植物多酚提取方法

植物多酚提取方法
植物多酚提取方法

植物多酚提取方法

1.1溶剂萃取法

原理:溶剂萃取是根据被提取成分在不同溶剂中的溶解性差异,选用适当的溶剂将有效成分从提取原料中分离出来的过程。

注意:除溶剂极性大小外,溶剂萃取法还易受到溶剂pH值、提取温度、提取次数、溶剂体积和样品颗粒大小等多种因素的影响。

1.2超声辅助提取

原理:利用超声波的机械破碎和空化作用,物料周围空穴形成、增大和闭合回产生极大的冲击波和剪切力,使细胞破碎,增加有效成分的溶出速度和数量,加速多酚等浸提物从原料向溶剂的扩散速度,从而提高了有效成分的浸提率,缩短浸提时问,浸提液采用与传统工艺相同处理精制过程取得产品。

优势:浸提所需的时间短,因此避免了长时间处于高温下茶多酚的氧化,收率和产品质量都较传统方法高。

1.3微波辅助提取

原理:利用在微波场中分子发生高频的运动,扩散速率增大,因此多酚等浸提物在微波的辐射作用下可快速浸取出来。

优点:大大的减少了多酚长时间在高温下的氧化,提高品质与收率。微波技术应用于多酚的提取具有短时、高效、节能等优点,微波结合水浴提取,不仅茶多酚浸出率高,优于乙醇、水提取,而且降低了成本和减少了污染。

1.4超临界流体萃取

原理:在超临界状态下,流体对被萃取物的萃取能力和选择性较之常温常压条件下大大的提高。一般情况下,超临界流体萃取技术采用CO为超临界流体溶剂。然而单一组分的超临界溶剂存在一定的局限性,因此可加入一定量的夹带剂来提高萃取效果。常用的夹带剂有水、丙酮、乙醇、甲醇等。

优点:超临界流体萃取低黏度、高扩散性,具有更高的传质效率;可以实现定量萃取和完全萃取;可以通过调节压力与温度实现对流体溶解能力大小的调控;超临界流体萃取在接近室温下操作,特别适合热敏性天然产物的提取分离甚至于发现新物质。

1.5离子沉淀提取

原理:利用茶多酚能与某些金属离子络合成结晶性沉淀物的特点,使其从浸提液中分离出来,实现分离。目前,已有 Ca2+、Mg2+、Ba2+、Fe2+、Zn2+、Al3+等多种离子用于沉淀提取茶多酚的工艺报道。

优点:原料经热水浸提后,加入沉淀剂即得多酚与金属离子的结晶性沉淀物,不必浓缩浸提液,同时由于这些沉淀的选择性较高,得到茶多酚的纯度相对较好。缺点:在其后的稀酸转溶过程中茶多酚损失较大且沉淀剂有的是有一定毒性的金属离子,有的偏碱性易造成多酚的氧化,因此在产品的纯度、收率、成本及安全性上仍不是完全令人满意。

1.3吸附分离提取

原理:将原料加热水浸提后合并提取液。提取液通过高分子吸附剂进行吸附,然后用95%乙醇洗脱,使吸附剂上吸附的GTP脱附于乙醇中,经减压蒸馏,浓缩液经真空干燥或喷雾干燥得到多酚。

特点:工艺技术简单、能耗低,但需要对GTP选择性强的高吸附量的吸附剂。

植物多酚分离方法

1.1制备HPLC

原理:一是将儿茶素粗品用亲脂性凝胶或吸附树脂多次层析纯化;另一种是制得粗品后直接用制备HPLC法分离纯化(用丙酮和水洗脱)。

特点:方法一操作过程复杂,周期长,条件不易控制;方法二难以得到大量的多种高纯儿茶素,而H柱子总负载量巨大,制备效果不高,色谱柱容易污染,寿命短。把两种方法结合起来,将粗提是先经柱层析分离,再用制备HPLC纯化精制,

使分离效应和产品纯度提高,分离周期短,所用的溶剂价格低廉,毒性小,易回收,精确度高。

1.2吸附树脂

原理:吸附树脂法是使用硅胶、氧化铝、活性炭、聚酰胺或大孔树脂等固态物质作吸附剂,用适当溶剂洗脱分离混合物。

特点:此工艺简单、操作方便、能耗较低、操作条件温和,避免了有效成分失恬,产品收率和纯度高,无毒、安全,而且可持续性生产,有利于大规模工业化生产。

1.3凝胶柱层析技术

原理:该技术分离机理类似于分子筛,样品中大分子化台物不能进入凝胶颗粒内部,只能在颗粒问移动,阻力小,移动快,小分子化合物能自由扩散到凝胶内部,透过层析柱时阻力大,由此经过一段时间洗脱,混合物组分按大小而分离。

特点:纯度高,总得率高,总回收率也高。

1.4膜技术

原理:膜技术足以选择性透过膜为分离介质,当膜两侧组分存在推动力时,原料侧组分选择性地透过膜,从而达到分离的目的。应用于儿荣索分离的现处于初步阶段,主要是利用UF及NF对儿荼素的选择分离,主要利用超滤、微滤对蛋白质、可溶性多糖、胶质等大分子物质进行截取以及用反渗透,纳滤进行浓缩。

特点:低档茶叶为原料,采用超滤膜一离子沉淀法成功地进行了高纯茶多酣的提取,纯度高。

最有效的多糖多酚植物RNA提取方法

华越洋多糖多酚植物RNA提取试剂盒 (Quick RNA isolation Kit) 由于一些植物组织中富含多糖、多酚类物质,细胞破碎后多酚类物质极易被氧化成红褐色物质,然后和核酸不可逆地结合;多糖与RNA共沉淀,对RNA提取造成很大的干扰。另外,RNA 极不稳定,易降解,因此,从富含多糖、多酚植物组织中获得高质量的RNA比较困难。针对多糖、多酚植物组织RNA的提取,华越洋自主研发生产,博取众家之长,根据多年来市场反馈不断进行技术升级和改良得来。具有操作步骤少,实验快捷,RNA产量纯度高,充分满足后续实验要求的需要,适用提取样品广泛等特点。 产量:每100mg样品提取的RNA平均值在20-50ug不等。 纯度:OD值一般在1.9以上。得到的RNA无DNA污染,可直接用于反转录,实时荧光定量PCR(尤其对RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后续实验。 1、快速:本试剂盒提取RNA的整个实验操作步骤简化快捷从时间因素考量上最大限度的防止RNA在提取中的降解(一般样品十多分钟就能完一个样RNA的提取,大大缩短了一般试剂盒提取所需要的半小时甚至更长的时间,)。 2、高产量:试剂盒拥有超强细胞裂解液,保证后续RNA提取的得率。(能完全通过化学方法彻底裂解细胞让RNA释放完整,并且有效成分能抑制内源RNA酶的降解作用)。 3、高纯度:进口吸附柱具有的专一吸附特性和强吸附力。三管齐下保证所提取RNA的产量和纯度,前期得到的高质量RNA才能保证后续实验成功,尤其是对荧光定量PCR实验等。

4、无DNA污染可直接用于荧光定量PCR:目前市面上的试剂盒大多提出的RNA会出现DNA污染其结果严重影响后续实验,特别是非常灵敏的荧光定量PCR的实验。一些市面上单独卖的去DNA污染的试剂,效果不稳定,去除DNA污染不彻底。本产品操作简单,去除DNA 彻底,得到的RNA样品可直接用于荧光定量PCR,反转录等各种后续实验。 5、产品整合了在提取过程中去除干扰物的技术,有去除多糖多酚类的植物RNA提取试剂盒,已成功用于葡萄,中草药等多糖含量高的样品,成功用于棉花等多酚含量高的样品。华越洋还开发了有强力去腐殖酸型的土壤DNA,RNA提取试剂盒,技术国内领先。另外华越洋还开发了糖类清除剂,腐植酸去除剂,核酸提取优化剂,样品核酸稳定剂,组织核酸保存液等核酸提取辅助产品。 6、适用材料广泛:本产品尤其适合植物组织,全血和病毒等样品的RNA提取,另有专门针对难提材料的RNA升级版试剂盒(已成功用于棉花、葡萄、番茄等多糖多酚类植物,小麦,水稻,玉米等农作物,果实、干枯树皮、病毒、全血、微量细胞、水溶液、土壤、粪便、岩石样本等),动物组织,微量细胞等45种复杂样品的核酸提取。 另有microRNA.SiRNA提取试剂盒。 姊妹产品推荐:Trizol 用法和质量与进口同类产品一致,华越洋常年特价销售。 反转录试剂盒(RT):用于第一连CDNA合成,低拷贝基因的检测。本试剂盒所含的反转录酶与市面上的常用的反转录酶相比有更高的效率和延伸能力和稳定性。合成CDNA长度最高可达15KB。 普通PCR扩增用MIX:本混合液优化了体系中Taq酶,DNTP,Mg离子浓度,电泳染料等各种试剂比例,用户不需要摸条件只需要引物和模板就可轻松完成PCR的扩增。 荧光定量PCR试剂(一般实验室常用版本):属于经典的SybrGreen荧光染料的高效高活性荧光定量检测试剂。用于绝大多数的CDNA模板和不同长度的CDNA片段高质量扩增。

植物蛋白质提取方法总汇

植物蛋白质提取方法总汇 一、植物组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。 2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。 3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃ 4、提取上清液,样品制备完成。蛋白质提取液:300ml 1、1Mtris-HCl(PH8) 45ml 2、甘油(Glycerol)75ml 3、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpolypyrrordone)6g这种方法针对SDS-PAGE,垂直板电泳! 二、植物组织蛋白质提取方法 氯醋酸—丙酮沉淀法 1、在液氮中研磨叶片 2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜,然后离心(4℃8000rpm以上1小时)弃上清。 3、加入等体积的冰浴丙酮(含0.07%的β-巯基乙醇),摇匀后离心(4℃8000rpm以上1小时),然后真空干燥沉淀,备用。 4、上样前加入裂解液,室温放置30分钟,使蛋白充分溶于裂解液中,然后离心(15℃8000rpm 以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准),可临时保存在4℃待用。 5、用Brandford法定量蛋白,然后可分装放入-80℃备用。 药品:提取液:含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮。裂解液:2.7g尿素0.2gCHAPS 溶于3ml灭菌的去离子水中(终体积为5ml),使用前再加入1M的DTT65ul/ml。 这种方法针对双向电泳,杂质少,离子浓度小的特点!当然单向电泳也同样适用,只是电泳的条带会减少! 三、组织:肠黏膜 目的:WESTERN BLOT检测凋亡相关蛋白的表达 应用TRIPURE提取蛋白质步骤: 含蛋白质上清液中加入异丙醇:(1.5ml每1mlTRIPURE用量) 倒转混匀,置室温10min

植物芳香油的提取_教案

课题1 植物芳香油的提取 ★课题目标 (一)知识与技能 1、设计简易的实验装置来提取植物芳香油 2、了解提取植物芳香油的基本原理 (二)过程与方法 初步学会用水蒸汽蒸馏法和压榨法提取植物芳香油 (三)情感、态度与价值观 形成严谨、科学、求实的态度和精神 ★课题重难点 植物芳香油的提取技术;针对原料的不同特点,采取不同的提取方法 ★教学方法 启发式教学 ★教学工具 多媒体课件 ★教学过程 (一)引入新课 在生物组织中,不但含有蛋白质和DNA ,而且含有很多人们需要的有效成分,如食用油、芳香油、植物色素、药物成分等。从这节课开始,我们学习植物有效成分的提取。 (二)进行新课 1.基础知识 1.1 1.2芳香油的性质:挥发性强(物理性质),以萜类化合物及其衍生物为主(化学本质)。 1.3芳香油的提取方法:蒸馏、压榨、萃取等。 (1)水蒸气蒸馏法 原理:水蒸汽可将挥发性较强的芳香油携带出来形成油水混合物,冷却后水油分层。 适用范围:易挥发、不溶于水、化学性质稳定的植物成分,如:玫瑰油、薄荷油等。 方法:水中蒸馏:原料放在沸水中加热蒸馏。 水上蒸馏:原料隔放在沸水上加热蒸馏。 水汽蒸馏:利用外来高温水蒸气加热蒸馏。 优点:简单易行,便于分离 不足:有些原料不适宜于水蒸气蒸馏,如柑橘、柠檬等易焦糊,有效成分容易水解。 (2)压榨法 原理:通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油。 适用范围:适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取。 优点:生产成本低,以保持原料原来的结构和功能。 不足:分离较为困难,出油率相对较低。 (3)萃取法 原理:芳香油易溶于有机溶剂,溶剂蒸发后得到芳香油。 适用范围:挥发性强、易溶于有机溶剂的植物芳香油提取,要求原料尽可能细小,能充分浸泡在有机溶剂中。 优点:易分离,出油率高。 不足:有机溶剂中的杂质影响芳香油的品质。 2.实验设计 2.1玫瑰精油的提取 (1)玫瑰精油性质:浅黄色至黄色,化学性质稳定,难溶于水,易溶于有机溶剂,能随水蒸气一同蒸馏 (2)实验流程: 鲜玫瑰花+清水→水蒸气蒸馏→油水混合物NaCl ????→加入分离油层24Na SO ??????→加入无水除水??? →过滤玫瑰油 ①采集玫瑰花:采集盛花期(5月中上旬)的玫瑰花,清水清洗沥干。 ②装入蒸馏原料:称取50g 玫瑰花放入蒸馏瓶,添加200mL 蒸馏水。

植物总多酚常用的含量测定方法有Folin

植物总多酚常用的含量测定方法有Folin- Ciocalteu 法, 酒石酸亚铁法, 普鲁士蓝法和高锰酸钾法等。 1.福林试液的配制: 取钨酸钠10g与钼酸钠2.5g,加水70ml、85%磷酸5ml与盐酸10ml,置200ml 烧瓶中,缓缓加热回流10小时,放冷,再加硫酸锂15g、水5ml与溴滴定液1滴煮沸约15分钟,至溴除尽,放冷至室温,加水使成100ml。滤过,滤液作为贮备液。置棕色瓶中,于冰箱中保存。临用前,取贮备液 2.5ml,加水稀释至10ml,摇匀,即得。 用10mL乙醇溶液溶解0.5000g没食子酸,定容至100mL,分别移取3.0mL 到100mL容量瓶中,用蒸馏水定容。加入福林-薛卡多(Folin-Ciocalteu)试剂显色,在765nm波长下测定吸光度。每个浓度做三个平行试验,取平均值,根据标准曲线。 取样品溶液1mL,按照上述的制作方法,测定其吸光度,每个样品做三个平行试验,取平均值,计算样品中的多酚含量。 反应原理为酚类化合物在碱性条件下可以将钨钼酸还原,生成蓝色的化合物,颜色的深浅与酚类化合物含量呈正相关,在波长760 nm左右有最大吸收。 2. 酒石酸亚铁比色法。 其测定原理是茶多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。用分光光度法测定其含量。 茶多酚标准溶液的配制称取提取纯品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混匀,即为每毫升含1mg提取纯品的标准溶液(mg/mL) 。 茶多酚的含量。茶多酚标准曲线的绘制。分别吸取茶多酚标准溶液1. 0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL 于4 个50mL 容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亚铁溶液10mL,加入pH为7. 5的磷酸缓冲液至刻度,混匀后用1㎝比色皿,以空白试剂作参比,于波长540nm处测定吸光度(A) ,绘制出标准曲线。

天然植物提取浓缩步骤分享

天然植物提取浓缩步骤分享

天然植物提取浓缩步骤如何?天然植物提取浓缩具体的步骤可以参考以下内容: 1、第一提取阶段:将原料投入第一搅拌提取罐中,得到的物料通过第一浓浆泵打入第一卧式螺旋离心机中进行固液分离,得到的固体进入第二搅拌提取罐,得到的物料通过第二浓浆泵打入第二卧式螺旋离心机中固液分离。得到的液体进入第二提取液暂存罐中,加入下一批物料到第一搅拌提取罐中。 2、第二提取阶段:第二提取液暂存罐中的液体进入第一搅拌提取罐中作为溶剂,重复步骤1)过程。可进行第N次提取。 3、浓缩阶段:将第一提取液暂存罐中的液体转入浓缩罐同时回收出溶剂到第二接收罐中,用于下次提取再利用。 4、尾气吸收阶段:降膜吸收塔中装入水,进行循环,吸收第一冷凝器、第二冷凝器、第一提取液暂存罐、第二提取液暂存罐的甲醇尾气,蒸馏出甲醇用于下次提取再利用。 5、废渣处理阶段:将步骤1中得到的固体运输进耙式真空干燥机中对固体进行加热真空干燥,同时回收溶剂到第一接收罐中,用于提取阶段再利用。 所述步骤1中原料进入第一搅拌提取罐中,以原料量量计,加入2-10倍的甲醇,开启搅拌并加热升温至40-50℃搅拌并提取3h。步骤

3中液体进入浓缩罐中在60℃以下进行减压浓缩。所述步骤1中固体进入第二搅拌提取罐中,以原料重量计,加2-10倍的甲醇至第二搅拌提取罐中,开启搅拌并加热升温至40-60℃搅拌并提取3h。 所述固体进入耙式真空干燥机,加热温度至50-100℃干燥。所述降膜吸收塔中,按罐的体积计,加入20-60%体积的水,进行循环吸收甲醇尾气。 德兰梅勒利用膜分离技术为生物制药、食品饮料、发酵行业、农产品深加工、植物提取、石油石化、环保水处理、空气除尘、化工等行业提供分离、纯化、浓缩的综合解决方案,满足不同客户的高度差异化需求。帮助客户进行生产工艺的上下游技术整合与创新,帮助企业节省投资、降低运行费用、减少单位消耗、提供产品质量、清洁生产环境,助力企业产业升级。

-植物芳香油的提取

-植物芳香油的提取

植物芳香油的提取 目标导航 1.了解植物芳香油的来源和发展史以及主要化学成分。2.了解提取芳香油的三种基本方法和原理。 一、基础知识 1.植物芳香油的来源 (1)来源:天然香料的主要来源是________和________。可用于提取植物芳香油的植物器官中,营养器官有________、________、________,生殖器官有______、______、________。 (2)植物芳香油的特性:提取的植物芳香油具有很强的______。 (3)植物芳香油的组成成分比较复杂,主要包括__________及其________。 2.基本方法有三种 采用哪种方法是根据________________来决定的。 (1)________________是常用的方法 ①原理:水和芳香油的沸点不同,利用________将挥发性较强的植物芳香油携带出来,形成________________,再冷却分离。

②分类:根据蒸馏过程中原料放置的位置,可以将水蒸气蒸馏法划分为________蒸馏、________蒸馏和________蒸馏。 ③适用范围:适用于具有挥发性的,能随水蒸气蒸馏而不被破坏,与水不发生反应,且难溶或不溶于水的成分的提取。 (2)________(主要为冷压榨) ①原理:含芳香油较多的果皮经冷磨或机械冷榨的方法将芳香油压榨出来,经分离水分后可得到冷压精油。 ②优点:此法生产过程在常温下进行,确保了芳香油中萜烯类化合物不发生化学反应,从而使精油质量提高,香气逼人,如含精油较多的柠檬、鲜橘、佛手柚等果皮均可通过压榨或割伤而得到。 (3)________ 萃取是有机化学实验中用来提纯和纯化化合物的手段之一,通过萃取从固体或液体混合物中提取出所需要的化合物。 ①液—液萃取法的基本原理:利用化合物在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中的溶解度不同,使化合物从一种溶剂内转移到另一种溶剂中。经过反

多酚提取方法

1.1溶剂提取法 多酚就是多羟基化合物,它的结构特点决定多酚易溶或可溶于水、醇类、醚类、酮类、酯类等,所以,溶剂提取法主要有水溶剂提取与有机溶剂提取两种。水溶剂提取植物多酚类物质早90年代就有报道,该法由于工艺简便、成本低、纯度高而被广泛使用,但此法提取率低。有机溶剂提取就是利用多酚在不同溶剂中的溶解度不同进行回流提取,常用的溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等,此法可提高提取率、缩短反应时间。姚永志[2]等人在比较水溶剂及乙醇溶剂提取花生红衣多酚物质的研究中报道,当以水作溶剂提取花生红衣多酚物质时,最佳工艺:水浴温度40℃、液料比75、提取时间lh、提取率为6.41%,而乙醇作溶剂时最佳工艺:乙醇浓度55%、水浴温度60℃、提取时间0.5 h、料液比1:37.5,提取率达到7.858%。但有机溶剂成本高、回收困难,有毒易燃,不利于安全生产。 1.2微波辅助提取 微波辅助提取技术就是利用微波能来提高提取率的一种技术。在微波提取过程中,微波辐射能 够导致植物细胞内的极性物质吸收微波能,产生大量热量,使细胞内温度迅速上升,液态水汽化,从而使产生的压力在细胞膜与细胞壁上形成微小孔洞,使胞外溶剂可以进入细胞内溶解并释放出胞内物质,因此可以有效的提高产率,降低反应时间,减少溶剂的使用量。由于目前微波的设备比较普遍,因此,微波提取植物多酚的方法为更多的人所接受与使用。宋薇薇等[3]人用微波辅助法提取石榴皮多酚类化合物,确定了石榴皮多酚提取的最优工艺条件:40%(体积分数)乙醇作溶剂,料液比(g:m1)l:35,微波功率为242 W,提取时间60 s,提取三次,以该优化条件提取时,多酚粗提物得率26.52%,这个结果较贾冬英[43以20%(体积分数)乙醇作溶剂,料液比(g:mL)1:20,温度50℃,提取时间1 h,以该优化条件提取所得石榴多酚得率22.86%高,与醇提法相比,微波辅助提取能强化浸取过程,体系受热均匀,提取物中多酚含量高,提取时间较短等优点。 1.3超声波辅助提取 超声波辅助提取法就是利用超声波产生的强烈振动、高加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等,可加速有效成分进入溶剂,从而提高提取率,缩短提取时间,并可避免高温对提出成分的影响。超声波提取的操作具有简便快捷、提取温度低、时间短、提取率高、提取物结构不易被破坏的特点.该法的缺点就是获得产品纯度不高。陶令霞c5]等人对苹果渣中多酚的超声辅助提取工艺条件进行了优化研究,确定最佳工艺条件为:70%乙醇,提取时间50 min,提取功率200 W,料液比1:15,提取温度35℃,提取2次,苹果多酚得率为4.29g/kg。同时,超声波辅助提取方法在荷叶多酚大麦多酚、以及诃子多酚中也有相应的报道。 1.4生物酶解提取 生物酶解提取技术就是根据酶反应具有高度专一性的特点,选择相应的酶,水解或降解细胞壁组成成分纤维素、半纤维素与果胶,从而破坏细胞壁结构,使细胞内的成分溶解、混悬或交溶于溶剂中,达到提取目的。酶法提取最大的优势就是反应条件温与。由于酶法提取就是在非有机溶剂下进行,所得产物纯度、稳定性、活性都较高,无污染,解决了有机溶剂提取法有机溶剂回收困难、用量大等缺点。此外,酶法提取在缩短提取时闻、降低能耗、降低提取成本等方面也具有一定优势[6]。刘军海等人[7]以低档绿茶为原料,采用复合酶法在较低温度下提取茶多酚。以单因素试验考察了酶用量、提取温度、提取时间及pH对茶多酚提取率的影响。通过正交试验优化并确定最佳提取工艺条件:酶用量为0.20%、提取温度为60℃、提取时间80 min、pH为4.6,在此工艺下茶多酚提取率为13.6%,其中儿茶素占茶叶干重的含量比沸水提取法高出 2.31%。1.5离子沉淀法离子沉淀法就是利用多酚能与金属离子络合生成沉淀,使其在浸提液中与其它物质分离而出,从而得到纯度较高多酚。目前常用金属离子有A13+、Zn2+、Fe2+、M92+、Ba2+、Ca2+等,其中A13+、Zn2+较为理想。离子沉淀法优点就是不使

植物内生菌DNA提取方法

在提取植物内生菌之前,植物需要表面灭菌,其具体操作为将植物浸泡在添加了0.02%的Tween-20的质量分数为1%的次氯酸钠溶液中1 min,再将植物浸泡在70%酒精中1 min,然后用硫代硫酸盐/Ringer’s(林格氏液)清洗3次,每.次1 min。根和茎(土表面以上1 cm处)都要灭菌处理,将根茎切成片状。为了更好地分析细菌的位置,灭菌后茎表皮撕下,茎内部按照之前的方法灭菌。表皮组织和根最后一次淋洗液中的细胞都用来提取DNA。 植物不同组织的内生菌群落DNA提取通过直接研磨植物组织,步骤为溶解、提取和纯化步骤(方案一),或者在DNA提取前从片状植物组织中淋洗出细胞(方案二)。 东南景天表面灭菌方法:整株植物用自来水冲洗30 min,用蒸馏水洗3次,每次3 min。用吸水纸吸去植物表面水分,用无菌剪刀在根基部将根系剪下,与植物地上部分开。将根系用70 %酒精浸泡2 min,无菌水洗3次,3 % NaClO浸泡2次,每次1 min,然后用无菌水冲洗3次,每次2 min,最后一次清洗液涂LB平板。 1. 将2 g左右消毒后植物组织于无菌研钵中,加5 mL磷酸钠缓冲液(19.9 g Na2HPO4·H2O,1.27 g NaH2PO4·2H2O,H2O 定容到1 L)研磨至匀浆。 2. 将植物匀浆转移至50 mL无菌离心管中,摇床200 rpm振荡1-2 h,使细菌细胞尽可能的从植物组织中释放出来。 3. 取4 mL悬液于新的无菌离心管中,12 000×g离心10 min收集菌体细胞。 4. 弃上清,将收集的菌体细胞重新溶于550μL 1×TE buffer(Tris-EDTA;pH8)中加入10 mg mL-1溶菌酶10μL,37℃水浴1-4h。 5. 加入50μL 20% SDS和8μL 20 mg mL-1蛋白酶K,混匀,65℃水浴3h,期间轻轻上下颠倒混匀数次。 6. 加入200μL 5M NaCl,涡旋振荡15 s,12000×g离心10 min。 7.取上清液,并向上清液中加入等体积的氯仿-异戊醇(24:1),彻底混匀,12000×g离心10 min。 8. 上清液转移至新的无菌离心管中,重复步骤7一次。 9. 上清液转移至新的无菌离心管中,加入0.6倍体积(0.6 vol)的冰冷的异丙醇,4℃放置1 h。 10. 4℃,12000×g离心10 min,弃上清。 11. 沉淀用70%冰乙醇清洗,离心,弃上清。 12. DNA沉淀室温风干后,用无菌超纯水溶解。 13. DNA纯化采用TIANquick Midi Purification Kit。

植物多酚提取方法

植物多酚提取方法 1.1溶剂萃取法 原理:溶剂萃取是根据被提取成分在不同溶剂中的溶解性差异,选用适当的溶剂将有效成分从提取原料中分离出来的过程。 注意:除溶剂极性大小外,溶剂萃取法还易受到溶剂pH值、提取温度、提取次数、溶剂体积和样品颗粒大小等多种因素的影响。 1.2超声辅助提取 原理:利用超声波的机械破碎和空化作用,物料周围空穴形成、增大和闭合回产生极大的冲击波和剪切力,使细胞破碎,增加有效成分的溶出速度和数量,加速多酚等浸提物从原料向溶剂的扩散速度,从而提高了有效成分的浸提率,缩短浸提时问,浸提液采用与传统工艺相同处理精制过程取得产品。 优势:浸提所需的时间短,因此避免了长时间处于高温下茶多酚的氧化,收率和产品质量都较传统方法高。 1.3微波辅助提取 原理:利用在微波场中分子发生高频的运动,扩散速率增大,因此多酚等浸提物在微波的辐射作用下可快速浸取出来。 优点:大大的减少了多酚长时间在高温下的氧化,提高品质与收率。微波技术应用于多酚的提取具有短时、高效、节能等优点,微波结合水浴提取,不仅茶多酚浸出率高,优于乙醇、水提取,而且降低了成本和减少了污染。 1.4超临界流体萃取 原理:在超临界状态下,流体对被萃取物的萃取能力和选择性较之常温常压条件下大大的提高。一般情况下,超临界流体萃取技术采用CO为超临界流体溶剂。然而单一组分的超临界溶剂存在一定的局限性,因此可加入一定量的夹带剂来提高萃取效果。常用的夹带剂有水、丙酮、乙醇、甲醇等。

优点:超临界流体萃取低黏度、高扩散性,具有更高的传质效率;可以实现定量萃取和完全萃取;可以通过调节压力与温度实现对流体溶解能力大小的调控;超临界流体萃取在接近室温下操作,特别适合热敏性天然产物的提取分离甚至于发现新物质。 1.5离子沉淀提取 原理:利用茶多酚能与某些金属离子络合成结晶性沉淀物的特点,使其从浸提液中分离出来,实现分离。目前,已有 Ca2+、Mg2+、Ba2+、Fe2+、Zn2+、Al3+等多种离子用于沉淀提取茶多酚的工艺报道。 优点:原料经热水浸提后,加入沉淀剂即得多酚与金属离子的结晶性沉淀物,不必浓缩浸提液,同时由于这些沉淀的选择性较高,得到茶多酚的纯度相对较好。缺点:在其后的稀酸转溶过程中茶多酚损失较大且沉淀剂有的是有一定毒性的金属离子,有的偏碱性易造成多酚的氧化,因此在产品的纯度、收率、成本及安全性上仍不是完全令人满意。 1.3吸附分离提取 原理:将原料加热水浸提后合并提取液。提取液通过高分子吸附剂进行吸附,然后用95%乙醇洗脱,使吸附剂上吸附的GTP脱附于乙醇中,经减压蒸馏,浓缩液经真空干燥或喷雾干燥得到多酚。 特点:工艺技术简单、能耗低,但需要对GTP选择性强的高吸附量的吸附剂。 植物多酚分离方法 1.1制备HPLC 原理:一是将儿茶素粗品用亲脂性凝胶或吸附树脂多次层析纯化;另一种是制得粗品后直接用制备HPLC法分离纯化(用丙酮和水洗脱)。 特点:方法一操作过程复杂,周期长,条件不易控制;方法二难以得到大量的多种高纯儿茶素,而H柱子总负载量巨大,制备效果不高,色谱柱容易污染,寿命短。把两种方法结合起来,将粗提是先经柱层析分离,再用制备HPLC纯化精制,

(推荐)多酚提取方法

1.1溶剂提取法 多酚是多羟基化合物,它的结构特点决定多酚易溶或可溶于水、醇类、醚类、酮类、酯类等,所以,溶剂提取法主要有水溶剂提取和有机溶剂提取两种。水溶剂提取植物多酚类物质早90年代就有报道,该法由于工艺简便、成本低、纯度高而被广泛使用,但此法提取率低。有机溶剂提取是利用多酚在不同溶剂中的溶解度不同进行回流提取,常用的溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等,此法可提高提取率、缩短反应时间。姚永志[2]等人在比较水溶剂及乙醇溶剂提取花生红衣多酚物质的研究中报道,当以水作溶剂提取花生红衣多酚物质时,最佳工艺:水浴温度40℃、液料比75、提取时间lh、提取率为6.41%,而乙醇作溶剂时最佳工艺:乙醇浓度55%、水浴温度60℃、提取时间0.5 h、料液比1:37.5,提取率达到7.858%。但有机溶剂成本高、回收困难,有毒易燃,不利于安全生产。 1.2微波辅助提取 微波辅助提取技术是利用微波能来提高提取率的一种技术。在微波提取过程中,微波辐射能够导致植物细胞内的极性物质吸收微波能,产生大量热量,使细胞内温度迅速上升,液态水汽化,从而使产生的压力在细胞膜和细胞壁上形成微小孔洞,使胞外溶剂可以进入细胞内溶解并释放出胞内物质,因此可以有效的提高产率,降低反应时间,减少溶剂的使用量。由于目前微波的设备比较普遍,因此,微波提取植物多酚的方法为更多的人所接受和使用。宋薇薇等[3]人用微波辅助法提取石榴皮多酚类化合物,确定了石榴皮多酚提取的最优工艺条件:40%(体积分数)乙醇作溶剂,料液比(g:m1)l:35,微波功率为242 W,提取时间60 s,提取三次,以该优化条件提取时,多酚粗提物得率26.52%,这个结果较贾冬英[43以20%(体积分数)乙醇作溶剂,料液比(g:mL)1:20,温度50℃,提取时间1 h,以该优化条件提取所得石榴多酚得率22.86%高,与醇提法相比,微波辅助提取能强化浸取过程,体系受热均匀,提取物中多酚含量高,提取时间较短等优点。 1.3超声波辅助提取 超声波辅助提取法是利用超声波产生的强烈振动、高加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等,可加速有效成分进入溶剂,从而提高提取率,缩短提取时间,并可避免高温对提出成分的影响。超声波提取的操作具有简便快捷、提取温度低、时间短、提取率高、提取物结构不易被破坏的特点.该法的缺点是获得产品纯度不高。陶令霞c5]等人对苹果渣中多酚的超声辅助提取工艺条件进行了优化研究,确定最佳工艺条件为:70%乙醇,提取时间50 min,提取功率200 W,料液比1:15,提取温度35℃,提取2次,苹果多酚得率为4.29g/kg。同时,超声波辅助提取方法在荷叶多酚大麦多酚、以及诃子多酚中也有相应的报道。 1.4生物酶解提取 生物酶解提取技术是根据酶反应具有高度专一性的特点,选择相应的酶,水解或降解细胞壁组成成分纤维素、半纤维素和果胶,从而破坏细胞壁结构,使细胞内的成分溶解、混悬或交溶于溶剂中,达到提取目的。酶法提取最大的优势是反应条件温和。由于酶法提取是在非有机溶剂下进行,所得产物纯度、稳定性、活性都较高,无污染,解决了有机溶剂提取法有机溶剂回收困难、用量大等缺点。此外,酶法提取在缩短提取时闻、降低能耗、降低提取成本等方面也具有一定优势[6]。刘军海等人[7]以低档绿茶为原料,采用复合酶法在较低温度下提取茶多酚。以单因素试验考察了酶用量、提取温度、提取时间及pH对茶多酚提取率的影响。通过正交试验优化并确定最佳提取工艺条件:酶用量为0.20%、提取温度为60℃、提取时间80 min、pH为4.6,在此工艺下茶多酚提取率为13.6%,其中儿茶素占茶叶干重的含量比沸水提取法高出2.31%。1.5离子沉淀法离子沉淀法是利用多酚能与金属离子络合生成沉淀,使其在浸提液中与其它物质分离而出,从而得到纯度较高多酚。目前常用金属离子有A13+、Zn2+、Fe2+、M92+、Ba2+、Ca2+等,其中A13+、Zn2+较为理想。离子沉淀法优点是不使用大量有机溶剂,工艺较简单,生产安全性好,在一定程度上可降低能耗,部分

植物DNA提取方法

1.2实验方法 1.2.1 茶花基因组DNA的提取 采用CTAB法[8]提取DNA,所有试剂(有机溶剂除外)和器皿都经高压灭菌,主要步骤如下: (1)取两片幼嫩新鲜叶片,置于预冷的研钵中,倒入适量液氮,迅速研磨成粉末状,随后加入3ml预热的2%CTAB抽提缓冲液和50ul抗氧化剂2-巯基乙醇,继续研磨成略有流动性的糊状或粥状,转入1.5ml的离心管中,于65℃水浴锅中保温约60min. (2)待混合物冷却至室温后加入等600ul的CI(氯仿:异戊醇=24:1)溶液混匀,轻轻颠倒离心管几次使管内混合物成乳浊液,常温下10000rpm离心10min,取上清液转入另一干净的离心管中。 (3)重复步骤(2)一次。 (4)取步骤(3)上清液加入2.5倍体积无水乙醇,仔细混匀,-20冰箱30min以上,沉淀DNA 4℃,12000rpm离心10min. (5)弃去上层有机溶剂,加500ul75%乙醇洗涤沉淀,4℃下8000rpm离心5min,弃去上清,洗涤沉淀3次。 (6)倒置或者37度培养箱烘干. (7)加50ulTE缓冲液溶解DNA,于-20℃冷藏备用。 1.2.2 DNA含量和质量的测定 (1)紫外分光光度法:取4ml提取的DNA,将之稀释200倍,测定提取的DNA在260nm 和280nm处的吸光度值,得出OD260/280的值以及DNA和蛋白质浓度。如蛋白质浓度过高,需纯化。 (2)琼脂糖凝胶电泳:配制1.0%琼脂糖凝胶,在0.5×TBE缓冲液中,电压5V/cm电泳约60min,溴化乙锭染色20min,在凝胶成像系统上观察并拍照。 1.2.3 PCR扩增 (1)PCR反应在Biometro PCR仪上进行,反应体系为25ul:ddH2O 14ul,10×Buffer 2.5ul,MgCl(25mM) 2.5ul,dNTPs(2.5mM) 2.0ul,primer(2.0uM) 1.0ul,DNA 2.7ul(约

磁珠法(多糖多酚)植物组织基因组DNA提取试剂盒

磁珠法多糖多酚植物组织基因组DNA提取试剂盒MagBeads Polysaccharide & Polyphenol Plant Genomic DNA Extraction Kit 【目录号】PTDE-6005、PTDE-6030; 【运输条件】2~25℃; 【保存条件】磁珠分散液、β-巯基乙醇2~8℃;蛋白酶K -20℃;其它组分室温保存; 【试剂盒组成】 【注意事项】 1. 使用前请检查裂解液(组分①)和结合液(组分②)是否出现结晶,如有结晶请置于 65℃温浴至重新溶解完全; 2. 初次使用全新试剂盒前,请按照结合液(组分②)标签标注量加入异丙醇,稀释备用; 3. 磁珠悬浮液(组分③)不可反复冻融或离心,使用前需充分摇匀; 4. 蛋白酶K(组分⑤)于-20℃长期保存,避免反复冻融;融化后4℃保存,并尽快使用; 5. 请仔细阅读本说明书,并按照操作指南建议操作。

【产品简介】 本试剂盒采用针对富含多糖多酚植物组织进行杂质去除的特殊磁珠,配合高性能缓冲液体系,可从各种富含多糖多酚植物组织样本中高质量的分离纯化基因组DNA。 特殊技术包埋的磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力,而当条件改变时,磁珠会释放所吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。提取所得的基因组DNA产物片段大、纯度高、质量稳定可靠,尤其适合高通量仪器自动化提取,特别是本公司生产的各类型号自动化核酸提取仪或工作站。使用本试剂盒纯化所得核酸产物可适用于各种常规分子生物学下游实验,如:酶切、PCR、荧光定量PCR、文库构建、Southern杂交、芯片检测和高通量测序等。 【试剂盒说明】 【自备仪器及耗材】 研钵&研磨棒(或者研磨机、匀浆机)、水浴锅、涡旋混合仪、高速离心机、EP管(1.5mL 或2.0mL)、EP管配套用磁力架、核酸提取仪(仪器自动版操作步骤需准备)。 【自备试剂】 液氮、乙醇(80%, v/v)、异丙醇、RNase A溶液(100mg/mL,分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH值8.0)。 【仪器自动法版操作步骤】 该方法配合磁棒法核酸提取仪使用,以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例,可同步完成32份植物样本提取工作。 1. 准备96孔板 注:1)每次吸取磁珠悬浮液前尽量摇晃均匀;2)为提高效率建议使用排枪。 2. 组织样本前处理和裂解 取适量(≤100mg)植物组织样本,液氮研磨至粉末状,尽量完全转移至EP管中。加入400μL 裂解液、0.8μL β-巯基乙醇和20μL蛋白酶K,涡旋振荡1~3min至混合均匀,呈云雾状。65℃温浴15min,每隔5~10min上下颠倒混匀一次。 注:1)若样本量大于100mg,但不超过400mg,需增加裂解液使用量,可按照每增加100mg组织样本增加150μL裂解液使用量,并延长裂解时间,其余试剂用量不变; 2)若样本个数较多,可预先将蛋白酶k、β-巯基乙醇和裂解液提前混合备用;

植物DNA提取经典方法

植物DNA提取经典方法:CTAB法原理 植物DNA提取经典方法:CTAB法原理 植物DNA提取经典方法CTAB法 标题:植物DNA提取经典方法:CTAB法原理 摘要: CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0 7mol L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复…… 关键词:植物DNA提取经典方法CTAB法 最专业的生命科学学术交流论坛 CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸.通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。 注:CTAB溶液在低于15℃时会形成沉淀析出,因此,在将其加入冰冷的植物材料之前必须预热,且离心时温度不要低于15℃。 一、CTAB提取缓冲液的经典配方: Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏; EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性; NaCl 提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中; CTAB溶解细胞膜,并结合核酸,使核酸便于分离;

β-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除。 二、CTAB提取缓冲液的改进配方: (1) PVP(聚乙烯吡咯烷酮)是酚的络合物,能与多酚形成一种不溶的络合物质,有效去除多酚,减少DNA中酚的污染;同时它也能和多糖结合,有效去除多糖; (2) 蛋白质的去除:酚/氯仿抽提使用变性剂变性(SDS、异硫氰酸胍等)高盐洗涤蛋白酶处理核酸分离,纯化; (3)多糖的去除:高盐法:用乙醇沉淀时,在待沉淀溶液中加入1/2体积的5M NaCl,高盐可溶解多糖。用多糖水解酶将多糖降解。在提取缓冲液中加一定量的氯苯(1/2体积),氯苯可以与多糖的羟基作用,从而去除多糖。用PEG8000代替乙醇沉淀DNA:在500 μL DNA液中加入200μl 20% PEG8000 (含1.2 M NaCl),冰浴20min.核酸分离,纯化; (4) 多酚的去除:在抽提液中加入防止酚类氧化的试剂:β-巯基乙醇、抗坏血酸、半胱氨酸、二硫苏糖醇等加入易与酚类结合的试剂:如PVP(聚乙烯吡咯酮),PEG(聚乙二醇),它们与酚类有较强的亲和力,可防止酚类与DNA的结合; (5) 盐离子的去除:70%的乙醇洗涤核酸吸附,沉淀和溶解使用合适的吸附材料吸附核酸,其它的杂质均被洗掉,达到纯化DNA的目的另一种方式加入1/10体积的NaAc(pH5.2,3M),用预冷的乙醇或异丙醇沉淀RNA吸附或沉淀后应用70%的乙醇洗涤,以除去盐离子等若长期储存建议使用TE缓冲液溶解TE中的EDTA能螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNasepH值为8.0,可防止DNA发生酸解。 三、基因组DNA提取常见问题 DNA中含有蛋白、多糖、多酚类杂质。DNA在溶解前,有酒精残留,酒精抑制

植物提取物白芸豆提取物

T 中国医药保健品进出口商会团体标准 T/CCCMHPIE 1.26—2018 ICS 11.120C 25 植物提取物白芸豆提取物 Plant extract ——White Kidney Bean Extract 中国医药保健品进出口商会 发布 2018-07-01发布 2018-07-15实施

前言 本标准按照GB/T1.1—2009和GB/T20004.1—2016给出的规则起草。 本标准由中国医药保健品进出口商会提出。 本标准由中华人民共和国商务部归口。 本标准由中国医药保健品进出口商会国际商务标准化技术委员会负责解释。 本标准负责起草单位:云南天保桦生物资源开发有限公司。 本标准主要起草人:钟毓、薛佳、孙艳、迟永楠、李丽波、何绍凯、张武松、任英。

植物提取物白芸豆提取物 1范围 本标准规定了白芸豆提取物的技术要求、检验方法、检验规则、包装、运输和贮存要求。 本标准适用于白芸豆的种子经粉碎、水提取、分离、干燥等工序得到的提取物。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定 GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验 GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数 GB4789.3食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数 GB4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验 GB4806.1食品安全国家标准食品接触材料及制品通用安全要求 GB5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定 GB5009.4食品安全国家标准食品中灰分的测定 GB5009.5食品安全国家标准食品中蛋白质的测定 GB5009.11食品安全国家标准食品中总砷的测定 GB5009.12食品安全国家标准食品中铅的测定 GB5009.17食品安全国家标准食品中总汞的测定 GB5009.19食品中有机氯农药多组分残留量的测定 GB5749生活饮用水卫生标准 《中华人民共和国药典(2015版)》第四部通则2351黄曲霉毒素测定法 3技术要求 3.1工艺要求 3.1.1植物原料 本品以豆科植物菜豆属多花菜豆种Phaseolus coccineus Linn.白芸豆种子为原料。 3.1.2工艺过程 原料→粉碎→水提取→分离→干燥→产品

常见植物提取方法

常见植物提取方法

植物提取物是指天然植物采用适当的溶剂或方法,从植物(植物全部或者某一部分)为原料提取或加工而成的物质,可用于医药行业、化工行业、食品行业、美容行业以及其它行业等都有一定的功效。那么一些常见植物的提取方法是什么呢?下面就为大家例举集中天然植物的提取方法。 植物提取物的提取方法 目前提取植物提取物常用的方法有溶剂提取法、超声波提取法、微波提取法等,而超临界流体萃取法、微波辅助提取法等则作为新的提取技术被广泛使用。 溶剂提取法 一般指从中草药中提取有效部位的方法,根据中草药中各种成分在溶剂中的溶解性,选用对活性成分溶解度大、对不需要溶出成分溶解度小的溶剂,而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法叫溶剂提取法。当溶剂加到中草药原料中时,溶剂由于扩散。渗透作用通过细胞壁透入细胞内,溶解可溶性物质,而

造成细胞内外的浓度差,细胞内的浓溶液不断向外扩散,溶剂又不断进入药材组织细胞中,多次往返,直到细胞内外溶液浓度达到动态平衡时,将此饱和溶液滤出,再加入新溶剂,可把所需成分大部分溶出。 超声波提取法 超声波提取是利用超声波产生的强烈振动和空化效应加速植物细胞内物质的释放、扩散并溶解进入溶剂中,同时可以保持被提取物质的结构和生物活性不发生变化。超声波提取原理主要为物理过程,是近年来逐渐受到重视的一个较新的提取方法。对多数成分来说,超声波提取方法较常规的溶剂提取能大幅地缩短提取时问,消耗溶剂少,浸出率高,因此具有较高的提取效率。在超声波法提取工艺过程中,溶剂的选择和浓度、料液比、提取温度、提取的时间会直接影响提取率。Ling Zhou等人利用超声波提取法提取五味子,主要研究了超声提取率的影响因素,实验研究得出,提取率随着温度的升高而升高,随着功率的增大而增大。Hong Van Le等利用超声波提取樱桃中的维生素E和酚类化合物,主要比较了超声提取法和酶提取法在提取时间、提取率上的差异,实验结果表明超声波提取法时间上比酶提取缩短了6倍,超声波提取的提取率是酶提取的2~3倍。钟爱国等利用超声波萃取鲜竹叶中叶绿素的方法,用分光光度计来定量测定所萃取的叶绿素的含量。结果表明:与常用的有机溶剂提取法相比,超声波萃取法不仅萃取率高、速度快、效率高,而且是室温提取,无需加热,节约能源。 微波提取法

《植物芳香油的提取》课题分析与导入设计

课题1 植物芳香油的提取 ★学习目标: 1.通过阅读教材,知道提取植物芳香油的基本原理; 2.能参看教材设计简易的试验装置来提取植物芳香油; 3.研究从生物材料中提取特定成分的方法,能针对原料的不同特点,初步学会选择适宜的提取方法。 ★教学重点: 植物芳香油的提取技术;针对原料的不同特点,采用适宜的提取方法。 ★教学难点: 植物芳香油的提取技术;针对原料的不同特点,采用适宜的提取方法。 ★学情分析 通过高一、高二的学习,学生对生物的分子成分有所了解。而且在高中化学中学习了蒸馏、萃取等等提取化学物质的方法。也就是说学生对芳香油的提取,有一定的知识基础。我们通过给学生介绍具体的原理、步骤等方面知识,让学生更系统地了解甚至掌握相关的技术手段。 ★教材分析: 课题背景从古代人类将芳香植物或花卉制成干品,当作药物和香料使用谈起,引入到欧洲中世纪香料贸易的发展,促成了植物芳香油提取技术的诞生,反映了社会生活的需要对科学技术的推动。随着有机化学的发展,人造香料日益普及,但人们对天然植物芳香油仍情有独钟,它一方面说明了科学技术的发展赋予了人类更多的自由,同时也反映了人造物依旧很难取代自然产物的事实。在充分体现了植物芳香油与人类社会生产生活的紧密联系后,教材说明了本课题的目标:了解提取植物芳香油的原理,设计简单的实验装置,从橘皮或玫瑰花中提取芳香油。教师在教学中可充分利用上述素材,对学生进行生动的科学、技术、社会的教育,并激发学生动手实践的兴趣。 ★教学建议: 1.教师在介绍植物芳香油的来源时,宜结合教材提供的旁栏资料进行讲解,让学生对植物芳香油的广泛来源有一个初步的了解。教师还可以采取学生查阅资料和介绍相关的小故事等方式,使学生大致了解植物芳香油的发展历史。 2.教师可以通过列举日常生活中的一些具体事例,帮助学生熟悉提取植物芳

多酚提取步骤和含量计算

多酚类化合物介绍: 多酚类化合物是指同一苯环上有若干个酚性羟基的一类化合物。植物多酚具有抗菌、消炎、抗血栓、抗病毒、抗癌和扩张血管等生理作用。一些多酚类化合物及其衍生物具有较好的清除自由基的作用,因此是一类良好的天然抗氧化剂。自然界植物中发现的具有抗氧化性的酚酸化合物主要有原儿茶酸、沒食子酸(山茱萸)、3-羟基苯乙酸、如绿原酸(金银花)、阿魏酸(当归)、咖啡酸、迷迭香酸(紫苏)、介子酸(蜂胶)等。绿茶中所含多酚类的儿茶酚具有抗氧化作用,其活性优于相同浓度的а-生育酚,是人工合成抗氧化剂BHT(二丁基羟基甲苯)、BHA(丁基羟基茴香醚)的4~6倍,若与维生素C和维生素E配合还具有增效作用。白藜芦醇以及沒食子酸和从葡萄籽及松树皮提取物中发现的原花青素等多酚物质也被证实有很强的抗氧化性,且已被证实强于某些抗氧化维生素。 清热解毒类中草药中总多酚的测定——Folin-Ciocalteu比色法[ 1.1 实验材料 栀子、龙胆草和板蓝根购于贵阳三桥药材批发市场;射干产自贵州施秉牛大场GAP药材基地;黄柏、头花蓼分别产自习水和雷山。 1.2 试剂 亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠,乙醇(均为分析纯) 1.3仪器 101-1A型电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司);A200S型电子天平

(Made in Germany);循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);KDM型控温电热套(山东鄄城华鲁电热仪器有限公司);UV2300分光光度计(上海天美科学仪器有限公司);FZ102型微型植物粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)。 1.4实验原理 Folin-Ciocalteu比色法原理是基于Folin-Ciocalteu试剂中的钨钼酸可以将多酚化合物定量氧化,自身被还原生成蓝色的化合物,颜色的深浅跟多酚的含量呈正相关。 2.分析步骤 ⑴多酚的提取 购买药材,清洗后晾干,将其放入微型植物粉碎机中粉碎,即得到相应的中药材粉末。精密称取粉碎均匀的试样2.5g于250ml圆底烧瓶中,加溶剂(95%乙醇/水)100ml加热回流1小时,抽滤,滤渣再加溶剂(95%乙醇/水)100ml 再回流1小时,抽滤。将两次滤液合并之后定容至250ml即得待测试样。 ⑵供试液的制备 取稀释液0.5mL至25mL棕色容量瓶中,加Folin-Ciocalteu试剂1.0ml;再加5%碳酸钠溶液15.0ml,摇匀,加水稀释至刻度,静置2h,在波长760nm处测定吸光度。 ⑶标准曲线的绘制 配制没食子酸标准品0.05mg/ml,分别准确吸取没食子溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml置于一系列25ml棕色容量瓶中,加Folin-Ciocalteu试剂1.0ml;再加5%碳酸钠溶液15.0ml,摇匀,加水稀释至刻度,静置2h,在波长760nm处测定标准系列及试样的吸光度并绘制标准曲线,试样吸光度与标准曲线比较定量或代

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