clustalx的应用
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利用clustalx 2.1对蛋白进行多序列比对目录
1. 方法介绍
1.1概念
1.2理论基础
1.3任务
1.4目的
2研究内容
3. 工具
3.1 clustalx简介
3.2 clustalx 后台运作流程
3.3 clustalx的下载
3.4 clustalx菜单设置
4.操作步骤
4.1获取目标序列
4.2执行比对
4.3 treeview软件制作进化树
5. 结果分析
正文
1. 方法介绍:多序列比对
1.1 概念:多序列比对即通过多个核苷酸或氨基酸的序列进行比较,确定
序列之间可能由于功能、结构或进化上的关联而形成的相似片
段。
1.2 理论基础:1)生物学一个最基本的假设是地球上所有物种都有共同的
祖先,从这个祖先开始以树状形式发展,通常称为生命
之树。
2)基于序列比对的同源即具有共同祖先。同源序列一般相
似;相似可以用百分比来描述。序列不一定是同源的,
相似序列在进化上具有趋同性。序列决定结构,结构决
定功能。
3)现有的基因、蛋白质等携带生物学信息、具有生物学功
能的分子都是由原有的分子演化而来;现有的基因及其
他核酸序列,都是由已经存在的基因或其他序列经过复
制、转移、合并、删减等方式形成的;不同物种的基因、
蛋白质在结构、序列上的相似性与其进化上亲缘关系密
切相关。
1.3 任务:发现序列之间的相似性,找出序列之间共同的区域,辨别序列
之间的差异。
1.4 目的:通过“相似序列→相似的结构→相似的功能“来判别序列之
间的同源性,进而推测序列之间的进化关系。
2. 研究内容:通过对人类、家鼠、大鼠和鸡体内BMP-2(bone morphogenetic
protein 2)即骨形态发生蛋白2的多序列比对得到的dnd结果文
件来揭示在四种生物中的该蛋白的同源性。
3. 工具:clustalx 2.1
3.1 clustalx简介:Clustal是用来对核酸与蛋白序列进行多序列比对的软
件,可以用来发现特征序列,进行蛋白分类,证明序列
间的同源性,帮助预测新序列二级结构与三级结构,确
定PCR引物,以及在分子进化分析方面均有很大帮助。
Clustal包括Clustalw和Clustalx和Clustal omega。
Clustalw是命令行接口;Clustalx是一个图形用户界面;;
Clustal omega是Clustal家族的最新补充,是在以前的
版本基础上,提供了一个显著增长的可扩展性,使数以
十万计的序列在只有几个小时内排列。它也将使用多个
处理器包含其中。此报告仅介绍本地软件版clustalx,其
操作界面简单,运行速度较快使其被广泛使用。
3.2 clustalx 后台运作流程:
3.3 clustalx的下载:
1)在浏览器地址栏输入clustal官方网站网址并进
入;
2)在右下角点击ClustalW/ClustalX并进入
3)呈现的界面如下,点击EBI ftp sitej进入下载条目界面
4)选择最新版本2.1,进入
5)选择windowns版本的clustalx2.1,点击进行下载
6)在弹出的下载窗口中选择保存位置
7)完成下载
3.4 clustalx菜单设置(因软件功能多样,此模块仅介绍与多序列比对相关
的主要操作内容)
输入序列的格式比较灵活,可以是FASTA格式,还可以是PIR、SWISS-PROT、GDE、Clustal、GCG/MSF、RSF等格式;输出格式也可以选择,有ALN、GCG、PHYLIP和NEXUS等,用户可以根据自己的需要选择合适的输出格式。
1)打开clustalx软件,操作界面如下图所示。上方有七个条目,分别是file(文件),edit(编辑),alignment(比对),tree(树状图),colors (颜色),quality(打分)和help(帮助)。
2)空白处的上方“mode”下可选择比对模式,有multiple alignment mode(多序列比对模式)和profile alignment file(剖面比对模式)。
我们做的一般选择多序列比对模式。
3)在mode右边的font(字体)下拉框中可根据需要选择字体大小
4)上方工具栏点击file,出现的load sequence为载入序列,选择此载入方式的前提是要把比对的多条序列保存在一个TXT文件中,重复操作则覆盖上次文件;append sequence为添加序列,选择此载入方式即可把分开保存的序列文件分别载入到界面中;save sequence 为保存序列。
5)Edit下有针对已载入序列的各种编辑操作,“cut sequence”为剪切,”paste sequence” 为粘贴,”select all sequence”为选中全部,下面还有”clear sequence selection”清除所选序列,”clear range selection” 清除所选区域,”remove gaps”清除空位等操作
6)alignment下有“do complete alignment“执行序列比对,”do guide tree only“只输出引导树,”alignment parameters“比对参数等,点击比对参数后,在右弹窗中可选择需要的比对参数,如”multiple alignment parameters“多序列比对参数。