(整理)分子生物学复习资料.

(整理)分子生物学复习资料.
(整理)分子生物学复习资料.

分子生物学理论资料

1. 结构基因的编码产物不包括(C)

A、snRNA

B、hnRNA

C、启动子

D、转录因子

E、核酶

2. 已知双链DNA的结构基因中,有义链的部分序列是5'AGGCTGACC3',其编码的RNA 相应序列是(C)

A、5'AGGCTGACC3'

B、5'UCCGACUGG3'

C、5'AGGCUGACC3'

D、5'GGUCAGCCU3'

E、5'CCAGUCGGA3'

3. 已知某 mRNA的部分密码子的编号如下(A):

127 128 129 130 131 132 133

GCG UAG CUC UAA CGG UGA AGC

以此mRNA为模板,经翻译生成多肽链含有的氨基酸数目为

A、127

B、128

C、129

D、130

E、131

4. 一般来说,真核生物基因的特点是(D)

A、编码区连续

B、多顺反子RNA

C、内含子不转录

D、断裂基因

E、外显子数目=内含子数目-1

5. 关于外显子说法正确的是(E)

A、外显子的数量是描述基因结构的重要特征

B、外显子转录后的序列出现在hnRNA中

C、外显子转录后的序列出现在成熟mRNA

D、外显子的遗传信息可以转换为蛋白质的序列信息

E、以上都对

6. 断裂基因的叙述正确的是(B)

A、结构基因中的DNA序列是断裂的

B、外显子与内含子的划分不是绝对的

C、转录产物无需剪接加工

D、全部结构基因序列均保留在成熟的mRNA分子中

E、原核和真核生物基因的共同结构特点

7. 原核生物的基因大多与(A)无关。

A、内含子

B、操纵子

C、启动子

D、起始密码子

E、终止子

8. 关于启动子叙述错误的是(D)

A、原核和真核生物均有

B、调控转录起始

C、与RNA聚合酶结合

D、都能被转录

E、位于转录起始点附近

9. 顺式作用元件的本质是(B)

A、蛋白质

B、DNA

C、mRNA

D、rRNA

E、tRNA

10. 关于真核生物的启动子,正确的说法是(B)

A、与RNA聚合酶的σ因子结合

B、tRNA基因的启动子序列可以被转录

C、都位于转录起始点上游

D、II类启动子调控rRNA编码基因的转录

E、起始转录不需要转录因子参与

11. 原核生物的启动子(B)

A、根据所调控基因的不同分为I、II、III类

B、与RNA聚合酶全酶中的σ因子结合

C、不具有方向性

D、涉及转录因子-DNA的相互作用

E、涉及不同转录因子之间的相互作用

12. 真核生物的启动子不能控制哪个基因的转录(D)

A、snRNA

B、hnRNA

C、5S rRNA

D、16S rRNA

E、U6 snRNA

13. 增强子是(C)

A、一段可转录的DNA序列

B、一段可翻译的mRNA序列

C、一段具有转录调控作用的DNA序列

D、一段具有翻译调控作用的mRNA序列

E、一种具有调节作用的蛋白质因子

14. poly(A)加尾信号存在于(B)

A、真核I类结构基因及其调控序列

B、真核II类结构基因及其调控序列

C、真核III类结构基因及其调控序列

D、调节基因

E、操纵基因

15. 有关mRNA的叙述正确的是(C)

A、hnRNA中只含有基因编码区转录的序列

B、在3′端具有SD序列

C、mRNA的遗传密码阅读方向是5′→3′

D、在细胞内总RNA含量中所占比例最大

E、mRNA碱基序列与DNA双链中的反义链一致

16. 关于开放读框叙述正确的是(A)

A、是mRNA的组成部分

B、内部有间隔序列

C、真核生物的开放读框往往串联在一起

D、内部靠近5′端含有翻译起始调控序列

E、由三联体反密码子连续排列而成

17. 关于帽子结构说法错误的的是(E)

A、真核生物mRNA的特点

B、位于5'端

C、与翻译起始有关

D、常含有甲基化修饰

E、形成3',5'-磷酸二酯键

18. 真核细胞mRNA的合成不涉及(A)

A、生成较多的稀有碱基

B、3'端加poly(A)尾巴

C、5'端加帽子

D、去除非结构信息部分

E、选择性剪接

19. 有关遗传密码的叙述正确的是(B)

A、一个碱基的取代一定造成它所决定的氨基酸的改变

B、终止密码子是UAA、UAG和UGA

C、连续插入三个碱基会引起密码子移位

D、遗传密码存在于tRNA中

E、真核生物的起始密码编码甲酰化蛋氨酸

20. 密码子是哪一水平的概念(D)

A、DNA

B、rRNA

C、tRNA

D、mRNA

E、snRNA

21. 不能编码氨基酸的密码子是(A)

A、UAG

B、AUG

C、UUG

D、GUG

E、UGC

20. 遗传密码的摆动性常发生在(A)

A、反密码子的第1位碱基

B、反密码子的第2位碱基

C、反密码子的第3位碱基

D、A+C

E、A+B+C

21. tRNA携带活化的氨基酸的部位是(E)

A、反密码环

B、TφC环

C、DHU环

D、额外环

E、CCA

22. 哺乳动物核糖体大亚基的沉降常数是(D)

A、30S

B、40S

C、50S

D、60S

E、70S

23. 信号识别颗粒的成分包括(B)

A、snRNA

B、7SL RNA

C、snRNP

D、SRP受体

E、ribozyme

24. 关于核酶叙述正确的是(A)

A、化学本质是RNA

B、分为DNA酶和RNA酶

C、属于核酸酶

D、底物只能是DNA

E、由核酸和蛋白质组成

25. 下列哪种物质不是核酸与蛋白质的复合物(D)

A、核糖体

B、snRNP

C、SRP

D、核酶

E、端粒酶

26. 哪种情况会导致移码突变( C)

A、倒位

B、颠换

C、插入一个碱基

D、连续缺失三个碱基

E、以上都不对

27. 原核生物的基因组主要存在于(C)

A、质粒

B、线粒体

C、类核

D、核糖体

E、高尔基体

28. 真核生物染色质的基本结构单位是(B)

A、α-螺旋

B、核小体

C、质粒

D、β-片层

E、结构域

29. 关于真核生物结构基因的转录,正确的说法是(B)

A、产物多为多顺反子RNA

B、产物多为单顺反子RNA

C、不连续转录

D、对称转录

E、新生链延伸方向为3′→5′

30. 下列有关真核生物结构基因的说法不正确的是(B)

A、结构基因大都为断裂基因

B、结构基因的转录是不连续的

C、含大量的重复序列

D、结构基因在基因组中所占比例较小

E、产物多为单顺反子RNA

31. 染色体中遗传物质的主要化学成分是(C)

A、组蛋白

B、非组蛋白

C、DNA

D、RNA

E、mRNA

32. 大肠杆菌DNA的复制(C)

A、为单起点单向复制

B、为双起点单向复制

C、为单起点双向复制

D、为多起点双向复制

E、为双起点双向复制

33. 合成冈崎片段不需要(E)

A、dNTP

B、NTP

C、引物酶

D、DNA聚合酶

E、DNA连接酶

34. DNA复制时,模板序列是5'-TAGA-3',将合成下列哪种互补结构(A)

A、5'-TCTA-3'

B、5'-ATCA-3'

C、5'-UCUA-3'

D、5'-GCGA-3'

E、5'-AGAT-3'

35. DNA是以哪种链进行复制的(B)

A、冈崎片段

B、两条亲代链

C、前导链

D、随后链

E、以上都不是

36. DNA半保留复制时需要(B)

A、DNA指导的RNA聚合酶

B、引发酶

C、延长因子

D、终止因子

E、mRNA

37. DNA半保留复制不涉及(D)

A、冈崎片段

B、引物酶

C、DNA聚合酶

D、氨基酰tRNA合成酶

E、DNA连接酶

38. 复制叉前进时,其前方的DNA双螺旋会形成哪种结构(B)

A、负超螺旋

B、正超螺旋

C、右手螺旋

D、左手螺旋

E、松弛状态

39. 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的核心酶含有的亚基是 (C)

A、α、β、γ

B、α、β、δ

C、α、ε、θ

D、α、γ、ε

E、β、γ、ε

40. 大肠杆菌DNA聚合酶的哪个亚基可以形成滑卡式结构(B)

A、α

B、β

C、γ

D、δ

E、ε

41. 逆转录病毒基因组复制时所用的引物为(C)

A、RNA

B、DNA

C、tRNA

D、mRAN

E、不用引物

42. 复制起点富含哪种碱基时易被与复制有关的酶和蛋白质识别(B)

A、GC

B、AT

C、AG

D、CT

E、TG

43. 若使15N标记的大肠杆菌在14N培养基中生长2代,提取DNA,则14N-15N杂合DNA分子

与14N-DNA分子之比为(A)

A、1:1

B、1:2

C、1:3

D、2:1

E、3:1

44. 下列哪种紫外线最易造成DNA损伤(D)

A、400—350nm

B、350—320nm

C、320—290nm

D、290—100nm

E、以上都不是

43. 致DNA损伤因素的作用靶点有(E)

A、嘌呤碱

B、嘧啶碱

C、脱氧核糖

D、磷酸二酯键

E、以上都是

44. 最严重的DNA损伤是(C)

A、错配

B、碱基置换

C、DNA双链断裂

D、DNA交联

E、移码突变

45. E.coli的RNA聚合酶中,辨认转录起始点的组分是(B)

A、核心酶

B、σ

C、α

D、β

E、β'

46. 真核生物中,RNA聚合酶Ⅱ的转录产物是(E)

A、45S rRNA

B、5S rRNA

C、tRNA

D、U6 snRNA

E、hnRNA

47. 真核生物Ⅱ类基因的启动子核心序列通常位于(A)

A、—25区

B、—10区

C、—35区

D、+1区

E、+10区

48. 下列物质中,能够辅助真核生物的RNA聚合酶结合启动子的是(C)

A、起始因子

B、增强子

C、转录因子

D、延长因子

E、σ因子

49. 下列哪种物质不需要进行转录后加工即可发挥功能(A)

A、E.coli mRNA

B、E.coli tRNA

C、E.coli rRNA

D、yeast mRNA

E、yeast tRNA

50. RNA编辑发生在(C)

A、成熟的mRNA

B、tRNA和rRNA的前体

C、hnRNA

D、成熟的tRNA和rRNA

E、snRNA

51. 蛋白质的生物合成不需要(B)

A、RAN

B、剪切因子

C、分子伴侣

D、帽子结合蛋白

E、GTP

52. 原核生物的核糖体大亚基是(C)

A、30S

B、40S

C、50S

D、60S

E、70S

53. 真核生物参与蛋白质合成的起始因子有几种(E)

A、1

B、2

C、3

D、4

E、>5

54. 原核生物的翻译起始阶段,帮助fMet-tRNA结合AUG的是(A)

A、IF-2

B、IF-1

C、eIF-2

D、eIF-3

E、eIF-4

55. SD序列与下列哪种rRNA相互作用(C)

A、5S

B、23S

C、16S

D、5.8S

E、18S

56. 原核生物肽链合成的延长阶段,使氨基酰-tRNA进入A位的蛋白质因子是(C)

A、EF-1

B、EF-2

C、EF-Tu

D、EF-G

E、转肽酶

57. 乳糖操纵子中,能结合异乳糖(诱导剂)的物质是(C)

A、AraC

B、cAMP

C、阻遏蛋白

D、转录因子

E、CAP

58. 下列哪项不属于真核生物基因的顺式作用元件(B)

A、激素反应元件

B、衰减子

C、启动子

D、沉默子

E、增强子

59. 与RNA聚合酶相识别和结合的DNA片段是(E)

A、增强子

B、衰减子

C、沉默子

D、操纵子

E、启动子

60. 下列哪一项不是转录的原料(A)

A、TTP

B、ATP

C、CTP

D、UTP

E、GTP

61. 转录生成的RNA链中有(E)

A、dAMP

B、CTP

C、UDP

D、dTTP

E、UMP

62. 在复制和转录中均起作用的是(E)

A、RNA引物

B、DNA聚合酶

C、NMP

D、dNTP

E、蛋白质因子

63. 转录时模板与产物之间不存在的碱基对应关系是(A)

A、A→T

B、T→A

C、A→ U

D、C→ G

E、G→C

64. 真核生物的细胞核RNA聚合酶有几种(C)

A、1

B、2

C、3

D、4

E、5

65. 原核生物的RNA聚合酶有几种(A)

A、1

B、2

C、3

D、4

E、5

66. 抗结核菌药物利福平的作用靶点是RNA聚合酶的(B)

A、α亚基

B、β亚基

C、β′亚基

D、σ亚基

E、不固定在哪一个亚基上

67. 原核生物mRNA的SD序列可以结合哪种核糖体组分(A)

A、30S亚基

B、40S亚基

C、50S亚基

D、60S亚基

E、以上都不对

68. 在翻译起始阶段发挥作用的蛋白质因子是(A)

A、IF

B、EF

C、RF

D、转肽酶

69. 原核生物中,某种代谢途径相关的几种酶类往往通过何种机制进行协调表达(B)

A、顺反子

B、操纵子

C、转录因子

D、衰减子

70. 细菌优先利用葡萄糖作为碳源,葡萄糖耗尽后才会诱导产生代谢其他糖的酶类,这种现象称为(E)

A、衰减作用

B、阻遏作用

C、诱导作用

D、协调调节作用

E、分解代谢物阻遏作用

71.大肠杆菌的乳糖操纵子模型中,与Operator结合而调控转录的是(A)

A、阻遏蛋白

B、RNA聚合酶

C、调节基因

D、cAMP-CAP

E、启动子

72. 翻译终止阶段,新生多肽链的释放涉及哪种化学键的断裂(E)

A、肽键

B、磷酸二酯键

C、氢键

D、疏水键

E、酯键

名词解释

1. 基因表达: 遗传信息从DNA传递给RNA——转录,再从RNA传递给蛋白质——翻译,使得遗传信息通过蛋白质来发挥生物学功能、表现生物学性状,这个过程称为基因表达。

2. 不对称转录: 在双链DNA的某一区域,一条链被用作模板链来指导转录,另一条链则不转录;对不同的DNA区域来说,模板链并非总是同一条链,这被称为不对称转录。

3. 管家基因: 在所有组织细胞中始终表达的基因,其功能对维持生命活动来说是必不可少的。

4. 顺式作用元件: 顺式作用元件(cis-acting element)指与被调控的目标DNA位于同一染色体上的特定DNA序列,是反式作用因子的结合位点,它们通过与反式作用因子。顺式作用元件本身不编码任何蛋白质,仅仅提供一个作用位点,要与反式作用因子结合而调控基因转录的精确起始和转录效率。

5. 反式作用因子:某些调控因子通过扩散结合于细胞内的多个目标DNA 序列,发生突变后将同时影响不同染色体上等位基因的表达,这样的调控因子称为反式作用因子,其化学本质一般为蛋白质,少数为RNA。

6. RNA 编辑: 指基因转录产生的mRNA 编码区中核苷酸序列发生缺失、插入或置换,导致其序列与其基因编码链序列不同的现象。

7. RNA 反式剪接:从不同DNA 分子转录得到的RNA 经过加工,将外显子连接形成成熟的RNA 分子,这个过程称为RNA 反式剪接。

8. 增色效应:变性时DNA 的双链解开,有序的碱基排列被打乱,增加了对光的吸收,因此变性后DNA 溶液的紫外吸收作用增强,此现象称为增色效应。

9. 减色效应:变性DNA 分子复性形成双螺旋结构时其紫外吸收降低的现象称为减色效应。核酸分子杂交:复性时,不同来源的DNA 之间或DNA 与RNA 之间的互补碱基序列可形成杂交双链DNA DNA-RNA。

10. 基因组:生物体或细胞中一套完整的单倍体遗传物质的总和。

11. 分子伴侣: 是一类在序列上没有相关性但有共同功能的蛋白质,它们在细胞内帮助其他含多肽的结构完成正确的组装,而且在组装完毕后与之分离,不构成这些蛋白质结构执行功能时的组份。12. 核酸的复性: 变性DNA 在适当条件下,两条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象称为复性。

13.反义RNA:许多小分子调控RNA 能与不同的mRNA 结合,在翻译水平上起调控作用,这些小分子RNA 被称为反义RNA。

14. 启动子:启动子是DNA 中一段特定的核苷酸序列,这段核苷酸序列是RNA 聚合酶在转录起始时对模板DNA 的识别部位和结合部位,是转录过程能否起始的决定部位,其本身不转录

15. 熔解温度: 当50% 的DNA 变性时的温度称为该DNA 的解链温度,即增色效应达到一半时的温度。

17. 基因家族: 基因家族是真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因。

18. 卫星DNA: 有些高度重复DNA 序列的碱基组成和浮力密度与主体DNA 有区别,在浮力密度梯度离心时,可形成不同于主DNA 带的卫星带,称为卫星DNA。

19. 跨越合成: 由特殊的DNA 聚合酶取代停留在损伤位点上的催化复制的DNA 聚合酶,在子链上(模板链上损伤碱基的对面)随机插入核苷酸(正确或错误的),以实现对损伤位点无错或易错的修复。。20. 假基因: 有些基因核苷酸序列与相应的正常功能基因基本相同,但却不能合成出功能蛋白质,这些失活基因称为假基因。

21. 蛋白质拼接: 指将一条多肽链内部的一段氨基酸序列切除,同时将两端的序列连接在一起的后加工方式。

22.端粒酶: 是一种反转录酶,能以自身RNA 为模板,不断合成新的端粒DNA 序列添加到染色体末端,弥补端粒丢失阻止端粒缩短,并可能使得细胞最终逃脱程序性死亡,获得无限增殖能力,即永生化。

23. RNA 剪接: 断裂基因在表达时首先转录成初级转录产物,即前体mRNA;然后经过加工,除去无关的DNA 内含子序列的转录物,形成成熟的mRNA 分子,这种删除内含子、连接外显子的过程,称为RNA 拼接或剪接。

24. SD 序列:原核生物mRNA 的5’端有一段富含嘌呤的序列,由4~5 个碱基组成,可与16S rRNA 的3’端反SD 序列互补配对,便于核糖体识别起始密码子。

25. 同源重组:也称一般性重组,是在两个DNA 分子的同源序列间直接进行交换的一种重组形式。

26.核酸的变性: 核酸在化学、物理因素的影响下,维持核酸双螺旋结构的氢键和碱基堆积力受到破坏,分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构甚至解旋成单链的现象,称为核酸的变性。27. 转座因子: 指可以从染色体基因组上的一个位置转移到另一个位置,甚至在不同染色体

之间跃迁的DNA 序列。

28. 同义突变:突变的密码子编码与原来相同的氨基酸,突变蛋白的结构和功能不发生变化,因此称为同义突变。

29. C 值:一个单倍体基因组的全部DNA 含量总是恒定的,这是物种的一个特征,通常称为该物种的C 值

30. C 值矛盾:指生物体DNA 含量的反常现象,具体包括:C 值并非总是随生物进化等级的提高而增加,亲缘关系相近的生物物种C 值差异巨大,真核生物DNA 的含量远远超过编码蛋白质的需求量。

31. 冈崎片段: 在DNA 的复制过程中,由于滞后链的不连续复制而产生的短的核苷酸片段,称为冈崎片段。

32. 信号肽:一段在一级结构上连续的氨基酸序列,通常有15~60 个氨基酸残基,引导蛋白质分拣。

33. 严谨反应: 细菌在饥饿条件下生长,特别是缺乏氨基酸时,将关闭大部分的代谢活动,主要表现是rRNA 和tRNA 合成大量减少,而蛋白质降解的速度增加,此现象称为严谨反应。

34. 切除修复:先切除DNA 中受损的碱基或核苷酸,重新合成正常的核苷酸,再经连接酶重新连接,前后经历识别、切除、重新合成和重新连接四步,由于不需可见光激活,也叫暗修复。

35. 重组修复: 利用同源重组的方法将DNA 模板进行交换以克服损伤对复制的障碍,而随后的复制仍然使用细胞内高保真的聚合酶,在DNA 损伤未被切除或修复的情况下使细胞恢复DNA复制,等到复制完成后再通过其他机理修复残留的损伤。

36. 错配修复: 是在含有错配碱基的DNA 分子中,使正常核苷酸序列恢复的修复方式;主要用来纠正DNA 双螺旋上错配的碱基对,还能修复一些因复制打滑而产生的小于4nt 的核苷酸插入或缺失。

37. SOS 反应:细胞受到致死性威胁,DNA 受到严重损伤时,做出的有利于细胞生存、但以突变为代价的反应,包括易错的DNA 跨损伤合成、细胞丝状化(细胞伸长,但不分裂)和切除修复系统的激活,其中涉及到超过40 个与DNA 损伤修复、复制、突变相关基因的表达。

38. 极性效应: IS 能从DNA 的一个位点插入到另一个位点,导致靶位点基因以及和靶位点基因在同一个操纵子内,但位于靶位点基因下游的基因表达受阻,此现象称为极性效应。

39. 操纵子: 指原核生物数个功能相关的结构基因串联在一起,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的 RNA 为多顺反子。

40. 分解代谢物阻遏效应: 葡萄糖的某些降解产物抑制利用其他糖类的酶的合成,这种效应称之为分解代谢物阻遏效应。

分子生物学复习题

1、分子生物学的定义。 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学,主要指遗传信息的传递(复制)、保持(损伤和修复)、基因的表达(转录和翻译)与调控。 2、简述分子生物学的主要研究内容。 a.DNA重组技术(基因工程) (1)可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ; (2)可用于定向改造某些生物的基因组结构 ; (3)可被用来进行基础研究 b.基因的表达调控 在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化(时序调节),并随着内外环境的变化而不断加以修正(环境调控)。 c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学) 一个生物大分子,无论是核酸、蛋白质或多糖,在发挥生物学功能时,必须具备两个前提: (1)拥有特定的空间结构(三维结构); (2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。 结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。它包括3个主要研究方向: (1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系 d.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法? (1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性,是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性,决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学,是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。 (2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域,也是新世纪的带头学科。

(3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的,同时也推动这些学科的发展。 (4)分子生物学涉及认识生命的本质,它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中,成为现代医药学重要的基础。 1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。 DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。 基本内容: (1) 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕,两条链均为右手双螺旋。 (2) 嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧,3′,5′- 磷酸与核糖在外侧,彼此通过磷酸二酯键相连接,形成DNA分子的骨架。 (3) 双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻碱基对之间相距的高度即碱基堆积距离 为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36。。 (4) 两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起,A与T相配对形成两个氢键,G与C相配对形成3个氢键。 (5) 碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制,但根据碱基互补配对原则,当一条多核苷酸的序列被确定后,即可决定另一条互补链的序列。

分子生物学与基因工程主要知识点

分子生物学与基因工程复习重点 第一讲绪论 1、分子生物学与基因工程的含义 从狭义上讲,分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。 基因工程是一项将生物的某个基因通过载体运送到另一种生物的活体细胞中,并使之无性繁殖和行使正常功能,从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。 2、分子生物学与基因工程的发展简史,特别是里程碑事件,要求掌握其必要的理由 上个世纪50年代,Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型; 60年代,法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型; 70年代,Berg首先发现了DNA连接酶,并构建了世界上第一个重组DNA分子; 80年代,Mullis发明了聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术; 90年代,开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序,分子生物学进入“基因组时代”; 目前,分子生物学进入了“后基因组时代”或“蛋白质组时代”。 3、分子生物学与基因工程的专业地位与作用:从专业基础课角度阐述对专业课程的支 撑作用 第二讲核酸概述 1、核酸的化学组成(图画说明) 2、核酸的种类与特点:DNA和RNA的区别 (1)DNA含的糖分子是脱氧核糖,RNA含的是核糖; (2)DNA含有的碱基是腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T),RNA含有的碱基前3个与DNA完全相同,只有最后一个胸腺嘧啶被尿嘧啶(U)所代替; (3)DNA通常是双链,而RNA主要为单链;

(4)DNA的分子链一般较长,而RNA分子链较短。 3、DNA作为遗传物质的直接和间接证据; 间接: (1)一种生物不同组织的细胞,不论年龄大小,功能如何,它的DNA含量是恒定的,而生殖细胞精子的DNA含量则刚好是体细胞的一半。多倍体生物细胞的DNA含量是按其染色体倍数性的增加而递增的,但细胞核里的蛋白质并没有相似的分布规律。 (2)DNA在代谢上较稳定。 (3)DNA是所有生物的染色体所共有的,而某些生物的染色体上则没有蛋白质。(4)DNA通常只存在于细胞核染色体上,但某些能自体复制的细胞器,如线粒体、叶绿体有其自己的DNA。 (5)在各类生物中能引起DNA结构改变的化学物质都可引起基因突变。 直接:肺炎链球菌试验、噬菌体侵染实验 4、DNA的变性与复性:两者的含义与特点及应用 变性:它是指当双螺旋DNA加热至生理温度以上(接近100oC)时,它就失去生理活性。这时DNA双股链间的氢键断裂,最后双股链完全分开并成为无规则线团的过程。简而言之,就是DNA从双链变成单链的过程。增色效应:它是指在DNA的变性过程中,它在260 nm的吸收值先是缓慢上升,到达某一温度后即骤然上升的效应。 复性:它是指热变性的DNA如缓慢冷却,已分开的互补链又可能重新缔合成双螺旋的过程。复性的速度与DNA的浓度有关,因为两互补序列间的配对决定于它们碰撞频率。DNA复性的应用-分子杂交:由DNA复性研究发展成的一种实验技术是分子杂交技术。杂交可发生在DNA和DNA或DNA与RNA间。 5、Tm的含义与影响因素 Tm的含义:是指吸收值增加的中点。 影响因素: 1)DNA序列中G + C的含量或比例含量越高,Tm值也越大(决定性因素);2)溶液的离子强度 3)核酸分子的长度有关:核酸分子越长,Tm值越大

分子生物学问题汇总

Section A 细胞与大分子 简述复杂大分子的生物学功能及与人类健康的关系。 Section C 核酸的性质 1.DNA的超螺旋结构的特点有哪些? A 发生在闭环双链DNA分子上 B DNA双链轴线高卷曲,与简单的环状相比,连接数发生变化 C 当DNA扭曲方向与双螺旋方向相同时,DNA变得紧绷,为正超螺旋,反之变得松弛为负超螺旋。自然界几乎所有DNA分子超螺旋都为负的,因为能量最低。 2.简述核酸的性质。 A 核酸的稳定性:由于核酸中碱基对的疏水效应以及电荷偶极作用而趋于稳定 B 酸效应:在强酸和高温条件下,核酸完全水解,而在稀酸条件下,DNA的核苷键被选择性地断裂生成脱嘌呤核酸 C 碱效应:当PH超出生理范围时(7-8),碱基的互变异构态发生变化 D 化学变性:一些化学物质如尿素,甲酰胺能破坏DNA和RNA二级结构中的 而使核酸变性。 E 粘性:DNA的粘性是由其形态决定的,DNA分子细长,称为高轴比,可被机械力和超声波剪切而粘性下降。 F 浮力密度:1.7g/cm^3,因此可利用高浓度分子质量的盐溶液进行纯化和分析 G 紫外线吸收:核酸中的芳香族碱基在269nm 处有最大光吸收 H 减色性,热变性,复性。 思考题:提取细菌的质粒依据是核酸的哪些性质? 质粒是抗性基因,,在基因组或者质粒DNA中用碱提取法。 Sectio C 课前提问 1.在1.5mL的离心管中有500μL,取出10 μL稀释至1000 μL后进行检测,测得A260=0.15。 问(1):试管中的DNA浓度是多少? 问(2):如果测得A280=0.078, .A260/A280=?说明什么问题? (1)稀释前的浓度:0.15/20=0.0075 稀释后的浓度:0.0075/100=0.75ug/ml (2)0.15/0.078=1.92〉1.8,说明DNA中混有RNA样品。 2.解释以下两幅图

南昌大学最新完整分子生物学复习资料

南昌大学分子生物学复习资料 杨光焱南昌大学生物科学141班 5601114030 一、名词解释 1)分子生物学:从分子水平上研究生命现象物质基础的学科。研究细胞成分的 物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系,如遗传信息的传递,基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能,以及细胞信号的转导等。 2)移动基因:又称转座子。由于它可以从染色体基因组上的一个位置转移到另一个位置,是指在不同染色体之间跃迁,因此也称跳跃基因。 3)假基因:有些基因核苷酸序列与相应的正常功能基因基本相同,但却不能合 成出功能蛋白质,这些失活的基因称为假基因。 4)重叠基因:所谓重叠基因是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列,或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。 5)基因家族:是真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基 因。 6)基因:能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位. 7)基因组:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和. 8)端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫 端粒.该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在. 9)操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区 (包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子. 10)顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关,能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列.包括启动子,上游启动子元件,增强子,加尾信号和一些反应元件等. 11)反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子. 12)启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列. 13)增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列. 它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远. 14)转录因子:直接结合或间接作用于基因启动子、形成具有RNA聚合酶活性 的动态转录复合体的蛋白质因子。有通用转录因子、序列特异性转录因子、辅助转录因子等。

生物化学与分子生物学复习归纳笔记

生物化学与分子生物学重点(1) https://www.360docs.net/doc/5017581712.html, 2006-11-13 23:44:37 来源:绿色生命网 第一章绪论 一、生物化学的的概念: 生物化学(biochemistry)是利用化学的原理与方法去探讨生命的一门科学,它是介于化学、生物学及物理学之间的一门边缘学科。 二、生物化学的发展: 1.叙述生物化学阶段:是生物化学发展的萌芽阶段,其主要的工作是分析和研究生物体的组成成分以及生物体的分泌物和排泄物。 2.动态生物化学阶段:是生物化学蓬勃发展的时期。就在这一时期,人们基本上弄清了生物体内各种主要化学物质的代谢途径。 3.分子生物学阶段:这一阶段的主要研究工作就是探讨各种生物大分子的结构与其功能之间的关系。 三、生物化学研究的主要方面: 1.生物体的物质组成:高等生物体主要由蛋白质、核酸、糖类、脂类以及水、无机盐等组成,此外还含有一些低分子物质。 2.物质代谢:物质代谢的基本过程主要包括三大步骤:消化、吸收→中间代谢→排泄。其中,中间代谢过程是在细胞内进行的,最为复杂的化学变化过程,它包括合成代谢,分解代谢,物质互变,代谢调控,能量代谢几方面的内容。 3.细胞信号转导:细胞内存在多条信号转导途径,而这些途径之间通过一定的方式方式相互交织在一起,从而构成了非常复杂的信号转导网络,调控细胞的代谢、生理活动及生长分化。 4.生物分子的结构与功能:通过对生物大分子结构的理解,揭示结构与功能之间的关系。 5.遗传与繁殖:对生物体遗传与繁殖的分子机制的研究,也是现代生物化学与分子生物学研究的

一个重要内容。 第二章蛋白质的结构与功能 一、氨基酸: 1.结构特点:氨基酸(amino acid)是蛋白质分子的基本组成单位。构成天然蛋白质分子的氨基酸约有20种,除脯氨酸为α-亚氨基酸、甘氨酸不含手性碳原子外,其余氨基酸均为L-α-氨基酸。 2.分类:根据氨基酸的R基团的极性大小可将氨基酸分为四类:① 非极性中性氨基酸(8种); ② 极性中性氨基酸(7种);③ 酸性氨基酸(Glu和Asp);④ 碱性氨基酸(Lys、Arg和His)。 二、肽键与肽链: 肽键(peptide bond)是指由一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸的α-氨基经脱水而形成的共价键(-CO-NH-)。氨基酸分子在参与形成肽键之后,由于脱水而结构不完整,称为氨基酸残基。每条多肽链都有两端:即自由氨基端(N端)与自由羧基端(C端),肽链的方向是N端→C端。 三、肽键平面(肽单位): 肽键具有部分双键的性质,不能自由旋转;组成肽键的四个原子及其相邻的两个α碳原子处在同一个平面上,为刚性平面结构,称为肽键平面。 四、蛋白质的分子结构: 蛋白质的分子结构可人为分为一级、二级、三级和四级结构等层次。一级结构为线状结构,二、三、四级结构为空间结构。 1.一级结构:指多肽链中氨基酸的排列顺序,其维系键是肽键。蛋白质的一级结构决定其空间结构。 2.二级结构:指多肽链主链骨架盘绕折叠而形成的构象,借氢键维系。主要有以下几种类型: ⑴α-螺旋:其结构特征为:①主链骨架围绕中心轴盘绕形成右手螺旋;②螺旋每上升一圈是3.6个氨基酸残基,螺距为0.54nm;③ 相邻螺旋圈之间形成许多氢键;④ 侧链基团位于螺旋的外侧。 影响α-螺旋形成的因素主要是:① 存在侧链基团较大的氨基酸残基;② 连续存在带相同电荷的氨基酸残基;③ 存在脯氨酸残基。 ⑵β-折叠:其结构特征为:① 若干条肽链或肽段平行或反平行排列成片;② 所有肽键的C=O和

(完整版)分子生物学试题及答案(整理版)

分子生物学试题及答案 一、名词解释 1.cDNA与cccDNA:cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA;cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2.标准折叠单位:蛋白质二级结构单元α-螺旋与β-折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块,此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。 3.CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein ) 4.回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。 5.micRNA:互补干扰RNA或称反义RNA,与mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。 6.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7.模体:蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8.信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36 个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。 9.弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。10.魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生一个应急反应,停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11.上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列,-10 区的TATA、-35 区的TGACA 及增强子,弱化子等。 12.DNA探针:是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13.SD序列:是核糖体与mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。 14.单克隆抗体:只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15.考斯质粒:是经过人工构建的一种外源D NA载体,保留噬菌体两端的COS区,与质粒连接构成。16.蓝-白斑筛选:含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5- 溴-4-氯-3- 吲哚-β-D- 半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后,LacZ 基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛 选重组细菌。称之为蓝- 白斑筛选。 17.顺式作用元件:在DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。 18.Klenow 酶:DNA聚合酶I 大片段,只是从DNA聚合酶I 全酶中去除了5' → 3'外切酶活性 19.锚定PCR:用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分别用 多聚dC 和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20.融合蛋白:真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1.DNA 的物理图谱是DNA分子的(限制性内切酶酶解)片段的排列顺序。 2.RNA 酶的剪切分为(自体催化)、(异体催化)两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是(IF-1 )、(IF-2 )和(IF-3 )。 4.蛋白质的跨膜需要(信号肽)的引导,蛋白伴侣的作用是(辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质)。5.启动子中的元件通常可以分为两种:(核心启动子元件)和(上游启动子元件)。 6.分子生物学的研究内容主要包含(结构分子生物学)、(基因表达与调控)、(DNA重组技术)三部分。7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是(肺炎球菌感染小鼠)、(T2 噬菌体感染大肠杆菌)这两个实验中主要的论点证据是:(生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能)。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点:(hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接,)、 (mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子,在mRNA′3 末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴)。9.蛋白质多亚基形式的优点是(亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法)、(可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响)、(活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭)。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括(成核)、(结构充实)、(最后重排)。 11.半乳糖对细菌有双重作用;一方面(可以作为碳源供细胞生长);另一方面(它又是细胞壁的成分)。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP 的启动子S2 进行本底水平的永久型合成;同时需要一个依赖于

现代分子生物学重点

现代分子生物学 第一章 DNA的发现: 1928年,英国Griffith的体内转化实验 1944年,Avery的体外转化实验 1952年,Hershey和Chase的噬菌体转导实验 分子生物学主要研究内容(p11) DNA的重组技术 基因表达调控研究 生物大分子的结构功能研究——结构分子生物学 基因组,功能基因组与生物信息学研究 第二章 DNA RNA组成 脱氧核糖核酸 A T G C 核糖核酸 A U G C 原核生物DNA的主要特征 ①一般只有一条染色体且带有单拷贝基因; ②整个染色体DNA几乎全部由功能基因与调控序列组成; ③几乎每个基因序列都与它所编码的蛋白质序列呈线性对应状态。 染色体作为遗传物质的特点: (1)分子结构相对稳定(贮存遗传信息) (2)通过自我复制使前后代保持连续性(传递遗传信息) (3)通过指导蛋白质合成控制生物状态(表达遗传信息) (4)引起生物遗传的变异(改变遗传信息) C值以及C值反常 C值单倍体基因组DNA的总量 C值反常C值往往与种系进化的复杂程度不一致,某些低等生物却有较大的C值。如果这些DNA 都是编码蛋白质的功能基因,那么,很难想象在两个相近的物种中,他们的基因数目会 相差100倍,由此推断,许多DNA序列可能不编码蛋白质,是没有生理功能的。 DNA的中度重复序列,高度重复序列 中度各种rRNA,tRNA以及某些结构基因如组蛋白基因都属于这一类 高度卫星DNA 核小体 是由H2A H2B H3 H4 各2分子生成的八聚体和约200bp的DNA构成的,H1在核小体外面。 真核生物基因组的结构特点 ①基因组庞大; ②大量重复序列; ③大部分为非编码序列,90%以上; ④转录产物为单顺反子; ⑤断裂基因; ⑥大量的顺式作用元件; ⑦DNA多态性:SNP和串联重复序列多态性; ⑧端粒(telomere)结构。 DNA的一级结构,二级结构 一级机构 指构成核酸的四种基本组成单位--脱氧核糖核苷酸(核苷酸)的连接和排列顺序,表示了该DNA分子

分子生物学复习资料 绝对重点

分子生物学复习资料 (第一版) 一名词解释 1 Southern blot / Northern blot—DNA斑迹法 / RNA转移吸印技术。是为了检测待检基因或其表达产物的性质和数量(基因拷贝数)常用的核酸分子杂交技术。二者均属于印迹转移杂交术,所不同的是前者用于检测DNA样品;后者用于检测RNA样品。 2 cis-acting element / trans-acting factor—顺式作用元件 / 反式作用因子。均为真核生物基因中的转录调控序列。顺式作用元件是与结构基因表达调控相关、能被基因调控蛋白特异性识别和结合的特定DNA序列,包括启动子和上游启动子元件、增强子、反应元件和poly (A)加尾信号。反式作用因子是能与顺式作用元件特异性结合、对基因表达的转录起始过程有调控作用的蛋白质因子,如RNA聚合酶、转录因子、转录激活因子、抑制因子。 3VNTR / STR—可变数目串联重复序列 / 短串联重复。均为非编码区的串联重复序列。 前者也叫高度可变的小卫星DNA,重复单位约9~24bp,重复次数变化大,变化高度多态性;后者也叫微卫星DNA,重复单位约2~6 bp,重复次数约10~60次,总长度通常小于150bp 。(参考第7题) 4 viral oncogene / cellular oncogene—病毒癌基因 / 细胞癌基因。病毒癌基因指存在于逆转录病毒中、体外能使细胞转化、体内能导致肿瘤发生的基因;细胞癌基因也叫原癌基因,指存在于细胞内,与病毒癌基因同源的基因序列。正常情况下不激活,与细胞增殖相关,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤。 5 ORF / UTR—开放阅读框 / 非翻译区。均指在mRNA中的核苷酸序列。前者是特定蛋白质多肽链的序列信息,从起始密码子开始到终止密码子结束,决定蛋白质分子的一级功能;后者是位于前者的5'端上游和3'端下游的、没有编码功能的序列,主要参与翻译起始调控,为前者的多肽链序列信息转变为多肽链所必需。 6 enhancer / silencer—增强子 / 沉默子。均为顺式作用元件。前者是一段含多个作用元件的短DNA序列,可特异性与转录因子结合,增强基因的转录活性,可以位于基因任何位置,通常在转录起始点上游-100到-300个碱基对处;后者是前者内含的负调控序列,结合特异蛋白因子时,对基因转录起阻遏作用。 7 micro-satellite / minisatellite—微卫星DNA / 小卫星DNA 。卫星DNA是出现在非编码区的串联重复序列,特点是有固定重复单位且重复单位首尾相连形成重复序列片段,串联重复单位长短不等,重复次数大小不一。微卫星DNA即STR;小卫星DNA分为高度可变的小卫星DNA(即VNTR)和端粒DNA。(参考第3题) 8 SNP / RFLP—单核苷酸多态性 / 限制性片段长度多态性。前者是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性,它是人类遗传变异中最常见的一种,占所

分子生物学整理

1.核酸与蛋白质的结构比较表如下: 核酸(Nucleic acids) 蛋白质(Proteins) DNA RNA 一级结构Primary structure 核苷酸序列 AGTTCT 或AGUUCU 的排列顺序 3,,5,- 磷酸二酯键 氨基酸排列顺序 肽键 二级结构Secondarystructure 双螺旋 主要是氢键,碱基堆积 力 配对(茎-环结构) (同左) 有规则重复的构象 (α-helix ,β-sheet, β-turn) 氢键 三级结构Tertiary structure 超螺旋RNA空间构象 一条肽链的空间构象 范德华力氢键疏水 作用盐桥二硫键等 四级结构Quaternarystructure 多条肽链 (或不同蛋白) 3.分离和纯化核酸:聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)与琼脂糖凝胶电泳(AGE)广泛用于核酸的分离、纯化 与鉴定 基因组DNA的分离与纯化:(一)酚抽提法(二)甲酰胺解聚法(三)玻棒缠绕法(四)DNA样品的进一 步纯化:纯化的方法包括透析、层析、电泳及选择性沉淀等 4原核生物与真核生物基因信息传递过程中的差异 1. DNA的复制 原核生物真核生物 DNA聚合酶DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、ⅢDNA聚合酶α、β、γ、δ、ε五种,其中δ为主要的聚合酶, γ存在于线粒体中 原核的DNA聚合酶I具有5'-3'外切酶活性。真核生物的聚合酶没有5'-3'外切酶活性,需要一种叫FEN1 的蛋白切除5'端引物 DNA聚合酶III复制时形成二聚体复合物 起始复制地点:细胞质复制地点:细胞核 复制时间:DNA合成只是发生在细胞周期的S期 有时序性,即复制子以分组方式激活而非同步启动复制起点:一个起始位点,单复制子复制起点:多个复制起始位点,多复制子 起始点长度:长起始点长度:短 延长冈崎片段:比较长冈崎片段:比原核生物要短 引物:RNA,切除引物需要DNA聚合酶I 引物:较原核生物的短,除RNA外还有DNA,所以真核生 物切除引物需要核内RNA酶,还需要核酸外切酶。 终止基因为环状的DNA,复制的终止点ter,催 化填补空隙为DNA-polⅠ,DNA连接酶连 接冈崎片段成DNA链真核生物基因为线状的DNA,其复制与核小体的装配同步进行,复制后形成染色体,DNA-polε填补空隙,存在端粒及端粒酶防止DNA的缩短(RNA引物留下的空白无法填补时出现DNA的缩短)

分子生物学考试,名词解释与考点(精要)

一,名词解释 1.(Northern blot)Northern印迹杂交。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。Northern 印迹杂交的RNA吸印与Southern印迹杂交的DNA吸印方法类似,RNA印迹技术正好与DNA相对应,故被称为Northern印迹杂交。 (Southern blot)Southern印迹杂交是一种常用的DNA定量的分子生物学方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。 2.(cis-acting element)顺式作用元件。存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列,它们的作用是参与基因表达的调控,本身不编码任何蛋白质, 仅仅提供一个作用位点, 要与反式作用因子相互作用而起作用。 (trans-acting factor)反式作用因子。是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 3. (VNTR )可变数目串联重复多态性。可变数目串联重复序列是重复单位为9~24bp,重复次数变化大,呈高度多态性的DNA序列,又称小卫星DNA,拷贝数10~1000不等。 (STR)短串联重复序列。又称微卫星DNA,是一类简单的寡核苷酸串联重复序列,其重复单位为2~6bp,重复次数10~60次左右,其长度通常小于150bp,分布在所有染色体中。 4.(viral oncogene)病毒癌基因。病毒(大多是逆转录病毒)具有的一种可以使宿主细胞发生癌变的基因。源自细胞中的正常基因。 (cell-oncogene)细胞癌基因。存在于正常的细胞基因组中,与病毒癌基因有同源序列,具有促进正常细胞生长、增殖、分化和发育等生理功能。在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因,当其受到某些条件激活时,结构和表达发生异常,能使细胞发生恶性转化。 5. (ORF) 开放阅读框。在mRNA的核苷酸序列中,有一段序列是一个特定蛋白质多肽链的序列信息,这一段核苷酸序列从起始密码子开始,到终止密码子结束。 (UTR)非翻译区。是mRNA分子两端的非编码片段。 6.(enhancer)增强子。存在于基因组中的对基因表达有调控作用的DNA调控元件。位置不定,结合转录因子后,可增强基因表达。 (silencer)沉默子。可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。 7.(microsatellite DNA)微卫星DNA。是一类简单的寡核苷酸串联重复序列,其重复单位为2~6bp,重复次数10~60次左右,其长度通常小于150bp,分布在所有染色体中。 (Minisatellite DNA) 小卫星DNA。可变数目串联重复序列是重复单位为9~24bp,重复次数变化大,呈高度多态性的DNA序列,拷贝数10~1000不等。 8. (RFLP)限制性片段长度多态性。是指基因型之间限制性片段长度的差异,这种差异是由限制性酶切位点上碱基的插入、缺失、重排或点突变所引起的。用于分析相关基因多态性的技术。即用同一种限制性内切酶,完全酶切来源于同一物种不同个体的基因组DNA,从而获得长度各异的DNA片段(酶切谱)。 (SNP)单核苷酸多态性。不同物种、个体基因组DNA序列同一位置上的单个核苷酸存在差别的现象。有这种差别的基因座、DNA序列等可作为基因组作图的标志。人基因组上平均约每1000个核苷酸即可能出现1个单核苷酸多态性的变化,其中有些单核苷酸多态性可能与疾病有关,但可能大多数与疾病无关。单核苷酸多态性是研究人类家族和动植物品系遗传变异的重要依据。 9. (cloning vector)克隆载体。可携带插入的外源DNA片段并可转入受体细胞中大量扩增的DNA分子。该分子中含有能够在受体细胞中自主复制的序列和筛选标记,常用于外源基因的克隆,如噬菌体或质粒。 (expression vector)表达载体。能使插入基因进入宿主细胞表达的克隆载体,包括原核表达载体和真核表达载体,可以是质粒、噬菌体或病毒等。典型的表达载体带有能使基因表达的调控序列,并在适当位置有可插入外源基因的限制性内切酶位点。 10.(optional exon)外显子选择。是指在不同的剪接方式中,某一个外显子(或几个外显子)可以在成熟的mRNA中保留,也可以通过剪接过程被去掉。所以,至少有两种剪接方式,一是外显子全部保留,二是删除一个或几个外显子。 (optional intron)内含子选择。是指在不同的剪接方式中,内含子可以被完全去掉,也可以有一个内含子被保留在成熟的mRNA中。有两种剪接方式,一是内含子全部删除,二是保留某一个内含子。 11.(promoter)启动子。DNA分子上能与RNA聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域。在许多情况下,还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点。 (terminator)终止子。转录过程中能够终止RNA聚合酶转录的DNA序列。使RNA合成终止。。①转录过程产生RNA 的一段可终止转录的茎-环结构序列;②位于模板基因下游该结构所对应的DNA序列。在大肠杆菌中有依赖于ρ或不依赖于ρ的两类终止子。 12.(leader sequence)前导序列。mRNA 5′端的核苷酸片段。位于翻译起始密码子AUG之前。在真核生物中前导序列通常是不翻译的;在原核生物中,前导序列含有的SD序列可与核糖体小亚基的16S rRNA相配对,置起始密码子于核糖体上适当位置,以启动翻译过程。 (SD sequence)SD序列。信使核糖核酸(mRNA)翻译起点上游与原核16S 核糖体RNA或真核18S rRNA 3′端富含嘧啶的7核苷酸序列互补的富含嘌呤的3~7个核苷酸序列(AGGAGG),是核糖体小亚基与mRNA结合并形成正确的前起始复合体的一段序列。 13.(gene)基因。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位,是染色体或基因组的一段DNA序列

分子生物学课件整理朱玉贤

1、广义分子生物学:在分子水平上研究生命本质的科学,其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学:即核酸(基因)的分子生物学,研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程,以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和 酶的结构与功能 3、基因:遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息 的基本单位,是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的 RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因:基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,包含产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学:是依附于对DNA序列的了解,应用基因组学的知识和工具去了解 影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学:是以蛋白质组为研究对象,研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学:对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组:指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学:是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白:也叫微生物蛋白,它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微 生物菌体。因而,单细胞蛋白不是一种纯蛋白质,而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组:指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值:指生物单倍体基因组的全部DNA的含量,单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾:C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因:共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠:同一段核酸序列参与了不同基因编 码的现象。 16、单拷贝序列:单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次,因而复性速度很慢。单 拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息,编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列:低度重复序列是指在基因组中含有2~10个拷贝的序列 18、中度重复序列:中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万(<105)次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序,但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列:基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列 的长度为6~200碱基对。

现代分子生物学考研复习重点

现代分子生物学考研复习资料整理 第一章绪论 分子生物学:是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构及其重要性、规律性和相互关系的科学 分子生物学的主要研究内容 1、DNA重组技术 2、基因表达调控研究 3、生物大分子的结构功能研究——结构分子生物学 4、基因组、功能基因组与生物信息学研究 5、DNA的复制转录和翻译 第二章染色体与DNA 半保留复制:DNA在复制过程中碱基间的氢键首先断裂,双螺旋解旋并被分开,每条链分别作为模板合成新链,产生互补的两条链。这样新形成的两个DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样,因此,每个子代分子的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新合成的,所以这种复制方式被称为DNA半保留复制 DNA半不连续复制:DNA双螺旋的两条链反向平行,复制时,前导链DNA的合成以5′-3′方向,随着亲本双链体的解开而连续进行复制;后随链在合成过程中,一段亲本DNA单链首先暴露出来,然后以与复制叉移动相反的方向、按照5′-3′方向合成一系列的冈崎片段,然后再把它们连接成完整的后随链,这种前导链的连续复制和后随链的不连续复制称为DNA 的半不连续复制 原核生物基因组结构特点:1、基因组很小,大多只有一条染色体2、结构简练3、存在转录单元,多顺反子4、有重叠基因 真核生物基因组的结构特点:1、真核基因组庞大,一般都远大于原核生物的基因组2、真核基因组存在大量的重复序列3、真核基因组的大部分为非编码序列,占整个基因组序列的90%以上,该特点是真核生物与细菌和病毒之间最主要区别4、真核基因组的转录产物为单顺反子5、真核基因是断裂基因,有内含子结构6、真核基因组存在大量的顺式作用元件,包括启动子、增强子,沉默子等7、真核基因组中存在大量的DNA多态性8、真核基因组具有端粒结构 DNA转座(移位)是由可移位因子介导的遗传物质重排现象 DNA转座的遗传学效应:1、转座引入插入突变2、转座产生新的基因3、转座产生的染色体畸变4、转座引起生物进化 转座子分为插入序列和复合型转座子两大类 环状DNA复制方式:θ型、滚环型和D-环型 第三章生物信息的传递(上)从DNA到RNA 转录:指拷贝出一条与DNA链序列完全相同的RNA单链的过程 启动子:是一段位于结构基因5′段上游区的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确地结合并具有转录起始的特异性 原核生物启动子结构:存在位于-10bp处的TATA区和-35bp处的TTGACA区,其是RNA聚合酶与启动子的结合位点,能与σ因子相互识别而具有很高的亲和力 终止子:是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列(促进转录终止的DNA序列) 终止子的类型:不依赖于ρ因子和依赖于ρ因子 增强子:能增强或促进转录起始的序列 增强子的特点:1、远距离效应2、无方向性3、顺式调节4、无物种和基因的特异性5、具

分子生物学期末考试重点

1.定义重组DNA技术 将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来,然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状。 2.说出分子生物学的主要研究内容 1.DNA重组技术 2.基因表达研究调控 3.生物大分子的结构功能研究 4.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3.简述DNA的一、二、三级结构 一级:4种核苷酸的连接及排列顺序,表示了该DNA分子的化学成分 二级:2条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋结构 三级:DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定的空间结构 4.原核生物DNA具有哪些不同于真核生物DNA的特征? ①DNA双螺旋是由2条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成,多核苷酸的方向由核苷酸间的磷酸二酯键的走向决定,一条是5---3,另一条是3---5②DNA双螺旋中脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧构成基本骨架,碱基排在内侧③两条链上的碱基通过氢键相结合,形成碱基对 5.DNA双螺旋结构模型是由谁提出的?沃森和克里克 6.DNA以何种方式进行复制,如何保证DNA复制的准确性? 线性DNA的双链复制:将线性复制子转变为环状或者多聚分子,在DNA末端形成发卡式结构,使分子没有游离末端,在某种蛋白质的介入下在真正的末端上启动复制。环状DNA 复制:θ型、滚环型、D型 ①以亲代DNA分子为模板进行半保留复制,复制时严格按照碱基配对原则 ②DNA聚合酶I 非主要聚合酶,可确保DNA合成的准确性

③DNA修复系统:错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SOS系统 7.简述原核生物DNA复制特点 只有一个复制起点,复制起始点上可以连续开始新的DNA复制,变现为虽只有一个复制单元,但可以有多个复制叉 8.真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控? 细胞生活周期水平调控;染色体水平调控;复制子水平调控 9.细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复? 错配修复,恢复错配;切除修复,切除突变的碱基和核苷酸片段;重组修复,复制后的修复;DNA直接修复,修复嘧啶二聚体;SOS系统,DNA的修复,导致变异 10.什么是转座子?分为哪些种类? 是存在于染色体DNA上可自主复制和移动的基本单位。可分为插入序列和复合型转座子11.什么是编码链?什么是模板链? 与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链,另一条根据碱基互补配对原则指导mRNA 合成DNA链称为模板链 12.简述RNA的种类及其生物学作用 mRNA:编码了一个或多个多肽链序列。 tRNA:把mRNA上的遗传信息变为多肽中的氨基酸信息。 rRNA:是核糖体中的主要成分。 hnRNA:由DNA转录生成的原始转录产物。 snRNA:核小RNA,在前体mRNA加工中,参与去除内含子。 snoRNA:核仁小RNA,主要参与rRNA及其它RNA的修饰、加工、成熟等过程。scRNA:细胞质小RNA在蛋白质合成过程起作用。

分子生物学考试资料完美整理

第一章 1、3′—end and 5′—end:DNA或RNA单链带有3’-羟基或其磷酸酯的一段叫做3’端;DNA或RNA单链带有游离5’-羟基或其磷酸酯的一段叫做5’端。 2、A、C、T、G:Adenine,guanine,cytosine,thymine 3、Melting temperature:熔解温度,指DNA变性过程中通过加热,有一半双链被分解或形成单链时的温度。 4、Spontaneous mutations:在自然条件下发生的突变叫做自发突变或自然突变。 5、Transition:转换是基因突变的一种,指一种嘧啶被另一种嘧啶代替、一种嘌呤被另一种嘌呤代替,G-C<=>A-T。 Transversion:颠换是基因突变的一种,指异型碱基的置换,即嘌呤被嘧啶代替或相反,A-T<=>T-A或G-C<=>G-C。 6、Hotspot:突变热点是突变发生频率高的位点或重组频率高的那些位点。 7、Modified bases :修饰碱基或稀有碱基,指除了那些在 DNA(A、T 、 G、 C)、 RNA( A、 U 、G、C) 合成时的四种通用碱基之外的一些碱基,由核酸合成后修饰产生。 9、Hybridization:杂交,指RNA 和 DNA 链互补配对形成 RNA-DNA 杂合链的过程。 8、Denaturation:变性,指DNA或RNA加热从双链转变为单链的状态。 10、Renaturation(annealing):复性(退火),DNA 双螺旋分子变性后的互补单链再结合成双链的过程。 11、如何理解结构决定功能(举例说明)? 第二章 1、Viroid:类病毒,是没有蛋白外壳的环状小分子单链RNA感染因子,能引起高等植物基因序列的甲基化,从而导致转录的失败。 2、PSTV: 土豆纺锤体管状病毒 (potato spindle tuber virus) ,为比较典型的呈梯状的类病毒,其RNA是一个裸露的闭合环状单链RNA分子。 3、Prion:朊病毒,是一种蛋白质样感染因子,不含核酸但表现出可遗传的特性,能引起人等哺乳动物的中枢神经系统病变。 PrP:朊病毒相关蛋白(prion related protein)。 PrP C:是人等哺乳动物的身体中存在的正常存在的细胞形式(c是细胞型的缩写),可被蛋白酶完全水解。 PrP SC:是朊病毒相关蛋白的致病形式(sc是瘙痒症的缩写)。 PrPsc蛋白和PrPc蛋白和是同分异构体,一级结构相同,但PrPsc比PrPc具有更多的β折叠,使得其溶解度降低,对蛋白酶抗性加强,从而被蛋白酶水解,从而致使大脑细胞代谢异常致病。 4、Scrapie :羊瘙痒病,是最早发现的朊蛋白病。 5、allele:等位基因,指位于染色体同一位置分别控制两种不同性状的基因。 6、Gain-of-function mutation:功能获得型突变,表示使蛋白质获得新的活性(或功能),性质显性的。 Null mutation:无效突变,表示基因的活性完全消失,因为该基因已被删除。 Loss-of-function mutation:功能丧失型突变,导致丢失原有功能的基因突

相关文档
最新文档