面试题(微生物部分)

面试题（微生物检验部分）

一、简述聚合酶链式反应简称PCR的工作原理？

答：PCR是一种体外DNA 扩增技术，是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下，依赖于DNA聚合酶的酶促合反应，将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物延伸”三步反应的多次循环，使DNA片段在数量上呈指数增加，从而在短时间内获得我们所需的大量的特定基因片段。

1、PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成

2、PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

二、简述革兰氏染色法的原理及其操作步骤？

答：革兰氏染色法的原理

G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性屏障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔隙缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。

G-菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红染液复染后呈红色。

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染四个步骤，具体操作方法是：（1）载玻片固定。在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。

（2）草酸铵结晶紫染1分钟。

（3）自来水冲洗，去掉浮色。

（4) 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。

（5）用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色30秒，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。酒精脱色为整个流程

最关键的一步。

（6）用蕃红染液或者沙黄复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。

三、食物中毒按病因分类分为哪几种？

答：食物中毒常见的有以下几种：

（1）细菌性食物中毒：沙门菌属食物中毒、变形杆菌食物中毒、腊样芽胞杆菌食物中毒、致病性大脸杆菌食物中毒、肉毒棱菌食物中毒、葡萄

球菌肠毒素食物中毒。

（2）化学性食物中毒：误食有毒物质或食入被其污染的食物引起的食物中毒，如某些金属、类金属化合物，亚硝酸盐和农药。

（3）有毒动物食物中毒：食入某些有毒动物或动物有毒脏器而引起的食物中毒。如河豚鱼、有毒鱼、贝类。

（4）有毒植物中毒：误食有毒植物或食入因加工不当而未除去有毒成分的某些植物而引起的食物中毒，如毒蕈、木薯、友芽巧铃薯、四季豆、

苦杏仁等中毒。

（5）真菌毒素和霉变食品中毒：如黄曲霉毒素、霉变甘蔗中毒。