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实验三高效苯酚降解菌的筛选及其性能测定
一、实验目的
1、掌握微生物分离纯化的基本操作；
2、掌握用选择性培养基从环境中分离苯酚降解菌的原理和方法；
3、掌握微生物对酚降解能力的测定方法；
4、掌握4-氨基安替比林法测定苯酚含量的方法。
二、实验原理
在工业废水的生物处理中，对污染成分单一的有毒废水，可以选育特定的高效菌株进行处理。这些高效菌株以有机污染物作为其生长所需的能源、碳源或氮源，从而使有机污染物得以降解，具有处理效率高、耐受毒性强等优点。
苯酚是一种在自然条件下难降解的有机物，其长期残留于空气、水体、土壤中，会造成严重的环境污染，对人体、动物有较高毒性。本实验通过筛选苯酚降
解菌来处理含酚废水，将苯酚降解为为二氧化碳和水，消除对环境的污染。
+ COOHCH2CH2COOH CH3COOH
C O2+H2O
从环境中采样后，在以苯酚为唯一碳源的培养基中，经富集培养、分离纯化、降解实验和性能测定，可筛选出高效酚降解菌。
三、实验器材与试剂
1、样品
实验土样采自校园污水处理厂。
2、器材
恒温培养箱、恒温摇床、分光光度计、比色皿、试管、250mL三角瓶、100mL 容量瓶、培养皿、涂布玻棒、量筒、天平、灭菌锅、酒精灯、接种环、棉花、棉
线、牛皮纸、pH 试纸。
3、试剂
葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、苯酚、四硼酸钠（Na2B4O7）、4-氨基安替比林、过硫酸铵（（NH4）2S2O8）、K2HPO4、KH2PO4、MgSO4、琼脂。
苯酚标准溶液：称取分析纯苯酚 1.0g，溶于蒸馏水中，稀释至1000mL，摇
匀。此溶液溶度为1000mg/L。测定标准曲线时将苯酚浓度稀释至100mg/L。
Na2B4O7 饱和溶液：称取N a2B4O7 40g，溶于1L 蒸馏水中，冷却后使用，此
溶液的pH值为10.1。
3% 4-氨基安替比林溶液：称取分析纯4-氨基安替比林3g，溶于蒸馏水中，
并稀释至100mL，置于棕色瓶中，冰箱保存，可用两周。
2% （NH4）2S2O8 溶液：称取分析出（NH4）2S2O8 2g，溶于蒸馏水中，并稀
释至100mL，置于棕色瓶中，冰箱保存，可用两周。
4、培养基
富集培养基：蛋白胨0.5g，K2HPO4 0.1g，MgSO4 0.05g，水1000mL，调节pH 7.2-7.4，高压蒸汽灭菌，冷却后视需要添加适量的苯酚。
基础培养基：K2HPO4 0.6g，KH2PO4 0.4g，NH4NO3 0.5g，MgSO4 0.2g，CaC2l 0.025g，水1000mL，调节pH 7.0-7.5，高压蒸汽灭菌，冷却后视需要添加适量的苯酚。
四、实验步骤
（一）富集培养和驯化
采集活性污泥或土样，接种于装有100mL 富集培养基和玻璃珠并加有适量
苯酚（50mg/L）的三角瓶中，30℃振荡培养。待菌生长后，用无菌移液管吸取
1mL 转至另一个装有100mL 富集培养基和玻璃珠并加有适量苯酚的三角瓶中，
如此连续转接2-3 次，每次所加的苯酚量适当增加，最后可得酚降解菌占绝对优
势的混合培养物。
（二）平板分离和纯化
1、用无菌移液管吸取经富集培养的混合液10mL，注入90mL无菌水中，充
分混匀，并继续稀释到适当浓度。
2、取适当浓度的稀释菌液，加一滴于固体平板（由富集培养基加入2%的琼
脂组成，倒平板时添加适量的苯酚，浓度达到200 mg/L。）中央，用无菌玻璃涂
棒把滴加在平板上的菌液涂平，盖好皿盖，每个稀释度做2-3 个重复。
3、室温放置一段时间，待接种菌液被培养基吸收后，倒置于30℃恒温箱中
培养2-3d。
4、挑选不同菌落形态，在含适量苯酚的固体平板上划线纯化。平板倒置于
30℃恒温箱中培养2-3d。
（三）转接斜面
将纯化后的单菌落转接至补加适量酚的试管斜面，30℃恒温箱中培养2-3d。（四）降解实验
用接种环取斜面菌苔一环，接种于100mL基础培养基中，添加适量的苯酚，30℃震荡培养2-3d。
（五）酚含量的测定
1、标准曲线的绘制：取100mL容量瓶7 只，分别加入100mg/L 苯酚标准溶
液0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，于每只容量瓶中加入Na2B4O7 饱和溶液10mL，3% 4-氨基安替比林溶液1mL，再加入Na2B4O7 和溶液10mL，2%（NH4）
S2O8 1mL，然后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。放置10min 后将溶液转至比色皿中，
2
在560nm 处测定吸光度，根据吸光度和苯酚的量绘制标准曲线。
2、培养液中苯酚含量的测定：取经降解的培养液30 mL，离心，取上清液
10 mL于100 mL容量瓶中，加入N a2B4O7 饱和溶液10mL，3% 4-氨基安替比林溶
液1 mL，再加入N a2B4O7 饱和溶液10mL，2%（NH4）2S2O8 1mL，然后用蒸馏水
稀释至刻度，摇匀。放置10min 后将溶液转至比色皿中，在560nm 处测定吸光度，从标准曲线上查得苯酚的量。
（六）、计算
C（苯酚，mg/L）=查得的苯酚毫克数/10×1000
苯酚脱除率=（C1-C2）/C1×100%
式中：
C1----降解前溶液中的苯酚浓度；
C2----降解后溶液中的苯酚浓度；
五、注意事项
1、各种培养基的配制应严格按配方的要求完成，尤其是苯酚的称量和pH；
2、涂布平板的菌悬液只作适度稀释，菌浓度不必过低；
3、涂布平板的菌悬液不要过多或过少，0.2mL为宜；
4、平板上挑取菌落时，要挑取单菌落；
5、单碳源实验的培养基和培养条件一定要严格把握。
六、思考题
1、如何从环境中分离高效苯酚降解菌株？
七、参考文献
1、张清敏. 环境生物学实验技术，化学工业出版社，2005
2、王兰. 环境微生物学实验方法与技术，化学工业出版社，2009
3、刘娜等. 环境生物技术实验，清华大学出版社，2012
4、孔志明等. 现代环境生物学实验技术与方法，2005
土样中淀粉降解细菌的筛选综述
土样中淀粉降解细菌的筛选（设计性实验） 一、实验目的 1.掌握土壤样品中微生物菌种分离和筛选技术的实验设计方案。 2.掌握富集、平板稀释涂布法、分离筛选产淀粉酶菌株的基本原理。 3.初步掌握从土壤样品中分离筛选产淀粉酶菌株的基本技术。 二、实验原理 在自然条件下，产淀粉酶的细菌和其它各种细菌混杂生活在土壤中，要想分离出来必须建立相应的“筛子”。淀粉酶能使淀粉分解成葡萄糖，而淀粉与碘液发生反应形成蓝色化合物。葡萄糖不与碘液发生反应形成蓝色化合物，结果可使淀粉酶产生菌周围形成透明圈，从而筛选出淀粉酶产生菌。 微生物酶产生菌的筛选具体分为增殖培养、初筛和复筛过程。增殖培养是通过控制培养基的营养成分和/或培养条件使样品中的目的菌得以大量繁殖,而非目的菌的生长受到抑制或繁殖减缓,从而提高样品中目的菌的数量和比例。初筛是对所得的纯种进行检测。由于淀粉酶是胞外酶，在分离培养基中加适量可溶淀粉通过平板透明圈法来检测淀粉酶产生菌。筛选透明圈比值大的菌株接种到培养基中进行培养，再进行复筛。复筛的目的是淘汰底产菌。 三、实验材料 1、培养基：蛋白胨， NaCl，可溶性淀粉，琼脂，蒸馏水。 2、玻璃仪器: 培养皿10副，试管10支，三角瓶 6个，移液管 10支（1mL7支,10mL 3支），100mL量筒2个,玻璃棒，玻璃珠。 3、其它：酒精灯，硅胶塞,包装绳，包装纸,PH试纸，接种环，电子天平，称量纸,高压蒸汽灭菌锅，摇床，角匙，记号笔等。 四、方法与步骤 1、土壤样品: 食品厂、粮食加工厂、饭店等日常接触淀粉较多的肥沃土壤。 2、培养基的制备 (1)液体培养基：称取蛋白胨1.0 g、NaCl 0.5 g、可溶性淀粉0.2 g溶于装有100 mL蒸馏水的三角瓶中，调pH为7.2至7.4，分装为2个三角瓶,50mL/个,包扎，121℃高压蒸汽灭菌20分钟。 (2)固体淀粉培养基：称取蛋白胨1.5g， NaCl 0.75g，可溶性淀粉0.3g ，溶于
石油降解菌的分离
从环境样品中分离筛选石油 降解菌的方案
引言 随着经济技术的迅速发展，石油日渐成为我过的主要能源，且需求量日益增大。研究表明，石油生产和运输环节会对土壤造成严重污染，且污染面积不断扩大。目前，我国石油行业每年产生的含油污泥多大八十万吨。由于石油的粘度大、粘滞性强，会再短时间内形成小范围的高浓度污染，长期的石油污染还会影响土壤的通透性，减少土壤肥力，阻碍植物生长。同时，石油中所含的多环芳香烃具有“三致”效应，一些挥发组分能引起人体麻醉、窒息和化学性肺炎等疾病。因此，石油污染对土壤生态系统的平衡和人体健康都有很大的危害。 目前，针对石油污染治理的方法主要包括：物理方法、化学方法以及生物修复法，但物理方法修复费用较高，耗材较多：化学方法会使用大量化学淋洗剂，很容易造成二次污染。相较而言，微生物修复技术由于生产费用低、不产生二次污染等特点而被视为一项最具有应用前景的修复技术。而且随着分子生物学的发展，无论是DNA文库的建立，还是多态性分析方法的进步，都为污染物的生物修复提供了全新的技术支持。既然生物修复法有诸多优点，那么就应该充分发挥其特性。本文则是着眼于环境样品，分离筛选其中的石油降解菌，以扩大培养进行更大规模的石油降解。 摘要 在长期被石油污染的土壤中，微生物可逐渐改变自身的代谢条件以适应环境。即以石油烃为碳源进行生长、繁殖，同时将石油烃降解。因此在这种土壤中存在着可降解石油烃的微生物，但石油烃降解菌的筛选、分离是生物法处理石油污染的关键。从这个角度考虑，以长期石油污染的土壤中微生物为菌源，从中筛选、分离出高效的石油烃降解菌。要降解哪里的石油就用哪里的土壤培养石油降解菌。目前，国内对极端条件下石油降解微生物研究较少，尤其是对低温、耐盐的石油降解菌，中国北方的大部分湿地，盐碱程度比较高，成年气温较低。无论是来源于海上还是来源于石油化工的污染都比较严重。本文针对大连开发区因石油泄露而被污染的白石湾，就地选取材料进行石油降解菌的筛选以及分离研究。
卡拉胶降解菌的筛选
卡拉胶降解菌的筛选 摘要：利用梯度稀释平板涂布的方法将经过富集的卡拉胶降解菌样品在涂布于 平板上，以卡拉胶为唯一碳源，在适宜的环境下培养，得到单个菌落，达到卡 拉胶降解菌的初步筛选的目的。 关键字：卡拉胶降解菌、初筛 前言：卡拉胶(Carrageenan)又名角叉菜胶、鹿角藻胶，是从红藻中提取的一种高分子亲水性多糖。根据其乳糖残基上硫酸酯基团的不同，可分为K一型、c-型、A一型、弘一型等7种最小重复结构单位。A一卡拉胶是一种高硫酸酯化的天然多糖资源，其降解产物A一卡拉胶寡糖的活性研究已得到充分的开展，如抗凝血、抗病毒、抗肿瘤等[1]。国内外的研究者从提取、结构、活性等方面对卡拉胶进 行了研究[2]。而不同的卡拉胶具有不同的凝固性和表面活性，可用于凝固剂黏 合剂、稳定剂、乳化剂、悬浮剂等，广泛用于食品工业。[3] 正文： 一．器材：试管16支，玻璃涂棒一根，1ml移液管3支，酒精灯一个，培养皿24个，试管架，1个锥形瓶，烘箱，高压杀菌锅 二．试剂：K2HPO4·3H2O，MgSO4·7H2O,FePO4·4H2O,CaCl2, H2O，NaNO3,NaCl卡拉胶，海水 三．步骤： 1.卡拉胶降解菌的初筛： （1）无机盐母液配制： K2HPO4·3H2O: 2.2g , MgSO4·7H2O: 1.25g ,FePO4·4H2O: 0.025 g , CaCl2: 0.25g 然后溶于水中，共配制250ml; [4] （2）培养基溶液配：NaNO3：0.7g , NaCl：5.25g ，卡拉胶：4.2g ， 溶于海水中，共配制350ml，并添加无机盐母液：35ml[5]
力学性能培训资料
第一节 拉伸试验 拉伸试验是在单向应力状态下,温度恒定、以及静载作用下进行的. 拉伸试验是材料力学性能测试中最常用的试验方法之一,拉伸试验简单易行, 试样制备简单, 测量数据精确,能够清楚地反映出材料受力后所发生的弹性、塑性与断裂三个变形阶段的基本特性,通过拉伸试验可以得到材料的基本力学性能指标,如弹性模量E、泊松比μ、规定塑性延伸强度R P、屈服强度、包括上屈服强度R e H和下屈服强度R e L、抗拉强度R m、断后伸长率A 、断面收缩率Z 、应变硬化指数(n值)和塑性应变比(r值)等。 拉伸试验所得到的上述强度指标和塑性指标,对于工程设计及合理选材,优选工艺、研制新材料、合理使用现有材料和改善其力学性能、采购、验收,质量控制、安全评估都有着很重要的应用价值和参考价值, 因此，很多产品都要测定材料的拉伸性能，并直接以拉伸试验的结果为依据来判定合格与否。 另外，拉伸试验可以揭示材料的基本力学行为规律，也是研究材料力学性能的基本试验方法。因此,各个国家和国际标准化组织都制定了完善的拉伸试验标准,将拉伸试验列为力学试验中最基本、最重要的试验项目。 我国2009年颁布了国家标准GB/T228.1-2009《金属材料 拉伸试验第1部分：室温试验方法》,该标准等效采用Metallic materials-Tensile testing-Method of test at ambient temperature (ISO/FDIS6892-1:2008,MOD )国际标准,与拉伸试验有关的标准还有: GB/T22315-2008金属材料弹性模量试验方法 GB/T4338-2006金属材料 高温拉伸试验方法 GB/T13239-2006金属材料 低温拉伸试验方法 GB/T5027-2007金属薄板和薄带塑性应变比(r值)试验方法 GB/T5028-2009金属薄板和薄带拉伸应变硬化指数(n值)试验方法 GB/T8170-2008数字修约规则 GB/T16865-1997变形铝、镁及其合金加工制品拉伸试验用试样 GB/T10573-1989有色金属细丝拉伸试验方法 GB/T228.4-2009金属材料 拉伸试验第4部分：液氦试验方法 3.1.1 拉伸试验的范围、术语及定义 GB/T228.1-2009《金属材料拉伸试验室温试验方法》适用于金属材料室温拉伸性能的测定。但对于小横截面尺寸的金属产品，例如金属箔、超细丝和毛细管等的拉伸试验需要相关方的协议。GB/T228.1-2009《金属材料拉伸试验第1部分：室温试验方法》采用下列术语及定义：
石油烃类的微生物降解研究
石油烃类的微生物降解研究 石油作为重要能源之一已被世界各国广泛使用，随之而来的石油烃污染已经对人类生存的土壤及水体环境造成了严重的危害，微生物降解是一种处理石油烃污染的理想方法。综述了降解菌种类和不同烃类的微生物代谢途径，分析了包括温度、营养物、氧和pH值等环境因素对石油烃降解的影响，为进一步的研究应用提供参考依据。 随着工业和经济的发展，人类对能源的需求日渐增多，促进了石油工业的飞速发展；在石油生产、贮运、炼制加工及使用过程中，不可避免地会有石油烃类的溢出和排放，造成土壤及水体的石油污染。据统计全球每年倾注到海洋的石油总量在200~1000万t之间。辽宁省环境中心监测站的化验结果显示，在辽河油田的重度污染区内，土壤中的含油量已达到10 000 mg／kg以上，是临界值(200 mg／kg)的50多倍，严重影响了油田附近的生态环境。 石油烃类物质引起的环境污染越来越引起人们的关注。利用物理、化学方法处理石油烃可以得到较受到了限制翻。生物处理方法是近年来发展起来的，具有处理效果好、费用低、对环境影响小、无二次污染及应用范围广等优点，是迄今为止处理石油烃污染比较好的一种方法。 1.降解石油烃类的微生物种类 国外在20世纪40年代就开展了细菌降解石油烃的研究，我国这方面的研究始于20世纪70年代末期。研究表明，在土壤和水体环境中存在着大量能够降解石油烃的微生物，主要是细菌和真菌；细菌在海洋生态系统的石油烃类降解中占主导地位，而真菌则是淡水和陆地生态系统中更为重要的修复因子。石油烃降解菌和藻类见表1。
大量研究表明，当菌群处于石油污染环境中时，利用烃类化合物的微生 物数量急剧增长，尤其是含降解质粒的微生物。Atlas报道在正常环境下降解菌一般只占微生物群落的1％，而当环境受到石油污染时，降解菌比例可提高到10％。含质粒细菌在石油烃污染环境中出现的频率和数量LL-t~污染环境高，说明质粒在石油烃的降解中可能起着重要作用。降解质粒的存在为降解工程 菌的构建提供了可能。 2.石油烃类的微生物代谢途径 2.1 直链烷烃 通常认为饱和烃在微生物作用下，直链烷烃首先被氧化成醇，醇在脱氢 酶的作用下被氧化为相应的醛，然后通过醛脱氢酶的作用氧化成脂肪酸；氧 化途径有单末端氧化、双末端氧化和次末端氧化[7]。在转化为相应的脂肪酸后，一种转化形式为直接经历随后的／3一氧化序列，即形成羧基并脱落2个 碳原子；另一种转化形式为脂肪酸先经历60一羟基化形成∞一羟基脂肪酸， 然后在非专一羟基酶的参与下被氧化为二羧基酸，最后再经历一氧化序列
实验三高效苯酚降解菌的筛选及其性能测定课件.doc
实验三高效苯酚降解菌的筛选及其性能测定 一、实验目的 1、掌握微生物分离纯化的基本操作； 2、掌握用选择性培养基从环境中分离苯酚降解菌的原理和方法； 3、掌握微生物对酚降解能力的测定方法； 4、掌握4-氨基安替比林法测定苯酚含量的方法。 二、实验原理 在工业废水的生物处理中，对污染成分单一的有毒废水，可以选育特定的高效菌株进行处理。这些高效菌株以有机污染物作为其生长所需的能源、碳源或氮源，从而使有机污染物得以降解，具有处理效率高、耐受毒性强等优点。 苯酚是一种在自然条件下难降解的有机物，其长期残留于空气、水体、土壤中，会造成严重的环境污染，对人体、动物有较高毒性。本实验通过筛选苯酚降 解菌来处理含酚废水，将苯酚降解为为二氧化碳和水，消除对环境的污染。 + COOHCH2CH2COOH CH3COOH C O2+H2O 从环境中采样后，在以苯酚为唯一碳源的培养基中，经富集培养、分离纯化、降解实验和性能测定，可筛选出高效酚降解菌。 三、实验器材与试剂 1、样品 实验土样采自校园污水处理厂。 2、器材 恒温培养箱、恒温摇床、分光光度计、比色皿、试管、250mL三角瓶、100mL 容量瓶、培养皿、涂布玻棒、量筒、天平、灭菌锅、酒精灯、接种环、棉花、棉 线、牛皮纸、pH 试纸。 3、试剂 葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、苯酚、四硼酸钠（Na2B4O7）、4-氨基安替比林、过硫酸铵（（NH4）2S2O8）、K2HPO4、KH2PO4、MgSO4、琼脂。
苯酚标准溶液：称取分析纯苯酚 1.0g，溶于蒸馏水中，稀释至1000mL，摇 匀。此溶液溶度为1000mg/L。测定标准曲线时将苯酚浓度稀释至100mg/L。 Na2B4O7 饱和溶液：称取N a2B4O7 40g，溶于1L 蒸馏水中，冷却后使用，此 溶液的pH值为10.1。 3% 4-氨基安替比林溶液：称取分析纯4-氨基安替比林3g，溶于蒸馏水中， 并稀释至100mL，置于棕色瓶中，冰箱保存，可用两周。 2% （NH4）2S2O8 溶液：称取分析出（NH4）2S2O8 2g，溶于蒸馏水中，并稀 释至100mL，置于棕色瓶中，冰箱保存，可用两周。 4、培养基 富集培养基：蛋白胨0.5g，K2HPO4 0.1g，MgSO4 0.05g，水1000mL，调节pH 7.2-7.4，高压蒸汽灭菌，冷却后视需要添加适量的苯酚。 基础培养基：K2HPO4 0.6g，KH2PO4 0.4g，NH4NO3 0.5g，MgSO4 0.2g，CaC2l 0.025g，水1000mL，调节pH 7.0-7.5，高压蒸汽灭菌，冷却后视需要添加适量的苯酚。 四、实验步骤 （一）富集培养和驯化 采集活性污泥或土样，接种于装有100mL 富集培养基和玻璃珠并加有适量 苯酚（50mg/L）的三角瓶中，30℃振荡培养。待菌生长后，用无菌移液管吸取 1mL 转至另一个装有100mL 富集培养基和玻璃珠并加有适量苯酚的三角瓶中， 如此连续转接2-3 次，每次所加的苯酚量适当增加，最后可得酚降解菌占绝对优 势的混合培养物。 （二）平板分离和纯化 1、用无菌移液管吸取经富集培养的混合液10mL，注入90mL无菌水中，充 分混匀，并继续稀释到适当浓度。 2、取适当浓度的稀释菌液，加一滴于固体平板（由富集培养基加入2%的琼 脂组成，倒平板时添加适量的苯酚，浓度达到200 mg/L。）中央，用无菌玻璃涂 棒把滴加在平板上的菌液涂平，盖好皿盖，每个稀释度做2-3 个重复。 3、室温放置一段时间，待接种菌液被培养基吸收后，倒置于30℃恒温箱中 培养2-3d。 4、挑选不同菌落形态，在含适量苯酚的固体平板上划线纯化。平板倒置于
高效石油降解菌的筛选
海洋中高效石油降解菌的筛选 楼浩 04016158
摘要 本研究利用原油为唯一碳源，采用富集培养分离的方法从象山港的表层海水和底泥混合物中筛选到两株石油降解菌株F3和F4。通过检测，两种菌株在油浓度为2000mg·L-1、温度为28℃的条件下培养七天后，降解率分别达到了48.1%和51.3%，与目前已筛选出的海洋石油降解菌相比较，F3、F4均属于降解率较高的菌株。本研究还对营养盐、原油浓度等影响F3、F4菌株生长和降解率的相关因素进行了初步探讨。结果表明：①氮、磷营养盐在较大程度上限制了F3、F4菌株对原油的降解率，是主要的限制因子。在氮磷浓度≥1.0m g·L-1时，F3菌株才能达到最大的降解效率48.1%，在氮磷浓度≥1.5m g·L-1时，F4菌株才能达到最大的降解效率57.3%。②F4菌株的降解率随原油浓度的降低而增加。在原油浓度为400mg·L-1时，F3、F4菌株的降解率分别达到57.6%和61.5%，而在油浓度为4000 mg·L-1时，F3、F4菌株的降解率仅为27.5%、11.2%，相比之下F3菌株对原油浓度的耐受能力更强。 关键词：石油降解菌；筛选；原油降解率；氮磷营养盐；原油浓度
ABSTRACT The use of oil as the sole carbon source, using enrichment culture method from the surface water and sediment which in the Xiangshan Port isolated two strains of oil degradation, Named as F3 and F4. To detect these two strains in the oil concentration was 2000mg/L, the temperature is 28℃ training seven days ,The degradation rate respectively reached 48.1% and 51.3%, compared with that which has been selected marine oil degrading bacteria, F3, F4 belong to the higher efficiency degradation of crude oil strain. The issue also conducted a preliminary test about nutrients, oil concentration and so on which Impact F3, F4 strain growth and the degradation efficiency. The results showed that: ①nitrogen and phosphorus nutrient limitation to a greater extent on the F3, F4 strains degradation efficiency , is the main limiting factor. In the concentration of nitrogen and phosphorus ≥ 1.0mg/L, F3 strain to achieve normal degradation efficiency 48.1%, the concentr ation of nitrogen and phosphorus in ≥ 1.5 mg/L, F4 strains to reach the degradation efficiency is 57.3%. ② the degradation of the F4 strain increasing when the concentration of oil reduced. in the concentration of 400 mg/L, The degradation rate of F3, F4 strains respectively reached 57.6% and 61.5%, the concentration of oil in the 4000mg/L, The degradation rate F3, F4 strains of was only 27.5%, 11.2%, but compared with F4, F3 strains better adapted to the higher concentration of oil. Key Words: Petroleum Degrading strains; Screening;Degradation of oil;nutrients of nitrogen and phosphorus; Oil concentration
石油烃降解菌的研究【文献综述】
文献综述 食品科学与工程 石油烃降解菌的研究 [摘要]石油烃降解菌，是一种能在油水表面上生长而降解石油的微生物，因土壤和近海中含有丰富的N、P等营养原料，所以在近海和土壤中的石油烃降解菌的密集度较高，然而，由于远海中会缺乏N、P等营养物质，所以石油降解菌的繁殖受到一定的制约。当海水一旦受到石油的污染后，降解菌就不能很快消除污染物，所以培养适应能力和降解率高的石油降解菌是解决石油污染的主要方法。 [关键词]石油污染；石油烃降解菌；石油烃（TPH），微生物 作为现代工业的关键燃料和原料，石油及其加工品广泛应用在生产和生活的各个领域，包括工业、军事、交通等各行业，但是随着石油工业的快速发展,石油同时也成为海洋环境的主要污染物.据初步统计,由于各种原因,全世界每年有约1.0×107t的石油进入海洋环境中,我国每年排入海洋的石油达1.15×105t[1]。 由于工艺水平的限制和处理技术的落后，大量含石油类的废水、废渣不可避免的被排入到生态环境中，严重了影响整个生态系统，尤其是土壤和海洋系统。虽然石油在人类社会发展提供有力的能源来源，但伴随带来的环境污染问题也日益加剧。土壤，是人类赖以生存的重要自然资源之一，要对受石油污染土壤进行完整的治理，并使它在短时间内达到可耕作的标准水平，对于保护生态环境、实现农业和工业的可持续发展具有非常重要的意义。在污染土壤的各种治理的方法中，微生物修复法对环境破坏性小而且消费低而受到人们的重视，近年来的发展尤为迅速，在一定程度上为污染土壤的修复带来技术上的更新，也为解决石油污染问题带来新的希冀。但是，从污染性质来看，即使油井关闭后，其对环境的影响仍会持续相当长的时间[2]。这些都引起了社会各界的普遍关注,近年来，从中央到地方各大主要媒体对这一问题均作了大量专题报道[3]。 一、土壤石油污染的来源 石油污染,一般指原油的初级加工产品(包括汽油、柴油等)以及各类石油的分解产物所造成的污染。在石油的开采、加工和使用的过程中，造成的石油溢出和泄漏，对环境（空气、土壤、海洋等）产生极大的负面影响。而土壤是作为物质流动和能量循环的重要环境，常常是污染物迁移、停留和积累的最终承受者。 石油污染物主要是通过五种方式进入到土壤中：⑴原油的泄漏和溢油意外引起的落地原油污染；⑵含油的矿渣、污泥和废物的堆放，导致石油向土壤渗透并向四周扩散；⑶使用含油污水灌溉农田；⑷汽车尾气的排放所产生的气态石油类污染物渗入到土壤中；⑸药剂污染，即作为各种杀虫剂、防腐剂的溶剂和乳化剂等的石油类物质随药剂使用而进入到土壤中。在这些因素中，前三个因素是引起土壤石油污染最主要的原因，造成污染的面积
微生物对石油烃的降解机理研究
云南化工Yunnan Chemical Technology Sep.2018 Vol.45，No.9 2018年9月第45卷第9期 石油是一种重要的能源，可以说是现代经济的血液。日常生活、工业生产、航天军工都需要石油作为能源和原料，是国家生存和社会发展不可或缺的战略资源。但是，与此同时石油在开采、运输、储存、加工和利用过程中的各种泄漏事故对环境造成的污染和破坏也是不可估量的，其对人类和其他生物的生存和发展也造成一定的威胁，并已成为全球范围内亟待解决的重要问题。了解石油烃污染物在自然界的生物降解转化规律，研究石油烃污染物微生物降解的技术和方法，培养可高效降解石油烃的工程菌，消除和减少石油烃在环境中的滞留，将有利于维护和创造高质量的人类生存环境。 1 石油烃降解菌的降解机理 微生物对石油中不同烃类化合物的代谢途径和机理是不同的。饱和烃包括正构烷烃、支链烷烃和环烷烃。通常认为，在微生物作用下，直链烷烃首先被氧化成醇，源于烷烃的醇在醇脱氢酶的作用下被氧化为相应的醛，醛则通过醛脱氢酶的作用氧化成脂肪酸。相同条件下，一般微生物对不同种类石油烃降解的倾向先后顺序是不同的。一般而言，石油烃被微生物降解的先后规律为：直链烷烃>支链烷烃>环烷烃>多环芳烃>杂环芳烃。在某石油烃降解菌修复不同碳链石油烃污染的研究中得出结论，该菌属对短链石油烃的分解率相对较高，而对芳香烃和润滑油组分的降解率较短链石油烃低。一般微生物降解正烷烃由氧化酶酶促进行。正烷烃第一步氧化为醇后，醇氧化成醛，醛再转化为相应脂肪酸，脂肪酸经 β-氧化为乙酰辅酶A，乙酰辅酶A进入三羧酸循环，分解成CO2和H2O，或进入其他生化过程。另外，链状烷烃可经脱氢步骤转变为烯烃，烯经氧化成为醇，然后醇可转化为醛，最后醛变为脂肪酸；链状烷烃还可通过直接氧化成烷基过氧化氢，然后经脂肪酸途径进行降解。有的可通过亚末端氧化成仲醇，再变成伯醇或脂肪酸进行氧化分解。还有些微生物可将烯烃变为不饱和脂肪酸，通过双键位移或甲基化等，变为支链脂肪酸，再进行降解。 2 石油烃降解菌的种类 2.1 普通石油烃降解菌 在受石油污染的土壤和水环境中存在许多能降解石油烃的微生物，细菌、放线菌、真菌、酵母、霉菌和藻类中均有能降解石油烃的微生物，据研究表明目前发现100余属、200多种石油烃降解微生物。不同种类的微生物对石油烃的降解能力不同，通常细菌比真菌、放线菌对原油的降解能力强。细菌中降解石油烃的主要有无色杆菌属、假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、芽孢杆菌属、诺卡氏菌属以及微球菌属等。 2.2 特殊石油烃降解菌 2.2.1 低温石油烃降解菌 低温微生物在地球上广泛存在，一般分布于南北极、海洋深底、高原冰川以及冻土地区等低温环境中。目前发现的低温微生物种类繁多，通常为真细菌、酵母菌、蓝细菌、单细胞藻类等，这些微生物正逐渐引起科学家的广泛重视[1]。随着石油污染问题日益突出和国内外对低温石油烃降解菌研究的深入，低温石油烃降解菌修复 doi：10.3969/j.issn.1004-275X.2018.09.081 微生物对石油烃的降解机理研究 李 洲 （西安石油大学，陕西 西安 710065） 摘 要：随着工业和经济的发展，环境问题成为人们普遍关注的焦点，石油污染成了不可忽视的问题。微生物修复作为一种新型环保的生物修复技术，已成为石油污染生物修复的核心技术。对石油降解微生物的种类即细菌、蓝藻、真菌以及藻类进行了总结，对微生物对石油烃的降解途径与降解机理进行了综述。 关键词：微生物；石油烃；降解机理 中图分类号：X74 文献标识码：A 文章编号：1004-275X（2018）09-179-02 Study on the mechanism of microbial degradation of petroleum hydrocarbons Li Zhou （Xi’an Petroleum University，Xi’an 710065，China） Abstract：With the development of industry and economy，environmental problems have become the focus of attention，and oil pollution has become a problem that can not be ignored.As a new environmental protection bioremediation technology，microbial remediation has become the core technology of bioremediation of petroleum pollution.The types of petroleum-degrading microorganisms such as bacteria，cyanobacteria，fungi and algae were summarized.The pathways and mechanisms of petroleum hydrocarbon degradation by microorganisms were reviewed. Key wordss：microorganism；petroleum hydrocarbon；degradation mechanism；research ·179·
铁路砼试验培训课件 (3)
混凝土工程 一、砼原材料主控项目 1、水泥进场时应对其品种、级别、包装或散装、出厂日期等进行检查，并应对其强度、安定性及其他必要的性能指标进行复验，其质量必须符合现行国家标准《硅酸盐水泥、普通硅酸盐水泥》等的规定。当在使用中对水泥质量有怀疑、应进行复验，并按复验结果使用。钢筋混凝土结构、预应力混凝土结构中，严禁使用含氯化物的水泥。 2、混凝土中掺用外加剂的质量及应用技术应符合现行国家标准《混凝土外加剂应用技术规范》 3、预应力混凝土结构中，严禁使用含氯化物的外加剂。钢筋混凝土结构中，当使用含氯化物的外加剂时，混凝土中氯化物的总含量应符合现行国家标准《混凝土质量控制标准》的规定。 4、混凝土中掺用矿物掺合料的质量应符合现行国家标准《用于水泥和混凝土中的粉煤灰》等的规定。矿物掺合料的掺量应通过试验确定。 5、普通混凝土所用的粗、细骨料的质量应符合国家现行标准《普通混凝土用碎石质量标准及检验方法》 混凝土中的粗骨料，其最大颗粒粒径不得超过构件截面最小尺寸的 1/4，且不得超过钢筋最小净距的3/4。 6、拌制混凝土宜采用饮用水；当采用其他水源时，水质应符合国家现行标准《混凝土拌合用水标准》的规定。 二、取样及技术要求 1、同厂家、同编号、同生产日期且连续检查的散装水泥达500t（袋装水泥200t）为一批，不足上述数量时也按一批计。检验项目：比表面积、凝结时间、安定性、 、碱含量等。 强度、烧失量、游离CaO,SO 3 1、连续进场的同料源、同品种、同规格的细骨料每400m3（或600t）为1批，不足上述数量时也按一批计。检验项目：筛分析、细度模数、含泥量、泥块含量、云母含量、有机物含量；
多环芳烃高效降解菌的筛选.
多环芳烃高效降解菌的筛选 2011-01-18 摘要：以多环芳烃芘和苯并(a)芘为供试物,对多株土著菌和引进菌同时进行筛选试验.结果表明,引进菌经过驯化后对芘和苯并(a)芘都具有一定的降解能力,降解率在30%～80%,通过SPSS数理统计分析软件对数据进行处理后得出,引进细菌B61、B67、M-B和引进真菌Y219、Y220、M-Y作为固定化包埋的`菌种;土著菌对芘和苯并(a)芘的降解率可达40%～95%,经过筛选后确定,土著细菌B02、B07、B09和土著真菌F02、F05、F06作为固定化包埋的菌种.通过试验对上述各菌进行了生长曲线的测定,细菌和酵母菌的对数生长期是5～20 h,真菌的对数生长期是10～55 h,这为固定化微生物提供了一定的前提条件.作者：王 新李培军巩宗强张辉 V.A.Ver khozina WANG Xin LI Pei-jun GONG Zong-qiang ZHANG Hui V.A.Ver khozina 作者单位：王新,WANG Xin(中国科学院沈阳应用生态研究所,辽宁,沈阳,110016;沈阳工业大学理学院,辽宁,沈阳,110023) 李培军,巩宗强,张辉,LI Pei-jun,GONG Zong-qiang,ZHANG Hui(中国科学院沈阳应用生态研究所,辽宁,沈阳,110016) V.A.Ver khozina,V.A.Ver khozina(俄罗斯科学院西伯利亚分院闽诺格拉多夫地质研究所,伊尔库茨克,664033) 期刊：农业环境科学学报 ISTICPKU Journal：JOURNAL OF AGRO-ENVIRONMENT SCIENCE 年，卷(期)：2007, 26(z1) 分类号：X172 关键词：土著菌引进菌筛选对数生长期
蒋勇 石油烃降解微生物研究进展
一前言 石油给人们带来巨大的利用价值和经济利益的同时,也对生态环境造成了巨大的威胁。在勘察、开采、运输以及储存过程中,油田周围大面积的受到严重污染。石油污染使得土壤理化性质发生改变,从而不利于农作物正常生长，石油类物质还通过地下水的污染以及污染的转移构成对人类生存环境多个层面上的不良胁迫。因此,治理石油污染具有重要意义。当今世界，治理石油污染具体措施中最安全、最环保、最经济的方法是生物修复技术，石油降解菌是一类具有分解矿化石油烃能力的微生物，在石油污染的生物修复中具有重要作用。本文就石油污染物生物降解方面的研究进行了综述及展望。
二本论 2．1 石油降解和菌的种类和分离 2．1．1石油降解和菌的种类 国外在20世纪40年代就开展了细菌降解油污的研究[1]，我国这方面的研究始于20世纪70年代末期[2]。已知降解石油的微生物共有70属200余种。细菌有28个属，霉菌30个属，酵母12个属。能够降解石油烃的细菌有假单胞菌属（Pseudomonas)、弧菌属（Vibrio）、不动杆菌属（Acinetobacter）、黄杆菌属（Flavobacterium）、气单胞菌属（Aeromonas）、无色杆菌属（Achromobacter）、产碱杆菌属（Alcaligenes）、肠杆菌科（Enterobacteriaceae)、棒杆菌属（Coryhebacterium）、节杆菌属（Arthrobacter）、芽孢杆菌属（Bacillus）、葡萄球菌属（Staphylococcus）、微球菌属（Micrococcus）、乳杆菌属（Lactobacillus）、诺卡氏菌属（Nocardia）等；酵母菌有假丝酵母属（Candida）、红酵母菌属（Rhodotorula）、毕赤氏酵母菌属（Pichia）等；霉菌有青霉属（Penicillium）、曲霉属（Apergillus）、镰孢霉属（Fusarium）等[3]。 2．1．2 石油降解和菌的分离 石油降解菌一般从受石油污染的土壤、水中进行分离并筛选，为了进一步的应用，还要进行驯化。根据研究目的与要求不同，在筛选时往往控制不同的条件从而得到不同功能的菌落。以烷烃为底物筛选出的菌落，对烷烃的去除效率会较高，由于烷烃相对于芳烃较易分解，且大部分的石油降解菌对烷烃的降解效果均较好，因此专门以烷烃为底物进行的研究不多见，郑金秀[4]以烷烃为底物培养出分属于不同菌属的菌落，其中不动细菌菌属的菌株降解率为69%，芽孢杆菌属的菌株降解率为71%，假单胞菌属的降解率可达73%；以环烷烃为底物，得到不动细菌菌属与芽孢杆菌属的菌株，石油降解率均为67%。两种底物研究降解时间均为48h。由于芳香烃及多环芳烃降解难度大，且其危害比较大，对降解芳烃的研究比较多。 2．2 石油降解菌的降解机理与影响因素 2．2．1石油降解菌的降解机理 微生物对石油的降解作用存在选择性,优先消耗碳链长度中等(C10—C24)的n-链烷烃类分子，其规律为:小于C10的直链烷烃>C10—C24或更长的直链烷烃>单环芳烃>环烷烃>多环芳烃,同种类型的烃类中分子量越大,降解越慢[5]。 通常认为饱和烃在微生物作用下，直链烷烃首先被氧化成醇，醇在脱氢酶的作用下被氧化为相应的醛，然后通过醛脱氢酶的作用氧化成脂肪酸；氧化途径有单末端氧化、双末
【开题报告】石油烃降解菌的筛选
开题报告 食品科学与工程 石油烃降解菌的筛选 一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义 目前，常有有关石油及其产品的微生物降解方面的研究报道，但对这些研究大多数以分离鉴定微生物种类为主，对混合菌株性能评价以及它们对高含油量的油泥降解研究很少。 作为现代社会的最主要动力燃料与化工原料，石油及其产品广泛应用于生产和生活的各个方面，包括工业、农业、军事、交通运输等各个行业，因此人们将石油称作“黑色的金子”。但是随着石油工业的发展，由于工艺水平和处理技术的限制，在许多环境特别是海洋环境中，石油污染已经成为一个普遍而严重的问题，石油的主要成分是烃类，在一个典型的石油样品中，含有的烃类可达200~300种之多，石油进入海洋后，石油中的一些成分可直接挥发而进入空气；一小部分海洋表面的石油受到紫外线作用可发生光化学分解，但速度极慢；而绝大部分石油要通过微生物的降解作用才得到净化。石油烃降解菌是一类能在油水界面上生长繁殖而降解石油的微生物，在近海、海湾等处，因海水中含有丰富的N、P等营养物质，石油降解菌的数量较多，然而，由于外洋海水中N、P等营养组织的缺乏，石油降解菌的繁殖受到制约，一旦污染，不容易很快消除，所以培养石油降解菌成为治理海上石油污染的主要方式。 而且在污染土壤的各种治理方法中，微生物修复由于具有费用低、处理效果好并且对环境破坏性小等诸多优点而受到人们的重视。所以筛选和培养石油烃降解菌对减轻石油污染是一个非常有意义的事情。 二、研究的基本内容，拟解决的主要问题： 1、降解石油烃的菌类哪些比较常见 2、石油烃降解菌降解石油的情况是怎样，会不会对环境产生二次污染 3、石油烃降解菌降解石油的能力会受环境的哪些因素影响 三、研究步骤、方法及措施： 1.用牛肉膏蛋白胨培养基进行菌种分离纯化与斜面保藏。
聚乙烯以及PAEs降解菌筛选方法
一、P AEs（邻苯二酸甲酯）降解菌的筛选 1.样品来源 南极样品，连云港海域水样泥样，最好为工业废水排污口附近海域水样。 2.特殊药品 PAEs是邻苯二甲酸与一些醇类形成的酯的统称。 其中DMP、DMI、DMT、MMI等较为常见[1]。根据情况选择底物。至少包含3种 同的底物[1, 2]。 3.培养基 基础无机盐（MSM）培养基（g/L）: K2PHO4 5.8, KH2PO4 4.5, (NH4)2SO4 2.0,MgCl2 0.16,CaCl2 0.02, Na2MoO4 0.0024, FeCl3 0.0018, MnCl2 0.0015 pH=7按照200mg/L加 入PAEs（邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲 酸二正辛酯各50mg/L。如果药品种类有变化则按总量200mg/L平均加入。） 4.降解菌株的驯化与分离纯化方法 4.1从4个样品中分别取0.5g于PAEs-MSM液体培养基中。 4.225℃下振荡培养7d。 4.3将有浑浊样品逐步转接至PAEs浓度分别240mg/L、280mg/L、320mg/的培养基 中培养，每次转接在25℃下培养7天。 4.4纯化时，用接种针蘸取少量菌液，在PAEs平板上分离纯化。 5.降解菌降解能力的测定 根据文献，一般使用HPLC法对PAEs的降解菌降解产物进行分析[3]。 但是如果菌株可以在PAEs为唯一碳氮源的PAEs-MSM培养基中生长，则可以认为 菌株具有降解PAEs的能力。 二、聚乙烯降解菌的筛选 1.样品来源 南极土样，连云港海域泥样、水样，最好为近海潮间带塑料堆积处泥样。 2.特殊药品 分子量为2000和5000的无任何添加物的纯聚乙烯粉末 3.材料预处理 将聚乙烯粉末放在无菌操作台紫外灯下紫外杀菌3h。并用接种环挑取少量灭菌的粉 末分别接入牛肉膏蛋白胨培养基、马丁氏培养基和高氏一号培养基。在37℃和28℃ 下培养72h。如粉末周围均没有发现菌落生长，则粉末已彻底灭菌。 4.培养基（g/L） 高氏一号培养基：可溶性淀粉20，KNO3 1，NaCl 0.5，K2HPO4 0.5，FeSO4 0.01，琼脂粉20，pH 7.2 马丁氏培养基：葡萄糖10，蛋白胨5，KH2PO41, MgSO40.5 1/3000孟加拉红 100mL，琼脂18 自然pH 牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3，蛋白胨10，NaCl 5，琼脂18，pH 7.2 无碳氮源琼脂固体培养基：K2HPO4 0.7，KH2PO4 0.7, MgSO4 0.7g, NH4NO3 1, NaCl 0.005, FeSO4 0.002, ZnSO4 0.002 MnSO4 0.001 琼脂18，自然pH 培养基A：3cm*3cm膜片一张，蛋白胨10，石蜡油0.1mL，K2HPO40.7，KH2PO4 0.7, MgSO4 0.7g, NH4NO3 1, NaCl 0.005, FeSO4 0.002, ZnSO4 0.002 MnSO4 0.001， 培养基B牛肉膏3，3cm*3cm膜片一张，石蜡油0.1mL蛋白胨10，琼脂18， K2HPO4 0.7，KH2PO4 0.7, MgSO4 0.7g, NH4NO3 1, NaCl 0.005, FeSO4 0.002, ZnSO4 0.002 MnSO4 0.001
纤维素降解菌的分离和筛选
纤维素降解菌的分离和筛选 1.实验目的：1.掌握纤维素降解菌的的分离和筛选的方法 2.学会会培养基的制备 3.再次了解菌落的形态 2.实验原理：从美术楼后面树林中取适量的土壤，用无菌水将得到的样品经适 当稀释, 在28℃下培养1d，稀释10-6、10-7、10-8三个浓度，分别接 种于鉴别培养基中培养, 每组3个平行，在37℃下培养2-3 d，然后 进行初筛，重复以上步骤，直至获得纯的菌株。最后镜检。 3.试验方法：1. 取样 先从树林中取10g土壤(10—15cm深)。用灭菌的塑料袋盛装。 2．饥饿培养 秤取10g土壤，置于250ml的装有90ml无菌水的锥形瓶中，摇匀， 在37℃下培养1d。 3.梯度稀释 所需仪器：试管（8支）、洗耳球、移液管。 需要先经高压蒸气灭菌的仪器：试管（每只内装9ml蒸馏水）、移液 管。 用移液管从饥饿培养土壤液中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌 水的试管中充分混匀。然后用移液管从此试管中吸取1ml加入另一 盛有9ml无菌水的试管中，混合均匀，以此类推制成10-1,10-2,10-3, 10-1,10-2,10-310-4,10-5,10-6,10-7,10-8不同稀释度的土壤溶液。 4.选择培养 ○1刚果红培养基的制备 所需要的仪器有：500ml锥形瓶、天平、药匙、玻璃棒、电炉、摇床、 培养基，用2层纱布加棉花做成瓶塞，将瓶口塞紧，再在瓶塞外包 裹两层报纸，用线绳扎紧，在121℃下高压蒸汽灭菌20min。灭菌后， 倒9个灭菌平板，凝固后待用。 ○2涂布平板 将上述已倒培养基的9个平板底面分别用记号笔写上10-6、10-7、10-8 3种稀释度（每个稀释度划3个平板）。然后用移液管分别由10-6、 10-7,10-8三管土壤稀释液中各吸取0.2ml对号放入已写好稀释度的平
力学性能培训教材
力学性能培训教材 1试验机种类：电子拉伸试验机，电液伺服万能试验机 1.1试验机工作原理 拉伸试验是在规定的温度、湿度和验速率条件下将符合要求的试棒放入试验机钳口中，夹好，用静拉伸力对试样进行轴向拉伸，测量力和相应的伸长，一般拉至断裂，以测其力学性能。拉伸试验中，以应力为纵坐标，以应变曲线为横坐标。在应力应变曲线上方便的测的拉伸性能的各项指标。 1.2.1抗拉强度：相应最大的应力。 R m = F m / S0R m：mPa, F m：N, S0：mm2 1.2.2生产率（延伸率）A变形 A = L u - L o / L o×100 L u ：断后标距，L o ：原始标距。 断后伸长率A：试验拉断后残余伸长与原始标距之比的百分率。 1.2.3断面收缩率（Z）：试样断裂后试验很截面积的最大缩减量与原始截面积之比的百分率。 Z = S o - S u / S o× 100 S o：原始截面积，S u：断后最小截面积。 应力：试验过程中任意时刻的力除以试样原始截面积之商。 1.2.4屈服强度：当金属材料在拉伸试验中呈现屈服现象时，在试验期间达到塑性变形发生而力值不再增加的应力点。 上屈服点：试样发生屈服而力值首次下降前的最高应力。 下屈服点：试验在屈服期间，不计初始效应时的最低应力。
金属材料的金相分析 一、金相学的定义 这一名词和其他科学一样，是生产发展与技术进步相结合的产物。金相学最初的含义仅指利用显微镜来研究金属相的形貌，随着发展进而成为综合的研究金属及其合金成分、组织与性能关系的科学。 二、晶体：固态物质分为晶体和非晶体。金属及合金都是晶体。 1．晶体：晶体中的原子呈规则排列，具有固定的熔点。 2．晶格：用以表示晶体中的原子在空间规则排列的框架，称为晶格。 3．晶体缺陷的类型：（几何形状）分点缺陷、线缺陷、面缺陷。 4．晶粒大小对金属性能的影响:常温下，金属晶粒越细小，其强度、硬度越高，塑性、韧性越好。高温下，金属零件大小适中的晶粒 才具有较高的蠕变强度。 5．控制晶粒大小的办法：增加过冷度、变质处理附加振动。 三、钢的基本组织 1．铁素体：经硝酸—酒精溶液侵蚀后，在金相显微镜下观察呈白亮色的多边形等轴晶粒，针状、月牙状、网状。 2．奥氏体：经硝酸—酒精溶液侵蚀后，呈规则的多边形，看可以看到孪晶及滑移线。 3．渗碳体：经硝酸—酒精溶液侵蚀后，呈白亮色，有呈片状，粒状，网络状等形态。硬度:HB800 4．珠光体：经硝酸—酒精溶液侵蚀后，在金相显微镜下观察，片状珠光体是黑白相间的层片状组织，球状珠光体中，渗碳体呈球粒 状。