wds操作全过程
Wds操作全过程.
实验环境：
服务器端：
域控制器、DNS服务器、DHCP服务器、
WDS服务器、WAIK、.NET 、.
计算机名:6478c
设置参数:
ip地址:作用域:验证用户名
Wds验证用户密码:P@ssw0rd
客户机：支持PXE启动
系统的封装
首先找到一张纯净的系统安装盘,安装完整的操作系统.系统安装完成之后,驱动不需要进行安装.直接安装常用的办公软件.(office 2007,adobe reader,active flash 10,winrar,暴风影音等)
Windows xp安装光盘中的support文件夹下的解压到%systemdrive%\Sysprep 文件夹下.运行setupmgr,创建一份完全自动安装的,格式为ini的应答文件.
由于需要突破硬件层的限制,所以需要使用特定的ntldr以及更改的属性,所以这一步没有采用脚本替换,直接用封装类软件实现.下载自由天空的封装软件(Easy Sysprep v3 beta ,并下载驱动智能识别程序.将这俩个程序统一放置在%systemdrive%\Sysprep文件夹中,运行封装工具,基本都可以按照默认来进行,值得注意的有俩处:其一,在系统部署前,指定调用驱动智能识别程序;其二,要为
新的系统生成新的sid.
配置好封装程序之后,点击封装.封装过程结束之后,关闭系统,留待抓取镜像.
windows部署服务器的配置.
安装windows部署服务.
在hdt上开始-----设置---控制面板---添加删除程序----添加删除组件中，选择windows部署服务，点击下一步，依次默认即可，无需设置，方便简单
安装WAIK、.NET Framework 、
WAIK下载地址：
&DisplayLang=zh-cn
将WAIK镜像放入光驱，在出现的向导中选择安装.NET Fframework安装程序和，最后安装windows AIK安装程序.
添加启动映像和创建安装映像组
开始----程序----管理工具----windows部署服务,在windows部署管理窗口中右键点击在出现的选项卡中选择配置服务器，在windows部署服务配置向导中点击下一步，开始配置windows部署服务。
首先配置远程安装文件夹，远程安装文件夹不能放在系统分区和启动分区，所以请更改一个其他逻辑盘，并保证该盘为ntfs分区格式。
其次到了配置监听端口的问题，因为我们的dhcp服务器与wds服务器是在一台机器上，所以我们选择不监听67端口，并且勾选“将DHCP选项标记#60配置为“PXEClient””。
，
依次勾选“选择响应已知和未知的客户端计算机”,
现在不在windows部署服务器上添加映像，点击完成.
打开windows部署服务管理器，右键点击“启动映像“在出现的选项卡上选择添加启动映像,
首先我们添加，在WAIK安装目录下，查找,主要作用是捕获模板计算机的操作系统,
我们可以选择映像名称，更改为好记的名称,这里我改为wds capture.
点击下一步,使用默认属性名,
下一步,完成.
接着我们添加,由于windows2003没有，我们挂入windows2008的光盘，下载地址为: ed29f5a，主要作用是通过网络启动裸机.
指定文件位置之后,需要添加映像名称，更改为好记的名称,我更改为Microsoft Windows XP Setup (x86).
默认属性名,下一步,之后完成.
在添加映像选项上单击右键,选择添加映像组，目的是为了更好的保存捕获的镜像.将新添加的映像组命名为vol xp.
至此,我们的wds服务器部署完毕.
三、映像的捕获.
启动封装的客户机,设置为pxe启动.进入引导的启动项.Windows pe界面是一个VISTA风格的界面，然后输入wdscapture开始捕获，如下图所示：
输入wdscapture后出现的捕获向导中点击下一步
选择要捕获的逻辑卷，命名捕获的映像名和对映像的简单描述
映像捕获后存放的位置，必须是本地和远程服务器全部填写，如果本地不填写会报告错误选择将映像加载到wds服务器上并且填写服务器名，点击连接
输入验证口令
添加映像组，映像组是保存捕获映像的位置
捕获成功完成
如下图所示：捕获的映像已经保存在安装映像的映像组中
四、系统的安装
WDS服务器端准备完毕，现在将裸机从网络启动，按F12进入windows安装界面，选择windows 2003sp2 setup 开始
进入部署界面选择下一步，
输入验证口令，开始安装操作系统
选择要部署的操作系统
选择安装系统的磁盘
正在复制安装文件，WIM格式的安装比IS0格式的安装要快的很多，WIM格式的安装相当于磁盘对考
安装文件复制完毕，重启后，进行最小安装，如：填写姓名、单位、产品密钥、管理员口令
部署完成
tp-link-无线桥接-bridge-WDS设置
在无线网络成为家庭和中小企业组建网络的首选解决方案的同时，由于房屋基本都是钢筋混凝土结构，并且格局复杂多样，环境对无线信号的衰减严重。所以使用一个无线AP进行无线网络覆盖时，会存在信号差，数据传输速率达不到用户需求，甚至存在信号盲点的问题。为了增加无线网络的覆盖范围，增加远距离无线传输速率，使较远处能够方便快捷地使用无线来上网冲浪，这样就需要用到我们无线路由器的桥接或WDS功能。 上图所示为一小型企业无线网络，A、B、C三个部门如果只使用1个无线路由器（本文以TL-WR841N V5为例），可能会出现一些计算机搜到信号很弱或者搜索不到信号，导致无法连接无线网络。解决方法是：A、B、C三个部门各自连接一台无线路由器，三个无线路由器通过WDS连接就可以实现整个区域的完美覆盖、消除盲点。 配置思想：无线路由器B作为中心无线路由器，无线路由器A、C与无线路由器B建立WDS连接。 步骤如下： 注：本文所介绍的产品设置方法适用于TL-WR841N v5、TL-WR741N、TL-WR742N。 一、中心无线路由器B设置 登陆无线路由器B管理界面，在无线设置-基本设置中设置“SSID号”、“信道”，如图：
在无线设置-无线安全设置中设置无线信号加密信息
记录无线路由器B设置后的SSID、信道和加密设置信息，在后续无线路由器A、C的配置中需要应用。 二、无线路由器A设置。 1.修改LAN口IP地址。在网络参数-LAN口设置中，修改IP地址和B路由器不同（防止IP地址冲突），如19 2.168.1.2，保存，路由器会自动重启。
2.启用WDS功能。重启完毕后，用更改后的LAN口IP地址重新登陆无线路由器A，在无线设置-基本设置中勾选“开启WDS”。 3.WDS设置。点击“扫描”，搜索周围无线信号。
两台双频无线路由器的WDS无线桥接方法
两台双频无线路由器的WDS无线桥接方法 现在很多家庭都是用两台双频无线路由器来进行WDS无线桥接，但是却不知道怎么设置。小编为大家整理了两台双频无线路由器的WDS无线桥接方法，供大家参考阅读! 两台双频无线路由器的WDS无线桥接方法 1、进入副路由器的管理界面 把操作电脑连接到副路由器的LAN口，如果使用笔记本或Pad 来设置，请连接TP-LINK_XXXX(背部标贴上写着信号名)这个默认信号就行。打开网页浏览器，清空地址栏并输入https://www.360docs.net/doc/5916351931.html,(或192.168.1.1)，登录管理界面。 注意：部分路由器首次设置时需要设置6~15位的管理密码。 2、启用桥接应用 进入管理界面后，点击应用管理，找到无线桥接，点击进入，如下图： 3、开始设置向导 进入无线桥接设置向导后，点击开始设置，如下： 4、扫描并选择主路由器信号 副路由器自动扫描周边信号，由于主、副路由器都支持5G频段，5G的干扰较小，此处选择桥接5G频段的信号。选择主路由器5G 信号，并输入对应的无线密码，点击下一步： 注意：如果扫描不到信号，请确认主路由器开启无线广播，且尝
试减小主副路由器的距离。 5、记录副路由器的管理IP地址 主路由器会给副路由器分配IP地址，后续需要使用该IP地址管理副路由器，建议记下该IP地址，点击下一步。 6、设置副路由器的无线密码 建议此处保持默认，直接点击下一步，如下： 注意：此处可以设置副路由器的无线参数，但是如果要实现无线漫游，则必须保持不变。 7、确认桥接成功 再次进入应用管理无线桥接中，可以看到桥接状态为桥接成功(如果使用无线终端操作，由于副路由器的默认信号消失，此时需要连接放大后的信号)，如下： 8、桥接成功后 双频路由器作为副路由器桥接主路由器，在无线桥接过程中我们只配置了一个频段的无线信号名称和密码，还需要配置另外一个频段。比如使用5G频段桥接，就需要单独设置2.4G的无线信号，反之一样。点击网络状态修改相关设置，如果主路由器也是双频路由器，请将信号名称和密码设置与主路由器一致，以实现漫游： 至此无线桥接(WDS)设置完成，最终的网络效果图如下：
WDS和DHCP配置说明
WDS和DHCP配置说明 网络启动程序(NBP) 是网络启动过程中第一个下载和执行的文件，它可以控制启动开始时的体验（例如，用户是否必须按F12 才能开始网络启动） WDS服务器配置说明： 1)如果WDS和DHCP安装在同一服务器上，在WDS安装完成后，DHCP的服务器配置选项中会自动生成061PXE Client选项，用来标识该DHCP服务器监听PXE Client请求，客户端可以直接获取到IP并从网络启动 2)如果WDS和DHCP分别位于不同的服务器上，但位于同一网段： 配置WDS属性：DHCP 选项卡：不勾选不监听DHCP端口和配置DHCP选项以指示此服务器也是PXE服务器两个选项（如果选中了不监听DHCP 端口则客户端无法获取到IP）高级选项卡：选中在DHCP中授权此Windows部署服务器选项（在VMware中不选中此选项客户端也可以获取到IP、找到WDS服务器并加载到启动 文件pxeboot.n12） DHCP服务器上不需要任何配置，这样客户端在同网段广播，获取其IP地址后，它会直接联系WDS服务器（再次使用DHCP 数据包），以获取要下载的NBP 的名称和路径。在DHCP服务器上配置了66和67选项，客户端也可以正常启动 配置DHCP服务器上的66和67选项说明： 只有DHCP和WDS安装在同一台服务器上，才会出现60 PXE Client选项。 使用DHCP 选项66 和67 被视为网络启动引用。 如果您配置这些选项，则客户端计算机将从DHCP 服务器直接接收IP 地址租约、有关启动服务器的信息，以及有关NBP 的信息。客户端将不会使用DHCP 联系Windows 部署服务服务器，但是它们将通过UDP 端口4011 上的普通文件传输协议(TFTP) 下载此NBP。 Microsoft 不推荐使用此方法，原因如下： 使用DHCP 选项不如配置路由器可靠。在测试中，客户端错误地解析了从DHCP 服务器返回的DHCP 选项，结果，客户端收到了“TFTP 失败”的错误消息。通常，在PXE ROM 忽略启动服务器主机名，并尝试直接从DHCP 服务器下载NBP 的情况下会发生此问题。 如果有多个Windows 部署服务服务器可用于处理客户端请求，则指定特定的服务器可能会防止负载平衡。相反，使用路由器转发表可以将请求转发到多个服务器。 客户端可能被定向到不可用的Windows 部署服务服务器。由于客户端不必直接联系Windows 部署服务服务器来确定要下载的NBP，因此，DHCP 服务器可能会引导客户端下载不存在的NBP，或将客户端定向到当前不可用的服务器。 客户端可能会绕过Windows 部署服务服务器的应答设置。 066 启动服务器主机名192.168.11.3（WDS服务器IP或计算机名） 067 启动文件名boot\x64\https://www.360docs.net/doc/5916351931.html,（也可以填写https://www.360docs.net/doc/5916351931.html,） 067 启动文件名 MSBoot\x86\https://www.360docs.net/doc/5916351931.html, ----在SCCM2012中播发OS需要填写该文件名，WDS默认不能跨网段部署，如果需要跨网段的话，也需要填写该文件名
Western操作步骤
Western-Blot 操作流程 （一）组织中总蛋白的提取 用干净的剪刀剪取绿豆大小的组织块于1.5ml的EP管中，加入200uLRIPA裂解液(含PMSF，比例为97：1：1：1)，用杵子研磨3-4min, 段事先在酒精里浸泡至少30min，用之前用滤纸吸干酒精，） 20-30s,每隔5min 后在 4℃下12000rpm 离心 5min，取上清分装于 1.5mlEP管中并置于-80℃冰箱保存。 （二）BCA法蛋白含量的测定 (1) 从-20℃取出 1mg/ml BSA，室温融化后，备用。 (3)以上步骤完成后，在所有加样的孔里各加上200uLBCA蛋白浓度测定试剂（按试剂A：试剂B=50：1的比例配置），然后置于37℃水浴锅30min后取出。 (4)酶标仪测定OD值。 (5)EXCEL表格制作标准曲线，按照标准曲线计算各样本的蛋白浓度。 （三）稀释蛋白及蛋白变性 如果计算出的样本的蛋白浓度偏高，需要用RIPA裂解液将蛋白稀释（一般将蛋白浓度稀释至5-10ug/uL）;稀释完后取10-30uL的样本蛋白置于新的1.5mLEP管中，加入新EP管中总体积1/4体积的上样缓冲液，置于99-100℃的干式恒温器中加热5-10min,使蛋白变性。（注意：将EP管的盖子盖紧，插入加热器的大圆孔中）煮过的蛋白置于-20℃冰箱保存。 （四）制作SDS电泳胶 ⑴清洗玻璃板，双蒸水冲洗晾干后，根据厂家说明安装玻璃板。 ⑵配置10%的分离胶 配方：H2O2 4.0ml 30%丙烯酰胺液 3.3ml 1.5mol/l Tris （ PH8.8） 2.5ml 10%SDS 100ul 10%过硫酸胺 100ul TEMED 4ul ⑶分离胶溶液中加入 TEMED 以及 10%过硫酸胺后需立即混匀（防止未灌胶就发生凝固），将混合液立即加入玻璃板内，距梳子下缘约 lcm 处即可，蒸馏水封顶，待凝胶完全聚合（约30min）后，倒去双蒸水。 ⑷制备5%的浓缩胶 配方；H2O2 3.4ml 30%丙烯酰胺液 0.83ml 1.5mol/l Tris （ PH6.8） 0.63ml 10%SDS 50ul
多台无线路由器wds桥接设置
2台以上TP-LINK 11n无线路由器WDS功能应用举例 我单位有些部门离网络接入口较远，300米往上，又难以布线，为了消除信号盲点的问题。增加无线网络的覆盖围，增加远距离无线传输速率，使较远处能够方便快捷地使用无线来上网冲浪，这样就需要用到我们无线路由器的桥接或WDS功能。 假如A、B、C三个部门如果只使用1个无线路由器（本文以TL-WR840为例），可能会出现一些计算机搜到信号很弱或者搜索不到信号，导致无法连接无线网络。解决方法是：A、B、C三个部门各自连接一台无线路由器，三个无线路由器通过WDS连接就可以实现整个区域的完美覆盖、消除盲点。当然，如果C部门搜索不到A部门信号，可以通过B 桥接A，C桥接B来连接因特网。 配置思想：无线路由器A作为中心无线路由器，无线路由器B、C与无线路由器A建立WDS连接。 步骤如下： 注：本文所介绍的产品设置方法适用于TL-WR841N v5、TL-WR840N、TL-WR741N、TL-WR742N、TL-WR700N等。 一、中心无线路由器A设置 登陆无线路由器A管理界面，在无线设置-基本设置中设置“SSID号”、“信道”，如图： 在无线设置-无线安全设置中设置无线信号加密信息
记录无线路由器A设置后的SSID、信道和加密设置信息，在后续无线路由器B、C的配置中需要应用。 二、无线路由器B设置。 1.修改LAN口IP地址。在网络参数-LAN口设置中，修改IP地址和A路由器不同（防止IP地址冲突），如19 2.168.1.2，保存，路由器会自动重启。
2.启用WDS功能。重启完毕后，用更改后的LAN口IP地址重新登陆无线路由器B，在无线设置-基本设置中勾选“开启WDS”。 3.WDS设置。点击“扫描”，搜索周围无线信号。
WDS 无线桥接 副路由器不能上网
随着无线网络的发展，现在越来越多的公司及企业都已经开始布局无线局域网，今天我们主要介绍下适合中小企业的无线路由器桥接或WDS功能。文章以TP-link WR841N无线路由器设置为例，其它路由器参考设置思路进行设置。 上图所示为一小型企业无线网络，A、B、C三个部门如果只使用1个无线路由器，可能会出现一些计算机搜到信号很弱或者搜索不到信号，导致无法连接无线网络。解决方法是：A、B、C三个部门各自连接一台无线路由器，三个无线路由器通过WDS连接就可以实现整个区域的完美覆盖、消除盲点。 配置思想：无线路由器B作为中心无线路由器，无线路由器A、C与无线路由器B建立WDS连接。 步骤如下： 无线路由器的基本设置请参考：tp link无线路由器设置 一、中心无线路由器B设置 登陆无线路由器设置B管理界面，在无线设置-基本设置中设置“SSID号”、“信道”，如图：
在“无线设置”——“无线安全设置”中设置无线信号加密信息 记录无线路由器B设置后的SSID、信道和加密设置信息，在后续无线路由器A、C的配置中需要应用。 二、无线路由器A设置。 1.修改LAN口IP地址。在网络参数-LAN口设置中，修改IP地址和B路由器不同（防止IP地址冲突），如19 2.168.1.2，保存，路由器会自动重启。
2.启用WDS功能。重启完毕后，用更改后的LAN口IP地址重新登陆无线路由器A，在无线设置-基本设置中勾选“开启WDS”。大家注意这里的SSID跟B路由器的是不一样的，当然也可以设置成相同的，这样你在这三个路由器覆盖范围内可以漫游，也就是说只要你在这个范围内随意一点连上了网，到这个范围内的另一点也能上网,不用重新连接,重新输入SSID很方便形象的说就是三个路由器组成了一个相同的大网。 3.WDS设置。点击“扫描”，搜索周围无线信号。
Western操作步骤
Western-Blot 操作流程及注意事项 Western操作步骤 （一）蛋白样品制备 （1）单层贴壁细胞总蛋白的提取： 1. 倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。 2. 每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS（0.01M pH7.2~7.3）。平放轻轻摇动1min 洗涤细胞，然后弃去洗液。重复以上操作两次，共洗细胞三次以洗去培养液。将PBS 弃净后把培养瓶置于冰上。 3. 按1ml 裂解液加10 μl PMSF（100mM），摇匀置于冰上。（PMSF要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合） 4. 每瓶细胞加400 μl含PMSF的裂解液，冰上裂解30min，为使细胞充分裂解培养瓶要经常来回摇动。 5. 裂解完后，用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧（动作要快），然后用枪将细胞碎片和裂解液移至1.5ml 离心管中。（整个操作尽量在冰上进行） 6. 于4℃下12000rpm 离心5min。（提前开离心机预冷） 7. 将离心后的上清分装转移倒0.5min 的离心管中放于-20℃保存。 （个人感觉上述方法可操作性有待加强，细胞中蛋白本来就很少，一瓶50ml的细胞有时按照实验要求只能加100~200μl 的裂解液，按照上述操作，直接用200μl 裂解液进行裂解，根本就不够瓶壁上沾的。本人是先用预冷的PBS（一般数毫升）加入后，用细胞刮刮下细胞，转移至试管中，如果数瓶细胞是收集同一蛋白的，可以放在同一试管，离心后再将蛋白转移到EP管中，这样可操作性就比较强） （2）组织中总蛋白的提取： 1. 将少量组织块置于1~2ml 匀浆器中球状部位，用干净的剪刀将组织块尽量剪碎。 2. 加400 μl 单去污剂裂解液裂（含PMSF）于匀浆器中进行匀浆。然后置于冰上。 3. 几分钟后再碾一会儿再置于冰上，要重复碾几次使组织尽量碾碎。 4. 裂解30 min 后，即可用移液器将裂解液移至1.5ml 离心管中，然后在4℃下12000rpm 离心5min，取上清分装于0.5ml 离心管中并置于-20℃保存。 （3）加药物处理的贴壁细胞总蛋白的提取： 由于受药物的影响，一些细胞脱落下来，所以除按（一）操作外还应收集培养液中的细胞。以下是培养液中细胞总蛋白的提取： 1. 将培养液倒至15ml 离心管中，于2500rpm 离心5min。 2. 弃上清，加入4ml PBS并用枪轻吹打洗涤，然后2500rpm离心5min。弃上清后PBS 重复洗涤一次。 3. 用枪吸干上清后，加100 μl 裂解液（含PMSF）冰上裂解30min，裂解过程中要经常弹一弹以使细胞充分裂解。 4. 将裂解液与培养瓶中裂解液混在一起4℃、12000rpm 离心5min，取上清分装于0.5ml 离心管中并置于-20℃保存。 （二）蛋白含量的测定 （1）制作标准曲线 1. 从-20℃取出1mg/ml BSA，室温融化后，备用。 2. 取18 个1.5ml 离心管，3 个一组，分别标记为0μg，2.5μg，5.0μg ，10.0μg ，20.0μg ，40.0μg。
路由器无线桥接(WDS)设置方法
一、WDS使用介绍 无线终端在移动过程中可以自动切换较好的信号，实现无线漫游。 设置之前，请您注意以下事项： 1.主、副路由器之间不需要（也不可以）连接网线； 2.无线桥接仅需要在副路由器上设置，以下操作指导均是在副路由器上进行； 3.务必确认主路由器的无线信号名称、无线密码以及无线信道，本文使用以下参数举例： 主路由器的无线配置 无线信号名称zhangsan 无线密码1a2b3c4d 无线信道6 二、WDS设置方法 1、登录副路由器的管理界面 操作电脑连接到副路由器的LAN口或无线信号（默认为TP-LINK_XXXX），打开浏览器， 默认均为admin，登录管理界面。
注意：管理账号和密码可以在路由器底板标贴查看，如果修改了管理账号和密码，请使用修改后的账号和密码登录管理界面。 2、修改LAN口IP地址 进入管理界面后，点击网络参数 > LAN口设置，修改IP地址和主路由器在同一网段但不冲突（如主路由器的IP地址是192.168.1.1，则修改副路由器为192.168.1.2），保存并重启路由器。 注意：重启后使用修改后的IP地址登录副路由器的管理界面。 3、修改无线设置及开启WDS扫描信号 使用修改后的IP地址登录路由器管理界面，点击无线设置 > 无线基本设置，设置与主路由器无线名称相同的SSID号及信道，勾选开启WDS，点击扫描。
注意：如果需要实现漫游，则必须设置与主路由器相同的SSID和无线密码。 4、选择主路由器信号 在扫描页面中找到主路由器的无线信号名称（SSID），并点击连接。 注意：如果扫描不到信号，请确认主路由器开启无线广播，且尝试减小主副路由器的距离。 5、输入主路由器无线密码
什么是AP、WDS模式以及WDS和AP+WDS详细配置
一、 1.AP无线接入点(信号覆盖模式)和AP Client (无线客户端模式) 2.WDS无线分布式系统(桥接模式)和AP+WDS混合模式(既做桥接，又做覆盖) 3.802.1x认证和客户端无缝漫游 AP无线接入点和AP Client 这种方案是针对受到空间范围限制的用户，适合小型网络类型：家庭、30左右的企业办公。这样可在有限的范围实现多用户高速上网。 WDS无线分布式系统和AP+WDS混合模式 这种方案是针对房间结构比较复杂，多层或多房间的用户，适合中型网络类型：校园网络、企业网，使用这种结构可以保证在传输速度、稳定性和覆盖范围上达到最佳平衡。 二、 无论是用那种模式，要达成WDS模式还有以下必要条件，在无线设置时必须遵循。 1.两个无线路由器/AP都要支持WDS功能 2.两个无线路由器/AP的SSID必须相同 3.两个无线路由器/AP的无线网频道必须相同。默认值通常是“自动”，建议手动设置，确保相同的频道。 4.两个无线路由器/AP都启动WDS功能，并相互注册对方AP的Wireless MAC address，以此作为组建WDS的身份识别。注意MAC地址通常是有线/无线各一个，即“Lan MAC Address”和“Wireless MAC Address”是不一样的。在WDS功能中需要注册的是对方AP的“Wireless MAC Address”，注意不要混淆。 5.两个AP的安全设置必须相同，关键是安全机制和密码都必须相同。对于两台不同品牌的无线路由器，建议先用不加密方式把WDS调试好，然后再根据需要设置加密，避免因为加密不兼容造成WDS设置不通的问题。 准备:两台无线路由器A与B 网络:外部的上网线接在A的WAN口上,A启用DHCP及代理上网功能.B做A的信号中继. 操作: 对路由器A进行的操作: 1. 进入A的管理界面, a. 将A基本配置中的使用类型改为AP+WDS. b. SSID与B路由器相同即可.2. 进入无线分布系统配置 a. 启动WDS b. 增加WDS AP,输入B路由器的MAC地址3. 设备工作模式 修改A路由器的工作模式为路由或网关模式----------------------------------对路由器B进行的操作: 1. 进入B的管理界面, a. 将B基本配置中的使用类型改为AP+WDS. b. SSID与A路由器相同即可.2. 进入无线分布系统配置 a. 启动WDS
Western_blot_试剂配制及操作流程
Western-Blot操作流程 试剂配制 1.RIPA裂解液： 10mM Tris（MW121.14，PH7.5） 1%NP40 0.5%TritonX-100 0.2%脱氧胆酸钠 2 mM EDTA 1 mM PMSF 20%甘油 调pH值至7.5。 混匀后4℃保存，长期保存于-20℃。使用时，加入蛋白酶抑制剂cooktail。 制胶用（1-6）： 1. 1.0mol/L Tris·HCl （pH6.8） Tris (MW121.14) 12.114g 蒸馏水 100ml 溶解后，（用浓盐酸调pH至6.8），室温下保存。 2. 1.5mol/L Tris·HCl（pH8.8） Tris (MW121.14) 18.671g 蒸馏水 100ml 溶解后，（用浓盐酸调pH至8.8），室温下保存。 3.10％SDS SDS 10g 蒸馏水至 100ml 如溶解困难，可在50℃水浴下溶解，室温保存。 如在长期保存中出现沉淀，水浴溶化后，仍可使用。 4.10％过硫酸胺（AP） 过硫酸胺 0.1g
（现用现配，可先将过硫酸胺干粉称好分量后放在1.5mlEP管中，一次性多装几管，使用时加入蒸馏水水即可，溶解后，4℃保存，保存时间为1周） 5．四甲基乙二胺原液（TEMED）： 4?C保存。 6．30%丙稀酰胺： 4?C保存。 10%下层胶，即分离胶（两块胶，15ml）：胶的浓度根据自己所做蛋白的大小确定依次加入去离子水 5.9ml 30%丙烯酰胺 5ml 1.5M Tris-HCl（pH8.8） 3.8ml 10%SDS 150μl 10%AP 150μl TEMED 6μl 每加一种成分随即摇匀，为了加快凝胶，可以将过硫酸胺和TEMED量加大，根据实验当时的温度适当调整，加入TEMED混匀后应即刻灌胶。灌胶后加异丙醇（1ml）消泡 5%上层胶（两块胶，6ml）： 依次加入去离子水 4.1ml 30%丙烯酰胺 1ml 1M Tris-HCl（pH6.8） 0.75ml 10%SDS 60μl 10%AP 60μl TEMED 6μl 每加一种成分随即摇匀，为了加快凝胶，可以将过硫酸胺和TEMED量加大，根据实验当时的温度适当调整，加入TEMED混匀后应即刻灌胶。 7．5X电泳液缓冲液 Tris（MW121.14） 15.1g 甘氨酸（MW75.07） 94g SDS 5.00g 蒸馏水至 1000ml 溶解后室温保存,用时稀释5倍，通常取160ml配制成800ml即可。 8．10X转膜缓冲液 甘氨酸（MW75.07） 151.1g Tris（MW121.14） 30.3g
DIR-605L如何设置无线桥接延续扩展无线信号
DIR-605L如何设置无线桥接延续扩展无线信号? 前言 什么是桥接 WDS全名是Wireless Distribution System（无线分散系统）。简单来说是用无线方式在基地台(AP)间做成类似桥梁功能，此功能可以是一对一或是一对多. 【注意】WDS该如何设置? 设置的必须条件有几下几点: 两个无线路由都需要具备桥接功能 无线路由使用的无线名字必须相同 无线路由使用的无线信道必须相同 两个路由都启用桥接模式,并且互相对填对方路由的MAC地址 无线路由的无线加密模式和密码必须相同 无线路由最好是同一个厂家,同一个型号的产品,以免产生兼容性问题 实际环境中主要应用在以下网络架构（以两点之间做桥接为例）
下面我们以两台DIR-605L 为例,配置WDS从而实现拓扑图中的远端PC2访问Internet 首先规划 一,设置路由1正常上网 设置方法请参考路由器的QIG 二,配置路由1的无线桥接功能 点击”安装”左边的”无线连接”,无线模式选择”WDS+AP+Router” 路由器2的MAC 点击“保存设置”----“立即重启”，等待倒计时,设置完成
【注意】路由器的MAC地址可通过两种方法查看 1）路由器底部白色标签查看 2）路由器配置界面----“状态”----LAN的MAC地址（如下图：路由1的MAC） 路由器1的MAC 三,配置第二台路由器 1.进界面后,点击”安装”左边的”无线连接”,无线模式选择”WDS+AP”,其他的无线参数跟前面一致,最后填写前端的MAC地址,保存设置后,点击”稍后重启”, 如下图: 路由器1的MAC
2. 点击“网络设置”将路由器2的IP地址修改为192.168.0.2,点击“保存设置”---- “立即重新启动”，等待倒计时结束后，测试上网即可 如何测试桥接是否通? 可以在路由器2下用网线接一电脑,自动获取ip,获取的网关会是192.168.0.1 然后通过这台连线的电脑可以把两个路由器界面都打开(192.168.0.1,和192.168.0.2) 而且还可以上网 温馨提示: 可以在设置第二台电脑的时候本地连接手动设置ip地址: 例如:ip:192.168.0.5 ,掩码:255.255.255.0,网关192.168.0.1,DNS:192.168.0.1, 以防没有设置好桥接,就进不去路由器2的界面
H3C WDS详细配置
一、测试拓扑：点对点模式 核心交换机 AP 192.168.6.101/24AP 192.168.6.100/24 移动用户群 移动用户 注：AP192.168.6.101的SSID是test，AP192.168.6.100的SSID是h3c 二、测试设备清单 三、注意事项 1.AP信道保持一致 2.AP预共享密钥保持一致 四、配置步骤
# 使能端口安全功能。
Western Blot 原理和操作方法(详细)资料
Western Blot 原理和操作方法（详细） 工作原理 蛋白质的电泳分离是重要的生物化学分离纯化技术之一,电泳是指带电粒子在电场作用下,向着与其电荷相反的电极移动的现象.根据所采用的支持物不同,有琼脂糖凝胶电泳,淀粉凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳等.其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)由于无电渗作用,样品用量少(1-100μg),分辨率高,可检出10-9-10-12mol的样品,凝胶机械强度大,重复性好以及可以通过调节单体浓度或单体与交联剂的比例而得到孔径不同的凝胶等优点而受到广泛的应用. SDS-PAGE是最常用的定性分析蛋白质的电泳方式,特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量. PAGE能有效的分离蛋白质,主要依据其分子量和电荷的差异,而SDS-PAGE(SDS变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳)的分离原理则仅根据蛋白质的分子量的差异,因为SDS-PAGE的样品处理液是在要跑电泳的样品中假如含有SDS和巯基乙醇(2-ME)或二巯基赤藓醇(DTT),其可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构,SDS是一种阴离子表面活性剂即去污剂,它可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级及三级结构,并与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,电泳样品假如样品缓冲液后,要在沸水中煮3-5分钟使SDS与蛋白质充分结合形成SDS-蛋白质复合物,SDS-蛋白质复合物在强还原剂巯基乙醇存在时,蛋白质分子内的二硫键被打开而不被氧化,蛋白质也完全变性和解聚,并形成榛状结构,稳定的存在于均一的溶液中,SDS与蛋白质结合后使SDS-蛋白质复合物上带有大量的负电荷,平均每两个氨基酸残基结合一个SDS分子,这时各种蛋白质分子本身的电荷完全被SDS掩盖,远远超过其原来所带的电荷,从而使蛋白质原来所带的电荷可以忽略不计,消除了不同分子之间原有的电荷差别,其电泳迁移率主要取决于亚基分子质量的大小,这样分离出的谱带也为蛋白质的亚基. 样品处理液中通常加入溴酚蓝染料, 溴酚蓝指示剂是一个较小的分子,可以自由通过凝胶孔径,所以它显示着电泳的前沿位置,当指示剂到达凝胶底部时,即可停止电泳. 另外样品处理液中也可加入适量的甘油或蔗糖以增大溶液密度,使加样时样品溶液可以沉入样品加样槽底部. 重要参数
WDS无线组网
https://www.360docs.net/doc/5916351931.html,/pages/school.asp 11n无线路由器WDS功能应用举例 在无线网络成为家庭和中小企业组建网络的首选解决方案的同时，由于房屋基本都是钢筋混凝土结构，并且格局复杂多样，环境对无线信号的衰减严重。所以使用一个无线AP进行无线网络覆盖时，会存在信号差，数据传输速率达不到用户需求，甚至存在信号盲点的问题。为了增加无线网络的覆盖范围，增加远距离无线传输速率，使较远处能够方便快捷地使用无线来上网冲浪，这样就需要用到我们无线路由器的桥接或WDS功能。 上图所示为一小型企业无线网络，A、B、C三个部门如果只使用1个无线路由器（本文以TL-WR841N V5为例），可能会出现一些计算机搜到信号很弱或者搜索不到信号，导致无法连接无线网络。解决方法是：A、B、C三个部门各自连接一台无线路由器，三个无线路由器通过WDS连接就可以实现整个区域的完美覆盖、消除盲点。 配置思想：无线路由器B作为中心无线路由器，无线路由器A、C与无线路由器B建立WDS连接。 步骤如下： 注：本文所介绍的产品设置方法适用于TL-WR841N v5、TL-WR741N、TL-WR742N。 一、中心无线路由器B设置 登陆无线路由器B管理界面，在无线设置-基本设置中设置“SSID号”、“信道”，如图：
在无线设置-无线安全设置中设置无线信号加密信息
记录无线路由器B设置后的SSID、信道和加密设置信息，在后续无线路由器A、C的配置中需要应用。 二、无线路由器A设置。 1.修改LAN口IP地址。在网络参数-LAN口设置中，修改IP地址和B路由器不同（防止IP地址冲突），如19 2.168.1.2，保存，路由器会自动重启。
western 操作步骤
Western 操作步骤 （三）SDS——PAGE电泳 （1）清洗玻璃板：一只手扣紧玻璃板，另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲，再用蒸馏水冲洗干净后放在烤箱里烤干。 （2）灌胶与上样 1、玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。（可以用1%琼脂糖在垂直电泳槽的左右和下部封边） 2、配10%下层胶（10ml两块胶，每块胶5毫升左右），加入TEMED后立即摇匀即可灌胶。灌胶后胶上加一层甲醇（约1ml）液封，液封后胶凝的更快。 3、当甲醇和胶之间有一条折线时，说明胶已凝了。弃甲醇，并用吸水纸将甲醇吸干。 4、等待胶凝期间，准备好蛋白、细胞裂解液、上样缓冲液，上样总体积一般不超过30ul,上样前要将样品于沸水中煮5min使蛋白质变性，上样前在冰上放置3~5分钟。 5、配5%的上层胶（4ml两块胶，每块胶2ml），加入TEMED后立刻摇匀即可灌胶。将剩余空间灌满浓缩胶，然后将梳子插入浓缩胶中（从梳子的一头开始插）。灌胶时也要使胶沿玻璃板流下以免胶中有气泡产生。插梳子时要使梳子保持水平。由于胶凝固时体积会收缩减小，所以在上层胶凝固的过程中要在两边补胶（不补胶问题也不大）。等待上层胶凝固期间配制1×电泳缓冲液。 6、加入1×电泳缓冲液，两手分别捏住梳子的两竖直向上轻轻拔出。电泳缓冲液一定要加至超过玻璃板的伤员（量要足够多），否则电泳期间会出现电流过低的现象，进而影响电泳的效果。 7、上样（注意：最外的两个泳道易跑歪，尽量不用）Marker 3ul （Marker加在最外边上的加样孔中）样本20~30ul （3）电泳：恒流25mA每块胶，两块胶50mA。电泳至溴酚兰刚跑出来即可终止电泳，进行转膜 （四）转膜 （1）转一张膜需准备四张滤纸和一张硝酸纤维素膜。切滤纸和膜时一定要戴手套（以防手上的蛋白污染膜）。将切好的硝酸纤维素膜和滤纸置于1×转膜缓冲液浸湿。 （2）夹子黑的一面：海绵—2张滤纸—NC膜—胶—两张滤纸—海绵（刘老师的顺序），将夹子打开使黑的一面保持水平。在上面垫一张海绵垫，用玻璃棒来回赶几遍以赶走里面的气泡。在垫子上垫两层滤纸（光滑面临膜），放膜于滤纸上，将玻璃板撬开，随后将浓缩胶轻轻刮去，小心剥下下层胶盖于膜上，用手调整对齐，再放两张滤纸（光滑面临膜）用玻璃棒赶去其中的气泡。最后盖下另一块海绵垫，擀几下就可以合起来了。整个操作在转移液中进行，要不断的擀去气泡。膜两边的滤纸不能相互接触，否则会发生短路。如果同时做两块胶，转膜时要记住样本的位置。 （3）将夹子放入转移槽槽中，要使夹的黑面对槽的红面，夹的白面对槽的黑面。电转移时会产热，在槽的一边放一块冰来降温。一般用35V过夜（刘老师）。 转膜时点击方向注意是膜正胶负转膜结束前配制封闭液（3%脱脂牛奶）及1×TBST缓冲液。 （五）免疫反应 （1）封闭：将膜移至含有封闭液的平皿中，室温下脱色摇床上摇动封闭30分钟。 （2）一抗 A.从封闭液中取出膜，1×TBST 5min ×4次 B.将膜蛋白面朝上放于槽中，加入抗体，室温下孵育1小时后，4度过夜，次日用1×TBST
wds 无线桥接设置(TP-LINK无线路由器TL-WR340G TL-WR541G+等 )【附图】
TP-LINK无线路由器TL-WR340G TL-WR541G+等 wds 无线桥接设置 WDS(Wireless Distribution System)，无线分布式系统：是建构在HFSS或DSSS 底下，可让基地台与基地台间得以沟通，比较不同的是有WDS的功能是可当无线网路的中继器，且可多台基地台对一台，目前有许多无线基台都有WDS。WDS把有线网路的资料，透过无线网路当中继架构来传送，借此可将网路资料传送到另外一个无线网路环境，或者是另外一个有线网路。因为透过无线网路形成虚拟的网路线，所以有人称为这是无线网路桥接功能。严格说起来，无线网路桥接功能通常是指的是一对一，但是WDS架构可以做到一对多，并且桥接的对象可以是无线网路卡或者是有线系统。所以WDS最少要有两台同功能的AP，最多数 量则要看厂商设计的架构来决定。 最简单地说：就是WDS可以让无线AP之间通过无线进行桥接（中继），在这同 时并不影响其无线AP覆盖的功能 点对点无线桥接配置 设备名称：无线宽带路由器 品牌型号：TP-LINK TL-WR541G+ 设备数量：2 另外测试用笔记本终端设备：2台 一、网络示意图：
二、网络应用图：
三、无线路由器应用的几种模式 1.AP模式 这个模式说简单点就是将我们的有线网络转换成无线网络！然后连接各种无线终端，比如带连接无线网卡的笔记本或者台式机。连接带WIFI的手机等等。
2.无线客户端模式 这个模式说简单点就是将我们的无线网络转换成有线网络！然后用普通的网线连接到各种带RJ45网线端口的设备，比如连接到电脑当无线网卡用。连接到DM500S 上面让我们的DM500S与路由器不需要连接网线就可以解密及共享！
western的操作步骤Word版
Western Blot操作全过程 一，收蛋白 a（如果要收集死细胞） 1.取冰，将4°C离心机提前降温。 2.将死细胞收集到离心管：孔板内的细胞用PBS洗1-2遍，用适量 的胰酶消化，用离心管内的原培养液将孔板内细胞吹打下来，收集到离心管，室温离心1000rpm，5min。 3.弃上清，将离心管倒扣在滤纸上，尽量吸尽残留上清。 4.视细胞量的多少加入细胞裂解液。（1×Cell Lysis Buffer： PMSF=100：1，1×Cell Lysis Buffer，PMSF-20°C保存。PMSF 常温易降解，拿出时间不得超过30min，必须放置冰上。） 5.冰上裂解15min，将裂解液转移至EP管离心，4°C，12000rpm， 15min。 6.小心将上清转移至另一EP管，记下吸取的量。如：100μL。 7.将收集好的蛋白保存与—20°C。（可长期保存） b （如果不收集死细胞） 1．弃上清，孔板PBS洗1-2遍，吸尽PBS。在孔板中视细胞量的多少加入相应细胞裂解液。（同上） 2．冰上裂解15min，用细胞刮在孔板里将细胞刮刮。（不同的孔不能用同一个刮子，刮前用水冲洗，擦干。） 3．将裂解液转移至EP管离心，4°C，12000rpm，15min。
4．小心将上清转移至另一EP管，记下吸取的量。 5．将收集好的蛋白保存与—20°C。（可长期保存） 二，测蛋白浓度 BCA法（或者按照自己的试剂盒说明操作） 1.需96孔板，测蛋白浓度的A液，B液，标准蛋白，要测的样品蛋 白。 2.按要测的样品蛋白的数量来配AB液，每孔需AB混合液80μl（A： B=50：1）。例：有5个样品，加上5个标准蛋白和空白对照。共有11个孔。则A液取11×80=880μl，B液取880÷50=17.6两液混匀，加入96孔板，每孔80μl。然后加入标准蛋白及样品蛋白4μl。（标准蛋白先配好浓度125，250，500，1000，2000） 3.将孔板放入37°C温箱孵育30min。 4.用酶标仪测蛋白浓度。 5.记下蛋白浓度，根据要上样的μg量算出μl量。例：蛋白浓度为 1000，需上样15μg。则需上样15÷1000=？上样量不超过20μl。 三，配胶 1.将薄板和厚板用洁净的布擦干净，对齐，夹好。（板必须擦干净， 下端对齐，否则容易漏胶。）
多台无线路由器wds桥接设置
多台无线路由器W D S 桥接设置 -CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
2台以上TP-LINK 11n无线路由器WDS功能应用举例 我单位有些部门离网络接入口较远，300米往上，又难以布线，为了消除信号盲点的问题。增加无线网络的覆盖范围，增加远距离无线传输速率，使较远处能够方便快捷地使用无线来上网冲浪，这样就需要用到我们无线路由器的桥接或WDS功能。 假如A、B、C三个部门如果只使用1个无线路由器（本文以TL-WR840为例），可能会出现一些计算机搜到信号很弱或者搜索不到信号，导致无法连接无线网络。解决方法是：A、B、C三个部门各自连接一台无线路由器，三个无线路由器通过WDS连接就可以实现整个区域的完美覆盖、消除盲点。当然，如果C部门搜索不到A部门信号，可以通过B桥接A，C桥接B来连接因特网。 配置思想：无线路由器A作为中心无线路由器，无线路由器B、C与无线路由器A建立WDS连接。 步骤如下： 注：本文所介绍的产品设置方法适用于TL-WR841N v5、TL-WR840N、TL-WR741N、TL-WR742N、TL-WR700N等。 一、中心无线路由器A设置 登陆无线路由器A管理界面，在无线设置-基本设置中设置“SSID号”、“信道”，如图：
在无线设置-无线安全设置中设置无线信号加密信息
记录无线路由器A设置后的SSID、信道和加密设置信息，在后续无线路由器B、C的配置中需要应用。 二、无线路由器B设置。
1.修改LAN口IP地址。在网络参数-LAN口设置中，修改IP地址和A路由器不同（防止IP地址冲突），如19 2.168.1.2，保存，路由器会自动重启。 2.启用WDS功能。重启完毕后，用更改后的LAN口IP地址重新登陆无线路由器B，在无线设置-基本设置中勾选“开启WDS”。 3.WDS设置。点击“扫描”，搜索周围无线信号。
Western blot基本操作步骤
Western blot基本操作步骤 一、细胞蛋白的提取 弃去培养基，加入预冷的PBS洗一遍，加入的RIPA裂解液（含1mM PMSF(100×)，每10ml加蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂各一片，六孔板每孔150-250μl，60mm×15mm培养皿300-400μl，），于冰上裂解约5分钟，裂解总液12000rpm离心10 min。取上清，用BCA法测定蛋白浓度。用于western blot的蛋白样品取一定量加4×loading buffer，10×reducing，再用裂解液补齐到所需上样体积。离心，使蛋白沉底。将EP管于沸水中煮5min，变性，之后再离心后准备上样。 二、BCA法测蛋白浓度操作步骤 将蛋白标准配制溶液溶解蛋白标准（BSA），配制成5mg/ml的蛋白标准溶液，10μl 分装，-20℃冷冻保存。 完全溶解蛋白标准品，取10μl用PBS稀释至100μl，使终浓度为0.5mg/ml。 据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液，充分混匀。BCA工作液室温24小时内稳定。 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl加到96孔板的标准品孔中，加稀释标准品的溶液补足到20μl。 加适当体积样品到96孔板的样品孔中（可以通过预实验摸索稀释倍数），加PBS到20μl。 各孔加入100μl BCA工作液，37℃放置30分钟。 测定580nm条件下吸光度。根据标准曲线计算出蛋白浓度。 三、Western blot基本操作步骤 1、溶液配制： ①Runnig Buffer(1×)：SDS Runnig Buffer（20×）50mL，加MiliQ水至1L； ②Transfer Buffer(1×): Transfer Buffer(10×)100mL,甲醇200mL（20%，v/v），加MiliQ水至1L； ③TBST缓冲液 1M Tris·HCl（pH7.6）：60.5g Tris-base，加入约30ml浓盐酸，调PH至7.6，加MiliQ水至500ml。 TBS缓冲液（10×）：1M Tris·HCl 100ml+80g NaCl加MiliQ水1L TBST缓冲液（1×）：TBS缓冲液（10×）100ml+0.5ml Tween-20（0.05%，v/v），加MiliQ 水至1L。 ④封闭液：5% BSA（5g/100ml，称取1g BSA至20ml TBST，充分混匀溶解） 2、样品准备与加样 ①用4×SDS loading buffer, 10×reducing与蛋白质样品混合，并将此EP 管放在水浴锅中沸水煮5min，使蛋白质变性。 ②将预制胶固定到电泳装置中，并在装置中加满Runnig Buffer(1×)，内槽加入0.5mL抗氧化剂，小心拔下梳子； ③向上样孔中加入一定体积的蛋白样品（总蛋白量20μg以上）。向marker孔中加入2.5μl marker（按照实验要求设定marker量），向空白孔中加入一定体积的加样缓冲液(loading buffer)。注意采用相同（或相近）的上样体积，以保证蛋白的各带宽度相同。防止体积较大的上样孔中的蛋白质将向相邻的泳道扩散。 3、电泳 将电泳装置与电源连接。调节电压为100-200V，电泳50min，直至溴酚兰接近分离胶的底部，然后关闭电源并撤去连接的导线。