淋巴细胞分型意义
人体的免疫细胞包括T细胞和B细胞。T细胞管细胞免疫。CD4是辅助T细胞表面的一种标记。CD8是抑制性T细胞的一种标记。
CD4/CD8增高，表示辅助性T细胞高于抑制性T细胞，说明免疫力好.CD3是所有总T细胞，CD3高表示总T细胞较高。CD4/CD8和CD3都高，是由于辅助性CD4细胞增高，因而总的T细胞也增高。是机体免疫力好的表现。
CD和CDT淋巴细胞检测
C D和C D T淋巴细胞 检测 集团档案编码：[YTTR-YTPT28-YTNTL98-UYTYNN08]
CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测?? ? 1? 范围 本章规定了用多平台三级程序法和单平台一步法检测全血中的CD4+ 和 CD8+ T淋巴细胞。 ? 2?? 规范性引用文件 1997 Revised Guidelines for Performing CD4+ T-Cell Determinations in Persons Infected with Human Immunodeficiency Virus (HIV) MMWR 46(RR-2);1-29 Publication date: 01/10/1997。 ? 3? 实验室条件 3.1 人员 进行HIV感染者CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测的人员须具有艾滋病实验室的上岗资格，并接受过省级以上艾滋病实验室安全及实验操作技术培训。 3.2? 设施和设备 3.2.1? 样品处理区：生物安全柜、离心机、冰箱、水浴箱、旋转振荡器、精确移液器（5μl~50μl、20μl~200μl、200μl~1000μl）。 3.2.2? 流式细胞仪检测区：流式细胞仪 3.3? 功能分区 实验室原则上应分为样品处理区和流式细胞仪检测区,各区的功能是： 3.3.1? 样品处理区应达到生物安全Ⅱ级（BSL-2）实验室要求，用于样品处理、流式检测样品制备。 3.3.2? 流式细胞仪检测区用于制备好的样品上机检测。
? 4? 样品采集、运输和接收 4.1? 样品的采集 4.1.1? 选择合适的抗凝剂，分别用于血液学检测和流式细胞仪的免疫表型检测。 4.1.1.1? 用于血液学检测的抗凝剂 （1） EDTA（1.5±0.15mg/ml血液）。 （2）在血球分析仪生产商允许的时间范围内检测，不超过30h，不检测超出抗凝时间范围的样品。 4.1.1.2? 用于流式细胞仪免疫表型检测的抗凝剂 （1）用K3EDTA抗凝，收集样品应在30h以内，尽早（8h以内）处理。 （2）用ACD或肝素抗凝，收集样品在48h以内，尽早（8h以内）处理。 4.1.2? 静脉采血收集血样，将血液注入一个事先加入适当抗凝剂的试管（用真空试管）。 4.1.2.1? 当收集儿童样品时，采用儿童用注射器、小试管。 4.1.2.2? 采血后立即握住试管两端，颠倒混匀数次，将血液与抗凝剂混匀，以防止凝固。 4.1.3? 准备适当数量的样品管 4.1.3.1? 当同一样品的血球检测和流式细胞仪免疫表型检测在不同实验室内进行时，用2个装有K3EDTA的试管即可。 4.1.3.2? 在所有其它条件下用2个试管（用K3EDTA作血球检测，用K3 EDTA、ACD或肝素作流式细胞仪免疫表型检测）。 4.1.4 ?对所有样品编号，并写明日期和收集时间。 4.2? 样品运输
刘霆-恶性淋巴瘤WHO分型
恶性淋巴瘤WHO分型---以病理学为基础的治疗策略World Health Organization Classification of Malignant Lymphoma: Therapeutic Strategies Based on Pathology 四川大学华西医院血液科刘霆 【关键词】恶性淋巴瘤，WHO分型，病理学，治疗 近年来，随着病理学、免疫学、遗传学和分子生物学的发展，对恶性淋巴瘤（malignant lymphoma，ML）疾病的特征有了更深入的认识，根据其病理组织学结构特征和淋巴瘤细胞的生物学特性的差异，将ML分为霍奇金淋巴瘤（Hodgkin’s lymphoma，HL）和非霍奇金淋巴瘤（Non-Hodgkin’s lymphoma，NHL）两大类，二者在发病率、临床经过、治疗及预后等方面存在明显差异。两大类淋巴瘤进而还可细分为不同的组织学亚型，每一种病理类型有各自的形态学和免疫学表现、遗传学特征、特殊的临床特点和预后。因此，正确的病理分型是临床诊断、制定治疗方案和判断预后的重要前提，以病理学为基础的治疗策略已成为当今淋巴瘤治疗的趋势。 一、霍奇金淋巴瘤病理分型演进 自Thomas Hodgkin1832年正式命名霍奇金氏病（Hodgkin’s disease，HD）以来，由于其病理形态的多样性，以及瘤组织中存在混杂的反应性细胞，长期以来对其特征性的异常细胞“里-斯细胞（Reed-Sternberg cell，RS）”的性质和起源存在争论，故近170年来一直沿用“霍奇金氏病”的名称。1994年Martin-Leo Hansmann，和1995年Harald Stein分别在霍奇金氏病患者瘤组织分离的里-斯细胞中检测到免疫球蛋白重链基因重排和免疫球蛋白可变区（IgV）的高度突变，证实了霍奇金氏病肿瘤细胞来源于生发中心阶段的克隆性B淋巴细胞。典型RS细胞的表型特征为：CD30、CD15、CD40阳性；而CD45阴性；CD20在40%的病例阳性，B细胞特异激活蛋白（B-cell specific activator protein, BSAP）阳性。 1966年的Rye分类法从病理形态学上将HD分为四个类型：淋巴细胞优势型、结节硬化型、混合细胞型、以及淋巴细胞消减型。Rye分类简单实用，目前仍被广泛使用。1994年欧美修订的REAL分类法将HD分为淋巴细胞为主型（lymphocyte predominance）和经典型（classical Hodgkin’s disease）两大类。经典型中包含富淋巴细胞型（lymphocyte-rich classical）、结节硬化型（nodular sclerosis）、混合细胞型（mixed cellularity）、和淋巴细胞消减型（lymphocyte depletion）四个亚型。1997年和2000年的WHO分类法基本沿用了REAL分类，但有两处重要改变：①将霍奇金氏病（HD）正式改称为霍奇金淋巴瘤（HL）；②明确地将结节性淋巴细胞为主型（nodular lymphocyte predominance Hodgkin’s lymphoma）作为独立的类型从淋巴细胞为主型中分出，其余的沿用REAL分类中经典型的分类。见表1。 表1 WHO 霍奇金淋巴瘤分类（2000） 结节性淋巴细胞为主型（nodular lymphocyte predominance Hodgkin’s lymphoma，NLPHL ） 经典型（classical Hodgkin’s lymphoma，CHL） 1.富淋巴细胞的经典型（lymphocyte-rich classical Hodgkin’s lymphoma，LRCHL） 2.结节硬化型（nodular sclerosis Hodgkin’s lymphoma，NSHL） 3.混合细胞型（mixed cellularity Hodgkin’s lymphoma，MCHL） 4.淋巴细胞消减型（lymphocyte depletion Hodgkin’s lymphoma，LDHL）
急性淋巴细胞白血病诊疗常规
急性淋巴细胞白血病诊疗常规 一、急性淋巴细胞白血病(ALL) 的诊断及分型 (一) ALL 基本诊断依据 1、临床症状、体征:有发热、苍白、乏力、出血、骨关节疼痛,有肝、脾、淋巴结肿大 等浸润灶表现。 2、血象改变:血红蛋白及红细胞计数降低,血小板减少,白细胞计数增高、正常或减低, 分类可发现不等数量的原、幼淋巴细胞或未见原、幼淋巴细胞。 3、骨髓形态学改变: 是确诊本病的主要依据。骨髓涂片中有核细胞大多呈明显增生或极度增生,仅少数呈增生低下,均以淋巴细胞增生为主,原始+幼稚淋巴细胞必须≥30% 才可确诊为ALL 。除了对骨髓涂片作瑞氏染色分类计数并观察细胞形态改变外,应该做过氧 化酶(POX) 、糖原(PAS) 、非特异性酯酶(NSE)等细胞化学染色检查,以进一步确定异常细胞性质并与其他类型的白血病鉴别。 (二) ALL 的M IC 分型 除了临床及细胞形态学(M) 诊断以外,还应该用单克隆抗体作免疫分型(I) 及细胞遗传 学C) 检查,即M I C 分型诊断,尽可能作分子遗传学/融合基因(molecular genetics,M ) 检测, 即M ICM 分型。 1、细胞形态学分型:淋巴细胞型按FAB 分型标准分为L1、 2 和L3 型,但L1、2 型之间已不具有明显的预后意义。 2、免疫分型:分为T、B型二大系列: (1) T系急性淋巴细胞白血病(T-ALL) :具有阳性的T 淋巴细胞标志,如CD1 、CD2、CyCD3 、CD4 、CD5 、CD7 、CD8 以及TdT 等。(2) B 系急性淋巴细胞白血病(B 系ALL) :根据其对 B 系淋巴细胞特异的单克隆抗体标志反应的表现临床分为 3 个亚型: ①早期前 B 型急性淋巴细胞白血病(early Pre B2ALL) , CD79a、CD19 和(或) CyCD22 、CD10 及HLA2DR 阳性, Sm Ig、CyIg 阴性; ②前 B 型急性淋巴细胞白血病(Pre B2ALL) , CyIg 阳性, Sm Ig 阴性,其他 B 系标志CD79a 、CD19 、CD20 、CD10 、CyCD22 以及HLA2DR 常为阳性; ③成熟 B 型急性淋巴细胞白血病(B2ALL) , Sm Ig 阳性, 其他 B 系标志CD79a 、CD19、CD22 、CD10、CD20 以及HLA2DR 常为阳性。 此外,尚可见伴有髓系标志的ALL (My 2ALL) : 具淋巴系的形态学特征表现,以淋巴系特 异的抗原标志表达为主,但伴有个别、次要的髓系特征的抗原标志(CD13、CD33 或CD14等) 。 3、细胞遗传学改变: (1)染色体数量改变:有≤45 条染色体的低二倍体和≥47条染色体的高二倍体。(2) 染色体核型改变: 与ALL 预后有利的核型异常有: t (12; 21) / AML12TEL (ETV62CBFA2) 融合基因; 与ALL 预后不利的核型异常有: t(9; 22) /BCR2ABL 融合基因; t(4; 11) /MLL2AF4 融合基因及其他MLL 基因重排。 (三)临床危险度分型 1、与儿童ALL 预后确切相关的危险因素: (1) 年龄在< 12 个月的婴儿白血病或≥10 岁的年长儿童。 (2) 诊断时外周血白细胞计数≥50 ×10 /L。 (3) 诊断时已发生中枢神经系统白血病(CNSL)或睾丸白血病(TL) 者。 (4) 免疫表型为T 细胞白血病。 (5) 不利的细胞遗传学特征:染色体数目为<45 的低二倍体, t (4; 11) /MLL2AF4 融合 基因或其他MLL 基因重排,或t (9; 22) /BCR2ABL 融合基因异常。 (6) 早期治疗反应不佳者:泼尼松诱导试验60 mg/ (m ·d) , ×7 d，第8 天外周血幼 稚淋巴细胞≥1 ×10 /L (1000/ μl) ,定为泼尼松不良效应者(PPR) ,和(或) 标准方案联
全血淋巴细胞亚群免疫分型
全血淋巴细胞亚群免疫分型 背景知识 即使在早期通过形态学特征来区分不同功能的淋巴细胞的检测中，对直接识别和计数方法的研究一直在进行。吸附方法在历史上有重要地位，这个方法首次假设了通过一些新的分子探针来检测膜上的受体或配体来识别细胞。单克隆抗体被证明是检测这种表面分子极其有效的探针；此后CD 命名协会统一命名了与这些表面分子结合的种类繁多的抗体。将单克隆抗体进行荧光标记后与白细胞反应，然后在流式细胞仪上检测，这个基本步骤使流式细胞仪在临床实验室中应用被大大拓宽。对外周血淋巴细胞免疫分型在诊断和分型免疫缺陷性疾病中意义重大。如检测与X染色体相关丙球蛋白贫乏症患者外周血淋巴细胞CD19、CD20和CD21时，会发现在疾病状态中的患者不存在成熟B淋巴细胞（CD19+，CD20+，CD21）。另一个例子是分析CD43的表达，它在Wiskott-Aldrich 综合症患者的淋巴细胞的表达降低。区分严重的联合免疫缺陷症病例，是通过患者淋巴细胞表面CD3、CD4、CD8和CD38的表达来将新诊断病例来进行的。进一步的有关淋巴细胞分型在免疫缺陷症在临床中的应用请参阅其他文献资料(Keren et al., 1994)。HIV病毒感和获得性免疫缺乏综合症，是流式细胞仪免疫分型外周血淋巴细胞运用最为广泛的适用病种。CD4阳性T细胞是HIV感染的主要靶分子，通过几种机制它们被催毁,并且其数量随着疾病的进程而下降。根据一些学术机构的报告，临床上对潜在的感染危协而进行的抗病毒或预防治疗决定，是依据对CD4+T细胞的计数而做出的；因此对这些病人的淋巴细胞亚群的精确检测就显得十分重要。毫无疑问，全球数量不断增加的HIV/AIDS病人和对CD4+T细胞快速而精确检测的需要使得流式细胞仪使用在临床实验室中日益广泛。这一点很好地解释了为什么为这个单一应用发展了相关的试剂和仪器，和一些针对CD4+T细胞检测的标准化程序。外周血淋巴细胞免疫分型被证明在诊断患有某些慢性淋巴细胞增生性疾病的患者中有重要作用；特别是B细胞性慢性淋巴细胞白血病，此类样本中可以通过B 细胞表面κ 和λ免疫球蛋白轻链的异常表达而识别出肿瘤细胞。对骨髓细胞免疫分型可确定慢性B淋巴细胞白血病的亚型(Loken et al., 1990; Ruiz-Argüelles et al.,1998)。在使用移植药物后，T细胞的亚群会发生改变，特别是CD4+T细胞会因为免疫抑制而有特异性的改变。病人在服用咪唑硫嘌呤或环孢霉素后CD4+和CD29+T细胞数量会下降，而CD4和CD45RA阳性的T细胞会增加。同时表达CD4和CD57的淋巴细胞的数据，一群功能尚在研究中的细胞，会在服用咪唑硫嘌呤的病人中增加，而在服用环孢霉素病人则不会。有些文献报道CD4/CD8比值低的病人其排斥反应增加的机率增大，并且会变现出对抗排斥药的耐药。CD8+T细胞的HLA-DR表达的增加可被识为早期排斥反应的信号，同时是抗排斥药物疗效下降的指标。T细胞亚群细胞比例失衡会在慢性免疫性疾病中见到，如系统性红斑狼疮，结缔组织疾病，进行性系统性硬化症和风湿性疾病，此外还有文献表明T细胞亚群细胞比例的改变程度与疾病的活跃程度相关。在mononucleosic综合症中，CD4和CD8细胞的构成会发生戏剧性的变化，而当其比例正常时则可认为疾病进入临床缓解期。在以上提及的临床应用中，对外周血淋巴细胞的区分、计数和分型分析一旦与一些淋巴细胞的其他表型和功能性标志物联合检测时，将会得到更多的实用信息。如刺激某个淋巴细胞亚群，如T，B，或NK细胞，使其分泌细胞因子或表达与活化相关的蛋白，或凋亡标志物及其他。 定义参数 选择抗体 外周血淋巴细胞免疫分型中的一个严格步骤是选择所使用的抗体。除了选择在高质量的荧光标记抗体，还要选择其克隆号和荧光素，及用来识别细胞的特异和敏感的标志物，这些是进行成功分析的必要因素。举个例子，虽然CD19和CD20被认为是B细胞的特异性标志物已经有数年了，现在
淋巴细胞分型意义
淋巴细胞亚群分析临床意义 映机体当前的免疫功能、状态和平衡 水平，并可以辅助诊断某些疾病（如 白身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、 血 液病、变态反应性疾病等）,分析 淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传 制剂患者O “过度活跃”状态，容易出现自体免 疫反应，见于性、I 型糖尿病等。CD. /CD 8<1. 4称为“免疫抑制”状态， 常见于（1）免疫缺陷病，如艾滋病时 的比值常显着小于；（2）恶性肿瘤； 项目名称 项目说明 临床意义 参考值范围 CD3+ T 淋巴细胞 淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和 65%~80% 总数 体液免疫功能的重要指标，它总体反 (±) % CD37CD 『 T 辅助/诱 (±) % 导淋巴细 CD37CDJ T 抑制/杀 发病机制，观察疗效及检测预后有重 (±) % 伤淋巴细 要意义: CD47CD& 比 T 确助.诱 #/T 抑 性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑 CD3VCD19' B 淋巴细胞 2. CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫 16%"28 % 总数 性疾病，如SLE 、艾滋病初期、慢性 CD3" /CD16+56 十 NK 淋巴细 活动性、肿瘤及病毒感染等。 胞总数 3. CD4/CD8>表明细胞免疫功能处于
人体的免疫细胞包括T细胞和B细胞。T细胞管细胞免疫。CD4是辅助T 细胞表面的一种标记。CD8是抑制性T细胞的一种标记。CD4/CD8增高，表示辅助性T细胞高于抑制性T细胞，说明免疫力好.CD3是所有总T细胞, CD3高表示总T细胞较高。CD4/CD8和CD3都高，是由于辅助性CD4细胞 增高，因而总的T细胞也增高。是机体免疫力好的表现。
淋巴细胞
淋巴细胞 淋巴细胞 lymphocyte 淋巴细胞描述：血液中主要是小淋巴细胞和一定数量的中淋巴细胞。小淋巴细胞核相对很大，细胞质极少。核内染色质多，染色较深。核圆形深染，核周围浅染，胞质蓝灰色。 白细胞的一种。由淋巴器官产生，机体免疫应答功能的重要细胞成分。淋巴器官根据其发生和功能的差异，可分为中枢淋巴器官（又名初级淋巴器官）和周围淋巴器官（又名次级淋巴器官）两类。前者包括胸腺、腔上囊或其相当器官（有人认为在哺乳动物是骨髓）。它们无须抗原刺激即可不断增殖淋巴细胞，成熟后将其转送至周围淋巴器官。后者包括脾、淋巴结等。成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化增殖，继而发挥其免疫功能。 在光学显微镜下观察淋巴细胞，按直径不同区分为大（11～18微米）、中（7～11微米）、小（4～7微米）3种。周围血液中主要是中小型细胞。根据淋巴细胞的发育部位、表面、抗原、受体及功能等不同，可将淋巴细胞分为T淋巴细胞和B淋巴细胞等多种。有人还分出抗体依赖性细胞毒细胞、双重阳性细胞以及裸细胞等。具有杀伤靶细胞作用，又称杀伤细胞或K细胞，细胞膜表面同时具有T细胞和B细胞的标记，其功能不明。裸细胞既无T细胞也无B细胞的表面标记。 T淋巴细胞（又名T细胞）和B淋巴细胞（又名B细胞）都起源于造血干细胞。T细胞随血循环到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，B细胞则到脾脏或腔上囊发育成熟。然后再随血循环到周围淋巴器官，在各自既定的区域定居、繁殖。受抗原激活即分化增殖，产生效应细胞，行使其免疫功能。T淋巴细胞激活后，分化增殖形成多种具特殊性的效应T淋巴细胞株。其中“细胞毒性”T淋巴细胞（TC）是具有调节功能的T淋巴细胞，可促进或抑制B淋巴细胞或T淋巴细胞的增殖与免疫功能，分别叫做辅助性T淋巴细胞（TH）和抑制性T淋巴细胞（TS）。T淋巴细胞的免疫功能，主要是抗胞内感染、瘤细胞与异体细胞等。在特定条件下，T细胞可产生迟发型过敏反应。T淋巴细胞产生的这种特异性免疫反应，叫做细胞性免疫。 淋巴的相关知识 ■淋巴结 lymph node
肺癌患者外周血淋巴细胞免疫分型检测的临床意义
肺癌患者外周血淋巴细胞免疫分型检测的临床意义 发表时间：2014-08-06T17:10:57.403Z 来源：《中外健康文摘》2014年第22期供稿作者：王辉 [导读] 机体免疫功能在抗肿瘤过程中起着重要的作用，不同淋巴细胞免疫分型在机体免疫的调控和抗肿瘤免疫中起重要作用。 王辉 （山东省寿光市人民医院 262700） 【摘要】目的探讨肺癌患者外周血淋巴细胞免疫分型，了解肺癌患者的基线免疫状态。方法采用流式细胞仪分别检测60例肺癌患者（肺癌组）和20例正常人（对照组）外周血淋巴细胞免疫分型，并对两组进行比较。结果肺癌患者CD3（+）、CD4（+）、自然杀伤细胞（NK细胞）比例及CD4（+）/CD8（+）比值均低于对照组(P<0.05)，CD8（+）细胞比例高于对照组(P<0.05)，CD19（+）细胞比例与对照组相比差异无显著性（P>0.05）。结论肺癌患者免疫功能与正常人群相比存在降低趋势，外周血淋巴细胞免疫分型可作为肺癌患者免疫监测的一种方法。 【关键词】肺肿瘤淋巴细胞免疫分型免疫监测 【中图分类号】R730.4 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）22-0097-01 机体免疫功能在抗肿瘤过程中起着重要的作用，不同淋巴细胞免疫分型在机体免疫的调控和抗肿瘤免疫中起重要作用。肺癌的发生、发展与宿主免疫监视功能低下有关。近年来研究发现，肺癌患者免疫功能低下主要表现为T淋巴细胞和NK细胞功能紊乱与缺陷。监测肺癌患者免疫状态有助于合理选择最佳的治疗方法并评价疾病的预后。本研究采用流式细胞仪检测了肺癌患者外周血淋巴细胞免疫分型的变化情况，以初步探讨肺癌患者的免疫功能状态变化，评估病情状况，指导免疫治疗。 1 资料和方法 1．1 研究对象和分组 2006年10月～2007年4月在我院经病理确诊为肺癌的患者60例（肺癌组），其中男性47例，女性13例，年龄34～82岁（中位年龄66岁）。根据美国联合癌症分类委员会（AJCC）和国际抗癌联盟（UICC）2002年制定的肺癌的TNM分期标准临床分期如下：Ⅱ期1例，Ⅲ期23例，Ⅳ期36例；病理类型为：鳞癌23例，腺癌20例，小细胞癌7例，未定型10例。对照组20例均为既往无相关疾病的健康体检者，其中男性16例，女性4例，年龄51～78岁（中位年龄64岁）。 1.2 实验方法 1.2.1 标本采集及处理取肺癌组患者及对照组健康体检者静脉血 3ml加入含肝素的抗凝管中混匀后备用。取专用试管6支，各试管加入外周血标本100 μl，分别加入CD45-异硫氰酸荧光素（FITC)/CD14-藻红脘（PE）,IgG1-FITC/IgG2a-PE，CD3-FITC/CD19-PE，CD3-FITC/CD4-PE，CD3-FITC/CD8-PE，CD3-FITC/ CD16（+）56-PE单克隆双色抗体15 μl，与之充分混匀，室温避光下孵育15 min，然后每管加入10×FACS(红细胞裂解液)溶血剂2 ml，充分混匀，室温避光下溶血10～15 min（15～22℃）至完全透明，1500 r/min离心10 min，弃上清液，PBS洗涤3次，每管加入0.5 ml PBS液悬浮，混匀放置室温下待测。 1.2.2 淋巴细胞免疫分型检测用Becton-Dickinson公司生产的FACS Calibur型流式细胞仪测定。 1.3 统计学处理本实验数据采用SPSS 11.0软件处理，检测结果以±s表示。肺癌患者与对照组之间的比较采用独立样本的双侧t检验，P<0.05为差异有显著性。 2 结果 肺癌组外周血CD3（+）、CD4（+）、NK细胞比例及CD4（+）/CD8（+）比值均低于对照组（P<0.05），而CD8（+）细胞比例高于对照组（P<0.05），CD19（+）细胞比例与对照组相比差异无显著性（P>0.05）。见表1略。表1 肺癌患者与正常人淋巴细胞免疫分型的比较与对照组比较：*P<0.05 3 讨论 机体免疫监视功能缺陷可能是肿瘤发生发展过程中的常见事件。随着对肿瘤病因的认识的深入，人们发现淋巴细胞亚群改变导致的免疫功能损害可能与肿瘤的发生、发展和预后相关，目前研究最多的是T细胞亚群的测定[1]。 T淋巴细胞不仅是细胞免疫的效应细胞，而且在调节免疫反应中起重要作用。T细胞亚群表面分子主要包括CD3（+）、CD4（+）和CD8（+）等。CD3（+）T细胞存在于所有成熟T细胞膜上，代表了宿主总的T细胞数量和细胞免疫状态。CD4（+）分布在辅助细胞诱导亚群和抑制细胞诱导亚群表面，又称T辅助或诱导细胞，在抗肿瘤免疫中起着积极的作用，其主要功能是通过分泌淋巴因子，增加和扩大免疫应答过程，辅助诱导其它免疫细胞共同发挥抗肿瘤作用。CD8（+）分布在抑制性T细胞和杀伤性T细胞表面，不仅具有负调节效应，同时具有维持抗肿瘤免疫记忆的功能，并能抑制B细胞产生抗体。CD4（+）/CD8（+）比例的恒定维持着细胞免疫反应的平衡，肿瘤抗原识别和杀伤分别通过CD4（+） T细胞和CD8（+） T细胞完成。Trojan等研究表明，在非小细胞肺癌的患者中，CD8（+） T细胞虽然能浸润入肿瘤细胞中，但由于不能被充分激活而无法产生有效的抗肿瘤作用。Prado-Garcia等发现CD8（+） T细胞亚群的比例不受T细胞产生的细胞因子刺激而改变，这种改变是导致肺癌患者抗肿瘤免疫效应低下的原因之一。此外，NK细胞也是机体免疫监视系统的主要组成部分，是机体抗肿瘤的第一道防线，参与T淋巴细胞、B淋巴细胞的调节，是细胞免疫中的非特异性成分[2]。在多数情况下，NK细胞不依赖抗体、补体及预先致敏，可自发启动杀伤功能，并与单核细胞、粒细胞等协同发挥抗肿瘤、抗感染的免疫调节作用，但其活性可被肿瘤细胞分泌的免疫抑制因子抑制，从而降低机体对肿瘤的抵抗力。近年来的研究还表明：NK细胞不仅在非特异性抗肿瘤免疫中发挥重要作用，并且具有激活和增强重要的抗原递呈细胞树突状细胞（DC）的功能，因此，NK细胞起到连接非特异性免疫和特异性免疫的桥梁作用。我们的研究发现，和对照组相比，肺癌患者机体免疫活性细胞比例存在异常，主要表现为淋巴细胞免疫分型比例失调，如CD3（+）、CD4（+）、NK细胞比例下降，CD8（+）细胞比例上升，CD4（+）/CD8（+）比值下降。提示肺癌患者存在免疫抑制和免疫调节功能紊乱，CD4（+）T细胞辅助诱导其它免疫细胞发挥抗肿瘤作用的功能减弱，CD8（+）T细胞数量增多，负调节效应增强；CD4（+）/CD8（+）比值下降，有利于肿瘤增殖。 CD19是B淋巴细胞膜表面标志，B淋巴细胞主要介导体液免疫。本研究结果显示，肺癌患者与正常人相比CD19（+）细胞比例差异无显著性，显示体液免疫在肿瘤免疫中并非处于主要地位。 我们认为，肺癌患者细胞免疫功能较正常人群存有降低趋势，外周血淋巴细胞免疫分型测定可用于肺癌患者的免疫功能监测。研究肺癌患者的免疫功能状况在指南个体化治疗、疗效评价、功能状态评分及预后中的作用有待于更多前瞻性的临床研究。
CD和CDT淋巴细胞检测
CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测?? 1? 范围 本章规定了用多平台三级程序法和单平台一步法检测全血中的CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞。 2?? 规范性引用文件 1997 Revised Guidelines for Performing CD4+ T-Cell Determinations in Persons Infected with Human Immunodeficiency Virus (HIV) MMWR 46(RR-2);1-29 Publication date: 01/10/1997。 3? 实验室条件 3.1 人员 进行HIV感染者CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测的人员须具有艾滋病实验室的上岗资格，并接受过省级以上艾滋病实验室安全及实验操作技术培训。 3.2? 设施和设备 3.2.1? 样品处理区：生物安全柜、离心机、冰箱、水浴箱、旋转振荡器、精确移液器（5μl~50μl、20μl~200μl、200μl~1000μl）。 3.2.2? 流式细胞仪检测区：流式细胞仪 3.3? 功能分区 实验室原则上应分为样品处理区和流式细胞仪检测区,各区的功能是： 3.3.1? 样品处理区应达到生物安全Ⅱ级（BSL-2）实验室要求，用于样品处理、流式检测样品制备。 3.3.2? 流式细胞仪检测区用于制备好的样品上机检测。 4? 样品采集、运输和接收 4.1? 样品的采集 4.1.1? 选择合适的抗凝剂，分别用于血液学检测和流式细胞仪的免疫表型检测。 （1）EDTA（1.5±0.15mg/ml血液）。 （2）在血球分析仪生产商允许的时间范围内检测，不超过30h，不检测超出抗凝时间范围的样品。 （1）用K3EDTA抗凝，收集样品应在30h以内，尽早（8h以内）处理。 （2）用ACD或肝素抗凝，收集样品在48h以内，尽早（8h以内）处理。
淋巴细胞分型意义
临 床 意 义 项目名称 项目说明 疫功能的重要指标，它总体反映机体当前的免 疫功能、状态和平衡水平，并可以辅助诊断某 机制，观察疗效及检测预后有重要意义: 免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂患者。 及病毒感染等。 疫缺陷病，如艾滋病时的比值常显着小于 0.5 ; （2）恶性肿瘤；（3）再生障碍性贫血、 白血病；（4）某些病 毒感染；CD4/CD8降到 1.0以下为“倒置”,是较为明显的异常。若 移植后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发 CD3 T 淋巴细胞总 淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和体液免 65%~80% (71.5 ± 6.2)% CD 3/CD 4 T 辅助/诱导 些疾病（如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿 (45.7 ± 5.3)% 淋巴细胞 瘤、血液病、变态反应性疾病等），分析发病 CD3/CD8 T 抑制9 / 杀 伤 1.CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性 (27.9 ± 5.0)% CD 4/CD 8 比值 T 辅助、诱导 /T 抑 制、 2. CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病, 1.66 ± 0.33 杀伤 如SLE 艾滋病初期、慢性活动性肝炎、 肿瘤 CD3 /CD19 B 淋巴细胞总 3. CD4/CD8>2.5表明细胞免疫功能处于 “过 度活跃”状态，容易出现自体免疫反应, 见于 CD3 NK 淋巴细胞 类风湿性关节炎、I 型糖尿病等。CD /CD V 16%~28% 5%~7% /CD16+56 总数 1. 4称为“免疫抑制”状态，常见于（1）免 临床意义 参考值范围 淋巴细胞
人体的免疫细胞包括T细胞和B细胞。T细胞管细胞免疫。CD4是辅助T细胞表面的一种标记。CD8是抑制性T细胞的一种标记。CD4/CD8增高，表示辅助性T细胞高于抑制性T细胞, 说明免疫力好.CD3是所有总T细胞，CD3高表示总T细胞较高。CD4/CD8和CD3都高，是由于辅助性CD4细胞增高，因而总的T细胞也增高。是机体免疫力好的表现。
淋巴细胞分型意义
淋巴细胞亚群分析临床意义项目名称项目说明临床意义参考值范围 +T淋巴细胞CD3 淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和 65%~80% 总数体液免疫功能的重要指标，它总体反 映机体当前的免疫功能、状态和平衡 （71.5±6.2）% +/CD4+T辅助/诱CD3 水平，并可以辅助诊断某些疾病（如 （45.7±5.3）% 导淋巴细自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、胞血液病、变态反应性疾病等），分析 +/CD8+T抑制/杀 CD3 伤淋巴细发病机制，观察疗效及检测预后有重 要意义： （27.9±5.0）% 1.CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、胞 +/CD8+比CD4 值T 辅助、诱导/T 制、杀伤 抑 遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免 疫抑制剂患者。 1.66±0.33 CD3－/CD19+B淋巴细胞－/CD19+B淋巴细胞 总数2.CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫 性疾病，如SLE、艾滋病初期、慢性活 动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。 16%~28% － CD3 + /CD16+56 N K淋巴细 胞总数 3.CD4/CD8＞2.5表明细胞免疫功能处 于“过度活跃”状态，容易出现自体 5%~7% 免疫反应，见于类风湿性关节炎、I型 糖尿病等。CD4／CD8＜1．4称为“免疫 抑制”状态，常见于（1）免疫缺陷病，如艾 滋病时的比值常显著小于0.5； （2）恶性肿瘤；（3）再生障碍性贫血、白血 病；（4）某些病毒感染；CD4/CD8降到1.0 以下为“倒置”,是较为明显的异常。若移植 后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生排 斥反应。 4.NK细胞（CD3 —CD16+和/或CD56+）能 够介导对某些肿瘤细胞和病毒感染细 胞的细胞毒性作用。 人体的免疫细胞包括T细胞和B细胞。T细胞管细胞免疫。CD4是辅 助T细胞表面的一种标记。CD8是抑制性T细胞的一种标记。CD4/CD8 增高，表示辅助性T细胞高于抑制性T细胞，说明免疫力好.CD3是所有总T细胞，CD3高表示总T细胞较高。CD4/CD8和CD3都高，是