优泌林7030注射步骤

注射胰岛素步骤（优泌林70/30）

1.安装笔芯

2.摇匀

3.消毒胰岛素笔芯瓶口

4.上针头

5.旋调一单位胰岛素推出排气（先拔出按钮→旋调→推）

6.旋调要注射的胰岛素单位后套回外盖（早餐前＿＿单位，晚餐前＿＿单位）

7.消毒皮肤；待干

8.捏起皮肤进针

9.慢慢按压按钮（推药）（直至剂量数字回到“0”）

10.推药完毕后停留10秒以上（慢慢数数，从1数到）

11.拔除针头后即除去针头。（除出的针头存放在一硬纸盒或瓶子，带回医院处理）

温馨提示：

1.您使用的胰岛素是优泌林70/30。未开封时存放在冰箱（2-8℃）；已开封使用的可存放在室温（一般不超过30℃），只可使用4周，超过4周即使未用完也不能再用。

2.于早晨和晚餐前15-30分钟注射：手臂外侧、大腿前侧和外侧、腹部脐周（离开肚脐眼2-3横指），前后两针之间隔1-2横指，在各个部位有顺序有规律地轮换，一个月内不再同一部位注射，每次注射前用手指按摩注射部位，如有感觉有硬结就不能在此部位注射，

3.针头只可用一次，不能重复使用，以免针头断裂。

4.低血糖反应的症状有：头晕、出冷汗、心悸、手脚发抖等。

低血糖处理：如出现以上某个症状时立即监测血糖，确定是低血糖后再进食；如确实无法测血糖时，也应进食。可进食下列食物：饼干或面包（15-20克）、或糖果数粒，或甜饮料1/3杯，如低血糖未纠正可重复进食。

5.出现低血糖反应后要做好记录，就诊时要报告医生，尽量避免出现低血糖。

6.监测早餐前、早餐后、晚餐前和晚餐后的血糖，并做好记录，每次就诊时交给医生看。

常见小鼠给药和采血方法

小鼠灌胃小鼠灌胃方法比较简单，需要关注的只有两点：一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线，方便灌胃针头进入；二是动作要轻柔，从口角进入，防止损失食道。做的多了自然就熟练了。具体操作过程如下： 1.准备灌胃针头。一般可以从市场上面买到，实在没有的话，可以用12号的针头，剪去针尖，用砂纸将头端磨平，也可以用。但是买的灌胃针头的头端用锡或者适宜的方法处理了针头的锐口，自己用砂纸不可能将所有的锐口都磨掉，用这样的针头灌胃，损失小鼠食道的可能性比较大。 2.抓住小鼠，使其头、颈和身体呈一直线。抓小鼠的动作很简单，左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部即可。因为小鼠始终在活动中，若一次抓的感觉不是很顺手，要放开重新抓，不要逞强进行下一步操作。 3.抓好小鼠就可以灌胃了，一般用1ml的注射器配灌胃针头。灌胃针头从小鼠的嘴角进入，压住舌头，抵住上颚，轻轻向内推进，进入食管后会有一个刺空感，进入食道后就可以推注药液了。（我认为，所谓的灌胃，不必要灌胃针头进入小鼠的胃部，进入食管后就可以推药了，这样对小鼠食道的损伤要小点，特别是要长期灌胃给药的情况下。）当然，灌胃针头也可以再往里面深入一点，防止药液从口中流出。 4.灌胃容积一般是0.1～0.2ml/10g，最大0.35ml/10g，每只小鼠的灌胃最大容积不超过0.8ml。小鼠腹腔注射腹腔注射是常见的给药方式，尤其是在麻醉时。常见的麻醉方法均是麻醉药物腹腔注射。 1.小鼠腹腔注射可以用1ml的注射器，配合4号针头。

2.腹腔注射时右手持注射器，左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部，使小鼠的头部向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。进针的动作要轻柔，防止刺伤腹部器官。 3.尤其是对于体重较小的小鼠，腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离，最好是从腹部一侧进针，穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔，注射完药物后，缓缓拔出针头，并轻微旋转针头，防止漏液。 4.小鼠腹腔注射的给药容积一般为5～10ml/kg。小鼠静脉注射这也是常见的操作，稍微有点难度，没有指导的话，一开始可能会感觉有点手足无措。但是可以肯定的说，只要掌握了方法，小鼠的尾静脉注射还是很容易的。操作步骤： 1.首先要固定小鼠，最简单的固定方法就是把小鼠放在盒子里面，让它的尾巴伸在盒盖的外面，用手抓住小鼠尾巴，轻轻往外拽，就可以固定好小鼠了。这种固定方法，小鼠可以在盒子里面活动，固定的也不是很牢固，但是只要你尾静脉注射的手法很熟练，就足以用来注射了。还有的固定方法就是用一个小的圆筒，最好是金属做的，（可以在当地的铁匠铺，或者买白铁铺里面定做）首先是金属比较结实，而且可以用来固定在铁架台上，方便操作。圆筒的一段有个盖子可以拿下来，盖子中间有个小孔，可以让小鼠的尾巴伸出来（中间的小孔可以用胶布缠一下，防止锐利的边缘割伤小鼠尾巴）。另外一段可以用金属网的结构，网的形状可以做成子弹头的头端形状。网状结构可以让光线透近来，方便小鼠钻进圆筒里面。圆筒的长度约10cm，直径约3～4cm，可以做个系列长度和直径的圆筒，适合不同大小的小鼠。 2.固定好小鼠后就是注射了，一般用一次性的1ml的注射器就可以了，玻璃的1ml的注射器也可以用，针头用4号的就可以了。

常见小鼠给药及采血方法

常见小鼠给药及采血方法小鼠灌胃小鼠灌胃方法比较简单，需要关注的只有两点：一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线，方便灌胃针头进入；二是动作要轻柔，从口角进入，防止损失食道。做的多了自然就熟练了。具体操作过程如下： 1. 准备灌胃针头。一般可以从市场上面买到，实在没有的话，可以用12号的针头，剪去针尖，用砂纸将头端磨平，也可以用。但是买的灌胃针头的头端用锡或者适宜的方法处理了针头的锐口，自己用砂纸不可能将所有的锐口都磨掉，用这样的针头灌胃，损失小鼠食道的可能性比较大。 2.抓住小鼠，使其头、颈和身体呈一直线。抓小鼠的动作很简单，左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部即可。因为小鼠始终在活动中，若一次抓的感觉不是很顺手，要放开重新抓，不要逞强进行下一步操作。 3. 抓好小鼠就可以灌胃了，一般用1ml的注射器配灌胃针头。灌胃针头从小鼠的嘴角进入，压住舌头，抵住上颚，轻轻向内推进，进入食管后会有一个刺空感，进入食道后就可以推注药液了。（我认为，所谓的灌胃，不必要灌胃针头进入小鼠的胃部，进入食管后就可以推药了，这样对小鼠食道的损伤要小点，特别是要长期灌胃给药的情况下。）当然，灌胃针头也可以再往里面深入一点，防止药液从口中流出。 4. 灌胃容积一般是0.1～0.2ml/10g，最大0.35ml/10g，每只小鼠的灌胃最大容积不超过0.8ml。小鼠腹腔注射腹腔注射是常见的给药方式，尤其是在麻醉时。常见的麻醉方法均是麻醉药物腹腔注射。 1. 小鼠腹腔注射可以用1ml的注射器，配合4号针头。 2. 腹腔注射时右手持注射器，左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部，使小鼠的头部向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。进针的动作要轻柔，防止刺伤腹部器官。 3. 尤其是对于体重较小的小鼠，腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离，最好是从腹部一侧进针，穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔，注射完药物后，缓缓拔出针头，并轻微旋转针头，防止漏液。 4. 小鼠腹腔注射的给药容积一般为5～10ml/kg。小鼠静脉注射

礼来简介

礼来产品简介美国礼来公司于1876年成立于美国的印第斯安那州，至今已经有134的历史，是一家以科研与开发为基础的全球性医药公司，在糖尿病领域有着辉煌的历史：1923年发现并大规模生产了第一支动物胰岛素—因苏林；1982年上市了世界上第一支重组人胰岛素—优泌林；1996年上市了第一支人胰岛素类似物—优泌乐。2005年在美国上市了全球第一个GLP—1受体激动剂百泌达，目前，我们的产品行销于全球143个国家和地区，在18个国家设有制造厂，在50多个国家从事临床研究，礼来公司已经跻身于全球十大药企以及世界500强行列。优泌林家族是利用基因重组技术生产的重组人胰岛素其化学结构、生物活性与人胰岛素完全一致，优泌林R为短效胰岛素，可用于静脉滴注或用于泵中进行强化治疗，优泌林70/30中含有30%的短效人胰岛素用于控制餐后血糖，70%的精蛋白锌重组人胰岛素用于控制基础血糖。优泌乐是由礼来公司于1996年新上市的胰岛素类似物其通用名为赖脯胰岛素，为速效胰岛素主要用于泵中进行强化治疗。优泌乐25其组成为25%的赖脯胰岛素和75%的精蛋白锌赖脯胰岛素，25%的赖脯胰岛素用于控制餐后血糖，75%的精蛋白锌赖脯胰岛素用于控制基础血糖。优泌乐25为白色，无菌混淆液。可在餐前即时注射，必要时，也可在饭后立即注射。优泌乐25只能以皮下注射方式给药。在任何情况下，优泌乐25都不能采取静脉注射方式给药。

优泌乐50其组成为50%的赖脯胰岛素和50%的精蛋白锌赖脯胰岛素,50%的赖脯胰岛素用于控制餐后血糖，50%的精蛋白锌赖脯胰岛素用于控制基础血糖。优泌乐50一天三次，为唯一50配比类似物，是强化控糖的新选择。优泌林家族及优泌乐家族均为笔芯装，规格为100单位/ ml，每支共3ml，其储存方式为密封保存2—8摄氏度（冰箱内），有效期为2年。开盖使用时，可在25摄氏度下，保存28天。

小鼠注射

一、小鼠腹腔注射：腹腔注射是常见的给药方式，尤其是在麻醉时。常见的麻醉方法均是麻醉药物腹腔注射。 1. 小鼠腹腔注射可以用 2. 腹腔注射时右手持注射器，左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部，使小鼠的头部向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。进针的动作要轻柔，防止刺伤腹部器官。 3. 尤其是对于体重较小的小鼠，腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离，最好是从腹部一侧进针，穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔，注射完药物后，缓缓拔出针头，并轻微旋转针头，防止漏液。液体外漏的主要原因是抓取小鼠时，腹部过紧而致腹内压过高所致，应该紧抓颈部但使其腹部皮肤松软，此时进针注射，不会外漏。 4. 小鼠腹腔注射的给药容积一般为5～10ml/kg 二、皮下注射给药将药液推入皮下结缔组织，经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环的过程。作皮下注射常选项背或大腿内侧的皮肤。操作时，常规消毒注射部位皮肤，然后将皮肤提起，注射针头取一钝角角度刺入皮下，把针头轻轻向左右摆动，易摆动则表示已刺入皮下，再轻轻抽吸，如无回血，可缓慢地将药物注入皮下。拔针时左手拇、食指捏住进针部位片刻，以防止药物外漏。注射量约为0.1～0.3ml/10g体重。三、皮内注射给药将药液注入皮肤的表皮河真皮之间，观察皮肤血管的通透性变化或皮内反应，接种、过敏实验等一般作皮内注射。先将注射部位的被毛剪掉，局部常规消毒，左手拇指和食指按住皮肤使之绷紧，在两指之间，用结核菌素注射器连接4.5针头穿刺，针头进入皮肤浅层，再向上挑起并梢刺入，将药液注入皮内。注射后皮肤出现一白色小皮丘，而皮肤上的毛孔极为明显。注射量为0.1ml/次。四、肌肉注射给药小鼠体积小，肌肉少，很少采用肌肉注射。当给小鼠注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时，采用肌肉注射。操作时1人固定小鼠，另一人用左手抓住小鼠的1条后肢，右手拿注射器。将注射器与半腱肌呈90°角迅速插入1/4，注入药液，用药量不超0.1ml/10g体重。五、静脉注射给药

常用胰岛素分类

常用胰岛素分类胰岛素制剂按照来源不同可分为动物胰岛素（猪胰岛素、牛胰岛素）及人胰岛素。猪胰岛素是从猪胰脏提取的；牛胰岛素是从牛胰脏提取的；1、动物胰岛素对人来说属于异种蛋白，有较强的免疫原性，易出现过敏反应和注射部位脂肪萎缩，长期应用可能产生抗体，导致疗效降低。 2、人胰岛素并不是从人体内提取的，而是借助先进的人工基因高科技生产技术合成的，其结构、功能与人胰岛素相似。与动物胰岛素相比，其主要优点在于免疫原性显著下降，生物活性提高，吸收速率增快，注射部位脂肪萎缩发生率减低。人胰岛素类似物在结构上与人胰岛素存在细小差异，免疫原性低，可模仿正常胰岛素生理作用。但是价格较高。胰岛素制剂按照作用时间不同，可分为短效、中效与长效。一、超短效（速效）胰岛素：15分钟起效，高峰30-60分钟，作用持续时间为2-4小时。可餐前即刻、餐后注射。包括：诺和锐（门冬胰岛素），优泌乐（赖脯胰岛素），速秀霖（赖脯胰岛素）短效胰岛素：30分钟起效，高峰2-4小时，作用持续时间为6-8小时。可餐前半小时注射。包括：普通胰岛素，诺和灵R，优泌林R，甘舒霖R 重和林R 主要用于控制餐后血糖。若静脉注射会即刻起作用，所以，一般在糖尿病急性代谢紊乱时应用静滴速效胰岛素。二、中效胰岛素（中性鱼精蛋白锌胰岛素(NPH)）：1-3小时起效，高峰6-12小时，作用持续时间为18-26小时。可餐前半小时注射。主要用于控制空腹血糖及两餐间血糖。只能皮下注射。包括：诺和灵N，甘舒霖N，优泌林N，重和林N 预混胰岛素：可餐前半小时注射。短效胰岛素和中效胰岛素按一定比例制成的预混制剂。包括：诺和锐30，优泌乐25，诺和灵30R，优泌林70/30，甘舒霖30R，诺和灵50R，甘舒霖50R，重和林M30 三、长效胰岛素（鱼精蛋白锌胰岛素(PZI)）：3-8小时起效，高峰14-24小时，作用持续时间为28-36小时。可餐时注射。主要用途与中效胰岛素相似。只能皮下注射。包括：甘精胰岛素（来得时），长秀霖、诺和平（地特胰岛素）动物胰岛素：普通胰岛素400u（10ml）人胰岛素：丹麦诺和系列（诺和灵R笔芯）生物合成人胰岛素注射液（诺和灵50R笔芯）精蛋白生物合成人胰岛素注射液（预混50R）（诺和灵30R笔芯）精蛋白生物合成人胰岛素注射液（预混30R）（诺和灵N笔芯）精蛋白生物合成人胰岛素注射液美国礼来公司的人胰岛素优泌乐优泌乐25 优泌乐50 （优泌林70/30）精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液（优泌林N）精蛋白锌重组人胰岛素注射液中国甘李公司：速秀霖长秀霖中国东宝甘舒霖系列（甘舒霖R笔芯）常规重组人胰岛素注射液（甘舒霖30R笔芯）30/70混合重组人胰岛素注射液（甘舒霖N笔芯）精蛋白重组人胰岛素注射液德国拜耳公司重和林R 重和林M30 重和林N 人胰岛素类似物诺和锐系列门冬胰岛素（特充）注射液（诺和锐特充）门冬胰岛素30（特充）注射液（诺和锐30特充）门冬胰岛素（笔芯）注射液（诺和锐笔芯）门冬胰岛素30（笔芯）注射液（诺和锐30笔芯）（优泌乐）赖脯胰岛素注射液（优泌乐25）精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液优泌乐50 甘精胰岛素注射液（来得时新预充）甘精胰岛素注射液（来得时笔芯）重组甘精胰岛素注射液（长秀霖笔芯）常用的胰岛素注射笔及其笔芯诺和笔（诺和灵R、30R、50R、N、门冬胰岛素、门冬胰岛素30）东宝笔（甘舒霖R、甘舒霖30/70、甘舒霖N）优泮笔（优泌乐、优泌乐25、优泌林30/70）秀霖笔胰岛素预充注射笔（一次性）诺和锐特充诺和锐30特充来得时新预充（甘精胰岛素注射液） - 1 -

胰岛素的种类及使用方法

目前，在我国临床上常用胰岛素制剂按起效的时间长短分为如下几种： 1、超短效胰岛素：有优泌乐（赖脯胰岛素）诺和锐（门冬胰岛素）等。本品注射后10～20分钟起效，40分钟为作用高峰，作用持续时间3～5小时，可餐前注射。 2、短效胰岛素：有猪和人胰岛素两种。诺和灵R、优泌林R和甘舒霖R为人胰岛素。本品注射后30分钟开始作用，持续5～7小时，可用于皮下、肌肉注射及静脉点滴，一般在餐前30分钟皮下注射。

3、中效胰岛素：有诺和灵N，优泌林N和甘舒霖N。本品注射后3小时起效，6～8小时为作用高峰，持续时间为14～16小时。作用持续时间的长短与注射的剂量有关。中效胰岛素可以和短效胰岛素混合注射，亦可以单独使用。中效胰岛素每日注射一次或两次，应根据病情决定。皮下或肌肉注射，但不可静脉点滴。中效胰岛素是混悬液，抽取前应摇匀。 4、长效胰岛素（包括鱼精蛋白锌胰岛素）：如来得时（甘精胰岛素）、诺和平（地特胰岛素），本品一般为每日傍晚注射，起效时间为1.5小时，作用可平稳保持22小时左右，且不易发生夜间低血糖，体重增加的不良反应亦较少；国产长效胰岛素是鱼精蛋白锌猪胰岛素，早已在临床使用。本品注射后4小时开始起效，8～12小时为作用高峰，持续时间约24小时，其缺点是药物吸收差，药效不稳定。长效胰岛素一般不单用，常与短效胰岛素合用，不可作静脉点滴。 5、预混胰岛素：是将短效与中效胰岛素按不同比例（30/70/、50/50、70/30）预先混合的胰岛素制剂，如诺和灵30R为30%诺和灵R 与70%诺和灵N预先混合的胰岛素。选择30/70或50/50、70/30是根据病人早餐后及午餐后血糖水平来决定早餐前一次剂量皮下注射；根据病人晚餐后及次日凌晨血糖水平来决定晚餐前皮下注射剂量。 1、超短效胰岛素：包括门冬胰岛素（诺和锐笔芯、特充）和赖脯胰岛素（优泌乐），皮下注射后起效时间10～20分钟，最大作用时间为注射后1～3小时，降糖作用持续3～5小时，和正规胰岛素相比，它更符合胰岛素的生理分泌模式，餐前注射吸收迅速，比人胰岛素快3倍，达峰时间短，能更有效地控制餐后血糖。使用时间灵活，病人比较容易接受，通常与中长效胰岛素合用，需注意的是用药10分钟内应进食碳水化合物，否则易致低血糖。 2、短效胰岛素：包括①动物来源的普通胰岛素（正规胰岛素、中性胰岛素、可溶性胰岛素等）；②重组人胰岛素：诺和灵R（笔芯、注射液）、优泌林R（笔芯、注射液）、甘舒霖R（笔芯、注射液）、万苏林（笔芯、注射液）。皮下注射后0.5小时内起效，1～3小时达峰，作用持续时间大约8小时。短效胰岛素一般在餐前30分钟皮下注射，由于在皮下存在一个吸收过程，不如超短效胰岛素峰型尖锐，与人的生理分泌模式有一定的差异，进餐时间提前易导致血糖控制不佳，若延后则易发生低血糖。

腹腔注射

腹腔注射【定义】：腹腔注射是将药物注入胃肠道浆膜以外，腹膜以内．其吸收速度较快（2小时左右）。【适应症】：人不常应用，有时可以作为特殊治疗手段，如多巴胺、速尿联合腹腔注射治疗肝硬化顽固性腹水。当猪只较小而难以寻找耳静脉时，或天冷皮肤血管收缩或猪处于贫血消瘦情况血管不明显时，可以通过腹腔注射补液．以防脱水死亡，因下痢脱水1/3以上即有生命危险．【操作步骤】：小鼠腹腔注射腹腔注射是常见的给药方式，尤其是在麻醉时。常见的麻醉方法均是麻醉药物腹腔注射。 1. 小鼠腹腔注射可以用1ml的注射器，配合4号针头。 2. 腹腔注射时右手持注射器，左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部，使小鼠的头部向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。进针的动作要轻柔，防止刺伤腹部器官。 3. 尤其是对于体重较小的小鼠，腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离，最好是从腹部一侧进针，穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔，注射完药物后，缓缓拔出针头，并轻微旋转针头，防止漏液。【禁忌】：⒈忌不等渗液体，如50%葡萄糖。 ⒉药液须加温至体温 ⒊选用无刺激性药液，忌葡萄糖酸钙等。 ⒋油乳剂，有沉淀，半固体药物不宜腹腔注射。【优点】：操作方便，任何动物不论大小都可腹腔注射。腹膜面积大.密布血管和淋巴管,吸收能力特强,每小时可吸收占动物体重3%~8 %的液体.且腹腔补液时间短,速度快大号针头2分钟即可输入500毫升药液,还不考虑心脏超负荷。【其他声音】：某些兽医认为腹腔注射液不宜过大，20KG的猪20-30ml，30kg 的猪40ml，50kg的猪50ml。【个人体会】：一般情况下，输入体重5%的适宜液体是安全可靠的。

常用胰岛素种类及特点表

常用胰岛素种类及特点表类型品种来源注射途径作用时间（小时）开始最强持续短效正规胰岛（RI）猪静脉皮下肌肉即刻 1/2～1 1/2 2～4 2 6～8 中性单峰胰岛素猪静脉皮下肌肉即刻 1/2～1 1/2 2～4 2 6～8 诺和灵R 人静脉皮下肌肉即刻 1/2～1 1～3 8 常规优泌林人皮下肌肉1/2 2～4 6～8 中效低鱼精蛋白锌胰岛素(NPH) 猪皮下肌肉3～4 6～12 24～28 诺和灵N 人皮下肌肉 1.5 4～12 24 中效优泌林人皮下肌肉1～2 4～10 16～20 长效鱼精蛋白锌胰岛素(PZI) 猪皮下肌肉4～6 14～20 24～36 优泌林u 人皮下肌肉4～6 8～20 20～30 预混诺和灵30R 人皮下肌肉0.5 诺和灵50R 人皮下肌肉0.5 优泌林70/30 人皮下肌肉0.5 2～8 16～20 优泌林50/50 人皮下肌肉0.5 2～8 16～20 B 28 Asp胰岛素 B28Asp胰岛素与常规人胰岛素作用的比较(Heinemann,1993) 胰岛素品种到达输注葡萄糖半最大速率之时间 (min) 葡萄糖输注率增加量mg/(min＊kg) 及占最大增加量＊的％葡萄糖输注率高峰注射I后45min 注射I后６０min B28Asp 人胰岛素45 ± 11 6.3 ± 2.7 (64 ± 28%) 7.9 ± 2.8 (81 ± 26%) 明显较高，较快常规人胰岛素58 ± 25 3.4 ± 1.8 (30 ± 15%) 4.8 ± 2.3 (42 ± 17%) 明显较低，较慢 P值<0.05 <0.001 <0.001 <0.05,<0.001 1922年加拿大著名糖尿病专家Banting（班亭）和Best、Macleod、Collip等人合作，从动物胰脏提取胰岛素成功，并用来治疗一个糖尿病患儿，成功的挽救了该患儿

小鼠腹腔注射LD50的测定标准操作规程(SOP)

小鼠腹腔注射LD50的测定标准操作规程(SOP) 点击次数：1208 作者：leancao 发表于：2008-08-22 00:00转载请注明来自丁香园来源：丁香园【目的】通过实验学习测定药物LD50的方法、步骤及计算过程，观察受试药品一次给予动物后所产生的急性毒性反应和死亡情况。【原理】药物给药剂量与动物死亡率间呈正态分布，以对数剂量为横坐标、死亡率为纵坐标作图，可得到一对称S型曲线，其两端较平坦，中间较陡，说明两端处剂量稍有变化时死亡率的改变不易表现出来，在50%死亡率处斜率最大，该处剂量稍有变动时，其死亡率变动最明显，即最灵敏，在技术上也最容易测得准确，所以人们常选用LD50值作为反映药物的指标。若将死亡率换算成机率单位，则对数剂量与机率单位呈直线关系，用数学方法可拟合其回归方程式，可精确地计算LD50及引起任何死亡率的剂量及相关数据。【器材】注射器（1ml）、天平、小鼠笼、苦味酸。【药品】盐酸普鲁卡因【动物】18～22g健康小鼠50只(正式试验)，雌雄各半（雌鼠应无孕），实验前禁食12h，不禁水。【方法】 1.预试验目的是寻找引起0%和100%动物死亡的剂量范围，以便正式实验时确定各组剂量。一般是取小鼠9～12只，分3～4组，选择组距较大的一系列剂量腹腔注射给药，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0%及100%死亡率，至少应找出引起20%～80%死亡率的剂量范围，以保证量-效曲线跨越足够的范围。普鲁卡因小鼠腹腔注射（ip）引起0%和100%动物死亡的剂量范围的参考值为：最小剂量（D

min）121.3mg/kg，最大剂量（Dmax）290mg/kg。 2.剂量计算及药液配制 (1)剂量计算根据预试结果找出Dmax及Dmin，设正式实验的剂量组数为n，剂量公比为r，则各组剂量为Dma x·rk-1，k为第几组，一般选用4～5组动物，r为0.6～0.85为宜。例已知普鲁卡因Dmin=121.3mg/kg，Dmax=290mg/kg 当n=6时，r=0.84, 各组剂量为： 1. 290 mg/kg 2. 290 mg/kg×0.84 = 24 3.6mg/kg 3. 290 mg/kg×0.842= 20 4.6mg/kg 4. 290 mg/kg×0.843= 171.9mg/kg 5. 290 mg/kg×0.844= 144.4mg/kg 6. 290 mg/kg×0.845= 121.3mg/kg （2）药液配制 ①药源充足时的配药方法最高浓度药液（母液）的配制

胰岛素分类及使用(概括全面)

简洁明了----胰岛素分类表一、分类：

二、预混类胰岛素组成成份商品名组成成份甘舒霖30R 30%常规重组人胰岛素（短效）70%低精蛋白重组人胰岛素（中效）甘舒霖50R 50%常规重组人胰岛素（短效）50%低精蛋白重组人胰岛素（中效）诺和灵30R 30%可溶性中性胰岛素（短效）70%低精蛋白锌胰岛素（中效）诺和灵50R 50%可溶性中性胰岛素（短效）50%低精蛋白锌胰岛素（中效）诺和锐30 30%门冬胰岛素（速效）70%精蛋白结合的结晶门冬胰岛素（中效）优泌林70/30 30%重组人胰岛素（短效）70%精蛋白锌重组人胰岛素（中效）优泌乐25 25%赖脯胰岛素（速效）75%精蛋白锌重组赖脯胰岛素（中效）优泌乐50 50%赖脯胰岛素（速效）50%精蛋白锌重组赖脯胰岛素（中效）三、贮藏与保存 1.未开启的所有胰岛素均应密闭，在冷藏室保存(2—8℃)。 2.开启后的普通胰岛素宜密闭，在冷藏室保存(2—8℃)。 3.除普通胰岛素之外的其他胰岛素开启后应在室温保存（保存温度参见分类表）。 4.所有胰岛素均不可冰冻，且勿接近冰箱的冷冻室。 5.所有胰岛素需保存在包装盒，避免过热和直射。

6.正在使用的胰岛素建议不要存放于冰箱中，在室温过高必须存放于冰箱的情况下，需在每次使用前使胰岛素恢复至室温。 7.使用胰岛素笔或者预填充/特充时，首次注射时应注意排气，每次注射后必须卸下针头（防温度变化时药液从针头漏出；预混类胰岛素由于针头漏液可能致剩余药液的胰岛素浓度改变）。四、特殊给药方式 1.可以静脉给药的胰岛素：普通胰岛素、诺和灵R、诺和锐、优泌林R、优泌乐。 2.可以用于胰岛素泵的胰岛素：诺和锐、优泌乐、优泌林R，甘舒霖R。五、胰岛素注射时注意事项 1.胰岛素注射器材常用：1ml注射器，胰岛素注射器（BD），各种配套的胰岛素笔，胰岛素泵不常用：胰岛素高压注射器胰岛素注射器：BD公司生产的红色刻度胰岛素注射器仅适用于规格为400IU:10ml瓶装胰岛素，灰色刻度仅适用于规格为300IU:3ml笔芯装胰岛素。 2.注射部位：腹部（肚脐5cm以及腰围除外）、三角肌、大腿前部、外侧部及臀部。吸收速度由快至慢依次为腹部—手臂—臀部—大腿；每次注射间距应在2.5cm以上；餐前、餐后需活动时，避免选择三角肌和大腿注射；长期注射胰岛素者应在注射区域轮换注射部位。为确保胰岛素吸收速度一致，防止血糖波动，每天注射的时间及同一时间点

病毒性心肌炎小鼠模型(含腹腔注射)

雄性BALB/c小鼠病毒性心肌炎模型 1.CVB3的繁殖和扩增将100ul CVB3原液加入约80%满的Hela细胞培养瓶中，48h后收集培养（此时细胞几乎全部死亡，培养液黄而清亮）。将收集到的上清反复冻融（-70度冰箱放置15min，室温放置30min，如此反复三次），3000转/分离心20分钟，去沉渣，留上清，分装于500ul EP管中，200ul/管，此即新制备的病毒原液。 2.CVB3 TCID50测定将CVB3病毒液以10倍梯度稀释法稀释成10-1-10-10，将Hela细胞以103/100 l/孔加入96孔培养板中，于37℃培养至约80%满；将10倍梯度稀释的CVB3，以30ul/孔接种Hela 细胞，每稀释度5孔；37℃孵育1h使病毒吸附；将病毒吸弃，以PBS洗3次，然后加入100ul/孔2% NBS 1640维持液；37℃培养，逐日观察细胞病变情况，连续观察5天，细胞病变达50%以上计为阳性。按Reed-Muench方法计算CVB3的TCID50。TCID50＝Log(>50%病变阳性率稀释度)＋距离比。距离比＝(>50%病变阳性率-50)/ (>50%病变阳性率-<50%病变阳性率)，最后换算为TCID50/100 ul。 3.将病毒稀释至适当滴度腹腔注射感染小鼠以103 TCID50/100ul腹腔注射感染雄性BALB/c小鼠，4-8周龄，此年龄段小鼠CVB3 感染的反应最为适当。左手提起并固定小鼠，使鼠腹部朝上，鼠头略低于尾部，右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线的两侧进行穿刺，针头刺入皮肤后进针，使注射针头与皮肤呈45°角刺入腹肌，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失，有落空感，固定针头，保持针尖不动，注射病毒。 4.鉴定 4.1小鼠外观和心脏外观小鼠一般第3天开始精神萎靡，活动减少，毛粗糙，体温下降，体重从感染后第3天一般开始下降，随后持续下降；第7天心脏晦暗，纹理不清，心脏表面出现白色点状条索状病变。 4.2病理学 HE染色，感染第7天，心肌组织有大量的炎性细胞浸润，可广泛弥漫，也可呈局灶性，并可有坏死灶。

带你认识各种类型的胰岛素

带你认识各种类型的胰岛素胰岛素由胰岛B细胞分泌，是体内惟一可以降低血糖的激素。胰岛素有许多剂型，按生产来源分动物胰岛素、半合成胰岛素和DNA重组生物合成胰岛素。在临床上，根据各种胰岛素作用时间特点，将品种繁多的胰岛素制剂分为六类。一、速效（超短效）胰岛素：有赖脯胰岛素、门冬胰岛素。赖脯胰岛素其特点是注射后能很快分解，皮下吸收迅速，起效快，作用时间短，餐前、餐中、餐后都可注射，并能减少低血糖的发生。门冬胰岛素与胰岛素的亲和力与人胰岛素相似，可迅速解离为单体，皮下注射10～20分钟起效，45分钟达高峰，持续4～6小时。二、短效胰岛素：（1）天然胰岛素，如：普通胰岛素、猪胰岛素；（2）DNA 重组生物合成胰岛素，如：重组人胰岛素、常规优泌林、诺和灵R、优泌林R等。普通胰岛素、结晶胰岛素CZI的pH值均为2.5～3.5，这样可使其保持在溶解状态，因此吸收快，作用开始时间及持续时间较短，皮下注射30分钟起效，4～8小时达峰，持续4～12小时。Actrapid是高精纯度猪胰岛素的中性溶液，其作用比CZI快，皮下注射15分钟起效，2～4小时达峰，持续6～8小时。三、中效胰岛素：中性蛋白锌胰岛素、低精蛋白锌胰岛素、诺和灵N、优泌林N。中效胰岛素只能皮下注射，吸收缓慢，注射60分钟起效，6～12小时达峰，持续18～24小时。四、长效胰岛素：如精蛋白锌胰岛素、中性精蛋白锌胰岛素、甘精胰岛素（来得时）、地特胰岛素（ID）。长效胰岛素与中效胰岛素不同在于内含过量的鱼精蛋白，因此结晶胰岛素与鱼精蛋白结合时作用时间延长，皮下注射后在酶的作用下逐步释放游离胰岛素而被吸收，注射3～4小时起效，16～24小时达峰，持续24～36小时。若与普通胰岛素合用则普通胰岛素必须多于长效胰岛素，方可显出普通胰岛素的作用，注射时先抽普通或结晶胰岛素，后抽长效胰岛素，反之则变质。五、预混胰岛素：为双时相胰岛素，是将短效与长效胰岛素混合注射，使注射的胰岛素不仅有短效，而且同时也具有中长效的作用。主要有诺和灵30R、优泌林70／30R、诺和灵30R特充、混合重组人胰岛素诺和灵50R、优泌林50R。六、胰岛素类似物：有赖脯胰岛素、门冬胰岛素、IG、ID、甘精胰岛素。胰岛素类似物指用基因工程的方法对人胰岛素的两条肽链进行修饰，从而改变胰岛素的药代动力学，或吸收更快，或吸收更缓慢平稳，但并没改变人胰岛素主要生物学功能，并较重组人胰岛素更好模拟内源性胰岛素的分泌模式。甘精胰岛素目前没有进入我国药品市场。临床上，医生会根据患者各个时段的血糖情况，选择合适的治疗方案。

胰岛素分类

胰岛素分类胰岛素制剂按照来源不同可分为动物胰岛素（猪胰岛素、牛胰岛素）及人胰岛素。猪胰岛素是从猪胰脏提取的；牛胰岛素是从牛胰脏提取的； 1、动物胰岛素对人来说属于异种蛋白，有较强的免疫原性，易出现过敏反应和注射部位脂肪萎缩，长期应用可能产生抗体，导致疗效降低。 2、人胰岛素并不是从人体内提取的，而是借助先进的人工基因高科技生产技术合成的，其结构、功能与人胰岛素相似。与动物胰岛素相比，其主要优点在于免疫原性显著下降，生物活性提高，吸收速率增快，注射部位脂肪萎缩发生率减低。人胰岛素类似物在结构上与人胰岛素存在细小差异，免疫原性低，可模仿正常胰岛素生理作用。但是价格较高。胰岛素制剂按照作用时间不同，可分为短效、中效与长效。超短效（速效）胰岛素：15分钟起效，高峰30-60分钟，作用持续时间为2-4小时。可餐前即刻、餐后注射。包括：诺和锐（门冬胰岛素），优泌乐（赖脯胰岛素），速秀霖（赖脯胰岛素）短效胰岛素：30分钟起效，高峰2-4小时，作用持续时间为6-8小时。可餐前半小时注射。包括：普通胰岛素，诺和灵R，优泌林R，甘舒霖R 重和林R 主要用于控制餐后血糖。若静脉注射会即刻起作用，所以，一般在糖尿病急性代谢紊乱时应用静滴速效胰岛素。中效胰岛素（中性鱼精蛋白锌胰岛素(NPH)）：1-3小时起效，高峰6-12小时，作用持续时间为18-26小时。可餐前半小时注射。主要用于控制空腹血糖及两餐间血糖。只能皮下注射。包括：诺和灵N，甘舒霖N，优泌林N，重和林N 预混胰岛素：可餐前半小时注射。短效胰岛素和中效胰岛素按一定比例制成的预混制剂。

包括：诺和锐30，优泌乐25，诺和灵30R，优泌林70/30，甘舒霖30R，诺和灵50R，甘舒霖50R，重和林M30 长效胰岛素（鱼精蛋白锌胰岛素(PZI)），：3-8小时起效，高峰14-24小时，作用持续时间为28-36小时。可餐时注射。主要用途与中效胰岛素相似。只能皮下注射。包括：甘精胰岛素（来得时），长秀霖、诺和平（地特胰岛素）动物胰岛素：普通胰岛素400u（10ml）人胰岛素：丹麦诺和系列（诺和灵R笔芯）生物合成人胰岛素注射液（诺和灵50R笔芯）精蛋白生物合成人胰岛素注射液（预混50R）（诺和灵30R笔芯）精蛋白生物合成人胰岛素注射液（预混30R）（诺和灵N笔芯）精蛋白生物合成人胰岛素注射液中国东宝甘舒霖系列（甘舒霖R笔芯）常规重组人胰岛素注射液（甘舒霖30R笔芯）30/70混合重组人胰岛素注射液（甘舒霖N笔芯）精蛋白重组人胰岛素注射液美国礼来公司的人胰岛素优泌乐优泌乐25 优泌乐50 （优泌林70/30）精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液（优泌林N）精蛋白锌重组人胰岛素注射液中国甘李公司：速秀霖长秀霖德国拜耳公司重和林R 重和林M30 重和林N

小鼠缺氧实验指导

实验三实验性缺氧【实验目的】 1.掌握各型（低张性和血液性）缺氧动物模型复制的方法，了解缺氧的分类。 2.观察不同类型缺氧时机体的变化（活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色）及存活时间； 3.观察不同年龄和中枢兴奋状态对机体缺氧耐受性的影响，理解条件因素在缺氧发病中的重要性。 4.掌握各型缺氧的发生机制及特点。 5.了解常见血液性缺氧的解救措施。【实验原理】导致低张性缺氧最常见的原因包括吸入气氧分压过低和外呼吸功能障碍。本实验将小鼠放置于加入钠石灰的密闭广口瓶内，随着小鼠的呼吸消耗，广口瓶中氧气含量逐渐降低，模拟外环境氧分压过低引起的低张性缺氧。观察低张性缺氧时机体的变化（活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色）及存活时间。影响机体对缺氧耐受性的因素很多，除缺氧时间、速度、类型和程度外，还与缺氧时中枢功能状态和年龄等因素有关。本实验通过应用药物改变小鼠的中枢兴奋状态及选择不同年龄的小鼠，观察不同条件下低张性缺氧小鼠的活动状况和存活时间。血液性缺氧是由于血红蛋白的数量减少或性质改变从而降低血液携氧能力或血红蛋白结合的氧不易释出所引起的缺氧。本实验将复制两种常见血液性缺氧模型：一氧化碳中毒和亚硝酸盐中毒引起的血液性缺氧。一氧化碳可与血红蛋白结合，形成碳氧血红蛋白而失去结合氧的能力，从而导致血液携氧能力降低而引起机体缺氧。亚硝酸钠是强氧化剂，可使血红蛋白分子内二价Fe2+氧化成为三价Fe3+而形成高铁血红蛋白，高铁血红蛋白同样失去携氧能力而引起血液性缺氧。【实验对象】成年小鼠（性别、年龄、体重近似、雌雄不拘）、新生小鼠【实验药品和器材】 3.75%尼可刹米、0.25%氯丙嗪、生理盐水、钠石灰、5%亚硝酸钠、1%亚甲兰、浓硫酸、草酸。缺氧瓶带气压平衡装置、耗氧量测定装置（图1）、1 ml注射器、5 ml注射器、电子天平、纱布、滤纸、眼科剪、眼科镊、小烧杯、酒精灯、火柴、CO发生装置（图2）、气囊袋。

优泌乐50和优泌林30R治疗2型糖尿病的疗效对比分析

优泌乐50和优泌林30R治疗2型糖尿病的疗效对比分析【摘要】目的比较预混胰岛素类似物（优泌乐50）和预混人胰岛素（优泌林30R）治疗口服磺脲类降糖药继发失效的2型糖尿病的疗效。方法本研究为持续12周的随机、开放实验，48例口服降糖药继发失效的2型糖尿病患者随机分为优泌乐50治疗组和优泌林30R治疗组，治疗12周，观察两种不同治疗方法患者糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹血糖、餐后2 h血糖、低血糖发生率、胰岛素用量的差异。结果显示接受优泌乐50治疗组餐后2 h血糖控制好于优泌林30R 治疗组（P＜0.01～0.05）；优泌乐50治疗组胰岛素用量更少（P＜0.05），糖化血红蛋白、空腹血糖两组差异无统计学意义（P＞0.05）；低血糖发生率优泌乐50治疗组较优泌林30R组发生率低。结论优泌乐50治疗2型糖尿病控制餐后血糖优于优泌林30R，低血糖发生率低于优泌林30R，同等疗效，优泌乐50治疗组更节省胰岛素。【关键词】预混胰岛素类似物；糖化血红蛋白；血糖 1资料与方法 1.1一般资料研究病例选自2011年9月至2012年9月在长春市中心医院内分泌科住院患者48例，全部病例为口服降糖药治疗失败的2型糖尿病患者，糖尿病诊断标准符合1999年WHO诊断标准，研究病例资料的一般情况如下：男22例，女26例，平均年龄（5 2.±11）岁，平均体重指数（BMI）（23±6.8）Kg/m2，病程（6± 3.5）年，随机分为优泌乐50治疗治疗组22例，优泌林30R治疗组26例，排除心衰、严重肝病、妊娠、反复严重低血糖患者。 1.2研究方法所有患者入院前均服用口服降糖药，血糖控制差，HbA1c＞7.0%，入院后停用口服降糖药，改为优泌乐50早晚餐前即刻皮下注射治疗和优泌林30R早晚二次餐前15～30 min皮下注射，所有研究病例用量调整阶段2周，空腹血糖控制目标4.4～7.0 mmol/L，餐后2 h血糖控制目标6.0～10.0 mmol/L，睡前血糖控制目标7.0～10.0 mmol/L。血糖控制达标后，每隔2周进行随访1次，随访期间至少有1 d检测空腹、三餐后2 h、睡前血糖情况，出现低血糖症状即时记录当时血糖情况。血糖测定统一采用德国拜耳拜安捷血糖仪，糖化血红蛋白测定采用免疫比浊法。 1.3统计学方法所有研究资料录入Stata统计软件进行资料分析。计量资料以x±s表示；组间比较采用t检验，计数资料应用百分率表示，组间比较应用χ2检验。 2结果 2.1一般情况结果所有研究病例均按要求完成治疗，应用优泌乐50治疗22例病例和应用优泌林30R治疗病例26例两组间一般情况包括性别、年龄、BMI、HbA1c差异无统计学意义（P＞0.05）。

浅谈小鼠腹腔注射的方法与技巧

浅谈小鼠腹腔注射的方法与技巧【摘要】小鼠腹腔注射仍是目前药典中异常毒性检查的主要方法之一，但很多从事药品检验或安全性评价的实验人员对腹腔注射的技巧把握得不够准确，胆子小的只能将药液注射在皮下，而胆大的有时则会刺破小鼠内脏，本文主要对小鼠腹腔注射的正确方法给以介绍，希望能给从事动物实验的人员带来一定的帮助。【关键词】小鼠;腹腔注射;异常毒性;安全性评价用小鼠来检测药品的异常毒性，是各国药品检验中用得最多的生物检定方法，我国从1953年第一部药典发行以来，异常毒性检测方法一直被收载在各版药典中，并且不断地进行了改进。从2005年版药典开始，虽然从很多品种的质量标准中删去了异常毒性的检查项目，但一直到2010年版药典仍然保留了部分品种的异常毒性检查项目，并且在附录中也介绍了异常毒性检查法［1］。此外，在新药的临床安全性评价试验中，小鼠仍得到了广泛应用［2-3］，有时还用小鼠做成动物模型［4］，对新开发药物的疗效进行研究。静脉注射和腹腔注射是小鼠最常见的两种给药途径，小鼠的尾静脉注射对初学者来说，可能有一定难度，但注射是否成功容易判断，不会对实验结果造成影响。而腹腔注射虽然看似简单，可如果操作不当，很容易造成注射失败，并不被发现，直接影响到实验结果。本文主要对小鼠腹腔注射的正确方法及注射时需注意的事项进行了介绍。 1 小鼠的选择 1.1 小鼠应同一来源同品系，雌者无孕，健康无伤，毛色光滑，眼睛红亮，活泼，体重17~20克［5］。 1.2 尽量选择雌性小鼠，因为整群饲养的雄性小鼠时常打斗，如确实需要选择雄性小鼠则应分开笼饲。 2 腹腔注射的方法 2.1 小鼠的抓取左手握小鼠，用拇指、食指捏住小鼠颈背部，用无名指及小指固定其尾和后肢，腹部向上，头呈低位［5］。 2.2 在下腹部离腹白线约0.5 cm处将注射针刺入皮下，沿皮下向前推进3~5 cm，然后使针头与小鼠腹部约成30°角刺入腹腔，针头刺入的速度要快，刚开始刺时会有一种明显的抵抗力，那是因为鼠皮具有韧性，后来突然会有一种抵抗力消失的感觉，说明针头已刺入腹腔内，此时就可以开始进药。 2.3 注射完毕后，轻轻将针头旋转一定角度，缓慢拔出针头，防止药液外漏。 2.4 注射成功与否的判断刺入腹腔后可轻拉针筒，如确认无血液或肠内容

实验动物学实验报告(大鼠,小鼠),小鼠的基本实验操作,大鼠的基本实验操作

实验一小鼠的基本实验操作一、实验目的:通过实际操作，掌握小鼠的一般操作方法，包括小鼠的抓拿、标记、给药（灌胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾静脉注射）、取血（眶后静脉丛，摘眼球）、脊椎脱臼法处死、大体解剖。二、实验动物：昆明小鼠2只（1雌1雄）三、实验步骤 1、抓取和固定，标记 2、去毛 3、给药：消化道、腹腔注射、尾静脉注射 4、取血：眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法 5、麻醉：氯胺酮腹腔麻醉 6、处死：脊椎脱臼法 7、解剖：雄性：睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺（在膀胱下方，胶质状，透明）雌性：双角子宫、卵巢肾上腺、胆囊、甲状腺、胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏、甲状腺四、实验结果 1、抓取和固定标记：抓取：抓小鼠的尾根部固定：抓住小鼠的尾根部，让小鼠在粗糙平面上爬行，后拉尾跟部，右手的拇指和食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤，小指和无名指将尾巴固定在手掌面。并标记： 2、灌胃法：左手抓取小鼠固定后，右手持特制灌胃针，沿一侧口角进针，紧贴咽后壁，头后仰以便伸直消化道，进针2/3后灌生理盐水0.5ml 3、注射给药：腹腔注射：从下腹部的两侧进针，进针时针与腹部成45°。进针后稍微晃动针，如无粘滞感则可注射药物尾静脉注射：一人固定小鼠，另一人用左手中指和拇指将尾拉直，食指托住尾部，在尾动脉位置进针注射0.5ml生理盐水。注射完毕拔出针头，用无菌棉球压迫止血。 4、采血从眼角内侧0.5cm处进针眼球摘除法：左手抓取用固定小鼠，右手持弯头镊在眼球根部将眼球摘除，头朝下，眼眶内血迅速流出。 5、麻醉： 0.5%氯胺酮腹腔麻醉：本小鼠重22g，按100mg/kg的药量给药，2分钟麻醉成功 6、处死：脊椎脱臼法：按住头部，将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死 7、解剖：雄性：寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺雌性：双角子宫、卵巢 3.7.2 肾上腺：米粒大小胰腺：位于胃下方，类似于脂肪组织，浑浊状 3.7.4 ，胆囊：芝麻大小，浅绿色，

小鼠腹腔注射LD50的测定标准操作规程

小鼠腹腔注射LD50的测定标准操作规程(SOP) 【目的】通过实验学习测定药物LD50的方法、步骤及计算过程，观察受试药品一次给予动物后所产生的急性毒性反应和死亡情况。【原理】药物给药剂量与动物死亡率间呈正态分布，以对数剂量为横坐标、死亡率为纵坐标作图，可得到一对称S型曲线，其两端较平坦，中间较陡，说明两端处剂量稍有变化时死亡率的改变不易表现出来，在50%死亡率处斜率最大，该处剂量稍有变动时，其死亡率变动最明显，即最灵敏，在技术上也最容易测得准确，所以人们常选用LD50值作为反映药物的指标。若将死亡率换算成机率单位，则对数剂量与机率单位呈直线关系，用数学方法可拟合其回归方程式，可精确地计算LD50及引起任何死亡率的剂量及相关数据。【器材】注射器（1ml）、天平、小鼠笼、苦味酸。【药品】盐酸普鲁卡因【动物】18～22g健康小鼠50只(正式试验)，雌雄各半（雌鼠应无孕），实验前禁食12h，不禁水。【方法】 1.预试验目的是寻找引起0%和100%动物死亡的剂量范围，以便正式实验时确定各组剂量。一般是取小鼠9～12只，分3～4组，选择组距较大的一系列剂量腹腔注射给药，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0%及100%死亡率，至少应找出引起20%～80%死亡率的剂量范围，以保证量-效曲线跨越足够的范围。普鲁卡因小鼠腹腔注射（ip）引起0%和100%动物死亡的剂量范围的参考值为：最小剂量（Dmin）121.3mg/kg，最大剂量（Dmax）290mg/kg。 2.剂量计算及药液配制 (1)剂量计算根据预试结果找出Dmax及Dmin，设正式实验的剂量组数为n，剂量公比为r，则各组剂量为Dmax·rk-1，k为第几组，一般选用4～5组动物，r为0.6～0.85为宜。例已知普鲁卡因Dmin=121.3mg/kg，Dmax=290mg/kg 当n=6时，r=0.84, 各组剂量为： 1. 290 mg/kg 2. 290 mg/kg×0.84 = 24 3.6mg/kg 3. 290 mg/kg×0.842= 20 4.6mg/kg