造血干细胞移植

造血干细胞移植（陆道培血·肿瘤中心）

造血干细胞移植(HSCT)是通过大剂量放化疗预处理，清除受者体内的肿瘤或异常细胞，再将自体或异体造血干细胞移植给受者，使受者重建正常造血及免疫系统。目前广泛应用于恶性血液病、非恶性难治性血液病、遗传性疾病和某些实体瘤治疗，并获得了较好的疗效。

发展历史

造血干细胞移植主要包括骨髓移植、外周血干细胞移植、脐血干细胞移植。由于骨髓为造血器官，早期进行的均为骨髓移植。1958年法国肿瘤学家Mathe首先对放射性意外伤者进行了骨髓移植。1968年Gatti应用骨髓移植成功治疗了一例重症联合免疫缺陷患者。上世纪70年代后，随着人类白细胞抗原(HLA)的发现、血液制品及抗生素等支持治疗的进展，全环境保护性治疗措施以及造血生长因子的广泛应用，造血干细胞移植技术得到了快速发展。1977年托马斯报道100例晚期白血病病人经HLA相合同胞的骨髓移植后，13例奇迹般长期生存。从此全世界应用骨髓移植治疗白血病、再生障碍性贫血及其他严重血液病、急性放射病及部分恶性肿瘤等方面取得巨大成功，开创临床治疗白血病及恶性肿瘤的新纪元。骨髓移植技术使众多白血病患者得到救治，长期生存率提高50%—70%。为发展此项技术做出了重要贡献的美国医学家托马斯因而获得了1990年度的诺贝尔医学奖。在中国，骨髓移植奠基人陆道培教授于1964年在亚洲首先成功开展了同基因骨髓移植，又于1981年首先在国内成功实施了异基因骨髓移植。目前异基因造血干细胞移植长期存活率已达75%，居国际先进水平。上世纪70年代年发现脐带血富含造血干细胞，1988年法国血液学专家Gluckman首先采用HLA相合的脐血移植治疗了一例范可尼贫血患者，开创了人类脐血移植的先河。1989年发现G-CSF动员造血干细胞的作用，动员的外周血成为干细胞新供源，1994年国际上报告第一例异基因外周血造血干细胞移植。近20年来，不仅在造血干细胞移植的基础理论包括造血的发生与调控、造血干细胞的特性及移植免疫学等方面有了长足的发展，而且在临床应用的各个方面包括移植适应症的扩大、各种并发症的预防等也有了很大发展，使移植的疗效不断得以提高，并且相继建立了一些国际性协作研究机构，如国际骨髓移植登记处(IBMTR、欧洲血液及骨髓移植协作组、国际脐血移植登记处等，还建立了地区或国际性骨髓库，如美国国家骨髓供者库和中国造血干细胞捐献者资料库等，对推动造血干细胞移植的深入研究和广泛应用起到了积极作用。迄今全世界进行骨髓移植和外周血造血干细胞移植的患者已超过10万例，其中非血缘关系骨髓移植和造血干细胞移植已达数万例，移植患者无病生存最长的已超过30年。在国内，上世纪90年代初开始建立了中国造血干细胞资料库，目前已登记志愿捐献者140万人，已为2000余患者捐献了造血干细胞进行无关供者造血干细胞移植，随后又在北京、上海、济南、天津、广州和四川等地成立了脐带血库，库存脐血数量超过50000份，估计全国进行脐血移植近1000例

造血干细胞适应症

造血干细胞移植迄今仍然是一种高风险治疗方法，目前主要用于恶性血液疾病的治疗，也试用于非恶性疾病和非血液系统疾病，如重症难治自身免疫性疾病和实体瘤等。

(1) 血液系统恶性肿瘤：慢性粒细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征等。

(2) 血液系统非恶性肿瘤：再生障碍性贫血、范可尼贫血、地中海贫血、镰状细胞贫血、骨髓纤维化、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。

(3) 其它实体瘤：乳腺癌、卵巢癌、睾丸癌、神经母细胞瘤、小细胞肺癌等。

(4)免疫系统疾病：重症联合免疫缺陷症、严重自身免疫性疾病。

由于移植存在致命性合并症，因而非血液系统疾病的造血干细胞移植治疗还未被广泛接受。

疾病分类

(1)按照采集造血干细胞的来源不同分为：骨髓移植、脐血移植、外周血造血干细胞移植等。

(2)按照供体与受体的关系分为：自体骨髓移植/脐血移植/外周血造血干细胞移植、异体骨髓移植/脐血移植/外周血造血干细胞移植。异体移植又称异基因移植，当供者是同卵双生供者时，又称同基因移植。

(3)根据供者与受者HLA配型相合程度，异体骨髓移植/脐血移植/外周血造血干细胞移植分为：HLA

全相合移植、不全相合移植、单倍体相合移植。

(4)根据供者与受者的血缘关系分为：血缘相关移植、非血缘移植即骨髓库来源供者。

(5)根据移植前的预处理方案强度可分为：清髓性造血干细胞移植和非清髓性造血干细胞移植(减低预处理剂量的造血干细胞移植)。

一般根据患者的疾病种类、疾病状态及预后、HLA配型结果及供者年龄等因素综合考虑来选择造血干细胞移植方式。目前异基因造血干细胞移植绝大多数为配型相同的同胞间、半相合父母与子女间、不全相合同胞间的移植，而随着全世界及我国骨髓库的增加，非血缘供者的异基因造血干细胞移植数量也在不断增加。不同移植类型各自优劣不同，自体造血干细胞移植的优点在于不受供者的限制，移植后不发生移植物抗宿主病，不需要使用免疫抑制剂，严重并发症较少，费用较低，缺点是复发率高。异基因造血干细胞移植治疗恶性疾病，植入的供者细胞有持久的抗肿瘤作用，复发率低，但严重并发症多，费用相对较高。

HLA骨髓配型与造血干细胞移植

骨髓移植成败的关键之一是人类白细胞抗原(HLA)配型问题，如果骨髓供者与患者(受者)的HLA不相合，便可能会发生严重的排异反应，甚至危及患者的生命。HLA遗传方式是从父母各得到“一串基因”，目前实验室常规进行检测的为A、B、C、DRB1等基因。父亲或母的两串HLA基因可随机分配给每一个子女。所以从理论上讲，父母和子女之间均为HLA半相合或单倍体相合，而子女之间1/4为全相合，1/2之间为半相合，1/4之间为不相合。目前HLA配型在同胞之间HLA全相合为首选。但由于防治排异反应的药物和方法的不断完善，亲属之间HLA不全相合移植GVHD发生率和全相合移植已无明显差异，亲属之间不完全相合(半相合)也可以选择。在无关人群之间，HLA相合的比例很低，通常数千分子一到数万分子一，需要建立供者HLA资料库，在大量的供者中去寻找。目前中华造血干细胞资料库已有140万人的HLA资料可供查询，对于亲属之间不能找到合适供者的患者约有60%以上可找到合适的供者而进行无血缘关系造血干细胞移植。但无血缘关系造血干细胞移植供受者之间HLA配型相合程度要求很高，需要全相合或几乎全相合的供者才能移植，否则可能会发生严重的排异反应而致生存质量严重下降或死亡。对于脐血移植，由于新生儿免疫发育的不成熟，脐血移植HLA配型相合要求较低，一般4/6相合即可移植，但需要细胞数较多的脐血或双份脐血同时移植.

移植术后晚期并发症

1.慢性移植物抗宿主病(cGVHD)

cGVHD通常发生在骨髓移植3个月后，甚至6-12月以后才出现，可以是aGVHD直接转为慢性，或从未发生过aGVHD而于骨髓移植3个月后出现cGVHD。cGVHD发生的根本原因仍然是供受者之间的组织相容性抗原的不同，其诱因常是aGVHD。cGVHD是一种全身性器官损伤性疾病，主要病变为受累器官的纤维化和萎缩，常与自身免疫性疾病的表现很相似，临床表现为硬皮肤样皮肤疾病、干燥综合征(Sjǒgren综合征)、胶原血管病、慢性肝病以及感染等。cGVHD在外周血干细胞移植中发生多于骨髓移植。cGVHD根据受累部位可分为局限性cGVHD和广泛性cGVHD。局限性cGVHD的患者通常不需要治疗而只需密切观察，而广泛性cGVHD可以使用强的松、CsA或硫唑嘌呤等药，多种免疫抑制剂合并应用对cGVHD的治疗是有益的，如抗CD20单抗与抗CD25单抗合并使用对cGVHD的治疗效果较好。另外对cGVHD的治疗时间较长，在此期间增加营养支持及预防和治疗各种病原体的感染是很重要的。cGVHD 具有明显的抗白血病效应，因而cGVHD的存在，白血病的复发机率大为减少，所以维持轻度的cGVHD 对患者有一定的好处。

2.慢性阻塞性肺部疾患

多发生于移植后3-12个月。发病多与cGVHD有关，其他潜在的危险因素包括全身照射(TBI)、低丙种球蛋白血症、MTX方案预防GVHD及既往有细菌感染史。典型的临床表现为进行性呼吸困难和干咳。大部分患者的胸片正常，但高分辨CT可显示非特异性异常。免疫抑制剂治疗有效率约50%。对肺功能检查异常但无症状的患者应密切监测，以便及早发现，在其可逆阶段进行治疗。

3.继发性恶性肿瘤

按发生时间的先后顺序通常分为移植后淋巴增殖性疾病(Posttransplant lymphoproliferative disorders，PTLD)、骨髓增生异常综合征(MDS)、白血病、实体瘤、黑色素瘤、脑瘤和口腔癌等。PTLD是移植后的严重并发症之一。根据器官移植的类型、患者的个体特点和免疫抑制剂的应用情况，PTLD 的发病率不同。低危移植(HLA相合亲缘移植) PTLD 的发生率为1%—5%，高危移植(去T 淋巴细胞移植，HLA半相合移植) 的发生率为10%—30%，自体骨髓移植(ABMT) 的发生率较低，仅1%?—2%。在异基因造血干细胞移植中发生PTLD的危险因素包括：(1)去除T淋巴细胞的造血干细胞移植;(2)HLA不完全相合(亲属供者或无关供者);(3)抗淋巴细胞抗体的使用;(4)原发病是免疫缺陷病。(5)移植后1年以上发生PTLD的高危因素是慢性GVHD。PTLD 绝大多数来源于B细胞，仅少数来源于T细胞。由于EBV感染在大多数PTLD的发生中起关键作用，故目前多采用聚合酶链反应(PCR)检测外周血单个核细胞中EBV-DNA负荷的方法进行PTLD发生的预测、早期诊断及疗效监测。临床上对于PTLD往往采取综合治疗。目前常用的主要治疗方法有以下几种：(1)免疫抑制剂的减量或停药，这往往是控制PTLD的首要选择。(2) 抗病毒治疗，常用更昔洛韦和阿昔洛韦，可与免疫球蛋白合用，但疗效有限。(3) 抗B淋巴细胞单克隆抗体的应用，在免疫抑制剂减量后,输注人源化抗CD20单克隆抗体的效率为83%。(4) 特异性免疫治疗，由于EBV相关的PTLD患者体内EBV特异性的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells, CTLs) 受抑制，故可通过输入EBV特异性CTLs来控制EBV感染的B细胞增殖。(5)还可以考虑使用化疗(方案类似于非霍奇金淋巴瘤，如CHOP方案、ProMACE-CytaBOM方案等)。其他继发肿瘤采用相应的治疗。

4.白内障是移植后常见的眼部并发症。其与预处理中TBI照射使用的总剂量、照射剂量率、类固醇用药的剂量及持续的时间、移植前疾病有关。发生的时间TBI为2～6年，分次照射比一次照射发生白内障的机会减少10%～20%，因此为减少白内障的发生，应减少晶体所受的照射剂量及采用分次照射。

5.白血病复发

是影响移植疗效的重要因素之一。移植后白血病的复发率为20%-30%，绝大多数(>95%)均为受者型复发。发生白血病复发的原因主要是与移植时白血病细胞的清除不彻底，即体内残留白血病细胞较多、移植后后移植物抗白血病作用不强有关。目前可通过移植后微小残留病的检测, 进行白血病复发预测。异基因造血干细胞移植后白血病复发可采取以下措施：停用免疫抑制剂、供者淋巴细胞输注或G-CSF动员后的供者外周血干细胞及淋巴细胞输注、化学药物再诱导治疗、免疫调节治疗(如干扰素、IL-2等)、二次移植。在移植后白血病复发的治疗中，对于急性白血病一般首先争取通过化疗再次诱导缓解后进行第二次移植。对某些病例也可不需诱导缓解，直接进行第二次移植。对一些情况较差，预计不能耐受第二次移植治疗的患者，则只能做支持治疗和对症治疗。对于慢性粒细胞白血病移植后复发患者的治疗，采用输注供者淋巴细胞结合格列卫治疗, 可使部分患者达到治愈。另外，与急性白血病相同，同样可采用第二次移植治疗。

6.对生长发育的影响

对儿童用造血干细胞移植治疗白血病等恶性病，TBI有很强的抑制免疫及杀伤恶性细胞的效果，但其对生长发育是有影响的，因而移植前头颅应尽量避免照射，TBI应选择分次的TBI，年龄过小的患者应尽量用化疗药物进行预处理，对cGVHD 要进行及早的防治，尽量避免大剂量肾上腺皮质激素的应用。

7.对性发育与生育的影响

青春期前作移植，无论男女均影响性发育，青春期延迟，女孩可发生原发性卵巢功能衰竭，甚至需要周期性药物治疗。单纯用Cy进行移植对性发育影响较小，TBI对性发育及生育影响较大，而分次的TBI比一次性TBI影响小。成年男性移植后(用TBI和化疗预处理)，90%呈无精子状态,但个别也可以逐渐恢复精子的产生。TBI后血浆睾丸酮的水平多正常，对男性性功能无影响。以TBI为预处理的女性患者可以发生卵巢功能衰竭, 故对女性性功能有一定影响, 个别可发生阴道狭窄。

日常护理

入住层流病室前对患者的处理

①消毒入室物品: 衣被、药品、食具、便器、书报等均需消毒处理，以防外源性感染。

②全面检查:特别要注意检查有无感染灶，发现感染或者带菌情况应该积极治疗，彻底清除慢性和潜

在的感染病灶。

③入室前修剪指(趾)甲、理发。入室当天清洁灌肠。沐浴后经1∶2 000氯己定液药浴30 min，更换无菌衣裤、鞋、帽，戴无菌口罩，然后进入100级空气层流病室，入室后不得擅自走出超净区。

④静脉置管:移植前1 d行锁骨下静脉置管术，备用。

全环境保护

①入住在100级无菌层流病房(LAFR)，LAFR墙壁、台面、门窗、地面均用0.05%的消毒清洗剂擦拭，1次/天，室内空气每周用0.8%过氧乙酸喷雾消毒一次。

②进无菌饮食：做熟的饭菜，饮料经微波炉高火消毒后食用，餐具每次同时消毒。水果经1∶2 000氯己定液浸泡消毒30 min后去皮食用。口服药片经紫外线正反照射各30 min后供病人服用。

③肠道消毒：每天口服不吸收抗生素如小檗碱等。

④皮肤消毒：每天清洁皮肤表面1次。1%氯霉素、0.5%利福平眼药水交替滴眼，每天2次。75%乙醇棉签擦外耳道每天3次。便后清洗或坐浴，75%酒精喷手清洁。

日常饮食

饭菜要新鲜，水果、蔬菜要洗净，避免食用富含油脂的食物。预处理前，应进食高蛋白、高维生素的饮食，如猪肉、牛肉、鱼肉、排骨、新鲜蔬菜、水果等。预处理及移植后早期，应进食清淡、少渣、易消化和少刺激性的食物，应避免油腻、粗糙、带刺、辛辣的食物，以免损伤口腔和消化道粘膜。发生口腔溃疡时饮食要以半流食、流食为主，如牛奶、菜粥、豆浆、面条等。移植中后期，逐渐增加进食量，增加高蛋白、高维生素、营养丰富食物的摄入，如鸡蛋、牛肉、羊肉、芹菜等，但不能吃不易消化吸收的食物，如烤鸭等油炸、烧烤的食物，多吃水果、蔬菜，仍需严格注意饮食卫生。