(110715)湿热灭菌程序的验证题库

题库1：

《湿热灭菌程序的验证：灭菌程序的设计、开发、确认以及日常控制》2007年增补，第一卷N0.S-1美国注射剂协会制药科学及技术杂志

1．填空题：

（1）在恒定的热力灭菌条件下，E微生物的死亡遵循D动力学规则（也叫存活曲线）。微生物死亡速率是微生物的B和C的函数，它与灭菌程序的 A 无关。

A微生物数量，B杀灭时间，C耐热参数D，D一级，E同一种

（2）．请选择对应划线并在括号内填写单位（5分）：P7

D T（），F值（），Z（），L（），SAL，F0值（），PUSU。

非无菌概率、无菌保证水平、灭菌率、耐热参数、累计杀灭时间、标准灭菌时间。

（3）．灭菌程序设计方法主要有哪两种？请填写以下英文的汉语。（P30）Overkill design approach ——

Product specific design approach ——

按产品特性设计灭菌程序的方法。

过杀灭法

（4）温度系数（Z值）反映孢子耐热性随温度变化而变化的特性。Z值是D T值变更一个对数单位时，温度需调节的度数。P15

（5）杀灭时间是灭菌程序中灭菌率的累计值（积分值）。P16

（6）F0是指蒸汽灭菌程序赋予一个容器或产品121℃下标准灭菌时间（灭菌效力）。P19

（7）F BIO生物杀灭力表示生物指示剂系统测得的实际杀灭效果。P20

（8）生物指示剂（BIS）的选择，取决于所用的灭菌方法和所选择的灭菌程序。P20

（9）所选用的生物指示剂的孢子浓度应高于灭菌前药品的生物负荷，耐热性应

强于最耐热的污染菌孢子的耐热性。P20

（10）生物指示剂计数的稳定性和耐热参数（D T值）的测试应在其有效期内进行。P21

（11）能量传递的方式有传导、对流和辐射，他们可以单独或同时发生。P28 （12）蒸汽的质量属性有干燥度、洁净度、潜热。P28-29

（13）过热蒸汽对微生物的灭菌率（L）小于该温度下的预期的灭菌率。P29 （14）很少发现自然生成的微生物的D121℃大于0.5分钟。P32

（15）不耐热产品/物品不能使用过热杀灭法。P32

（16）灭菌程序的设计和确认需要研究产品的生物负荷和耐热性。P32

（17）D T值的选择应将生物负荷试验中最耐热菌的安全余地考虑在内。P32 （18）多孔/坚硬装载是指以直接接触饱和蒸汽来实现灭菌目的的物品。P34 （19）制药工业中使用的多孔/坚硬装载不管装载物内容是什么，通常不采用对每类物品建立特定灭菌程序的做法，而是建立标准化的、能够获得最低无菌保证的灭菌程序。P34

（20）饱和蒸汽灭菌程序主要有两种类型：预真空和重力置换。P35-37

（21）常用的两种空气加压灭菌程序指蒸汽-空气混合物灭菌程序和过热水灭菌程序。P38-39

（22）与其他蒸汽灭菌法相比，循环水喷淋法最大的优点是加热和冷却的速率容易控制，若设定得当，不受产品装载方式和其他公用设施的影响。P39

（23）水循环为最终灭菌产品提供了有效的冷却方法，提高了灭菌器的效率。为了保证产品的稳定性，有必要采取这种快速冷却的方法。P40

（24）过热水灭菌所用水（包括冷却用水）的微生物水平是最重要的质量特性，另其质量标准应符合工艺用水-纯化水标准。P40

（25）灭菌程序的开发是确立灭菌程序物理参数的过程。P40

（26）建立灭菌程序的目的是鉴别出关键和重要的参数，以致产品和材料在灭菌后能够达到无菌保证要求并保持其质量属性。P40

（27）灭菌程序的开发需要形成正式的文件，应包括计划、方案、记录、总结等，并应形成档案妥善保存。P40

（28）装载的最难加热点的确认应在腔室热穿透实验之前完成，并应画出装载分

布图，标明产品或包装中最难加热的部位。P41

（29）应将温度探头和生物指示剂放置在最难加热的位置。P41

（30）可穿透蒸汽的包装和包扎材料应兼顾：1.具有通透性确保去除空气和冷凝水;2.保护产品免遭微生物污染；3.不脱落纤维和颗粒污染被灭菌物品。P41 （31）在SOP中要对装载的准备方法做出详细的说明，严格遵循这些规程对确保灭菌至关重要。P41

（32）多孔/坚硬装载方式应在运行确认之后，性能确认开始前，确认装载的类型和方法并具有记录。P42

（33）关键参数涉及产品的安全性和有效性，重要参数保证日常运行处于“受控”状态。重要参数不合格时需进行偏差调查并有文件证明对装载处理的合理性。P43 （34）在同一位置测得的物理杀灭时间和生物杀灭时间应是相等的。P44 （35）液体装载灭菌方式一般要求加热/冷却介质强制循环，以促进装载加热/冷却过程中的热传递。P45

（36）灭菌时，杀灭时间和降解都随着时间和温度而累积，加热和冷却的变化将影响产品的稳定性。P48

（37）稳定性研究需要将产品处于最苛刻的灭菌条件下进行。P48

（38）灭菌程序的性能确认是为了证明灭菌工艺始终符合灭菌程序的设计标准；（39）紧接在灭菌参数开发之后；灭菌程序的性能确认包括物理确认和生物指示剂确认。

（40）每一种装载方式应连续三次合格的运行。P49

（41）热分布确认的主要目的是证明整个装载区加热介质的分布是均匀的。P49 （42）应根据热穿透数据计算物理杀灭时间F PHY。P49

（43）生物指示剂确认为获取BI数据后，证明所开发的灭菌程序实际达到了程序设计中所确定的生物杀灭时间。P50

（44）为了评价F PHY、F BIO之间的关系，生物指示剂应靠近温度传感器放置；为了得到有代表性的结果，应在同一位置放置两个相同的物体，一个放置温度探头，一个放置生物指示剂。P52

（45）应当对日常运行的灭菌参数进行评估，确保它们在正常范围内。所有关键参数必须回顾审核合格，才能放行产品。P55

（46）还应当对指示灭菌程序受控的重要参数进行回顾审核评估，若有一个重要参数不符合，就必须找到比较完整的科学依据来支持产品的放行。

2．湿热灭菌使用的灭菌剂（或加热介质）有哪三种？我国常用的是哪种？P8 3．请解释混合装载的定义。P8

4．请解释灭菌的定义。P10

5．请解释最难灭菌的装载。P11

6．请解释Z值的定义。P11

7．请解释存活曲线的定义。P11

8．耐热参数（D T）是微生物的遗传特性吗？P13

9．请列举你所知道影响微生物D T值的影响因素。P13

10．耐热参数（D T）可使用什么方法进行测定？P13-14

11．在那些国家或地区《药典》收载有生物指示剂专论？P21

12．我国《药典》收载了吗？

13．在对比平衡灭菌赋予产品的物理杀灭和生物杀灭时间F值的试验中，应以什么为基础计算物理杀灭时间F T？P15

14．灭菌率是一个指数函数，很小的温度变化就会对灭菌率产生明显的影响。如

Z=10℃的生物指示剂系统，温度降低1℃，会使灭菌率（L）降低20%，如120℃灭菌1分钟相当于121℃灭菌0.79分钟，请用数学公式表示以上结果。P17

15．生物指示剂购买之后，需要检测其孢子浓度吗？为什么？P20

16．以下那些因素影响生物指示剂的D值的的测试结果？P21

□微生物种类、□菌株、□环境因素、□测试操作（人员变动、设备控制）。

17．以下那些是影响生物指示剂的D值的的测试结果的环境因素？P21

□测试系统（悬浮、传热环境和效果），□孢子悬浮介质性质，□测试温度，□内包装材料，□加热和冷却滞后没作校正对灭菌时间的影响，□加热和培养计数之间的温度、时间和环境条件，□用来培养计数灭菌后孢子的培养基灵敏度，□培养条件（温度、时间、湿度），□固态附着物性质，等等。P21

18．请列举过热杀灭法的优点和缺点是什么？P31

19．请列举按产品特点决定法（残存概率法）的优点和缺点是什么？P31

20．为什么说过度杀灭法设计的灭菌程序使被灭菌品获得F（F PHY、F B IO）至少为12分钟？请使用半对数残存曲线推算证明。P32

条件：D121℃=1分钟，N O=106，Z=10℃，应达到N F=10-6

公式：LgN F=—F（T，Z）/D T+LgN O

21．灭菌程序设计计算一：

已知：产品初试菌测试，耐热菌N O＜101/单元，D121℃＜0.25分钟，要求灭菌程序设计使用的数据，应达到N O=102/单元，D121℃=0.4分钟，N F=10-6（PNSU），计算残存概率达到小于10-6的标准灭菌时间（F121℃）。P33

问：是否需要对商业化生产过程进行生物负荷的监控？

22．灭菌程序设计计算二：

已知：产品初试菌测试，耐热菌N O＜101/单元，D121℃＜0.25分钟，要求灭菌程序设计使用的数据，应达到N O=102/单元，D121℃=1分钟，N F=10-6（PNSU），计算残存概率达到小于10-6的标准灭菌时间（F121℃）。P33

问：是否需要对商业化生产过程进行生物负荷的监控？如何进行？

23．灭菌工艺开发和灭菌程序的确认共覆盖哪六部分内容？P4

24．湿热灭菌装载类型区分哪两种？P34

25．多孔/固体物品通常包括哪些种类？请列举7种以上。P34

26．实验室取样微生物器皿及生物检测用容器、工具是否属于多孔/固体物品？通常采取怎样的灭菌程序？

27．湿热灭菌常用哪两种灭菌程序？各自通常用于什么物品的灭菌？P35

28．请简述饱和蒸汽预真空程序如何使装载处于正常并缩短平衡时间？P35

29．请简述饱和蒸汽重力置换程序原理及其关键影响因素？P36

30．为什么液体物品需要使用空气加压灭菌程序？P38-39

31．为什么蒸汽-空气混合物（SAM）程序必须使蒸汽-空气不断循环？P38

32．多孔/坚硬装载灭菌重现性和可预测无菌保证值的最大障碍是什么？如何解决？P40

33．为什么多孔/坚硬装载灭菌必须要使用干燥的饱和蒸汽？P40

34．请简述如何灭菌程序开发时为什么要确认装载方式中的最难加热点？请列举最难加热点的评估影响因子。P41

35．灭菌程序开发包含了物品的装载的准备方法，这样的说法正确吗？P41 36．你所知道的装载的准备工作有那些？P41

37．确认多孔/坚硬装载方式有那些注意事项？P42

38．多孔/坚硬装载灭菌程序的关键在于确定运行参数。请列出你所知道工艺参数需要考虑的问题，其中哪些是关键参数，哪些是重要参数（表格形式）？P42

39．请解释何谓平衡时间？P43

40．减少平衡时间的措施有那些？P43

41．液体装载灭菌程序最需要关注的问题是什么？需确保哪四个前提？P43

42．在制定灌封液体容器类装载的灭菌程序时，需要考虑的因素有哪些？P43

43．大容量注射液热穿透冷点的位置一般在哪里？小容量注射液需考虑热穿透冷点吗？旋转灭菌时冷点位置明显吗？P46

44．蒸汽灭菌灌封液体容器装载方式应考虑那些因素？装载方式是否应形成书面操作规程？P46

45．液体装载灭菌程序的开发重要内容是确认运行参数，请各举例简述你所了解的关键参数和重要参数。P47-48

46．请列举灭菌设备中需要进行监控和警告的控制系统。P47-48

47．请设计灭菌工艺验证过程中稳定性研究样品的取样注意事项？P48

提示：取样数量、取样位置、生产同步验证时FO值，等等。

48．请举例灭菌工艺验证热力学稳定性研究，反映产品重点质量属性应考察的项目有那些？P48

49．灭菌程序性能确认实施之前，应完成预确认内容有哪些？P48

50．灭菌程序有关热分布的合格标准有哪些？P49。

51．请说明热穿透探头位置放置的原则？P49

52．生物指示剂挑战确认应遵循的程序有那些内容？P50

53．过度杀灭法应使用什么种类的生物指示剂？P51

54．按产品特性设计方法应使用什么种类的生物指示剂？P51

55．液体装载灭菌程序生物指示剂应如何放置？P51

56．多孔/坚硬装载灭菌程序生物指示剂应如何放置？P51

57．请设计灭菌程序性能确认的合格标准（包含生物确认的合格标准）。P52

58．生物指示剂确认计算

（1）采用按照产品特性设计的灭菌程序，期望最短的物理杀灭时间F PHY为6.0分钟，本确认方案预期生物指示剂残存数（N F=100），D值为1.2分钟。请计算

挑战试验用的生物指示剂初始菌数（N0）。

Lg N0= Lg N F+F/D

为了确保F BIO≥6.0分钟的设计要求，最低合格灭菌系统应该完全杀灭N0=？、D 值为1.2分钟的生物指示剂。商业化生产灭菌程序应该留有完全余地，最低合格灭菌程序应超过该F PHY值。

（2）过度杀灭的设计工艺，期望的物理杀灭时间（F PHY）生物生物杀灭时间（F B IO）均≥12分钟。若确认过程中使用D值为2.1分钟的生物指示剂，求完全杀灭挑战性试验中的生物指示剂的起始浓度（N0）。

Lg N0= Lg N F+F/D

（3）请计算当F0=8分钟，生物指示剂起始浓度（N0）为2*106）；D值为2.1分钟，其灭菌后最大N F应是多少？

Lg N F = Lg N0 -—F/D

5

9．已知某灭菌程序关键参数为灭菌温度100℃，灭菌时间40分钟，查设定Z=10时，L为x，求其相当于121℃下灭菌多少分钟（即F0值，标准灭菌时间）？

提示：在表中查到L值再进行计算。

60．已知某药品最耐热菌D值0.4分钟，当其灭菌前药液生物负荷限制在100CFU/最小包装单位时，为了达到SAL≤10-6，F0值（标准杀灭时间）应设定在多少？Lg N0= Lg N F+F/D

61．已知某药品最耐热菌D值0.5分钟，当其F0值为9.48，当灭菌前药液生物负荷检测得100CFU/最小包装单位时，请计算其无菌保证值（SAL）或非无菌概率是多少？

Lg N0= Lg N F+F/D Lg N F= Lg N0 - F/D

SAL=- Lg N F

62．当日常监控灭菌前药液沸腾试验为阳性，并且其污染菌耐热性D值大于验证时标准生物指示剂的D值时，虽然灭菌前药液生物负荷值检测值为50CFU/最小包装单位，仍符100CFU/最小包装单位的限度，产品可否出库放行？

63．灭菌工艺验证中化学指示剂可以取代生物指示剂吗？（P）

64．简述等效灭菌器应如何确认其等效性？P53

65．在灭菌工艺开发阶段如何使用各种分组法？P54

66．商业化生产灭菌工艺程序的日常监控计划应包含哪些重要内容？P55

67．灭菌器系统的适用性试验包含哪些内容？P55

68．变更控制应包含哪些内容？P55-56

69．变更控制方案应包含哪些内容？P56

70．如何进行灭菌程序定期再确认？P57