PCB检测中圆Mark的快速精确定位_熊光洁
熊果酸含量测定方法研究进展
熊果酸含量测定方法研究进展 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 【关键词】熊果酸；含量测定方法 熊果酸（ursolie acid，UA）又名乌索酸、乌苏酸，属于三萜类化合物，广泛存在于熊果、白花蛇舌草、女贞子、乌梅等天然植物和草药中，具有抗炎、护肝、降血脂等多种生物学活性［1～4］。目前许多中药材及其制剂常选用熊果酸的含量作为其质量控制指标。本文对熊果酸含量测定方法的研究进展综述如下。 1 分光光度法 李国章等［5］建立了湘产3种苦丁茶中熊果酸含量测定的分光光度法，具体操作是取苦丁茶经索氏提取器提取后，加入5%香草醛－冰醋酸、高氯酸显色，在波长548 nm处测定吸光度，结果熊果酸在4～20 μg·ml-1浓度范围内线性关系良好，加样回收率为98.96%。罗启剑等［6］采用同样方法测定了连钱草中熊果酸含量，结果熊果酸在0～18 μg·ml-1浓度范围内线性关系良好，加样回收率为100.64%。 2 薄层扫描法
白洁等［7］采用双波长薄层扫描法测定了夏枯草中熊果酸的含量，具体操作为取夏枯草药材粗粉经95％乙醇超声提取两次，滤液用70℃水浴蒸干，残渣用石油醚浸泡两次，挥干溶剂，用95％乙醇溶解后测定。采用硅胶G板，以环己烷－氯仿－醋酸乙酯（20∶5∶8）为展开剂，用10％硫酸乙醇溶液显色，选用λS=540 nm，λR=700 nm进行双波长反射式锯齿扫描，结果熊果酸在0.314～1.570 μg范围内线性关系良好，加样回收率为99.3％。张军等［8］建立了狼疮静颗粒中熊果酸的薄层扫描法测定方法，具体操作为取狼疮静颗粒用乙醚萃取3次，合并乙醚萃取液水浴蒸干乙醚，残留物加无水乙醇－氯仿（3∶2）混合液溶解后测定，以环己烷－氯仿－醋酸乙酯－甲酸（20∶5∶8）为展开剂，用10％的硫酸乙醇液显色，以λS=520 nm，λR=700 nm进行双波长薄层扫描，结果熊果酸在0.498～3.084 μg范围内线性关系良好，加样回收率为97.91％。 3 高效液相色谱法 3.1 HPLC－UV法戚志华等［9］采用HPLC法测定了陕西女贞子中熊果酸的含量，其方法为取女贞子粉末经超声提取后采用HPLC法，选用Lichrospher C18（ 4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，流动相为乙腈－甲醇－水－磷酸－三乙胺（50∶30∶20∶0.02∶0．04），流速1 ml·min-1，测定波长为205 nm，结果熊果酸在20.48～102.4 μg范围内线性关系良好，加样回收率为100.6％。梁洁等［10］采用HPLC法测定了广西产美味猕猴桃根中熊果酸的含量，具体操作为取
熊果酸的含量测定
微波-超声辅助协同萃取-高效液相色谱法测定 新疆野蔷薇根中总皂苷的含量 其买古丽·阿沙木，努尔皮达·阿卜拉江，迪丽努尔·马里克*（新疆师范大学化学化工学院,新疆乌鲁木齐840054） 摘要：建立了用微波-超声辅助提取，高效液相色谱测定野蔷薇根中总皂苷的方法，以野蔷薇根总皂苷含量为考察标准，研究了提取时间、乙醇浓度、微波-超声功率、料液比这四个因素对总皂苷含量的影响。该方法线性范围宽，检测限为0.3μg/L，平均相对标准偏差2.2%，加标回收率在99~104%之间。结果表明，该方法的灵敏度高并且具有较好的重复性、准确性及稳定性。 关键词：野蔷薇根；总皂苷；超声；微波；HPLC法。 Determination of total saponins in Rosa multiflora Thunb by Microwave-ultrasonic assisted extraction -high performance liquid chromatography (HPLC) QIMANGUL·Hasan，NURPIDA·Ablajan，DILNUR·Malik (School of chemistry and chemical engineering xin jiang normol university，Urumqi 830054）Abstract： A microwave-ultrasonic assisted extraction-high performance liquid chromatography(HPLC) method for the determination of total saponins in Rosa multiflora Thunb was established ，Regarding the content of total saponins in Rosa multiflora Thunb as the index of investigation, the factors such as the extraction time, ethanol concentration, power of microwave, ratio of solid to liqud as affecting the content of total saponins were studied.Under the optimum extraction conditions,the method yields a good linearity and the low limits of detection are 0.3 μg/L.The recovery was between 99%～104% with relative standard deviation was2.2% . The results shown that the method has Good Repeatability, sensitivity ,stability and accuracy. Keywords: Rosa multiflora Thub; Total saponins; Ultrasonic; Microwave; HPLC 野蔷薇（Rosa multiflora Thub）属于蔷薇科蔷薇属植物，野蔷薇富含多种人体所需的营养物质[1-2]，有较大开发利用价值，现代研究证明，野蔷薇中含有熊果酸、齐墩果酸等三萜类化合物[3]。三萜类化合物是自然界中一类重要化合物，*基金项目：国家自然科学基金（21165018）项目资助 作者简介：其买古丽，女，（维吾尔族）硕士研究生，主要从事天然产物的研究。 联系作者：迪丽努尔.马里克（1964-），女，教授，主要从事天然产物研究。（pkudilnur@https://www.360docs.net/doc/56814796.html,）
山楂含片中熊果酸的含量测定
山楂含片中熊果酸的含量测定 目的建立山楂片中熊果酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定熊果酸。色谱柱：phenomenex Kinete x2.6u XB-C18 100A柱（100 mm×4.6 mm ，5μm），流动相：以乙腈-0.1%磷酸水洗脱，流速1.0ml/min，检测波长：210nm，柱温40℃。结果阴性对照无干扰，熊果酸在13.5～53.9ng范围内线性关系良好（r=0.9999），平均回收率为98.3%，RSD=0.9（n=9），该法操作简便，方法稳定，专属性强，可作为三箭草和堂山楂含片的质量控制方法。 标签：山楂含片；HPLC；熊果酸；含量测定 三箭草和堂山楂含片由山楂、白砂糖制成。山楂中富含熊果酸等成分，具有疏肝理气，活血化瘀，助消化等功效，主要用于治疗脂肪肝和肝纤维化等症状。本研究采用HPLC法对三箭草和堂山楂含片中指标成分熊果酸进行含量测定。经查阅文献，尚未有对其成分熊果酸做含量测定的报道。 1 仪器与试药 1.1 仪器Aglient 1260生物惰性四元高效液相色谱仪，德国梅特勒-托利多XA205DU电子分析天平。 1.2样品山楂含片：广西梧州三箭制药有限公司保健品厂出品（批号20120816，20121217，20120320）；阴性样品：按处方缺山楂按工艺制备。熊果酸对照品购于中国药品生物制品检定所（批号：110742-200517，供含量测定用）；其他化学试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件色谱柱phenomenex Kinete x2.6u XB-C18 100A柱（100 mm×4.6 mm ，5μm）；乙腈-0.1%磷酸水溶液（68：32）为流动相；流速为 1.0ml.min-1；检测波长为210nm。 2.2 对照品溶液的制备精密称取熊果酸对照品1.078mg置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成每1ml含107.8μg的溶液。 2.3 供试品溶液的制备精密量取本品粉末3g，置于50ml锥形瓶中，精密加入20ml甲醇，称定重量，超声20min，放置室温后用甲醇补足重量，摇匀，用微孔滤膜（0.22μm）滤过，取续滤液，即得。 2.4 测定法分别精密吸取对照品和供试品溶液各4μl，注入高效液相色谱仪，测定峰面积积分值。按外标法以峰面积计算，即得。 2.5 专属性考察取阴性样品，按2.3制备阴性供试品溶液，按2.1 色谱条
紫外分光光度法测定锁阳中熊果酸的含量
3 实验结果 蚕羌和鸡腿羌挥发油得率分别为1.4, 1.1ml/100g;相对密度分别为0.977,0.982; [α]20D分别为0.642 ,0.982 。 蚕羌挥发油共鉴定出57个化合物,含量为93.24%;鸡腿羌共鉴定出56个化合物,含量为87.34%(见附表)。 4 参考文献 1 中国药典.一部.1995:157 2 中国医学科学院药物研究所等.中药志.第一册.北京:人 民卫生出版社,1959:282 3 中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴.第二册.北 京:科学出版社,1985:1099 4 中国药品生物制品鉴定所.中药材手册.北京:人民卫生出 版社,1992:117 5 Stenhageon E et al.Registry of Mass Spectral Data.Vol.1～ 2.New Y ork:John Wiley&Sons Inc,1974 6 Heller S R et al.EPA/NIH Mass Spectral Data Base.Vol.1 ～2. Washington:US G overnment Printing Office,1978致谢 本院中药研究所徐植灵研究员、吉力副研究员代做GC2MS。 1996210216收稿 紫外分光光度法测定锁阳中熊果酸的含量 丁红 王毅 王胜勇 (山西医科大学药学系 太原030001) 游万兴 (山西省药品检验所 太原030001) 摘要 通过薄层层析从锁阳中提取分离出熊果酸,并用紫外分光光度法测定其含量为0178%。实验平均回收率为9714%,RSD=0.45%(n=4)。 关键词 锁阳 熊果酸 紫外分光光度法 中药锁阳为锁阳的干燥肉质茎,性甘、温,具有补肾阳,益精血,润肠通便的功能,用于腰膝痿软,阳痿滑精及肠燥便秘[1],是中医临床上兴阳益精,抗衰老的重要药物。据文献报道,锁阳含有熊果酸、β2谷甾醇、胡萝卜甙[2],其中熊果酸具有安定,降温,抗菌,抗炎,降酶,抗癌等作用[3]。因此,测定锁阳中熊果酸的含量可为评价药材内在质量提供依据,也可对制定含有锁阳的中药制剂质量标准有一定意义。 1 仪器与药品 岛津UV2260紫外分光光度仪,UV2Ⅰ型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂)。锁阳Herba Cynomorii购自太原市药材公司,内蒙产,山西省药品检验所顾腾喧教授鉴定。熊果酸对照品由中国药品生物制品检定所提供。硅胶G为青岛海洋化工厂生产,甲醇、丙酮等均为分析纯,北京化工厂生产。 2 实验方法和结果 211 薄层层析条件 硅胶G薄层板,展开剂石油醚2丙酮2甲醇(7∶3∶4),展距15.6cm。喷95%磷钼酸乙醇液, 110℃加热5min显色,254nm紫外灯下确定熊果酸荧光区。 212 标准曲线的测定 分别量取熊果酸对照液0.05,0.10,0.15, 0.20,0.25,0.30,0.40ml置5ml容量瓶中,甲醇定溶。甲醇为空白,204nm波长处分别测其吸收度。回归方程Y=101046X+010453,r= 019998。在010104mg/ml～010832mg/ml范围内呈良好线性关系。 213 样品测定 锁阳干燥粉末(40目)10g,80ml甲醇水浴
熊果酸的含量测定
野蔷薇根中熊果酸的提取工艺研究 努尔皮达·阿卜拉江，其买古丽·阿沙木，迪丽努尔·马里克* （新疆师范大学化学化工学院,新疆乌鲁木齐840054） 摘要：目的：优选野蔷薇根中熊果酸的超声提取工艺。方法：使用超声波提取法，采用L9(34)正交设计实验，用高效液相色谱法测定熊果酸的含量，确定最佳提取工艺条件。结果表明：野蔷薇根中熊果酸的提取最佳工艺是超声功率为600W，超声频率为工作5s间歇5s，料液比1：25，提取时间为30min，各因素的影响依次为超声波频率> 超声波功率>料液比和提取时间。结论：超声辅助提取野蔷薇根中熊果酸是一种简单、快捷、高效的提取方法。关键词：野蔷薇；熊果酸；超声提取；HPLC法 Study on extraction technology of Ursolic acid in Rosa multiflora Thunb NURPIDA·Ablajan，QIMANGUL·Hasan，DILNUR·Malik (School of chemistry and chemical engineering xin jiang normol university，Urumqi 830054）Abstract:objective: to optimize the ultrasonic extraction of Ursolic acid in Rosa multiflora Thumb . Method: by utilizing the ultrasonic extraction method and using the orthogonal test of L9(34), with high-performance liquid chromatography (HPLC) to determine ursolic acid content and the optimum extraction conditions. The results show that the order of each factor affecting the extraction was ultrasonic frequency>ultrasonic power>ratio of liquid to material>extracting time, and the optimum conditions of extracting ursolic acid from the root of wild roses were as follows: ultrasonic power 600W, ultrasonic frequency of resting for 5s in the working period of 5s,ratio of liquid to material 1:25, extracting time 30min, . Conclusion: the ultrasonic-assisted extracting of ursolic acid from the root of wild roses is a simple, quick way of extraction with high efficiency. Keywords: Rosa multiflora ; ursolic acid; Ultrasonic Extraction ; HPLC method 熊果酸(Ursolic acid)，又名乌苏酸、乌索酸、α-香树脂醇，是一种弱酸性五环三萜类化合物[1]。熊果酸纯品为白色针状结晶(乙醇中结晶)，味苦，具有多种生物活性，有镇静、抗炎、抗菌，降低血糖，抗肝炎[2]等多种生物学效应，熊果酸还具有明显的抗氧化功能[3]，所以是一种很有开发价值的植物活性成分，被广泛地用作医药和化妆品原料，日本等国家已经将其作为天然抗氧化剂应用于食品中 *基金项目：国家自然科学基金（21165018）项目资助 作者简介：努尔皮达，女，（维吾尔族）硕士研究生，主要从事天然产物的研究。 联系作者：迪丽努尔.马里克（1964-），女，教授，主要从事天然产物研究。（pkudilnur@https://www.360docs.net/doc/56814796.html,）
山楂核中熊果酸含量的HPLC测定
山楂核中熊果酸含量的HPLC 测定 杨晓彤 程乐乐 糜 可 周韵丽 杨庆尧 上海师范大学微生物与免疫学研究所 (上海 200024) 摘要:采用C 18反相高效液相色谱RP -HPLC 法对山楂核中的熊果酸作含量测定。结果:测得山楂核中的熊果酸含量为01577mg/g,回收率为103113%,保留时间和峰面积的变异系数分别为0118%和1168%(n =8)。山楂核甲醇萃取液在作HPLC 分析前,先用硅胶柱吸附,再用洗脱液(环己烷:乙酸乙酯:冰醋酸=12B 4B 1)洗脱,可去除大部分杂质,提高测定效果。 关键词:山楂核(Seed of Crataegus pinnati fida ),熊果酸,RP-HPLC 中图分类号:R 282.6 文献标识码:B 文章编号:1008-861X(2001)01-0055-03 基金项目:上海市高等学校科学技术发展基金资助项目(96011) 熊果酸(Ursolic acid,UA )属三萜类化合物,广泛存在于山楂、乌梅、夏枯草等植物[1]。近年发现熊果酸除有抗炎、抗突变活性外,对多种恶性肿瘤细胞亦有强烈的毒杀效应[2~4],并有诱导癌细胞分化的能力[5]。已知山楂中含熊果酸[6]。有人在山楂核中也检测到熊果酸[7],但迄今未见其含量报道。本文用HPLC 测定了山楂核中的熊果酸含量。1 仪器与材料 仪器:Beckman Gold System 高效液相色谱仪及软件,125型泵,168型紫外二极管阵列检测器;Beckman Ultrasphere C18反相柱(416@250mm,加416@50mm 保护柱);旋转蒸发器为B chi 公司产品;C Q250超声波发生器产自上海超声仪器厂。 材料:熊果酸标准品由中国药品生物制品检定所提供。山楂购自天津市场,品种名:大红袍。测定用甲醇为色谱级。提取用试剂(甲醇、环己烷、乙酸乙酯、冰醋酸)均为化学纯。层析硅胶为上海五四化学试剂厂产品。2 方法与结果 2.1 山楂核样品制备、预处理及熊果酸检出 2.1.1 样品提取: 将鲜山楂沸水煮1min 后,分离山楂核,60~80e 烘干,打成200目的细粉,精密称取山楂核粉1g,加100ml 甲醇,90e 水浴回流提取6h 或置超声波发生器内超声提取1h,过滤,取滤液减压蒸干,残渣用甲醇溶解并定容至5ml,待作硅胶柱预处理。 2.1.2 硅胶柱预处理: 取100g 层析用硅胶,用二倍柱体积的洗脱液(环己烷:乙酸乙酯:冰醋酸=12B 4B 1,V/V)洗脱,100e 烘至无酸味。取118g 装成id 8@85mm 的硅胶柱。精密吸取015ml 待处理样品于硅胶柱上,待甲醇挥干后用7ml 层析液(环己烷:乙酸乙酯:冰醋酸=12B 4B 1)洗脱,收集洗脱液,减压蒸干,用甲醇溶解并定容至1ml,0122mm 膜过滤后进行HPLC 分析。 2.1.3 样品测定结果 山楂核提取样品经硅胶柱预处理后上HPLC 仪测定,测定用流动相为甲醇/水(用甲酸调p H 至3)=95/5(V/V);流速:1ml/min;进样量:20L l;在215nm 波长下检测,用熊果酸标准品作对照。结果:样品在熊果酸标准品的出峰位置上出现相同的色谱峰(图1)。另在样品中加入熊果酸标准品后该峰的面积增加,但保留时间未改变,且没有出现新增的峰(图2) 。 a:山楂核甲醇提取物 b:熊果酸 Me than ol extract of the Ursolic acid(uA)S eeds of C.pinnati fida 图1 山楂核甲醇提取物与熊果酸标准品HP LC 色谱图 Fig.1 HPLC ch romatograms of m eth an ol extract of the seeds of C.pinnati fida 除上述色谱图外,另以每秒4次的频率记录190~320nm 范围内的光谱吸收,结果两者的光谱吸收图完全一致,其最大吸收在204nm(图3a)。将上述光谱进一步作二阶导数变换,其二阶导数光谱也完全一致(图3b)。由此可见两者为同一物质,山楂核提取物中的该色谱峰为熊果酸吸收峰。 第15卷第1期2001年3月 上海中医药大学学报 ACT A UNI VERSIT ATIS TRADI TIONIS MEDIC AL IS SINENSIS P HARMACOL OGIAEQUE S HANGHAI VOL.15NO.1 Ma r.,2001