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临床常见微生物标本采集方法

血培养标本采集方法

一、概述

当微生物侵入血液迅速繁殖超出免疫系统清除这些微生物的能力时形成菌血症或真菌菌血症。血液和骨骼的细菌学培养对菌血症的诊断具有重要意义。

临床菌血症按病程可分为一过性菌血症、间歇性菌血症、持续性菌血症。菌血症患者多为间歇性菌血症，病原菌周期性出现在血液中，随之为无菌时期。不管临床症状经历的严重程度，患者血液中病原菌浓度相当低，因此要求临床多次采集血液标本进行培养，但24小时内一般不超过3次。菌血症是临床医学急症，应尽快采集血液进行培养。

二、采集指征

发热(大于等于38°)或低体温(小于等于36°)，寒战，白细胞计数增多(大于10×109L，特别有核左移时)，皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭，血压降低，C反应蛋白升高及呼吸加快，血液病患者出现粒细胞减少、血小板减少等。

当患者同时具备上述几种体征而临床可疑菌血症时，应采集血液培养。新生儿可疑菌血症可增加尿液和脑脊液培养。

对入院危重感染患者应在未进行抗菌药物治疗之前及时做血培养。

三、采集方法

1、物品准备：专用血培养瓶【一套血培养包括需养血培养瓶（蓝色帽）、厌氧血培养瓶（红色帽）】、棉签、碘伏、压脉带、20ml注射器、橡胶手套。

2、操作流程：配戴帽子口罩，手消毒，核对检验申请单和患者。选择采血部位，清洁消毒采血部位皮肤，松开压脉带，打开血培养瓶塑料盖用75%酒精或0.5%碘伏消毒血培养瓶橡皮塞，用0.5%碘伏从穿刺点向外画圈消毒，消毒区域直径达5厘米以上，涂擦穿刺皮肤两

遍，作用2分钟待干燥。对碘过敏者可以用75%酒精消毒，待酒精挥发干燥后采血。用无菌注射器抽取血液从橡皮塞处注入血培养瓶内，混匀以免血液凝固（采血量：成人采血量是每瓶10ml，小儿2-5ml。其中新生儿约0.5ml左右，一般只抽一瓶需养瓶进行培养，无需常规做厌氧瓶。）立即送检（全自动血培养的专用培养瓶注入血液后不需再消毒瓶塞，也不用再盖塑料盖，直接送检）。

四、血培养次数和采血时问

1、采血应该尽量在使用抗菌药之前进行，在患者发热期间越早越好，以发热高峰前1小时内或病人寒战和发热开始时采集为宜。在30-60分钟内或同时于不同部位采集2-3份血标本(一次静脉采血注入到多个培养瓶中视为单份血培养)。在采取血培养后的2-5天内，不需要再重复采血培养，因为进行治疗后的2-5天血液中的感染细菌不会马上消失。

2、怀疑导管相关血流感染时根据是否保留血管内导管采取不同采集方法：

保留导管：中央导管采血1套加外周静脉采血1-2套。

不保留导管：从外周静脉采血1-2套培养，加中央导管尖端段5cm进行半定量培养。

中央导管采血方法：夹闭中央导管，使用75％乙醇消毒中央导管接头2遍，待干，采血。

中央导管尖端段5cm采集方法：穿刺部位使用皮肤消毒剂消毒后拔除中央导管，使用无菌剪刀剪去导管尖端5cm置入干燥试管或血琼脂营养平皿送检。切勿放入营养肉汤管中送检。

五、操作注意事项

1、从静脉采血，不建议从动脉采取，在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，但不可接触穿刺点。

2、用注射器无菌采血后勿换针头直接注入消毒后的血培养瓶。

3、多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤菌丛污染的可能。

4、在同时需要采集外周静脉与中央导管血标本时，须先进行外周静脉穿刺采血，以确保可以采到足够量的血标本；定量培养时，如果外周静脉采血每个培养瓶不足10 ml血量时，中央导管采血总量以及每瓶的采血量必须调整到与外周静脉的采血量一致；外周静脉与中央导管血标本的采血时间间隔≤10分钟。并在血培养瓶上标注采血时间和部位（中央导管或外周静脉）。

5、血标本接种到培养瓶后，轻轻混匀以防血液凝固。放入标本箱内立即送检，如不能立即送检，需室温保持，切勿冷藏。

伤口分泌物培养标本采集方法

一、概述

组织或器官的化脓性感染，其病原菌的来源可以分为两类：内源性(感染源是炎症局部周围器官中的正常菌群)和外源性(感染源是存在于外界的微生物)。

二、采集指征局部组织或器官有化脓性感染表现，应进行细菌培养。

三、开放脓肿采集方法物品准备：换药包、无菌拭子、生理盐水、橡胶手套

操作流程：用无菌盐水擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡基底部或边缘部，采集两个拭子，分别做培养和革兰染色，也可对渗出物做需氧培养，开发病灶不能做厌氧培养。

四、注意事项：

1、对大多数开放伤口，采集前应先清创，去除表面菌群。

2、除非有渗出物，干燥、结痂伤口一般不做培养。

3、闭合脓肿应取穿刺物和脓肿壁标本。开发脓肿处理同开放性伤口。

4、不要仅仅送检脓液，应在病灶活动区域或基底部采集标本，最好是组织标本。

五、标本送检和验收: 标本采集后应尽快送检，如果在1 h不能培养，应将标本冷藏。

尿培养标本采集方法

一、概述

尿路感染是指尿道内有大量微生物繁殖而引起的尿路炎症。尿路感染并非是一种单一的疾病，而是一种临床综合征。尿液的细菌学检查对尿路感染的诊断具有重要价值。正常人体内的尿液是无菌的，而外尿道有正常菌群寄居。尿液经尿道排出时受到尿道中细菌的污染而混有细菌，但细菌数不超过103cfu/ml。患有泌尿系统感染时，尿中的菌数高于104~105cfu/L，因而可以此界限作为诊断泌尿系感染的依据。

二、采集指征:有下列体征之一者，应进行尿培养：（1）有典型的尿路感染症状；（2）肉眼脓尿或血尿；（3）尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性；（4）不明原因的发热，无其他局部症状；（5）留置导尿管的患者出现发热；（6）膀胱排空功能受损；（7）泌尿系统疾病手术前。

三、采集方法

标本采集应力争在未使用抗生素之前或停用抗菌药5d后留取尿液，尿液在膀胱内应停留4h以上，使细菌有足够的时间繁殖。常用的采集方法包括清洁中段尿法、耻骨上膀胱穿刺法、直接导尿法及留置导尿管收集尿液。

留置导尿管收集尿液：物品准备：一次性专用无菌塑料杯（未留标本之前不要打开杯盖）、棉签、碘伏、注射器、手套。

操作流程：先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用穿刺导尿管吸取5-10ml尿液，置于无菌试管中送检。

标本运送：标本采集后应立即送检，如不能立即送检，室温保存时间不得超过2小时，4°C保存不得超过24小时。

四、操作注意事项

操作时应防止混入消毒剂。不能在尿液收集袋中采集尿液，导尿管末端的尿液也不能用于培养。