真菌基因组DNA的快速提取

丝状真菌基因组DNA的快速提取

1）取少许石英砂于1.5mL离心管中，用移液枪吸入600μL DNA 提取缓冲液（1M Tris-Cl(pH 8.0) 50mL；0.5M EDTA(pH 8.0) 100mL；20%SDS 100mL；5M NaCl 100mL；650mL无菌水定容至1L）；

2）挑取少量酵母培养基上生长的气生菌丝于上述离心管中；

4）加入提前配好的等体积的Tris饱和酚-氯仿溶液（V/V为1:1，约

600ul），涡旋6min，室温静置5min；

5）室温下，13000rpm离心20min；

6）用移液枪小心吸取约350μL的上清液，转移至一新的离心管中，加入2.5倍体积的冰冻无水乙醇（约1ul），上下颠倒混合均匀后，于-20℃中放置

2h；

7）室温下，12000rpm离心10min；

8）弃上清液，用75%乙醇洗沉淀1次；用手弹起沉淀

9）倒去上清，倒扣放置，放于超净台吹10min，使乙醇挥发晾干，加入

80μL无菌水溶解沉淀。