溶液各种配制
附录：常用试剂配制及应用
一、常用缓冲液、试剂的配制
碳酸盐缓冲液(Carbonate-BicarbonateBuffer)
由于碳酸盐pH值偏碱，因此，常用于pH>9的缓冲液配制（附表1）。
附表1. 0.2mol/L碳酸盐缓冲液（～）
磷酸缓冲液(PhosphateBuffers，PB)
磷酸盐是使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa值，所以
用它们配制的缓冲液，pH范围最宽。NaH
2PO4：pKa1＝，pKa2＝；Na
2
HPO4：pKa1
＝，pKa2＝。
另外，磷酸盐还有钾盐分子形式，一般来说，低温时钠盐难溶，钾盐易溶，因此，配制细胞培养用试剂时常常添加钾盐试剂，但若配制十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用钠盐而不能用钾盐，因为SDS会与磷酸钾生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸缓冲液的优点为：①可配制成不同离子强度的缓冲液；②适用pH缓冲范围较宽；③受温度影响缓冲液pH值变化较小；④离子强度对缓冲液pH影响较小，如L缓冲液稀释10倍其pH变化小于。
磷酸缓冲液的缺点是：①磷酸盐易与钙离子（Ca2+）、镁离子（Mg2+）及重金属离子结合生成不溶的沉淀物；②可能干扰某些化学反应过程，如对某些酶的催
化活性具有一定程度的抑制作用。
NaH
2PO
4
的pH值偏酸性，可用作pH<4的缓冲液。
Na
2HPO
4
的pH值偏碱性，可用作pH>10的缓冲液。
而pH＝6～8的中性缓冲液是更常用的缓冲液，需要NaH
2PO
4
与Na
2
HPO
4
两种磷
酸盐混合配制（附表2）。
附表2. 0.2mol/L磷酸盐缓冲液（～）
磷酸盐缓冲溶液（Phosphate-bufferedsaline,PBS)
磷酸盐缓冲液是在磷酸缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压，因此，PBS适用于做细胞缓冲液，常用PBS配制如下。
NaCl8g
KCl0.2g
Na
2HPO
4
1.44g
KH
2PO
4
0.24g
在800ml蒸馏水中溶解，用HCl调节溶液的pH值至～加水定容至1L，15psi （1.05kg/cm2）高压灭菌20min，室温保存备用。
Tris缓冲液（Tris-HClBuffer,TB）
Tris的pH值偏于碱性，因此，通过添加HCl调节pH至所需值，Tris-HCl 缓冲液的离子强度（mol/L）是专指Tris的浓度，如某一特定pH的LTris缓冲液的配制是将LTris碱溶液与附表3所示相应体积（ml）的LHCl混合，加水至将体积100ml，即为LTris缓冲液。
另外，按附表3制备的缓冲液，由于试剂来源的不同，缓冲液pH可能与所需略有差异，此时可通过稍许减少或增加HCl用量，精细调节pH至所需值。
附表4. 0.05mol/LTris缓冲液
Tris盐缓冲液（TBS）：
Tris盐缓冲液是在Tris缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压，因此，TBS也适用于做细胞缓冲液，常用TBS配制如下。
8gNaCl、0.2gKCl以及3gTris溶解于800ml蒸馏水中，加入0.015g酚红并用HCl调pH至用蒸馏水定容至1L，分装后在15psi（1.05kg/cm2）高压灭菌20min，室温保存。
现在常用Tris盐缓冲液通常不加pH指示剂，而且该溶液如果不用于细胞培养，通常不加KCl及酚红。
Hank’s液(Hank’sBalancedSaltSolution)
Hank’s液是一种平衡盐溶液，主要用于细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗等。
贮存液A液：(I)NaCl80g
KCl4g
MgSO
4·7H
2
O1g
MgCl
2·6H
2
O1g
用双蒸馏水定容至450ml。
(II)CaCl
21.4g(或CaCl
2
·2H
2
O1.85g)
用双蒸馏水定容至50ml。
将I和II液混合，即成A液。贮存液B液：
Na
2HPO
4
·12H
2
O1.52g，
KH
2PO
4
0.6g,
酚红0.2g,
葡萄糖,
酚红应先置研钵内磨细，然后按配方顺序一一溶解，用双蒸馏水定容至500ml。
(3)应用液：A、B储存液分别经112.6℃湿热灭菌20min，取A和B液各25ml，加无菌双蒸馏水至450ml，使用前用无菌的%或%NaHCO
3
调至所需pH。
注意：药品必须全部用试剂，并按配方顺序加入，用适量双蒸水溶解，待前一种药品完全溶解后再加入后一种药品，最后补足水到总量。
无Ca2+、Mg2+Hank’s液（Hank’sSolutionwithoutcalcium,magnesiumsulfate）NaCl80g,
KCl4g,
Na
2HPO
4
·12H
2
O1.52g，
KH
2PO
4
0.6g,
葡萄糖10g,
用双蒸馏水溶解后，加入％酚红溶液50ml，再加入双蒸水至1000ml，112.6℃湿热灭菌20min，4℃冰箱保存。临用前将原液用无菌双蒸水作1：10倍稀释，用无菌的%或%NaHCO
3
调至所需pH。
柠檬酸盐缓冲液(CitrateBuffer)
柠檬酸0.327g
柠檬酸钠2.63g
磷酸氢钠
葡萄糖
蒸馏水加至100ml。
枸橼酸-磷酸盐缓冲液（Citricacid-PhosphateBuffer)
Lcitrateacid，LNa
2HPO
4
，等量混合，调节pH至。
LEDTA,
EDTA·2H
2
O186.1 g
NaOH～20 g
将EDTA·2H
2
O加入800ml水中，在磁力搅拌器上剧烈搅拌。用NaOH调节pH 至，EDTA直到接近才完全溶解，定容至1L。分装后高压蒸汽灭菌。
%酚红溶液
取酚红置于研钵中逐滴加入1mol/LNaOH溶液，边研磨边使酚红转变为钠盐溶于水中，加双蒸水至100ml，过滤后，4℃冰箱保存。
醋酸钾（PotassiumAcetate）
在60ml5mol/L醋酸钾溶液中，加入冰醋酸和水。该溶液用于碱性裂解。
3mol/L醋酸钠（SodiumAcetate），和
在800ml水中溶解408.1g三水醋酸钠，用冰乙酸调pH至或用稀释乙酸调pH至，加双蒸水至1L。分装后高压灭菌。
柠檬酸钠缓冲液(SodiumCitrateBuffer)
柠檬酸钠1.8g
HCl(1mol)4ml
无水乙醇95ml
先用100ml去离子水溶解柠檬酸钠，然后加入HCl和无水乙醇，再补充去离子水至总量200ml。
饱合硫酸铵溶液(SaturatedAmmoniumSulfateSolution)
取500ml双蒸馏水，加入约400克硫酸铵，水浴加热至70℃，磁力搅拌器充分
搅拌，直到加入的硫酸铵不再溶解，以氨水（也可用NaOH）调，室温保存。
二、酶免疫检测常用试剂配制
包被液(CoatingBuffer)（碳酸盐缓冲液）
Na
2CO
3
·10H
2
O8.58g
NaHCO
3
5.8g
溶于双蒸水至1000ml。
封闭液(Confiningliquid)（5%脱脂乳-PBS溶液，）脱脂乳50g
加磷酸盐缓冲液（PBS）至1000ml溶解。
洗液(washingliquid)
氯化钠8.0g
磷酸二氢钾0.2g
磷酸氢二钠（12H
2
O）2.9g
吐温
加去离子水至1000ml溶解即可。
终止液(stopbuffer)（2mol/LH
2SO
4
）：
加去离子水至200ml。
缓冲甘油(glycerinebuffer)
甘油9份
PB（）1份
将9份甘油与1份PB合并，充分混匀。
%H
2O
2
-甲醇液(HydrogenPeroxide-MethanolSolution)（总体积120ml）
3%H
2O
2
20ml
甲醇100ml
DAB-H
2O
2
底物缓冲液(DAB-H
2
O
2
SubstrateBuffer)
取6mg二氨基联苯胺(3,3’-DiaminobenzidineTetrahydrochlorideDAB)溶
解于。使用前取%加入到DAB溶液中(H
2O
2
的终浓度为%)。如有沉淀生成，则用滤
纸过滤。
5-溴-4-氯-3吲哚磷酸/四唑氮蓝底物显色液（BCIP/NBTSubstrateSolution）贮存液配制：
NBT：在10ml70%的乙醇中溶解0.5gNBT。
BCIP：在10ml100%二甲基甲酰胺中溶解0.5gBCIP。
贮存液4℃保存，可稳定一年。
底物显色液：
取66μlNBT贮液与33μlBCIP加入到10ml碱性磷酸酶缓冲液中，充分混匀，底物显色液应在用前1小时内配制。
三、细胞相关试剂配制
L-谷氨酰胺（L-G）溶液（L-glutaminSolution）（L）
称2.9 gL-谷氨酰胺（分子量为）用去离子水溶解至100ml，过滤除菌，分装小瓶，4～5ml/瓶，-20℃冻存。
100x青-链霉素（双抗）溶液（P/SPenicillin/StreptomycinSolution）取青霉素G（钠盐）100万单位和链霉素（硫酸盐）1 g，溶于100ml去离子水中，分装小瓶，4～5ml/瓶，-20℃冻存。
%NaHCO
3溶液（NaHCO
3
Solution）
称分析纯NaHCO
3
7.5 g，用去离子水溶解至l00ml，过滤除菌，分装小瓶，4～5m1/瓶，盖紧瓶塞，4℃保存。
HEPES溶液（HEPESSolution）（1mol/L）
称23.83 gHEPES （N-2-Hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonicacid，N-2-羟乙基呱嗪-N'-2-乙基磺酸，分子量为），用去离子水溶解至100ml，过滤除菌，分装小瓶，4～5m1/瓶，4℃保存。
氨基喋呤（A）贮存液（AminopterinStockingSolution）（100×,4×10-5mol/L）称氨基喋呤（Aminopterin,分子量），溶于90 m1去离子水中，滴加lmol/LNaOH0.5 m1，并不断搅动，待氨基喋呤完全溶解后，加1mol/L的HCl0.5m1中和，再补加去离子水至100 m1。过滤除菌，分装小瓶，2ml/瓶，-20℃冻存。次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷贮存液（HTStockingSolution）（100×,H:10-2mol/L;T:×10-3mol/L）
称取次黄嘌呤（Hypoxanthine，分子量）和胸腺嘧啶核苷（Thymidine，分
子量），加去离子水至l00ml，置45～50℃水浴中使完全溶解，过滤除菌，分装小瓶，2 m1/瓶，-20℃冻存。用前可置37℃加温助溶。
HAT培养液
培养液98ml，A贮存液1 m1，HT贮存液lml。
秋水仙素溶液（colchicineSolution）
称取10mg秋水仙素，溶于100 m1生理盐水中（即为100μg/ml），过滤除菌后，分装小瓶，－20℃冻存备用。
Alsever’s血细胞保存液（Alsever’s Solution）
葡萄糖2.05g,
柠橡酸钠0.8g,
NaCl0.42g，
蒸馏水l00ml。
以上成分混匀后，微加温使其溶解后，用柠檬酸调节，分装于三角瓶中(30～50ml/瓶),113℃湿热灭菌15min，4℃保存备用。
细胞冻存液(FreezingMedium)
50%小牛血清；40%不完全培养液；10%DMSO（二甲基亚砜）。
%胰蛋白酶－%EDTA细胞消化液(Trypsin-EDTASolution)
A:%胰蛋白酶:
胰蛋白酶2.5g
磷酸缓冲盐溶液100ml
过滤除菌保存。
B:%二乙胺四乙酸二钠（EDTA）
EDTA0.2g
双蒸馏水100ml
高压灭菌保存。
取A液1份，加B液99份，混匀，分装-20℃保存。
CI溶液(AmmoniumChlorideSolution)
%NH
4
CI0.83g
NH
4
0.1g
KHCO
3
EDTA·2Na0.0037g
蒸馏水加至100ml。
Cl溶液(Tris-AmmoniumChlorideSolution)
Tris-NH
4
Cl3.735g/450ml双蒸水+Tris1.3g/50ml双蒸水（）。
NH
4
细胞裂解液（CellLysisSolution）
20mmol/LHEPES
150mmol/LNaCl
1mmol/LEDTA
10?g/mlleupeptin
1mmol/LPMSF
1%TritonX-100
%deoxicholate(sodiumsalt)
%SDS
组织匀浆缓冲液（HistolysisBuffer）
50mmol/LTris-HCl
150mmol/LNaCl
1%NP40
1mmol/Lphenylmethylsulfonylfluoride
4?g/mlleupeptin
1?g/mlaprotinin
细胞核裂解液(NuclearLysisBuffer)
10mmol/LTris-HCl
150mmol/LNaCl
10mmol/LEDTA
蛋白酶K100μg/ml
%SDS（最后加）
10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）
在异丙醇中溶解PMSF至ml，即10mmol/L，分装后保存于-20℃，如果需要的话，可将储存液制备至ml，即100mmol/L的高浓度。
闪烁液(ScintillationSolution)
PPO(2,5-二苯基)5.0g、POPOP（1,4-双－5－苯基）0.5g溶于1000ml二甲苯中。也可将POPOP加入二甲苯，在37℃水浴上溶解后，再加PPO，然后补足二甲苯。3H-TdR工作液（wokingSolution）
按1:20的比例将浓度为1mCi/ml的3H－TdR用无血清的RPMI培养液稀释，终浓度为50μCi/ml。
肝素溶液的配制：
含有肝素的培养液可以使内皮细胞纯度提高，肝素加入全培养液中最终浓度为50ug/ml。因为现在市售的多为肝素钠，包装为约为克/瓶，配制时，可将其溶于100ml三蒸水中，定容，过夜，然后过滤除菌，分装小瓶，保存温度为4℃。使用时，向100ml培养液中加入1ml（精确可加入）即可。
Ⅰ型胶原酶：
％Ⅰ型胶原酶溶液同胰蛋白酶一样配制和消毒灭菌。注意：因为Ⅰ型胶原酶分子颗粒比胰酶大，不容易过滤，因此可以用蔡式滤器过滤除菌。分装入10ml 小瓶-20℃保存。用时提前一小时37℃复温即可.%的I型胶原酶的配置，100mg的粉末状的I型胶原酶可以溶于100ml的DMEM/F12，微米滤器过滤%的I型胶原酶的配置，100mg的粉末状的I型胶原酶可以溶于100ml的DMEM/F12，微米滤器过滤.
四、染色液配制（PreprationofStainingSolution）
苏木素液(HematoxylinSolution)：
苏木素2.5g，乙醇，钾明矾2.5g，氧化汞1.25g，冰乙酸，蒸馏水。配制方法是先将苏木素溶于乙醇中（稍加热）。将预先已溶解明矾的蒸馏水加入苏木素乙醇液中，使溶液尽快沸腾后，将火焰熄灭，慢慢加入氧化汞，防止溶液油溅出，再煮沸2min。将烧瓶立即浸入冷水中，当染液冷却后，加入醋酸，室温保存，用前过滤。
伊红Y染色液(EosinYSolution)
伊红～1.0g，蒸馏水75ml，95%乙醇25ml，冰乙酸1～2滴。先取少许蒸馏水加入伊红，用玻棒将伊红研碎，再加入全部蒸馏水，溶解后加入乙醇。
甲基绿染色液(MethylGreeenSolution)
新购买的甲基绿需用氯仿处理去除甲基紫。方法是将2%甲基绿水溶液20ml
倾入洁净分液漏斗，移去慢慢下沉带紫红色的氯仿，再加入新的氯仿10ml，如此反复更换氯仿，到无紫红色为止。该液作为贮存液，4℃保存。染色液：甲基绿贮存液5ml，5%派诺宁水溶液1ml，蒸馏水12ml，L乙酸钠18ml（临用前配制，滤纸过滤）。
吖啶橙贮存液(AcridineOrangeStockingSolution)
10mg吖啶橙溶解于100mlPBS中，～滤过，4℃避光保存。
吉姆萨贮存液(GiemsaSolution)
吉姆萨染色粉1g先溶于少量甘油，在研钵内研磨30min以上，至看不见颗粒为止，再将全部(66ml)剩余甘油倒入，于56℃温箱内保温2h。然后再加入甲醇(66ml)，搅匀后保存于棕色瓶中。母液配制后放入冰箱可长期保存，一般刚配制的母液染色效果欠佳，保存时间越长越好。
临用时用磷酸缓冲液稀释10倍，随配随用。
瑞氏染色液(Wright’s Solution)
瑞氏染色粉0.3g
甘油3ml
甲醇97ml
将瑞氏染色粉放干燥研钵内磨细，加入甘油继续研磨，不断滴加甲醇并继续研磨，将上层溶解的染料倒入棕色瓶中，直至染料全溶后加甲醇至所需量。混匀后置棕色瓶中保存，用前过滤。一般配制后置室温一周便可使用，保存时间愈入，则染色效果愈佳。
吉姆萨-瑞氏染色液(Giemsa-Wright’s StainingSolution)
瑞氏染色粉0.3g
吉姆萨染色粉0.03g
甲醇100ml
将二种粉末置于研钵中磨细，再逐滴加入甲醇混匀后倒入棕色瓶中，塞紧瓶口并充分振荡。置室温溶解后使用。
噻唑兰（MTT）
称取250mgMTT，加50mlPBS（L，）在磁力搅拌器上搅拌30min，用0.22 m的微孔滤膜过滤除菌，分装，4℃保存。两周内有效。
台酚蓝染色液(TrypanBlueSolution)
A：台酚蓝染料1g
蒸馏水100ml
将染料置于研钵中边研磨边加入蒸馏水溶解。
B：NaCl1.7g
蒸馏水100ml
临用前A、B液1：1混合，离心沉淀，取上清供染色用。混合后的染液存放过久，易形成沉淀，故应新鲜配制。
染色时，取细胞悬液加入新鲜配制的染色液一滴，室温下染5～10分钟，取一滴悬液于载波片上，加盖玻片，高倍镜下检查。死亡细胞膨大并染成浅蓝色，活细胞不着色，大小正常。
五、固定剂(Fixatives)
大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽类）的化学性质，并根据需要来选择适宜的固定剂（或固定方法）以及改进固定条件。目前，免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂，其中以甲醛类和戊二醛最为常用。
4%多聚甲醛L磷酸缓冲液,（formaldehyde-PhasphateBuffer）
多聚甲醛40g
L磷酸缓冲液至1000ml
配制方法：称取40g多聚甲醛，置于三角烧瓶中，加入500～L磷酸缓冲液（PhosphateBuffer以下简称PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）至完全溶解，通常需滴加少许1NNaOH才能使溶液清亮，最后补足L的PB于1000ml，充分混匀。
该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究，最好是动物经灌注固定取材后，继续浸泡固定2～24h。另外，该固定剂较为温和，适于组织标本的较长期保存。
4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠（formaldehyde-SodiumPhosphate/SodiumHydroxideBuffer）
A液：多聚甲醛40g
蒸馏水400ml
B液：Na
2HPO
4
·2H
2
O
蒸馏水300ml
C液：NaOH
蒸馏水200ml
配制方法：A液最好在500ml的三角烧瓶中配制（方法同前），至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。注意，在溶解多聚甲醛时，要尽量避免吸入气体或溅入眼内。B液和C液配制好后，将B液倒入C液中，混合后再加入A液，以1NNaOH 或1NHCl将pH调至～，最后，补充双蒸水至1000ml充分混合，4℃冰箱保存备用。
该固定剂适于光镜和电镜免疫细胞化学研究，用于免疫电镜时，最好加入少量新鲜配制的戊二醛，使其终浓度为%～1%。该固定剂较温和，适于组织的长期保存。组织标本于该固定液中，4℃冰箱保存数月仍可获得满意的染色效果。六、蛋白电泳相关试剂
30％丙烯酰胺（Acrylmide）
丙烯酰胺29g
N,N’-亚甲双丙烯酰胺1g
溶于60ml水中，加热至37℃溶解，补加水至终体积100ml。μM滤器过滤除杂质，置深色瓶中室温保存。
考马斯亮蓝R-250染色液（CoomassieStainingSolution）
1.称取1 g考马斯亮蓝R-250，置于1 L烧杯中。
2.量取250ml的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解。
3.加入100ml的冰醋酸，搅拌均匀。
4.加入650ml的去离子水，搅拌均匀。
5.用滤纸除去颗粒物质后，室温保存。
考马斯亮蓝脱色液（DestainingSolution）
量取下列溶液，置于1 L烧杯中，充分混合后使用。
醋酸100ml
乙醇50ml
dH
O850ml
2
1mol/L二硫苏糖醇贮存液（DTTStockingSolution）
用L乙酸钠溶液（）溶解，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于－20℃保存。DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。
甘氨酸-HCl缓冲液(Glycine-HClBuffer)
称取固体甘氨酸15.01克，用蒸馏水溶解后，加入LHCl648ml，然后定容成2000ml。
2×SDS凝胶加样缓冲液(2×LoadingBuffer)
100mmol/（）
200mmol/L二硫苏糖醇（DTT）
4%SDS（电泳级）
%溴酚蓝
20%甘油
不含二硫苏糖醇的2×SDS凝胶加样缓冲液可以保存于室温，临用前须从
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）贮存液现用现加于上述缓冲液。
10%十二烷基硫酸钠（SDS）
在900ml蒸馏水中溶解100g电泳级SDS,加热至68℃助溶，加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至，加水定容至1L，分装备用。
SDS的微细晶粒易于扩散，因此称量时要戴面罩，称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS,10%SDS溶液无需灭菌。
电转印缓冲液为(Semi-DryTransferBuffer)
Tris3g
Glycine14.4g
SDS0.185g
加入甲醇200ml，用去离子水调至1000ml。
Tris-乙酸50×（TAE）
Tris碱242g
冰乙酸
LEDTA100ml
蒸馏水定容至1L。
Tris-硼酸5×（TBE）
Tris碱54g
硼酸27.5g
LEDTA20ml
蒸馏水定容至1L。
TE缓冲液10×,,
1.量取下列溶液，置于1 L烧杯中。
1mol/LTris-HCl,,100ml
500mmol/LEDTA20ml
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合。
3.将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
Tris－甘氨酸缓冲液（Tris-GlycineBuffer5×）
Tris15.1g
甘氨酸（电泳级）94g
10％SDS（电泳级）50ml
蒸馏水定容至1L。
七、淋巴细胞分离液
聚蔗糖－泛影葡胺分层液(Ficoll-paqueGradientMixer) 90g/L聚蔗糖15ml，加500g/L泛影葡胺10ml（比重。90g/L聚蔗糖，加500g/L泛影葡胺10ml（比重。
90g/L聚蔗糖20ml，加500g/L泛影葡胺10ml（比重。
90g/L聚蔗糖24ml，加500g/L泛影葡胺10ml(比重。
Percoll配制(PreprationofPercoll)
将一份10×PBS与9份Percoll贮存液混合，制成等渗Percoll悬液，此悬液被认为是100%Percoll，其密度为ml。利用1×PBS或细胞培养液稀释100%Percoll，可获得适宜密度的细胞分层液，用于各种细胞的分离，其浓度与密度的关系如下：
70%Percoll比重1.090g/ml
60%Percoll比重1.077g/ml
50%Percoll比重1.067g/ml
40%Percoll比重1.056g/ml
30%Percoll比重1.043g/ml
20%Percoll比重1.037g/ml
人外周血单个核细胞（PBMC）分离Ficoll分层液配制
9％聚蔗糖（Ficoll）24份
34％泛影葡胺（Urografin）10％
混合，测比重为～，G5玻璃滤器过滤除菌。4℃冰箱保存备用。
八、其它试剂
佐剂(Adjuvant)
动物实验常用弗氏佐剂（Freundadjuvant），其成分通常是羊毛脂1份、液体石腊油5份，羊毛脂与石腊油的比例，视需要可调整为1：2～9（V/V），充分混合后即是不完全福氏佐剂，如果在每毫升不完全佐剂加入1～20mg卡介苗就成为完全弗氏佐剂。
配制方法：将羊毛脂与石蜡油按比例置于容器内，超声波混匀，高压灭菌，4℃保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液（其中加卡介苗3～4mg/ml或不加），加完后再继续研磨成乳剂，滴于冰水上5～10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原，亦可用一注射器装抗原液，另一注射器装佐剂，二者以聚乙烯塑料管连接，然后二者来回反复抽吸，约数十分钟后即能完全乳化。检查合格后即以其中一注射器作注射用。
清洁液(CleaningSolution)
配方1：重铬酸钾100g
蒸馏水200ml
浓硫酸800ml
将重铬酸钾加入蒸馏水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩埚中加热溶解，然后慢慢加入浓硫酸，边加边搅拌，见发热过剧则稍停，冷却后再继续加。此为强洗液。盛清洁液的容器要坚固，上加厚玻璃盖，操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套，以保安全。洗液一旦变绿，表示铬酸已经还原，失去了氧化能力，不宜再用。如将这样洗液加热，再加适量重铬酸钾，又可重新使用。
配方2：重铬酸钾60g
蒸馏水300ml
浓硫酸460ml
此为中等强度洗液。
配方3：重铬酸钾100g
蒸馏水750ml
浓硫酸250ml
此液为弱洗液，为棕红色。使用此液时，必须预先用热肥皂水将玻璃器皿洗净，经自来水冲洗，沥干然后才能浸入，否则该洗液很快失效。
（崔雪玲）
氨苄青霉素（Ampicillin）
在9ml蒸馏水中溶解1gAmpicillin粉末并定容至10ml，然后用微孔滤膜过滤除菌，分装成小份存于-20℃。
青、链霉素溶液：
所用纯净水（双蒸水）需要15磅高压20分钟灭菌。具体操作均在超净台内完成。青霉素是80万单位/瓶，用注射器加4ml灭菌双蒸水。链霉素是100万单位/瓶，加5ml灭菌双蒸水，即每毫升各为20万单位。分装于－20℃保存。使用时溶入培养液中，使青链霉素的浓度最终为100单位/ml。
3%酸性酒精溶液
浓盐酸3ml95%酒精97ml
中性红指示剂
中性红0．04g
95%乙醇28ml
蒸馏水72ml
中性红—8，颜色由红变黄，常用浓度为0．04%
淀粉水解试验用碘液(卢戈氏碘液)
碘片1g
碘化钾2g
蒸馏水300ml
先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。
溴甲酚紫指示剂
溴甲酚紫0．04g0．01mol/LNaOH7．4ml
蒸馏水92．6ml
溴甲酚紫pH5．2—6．8，颜色由黄变紫，常用浓度为0．04%。
溴麝香草酚蓝指示剂
溴麝香草酚蓝0．04g
0．01mol/LNaOH6．4ml
蒸馏水93．6ml
溴麝香草酚蓝pH6．0—7．6，颜色由黄变蓝，常用浓度为0．04%。
甲基红试剂
甲基红(Methylred)0．04g
95%酒精60ml
蒸馏水40ml
先将甲基红溶于95%酒精中，然后加入蒸馏水即可。
V．P．试剂
1．5%α-萘酚无水酒精溶液
α-萘酚5g
无水乙醇100ml
2．40%KOH溶液
KOH40g
蒸馏水100ml
吲哚试剂
对二甲基氨基苯甲醛2g
95%乙醇190ml
浓盐酸40ml
格里斯氏(Griess)
试剂
A液：对氨基苯磺酸0．5g
10%稀醋酸150ml
B液：α-萘胺0．1g
蒸馏水20ml
10%稀醋酸150ml
二苯胺试剂
二苯胺0．5g溶于100ml浓硫酸中，用20ml蒸馏水稀释
十一、阿氏(Alsever)血液保存液
柠檬酸三钠·2H2O8g
柠檬酸0．5g
无水葡萄糖18．7g
NaCl4．2g
蒸馏水1000ml
将各成分溶解于蒸馏水后，用滤纸过滤，分装，0．56—0．70kg/cm2(8—10磅/英寸2)，灭菌20分钟。冰箱保存备用。
pH8．6离子强度0．075mol/L巴比妥缓冲液
巴比妥2．76g
巴比妥钠15．45g
蒸馏水1000ml
1%离子琼脂
琼脂粉1g
巴比妥缓冲液50ml
蒸馏水50ml
1%硫柳汞1滴
称取琼脂粉1g先加至50ml蒸馏水中，于沸水浴中加热溶解，然后加入50ml 巴比妥缓冲液，再滴加1滴1%硫柳汞溶液防腐，分装试管内，放冰箱中备用。
电泳缓冲液
50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液成分及终浓度
配制1L
溶液各成分的用量
2mol/LTris碱
1mol/L乙酸
100mmol/LEDTA水242g
ml的冰乙酸（mol/L）
200ml的mol/LEDTA（pH）
补足1L
1％溴酚蓝
加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
1％二甲苯青FF（xylenecyanoleFF）
溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。
10mg/ml的溴化乙锭
小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于4℃贮存。
四常用抗生素
氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）
溶解羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃
常用溶液及其配制
常用溶液及其配制 1.非电解质溶液 常用5%～10%葡萄糖液，前者为等渗液，后者为高渗液。但由于葡萄糖输入体内后被迅速代谢成二氧化碳和水同时释放能量，或转化糖原储存，不能维持有效渗透压，故输液时不计算其张力，只用于供给水分及能量。 2.电解质溶液 （1）0.9%氯化钠（生理盐水）：每升含Na+和Cl-各为154mmol，与血浆离子渗透压相似为等渗液，但钠、氯之比为1：1，与人体血浆钠（142mmol）、氯（103mmol）的比例不同（血浆钠、氯比例约3：2），若大量或长期单独补给可使血氯增高，造成高氯性酸中毒。若用2份生理盐水和1份1.4%碳酸氢钠，配成2：1溶液，则钠氯之比为3：2较符合血浆。 （2）碱性液体：常用于纠正酸中毒也可配置其他溶液。①1.4%（1/6M）碳酸氢钠是等渗液，成品为5%，用5%～10%葡萄糖稀释3.5倍后，即为等渗液。1.4%碳酸氢钠4ml/kg或5%碳酸氢钠1ml/kg，可提高二氧化碳结合力1mmol/L，此为小儿纠酸的首选。②11.2%乳酸钠，稀释6倍，浓度1.87%（1/6M）时为等渗液。乳酸钠需在有氧情况下，经肝脏分解产生HCO3-而发挥作用，故小儿期纠酸不宜作为首选。 （3）10%氯化钾：纠正低血钾用。 3.混合溶液 将几种液体按不同比例配制成各种混合溶液，使之更适合于不同性质脱水补液的要求。 （1）2：1等渗液：为2份生理盐水与1份1.4%碳酸氢钠或1.87%乳酸钠。该液体有利于补充血容量，常用于低渗性脱水或重度脱水的扩容。 （2）4：3：2液：为4份生理盐水、3份5%～10%葡萄糖液、2份1.4%碳酸氢钠或1.87%乳酸钠。2/3张液。常用于中度以上或低渗性脱水。 （3）2：3：1液：为2份生理盐水、3份5%～10%葡萄糖液、1份1.4%碳酸氢钠或1.87%乳酸钠。1/2张液。常用于轻、中度等渗性脱水。 （4）维持液：为4份5%～10%葡萄糖液、1份生理盐水，并含0.15%氯化钾的混合液。常用于高热、肺炎等的维持输液。 （5）口服补液盐其成分为氯化钠0.35g、碳酸氢钠0.25g、氯化钾0.15g、葡萄糖2g、水100ml.2/3张液。用于口服补液。
各种皮试液配制及皮试方法
各种皮试液配制及皮试方法 注：药物是否须要皮试及所用皮试液的配制方法请按说明书为准则，原则上原药皮试。 1、青霉素80万U/瓶：50u 80万青霉素加生理盐水溶解至4ml；（20万U/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2万U/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2千U/ml） 取上液0.25ml+生理盐水至1ml；（500U/ml） 取上液0.1ml作皮试（即50U）皮试结果判断同青霉素。 2、美洛西林舒巴坦钠1.25g/瓶 以上所需药物加生理盐水溶解至5ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml） 取上液0.1ml作皮试（即0.05mg） 皮试结果判断同青霉素。 3、阿莫西林舒巴坦钠1. 5g/瓶、派拉西林舒巴坦钠1.5g/瓶 以上所需药物加生理盐水溶解至6ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml） 取上液0.1ml作皮试（即0.05mg） 皮试结果判断同青霉素。 4、美洛西林0.5g/瓶、派拉西林0.5g/瓶、氨苄西林0.5g/瓶 以上所需药物加生理盐水溶解至2ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml） 取上液0.1ml作皮试（即0.05mg） 皮试结果判断同青霉素。 5、先锋铋1g/瓶、头孢替唑1g/瓶： 以上所需药物加生理盐水溶解至4ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25 mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml）(500ug/ml) 皮试时取0.1ml（即50ug/0.1ml） 皮试结果判断同青霉素。 6、头孢拉定0.5g/瓶、头孢呋新钠0.5g/瓶、头孢地嗪钠0.5g/瓶、头孢派酮钠舒巴坦钠0.5g/瓶、头孢唑林钠0.5g/瓶： 以上所需药物加生理盐水溶解至2ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25 mg/ml）
常用溶液配制方法
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性， 须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇 至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。 8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。 1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。 3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml 水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。 1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH （6.8-8.2），然后用水定容至100ml。 1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。 25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml 水中，分成小份贮存于-20℃。 1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100ml。
常见缓冲溶液的配制
常见缓冲溶液的配制 缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。PH缓冲系统对维持生物的正常pH 值，正常生理环境起重要作用。多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动，而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系，它们时蛋白质、重碳酸盐缓冲体系。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的。 在生化研究工作中，常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究工作的溶液体系pH 值的变化往往直接影响到我们工作的成效。如果提取酶实验体系的pH值变化或变化过大，会使酶活性下降甚至完全失活。所以我们要学会配制缓冲溶液。 由弱酸及其盐组合一起使具有缓冲作用。生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的反应。硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。 柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。 磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。 三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑止的作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris一缓冲液，在4℃时是8.4，在37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液拿到37℃测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下，缓冲能力很差。 缓冲液的pH值由哪些因素决定？ 设缓冲系统的弱酸的电离常数为K（平衡常数），平衡时弱酸的浓度为[酸]，弱酸盐的浓度为[盐]，则由弱酸的电离平衡式可得下式： 根据此式可得出下列几点结论： （1）缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数K及盐和酸的浓度有关。弱酸一定，但酸和盐的比例不同时，可以得到不同的pH值。当酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PK值相同。 （2）酸和盐浓度等比例也增减时，溶液的pH值不便。 （3）酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为最高，比例相差越大，缓冲效率越低，一般地说缓冲液有效缓冲范围为PK±1pH。 从上述可知，只要知道缓冲对的PK值，和要配制的缓冲液的pH值（及要求的缓冲液总浓度）时，可按公式计算出[盐]和[酸]的量。这样算涉及到对数的换算，较麻烦，前人为减少后人的计算麻烦，经计算已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系列出了表格。讲义附录部分节录有磷酸缓冲液的配制表。只要我们知道要配制的缓冲液的pH，经查表便可计算处所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nmpH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。 经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。 所以500ml 0.1M磷酸缓冲液需要Na2HPO4量为: 需Na2HPO4量为 : 计算好后，按计算结果称好药品，放于烧杯中，加少量蒸馏水溶解，转移入50ml容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，便得所需的缓冲液。 各种缓冲溶液的配制，均按下表按比例混合，某些试剂，必须标定配成准确的浓度才能进行，如醋酸、NaOH等 常用体系 1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M） X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200ml pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml 2.2 50 44.0 3.0 50 11.4 2.4 50 32.4 3.2 50 8.2 2.6 50 24.2 3.4 50 6.4 2.8 50 16.8 3.6 50 5.0
皮试液配制方法大全
《皮试液配制方法大全》 1、青霉素80万U/瓶（160万U/瓶）：80万青霉素加生理盐水溶解至4ml（8ml）;(20万U/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2万U/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2千U/ml) 取上液0.25ml+生理盐水至1ml;(500U/ml) 取上液0.1ml作皮试(即50U) 2、美洛西林舒巴坦钠1.25g/瓶以上所需药物加生理盐水溶解至5ml;(250mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml) 取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml) 取上液0.1ml作皮试(即0.05mg) 皮试结果判断同青霉素。 3、氨苄西林钠氯唑西林钠2g/瓶以上所需药物加生理盐水溶解至 8ml;(250mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml) 取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml) 取上液0.1ml作皮试(即0.05mg) 皮试结果判断同青霉素。 4、氨苄西林1g/瓶、氯唑西林1g/瓶、氨苄西林钠氯唑西林钠1g/瓶、阿洛西林舒巴坦钠1g/瓶： 以上所需药物加生理盐水溶解至4ml;(250mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)
取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml) 取上液0.1ml作皮试(即0.05mg) 皮试结果判断同青霉素。 5、阿莫西林舒巴坦钠1.5g/瓶、派拉西林舒巴坦钠1.5g/瓶以上所需药物加生理盐水溶解至6ml;(250mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml) 取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml) 取上液0.1ml作皮试(即0.05mg) 皮试结果判断同青霉素。 6、美洛西林0.5g/瓶、派拉西林0.5g/瓶、氨苄西林0.5g/瓶以上所需药物加生理盐水溶解至2ml;(250mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml) 取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml) 取上液0.1ml作皮试(即0.05mg) 皮试结果判断同青霉素。 7、长效西林(苄星青霉素)120万U/瓶： 长效西林+生理盐水5.8ml溶解;(20万U/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2万U/ml) 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2千U/ml) 取上液0.25ml+生理盐水至1ml;(500U/ml) 取上液0.1ml作皮试(即50U/0.1ml) 皮试结果判断同青霉素。 8、普鲁卡因： 普鲁卡因40mg/支，浓度为0.25%;
各种化学试剂标准溶液的配制
各种化学试剂标准溶液的 配制 Prepared on 21 November 2021
常用试剂的配制一、标准溶液的配制 1、硫酸（H 2SO 4 ）溶液的配制： 1000mL浓度c（1/2H 2SO 4 ）=0.1mol/L，即c（H 2 SO 4 ）=0.05mol/L的硫酸溶液的配制： 取3mL左右的浓硫酸缓缓注入1000mL水中，冷却，摇匀。 新配制的硫酸需要标定，其标定方法如下： 称取于270-300℃高温炉中灼烧至恒重的工作基准试剂无水碳酸钠0.2g，溶于50mL水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液，用配制好的硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时做空白试验（取50mL水，加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液，同样用硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色）。 计算公式为： 式中： m：无水碳酸钠的质量，g； V 1 ：滴定时所用的硫酸的体积，mL； V 2 ：空白滴定时所用的硫酸的体积，mL； M：无水硫酸钠的相对分子质量，g/mol，[M（1/2Na 2CO 3 ）=52.994）]。 测定氨氮时，氨氮含量的计算： 式中： 氨氮：氨氮含量，mg/L； V 1 ：滴定水样时所用的硫酸的体积，mL； V 2 ：空白滴定时所用的硫酸的体积，mL； M：硫酸溶液的浓度，mol/L； V：水样的体积，mL。 2、重铬酸钾（K 2Cr 2 O 7 ）溶液的配制 1000mL浓度c（1/6K 2Cr 2 O 7 ）=0.2500mol/L，即c（K 2 Cr 2 O 7 ）=0.0417mol/L的重铬酸钾溶液的 配制： 称取12.258g于120℃下干燥2h的重铬酸钾溶于水中，并移入容量瓶中，定容至1000mL，摇匀，备用。
标准溶液配制
溶液配制 标准溶液的配置与标定 一、1N、0.5N、0.1N硫酸标准溶液 1、配制 1N硫酸标准溶液 量取98%的浓硫酸280ml，慢慢倒入装有10L水瓶中，摇匀待标 0.5N硫酸标准溶液 量取98%的浓硫酸140ml，慢慢倒入装有10L水瓶中，摇匀待标 0.1N硫酸标准溶液 量取98%的浓硫酸28ml，慢慢倒入装有10L水瓶中，摇匀待标 2、标定 1）标定方法 1N硫酸标准溶液 吸取25ml1N碳酸钠基准液于250ml三角烧瓶中，加入2D0.05%甲基橙指示剂，用配制好的硫酸标准溶液滴定至橙色，煮沸5min，冷却后继续滴定至橙色为终点。 0.5N硫酸标准溶液 吸取10ml1N碳酸钠基准液于250ml三角烧瓶中，加入2D0.05%甲基橙指示剂，用配制好的硫酸标准溶液滴定至橙色，煮沸5min，冷却后继续滴定至橙色为终点。 0.1N硫酸标准溶液 吸取25ml1N碳酸钠基准液于250ml三角烧瓶中，加入2D0.05%
甲基橙指示剂，用配制好的硫酸标准溶液滴定至橙色，煮沸5min，冷却后继续滴定至橙色为终点。 2）计算 N=N1*V1/V 式中：V1－碳酸钠基准液用量 ml N1－碳酸钠基准液当量浓度 V－消耗硫酸标准溶液的用量 ml 二、10%、25% 10%硫酸溶液 量取98%的浓硫酸600ml，慢慢倒入装有10L水瓶中，摇匀待标25%硫酸溶液 量取98%的浓硫酸1600ml，慢慢倒入装有10L水瓶中，摇匀待标 2、标定 1）标定方法 10%硫酸溶液 吸取配制好的10%的硫酸溶液5ml于250ml三角烧瓶中，加入3D 甲基红指示剂，用1N的氢氧化钠标准溶液滴定，滴至由红色变为橙色即为终点。（消耗的氢氧化钠标准溶液应在10.85ml以上，方可达到10%浓度） 25%硫酸溶液 吸取配制好的25%的硫酸溶液5ml于250ml三角烧瓶中，加入3D 甲基红指示剂，用1N的氢氧化钠标准溶液滴定，滴至由红色变为橙
溶液各种配制
附录:常用试剂配制及应用 一、常用缓冲液、试剂得配制 碳酸盐缓冲液(CarbonateBicarbonate Buffer) 由于碳酸盐pH值偏碱,因此,常用于pH>9得缓冲液配制(附表1)。 附表1、 0、2 mol/L碳酸盐缓冲液(pH9、2～10、7) 磷酸缓冲液(Phosphate Buffers,PB) 磷酸盐就是使用最广泛得一种缓冲剂,由于它们就是二级解离,有二个pKa PO4:pKa1＝2、12,pKa2＝7、21; 值,所以用它们配制得缓冲液,pH 范围最宽。NaH 2 HPO4:pKa1＝7、21,pKa2＝12、32。 Na 2 另外,磷酸盐还有钾盐分子形式,一般来说,低温时钠盐难溶,钾盐易溶,因此,配制细胞培养用试剂时常常添加钾盐试剂,但若配制十二烷基硫酸钠(SDS)聚丙 烯酰胺凝胶电泳得缓冲液时,只能用钠盐而不能用钾盐,因为SDS会与磷酸钾生 成难溶得十二烷基硫酸钾。 磷酸缓冲液得优点为:①可配制成不同离子强度得缓冲液;②适用pH缓冲范围较宽;③受温度影响缓冲液pH值变化较小;④离子强度对缓冲液pH影响较小,如0、1mol/L缓冲液稀释10倍其pH变化小于0、1。 磷酸缓冲液得缺点就是:①磷酸盐易与钙离子(Ca2+)、镁离子(Mg2+)及重金属离子结合生成不溶得沉淀物;②可能干扰某些生物化学反应过程,如对某些酶得催化活性具有一定程度得抑制作用。
NaH 2PO 4 得pH值偏酸性,可用作pH<4得缓冲液。 Na 2HPO 4 得pH值偏碱性,可用作pH>10得缓冲液。 而pH＝6～8得中性缓冲液就是更常用得缓冲液,需要NaH 2PO 4 与Na 2 HPO 4 两种 磷酸盐混合配制(附表2)。 附表2、 0、2 mol/L磷酸盐缓冲液(pH5、7～8、2) 磷酸盐缓冲溶液(Phosphatebuffered saline, PBS) 磷酸盐缓冲液就是在磷酸缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液得渗透压,因此,PBS适用于做细胞缓冲液,常用PBS配制如下。 NaCl 8g KCl 0、2g Na 2HPO 4 1、44g KH 2PO 4 0、24g 在800ml蒸馏水中溶解,用HCl调节溶液得pH值至7、2～7、4加水定容至1L,15psi(1、05kg/cm2)高压灭菌20min,室温保存备用。
各种皮试液地配制大全
【各种皮试液的配制大全】 青霉素皮试药液配制方法： 青霉素1瓶80万u，注入4ml生理盐水，则1ml含20万u 取0. 1ml，加生理盐水至1ml，则1ml含2万u 取0. 1ml，加生理盐水至1ml，则1ml含2000u 取0.25ml，加生理盐水至1ml，则1ml含500u，即成青霉素皮试液。皮注射0.1ml 含50u 破伤风抗毒素（TAT）皮试液的配制方法： TAT 每支1500IU约0.7 ml，加水至1ml，抽取0.1ml，加生理盐水稀释至1ml（含150IU），皮注射0.1ml含15IU。 细胞色素C皮试液的配制方法： 细胞色素C 每支2 ml含15mg，取0. 1ml，加生理盐水至1ml（1ml含0.75 mg），皮注射0. 1ml含0. mg。 先锋霉素皮试液的配制方法： 先锋霉素0.5 g加生理盐水2 ml，则1ml含250mg 取0.2ml，加生理盐水至1ml，则1ml含30mg 取0.1ml，加生理盐水至1ml，则1ml含3mg（3000 ug）,取0. 1ml，加生理盐水至1ml，则1ml含300 ug 皮注射0. 1ml含30ug 长效青霉素皮试液的配制方法: 长效青霉素1瓶120万u，注入4ml生理盐水，则1ml含30万u 取0. 1ml 含3万u，做画痕试验。 碘过敏试验：30%泛影葡胺1ml缓慢静脉注射 链霉素皮试液的配制方法： 链霉素1瓶1g（100万u），加生理盐水至3.5ml溶解后为4ml，则1ml含0.25g （25万u）取0.1ml，加生理盐水至1ml，则1ml含2.5万u 取0.1ml，加生理盐水至1ml，则1ml含2500u 皮注射0.1ml含250万u 精制抗狂犬病血清皮试液的配制方法： 抗血清每支400 IU，取0.1ml，加生理盐水0.9ml，皮注射0.05ml，观察30分钟。 头孢唑啉钠皮试液的配制: 0.5g/瓶头孢唑啉钠加等渗盐水至5ml －→0.1g/ml 取0.1ml瓶加4.9ml等渗盐水至5ml －→2mg/ml 取0.15ml/瓶加4.85ml等渗盐水至5ml －→60μg/ml 取头孢唑啉钠皮试液0.1ml（含6μg）作皮注射，观察20分钟后，判断试验结果。 头孢曲松皮试液的配置: 在1g的头孢曲松钠中加入生理盐水4ml,充分溶化,使每毫升浓度为250 mg/ml。-用1 ml注射器从上液中抽取0.2 ml,加生理盐水至1 ml，使其浓度为50 mg/ml。
实验室常用溶液及试剂配制(重新排版)
实验室常用溶液及试剂配制 一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1 表一普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂配制 表三混合酸碱指示剂配制 表四容量分析基准物质的干燥 表五缓冲溶液的配制 1、氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、氨水-氯化铵缓冲溶液 8、常用缓冲溶液的配制 二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4 1、硝酸银（C AgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（C I2=0.1mol/L）标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠（C Na2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（C HClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（C HCl=0.1mol/L）标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠（C EDTA =0.1mol/L）标准溶液的配制 7、高锰酸钾（C K2MnO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 8、氢氧化钠（C NaOH=1mol/L）标准溶液的配制 三、常见物质的实验室试验方法 ----------------------------------------------------------6 1、柠檬酸（C6H8O7·H2O） 2、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等） 3、氟（Fˉ）含量的测定 4、磷（P）的测定 5、硫酸铜（CuSO4·5H2O） 6、硫酸锌（ZnSO4·H2O） 7、硫酸亚铁（FeSO4·H2O） 8、砷 9、硫酸镁（MgSO4） 四、维生素检测--------------------------------------------------------------------------------8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱
实验室常用溶液的配制
实验室常用溶液的配制 1．30%丙烯酰胺溶液（100ml） 【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于4℃温度。 【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸，因此大于1年的溶液应该被丢弃。 2．40%丙烯酰胺（用于DNA测序，1L） 【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml 的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。置棕色瓶中保存于室温。 【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。 3．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液（1ml） 【配制方法】在0.8ml蒸馏水中溶解60mg ATP，用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水稀释1ml 【注意】分装成小份保存于-70℃ 4．10mol/L乙酸铵溶液（1L） 【配制方法】把770g乙酸铵溶解于800ml蒸馏水中，加水稀释至1L后过滤除菌。在4°C 储存。 【注意】乙酸铵是热不稳定的。不要高压灭菌。 5．10%过硫酸铵溶液（10ml） 【配制方法】把1g过硫酸铵溶于8ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至10ml。该溶液可在4℃保存数周。 6．1mol/L CaCl2溶液（200ml） 【配制方法】称取54g CaCl2·6H2O并溶解在170ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至200 ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃。 【用法】制备感受态细胞时，将等分试样解冻，用蒸馏水稀释至100ml。通过Nalgene过滤器（0.45微米）过滤除菌，并在使用前冷却至0℃。 7．2.5mol/L CaCl2溶液（20ml） 【配制方法】称取13.5g CaCl2·6H2O并溶于15ml蒸馏水中，用蒸馏水补足体积至20ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。 8．脱氧核苷三磷酸（dNTPs）溶液 【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种 dNTP的实际浓度。
常见缓冲溶液配制方法
常见缓冲溶液配制方法 乙醇－醋酸铵缓冲液：取5mol/L醋酸溶液，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至，用水稀释至1000ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液：取氯化钙0.294g，加L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L 盐酸溶液调节pH值至，加水稀释至100ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液：取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至。 乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液，再用水稀释至250ml。 巴比妥缓冲液：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至，滤过。 巴比妥缓冲液：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。 巴比妥－氯化钠缓冲液：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用L盐酸溶液调节pH值至，再用水稀释至500ml。 甲酸钠缓冲液：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至～。 邻苯二甲酸盐缓冲液：取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至，加水稀释至1000ml，混匀。 枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。 枸橼酸盐缓冲液：取％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至。 枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液：甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液与乙液混合，摇匀。 氨－氯化铵缓冲液：取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至。 氨－氯化铵缓冲液：取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氯溶液35ml，再加水稀释至100ml。 硼砂－氯化钙缓冲液：取硼砂0.572g与氯化钙2.94g，加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约调节pH值至，加水稀释至1000ml。 硼砂－碳酸钠缓冲液～：取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml与硼砂溶液27ml，混匀。 硼酸－氯化钾缓冲液：取硼酸3.09g,加L氯化钾溶液500ml使溶解，再加L氢氧化钠溶液210ml。 醋酸盐缓冲液：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至(电位法指示)，用水稀释至100ml，即得。 醋酸－锂盐缓冲液：取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH值至，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取醋酸钠5.1g，加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取无水醋酸钠20g，加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml，加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取醋酸钠18g，加冰醋酸，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取醋酸钠5.4g，加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至，再加水稀释至100ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml。 醋酸－醋酸钾缓冲液：取醋酸钾14g，加冰醋酸，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸铵缓冲液：取醋酸铵7.7g，加水50ml溶解后，加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml。
溶液各种配制
附录：常用试剂配制及应用 一、常用缓冲液、试剂的配制 碳酸盐缓冲液(Carbonate-Bicarbonate Buffer) 由于碳酸盐pH值偏碱，因此，常用于pH>9的缓冲液配制（附表1）。 附表1. 0.2 mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.2～10.7） 磷酸缓冲液(Phosphate Buffers，PB) 磷酸盐是使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值， PO4：pKa1＝2.12，pKa2＝7.21；所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽。NaH 2 HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32。 Na 2 另外，磷酸盐还有钾盐分子形式，一般来说，低温时钠盐难溶，钾盐易溶，因此，配制细胞培养用试剂时常常添加钾盐试剂，但若配制十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用钠盐而不能用钾盐，因为SDS会与磷酸钾生成难溶的十二烷基硫酸钾。 磷酸缓冲液的优点为：①可配制成不同离子强度的缓冲液；②适用pH缓冲范围较宽；③受温度影响缓冲液pH值变化较小；④离子强度对缓冲液pH影响较小，如0.1mol/L缓冲液稀释10倍其pH变化小于0.1。 磷酸缓冲液的缺点是：①磷酸盐易与钙离子（Ca2+）、镁离子（Mg2+）及重金属离子结合生成不溶的沉淀物；②可能干扰某些化学反应过程，如对某些酶的催
化活性具有一定程度的抑制作用。 NaH 2PO 4 的pH值偏酸性，可用作pH<4的缓冲液。 Na 2HPO 4 的pH值偏碱性，可用作pH>10的缓冲液。 而pH＝6～8的中性缓冲液是更常用的缓冲液，需要NaH 2PO 4 与Na 2 HPO 4 两种磷 酸盐混合配制（附表2）。 附表2. 0.2 mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.2） 磷酸盐缓冲溶液（Phosphate-buffered saline, PBS) 磷酸盐缓冲液是在磷酸缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压，因此，PBS适用于做细胞缓冲液，常用PBS配制如下。 NaCl 8g KCl 0.2g Na 2HPO 4 1.44g KH 2PO 4 0.24g
常用溶液的配制方法
常用溶剂的配制方法 1.磷酸缓冲液： 0.15M，pH=7.4磷酸缓冲液： KH2PO4：2.041g+100ml水K2HPO4·3H2O：10.3g+300mL水 两液混合即成400mL，0.15M，pH=7.4的磷酸缓冲液 0.2mol/L 不同pH的磷酸缓冲液：先配制0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液和0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液，然后按下表配制：
2.硼酸缓冲液 0.15M，pH=8.2硼酸缓冲液： 四硼酸钠溶液：2g+35 mL水硼酸溶液：3.246g硼酸+350 mL水 两液混合即成700 mL，0.15M，pH=8.2的硼酸缓冲液 0.2 mol/L（硼酸根），不同pH的硼酸缓冲液：先配制0.2 mol/L的硼酸溶液和0.05 mol/L的四硼酸钠溶液，然后按下表配制： 3.甘氨酸-盐酸缓冲液：0.2 mol/L 0.2 mol/L甘氨酸溶液（15.01g/L）
4.柠檬酸缓冲液：0.1mol/L C6H8O7·H2O:0.1mol/L 溶液为21.01g/L Na3C6H5O7·2H2O：0.1mol/L溶液为29.41g/L
5.Tris-HCl缓冲液：0.1mol/L 100mL0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与一定量的0.1mol/L盐酸混匀，可得0.1mol/L，不同pH的缓冲液。 200mL 0.1M Tris（2.42g）加入0.1M HCl 24mL→pH=9，0.1M Tris-HCl buffer 6.醋酸缓冲液：0.2mol/L 0.2mol/L醋酸钠：27.22g三水醋酸钠（无水的为16.4g）+1L水 0.2mol/L醋酸：11.55mL冰醋酸+1L水
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法(总5 页) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1 -CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（L ） X 毫升 mol/L 甘氨酸+Y 毫升 mol/L HCI ，再加水稀释至200毫升 甘氨酸分子量 = ， mol/L 甘氨酸溶液含克/升。 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（ mol/L ） X 毫升 mol/L 邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl ，再加水稀释到20毫升 邻苯二甲酸氢钾分子量 = ， mol/L 邻苯二甲酸氢溶液含克/升 3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 Na 2HPO 4分子量 = ， mol/L 溶液为克/升。 Na 2HPO 4-2H 2O 分子量 = ， mol/L 溶液含克/升。 C 4H 2O 7 ·H 2O 分子量 = ， mol/L 溶液为克/升。 4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液
①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 ② 5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（ mol/L） 柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量， mol/L溶液为克/升。 柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量， mol/L溶液为克/毫升。 6．乙酸–乙酸钠缓冲液（ mol/L） Na2Ac·3H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。 7．磷酸盐缓冲液 （1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（） Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。 Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。 Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。
最新各种皮试液配制方法
各种皮试液配制方法 1、青霉素80万U/瓶：50u 80万青霉素加生理盐水溶解至4ml；（20万U/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2万U/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2千U/ml） 取上液0.1ml或0.25ml+生理盐水至1ml；（200－500U/ml） 取上液0.1ml作皮试（即20－50U） 2、氨苄西林1g/瓶、氯唑西林1g/瓶、氨苄西林钠氯唑西林钠1g/瓶、阿洛西林舒巴坦钠1g/瓶： 以上所需药物加生理盐水溶解至4ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml） 取上液0.1ml作皮试（即0.05mg） 皮试结果判断同青霉素。 3、氨苄西林钠氯唑西林钠2g/瓶 以上所需药物加生理盐水溶解至8ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml） 取上液0.1ml作皮试（即0.05mg） 皮试结果判断同青霉素。 4、美洛西林舒巴坦钠1.25g/瓶 以上所需药物加生理盐水溶解至5ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml） 取上液0.1ml作皮试（即0.05mg） 皮试结果判断同青霉素。 5、阿莫西林舒巴坦钠1. 5g/瓶、派拉西林舒巴坦钠1.5g/瓶 以上所需药物加生理盐水溶解至6ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml） 取上液0.1ml作皮试（即0.05mg） 皮试结果判断同青霉素。 6、美洛西林0.5g/瓶、派拉西林0.5g/瓶、氨苄西林0.5g/瓶 以上所需药物加生理盐水溶解至2ml；（250mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（25mg/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2.5mg/ml） 取上液0.2ml+生理盐水至1ml；（0.5mg/ml） 取上液0.1ml作皮试（即0.05mg） 皮试结果判断同青霉素。 7、长效西林（苄星青霉素）120万U/瓶： 长效西林+生理盐水5.8ml溶解；（20万U/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2万U/ml） 取上液0.1ml+生理盐水至1ml；（2千U/ml） 取上液0.25ml+生理盐水至1ml；（500U/ml）
常用溶液配制方法题库1-2-10
常用溶液配制方法题 库1-2-10
问题： [单选,A1型题]配制100ml的0.2molL盐酸（36.46molL），已知市售盐酸的浓度为37%，比重1.19，所需盐酸的体积为（） A.1.66L B.1.66ml C.1.98ml D.1.98L E.1.66×10ml
问题： [单选,A1型题]以下关于当量的概念错误的是（） A.当量浓度是指1L溶液中所含溶质的Eq数（1ml溶液中所含溶质的mEq数）表示的浓度，表示为μ B.已知NaOH的分子量为40，计算NaOH当量为40 C.当量浓度的单位可以用1ml溶液中所含溶质的Eq数表示 D.当量的计算方法为分子量与阳离子的价数的比值 当量浓度是指1L溶液中所含溶质的Eq数（1ml溶液中所含溶质的mEq数）表示的浓度。表示为μ，其中体积和Eq数一一对应。
问题： [单选,A1型题]缓冲溶液能够对抗外来少量强酸强碱的原因，错误的是（） A.多元酸的酸式盐及其对应的次级盐，弱碱及其对应的盐，弱酸极其对应的盐所组成的缓冲溶液的作用机制相似 B.以醋酸-醋酸钠缓冲系为例，NaAc是缓冲溶液的抗酸成分 C.以醋酸-醋酸钠缓冲系为例，HAc是缓冲溶液的抗碱成分 D.缓冲作用是有一定限度的，一旦强酸、强碱量过大，缓冲溶液将丧失原有缓冲能力 E.起到缓冲作用的两种以上的组成成分都可以组成缓冲溶液 缓冲溶液可由下列三种成对的组分组成，它们分别是弱酸及其对应的盐，多元酸的酸式盐及其对应的次级盐，弱碱及其对应的盐。 (免费小游戏 https://www.360docs.net/doc/458452791.html,/)
问题： [单选,A1型题]制备75%乙醇，即将75ml纯乙醇加入25ml蒸馏水，因此其百分浓度可计为（） A.重量-重量百分浓度 B.重量-体积百分浓度 C.体积-体积百分浓度 D.体积-重量百分浓度 E.以上均可 百分浓度的标准定义是每100份溶液中所含溶质的份数，用符号（%）表示，其包括重量-重量（gg）即每100g溶液中所含溶质的克数，重量-体积（gml）即100ml溶液中所含溶质的克数，体积-体积百分浓度（mlml）即每100ml溶液中所含溶质的毫升数。其用公式表示为百分浓度=（溶质的份数／溶液的份数）×100%。
缓冲溶液的配制
缓冲溶液 缓冲溶液是一类能够抵制外界加入少量酸和碱的影响，仍能维持pH值基本不变的溶液。该溶液的这种抗pH变化的作用称为缓冲作用。缓冲溶液通常是由一或两种化合物溶于溶剂（即纯水）所得的溶液，溶液内所溶解的溶质（化合物）称之为缓冲剂，调节缓冲剂的配比即可制得不同pH的缓冲液。 缓冲溶液的正确配制和pH值的准确测定，在生物化学的研究工作中有着极为重要的意义，因为在生物体内进行的各种生物化学过程都是在精确的pH值下进行的，而且受到氢离子浓度的严格调控，能够做到这一点是因为生物体内有完善的天然缓冲系统。生物体内细胞的生长和活动需要一定的pH值，体内pH环境的任何改变都将引起与代谢有关的酸碱电离平衡移动，从而影响生物体内细胞的活性。为了在实验室条件下准确地模拟生物体内的天然环境，就必须保持体外生物化学反应过程有体内过程完全相同的pH值，此外，各种生化样品的分离纯化和分析鉴定，也必须选用合适的pH值，因此，在生物化学的各种研究工作中和生物技术的各种开发工作中，深刻地了解各种缓冲试剂的性质，准确恰当地选择和配制各种缓冲溶液，精确地测定溶液的pH值，就是非常重要的基础实验工作。下表列出某些人体体液的pH值： 7.1 基本概念 ⑴Br?nsted-Lowry酸碱理论（又称酸碱质子理论）。1923年由
丹麦化学家J.N.Br ?nsted 和英国化学家T.M.Lowry 同时提出了酸碱质子学说，发展了酸碱理论，被后人称为酸碱质子理论或Br ?nsted-Lowry 酸碱理论。他们认为凡能释放质子的分子或离子（如：H 2O ，HCl ，NH 4+，HSO 4— 等）称为酸，凡能接受质子的分子或离子（如：H 2O ，NH 3，Cl —等）称为碱。因此，一种酸释放质子后即成为碱，称为该酸的共轭碱，同样一种碱与质子结合后，形成对应的酸，称为该碱的共轭酸。 A —H ＋ B — A ＋ B —H 酸1 碱2 碱1 酸2 酸1 是 碱1的共轭酸， 碱2 是 酸2 的共轭碱。 如盐酸在水中的解离： HCl Cl — ＋ H + HCl 是酸，Cl —是它的共轭碱。 ⑵ 缓冲体系的设计： 强电解质溶于水几乎全部解离为正负离子，弱电解质溶于水时，则不完全解离，只有部分的分子解离出正负离子，其馀以分子形式存在于溶液中。例如弱酸（HA ）及其盐溶于水时，只有部分HA 解离为 H + 和 A —离子，其平衡方程式如下： K 1 HA A — ＋ H + (1-1) K2 ][]][[HA A H K a -+= ∴ ][] [][-+=A HA K H a (1-2) (1-2)式两边取负对数： ][] [lg lg ]lg[HA A K H a -+ =＋－－ (1-3) (1-3)式中： [HA] — 为弱酸的浓度 [H +] — 为HA 解离出的氢离子浓度 [A —] — 为HA 的共轭碱的离子浓度 K 1 — 为酸解离的速度常数 K 2 — 为A —与H + 缔合的速度常数