不同生境下野生铁皮石斛内生真菌多样性的初步研究

瘤胃微生物定量方法的研究进展_郭同军

瘤胃微生物定量方法的研究进展 郭同军1,2,王加启1,王建平1,霍小凯1,2,卜登攀1,魏宏阳1,周凌云1,刘开朗1 (1.中国农业科学研究院北京畜牧研究所动物营养学国家重点实验室,北京　100193;2新疆农业大学,乌鲁木齐　830052) 摘要:当前人们对瘤胃中微生物的认识只有10%～20%,不断改进研究技术和手段,才能大大推动瘤胃微生态领域的研究。作者阐述了瘤胃微生物传统定量方法(滚管计数法和最大或然数法)和分子生物学定量方法,如探针杂交技术、荧光原位杂交、D GGE、定量PCR和流式细胞计量术(flow cytometry)等的应用状况及其各自的优缺点。 关键词:瘤胃微生物;滚管计数法;最大或然数法;Real2Time PCR;流式细胞计量术 中图分类号:Q93.3 文献标识码:A 文章编号:167127236(2009)0420019206 反刍动物在长期的自然进化过程中获得了独特的瘤胃发酵系统。瘤胃内有大量的微生物,目前为止,所知细菌达200种以上,活菌数为1011个/mL,原虫超过25个属,其数量为104～106个/mL,真菌含有5个属(Miron等,2001)。由众多的细菌、真菌和原虫组成的微生态系统中,不仅每种微生物与底物的作用机理不同,各种微生物之间的关系更是复杂(冯仰廉,2004)。传统定量方法如滚管法(Hun2 gate,1969)和最大似然法(Dehority等,1989)只能培养瘤胃微生物中的一小部分,这使得瘤胃微生物的多样性被严重低估(Amann等,1995)。20世纪80年代,基于16S/18S rRNA/rDNA的分子生物学定量方法的兴起,可以提供微生物核酸分子方面的特征,评价不同生态系统中微生物的遗传多样性和 收稿日期:2008211226 作者简介:郭同军(1981-),男,甘肃人,硕士生,研究方向:瘤胃微生物工程。 通信作者:王加启(1967-),男,安徽人,研究员,博士生导师,从事反刍动物营养和牛奶质量改良研究。E2mail: wang2jia2qi@https://www.360docs.net/doc/5019213940.html,;010********* 基金项目:“十一五”国家奶业科技支撑计划(2006BAD04A14和2006BAD04A10)。系统发育关系(Tajima等,1999),而且还能对瘤胃微生物进行计数(Sdiva等,2004),由于研究方法的不断改进,使得人们不断的发现许多新的瘤胃微生物品种(K oike等,2003;Shin等,2004)。认识瘤胃微生物的功能、活动规律和建立准确、快速、高效的瘤胃微生物定性及定量评价方法,是瘤胃微生态研究必然的趋势。作者主要就当前瘤胃微生物定量方法的研究进展做了详细阐述。 1　定量研究方法在瘤胃微生物研究中的应用及评价 1.1　传统定量方法　采用Hungate发展起来的厌氧培养技术,以及采用模拟瘤胃环境而设计的培养基,对瘤胃微生物进行分离、纯培养、计数、形态鉴定、生理生化特性的鉴别、分类等。瘤胃细菌与真菌的数量用显微镜直接计数,常采用滚管法计数,以及最大或然数计数法(mo st p robable number,MPN) (Dehority等,1989)。 1.1.1　稀释平板记数法　稀释平板记数法又称活菌记数法,是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一特征设计的记数方法。瘤胃液中细菌或真菌的活菌记数常采用亨氏滚管计数法(roll2t ube tech2 nique)(Hungate,1969)。亨氏滚管计数法可以获 Abstract:The advances on nutrient requirements,feedstuff evaluation and formulation techniques of broiler are reviewed in this paper.It showed that feeding phases decision is more scientific f rom three to four phases;nutrient requirement specifica2 tions is presenting diversified trend of development,which are referred to be combined with the broiler breeds,environment, production goal and the evaluation systems of the feedstuff itself etc;secondly,formulation optimization technology itself is rel2 ative invariable,but if the coefficients matrix of formulation model is integrated f rom the standard deviation of the nutrients of used feedstuff,it will evidently enhance the true probability for goal nutrients to reach.The third,performance prediction a2 bout broiler is improved when diets are formulated on the basis of standardized ileal amino acid digestibility.The results and thought can provide the scientific basis for developing the new generation expert system of broiler feeding and nutrition. K ey w ords:broiler;nutrient requirements;formulation technology;standardized ileal digestibility

植物内生真菌的分离

植物内生真菌的分离 一、实验目的 1．理解内生真菌存在的普遍性和多样性 2.掌握常规的微生物分离纯化方法 3.掌握分菌过程中的一些基本操作技能 二、实验原理 植物内生真菌( Ｅnｄophｙte) 是指那些在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部的真菌或细菌，而宿主植物一般不表现出外在的症状。所有植物中几乎都存在内生菌. 由于植物内生真菌与宿主在长期的进化过程中形成了特殊的生态关系,因而内生真菌能产生与宿主相同或相似的具有生理活性的次生代谢产物，从内生菌中寻找和发现新的活性化合物越来越成为微生物次生代谢产物的研究热点之一。 采用微生物学常规的组织分离法从植物中分离内生真菌 三、实验材料 板蓝根新鲜健康的叶片 试剂:次氯酸钠、无水乙醇、葡萄糖、琼脂、青霉素、链霉素 培养基：PDA培养基、分离培养基 四、实验步骤 （一)、配制PDA培养基 10月27号晚上：

(1）配置ＰDA培养基,用电子称称取去皮的土豆10０g，煮沸30min，4层纱布过滤，滤液加热,加入琼脂７.5克，琼脂完全融化后加入葡萄糖10g，待稍冷却后加水至5０0毫升。 (2)准备1０瓶无菌水，每瓶150ml左右。 (3)包好烧杯,培养皿，涂布棒等实验仪器，等待消毒。 (二)、配制分离培养基 28号中午： （1）配置分离培养基，将PDA培养液均分成两份，一份备用,另一份待高温灭菌后,加入青霉素１0０mg／L、链霉素200mg/L的混合液20mｌ，即得到分离培养基。 （2）用消毒后的培养皿在通风橱中倒平板,注意在整个过程中保证无菌操作。 (三)、采集新鲜板蓝根叶片 ２8号晚上到实验室外采集新鲜健康叶片完整的板蓝根叶片。(四)、植物组织表面消毒 2８号晚上将新鲜、健康的板蓝根叶片于自来水下冲洗干净，用吸水纸吸干表面水分后剪成小段(片）做如下表面消毒处理:75%酒精漂洗3ｍin，无菌水冲洗4~5次,5％次氯酸钠溶液漂洗叶3ｍin,无菌水冲洗4~5次，无菌滤纸吸干水分。 （五）、接种并培养 28号晚上: (1）将上述表面消毒后的材料剪切成0.５ｃm 2 小块,放入含

真菌多样性研究现状综述

内生真菌多样性研究现状综述 魏洁 摘要：随着研究的发现，内生真菌的在自然界的作用被越来越重要。本文章主要分析了内生真菌生物多样性的现状、内生真菌多样性检测技术和方法及其影响因素分析。从植物内生真菌物种多样性与产生生物活性物质多样性等方面总结近年最新的研究进展, 提出了现阶段植物内生真菌及活性物质研究的存在的问题及其未来发展方向。 关键词：内生真菌；多样性；研究技术；影响因素；展望 Research of endophytic fungi diversity Abstract:With the findings of the study, endophytic fungi are an increasingly important role in nature. This article mainly analyzes the status quo of endophytic fungi biodiversity, the detection techniques and methods of endophytic fungi diversity and its influencing factors. From the latest Endophytic fungal species diversity and produce biologically active substances diversity summarizes research progress in recent years, we dish the stage of plant endophytic fungi and active substances research problems and their future development direction. Keywords：endophytic fungi; diversity; research techniques; influencing factors; prospect 1.引言 真菌是吸收异养型的真核生物，种类繁多的植物内生真菌是一大类尚未被充分认识的真菌。随着近二十年来的研究的发现内生真菌具有重要的生态学意义和经济意义，其物种多样性也是非常丰富的。内生真菌（内生菌）(Fungal endophyte)[1]是指一类在其部分或全部生活史中存活于健康植物组织内部, 而不使宿主植物表现出明显感染症状的微生物。在植物体特殊环境中，内生真菌与寄主之间协同进化，在生活演变过程中形成一种互利共生的关系。内生真菌可以促进植物的生长发育[2], 提高宿主植物的抗逆性[3]。近年来,由于内生真菌的次生代谢物在病虫害的生物防治、医药工业上的用途和范围逐渐增大,因此有关内生真菌的研究逐渐受到重视[4]。内生真菌由于其物种丰富,数量庞大,而且与其它生物之间具有紧密的生态关系,使其成为天然活性物质的丰富来源,因而引起人们的广泛关注,成为目前国内外研究的热点之一. 2研究现状 近年来对内生菌的研究逐渐进入了一个新的阶段，内生真菌的研究日益受到了全球性的广泛关注，在其侵入机制每年有数百篇论文报道新发现的内生菌。从内生真菌寻找活性成分日益成为研究的热点。 2.1 植物内生真菌的生物多样性

铁皮石斛市场营销策略

铁皮石斛市场营销策略 中国铁皮石斛加工品市场营销策略研究 一、中国铁皮石斛加工品市场现状 铁皮石斛是我国传统名贵中药材, 具有滋阴清热、益胃生津, 润肺止咳等功效,常用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热等多种病症。因森林生态破坏与资源的过度开采, 野生资源濒临枯竭, 1987 年国务院将其列为国家重点保护植物。为了实现铁皮石斛资源的可持续利用, 科研人员自20世纪70年代就开始了人工栽培技术研究工作, 但直到新世纪, 种子生产、组织培养和设施栽培等人工繁育关键技术才得以突破, 并迅速推广应用。同时, 铁皮石斛药用功效与价值的研究也不断深入,一批功能性保健专利产品得以研发、生产, 形成了从铁皮石斛种植生产、加工到销售完整的产业链 , 成为重要的高科技富民农业产业。 二、铁皮石斛加工品市场营销策略 现阶段铁皮石斛产品生产线在各个中药材加工企业中都属新增项目,原有产品 的营销模式固然可以应用到铁皮石斛产品上来,但对于投入成本较大、营养价值较高且消费者并不十分了解的铁皮石斛产品来说,采用原有策略显然已经不能满足市场的需要。 因此,研究制定一套新的、符合铁皮石斛产品本身特性的市场营销策略显得尤 为重要。 1.产品策略 国内对铁皮石斛的认识仅仅局限在少数经济发达城市,而众多种类铁皮石斛加 工品的上市恰恰更大范围地增进了消费者对铁皮石斛的了解与关注。但是,所谓的铁皮石斛加工品是否含有真正来自铁皮石斛果实的原料,而不仅仅是商家用来炒作的概念和促销的手段,这一点还有待于考究。为了使消费者了解真正的铁皮石斛,并

能够根据自身需求选择产品,我们特别针对国内市场上的部分铁皮石斛产品进行了 研究分析。 , 开发与销售 从各地销售市场调研看, 铁皮石斛销售市场目前主要在浙江, 其次是上海、北 京等大都市, 包括主产区云南在内的大部分区域铁皮石斛销售还未形成市场。国 内市场上目前能够购买到的国内企业或合资企业生产的铁皮石斛产品可分为三大类,目前市场销售的一是将铁皮石斛茎制成干品, 即铁皮枫斗, 它由铁皮石斛剪去部分须根后, 边烘边扭成螺旋形或弹簧状干品。二是精深加工产品, 主要有3种类 型,42种，见表1，即胶囊(丸)、口服液和浸膏, 其中有铁皮石斛茎粉末纯品, 但 更多的是添加人参、糖、维生素、灵芝等加工成的复合保健品。三是鲜品直接销售, 包括茎、花和叶, 其中茎为最重要的销售品。 表1 浙江杭州市场销售的石斛产品类型及销售产品类型代表产品主要产地 或产销售场所 家 茎干制品铁皮枫斗云南昆明、浙江集散市场、医药 乐清、广西等产名店 地 精加工品铁皮枫斗胶丸, 浙江森宇控股超市、医药名 铁皮枫斗晶集团、武义寿仙店、专卖店 (冲剂), 铁皮谷药业、浙江天 枫斗胶囊, 铁皇药业、 皮枫民康天然植物 斗晶(颗粒), 制品、杭州胡庆 石斛芝品余堂药业、康恩

影响土壤真菌多样性的土壤因素及土壤真菌研究进展

土壤真菌多样性研究及真菌分类方法研究进展 陈秋君 201231142005 经济管理学院12级20班 摘要：简述了土壤真菌的多样性以及影响土壤真菌多样性的因子，介绍了土壤真菌分类方法近年来的研究进展。 关键词：土壤真菌多样性影响因子研究方法 0 引言 真菌是一类种类繁多、分布广泛的真核微生物. 真菌多样性在维持生物圈生态平衡和为人类提供大量未开发的生物资源方面起到了重要作用. 真菌构成了土壤的大部分微生物生物量, 具有分解有机质, 为植物提供养分的功能, 是生态系统健康的指示物. 在农业中, 真菌既降低粮食产量, 又为控制植物病虫害和其他真菌生物防治提供一条有效途径. 对根际真菌结构和多样性的了解将有助于更好的了解真菌对病原菌的抑制功能 . 在林业中, 丛枝真菌与植物相互共生作用, 为植物提供养份, 使植物能耐受干旱或贫养的条件, 同时也提高了植物的多样性 . 在草地生态系统中, 分解者生物量总体中78% ~ 90%是真菌 . 20 世纪60 年代以来, 微生物生态学研究发展较快, 推动了土壤真菌学研究的发展, 人们对探究土壤中真菌存在的形式、数量、活性以及它们在物质转化中的重要作用等方面充满兴趣。70 年代以后人们更进一步认识到土壤真菌是微生物区系的主要成分, 并具有较高的生物活性。80 年代至今, 由于逐渐采用新的研究技术和手段, 土壤真菌研究的发展进入了一个新时期。 虽然真菌在陆地生态系统中有很重要的作用, 但是人们对自然界的真菌多样性了解还很少. 受到全球气候变化、环境污染和人类活动等诸多因素的影响, 自然环境中真菌的种类和数量、分布都发生了显著的变化. 土壤真菌研究越来越受到人们的重视。 1 土壤真菌多样性 1.1 物种多样性 通常真菌被描述为具有真核, 能产生孢子、无叶绿素的有机体, 以吸收方式获得营养, 普遍以有性和无性两种方式进行繁殖, 菌丝通常是由丝状、分枝的枝细胞构成, 并典型地被细胞壁所包裹. 真正意义的真菌包括四大类群, 壶菌门、接合菌门、子囊菌门、担子菌门. 已知的壶菌约100 属, 1 000种. 最新研究估计全世界的真菌种类约有150 万, 但至今已被正式描述的只有5%~ 10%[ 18~ 20] , 绝大多数是未知的. 其原因一方面在于对真菌分离培养技术的依赖, 不能从少量材料中分离出目标生物, 缺少对所有真菌群落生物都适应的培养基和培养条件; 另一方面在于对真菌生活环境缺乏全面了解, 不能准确地评价不同地域( 特别是热带雨林地区) 真菌群落的结构组成. 1.2 生境多样性 真菌广泛分布在各种各样的土壤环境中, 包括农田、林地、草地、沼泽湿地、温泉热土、冻土层等. 由于不同环境因子的影响, 使土壤真菌在其生活环境中形成独特的群落种类、组成和分布规律. 例如在林地中外生菌根真菌的种类、数量较多, 而在草地生态系统中丛枝菌根真菌的分布比较广泛. 在一些极端环境, 如南北极的冻土层中则分布着丰富的子囊菌门生物, 而在温泉热土中则与其他土壤例如林地的优势种类几乎完全不同. 一些真菌的生活环境仍然没被完全的报道,真菌能否像细菌一样生活在一些极端环境中? 这有待我们进一步去发现新环境中新的种类, 并探索其生理机制. 1.3 功能多样性 真菌在土壤生态系统中发挥着多种多样的功能, 包括降解纤维素、半纤维素、木质素、胶质、还原氮、溶解磷、螯合金属离子、产生青霉素等一些抗生素等.功能基因多样性又使我们对真菌功能多样性有了更进

铁皮石斛市场调查报告

铁皮石斛市场调查分析报告 一、项目简介及市场简况 铁皮石斛是石斛属药用植物中最为珍稀名贵的一种，被誉为人间仙草。现代科学研究表明，铁皮石斛有效成分主要为石斛碱、石斛苷、石斛多糖、18种氨基酸、酚类、挥发油等。 人们对铁皮石斛十分熟悉，有长期食用的习惯，传统历史久远。目前，铁皮石斛市场需求量很大，但由于自然资源稀缺，人工种植技术成熟度有待提高，其市场供给能力较弱。铁皮石斛种苗、鲜石斛、以鲜石斛加工而成的枫斗及其深加工产品均有广阔的市场前景。适合种植地区：我国华南及东南亚。 经国内外联机检索，国外对于铁皮石斛介绍的相关文献甚少，Internet网上仅提到铁皮石斛，但未作深入讨论。国内自七十年代末以来，相关研究机构对铁皮石斛的组织培养条件、移栽影响因素、成活率和铁皮石斛有效成分等方面进行了一些探索。基本上以传统的培养基及组织培养器具进行组培苗的生产，然后人工模拟铁皮石斛的生长环境，将组培苗移栽到大棚，但移栽成活率不高，且成本居高不下。大部分研究机构(或公司)由于人工栽培本身的难度及成本问题，而停留在实验研究阶段，无法实现商业(工业)化生产。现在，铁皮石斛的人工种植，已成为国内学者、研究机构和企业(公司)关注和研究开发的热点之一。 国际市场上，每公斤铁皮枫斗价格为1300美元左右；东南亚一带，早有历史上形成的销售市场，价格高达每公斤1500美元。澳门、香港、韩国、日本、台湾、马来西亚、新加坡需求旺盛，属有价无货的紧缺药材。在国内市场上，用铁皮石斛制成的枫斗价格为10,000元/kg。 二、铁皮石斛主要药理功效 1、滋阴生津 2、增强体质、调节免疫力 3、抗肿瘤 4、降低血糖、血脂、血压

铁皮石斛有效成分及药理作用的研究进展

铁皮石斛有效成分及药理作用的研究进展 张绘芳1，郭慧2 【摘要】铁皮石斛主要含石斛多糖、生物碱、氨基酸、微量元素和菲类化合物等有效成分；现代研究表明，其具有增强机体免疫力、抗肿瘤、促进消化液分泌、抑制血小板凝集、降血脂、降血糖、抗氧化、抗衰老和退热止痛等药理作用。本文通过对相关文献的整理和归纳，对铁皮石斛有效化学成分和药理作用的研究概况作一综述，为开发利用有药用价值的天然产物提供参考。 【关键词】铁皮石斛；化学成分；药理作用 铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lindl)为兰科(Orchidiaceae)石斛属多年生草本植物的新鲜或干燥茎。铁皮石斛又名铁皮枫斗、耳环石斛、铁皮兰、黑节草等，为石斛之上品，名列“中华九大仙草”之首。其味甘，性微寒，归胃、肾经，具有养阴清热、益胃生津的功效，药用价值历代为人们所推崇。本文就近年来对铁皮石斛的化学成分和药理作用研究情况做一次较全面回顾，旨在使该种传统中药的独特药用价值被更多地了解，为进一步研究、开发和利用提供参考。 1 有效化学成分 1.1 多糖 多糖是铁皮石斛中一种重要的活性物质，且含量较高。研究表明，多糖成分与铁皮石斛的药效，如增强机体免疫机能、杭肿瘤、杭衰老、杭疲劳、降血糖等方面，有着密切的联系。实验证明从铁皮石斛中能分离纯化得到三种多糖I、II、III，并确定它们为一类0-乙酸葡萄甘露聚糖。杨虹等运用糖组成分析、甲基化分析及NMR等方法研究铁皮石斛多糖DT2、DT3的化学结构，主要以。α-(1-4)-D-Glc为主链。这种多糖具有增长T细胞、B细胞、NK细胞和巨噬细胞功能的作用。 1.2 生物碱 生物碱类成分是石斛属植物中最早分离并进行结构确认的化合物，其研究开

内生真菌研究进展

植物内生真菌研究进展 植物内生真菌（Endophytic fungus）是指在生活史中某一阶段或整个阶段存在于健康植物组织内部，对植物组织没有引起明显病症或对宿主没有造成明显伤害的真菌。内生真菌在植物组织中普遍存在，具有丰富的物种多样性。它是生活在植物组织内的一类微生物, 是植物微生态系统中的天然组成成分，且长期生活在植物体内的特殊环境中, 与寄主协同进化, 根据内共生理论, 内生真菌可能产生与宿主相同或相似的具有生物活性的次生代谢产物。1898年，Vogl等人从黑麦草Lolium temulentum L. 种子内分离出第一株内生真菌，引起了人们对植物内生真菌的注意。特别是美国学者从短叶红豆杉Taxus brevifolia的韧皮部分离到一株产抗癌物质紫杉醇的内生真菌，更是掀起了各国学者对内生真菌的研究热潮。 1 植物内生真菌的研究方向 内生真菌活性成分的筛选有两条思路。一是根据部分内生真菌具有合成和宿主植物相同或相似活性成分的能力这一特点，从药用植物中寻找具有合成确定化合物的内生真菌，常用方法是对分离得到的内生真菌培养液提取物通过色谱技术、单克隆抗体免疫检测等手段来确定该内生菌是否有产生目的化合物的能力。这一思路目标明确、针对性强、工作量相对较小，是目前从内生真菌中筛选活性物质的主要方法，采用这种方法已从多种资源缺乏的药用植物的内生菌中分离得到了和宿主植物相同或相似的活性物质。这种思路具有一定的偶然性，因为不能证实所有的植物中都存活着具有合成和宿主植物相同或相似活性物质的内生真菌。二是按照传统的化合物分离纯化鉴定的思路，寻找未知但具有特定活性的化合物。首先是按照目的选择不同的筛选模型进行活性菌株的筛选。其次是对筛选出的活性菌株发酵培养、分离纯化活性物质，再对活性物质进行理化研究及结构鉴定。 2 内生真菌药用活性物质及其生物学作用 2.1 抗肿瘤活性物质 2.1.1萜类化合物 紫杉醇是存在于各种紫杉属植物树皮和树叶中的萜类化合物, 被当今世界上认为是广谱、活性最强的抗癌药物。由于紫杉属植物中紫杉醇含量极低，加之紫杉属植物生长极其缓慢，自然资源非常缺乏。1993 年美国学者Stierle 等首次从短叶紫杉( Taxus brevifolia) 的韧皮部中分离出一种新的内生真菌( Taxomyces an2dreanae)，可在半合成培养液中产生紫杉醇和紫杉烷类化合物。这一发现为用微生物发酵法生产紫杉醇以解决紫杉醇药源危机提供了一条新途径，并成为从药用植物中分离内生菌热潮的开端。2006年, 田仁鹏等从生长在

铁皮石斛功效大全

铁皮石斛功效大全 1、滋养阴津 《中国药学大词典》称铁皮石斛“专滋肺胃之气液，气液冲旺，肾水自生”，善于养阴生津，治疗阴虚津亏诸症。 2、增强体质 铁皮石斛具有滋阴养血的功能。清代《药性论》说：铁皮石斛能补肾积精、养胃阴、益气力。含有丰富的多糖类物质，具有增强免疫功能的作用。 3、补益脾胃 铁皮石斛是益胃生津药。《神农本草经》、《本草再新》中均有记载，称谓“肠胃药”，是治疗胃脘痛、上腹涨痛的常用药物。现代医学实验证实：铁皮石斛对脾胃病中常见的致病菌幽门螺杆菌有较好的抑制作用，有助于治疗萎缩性胃炎、浅表性胃炎、十二指肠溃疡等幽门螺杆菌阳性的病症；同时，口服铁皮石斛煎液能够促进胃液的分泌，增强胃的排空能力，帮助消化。 4、护肝利胆 铁皮石斛有较好的利胆作用。历代医家都认为“铁皮石斛”具有滋养肝阴的作用，是治疗各种肝胆病的要药，可用于治疗肝炎、胆囊炎、胆结石等肝胆疾病。 5、强筋降脂 人进入中年以后，阴津开始衰弱，筋骨功能逐渐减退，铁皮石斛能够滋养阴液、润滑关节，从而达到强筋健骨、流利关节、增强抗风湿的效果。现代药理研究还表明：铁皮石斛能提高应激能力，具有良好的抗疲劳、耐缺氧作用；可促进循环、扩张血管、降低血胆固醇和甘油三脂。 6、降低血糖 铁皮石斛功能养阴清热润燥，自古以来就是治疗糖尿病的专用药。临床研究表明，铁皮石斛不仅可以增强胰岛素活性，同时能显著降低血糖水平，使血正常。 7、抑制肿瘤 铁皮石斛对肺癌、卵巢癌和早幼粒细胞性白血病等恶性肿瘤的某些细胞有杀灭作用，具有较强的抗肿瘤活性。临床用于恶性肿瘤的辅助治疗，能改善肿瘤患者的症状，减轻放、化疗的副作用，增强免疫力，提高生存质量，延长生存时间。 8、明亮眼睛 石斛具有滋阴养目的功能，被历代医家作为养护眼睛的佳品。现代药理学研究证实：石斛对防治老年白内障和保护少儿视力有明显效果。 9、滋养肌肤 人体进入中年后，由于体内的阴液日益减少，从而加速了皮肤老化，使之变黑或变皱。铁皮石斛含有的黏液质，对人体皮肤有滋润营养作用。 10、延年益寿 《神农本草经》将铁皮石斛列为具有“轻身延年”作用的圣药。现代药理学研究证实：铁皮石斛含有多种微量元素，对于人体的健康长寿有着密切的关系，对人体的抗衰老作用比一般的药物更广泛、更全面。

瘤胃微生物研究进展

瘤胃微生物与瘤胃发酵调控研究进展 一、国内研究进展 1.植物提取物对瘤胃发酵调控的影响 陆燕等(2009)综述了大蒜素及其抑菌机制，以及大蒜素对甲烷产量和瘤胃发酵的影响。认为大蒜中活性物质能调控瘤胃发酵模式，可抑制瘤胃内甲烷生成，降低蛋白降解率，降低氨态氮浓度，保护过瘤胃蛋白。与其他植物提取物相比，添加低浓度的大蒜素对饲料消化率的负面影响较小，具有很大的开发前景。 林波等（2009）综述认为植物提取物中的挥发油、皂苷、生物碱、萜类等化学物质具有抗菌、促生长、提高免疫力和抗氧化等功能。并总结近年来研究发现，植物提取物还可以调控反刍动物瘤胃发酵模式，提高氮存留，减少甲烷排放的功能，因此，植物提取物作为调控反刍动物瘤胃发酵的一种重要添加剂得到了广泛的研究与应用。目前国内外的学者已经在有效植物品种的筛选和植物提取物作用机理、剂量效应等方面的研究取得了较大进展。文中就目前植物提取物对反刍动物瘤胃发酵调控的最新研究进展作一综述，为我国开展植物提取物作为反刍动物瘤胃发酵调控添加剂的研究提供参考。 李世霞(2009)以4只安装永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊羯羊为试验动物，探讨银杏叶提取物对山羊瘤胃发酵参数、纤维降解及各血清指标的影响，旨在寻找一种新的瘤胃发酵调控剂。研究结论如下：①以淀粉、酪蛋白和纤维素粉为底物，探讨银杏叶提取物对山羊瘤胃体外发酵的影响，发酵时间24h，银杏叶提取物可降低pH值、NH3-N浓度、原虫蛋白产量和乙丙比，提高发酵的产气量、乙酸、丙酸、丁酸、TVFA浓度和细菌蛋白产量；②以淀粉、酪蛋白和纤维素粉为底物，探讨银杏叶提取物对山羊瘤胃体外纤维降解的影响，随着银杏叶提取物添加量的增加，纤维素降解率呈上升趋势，添加量为1.2%时，纤维素降解率可达到55.30%；银杏叶提取物可提高滤纸纤维素酶、和木聚糖酶的活性，对木聚糖酶的影响最大；银杏叶提取物可增加产琥珀酸丝状杆菌、白色瘤胃球菌和黄色瘤胃球菌的数量；③通过体内试验得出：瘤胃发酵参数的结论与体外试验一致，本试验所设定的银杏叶提取物的添加范围对山羊各血清指标没有显著影响，此添加范围对山羊机体是安全的、可靠的。 2.外源微生物对瘤胃微生物和瘤胃发酵调控的影响 邓露芳（2009）研究了纳豆枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis natto strain RNLBSN002，BSN2）作为奶牛安全饲用微生物的应用效果，并初步探讨了其发挥益生作用的机理。研究结果认为（1）纳豆枯草芽孢杆菌为典型革兰氏阳性杆状菌，通过对其菌落形态、细胞形态和

铁皮石斛栽培技术研究进展【论文】

铁皮石斛栽培技术研究进展 摘要：通过对近年来国内外关于铁皮石斛栽培技术的相关文献进行归纳和总结，发现适合铁皮石斛的种植基质多种多样，这些基质有共性，也有特性。通过对其栽培环境因子的研究，为合理开发和种植铁皮石斛提供理论依据。 关键词：石斛；基质；栽培模式；肥料 1基质 1.1菌渣∶水苔 栽培食用菌后的培养料称为菌渣，富含纤维素、维生素、抗生素、木质素、矿质元素和其他生物活性物质。陈世昌等的研究表明，添加适宜菌渣，可以增加土壤孔隙度，降低土壤容重[5]。唐敏[6]设计了5种栽培基质：A（菌渣∶水苔=1∶9）、B（菌渣∶水苔=3∶7）、C（菌渣∶水苔=5∶5、D（菌渣∶水苔=4∶6）、CK（菌渣∶水苔=0∶10），结果表明，当菌渣和水苔的比例为3∶7时，其基质对铁皮石斛的根长、根数、苗高、生长速度和存活率起到了较明显的促进作用。我们每年产生的菌渣至少400万t，传统的处理方法为燃烧

或丢弃，但会造成环境污染，这也为菌渣的合理开发开辟了新的途径。 1.2松树皮∶泥炭土 谢静等[7]所做试验设3个处理，分别为松树皮∶泥炭土=2∶1、松树皮、松树皮∶蔗渣=2∶1，结果表明，松树皮与泥炭土体积比为2∶1时能显著促进铁皮石斛节数、根数增多，茎伸长，增加鲜叶和鲜条产量，提高生物量，总体情况显著优于其他处理。蔗渣因其通气性差，基质潮湿，容易造成根系腐烂死亡，从而影响铁皮石斛生长。 1.3细陶粒∶腐殖土 李关艳等[8]以细陶粒、珍珠岩、腐殖土、椰糠、刨花、泥炭6种基质配制不同的混合基质进行炼苗筛选，具体试验设计如下：珍珠岩∶细陶粒（1∶1、1∶2、1∶3）、珍珠岩∶腐殖土（1∶1、1∶2、1∶3）、珍珠岩∶泥炭（1∶1、1∶2、1∶3）、珍珠岩∶椰糠（1∶1、1∶2、1∶3）、珍珠岩∶刨花（1∶1、1∶2、1∶3）、细陶粒∶腐殖土（1∶1、1∶2、1∶3）、细陶粒∶泥炭（1∶1、1∶2、1∶3）、细陶粒∶椰糠（1∶1、1∶2、1∶3）、细陶粒∶刨花（1∶1、1∶2、1∶

铁皮石斛多糖的研究进展

铁皮石斛多糖的研究进展 xx （xx，xx，xx） 摘要：以系统的文献调研为基础,对兰科石斛属植物铁皮石斛多糖的含量、药理作用、提取方法和组成加以综述。该文对其多糖的含量、药理作用、提取方法和组成等方面做了详细而全面的总结,为今后铁皮石斛药用资源的更好的开发利用提供参考。 关键词: 铁皮石斛多糖药效药用资源 1 引言 铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo),是兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium)多年生附生草本植物[1],一种名贵珍稀濒危的中药材。自古以来就有“植物熊猫”、“救命仙草”的美誉。其主要分布于西南部（大别山）、东部（鄞县、天台、仙居）、西部（宁化）、广西西北部（天峨）、（地点不详）、东南部（石屏、、麻栗坡、西畴）。生于海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上[2]。铁皮石斛具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳等功效,位列“中华九大仙草之首”,被录入2010版药典[3]。由于铁皮石斛在自然条件下生长的环境较为苛刻，加上人们过度采挖，导致野生的铁皮石斛资源濒临灭绝。目前铁皮石斛已经实现了人工栽培，但一般也不易成活。铁皮石斛主要含有多糖、生物碱、氨基酸、酚类化合物等化学成分。现代药理研究表明铁皮石斛在增强免疫力、抗肿瘤、抗氧化、抗疲劳、降血糖、生津、镇咳等方面有多种功效[4]。本文就铁皮石斛多糖的含量、药理作用、提取方法和组成等方面研究工作进行概述。

2 铁皮石斛多糖含量的研究 近年来,铁皮石斛多糖的研究得到了人们越来越多的关注。由于铁皮石斛多糖是铁皮石斛的主要成分，其含量较高,还具有提高免疫力、抗氧化、抗肿瘤等功效,使得铁皮石斛在医学上具有极大的应用前景。 多糖的含量测定方法有苯酚-硫酸法[5]、3,5-二硝基水酸法[6]、分子光谱法[7]等。 2.1 不同器官组织、不同生长期多糖含量不同 无论是野生苗还是人工栽培苗，都是茎中多糖含量最高，又尤以二年生的茎中多糖含量最高。 何铁光[8]发现，野生铁皮石斛茎中的多糖含量随年份不同含量差异较大，多年生茎中的多糖含量最高，其次是叶。华允芬[9]也发现铁皮石斛的多糖含量是茎>根；尚喜雨[10]对铁皮石斛的组培苗、野生植株、栽培植株中多糖的含量及分布进行了系统的分析和研究，也发现铁皮石斛的多糖含量很高，尤以茎段为最；不同部位的含量存在一定差异，茎部的差异要大于根、叶。这说明传统用药上铁皮石斛以茎为入药部分在主要化学成分分析上是合理的。 何铁光[11]对铁皮石斛的组培产物原球茎的多糖含量进行了测定，发现原球茎与野生品的多糖和总氨基酸含量相近。初步证明以组织培养获得的铁皮石斛原球茎代替其野生品是解决铁皮石斛资源紧缺的有效途径。 2.2 不同品种铁皮石斛的多糖含量不同

药用植物内生真菌及活性物质多样性研究进展_孙剑秋

西北植物学报,2006,26(7):1505-1519 Acta Bot.Boreal.-Occident.Sin. 文章编号:1000-4025(2006)07-1505-15＊ 药用植物内生真菌及活性物质多样性研究进展 孙剑秋1,2,3,郭良栋2＊,臧　威1,3,迟德富1 (1东北林业大学林学院,哈尔滨150040;2中国科学院微生物研究所真菌地衣系统学重点实验室,北京100080;3齐齐哈尔大 学生命科学与工程学院,齐齐哈尔161006) 摘　要:药用植物具有丰富的物种多样性,是人类生存与发展的重要自然资源。内生真菌广泛存在于健康植物组 织内部,是植物微生态系统的重要组成部分,各种药用植物中蕴藏着非常丰富的内生真菌。通过与药用植物的“协 同进化”,某些内生真菌具有了产生与宿主植物相同或相似的生物活性物质的能力。内生真菌产生的各种活性物 质,在生物制药、农业生产、工业发酵等方面都表现出美好的应用前景,受到世界各国专家的广泛关注。利用内生 真菌发酵实现生物活性物质的工业化生产,可以提高产量、降低产品成本,满足人们日益增长的需求;同时有利于 珍稀、濒危药用植物资源的保护,对减少野生药用植物多样性的破坏具有重要意义。本文从药用植物内生真菌物 种多样性与产生生物活性物质多样性等方面总结近年最新的研究进展,提出了内生真菌及活性物质研究的未来发 展方向。 关键词:药用植物;内生真菌;生物活性物质;协同进化 中图分类号:Q949.95文献标识码:A Research Advances in the Diversities of Endophytic Fungi in Medicinal Plants and Their Bioactive Ingredients SUN Jian-qiu1,2,3,G UO Liang-dong2＊,ZANG Wei1,3,C HI De-fu1 (1College of Forestry,Northeast Fores try University,H arbin150040;2S ystematic M ycology and Lichenology Laboratory,In sti- tute of M icrobiology,Chinese Academy of S ciences,Beijing100080;3College of Life Science and Engineering,Qiqih ar University, Qiqih ar161006) A bstract:Medicinal plants,w hich are of rich species diversity,a re im po rtant na tural reso urces for human e xistence and develo pment.Endo phy tic fungi,w idely existing inside the tissues of healthy plants,are im-po rtant com po nents o f plant micro-ecosy stems and various medicinal plants are rich in endo phytic fungi. Co-evolving w ith medicinal plants,some endophy tic fung i have developed the abilities to produce same o r similar bioactive substances as or to w hat their host plants produce.V ario us bioactive substances that endo-phytic fung i have show ed a bright prospect in biological pharmaceutical pro duction,agricultural produc-tion,industrial fermentatio n thereby attracting ex tensive interest from ex perts of various countries in the w orld.The industrial productio ns of bioactive substances that m ake use o f endophy tic fungi are capable of increasing their yields and low ering their pro ductive co sts and thus conducive to satisfying people's ever-in-creasing dem ands.In the meantime,it is co nducive to the co nserv ation of precious and endangerd medicinal plants and of g reat impo rtance in avoiding the damage to the diversity of w ild m edicinal plants.The paper summa rizes la test research advances in terms of the diversity of endophy tic fungi and their bioactive sub-＊收稿日期:2006-03-28;修改稿收到日期:2006-05-19 基金项目:国家自然科学基金(30370006,30230020) 作者简介:孙剑秋(1969-),男(汉族),黑龙江德都人,博士,副教授,硕士研究生导师,主要从事微生物学方面的科研与教学工作。 ＊通讯联系人。Correspondence to:GUO Liang-dong.E-m ail:gu old@https://www.360docs.net/doc/5019213940.html,

中药铁皮石斛研究概况-宋晓艳

118 第17卷 第8期 2015?年?8?月 辽宁中医药大学学报 JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM Vol. 17 No. 8 Aug .，2015 铁皮石斛来源于兰科植物铁皮石斛 （Dendrobium officinale Kimura et Migo ）的干燥茎，又名黑节草、铁吊兰等，是一种极为珍稀的中药材。2005版《中华人民共和国药典》记载铁皮石斛为兰科石斛的一个品种，而2010版《中华人民共和国药典》把铁皮石斛作为单列药材品种。铁皮石斛剪去部分须根，边加热边扭成螺旋形或是弹簧状，烘干， 称“铁皮枫斗”（耳环石斛）[1] 。在《神农本草经》中铁皮石斛被列为上品，性寒，味甘、淡、微咸，归胃、肺、肾经，功效为益胃生津、滋阴清热。用于阴伤津亏，口干烦渴，食少干呕，病后虚热，目暗不明[2]。当今，时代的快速发展，生活节奏的加快，越来越多的人出于亚健康的状态，需要滋补调理的人也越来越多，以铁皮石斛为原料开发的保健品越来越多，其药食两用也渐渐被青睐。但是，铁皮石斛的生长环境极为苛刻，自然产量极低，其野生资源已濒临绝种， 被国家列为2级保护植物[3] 。所以，对铁皮石斛要更加的关注和保护。本文从以下几个方面对铁皮石斛进行研究综述。 1 组织快速繁殖的研究 铁皮石斛的种子极为细小，胚胎发育不完全， 无胚乳，在自然状态下发芽率极低，有性繁殖极为困 难。利用组织快速繁殖幼苗的方法成为人工栽培铁皮石斛的最佳途径之一。铁皮石斛组织培养过程与外植体的种类、培养基、激素、有机提取物（马铃薯汁、椰子汁、苹果汁、香蕉提取液等）、无机添加物（活 性炭、硒）等有关[4] 。 1.1?种子外植体的培养 以种子作为外植体的报道，大多采用种子→原球茎→愈伤原球茎的增生和分化→壮苗生根→小植株[5]，这种组织培养过程耗费的时间特别长，邓瑞云等[6] 研究建立种子萌发最适培养基为1/2 MS+0.2 mg/L 萘乙酸（NAA ）+100 g/L马铃薯汁+ 25 g/L 蔗糖汁，小苗增殖最适培养基为1/2 MS+0.2 mg/L NAA+100 g/L 马铃薯汁（或香蕉汁）+ 25 g/L 蔗糖汁+0.5 g/L 活性炭，壮苗与生根最适培养基为1/2 MS+0.2 mg/L NAA+100 g/L 香蕉汁+25 g/L 蔗糖汁+0.5 g/L 活性炭，使种子直接萌发成小苗，缩短组培育苗的时间。 1.2?茎段外植体的培养 由于大多试管苗茎细，苗弱，脱瓶移栽成活率 低，朱艳等[7] 取铁皮石斛茎段进行组织培养，这样既可获得一定数量的试管苗，又为进一步的移植栽培试验提供了种苗，由此也建立了一套茎段快速繁殖的体系，丛芽最适合的培养基1/2 MS+10%香蕉 中药铁皮石斛研究概况 宋晓艳1，2 ，冯晓2，赵雪梅2 （1.山东中医药大学，山东?济南?250355；2.山东大学附属省立医院，山东?济南?250021） 摘 要： 铁皮石斛是药食两用名贵中药之一，石斛中之极品，具有独特的药用价值，应用极其广泛。其含有多糖、氨基酸、挥发油等多种化学成分，具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖等多种生物活性。该文就铁皮石斛组织快速繁殖培养、化学成分、药理作用、临床应用方面进行了综述概况。这对其药用价值和开发利用价值的进一步研究提供重要前提。 关键词：铁皮石斛；组织培养；化学成分；药理作用；临床应用 中图分类号：R284 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2015) 08- 0118- 03 收稿日期：2014-12-30 基金项目：山东省中医药科技发展计划项目（2013-189）作者简介：宋晓艳（1987-），女，山东潍坊人，硕士研究生，研究方向：中药新制剂与临床药学。通讯作者：赵雪梅（1964-），女，山东潍坊人，主任药师，硕士研究生导师，博士，研究方向：中药新制剂与临床药学。 Introduction to Research Progress of Dendrobium Officinale Kimura Et Migo SONG Xiaoyan 1，2 ，FENG Xiao 2，ZHAO Xuemei 2 （1.Shangdong University of Traditional Chinese Medicine，Ji'nan 250355，Shandong，China；2.Shangdong Provincial Hospital Affiliated to Shangdong University，Ji'nan 250021，Shandong，China）Abstract：Dendrobium is affiliated one of edible expensive medicine and need Dendrobium ，it has a unique medicinal value and an extremely wide application. It contains polysaccharides，amino acids，volatile oil，et. It has function of antioxidant，antitumor，hypoglycemic. To make a summary of tissure culture，chemical constituents，pharmacology，clinical application of Dendrobium officinale Kimura et Migo ，which provides medicinal value and exploitation value for the further study of the important prime. Key words：Dendrobium officinale Kimura et Migo ；tissure culture；chemical constituents；pharmacology；clinical application DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2015.08.039