中的硝苯地平等常用气相色谱法测定。

3.高效液相色谱法

高效液相色谱法具有分离模式多样、适用范围广、选择和专属性强、检测手段多样、灵敏、重复性好、分析速度快等优点。

利用高效液相色谱法可以十分有效地分离苯并二氮?类药物及其降解产物。

生物碱简介

1.简介

生物碱是存在于自然界（主要为植物，但有的也存在于动物）中的一类含氮的碱性有机化合物，有似碱的性质，所以过去又称为赝碱。大多数有复杂的环状结构，氮素多包含在环内，有显著的生物活性，是中草药中重要的有效成分之一。具有光学活性。有些不含碱性而来源于植物的含氮有机化合物，有明显的生物活性，故仍包括在生物碱的范围内。而有些来源于天然的含氮有机化合物，如某些维生素、氨基酸、肽类，习惯上又不属于“生物碱"

2.提取分离方法

苦参以稀酸水渗漉，酸水提取液通过强酸性阳离子交换树脂提取总生物碱。苦参碱和氧化苦参碱的分离，利用二者在乙醚中的溶解度不同进行。

（1）鉴别反应

麻黄碱和伪麻黄碱不能与大数生物碱沉淀试剂发生反应，但可用下述反应鉴别：

二硫化碳-硫酸铜反应

属于仲胺的麻黄碱和伪麻黄碱产生棕色沉淀。属于叔胺的甲基麻黄碱、甲基伪麻黄碱和属于伯胺的去甲基麻黄碱、去甲基伪麻黄碱不反应。

铜络盐反应麻黄碱和伪麻黄碱的水溶液加硫酸铜、氢氧化钠，溶液呈蓝紫色。

（2）提取分离

溶剂法：利用麻黄碱和伪麻黄碱既能溶于水，又能溶于亲脂性有机溶剂的性质，以及麻黄碱草酸盐比伪麻黄碱草酸盐在水中溶解度小的差异，使两者得以分离。方法为麻黄用水提取，水提取液碱化后用甲苯萃取，甲苯萃取液流经草酸溶液，由于麻黄碱草酸盐在水中溶解度较小而结晶析出，而伪麻黄碱草酸盐留在母液中。

水蒸汽蒸馏法：麻黄碱和伪麻黄碱在游离状态时具有挥发性，可用水蒸汽蒸馏法从麻黄中提取。

离子交换树脂法：利用生物碱盐能够交换到强酸型阳离子交换树脂柱上，而麻黄碱的碱性较伪麻黄碱弱，先从树脂柱上洗脱下来，从而使两者达到分离。

巴比妥类

1.鉴别试验

1）丙二酰脲类反应

①与银盐的反应：在碳酸钠溶液中振摇使溶解，滤液中逐滴加入硝酸银试液，生成白色沉淀。

②与铜盐的反应：在吡啶溶液中与铜吡啶试液作用，生成配位化合物，显紫色或生成紫色沉淀；硫喷妥钠药物显绿色。此反应可用于鉴别、区别巴比妥类和硫代巴比妥类药物。

2）钠盐的鉴别反应

①焰色反应：黄色火焰

②与醋酸氧铀锌反应：黄色沉淀

2.含量测定

《中国药典》（2005年版）采用巴比妥类药物含量测定方法有银量法、溴量法和紫外分光光度法。

1.银量法：在适当的碱性溶液中，易与重金属离子反应，

并可定量地形成盐的化学性质，异戊巴比妥及其钠盐、苯巴比妥及其钠盐均采用银量法测定含量。

2.溴量法：司可巴比妥钠分子结构中含有丙烯取代基，利用双键可与溴定量地发生加成反应的特点，可采用溴量法测定原料药及其胶囊的含量。过量的溴与碘化钾作用生成碘，用硫代硫酸钠进行滴定。

3.紫外分光光度法：基于硫喷妥具有紫外吸收的性质，注射用硫喷妥钠的含量测定采用对照品比较法紫外分光光度法。

4.HPLC法：《中国药典》（2005年版）规定测定苯巴比妥片采用此法。