[小学]生化实验考试习题

《生物化学实验》课程期末考试试卷（第1卷）考试专业班级考试形式考试时间120分钟

考试学期考试类型命题教师李峰李荣

一、名词解释题（每题4分，共24分）

1、解链温度

2、层析

3、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳

4、复性

5、蛋白质沉淀

6、双缩脲反应

二、填空题（每空1分，共20分）

1、A、B、C、D、E五种氨基酸，其pI由低到高，设溶液pH在C的等电点，则A带，

B带，C带，D带，E带。

2、测定蛋白质浓度的方法主要有（）、（）、（）。

3、双键DNA热变性后，或在pH2以下，或在pH12以上时，其OD260（），同样条件下，单键DNA的OD260（）。

4、硝酸纤维素膜可结合（）链核酸。将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交，称（）印迹法。

5、变性DNA的复性与许多因素有关，包括（）、（）、（）、（）、（）。

6、利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使它和其他小分子物质分开的方法有（）和（）等。

7、核酸在260nm附近有强吸收，这是由于（）。

8、在分光光度计的使用或检定中，（）的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标，

它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。（）的误差越大，测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。

三、选择（每题2分，共16分）

1、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用属于( )

A 不可逆

B 竞争性

C 非竞争性

2、羟化酶的辅酶是（）

A 硫胺素

B 核黄素

C 吡哆素D维生素C

3、下列哪组反应是错误的？（）

A、葡萄糖——Molish反应

B、胆固醇——Libermann-Burchard反应

C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应

D、氨基酸——茚三酮反应

4、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（）

A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同

B、分子大小不同

C、分子极性不同

D、溶解度不同

5、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？（）

A、茚三酮试剂

B、奈氏试剂

C、双缩脲试剂

D、Folin-酚试剂

6、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？（）

A、天冬氨酸

B、脯氨酸

C、赖氨酸

D、丝氨酸

7、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（）

A、215nm

B、260nm

C、280nm

D、340nm

8、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。已知有些不同的限制酶也可能会切出相同的黏性末端限制酶I的识别序列和切点是一G ↓GATCC 一，限制酶Ⅱ的

识别序列和切点是一↓GATC一。根据图示判断下列操作正确的是（）

A、质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶I切割 C．目的基因和质粒均用限制酶I切割 D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

四、简答题：（每题8分，共40分）

1、紫外分光光度法测定核酸含量的原理。

2、蛋白质变性与沉淀的关系。

3、试述凝胶成像系统操作时应注意的事项。

(完整word版)生物化学实验知识点整理,推荐文档

生物化学实验知识点整理实验一还原糖的测定、实验二粮食中总糖含量的测定 1.还原糖测定的原理 3,5-二硝基水杨酸与还原糖溶液共热后被还原成棕色的氨基化合物,在550nm 处测定光的吸收增加量，得出该溶液的浓度，从而计算得到还原糖的含量 2.总糖测定原理多糖为非还原糖，可用酸将多糖和寡糖水解成具有还原性的单糖，在利用还原糖的性质进行测定，这样就可以分别求出总糖和还原糖的含量 3.电子天平使用 4.冷凝回流的作用：使HCl 冷凝回流至锥形瓶中，防止HCl 挥发，从而降低HCl 的浓度。 5.多糖水解方法：加酸进行水解 6.怎样检验淀粉都已经水解：加入1-2滴碘液，如果立即变蓝则说明没有完全水解，反之，则说明已经完全水解。 7.各支试管中溶液的浓度计算 8.NaOH 用量：HCl NaOH n n = 9.不能中途换分光光度计,因为不同的分光光度计的光源发光强度不同 10.分光光度计的原理：在通常情况下，原子处于基态，当通过基态原子的某辐射线所具有的能量（或频率）恰好符合该原子从基态跃迁到激发态所需的能量（或频率）时，该基态原子就会从入射辐射中吸收能量，产生原子吸收光谱。原子的能级是量子化的，所以原子对不同频率辐射的吸收也是有选择的。这种选择吸收的定量关系服从式/E h hc νλ?==。实验证明，在一定浓度范围内，物质的吸光度A 与吸光样品的浓度c 及厚度L 的乘积成正比，这就是光的吸收定律，也称为郎伯-比尔定律分光光度计就是以郎伯比尔定律为原理，来测定浓度 11.为什么要水解多糖才能用DNS 因为DNS 只能与还原糖溶液在加热的条件下反应生成棕红色的氨基化合物，不能与没有还原性的多糖反应。 12.为什么要乘以0.9 以0.9才能得到多糖的含量。 13.为什么要中和后再测？因为DNS 要在中性或微碱性的环境下与葡萄糖反应实验三蛋白质的水解和纸色谱法分离氨基酸、实验四考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 1.纸色谱分离氨基酸分离原理由于各氨基酸在固定相（水）和流动相（有机溶剂）中的分配系数不同，从而移动速度不同，经过一段时间后，不同的氨基酸将存在于不同的部位，达到分离的目的。 2.天然氨基酸为L 型 3.酸式水解的优点是：是保持氨基酸的旋光性不变，原来是L 型，水解后还是L 型，由于甘氨酸所有的R 基团是氢原子，所以它不是L 型

生化习题及答案

一.选择题 1.唾液淀粉酶应属于下列那一类酶( D ); A 蛋白酶类 B 合成酶类 C 裂解酶类 D 水解酶类 2.酶活性部位上的基团一定是( A ); A 必需基团 B 结合基团 C 催化基团 D 非必需基团 3.实验上,丙二酸能抑制琥珀酸脱氢酶的活性,但可用增加底物浓度的方法来消除其抑制,这种抑制称为( C ); A 不可逆抑制 B 非竟争性抑制 C 竟争性抑制 D 非竟争性抑制的特殊形式 4.动物体肝脏内,若葡萄糖经糖酵解反应进行到3-磷酸甘油酸即停止了,则此过程可净生成( A )ATP; A 0 B －１ C 2 D 3 5.磷酸戊糖途径中,氢受体为( B ); A NAD+ B NADP+ C FA D D FMN 6.高等动物体内NADH呼吸链中,下列那一种化合物不是其电子传递体( D ); A 辅酶Q B 细胞色素b C 铁硫蛋白 D FAD 7.根据化学渗透假说理论,电子沿呼吸链传递时,在线粒体内产生了膜电势,其中下列正确的是( A ); A 内膜外侧为正,内侧为负 B 内膜外侧为负,内侧为正 C 外膜外侧为正,内侧为负 D 外膜外侧为负,内侧为正 8.动物体内,脂酰CoA经β-氧化作用脱氢,则这对氢原子可生成( B )分子ATP; A 3 B 2 C 4 D 1 9.高等动物体内,游离脂肪酸可通过下列那一种形式转运( C ); A 血浆脂蛋白 B 高密度脂蛋白 C 可溶性复合体 D 乳糜微粒 10.对于高等动物,下列属于必需氨基酸的是(B ); A 丙氨酸 B 苏氨酸 C 谷氨酰胺 D 脯氨酸 11.高等动物体内,谷丙转氨酶(GPT)最可能催化丙酮酸与下列那一种化合物反应( D );

生化实验操作考核要点(新)

【实验操作考核要点】一、目的要求 1．掌握组织样品的制备方法，了解其注意事项。 2．了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项，掌握其操作方法。 3．正确操作使用刻度吸管和可调微量移液器。 4．熟练运用溶液混匀的各种方法（视具体情况，采用合适的混匀方法）。 5．正确掌握溶液转移的操作。 6．正确操作使用分光光度计。二、操作考核内容按百分制计。 1．吸量管操作（20分）； 2．可调式微量移液器操作（20分）； 3．溶液混匀操作（视具体情况，采用合适的混匀方法）（15分）； 4．溶液转移操作（10分）； 5．分光光度计比色操作（25分）。 6．整体表现（10分）。三、操作考核标准（一）吸量管操作（20分，每项操作5分） 1．执管要求右手拿吸量管，左手拿橡皮球，只能用食指而不能用拇指按压吸量管上口来调节吸取液量的刻度；吸液、排液整个操作过程吸量管应始终保持垂直。 2．坐姿要求腰、背保持竖直，看刻度时眼睛保持平视。 3．吸取溶液吸量管插入液面深度约0.5cm，不能一插到底，也不能插入过浅而吸进空气致使溶液进入橡皮球内；调控吸量管吸取液量的刻度时，吸量管尖应离开液面靠在容器内壁上。 4．排出液体

吸量管尖应靠上受纳容器内壁，让管内溶液自然流出。不能用橡皮球吹压，而且在流净后吸量管尖停靠受纳容器内壁至少3秒。（二）可调式微量移液器操作（20分，每项操作5分） 1．设定容量值转动加样器的调节旋钮，反时针方向转动旋钮，可提高设定取液量。顺时针方向转动旋钮，可降低设定取液量。在调整设定移液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注意使取液器显示的数值不超过其可调范围。 2．吸液（1）选择合适的吸头安放在取液套筒上，稍加扭转压紧吸嘴使之与套筒之间无空气间隙；（2）把按钮压至第一停点，垂直握持加样器,使吸头浸入液面下2~3毫米处,然后缓慢平稳地松开按钮，吸入液体，等一秒钟，然后将吸头提离液面，贴壁停留2-3秒，使管尖外侧的液滴滑落。 3．放液（1）将吸头口贴到容器内壁底部并保持100°~40°倾斜；（2）平稳地把按钮压到第一停点，等一秒钟后再把按钮压到第二停点以排出剩余液体；（3）压住按钮，同时提起加样器，使吸头贴容器壁擦过，再松开按钮。按吸头弹射器除去吸头。 4．压放按钮时保持平稳；加样器不得倒转；吸头中有液体时不可将加样器平放。取液器吸嘴为一次性使用。实验完毕，将取液器读数调至最大量程值，竖立放于支架上。（三）溶液的混匀（操作流程中下划实线的三处，每项操作5分，共15分）1．肝糖原的提取与鉴定操作中，肝匀浆上清液中加5ml 95%乙醇后的混匀最好用倾倒混匀，也可用滴管或吸量管吸、吹混匀，或用玻璃棒搅拌混匀。 2．肝糖原定量测定中，肝组织消化液沸水浴后全部转入100 ml容量瓶，加水至刻线后的混匀应采用倒转混匀。 3．肝糖原定量测定中，加蒽酮溶液后的混匀，可将试管倾斜约45o再作旋转混匀。因蒽酮溶液（浓硫酸配制）比重大于样品水溶液很多，一加入便沉于管

2015高级生物化学及实验技术试题答案

高级动物生化试题问答题： 1. 简述非编码RNA（non-coding RNA）的种类、结构特点及其主要功能。非编码RNA的种类结构和功能 1tRNA转运RNA（transfer RNA，tRNA）结构特征之一是含有较多的修饰成分，核酸中大部分修饰成分是在tRNA中发现的。修饰成分在tRNA分子中的分布是有规律的，但其功能不清楚。5’末端具有G（大部分）或C。3’末端都以ACC的顺序终结。有一个富有鸟嘌呤的环。有一个反密码子环，在这一环的顶端有三个暴露的碱基，称为反密码子（anticodon）.反密码子可以与mRNA链上互补的密码子配对。有一个胸腺嘧啶环。tRNA具有三叶草型二级结构以及“L”型三级结构，tRNA 的不同种类及数量可对蛋白质合成效率进行调节。tRNA负责特异性读取mRNA中包含的遗传信息，并将信息转化成相应氨基酸后连接到多肽链中。 tRNA为每个密码子翻译成氨基酸提供了结合体，同时还准确地将所需氨基酸运送到核糖体上。鉴于tRNA在蛋白质合成中的关键作用，又把tRNA称作第二遗传密码。tRNA还具有其他一些特异功能，例如，在没有核糖体或其他核酸分子参与下，携带氨基酸转移至专一的受体分子，以合成细胞膜或细胞壁组分；作为反转录酶引物参与DNA合成；作为某些酶的抑制剂等。有的氨酰-tRNA还能调节氨基酸的生物合成。 2rRNA核糖体RNA（ribosomal RNA, rRNA）核糖体RNA是细胞中最为丰富的RNA，在活跃分裂的细菌细胞中占80%以上。

他们是核糖体的组分，并直接参与核糖体中蛋白质的合成。核糖体是rRNA 提供了一个核糖体内部的“脚手架”，蛋白质可附着在上面。这种解释很直接很形象，但是低估了rRNA在蛋白质合成中的主动作用。较后续的研究表明，rRNA并非仅仅起到物理支架作用，多种多样的rRNA可起到识别、选择tRNA以及催化肽键形成等多种主动作用。例如：核糖体的功能就是,按照mRNA的指令将氨基酸合成多肽链。而这主要依靠核糖体识别tRNA 并催化肽键形成而实现。可以说核糖体是一个大的核酶( ribozyme)。而核糖体的催化功能主要是由rRNA来完成的,蛋白质并没有直接参与。 3 tmRNA tmRNA主要包括12个螺旋结构和4个“假结”结构，同时还包括一个可译框架序列的单链RNA结构。tmRNA中H1由5’端和3’端两个末端形成，与tRNA的氨基酸受体臂相似。H1和H2的5’部分之间有一个由10-13nt 形成的环，类似tRNA中的二氢尿嘧啶环，称为“D”环。H3和H4，H6和H7，H8和H9，H10和H11之间分别形成Pk1，pK2，pK3，pK4。H4和H5之间则由一段包含编码标记肽ORF的单链RNA连接。H12由5个碱基对和7nt 形成的环组成，类似tRNA中的TΨC臂和TΨC环，称为“T”环。tmRNA 结构按照功能进行划分可分为tRNA类似域（TLD）和mRNA类似域（MLD），TLD主要包括H1,H2,H12,“D”环和“T”环，MDL则包括ORF和H5，这两部分分别具有类似tRNA和mRNA的功能。tmRNA是一类普遍存在于各种细菌及细胞器（如叶绿体，线粒体）中的稳定小分子RNA。它具有mRNA分子和tRNA分子的双重功能，它在一种特殊的翻译模式——反式翻译模式中发挥重要作用。同时，它与基因的表达调控以及细胞周期的调控等生命过程密切相关，是细菌体内蛋白质合成中起“质量控制”的重要分子之一。识别翻译或读码有误的核糖体，也识别那些延迟停转的核糖体，介导这些有问

生物化学题库及答案.

生物化学试题库蛋白质化学一、填空题 1．构成蛋白质的氨基酸有种，一般可根据氨基酸侧链（R）的大小分为侧链氨基酸和侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两种，它们分别是氨基酸和氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是氨基酸和氨基酸。 2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。 3．丝氨酸侧链特征基团是；半胱氨酸的侧链基团是。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是，除脯氨酸以外反应产物的颜色是；因为脯氨酸是α—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示色。 5．蛋白质结构中主键称为键，次级键有、、、、；次级键中属于共价键的是键。 6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子β亚基的第六位氨酸被氨酸所替代，前一种氨基酸为性侧链氨基酸，后者为性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7．Edman反应的主要试剂是；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是。 8．蛋白质二级结构的基本类型有、、和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的α-螺旋往往会。 9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是和。 10．蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征是、。 11．在适当浓度的β-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。其中β-巯基乙醇可使RNA酶分子中的键破坏。而8M脲可使键破坏。当用透析方法去除β-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为。 12．细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是、。 13．在生理pH条件下，蛋白质分子中氨酸和氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而氨酸、氨酸或氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。 14．包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示为，单个肽平面及包含的原子可表示为。 15．当氨基酸溶液的pH＝pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在；当pH＞pI时，氨基酸

生物化学实验重点试题

一、解词 1、总氮量水中各种形态无机和有机氮的总量 2、酶的抑制作用是指在某个酶促反应系统中，某种低相对分子质量的物质加入后，导致酶活力降低的过程。 3、酶的最适温度酶催化活性最高时的温度 4、蛋白质的等电点每个蛋白都存在一个pH使它的表面净电荷为零即等电点 5、盐析增加中性盐浓度使蛋白质、气体、未带电分子溶解度降低的现象 6、蛋白质变性蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失6、酶的专一性酶对底物及其催化反应的严格选择性通常酶只能催化一种化学反应或一类相似的反应 7、激活剂能提高酶活性的物质大部分是离子或简单的有机化合物 8、抑制剂凡能使酶催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质 9、酶催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体二、填空 1、球蛋白可在半饱和中性硫酸铵溶液中析出，清蛋白可在高盐浓度溶液中析出。 2、在PH3.0、和9.5时的电场中，卵清蛋白（PI4.6）移动方向分别为负移动，正移动。 3、唾液淀粉酶的最适温度是37 4、还原糖与本乃狄试剂共热现象生成生成砖红色沉淀。 5、维生素C也称抗坏血酸，它具有很强还原性 6、用苔黑酚浓盐酸溶液可以鉴定核糖核酸 7、当溶液的PH低于蛋白质等电点时，蛋白质分子带正电荷；当溶液的 PH大于蛋白质等电点时，蛋白质分子带负电荷； 10．凯氏定氮法测定蛋白质含量消化终点颜色为清澈的蓝紫色色。 11．蛋白质变性的实质是空间结构被破坏。 12．常用的RNA提取方法有苯酚法、、高盐法等。 13、维持蛋白质亲水胶体稳定的因素是蛋白质颗粒表面的电荷层和水化膜、 14、蛋白质在等电点时，主要以两性离子离子形式存在；当溶液的P H＞PI 时，蛋白质分子以负离子形式存在；当溶液的P H＜PI时，蛋白质分子带正离子形式存在。 15、蛋白质分子中氮的平均含量为 5.16% ，样品中的蛋白质含量常以测氮量乘以 6.25 、即 6 。三、选择 1、盐析法沉淀蛋白质的原理( ) A 与蛋白质结合成不溶性蛋白盐 B 次级键断裂蛋白质的构象改变 C 中和电荷，破坏水化膜 D 调节蛋白质溶液的等电点 2、以下哪项不是酶的特性（） A 酶是生物催化剂，催化效率极高 B 易受Ph，温度等外界因素的影响 C 能加速化学反应但不改变反应平衡点 D 有高度特异性 3、RNA和DNA的最大紫外吸收值是在（） A 280nm B 260nm C 510nm D 620nm 4、．凯氏定氮法使用的混合催化剂硫酸钾-硫酸铜配比为（） A 1:3 B 5:1 C 3:1 D 1:1

生物化学实验习题及参考答案完整版

生物化学实验习题及参考答案 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】

生物化学实验习题及解答一、名词解释 1、pI； 2、层析； 3、透析； 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳； 5、蛋白质变性； 6、复性； 7、Tm 值； 8、同工酶； 9、Km值； 10、DNA变性；11、退火；12、增色效应二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键（） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的（） A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是（） A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、-巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收（） A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收（） A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查（） A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 8、蛋白质变性是由于（） A、一级结构改变 B、亚基解聚 C、空间构象破坏 D、辅基脱落 9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（） A、胶体性 B、粘性 C、变性作用 D、沉淀作用 10、有关变性的错误描述为（）

生化试题及答案

一、填空题 2．蛋白质分子表面的_电荷层_____和__水化膜____使蛋白质不易聚集，稳定地分散在水溶液中。 5．写出下列核苷酸的中文名称：A TP__三磷酸腺苷__和dCDP_脱氧二磷酸胞苷______。6．结合蛋白质酶类是由__酶蛋白__和__辅助因子____相结合才有活性。 7．竞争性抑制剂与酶结合时，对Vm的影响__不变_____，对Km影响_是增加_____。有机磷杀虫剂中毒是因为它可以引起酶的___不可逆____抑制作用。 8．米氏方程是说明___底物浓度___和__反应速度__之间的关系，Km的定义__当反应速度为最大速度的1/2时的底物的浓度___________。 9．FAD含维生素B2_____，NAD+含维生素____PP________。 12．磷酸戊糖途径的主要生理意义是__生成磷酸核糖__和__NADPH+H_。 13．糖酵解的主要产物是乳酸___。 14．糖异生过程中所需能量由高能磷酸化合物_ATP__和__GTP__供给。 15．三羧酸循环过程的限速酶_柠檬酸合酶__、_异柠檬酸脱氢酶、_a—酮戊二酸脱氢酶复合体。 16．糖酵解是指在无氧条件下，葡萄糖或糖原分解为_乳酸______的过程，成熟的_红细胞____靠糖酵解获得能量。 17．乳糜微粒（CM）在__小肠粘膜细胞__合成，其主要功能是_转运外源性甘油三酯____。极低密度脂蛋白在__肝脏_合成。 18．饱和脂酰CoAβ—氧化主要经过脱氢、_ 加水__、__再脱氢___、__硫解___四步反应。19．酮体是由__乙酰乙酸___、__2---_羟基丁酸____、__丙酮_____三者的总称。 20．联合脱氨基作用主要在__肝____、_肾__、__脑___等组织中进行。 21．氨在血液中主要是以__谷氨酰胺__和__丙氨酸_____的形式被运输的。 22．A TP的产生有两种方式，一种是作用物水平磷_酸化____，另一种_氧化磷酸化____。23．线粒体外NADH的转运至线粒体内的方式有_苹果酸-天冬氨酸_和_a_---磷酸甘油___。24．携带一碳单位的主要载体是_四氢叶酸__，一碳单位的主要功用是_合成核苷酸等______。25．脂肪酸的合成在__肝脏______进行，合成原料中碳源是_乙酰CoA__；供氢体是_NADPH+H_，它主要来自_磷酸戊糖途径____。 26．苯丙酮酸尿症患者体内缺乏__苯丙氨酸氧化_酶，而白化病患者是体内缺乏_酪氨酸____酶。使血糖浓度下降的激素是_胰岛素___。 27．某些药物具有抗肿瘤作用是因为这些药物结构与酶相似，其中氨甲嘌呤（MTX）与__叶酸____结构相似，氮杂丝氨酸与__谷氨酰胺____结构相似。 28．核苷酸抗代谢物中，常见的嘌呤类似物有__6—MP______，常见的嘧啶类似物有__5—FU______。 29．在嘌呤核苷酸从头合成中重要的调节酶是_磷酸核糖焦磷酸激_酶和_磷酸核糖氨基酸转移__酶。 30．生物体物质代谢调节的基本方式是__酶调节___、__激素调节__、_整体水平调节___。31．化学修饰最常见的方式是磷酸化和___脱磷酸化_____。 33．DNA合成的原料是__四种脱氧核糖核苷酸__，复制中需要的引物是_RNA______。34．“转录”是指DNA指导合成__RNA__________的过程；“翻译”是指由RNA指导合成__蛋白质___的过程。 35．在体内DNA的双链中，只有一条链可以转录生成RNA，此链称为__模板链______。另一条链无转录功能，称为__编码链______。 36．阅读mRNA密码子的方向是___5----3_________，多肽合成的方向是___C端---N端___。

生物化学实验练习题及参考答案[1]

生物化学实验一、名词解释：分配层析法电泳同工酶酶活性分光光度法层析技术比活力二、填空题： 1. 测定蛋白质含量的方法有，，和。 2. CAT能把H2O2分解为H2O和O2，其活性大小以来表示，当CAT与H2O2反应结束，再用测定未分解的H2O2。 3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以作为载体的一种区带电泳，这种凝胶是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备_____________胶，其自由基的引发剂是，催化剂是______________；光聚合法适于制备大孔径的_________________胶，催化剂是______________。 4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类，可分成以下几种：_______________，_______________，_______________，_______________和________________。 5. 使用离心机离心样品前，必须使离心管__________且对称放入离心机。 6. 米氏常数可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，表示E对S的亲合力愈，Km愈大，表示E对S 的亲合力愈。 7. 分光光度计在使用之前必须预热，注意预热及样品槽空时必须_________（打开、合上）样品池翻盖。 8. CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植物的密切相关。 9. 纸层析实验中，____________形成固定相，____________流动相。 10. 聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成的，在具有自由基团体系时，两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种：和。11. 层析技术按按固定相的使用形式进行分类，可分成以下几种：_______________，_______________，_______________和________________。三、问答题： 1、简述4种测定蛋白质含量的方法及其原理。 2、简述不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中的三个不连续及三种物理效应。 3、试分析影响电泳的主要因素有哪些？参考答案：生物化学实验一、名词解释： 1、电泳：指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象。 2、同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。 3、分配层析法：用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离目的的一种实验方法。

生化题库及答案

第一章蛋白质的结构与功能一、A型选择题 1、某一溶液中蛋白质的百分含量为55%，此溶液蛋白质含氮量的百分浓度为：A A.8.8％ B. 8.0％ C. 8.4％ D. 9.2％ E. 9.6％ 2、关于肽键的特点哪项叙述是不正确的？D A.肽键中的C—N键比相邻的N—Cα键短 B.肽键的C—N键具有部分双键性质 C.与α碳原子相连的N和C所形成的化学键可以自由旋转 D.肽键的C—N键可以自由旋转 E.肽键中C—N键所相连的四个原子在同一平面上 3、维持蛋白质一级结构的化学键主要是： E A.盐键 B. 二硫键 C. 疏水键 D. 氢键E．肽键 4、蛋白质中的α-螺旋和β折叠都属于： B A.一级结构 B.二级结构 C. 三级结构 D.四级结构E．侧链结构 5、α-螺旋每上升一圈相当于几个氨基酸？ B A．2．5 B．3．6 C．2．7 D．4．5 E．3．4 6、关于蛋白质分子三级结构的叙述哪项是错误的？B A.天然蛋白质分子均有这种结构 B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C.三级结构的稳定性主要由次级键维持 D.亲水基团大多聚集在分子的表面 E.决定盘绕折叠的因素是氨基酸残基 7、关于α-螺旋的论述哪项是不正确的？ D A.α-螺旋是二级结构的常见形式 B.多肽链的盘绕方式是右手螺旋 C.每 3.6个氨基酸残基盘绕一圈 D.其稳定性靠相连的肽键平面间形成的氢键 E.影响螺旋的因素是氨基酸残基侧链的结构与性质 8、具有四级结构的蛋白质特征是： E A．分子中一定含有辅基 B．是由两条或两条以上具有三级结构的多肽链进一步折叠盘绕而成 C．其中每条多肽链都有独立的生物学活性 D．其稳定性依赖肽键的维系E．靠亚基的聚合和解聚改变生物学活性 9、关于蛋白质四级结构的论述哪项是正确的？ E A.由多个相同的亚基组成 B.由多个不同的亚基组成 C.一定是由种类相同而不同数目的亚基组成 D.一定是由种类不同而相同数目的亚基组成 E.亚基的种类和数目均可不同 10、关于蛋白质结构的论述哪项是正确的？ A A．一级结构决定二，三级结构B．二，三级结构决定四级结构 C．三级结构都具有生物学活性D．四级结构才具有生物学活性 E．无规卷曲是在二级结构的基础上盘曲而成 11、蛋白质的一级结构及高级结构决定于： D A．分子中氢键B．分子中盐键C．分子内部疏水键 D．氨基酸的组成及顺序E．氨基酸残基的性质 12、关于β-折叠的论述哪项是错误的？ C A．β-折叠是二级结构的常见形式B．肽键平面折叠呈锯齿状排列 C．仅由一条多肽链回折靠拢形成D．其稳定靠肽链间形成的氢键维系

生化设计实验

蛋白质与核酸的定性与定量一.实验目的 1.学习和掌握纯化蛋白质的原理和方法、蛋白质等电点的测量原理和方法。 2.掌握使用双缩脲法对蛋白质的定性测定。 3.学会利用定糖法对核酸的定性与定量测定二.实验原理 1.区分蛋白质和核酸：蛋白质在碱性溶液中可与Cu2+紫红色反应。这是蛋白质分子中肽键的反应，肽键越多反应颜色越深。核酸由单核苷酸所组成，无此反应。另外，核酸组成成分嘌呤及嘧啶碱基具有强烈的紫外吸收，所以核酸也具有强烈的紫外吸收，最大吸收值在260mn，利用这一性质亦可鉴别核酸样品和蛋白质样品。 2.蛋白质的纯化方法：（1）粗分离：中性盐对蛋白质胶体的稳定性有显著的影响。一定浓度的中性盐可破坏蛋白质胶体的稳定因素而使蛋白质盐析沉淀。盐析沉淀的蛋白质一般保持着天然构象而不变性。（2）蛋白质类别及分子量的确定：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术测定样液中含有几种蛋白质，每种蛋白质的分子量大小。由于SDS 是阴离子，使多肽表面覆盖的负电荷远远超过蛋白质分子原有的电荷量，消除了原来的电荷差异。改变了蛋白质单体分子的构象，不同蛋白质的SDS复合物的短轴长度都相同，长轴长度随其分子量的大小

成正比变化。（3）蛋白质的精制：根据上一步骤得到的蛋白质的分子量，采用葡聚糖凝胶层析的方法。聚糖凝胶层析，是使待分离物质通过葡聚糖凝胶层析柱，各个组分由于分子量不相同，在凝胶柱上受到的阻滞作用不同，而在层析柱中以不同的速度移动。分子量大于允许进入凝胶网孔范围的物质完全被凝胶排阻，不能进入凝胶颗粒内部，阻滞作用小，随着溶剂在凝胶颗粒之间流动，因此流程短，而先流出层析柱；分子量小的物质可完全进入凝胶颗粒的网孔内，阻滞作用大，流程延长，而最后从层析柱中流出。若被分离物的分子量介于完全排阻和完全进入网孔物质的分子量之间，则在两者之间从柱中流出，由此就可以达到分离目的。 3.蛋白质的含量测定以及等电点、比旋度等性质（1）蛋白质的含量测定：采用Folin-酚试剂法。蛋白质中有带酚基的酪氨酸，故能与试剂乙反应而呈蓝色，蓝色深浅与蛋白质溶度相关，在一定溶度范围内呈线性关系，因此可做比色测定。（2）等电点与比旋度。蛋白质分子的解离状态和解离程度受溶液的酸碱度影响。当溶液的PH达到一定数值时，蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等，在电场中，蛋白质既不向阴极移动，也不向阳极移动，此时溶液的pH值称为此种蛋白质的等电点。不同蛋白质各有特异的等电点。在等电点时，蛋白质的理化性质都有变化，可利用此种性质的变化测定各种蛋白质的等电点。最常用的方法是测其溶解度最低时的溶液pH值。蛋白质的比旋度可用旋光仪。

12级生物化学实验2期末复习题-考试

生物化学实验（2）理论习题一、名词解释题 1、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）：在样品介质和聚丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后，蛋白质亚基的点泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小，而电荷因素可以被忽略。当蛋白质的分子量在15KD到200KD之间时，电泳迁移率与分子量的对数呈线性关系，可以用来测定蛋白质亚基的分子量。 2、电泳：带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动，称为电泳 3、层析分离技术：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度分布在两个相中。 4、吸附色谱法：利用同一吸附剂对混合物中不同成分吸附能力的差异，从而使各成分达到分离目的的色谱法。 5、离子交换层析：以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。 6、分配层析：根据一种或多种化合物，在两种不相

融合的溶剂间的分配来分离物质的方法。 7、亲和层析：是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。是近年来发展的纯化酶和其他高分子的一种特殊的层析技术。 8、凝胶层析（凝胶色谱）：混合物随流动相经过凝胶层析柱时，由于各组分流经体积的差异，使不同分子量的组分得以分离的层析方法。 9、电渗作用：指在电场作用下液体(通常是水)相对于和它接触的固定的固体相作相对运动的现象。 10、担体：担体是一种化学惰性的，多孔性的固体微粒，能提供较大的惰性表面，使固定液以液膜状态均匀地分布在其表面。 11、死时间：从进样到惰性气体峰出现极大值的时间称为死时间.。 12、保留时间：被分离样品组分从进样开始到柱后出现该组分浓度极大值时的时间，也即从进样开始到出现某组分色谱峰的顶点时为止所经历的时间，称为此组分的保留时间。 13、高效液相色谱法：，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，

2015年中考生化实验操作考题目

2015年中考生物、化学实验操作试题一、观察根尖的结构实验要求 1、熟练正确使用光学显微镜，在低倍镜下观察根尖纵切的永久切片。 2、识别根尖的基本结构，正确指出成熟区。材料器具显微镜、植物根尖纵切永久切片、擦镜纸、纱布。注：出现评分细则外的错误操作扣1分，造成严重后果扣2分

二、制作并观察洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片 1、熟练正确制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片。 2、正确使用显微镜，在低倍镜下对装片进行观察。材料用具显微镜、胶头滴管、载玻片、盖玻片、刀片、镊子、解剖针、白瓷盘、碘液、吸水纸、擦镜纸、清水、干净纱布、洋葱鳞片叶

注：出现评分细则外的错误操作扣1分，造成严重后果扣2分三、用显微镜观察番茄果肉细胞实验要求 1、熟练正确制作番茄果肉细胞临时装片。 2、正确使用显微镜，在低倍镜下对装片进行观察。材料用具显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、白瓷盘、胶头滴管、清水、纱布、擦镜纸、吸水纸、番茄实验操作规则及评分标准注：出现评分细则外的错误操作扣1分，造成严重后果扣2分

四、观察种子的结构实验要求 1、观察大豆、玉米种子外形，识别种子的基本结构，指出大豆种子的种脐。 2、熟练处理、和解剖大豆和玉米种子，按照正确的程序观察种子的结构。依据观察绘出大豆种子胚示意图并标出各部分名称。指出玉米种子纵剖面的胚和胚乳。材料用具

五、制作叶片的临时切片 1、熟练正确制作叶片临时切片。 2、正确使用显微镜，在低倍镜下对装片进行观察。材料用具显微镜、白瓷盘、滴管、载玻片、盖玻片、双面刀片（每组2片；两片并齐，一侧用胶布粘牢）、镊子、盛有清水的培养皿、纱布、清水、吸水纸、擦镜纸、新鲜植物（菠菜、油菜等）的叶片实验操作规则及评分标准

生化实验思考题参考标准答案

生化实验讲义思考题参考答案实验一淀粉的提取和水解 1、实验材料的选择依据是什么？答：生化实验的材料选择原则是含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低。从科研工作的角度选材，还应当注意具体的情况，如植物的季节性、地理位置和生长环境等，动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和生理状态等，微生物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。 2、材料的破碎方法有哪些？答：(1) 机械的方法：包括研磨法、组织捣碎法； (2) 物理法：包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等； (3) 化学与生物化学方法：包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。实验二总糖与还原糖的测定 1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定方法各有何优缺点？答: 我们采用的是碱性铜试剂法中的间接法测定还原糖的含量。间接法的优点是操作简便、反应条件温和，缺点是在生成单质碘和转移反应产物的过程中容易引入误差；直接法的优点是反应原理直观易懂，缺点是操作较复杂，条件剧烈，不易控制。实验五粗脂肪的定量测定─索氏提取法（1）本实验制备得到的是粗脂肪，若要制备单一组分的脂类成分，可用什么方法进一步处理？答：硅胶柱层析，高效液相色谱，气相色谱等。（2）本实验样品制备时烘干为什么要避免过热? 答：防止脂质被氧化。实验六蛋白质等电点测定 1、在分离蛋白质的时候，等电点有何实际应用价值？答: 在等电点时，蛋白质分子与分子间因碰撞而引起聚沉的倾向增加，所以处于等电点的蛋

白质最容易沉淀。在分离蛋白质的时候，可以根据待分离的蛋白质的等电点，有目的地调节溶液的pH使该蛋白质沉淀下来，从而与其他处于溶液状态的杂质蛋白质分离。实验七氨基酸的分离鉴定－纸层析法 1、如何用纸层析对氨基酸进行定性和定量的测定？答: 将标准的已知氨基酸与待测的未知氨基酸在同一张层析纸上进行纸层析，显色后根据斑点的Rf值，就可以对氨基酸进行初步的定性，因为同一个物质在同一条件下有相同的Rf 值；将点样的未知氨基酸溶液和标准氨基酸溶液的体积恒定，根据显色后的氨基酸斑点的面积与点样的氨基酸质量成正比的原理，通过计算斑点的面积可以对氨基酸溶液进行定量测定。 3、纸层析、柱层析、薄层层析、高效液相层析各有什么特点？答: 实验八蛋白质含量的测定 (1) 简述紫外分光光度法测定蛋白质浓度的原理及优点。答：原理：由于蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，因此蛋白质具有吸收紫外线的性质，吸收高峰在280 nm波长处。在此波长范围内，蛋白质溶液的光吸收值（OD280）与其含量呈正比关系，可用作定量测定。优点：迅速、简便、不消耗样品，低浓度盐类不干扰测定。

(完整版)生物化学试题及答案(4)

生物化学试题及答案( 4) 第四章糖代谢【测试题】一、名词解释 1．糖酵解( glycolysis ) 2．糖的有氧氧化 3．磷酸戊糖途径 4．糖异生( glyconoegenesis) 5．糖原的合成与分解6．三羧酸循环( krebs 循环) 7．巴斯德效应(Pastuer 效应) 8．丙酮酸羧化支路 9．乳酸循环( coris 循环) 10．三碳途径二、填空题 21．葡萄糖在体内主要分解代谢途径有22．糖酵解反应的进行亚细胞定位是在23．糖酵解途径中仅有的脱氢反应是在底物水平磷酸化反应分别由 11．糖原累积症 12．糖酵解途径 13．血糖(blood sugar) 14．高血糖(hyperglycemin) 15．低血糖 (hypoglycemin) 16．肾糖阈 17．糖尿病 18．低血糖休克 19．活性葡萄糖 20．底物循环、和，最终产物为。酶催化下完成的，受氢体是酶和酶催化。 24．肝糖原酵解的关键酶分别是、和丙酮酸激酶。 25．6—磷酸果糖激酶—1最强的变构激活剂是，是由6—磷酸果糖激酶— 2 催化生成，该酶是一双功能酶同时具有和两种活性。 26．1 分子葡萄糖经糖酵解生成分子ATP，净生成分子ATP，其主要生理意义在于。 27．由于成熟红细胞没有，完全依赖供给能量。 28．丙酮酸脱氢酶复合体含有维生素、、、和。 29．三羧酸循环是由与缩合成柠檬酸开始，每循环一次有次脱氢、 - 次脱羧和次底物水平磷酸化，共生成分子ATP。 30．在三羧酸循环中催化氧化脱羧的酶分别是和。 31．糖有氧氧化反应的进行亚细胞定位是和。1 分子葡萄糖氧化成CO2和H2O 净生成或分子ATP。 32．6—磷酸果糖激酶—1有两个ATP结合位点，一是ATP 作为底物结合，另一是与 ATP亲和能力较低，需较高浓度ATP才能与之结合。 33．人体主要通过途径，为核酸的生物合成提供。 34．糖原合成与分解的关键酶分别是和。在糖原分解代谢时肝主要受的调控，而肌肉主要受的调控。 35．因肝脏含有酶，故能使糖原分解成葡萄糖，而肌肉中缺乏此酶，故肌糖原分解增强时，生成增多。 36．糖异生主要器官是，其次是。 37．糖异生的主要原料为、和。 38．糖异生过程中的关键酶分别是、、和。 39．调节血糖最主要的激素分别是和。

生物化学实验习题及参考答案

生物化学实验习题及解答一、名词解释 1、pI：指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值，用符号pI表示。 2、层析：按照在移动相和固定相（可以是气体或液体）之间的分配比例将混合成分分开的技术。 3、透析：通过小分子经过半透膜扩散到水（或缓冲液）的原理，将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳：在去污剂十二烷基硫酸钠存在下的聚丙烯酰氨凝胶电泳。SDS-PAGE 只是按照分子的大小，而不是根据分子所带的电荷大小分离的。 5、蛋白质变性：生物大分子的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象。蛋白质在受到光照，热，有机溶济以及一些变性济的作用时，次级键受到破坏，导致天然构象的破坏，使蛋白质的生物活性丧失。 6、复性：在一定的条件下，变性的生物大分子恢复成具有生物活性的天然构象的现象。

7、Tm 值：核酸分子变性过程中，紫外吸收达到最大增量一半时的溶解温度。 8、同工酶：能催发相同的反应类型但其理化性质及免疫学性质不同的酶。 9、Km值：反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。是酶的特征物理学常数之一。近似表示酶与底物的亲和力。 10、DNA变性：DNA双链解链，分离成两条单链的现象。 11、退火：既DNA由单链复性、变成双链结构的过程。来源相同的DNA单链经退火后完全恢复双链结构的过程，同源DNA之间`DNA和RNA之间，退火后形成杂交分子。 12、增色效应：当双螺旋DNA熔解（解链）时，260nm 处紫外吸收增加的现象。二、基础理论单项选择题 1、A； 2、C； 3、B； 4、A； 5、A； 6、B； 7、B； 8、C； 9、D；10、A；11、A；12、D；13、A； 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（）

生化实验2考试题库答案(答案任老师已经核对)

生物化学实验（2）理论习题一、名词解释题 1、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）：是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。在样品介质和聚丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和还原剂后，蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小，而电荷因素可以被忽略，当蛋白质的分子量在15KD到200KD时，电泳迁移率与分子量的对数呈线性关系，可以用来测定蛋白质亚基的分子量。 2、电泳：带电粒子在直流电场中向着所带电性相反的电极移动的现象。 3 4、吸附色谱法：，利用同一吸附剂对混合物中各组份的吸附能力的差异，从而使各组分达到分离的目的。 5 6、分配层析：是根据一种或者多种化合物，在两种不相混合的溶剂间的分配来分离物质的方法，相当于一种连续液一液猝取法。 8、：凝胶层析（凝胶色谱）：混合物随着流动相经过凝胶层析柱时，由于各组分流经体积的差异，使不同分子量的组份得以分离的方法。 9 10 态均匀地分布在其表面。 11、死时间：死时间（dead time）,从进样到惰性气体峰出现极大值的时间称为死时间. （所谓惰气指的是与色谱固定相无相互作用的组分，也就是说它能与进样瞬间的载气同时进入检测器。所以惰气出峰时间反映载气流过系统的时间。载气流速一定，此时间不变，故称死时间。）12、保留时间：被分离样品组分从进样开始到柱后出现该组分浓度极大值时的时间，也即从进样开始到出现某组分色谱峰的顶点时为止所经历的时间，称为此组分的保留时间，用RT表示，常以分（min）为时间单 13 二、填空题

1、蛋白质分离常用的色谱法有（凝胶色谱法），（离子交换色谱），（高效液相色谱）和（亲和色谱法）。 2、离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有（离子强度梯度）和（pH梯度）。 3、根据分离机理的不同，色谱法可分为（吸附色谱），（离子交换色谱），（凝胶色谱），（分配色谱）和（亲和色谱）。 4、聚丙烯酰胺凝胶由（单体丙烯酰胺）和（甲叉（或亚甲基）双丙烯酰胺）聚合而成，聚合时以（过硫酸铵）为催化剂，以（四甲基乙二胺）为加速剂。 5、离子交换树脂主要分为（阳离子交换树脂）和（阴离子交换树脂）两类 6、气相色谱仪的核心部件是（色谱柱）。 7、SDS-PAGE电泳中，SDS的作用是（使蛋白质变性），β-巯基乙醇的作用是（破坏蛋白质的二硫键）。 8、不连续体系的SDS-PAGE电泳分离蛋白质时，具有（电荷效应）、（分子筛效应）、（浓缩效应）三种效应。 9、食品中亚硝酸盐含量测定中，硼砂主要起到（提取亚硝酸盐）和（沉淀蛋白质）的作用。 10、亚硝酸盐提取过程中，加入的亚铁氰化钾及硫酸锌的作用是（沉淀蛋白质）。 11、亚硝酸盐作为食品添加剂允许在食品加工中限量使用，具有（防腐或抑菌）、（增色）、和产生风味的作用。 12、亚硝酸盐提取过程中，制作标准曲线时，先在弱酸条件下在亚硝酸盐中加入（对氨基苯磺酸），然后再加入（盐酸萘乙二胺），偶合形成（紫红色）染料后，用分光光度法进行测定。13、凝胶层析中，先被洗脱下来的是相对分子质量（大）的分子，而SDS-PAGE中跑的快的是相对分子质量（小）的分子。三、选择题 1、下面关于SDS的说法正确的是：（ A ） A、常用的变性剂 B、常用的提取试剂 C、常用的盐析剂 D、常用的萃取剂 2、琼脂糖凝胶孔径由（ B ）决定的 A、交联度 B、琼脂糖浓度 C、琼脂糖密度 D、颗粒大小 3、HPLC是哪种色谱的简称：（ C ）： A、离子交换色谱 B、气相色谱 C、高效液相色谱 D、凝胶色谱 4、针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是：（ C ） A、凝胶过滤 B、离子交换层析 C、亲和层析 D、纸层析 5、盐析法沉淀蛋白质的原理是：（ B ）