转博考试历年考试题

2000年分子生物学专业博士研究生理论课程笔试试题

1．进行PCR扩增可使用哪些类型的DNA聚合酶，各有哪些特征？

2．有哪些类型的载体可用于构建DNA文库，各有哪些特征？

3．在通过生物化学方法分离到某种哺乳动物的一种蛋白活性因子后，若要在E.coli中大量表达该蛋白质，试问如何分离得到编码该蛋白质的基因？

4．从原核生物中获得一个新的杀虫基因后，将该基因转移到某一植物，如何检测该转基因植株是否产生该杀虫基因所编码的蛋白质？

5．2000年，国际人类基因组合作计划和美国孟山都公司分别宣布，完成了人类和水稻基因组的工作草图（working draft），这两个工作草图的基本含义（如测序完成的大致情况）是什么？

6．有人将生物全基因组序列比作“天书”，以你所熟悉的生物为例，谈谈你将如何破译这部“天书”？

7．何为“GMO”，目前国际，国内关于“GMO”有何争议？有人认为“公众与新闻媒体的无知”是引起GMO争议的主要原因之一，对此请予以评论。

8．论述染色质结构与状态的变化与基因表达的关系。

9．Crick提出的“中心法则”（central dogma）的意义是什么？至今，分子生物学的发展对“中心法则”有哪些修订和补充？

10．何谓“后基因组学”？依托哪些基本的分子生物学理论和原理？

2000年分子生物学博士学位理论考试试题

1．近年来，国际上关于转基因农作物环境释放和遗传工程食品存在很大的争议，这些争议所关心的主要问题是什么？你对此有何评议？

2．试述比较基因组学（comparative genomics）的主要内容及其理论和实际意义。

3．试述功能基因组学（functional genomics）的基本内容。

4．简述从基因组中分离的启动子和终止子，确定基因转录起始位点和终止位点的方法和策略。

5．仅从转录和翻译水平上阐明原核生物与真核生物之间的差别。

6．说明真核生物基因组内重复序列的分子机理。

7．说明两种利用PCR技术实现基因点突变的方法及原理。

8．何谓“gene knock-out”法？原理是什么？

2001年分子生物学专业博士笔试试题

1．简述人类和拟南芥基因组研究的进展。

2．简述国际上转基因作物的研究和产业化进展，以及有什么争议。

3．简述蛋白质组的概念和蛋白质组研究的目的意义和基本方法。

4．对于用BAC载体克隆到的100Kb基因组片段，如果要测定该片段核苷酸序列，应采用哪些步骤和方法。

5．什么是Southern, Northern, Western杂交，有何用途？

6．若欲从哺乳动物中克隆一个编码蛋白质生长因子的基因，并使之在E.coli中表达，说明主工步骤，并简要说明可能遇到的问题及解决的办法（已知该蛋白质生长因子的N-末端氨基酸序列）。

7．什么是RAPD 和AFLP，各有什么用途？

8．论述Forward genetics和Reverse genetics进行基因遗传分析的方法与原理。

9．保证染色体稳定遗传的三个顺式作用位点是什么？说明它们的结构与功能。

10. 何谓Parent Imprint ? 说明这一现象的形成原因和生物学意义。

2001年分子生物学专业博士笔试试题

1．什么是Southern, Northern, Western杂交，有何用途？

2．已知一个BAC克隆，想要测此BAC序列，你将采用哪些步骤和方法？

3．已知一个哺乳动物的生长因子，想要分离该基因并在E.coli中表达，设计实验步骤。

4．如何理解蛋白质与蛋白质相互作用，蛋白质与核酸相互作用？

5．说明至少三种在转基因育种中用到的分子生物学原理？

6．真核生物转录因子的结构特点及功能？

7．中心法则的主要含义？中心发则的发展？

8．列出三种已测序的真核生物全基因组测序结果（基因组大小，基因数目）。

9．生物信息学的主要内容及主要分析方法？

10. 全基因组测序对破译该生物这部天书有何意义？

11．何为DNA芯片，蛋白质芯片（芯片内容，制作方法，检测）

2002年第二次博士生《生物技术与遗传改良》笔试题

1．DNA作为遗传物质的发现过程及实验证据。

2．DNA结构的阐明于上世纪中叶获诺贝尔奖。请说出该奖项的基本内容（即其所阐明的DNA 基本结构）、获奖人、获奖年份。试述该发现对生命科学的发展和以重组DNA为基础的现代生物技术产业形成的意义。

3．近年在基因工程技术研究中的一个重要进展是“同源重组”技术（英文常用的术语有：homologous replacement, homologous recombination, gene targeting等）。请描述此技术的基本内容，评价其技术上的优越性及应用前景。

4．说明比较基因组的研究方法及近年来主要进展。

5．举例说明真核生物RNA选择性的剪接对基因表达调控的作用。

6．Transcriptional Factor的主要特点是什么？提出一个克隆 Transcriptional Factor 并研究其功能的技术路线。

7．说明生物体在长期进化过程中形成保证遗传稳定性的机制。

8．肽核酸是一种以肽为骨架的DNA类似物，是由手性不对称的中性肽骨架置换脱氧核糖核酸骨架而成，试述其潜在的生物学意义。

9．你试图在一种细胞系中敲除某一基因，你可以用到那些方法。

10. 如果你认为已经获得了一个新的基因，你该如何去证实它？

2002年下半年博士生理论考试

1.证明DNA是遗传物质的实验证据。

2.20世纪中叶DNA双螺旋结构的提出获得了诺贝尔奖，该奖项的内容（DNA双螺旋结构理

论的内容）、获奖人、获奖时间；试述该理论对现代分子生物学和生物技术产业化发展的重大意义。

3.同源重组技术的内容，发展及其应用

4.比较基因组研究有哪些技术，其发展如何

5.举例说明RNA选择性剪接在基因表达调控中的作用

6.Transcription Factor有哪些特点；举一例说如何克隆Transcription Factor并验证

其功能

7.试述生物在长期进化过程中形成的保持遗传稳定性的机制

8.肽核酸的生物学意义

9.如果要将基因敲除，应使用哪些技术

10.如果有一个新基因，如何研究它的功能

2003年博士资格考试生物化学与分子生物学试题

1.已知一基因定位于细菌染色体上，如何克隆该基因。

2.列举有关DNA双螺旋结构十个要点。

3.DNA复制、RNA转录及Protein合成的极性及形成这种极性的分子机制。

4.PCR在分子生物学中的应用。

5.真核生物的多级调控机制。

6.基因芯片在表达谱分析及蛋白质组分析中的原理、应用及异同点。

7.BLAST原理、种类及应用。

8.蛋白质高级结构中氨基酸组成、氨基酸排列顺序、构象对其功能的影响。以Leu, Lys, Glu

为例说明之。

2004年博士生资格考试《生物技术与遗传改良》笔试题

1.举例说明DNA、RNA、peptide 三种大分子折叠（folding）的功能。（10分）

2.简述Basic transcription和Activation transcription过程中顺、反因子间的互作事

件。（10分）

3.基因工程是通过对基因的操作对物种进行改良、生产蛋白活性物质以及基因治疗等直接为人类的生活和健康的服务的技术。请你谈谈对基因工程的认识，以及基因工程的种类和应用范围。（8分）

4.禽流感(AI) 是正粘病毒科流感病毒属A 型流感病毒(AIV)引起的禽类的烈性传染病。其基因组由8 条单链(-)RNA 组成, 编码10 种蛋白(PA、PB1、PB2、HA、NA、N P、M1、M2、NS1、NS2)。如果新分离到一株烈性感染的禽流感，并由你来测定该病毒的基因组序列，请问你将如何实施。请列出主要的步骤（或方法）。（12分）

5.获得目标基因是许多研究工作的基础。若从哺乳动物中分离到一个蛋白质生长因子，如欲分离编码该蛋白因子的基因，并使之在大肠杆菌中表达出产物，请设计主要技术步骤。（10分）

6.已知基因序列但不知其功能，试述如何通过生物信息学分析和一系列反向遗传学研究技术（至少列举出5种）验证其功能。（10分）

7.研究蛋白－蛋白互作和DNA－蛋白互作的有哪些方法，简述其原理。（8分）

8.今年在高等动植物和人类基因组研究中，利用和产生了哪些模式生物？以你所熟悉的生物为例，试述模式生物在比较基因组研究中的用途。（12分）

9.有人说高等生物基因组序列的测定是获得了关于生命的奥秘的“天书”，以你所熟悉的生物为例，试述我们将如何破译这部“天书”。（12分）

10.试述RNAi的基本原理和用途。（8分）

2005年华中农业大学博士研究生课程考试试卷

1.简述蛋白质磷酸化和去磷酸化的生物学意义，蛋白质磷酸化与糖基化有何关系？

2.如果你在研究中发现了一个可能的新蛋白质，你应该通过哪些基础数据来证实其是新的蛋白质或是已知蛋白质？

3.简述伴侣蛋白（chaperone）的生物学功能。

4.请比较说明Enhancer和Promoter在结构与功能上的特点。

5.请分别建树复制性转座子，剪贴性转座子，反转录转座子的转座机制及遗传效应。

6.何谓Epigenetic？请简述Epigenetic的分子基础。

7.什么是定点诱变（Site-directed mutagenesis）？简述（或图示）如何实现某一基因的定点、。

8.什么技术可检测某一基因在蛋白质水平上的表达差异？简述其基本原理及试验程序。

9.植物的图位克隆（map-based cloning）一般都需要通过遗传转化来证明候选基因，而人类基因克隆（positional cloning）时为什么不做转化也可确定目标基因？在植物中也可采用人类基因克隆的方法来确定目标基因吗？

10.目前，人类,拟南芥，水稻等生物的基因组测序已经完成，图位克隆技术在这些物种的新基因发掘中还有用处吗？为什么?

2005年生物技术与遗传改良

1.试述功能基因组学研究的策略与技术路线，并具体说明SSH技术在功能基因组研究中的优，缺点，为什么这一技术具有Suppression和subtraction效应。

2.何谓Epigenetic？简述它的研究领域及进展。

3.试述双杂交系统（two-hybrid system）的原理及应用

4.何谓体外定向（in vitro directed molecular evolution）分子进化？浅述其应用和意义。

5.何为核算与蛋白质的相互作用，有何生物学意义，举几例说明。

6.何谓蛋白质与蛋白质的相互作用，有何生物学意义，举例说明。

7.在动植物和人类基因表达的研究中，发现“allelic specific expression”现象，描述这种现象并说明其检测原理和方法。

8.Micro-RNA的定义和功能。

9.今年国际上已完成了人类，拟南芥，水稻等高等生物全基因组测序，并根据所测序列对各基因组进行了基因预测和注释。这些基因预测和注释是如何进行的？在基因预测和注释中遇到些什么问题，采取了什么对策？

2006年.6.22 华中农业大学研究生课程考试试卷

1.已知某一蛋白质（基因序列已报道）的103位氨基酸残基与功能相关。欲把该位点氨基

酸分别变为其他其他19种氨基酸，研究其单个氨基酸变化对功能的影响，在基因水平上采用什么技术操作最简便？请简述技术路线。

2.某已知序列的DNA片段随即插入到基因组DNA的某一位点，有哪些方法可用于克隆插入

位点侧翼DNA？

3.什么叫蛋白质家族？它的产生原因？并举一例说明蛋白质家族的结构及功能。

4.糖蛋白可占生物体中蛋白质种类的一半以上，它们在生物体中的功能将会不断被证实，

请就你已知的知识，简述糖蛋白的结构及功能特点。

5.如何理解小泡介导的蛋白质转运的“生物膜不对称型”的内容和意义。

6.说明真核生物对pre-mRNA进行选择性剪接的方式和生物学功能。

7.比较论述Transposon与Retro-tranposon在结构，转座机制以及功能上的异同。

8.Codon usage的概念是什么？在各种不同生物之间他们表现的共性和个性的规律是什

么？

9.下列几种实验技术的原理和目的：酵母双杂交，酵母单杂交，细菌双杂交。

10.简述Gene shuffling 的工作原理和实验目的。

2006.7.12 华中农业大学研究生课程考试试卷

1.如何从基因组到蛋白质组的基本概念来理解“一个基因并不止决定一个相应的蛋白质，

可能会有几个，甚至几十个。

2.一个生物样品中有一种重要的蛋白质是糖蛋白，你将如何去分析鉴定和分离它。

3.如何从核酸与蛋白质的相互作用来理解基因表达的时空调节。

4.什么叫穿梭载体（shuttle vector）？穿梭载体应具有哪些特征？

5.什么是随机诱变（Random Mutagenesis）和饱和诱变（Saturation mutagenesis）？试

述两种诱变技术在基因操作中的应用。

6.说明Attenuator的结构特点和功能。

7.说明生物体保证蛋白质准确翻译的机制。

8.论述Enhancer的结构特点与功能。

9.在获得了一个cDNA序列后，你将如何应用生物信息技术和公共信息资源尽可能多的了解

该cDNA所对应基因的功能？

10.目前世界各国对生物质能源十分重视。已有利用农作物秸秆（主要成分为木质素，纤维

素，半纤维素等）生产乙醇的尝试，并引起了广泛关注。在我国每年有数亿吨的作物秸秆被废弃，大量的秸秆甚至被焚烧，成为公害。请以你所学的知识，探讨用秸秆生产酒精的可行性。

生物化学与分子生物学博士生资格考试试题 2007年春

1.简述蛋白质的二级结构类型及其特征。

Please list the types of the protein secondary structures, and describe the main features for each type.

2.生物体内有哪些RNA，各有何功能？

Please list the types of RNAs so far found in various organisms, and describe their functions.

3.什么是基因捕获技术？如何利用该技术获得某一目标基因？

What is “gene trapping” technique? How do you utilize gene trapping technique to obtain

a target gene?

4.哪些方法可用于检测基因转录和翻译水平的差异？

What methods cabn be used to assay the differences in levels of gene transcription and translation?

5.何为选择性剪接？请简述它的机制与功能。

6.至少说明生物保证蛋白质准确翻译的三种的分子机制？

7.比较说明真核生物与原核生物extended promoter 的机构特点。

8.DNA芯片已成为研究基因表达谱的常用手段。基因表达谱分析对认识基因的功能有何帮

助？对芯片鉴定出的特异表达的基因如何进行功能验证？

9.图位克隆是一种非常花费人力，物力及时间的基因分离途径。在基因组信息，功能基因组研究的技术平台和资源渐趋完善的今天，有无必要进行图位克隆？为什么？

10.突变体库已成为基因克隆和基因功能分析的主要手段之一。简述引用突变体库（转座子或T-DNA插入）克隆基因的基本程序。

2008年生物技术与遗传改良试题

1.简述酵母双杂交系统的用途及其基本实验程序。

2.简述酵母单杂交系统的用途及其基本实验程序。

3.如果你在研究中发现了一个可能的新蛋白质，你应该通过哪些基础数据来证实其是新的蛋白质或是已知蛋白质。

4.举例说明DNA RNA peptide三种大分子折叠的功能。

5.简述伴侣蛋白的生物学功能。

6.如何从核算与蛋白质的相互作用来理解基因表达的时空调节。

7.请比较说明Enhancer和Promoter在结构与功能上的特点。

8.请分别简述复制型转座子，剪贴性转座子，反转录转座子的转座机制及遗传效应。

9.在动植物和人类基因表达的研究中，发现来自双亲的等位基因在杂种的表达水平有差异，该现象被称为“allelic specific expression“。请提出定量检测双亲等位基因表达量的方法，并分析产生双亲等位基因差异表达现象的可能原因。

10.已知基因序列但不知其功能，通常需要在生物信息学分析基础上通过一系列反向遗传学研究技术验证其功能。列举出3种以上反向遗传学研究基因功能的技术，并简述其原理。

2009年生化与分子博士资格考试试题

1.蛋白质修饰贯穿蛋白质合成和成熟的全过程，修饰有哪些类型？在哪些亚细胞环境进行？

2.假如你获得了一个膜蛋白基因，你如何去研究它的潜在生物学功能？

3.说明增强子的结构特点及其功能的组织特异性？

4.说明non-coding RNA的种类及其可能的功能。

5.说明chromatin remodeling的机制及其对基因表达的调控。

6.试述6-His与GST系统的原理和方法，并比较二者的优缺点。

7.试述如何构建一个cDNA文库和从该文库中筛选到一个特定的目的基因。

8.如果你从原核生物中发现一个有价值的新的蛋白质，如何获得编码该蛋白的基因？如何确定该基因的功能？

9.何为转录因子，在全基因组水平上，如何确定一个转录因子的靶位点？

10.在高等生物的多基因家族中，同一家族的不同成员往往会呈现出不同的时空表达模式，讨论这种现象在生物生长中的意义。

2010年生物技术与遗传改良博士生资格考试试题

1.何为球蛋白？球蛋白构象是如何维系的？

2.蛋白质的受体有哪些类型？其结构和功能特征如何？

3.比较Insulator，Silencer和Enhancer在结构与功能上的异同。

4.说明真核生物转录因子可能的四种功能域及各自的类型特点。

5.2009年度诺贝尔生理学/医学奖授予Elizabeth H. Blackburn，Carol W. Greider和Jack W. Szostak三位科学家，以表彰他们“for the discovery of chromosomes are protected by telomeres and the enzyme telomerase”。请描述这一成就的内容。

6.当目标基因在异源宿主表达时，表达蛋白常以无生物活性的包涵体形式存在，你通过哪些方法可避免这一现象？

7.通过双向电泳图谱，发现某一蛋白质斑点与某一生物表型有关，如何通过蛋白质组学技术获得该斑点的编码基因信息？又如何根据所获信息克隆该基因？

8.现将某一基因在大肠杆菌中克隆表达，你如何用最简便得方法将其目标蛋白纯化？请简述其操作过程和注意事项。

9.转苏云金芽孢杆菌（BT）抗虫基因的转基因水稻在湖北生产应用的安全证书颁发以后，激起了较大的争议，其中有个说法“虫都不吃的东西，人吃要慎重”。请对此说法发表你的看法。

10.“转基因食品是有史以来评价最透彻、管理最严格的食品”。请对此说法发表你的看法。

2011年