实验五、种子活力的快速测定
实验五、种子活力的快速测定
一、实验目的
熟悉种子活力快速测定的方法
?TTC（氯化三苯基四氮唑）法
?BTB（溴麝香草酚蓝）法
?红墨水法
?纸上荧光法
二、实验原理
?TTC（氯化三苯基四氮唑）法
二、实验原理
?红墨水法
?活细胞的原生质膜具有选择透性，死亡的种
胚细胞原生质膜无选择透性；
?红墨水中的染色成分大红G不能通过选择透
性膜，但能通过非选择透性膜。
三、实验材料、器材及试剂
?材料：小麦种子
?仪器及器皿：恒温箱，恒温水浴锅，镊子，刀片，培养皿，小烧杯
?试剂：
?0.5% TTC溶液（随配随用，若已变为红色
则不能继续使用。）
?5%红墨水
四、实验步骤
?1、材料准备：将待测小麦种子用30-35℃温水浸种6~8h。
?2、切种子：随机取种子30粒以上,用刀片沿种子胚中心
线切成两半。
?3、染色处理：取一半的种子放在培养皿中，加入染色溶
液（刚好浸没种子），30-35℃恒温箱中保温0.5-1h。
?4、对照处理：另一半于沸水中煮死，染色同3。
?5、结果观察：倒出染色溶液，TTC处理种子用清水将种
子冲洗1-2次，红墨水处理种子则用水冲洗至冲洗液无色为止。观察种胚着色状况。
?6、结果验证：随机取种子30粒以上，25℃保温保湿培
养，48h检测发芽率。
五、结果与讨论
?1、计算两种测定法得到的种子发芽率。统计分析两种测定方法的结果是否有差异。
?讨论两种方法有什么不同？你认为哪一种方
法测定的结果较好，为什么？
?2、统计分析种子活力快速测定结果与实际种子萌发结果的差异性。
?讨论可能原因。比较分析种子活力快速测定
与种子直接发芽率测定的优缺点。
注意事项
?TTC处理染色结束后要立即进行鉴定。凡种胚全部或大部分被染成红色的即为具有生活力的种子，种胚不被染色的为死种子。如果种胚中非关键性部位（如子叶的一部分）被染色，而胚根或胚芽的尖端不能染色都属于不能正常发芽的种子。
?红墨水处理后要冲洗充分后观察。凡种胚不着色或着色很浅的为活种子，凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。
种子生活力快速测定
种子生活力快速测定 一、实验原理 通过本实验，掌握种子生活力快速测定的原理和方法。 二、实验原理 （1）活细胞染色：脱氢辅酶（NADH或NAFPH)存在于活的细胞内，当TTC渗透进入细胞内作为受体被脱氢辅酶上的氢还原，便由无色的TTC变为红色的三苯基甲（TTE)。当细胞死亡后，NADH会迅速被降解，不会发生相应的颜色反应，故TTC染色法可显示细胞是否存活。 （2）死细胞染色：有生命力的细胞膜是一个半透性膜，因此对内渗透的物质有选择性；而无生命力的细胞，其细胞膜已经消失，因此有的有色物质（如品红）不能进入活的细胞内，但可以进入已经死亡的细胞，从而使细胞内出现该有色成分特有的颜色，故可以据此鉴别细胞是否死亡。 三、实验材料、药品和器具 1、实验材料：花生、黄豆 2、实验药品和器具：品红、TTC、培养皿、吸水纸、镊子、解剖针、刀片等 四、试验方法 1、分别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入TTC培养1h左右，观察胚染色的情况。胚被染色的为有活力种子，未被染色的为无活力的种子。 2、别取10颗红豆和黄豆的种子，沿种子的培从中切成两半，将带胚的部分放入培养皿中，加入品红培养10-20min，倒掉品红溶液，冲洗数次，观察胚染色的情况。胚被染色的为无活力种子，未被染色的为有活力的种子。 五、实验结果 品种测定方法测定种子总数有生活力种子粒数无生活力种子粒数种子生活率花生TTC 30 28 2 93% 品红30 28 2 93% 黄豆TTC 30 30 0 100% 品红30 29 1 97% 实验结果可以得出选用TTC染色和品红染色得出的结果存在差异，用TTC染色得出的结果高于品红染色法。 结果分析：可能的原因是在清洗品红时没有清洗干净，品红粘在胚上，影响实验的观察，导致结果差异。 六、注意事项 1、选取种子的时候，要尽量选取未发芽的种子，避免影响测定。 2、添加染色液时，要是然也尽量没过种胚，使种胚和染液充分接触。 3、染色时间要尽量控制在规定时间内，染色过长过短都会影响结果测定。 4、清洗品红染液时，要冲洗干净，冲洗数次，直至冲洗液无色为止，冲洗不干净直接影响实验结果的测定。
种子生活力的测定红墨水法教学设计
种子生活力的测定红墨 水法教学设计 SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#
《林果生产技术》实验实训2“种子质量的简易测定”之五： 种子生活力的测定（红墨水法）教学设计 课题：种子生活力的测定（红墨水法）课型：专业技能实训课 班级：2014级现代农艺班时间：2015年10月9日 教学目标： 1、应知：种子生活力的概念，红墨水法测定生活力的原理、意义、步骤。 2、应会：掌握用红墨水染色法测定种子生活力的操作技能，熟悉种子质量鉴定技术过程。 3、能力培养：学会自主学习、合作学习、探究学习，培养动手能力、观察能力、合作意识和专业情感。 教学重点： 小麦种子生活力红墨水染色法测定的方法步骤。 教学难点： 1、切分种子。 2、有无生活力的判断。 教学方法：
1、紧抓生本课堂的五大元素“前置学习、合作学习、展示分享、质疑问难、教师点拨”，让学生自主学习，先做后学，先学后教。 2、恰当运用信息化教学手段。 课前任务布置： 提前一天晚自习分发学案和适量材料样品（每小组分发经浸泡后充分吸胀了的小麦种子50粒左右，单面刀片2片，镊子2把，放大镜1个），自学时间2课时。学案附后。 材料器具准备： 经浸种吸胀后的小麦种子（每小组600粒左右）、直尺、烧杯、9cm培养皿（每小组4套）、镊子（每人1把）、单面刀片（每人1片）、瓷盘、洗瓶、滤纸、5%红墨水。 导入： 种子质量的好坏，直接关系到农业的丰歉。种子的纯度、净度、发芽率、生活力、含水量等是种子分级、是否合格的重要指标。今天我们以小麦种子为例，通过实训操作一起来学习种子生活力的测定方法。同学们课前已经做了预习，在操作之前我们先来弄清楚几个问题，分小组回答： 问题一：种子生活力指的是什么（一组回答） 答案：种子生活力是指种子潜在的发芽能力。
种子生活力的测定(红墨水法)教学设计
《林果生产技术》实验实训2“种子质量的简易测定”之五：种子生活力的测定（红墨水法）教学设计 课题：种子生活力的测定（红墨水法）课型：专业技能实 训课 班级：2014级现代农艺班时间：2015年10月9日 教学目标： 1、应知：种子生活力的概念，红墨水法测定生活力的原理、意义、步骤。 2、应会：掌握用红墨水染色法测定种子生活力的操作技能，熟悉种子质量鉴定技术过程。 3、能力培养：学会自主学习、合作学习、探究学习，培养动手能力、观察能力、合作意识和专业情感。 教学重点： 小麦种子生活力红墨水染色法测定的方法步骤。 教学难点： 1、切分种子。 2、有无生活力的判断。 教学方法： 1、紧抓生本课堂的五大元素“前置学习、合作学习、展示分享、质疑问难、教师点拨”，让学生自主学习，先做后学，先学后教。 2、恰当运用信息化教学手段。
课前任务布置： 提前一天晚自习分发学案和适量材料样品（每小组分发经浸泡后充分吸胀了的小麦种子50粒左右，单面刀片2片，镊子2把，放大镜1个），自学时间2课时。学案附后。 材料器具准备： 经浸种吸胀后的小麦种子（每小组600粒左右）、直尺、烧杯、9cm培养皿（每小组4套）、镊子（每人1把）、单面刀片（每人1片）、瓷盘、洗瓶、滤纸、5%红墨水。 导入： 种子质量的好坏，直接关系到农业的丰歉。种子的纯度、净度、发芽率、生活力、含水量等是种子分级、是否合格的重要指标。今天我们以小麦种子为例，通过实训操作一起来学习种子生活力的测定方法。同学们课前已经做了预习，在操作之前我们先来弄清楚几个问题，分小组回答： 问题一：种子生活力指的是什么？（一组回答） 答案：种子生活力是指种子潜在的发芽能力。 问题二：既然种子生活力是指种子潜在的发芽能力，那么我们为什么不直接测定种子的发芽率，而测定种子生活力? （二组回答）答案：用标准发芽试验无法准确测出处于休眠状态的种子的发芽能力；发芽试验测定发芽率，所需时间较长，如小麦需要8天，水稻需要14天，多数林木种子则需要更长的时间，而生活力的测定可
种子活力的测定
肇庆学院 生命科学学院生物科学系植物生理学课实验报告 08 年级生本班 B 组 28 实验日期 10.22 姓名杨丹平老师评定 ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿实验题目实验五种子活力的测定 一、实验目的： 掌握种子活力快速测定的几种方法。 二、实验原理： 1、活种子的胚在呼吸作用过程中能进行氧化还原反应，而死种子则无此反应。当TTC 渗入活种子胚细胞内作为氢受体而被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原时，无色的TTC转变为红色的三苯基甲（TTF）。 2.、活种子进行呼吸作用呼吸空气中的O2，放出CO2。CO2溶于水成为H2CO3，H2CO3 解离为H+和HCO3-，使得种子周围环境的酸度增加。BTB法通过测定酸度的变化来判断种子活性。BTB变色范围为PH6.0—7.6,酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为PH7.1）。色泽差异显著，易于观察。 3红墨水染色法是根据活种子细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的透性，而死种子的胚细胞原生质膜则丧失此性质，于是染料进入死细胞而染色。 三、实验仪器及材料： 1、仪器：电热恒温培养箱、培养皿、烧杯、镊子、单面刀 2、试剂：3%TTC溶液、0.1%BTB溶液、1%BTB琼脂凝胶 3、材料：玉米、绿豆吸胀种子 四、实验步骤： 1．浸种 种子在30—35℃温水中浸种5h 2.0.5%TTC显色实验 将吸胀的玉米种子30粒用单面刀沿种子胚的中心线纵切为两半，其中一半置于培养皿中，加入0.3%TTC，以覆盖种子为宜；将吸胀的绿豆种子去皮，随机选30粒置于培养皿中，加入0.3%TTC，置于30C观察培养箱中培养30min。观察浸种胚是否为红色。另30半粒玉米和已去皮的30粒绿豆置于沸水中2min以杀死胚，同样加入 0.5%TTC置于30C培养箱中染色处理作为对照观察。计算活种子的百分率。 3.1%BTB染色 将吸胀的玉米种子30半粒和去皮的30粒绿豆种子分别整齐地埋于1%BTB琼脂凝胶两个培养皿中，平放，间距约1cm。培养皿置于30C培养箱中培养1h，在光亮处下观察，种子附近呈现深黄色晕圈的是活种子，用沸水中杀死的种子分别进行对照。 4.5%红墨水显色 将吸胀的玉米种子30粒用单面刀沿种子胚的中心线纵切为两半，其中一半置于培养皿中，加入5%红墨水，以覆盖种子为宜；将吸胀的绿豆种子去皮，随机选30粒置于培养皿中，加入5%红墨水，以覆盖种子为宜，置于30C培养箱中培养10min.染色后倒去红墨水并用水冲洗多次至冲洗液无色为止。凡种胚不着色或着色很浅的为活种子，种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。另30半粒玉米和已去皮的30粒绿豆置
三种常用检测种子生活力方法比较
植物生理学小论文 三种常用检测种子生活力方法的比较 班级：09级生物技术2班 学号: 系别: 化学与生命科学系 : 雪婷 日期：2012年5月15日
浅谈三种常用检测种子生活力的方法 雪婷 （师学院化学与生命科学系675000） [摘要] 种子活力是种子最重要的生理及生产指标之一，近年来，无论在育种选种方面还是植物生理实验方面都得到广泛关注。本文基于对种子活力的概念、影响种子活力的因素和种子活力快速测定的最新研究进展为基准, 对TTC法、BTB法及红墨水染色法三种常见种子活力快速检测方法进行了简要综述。结论：四氮唑染色法是蔓荆子种子生活力测定的最佳方法，生活力与发芽率呈显著的正相关。 关键词：种子活力；TTC法；BTB法；红墨水染色法；研究进展 The discussion on three kinds of methods to detect seed vigor SUN-xueting （Chuxiong normal university，chuxiong，yunnan675000，China） Abstracts: The seed vigor is the most important physiological and seed production indexes. In recent years，No matter in selecting seeds breeding or in plant physiology experiments. The seed vigor is widely mentioned This paper based on the concept of the seed vigor influence factors of the seed vigor and the seed vigor rapid determination of the latest research progress Comparition of three kinds of methods to determine seed vigor. Keywords: seed vigor ；Triphenyl Tetrazolium Chloride method；Bromo—thymol blue method; red ink method;research progress 种子生活力是检测种子质量最重要的指标之一，它对于种子的发育，萌发，成熟以及成长为植株的潜在能力具有十分紧密的联系。对于科学选种，快速预测种子的利用价值也具有重要的意义。快速检测种子生活力的方法很多，但生产实验及植物生理实验中常用的主要有氯化三苯基四氮唑(TTC)法、溴麝香草酚蓝(BTB)法和红墨水染色法。这三种方法都能快速测定种子的正常生理代功能是否受到损害，胚是否存活,以了解种子是否还具有发芽的潜力。 种子生活力（seed viability)是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力，通常是指一批种子中具有生命力（即活的）种子数占种子总数的百分率。早在1876年种子学的创始人Nobbe（德国）[1]就指出在同一批种子存在个体间发芽和幼苗生长速度的差异，并且不
实验六 种子生活力的快速测定
实验六 种子生活力的快速测定 一、实验目的 1.加深对种子作用的理解； 2.掌握种子生活力的测定方法。 二、实验原理 在播种、交换和调运种子之前，都要及时了解种子的发芽率，以确定是否作为播种材料或引种种源。因此，快速而又准确地测定种子生活力，对于及时调种和播种后确保全苗、壮苗具有极其重要的意义。种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。 有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产生的氢（H ） 种子生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深； 死亡种子没有呼吸作用，不会将TTC 还原成红色； 种胚生活力衰退或部分丧失生活力，染成较浅或局部被染色； 三、实验材料及用品 材料：绿豆种子 实验器皿：恒温箱、小烧杯、镊子、刀片 实验试剂：0.5%TTC 溶液（避光保存） 四、实验步骤 1. 浸种：将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种，以增强种胚的呼吸作用。 2. 显色 ：a 、种子处理：随即选取吸胀的种子 40 粒，小心剥去种皮，勿伤及种胚。 b 、实验组处理：将处理好的20粒种子置于小烧杯中，加入0.5%TTC 溶液，以 刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保1h 。 c 、对照组处理：另取20粒种子，于沸水浴中煮5min 后，加入0.5%TTC 溶液， 以刚好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保温1h 。 有生活力的种子进行呼吸 作用，呼吸代谢途径催化产 生的氢（H ）
3. 统计：染色结束，马上鉴定；倒出TTC溶液，用清水将种子冲洗1-2次，观察种胚乳染 色情况。有生活力种子：种胚全部或大部分被染成红色；无生活力种子：不被染 色。 生活力的种子数 计算种子生活力的比率= ————————X 100% 实验组测定种子数 五、实验现象与结果 表一种子染色情况记录表 图1 未煮沸的种子染色情况 图2 煮沸的种子染色情况 生活力的种子数 未煮沸的种子生活力的比率= ————————X 100% = 14/20 X 100% = 70% 实验组测定种子数
实验一 种子活力测定
高级植物生理实验报告 种子生理 农学院 农药学 东保柱2013202054 2013年12月27日
种子活力 种子活力即种子的健壮度，是种子发芽和出苗率、幼苗生长的潜势、植株抗逆能力和生产潜力的总和，是种子品质的重要指标。长期以来都用发芽试验检验种子的质量，生产实践表明，实验室的发芽率与田间的出苗率之间往往存在很大差距。由于种子活力是一项综合性指标，因此靠单一活力测定指标判定其总活力水平或健壮度是不科学的。 实验 1 种子活力的测定 种子发芽率、发芽势和发芽指数的测定（垂直板发芽法） 一 原理 种子在适宜的水分、氧气、温度条件下经一段时间可以萌发。在最适宜条件和规定天数内，发芽的种子数与供试的种子的百分比，叫发芽率。为了表示萌发速度与整齐度，反映种子活力程度，规定在短时间内能正常萌发的种子数叫发芽率（测定发芽与发芽天数可参看下述的《种子发芽试验的技术规定》）。发芽数与发芽相应天数之比的和叫发芽指数。 二 材料与设备 1 材料 ：小麦种子。 2 设备：玻璃板 滤纸或湿沙 恒温箱 镊子 3 药品： 1%次氯酸钠（NaClO ） 三 实验步骤 1 选取完整健壮的种子10-15粒，三个重复，用1%次氯酸钠消毒0.5—1min,将种子均匀地排列在有滤纸的培养皿中，种子之间留有一定距离，加入适量蒸馏水，放于所需温度条件下萌发。 2 每天定时记录发芽粒数。根据附表《种子发芽试验的技术规定》计算种子的发芽势、发芽率和发芽指数。 3 计算 正常发芽的种子数 1、发芽率（%）= ×100 供试种子数 2、发芽指数(∑=Dt Gt Gi ) 式中：Gi —发芽指数 Gt ——在时间t 日发芽日数 Dt ——相应的发芽日数 四 注意事项 1 对于1—2天内全部萌发的迅速发芽类型种子，不适用上述公式计算，宜采用简化活力指数（见实验21）。 2 种子发芽试验的技术规定（附表）
实验 34 种子生活力的快速测定 - 食品伙伴网
实验 17 种子生活力的快速测定 种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。测定种子生活力常采用发芽实验，即在适宜条件下，让种子吸水萌发，在规定天数内统计发芽的种子占供试种子的百分数。但是常规方法（直接发芽）测定种子生活力所需时间较长，特别是有时为了应急需要，没有足够的时间来测定发芽率，遇到休眠种子也无法知道。而采用以下的化学方法，则能在较短时间内获得结果。 Ⅰ氯化三苯基四氮唑法（ TTC 法） 一、原理 凡有生命活力的种子胚部，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，在呼吸代谢途径中由脱氢酶催化所脱下来的氢可以将无色的 TTC 还原为红色、不溶性三苯基甲（ TTF ），而且种子的生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深。死亡的种子由于没有呼吸作用，因而不会将 TTC 还原为红色。种胚生活力衰退或部分丧失生活力，则染色较浅或局部被染色。因此，可以根据种胚染色的部位以及染色的深浅程度来判定种子的生活力。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 玉米、小麦等种子。 （二）试剂 0.5% TTC 溶液：称取 0.5 gTTC 放在烧杯中，加入少许 95% 乙醇使其溶解，然后用蒸馏水稀释至 100 mL 。溶液避光保存，若变红色，即不能再用。 （三）仪器设备 恒温箱，培养皿，刀片，烧杯，镊子，天平。 三、实验步骤 1. 浸种将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种（大麦、小麦 6 小时，玉米 5 小时左右），以增强种胚的呼吸作用。 2. 显色取吸胀的种子 200 粒，用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于 2 只培养皿中，每皿 100 个半粒，加入适量的 0.5% TTC 溶液，以覆盖种子为度。然后置于 30 ℃恒温箱中 1 h 。观察结果，凡胚被染为红色的是活种子。 将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚，作同样染色处理，作为对照观察。 3. 计算活种子的百分率，如果可能的话与实际发芽率作一比较看是否相符？ Ⅱ溴麝香草酚蓝法（ BTB 法） 一、原理 凡活细胞必有呼吸作用，吸收空气中的 O 2 放出 CO 2 。 CO 2 溶于水成为 H 2 CO 3 ， H 2 CO 3 解离成 H + 和 HCO 3 ˉ，使得种胚周围环境的酸度增加，可用溴麝香草酚蓝（ BTB ）来测定酸度的改变。 BTB 的变色范围为 pH6.0 ～ 7.6 ，酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经过绿色（变色点为 pH 7.1 ）。色泽差异显著，易于观察。 二、实验材料、试剂与仪器设备
实验四 种子生活力测定
实验四种子生活力测定 一、目的要求 应用化学药剂处理和生物化学法快速测定体眠种子生活力并比较不同方法的效果。 二、材料用具 （一）材料：水稻和玉米种子 （二）药品：2．3—5一氯化三苯基四氮唑和红墨水等。 三、方法步骤 （一）四唑盐类法： 1．在洁净的水稻种子中，随机数取试样2份，各100粒剥去谷壳，浸入30℃的水中6－8小时。 2．用2．3．5－氯化三苯基四氮唑配制成的溶液，装在棕色玻璃瓶里，保存在黑暗中。 3．将已剥去壳的软化的米粒沿种胚纵切，取其一半浸于已配好的药液中，放于暗处（最好用棕色发芽皿盛放），经24小时可观察结果，如果提高温度可以缩短处理时间（40℃1小时）。 4．观察结果：凡种胚的主要构造染成深红色者为有生活力的种子，凡种胚的主要构造染成浅红色或不染色者为无生活力的种子。 5．具体种子具体做法： 取水稻种子样品200粒，去壳，放纸间或水中30℃预湿12h，沿种子侧面胚纵切，放入0.1%四唑溶液35℃染色1-2h，凡是胚的主要构造染成正常鲜红色，或胚根尖端2/3不染色而其他部分正常染色的种子为有生活力种子。 （二）红墨水染色法： 1．从洁净玉米种子随机数取试样二，各100粒，于30℃温水中浸2-3小时。 2．配制红墨水溶液，用红墨水加水配成1：60的溶液。 3．取出软化过的种子，沿胚切成对半，取其半粒种子。 4．浸入红墨水溶液，15分钟后取出，用清水冲洗。 5．观察结果：凡种胚的主要构造不染色或染色浅者为有生活力的种子，凡种胚染色者为无生活力的种子。
四、结果表示与报告 计算各个重复中有生活力的种子数，重复间最大容许差距不得超过附表（生活力测定重复间的最大容许差距）的规定，平均百分率计算到最近似的整数。
实验六 种子生活力的快速测定
实验六种子生活力的快速测定 一、实验目的 1.加深对种子作用的理解； 2.掌握种子生活力的测定方法。 二、实验原理 在播种、交换和调运种子之前，都要及时了解种子的发芽率，以确定是否作为播种材料或引种种源。因此，快速而又准确地测定种子生活力，对于及时调种和播种后确保全苗、壮苗具有极其重要的意义。种子生活力是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。 有生活力的种子进行呼吸作用，呼吸代谢途径催化产生的氢（H） 有生活力的种子进行呼吸 作用，呼吸代谢途径催化产 种子生活力越强，代谢活动越旺盛，被染成红色的程度越深； 死亡种子没有呼吸作用，不会将TTC还原成红色； 种胚生活力衰退或部分丧失生活力，染成较浅或局部被染色； 三、实验材料及用品 材料：绿豆种子 实验器皿：恒温箱、小烧杯、镊子、刀片 实验试剂：0.5%TTC溶液（避光保存） 四、实验步骤 1. 浸种：将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种，以增强种胚的呼吸作用。 2. 显色：a、种子处理：随即选取吸胀的种子 40 粒，小心剥去种皮，勿伤及种胚。 b、实验组处理：将处理好的20粒种子置于小烧杯中，加入0.5%TTC溶液，以刚 好浸没种子为宜，恒温（32℃）中保1h。 c、对照组处理：另取20粒种子，于沸水浴中煮5min后，加入0.5%TTC溶液， 以刚好浸没种子为宜，恒温（
32℃）中保温1h。 3. 统计：染色结束，马上鉴定；倒出TTC溶液，用清水将种子冲洗1-2次，观察种胚乳染 色情况。有生活力种子：种胚全部或大部分被染成红色；无生活力种子：不被染 色。 生活力的种子数 计算种子生活力的比率= ————————X 100% 实验组测定种子数 五、实验现象与结果 保温1h后种子染色情况： 被染色的数目未被染色的数目未煮沸的种子14 6 煮沸的种子 0 20 表一种子染色情况记录表 图1 未煮沸的种子染色情况 图2 煮沸的种子染色情况 生活力的种子数 未煮沸的种子生活力的比率= ————————X 100% = 14/20 X 100% = 70%
种子生活力的测定
种子生活力的测定 一、氯化三苯基四氮唑（TTC）法 【原理】 凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。当TTC溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH或NADPH）还原时，可产生红色的三苯基甲（TTF），胚便染成红色。当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。TTC还原反应如下： TTC（无色）TTF（红色） 【仪器与用具】 培养皿2套；镊子１把；单面刀片１片；垫板（切种子用）１块；烧杯１个；棕色试剂瓶；解剖针１把；搪瓷盘１个；pH试纸。 【试剂】 TTC溶液的配制：取1g TTC溶于１L蒸馏水或冷开水中，配制成0.1％的TTC溶液。药液pＨ应在6.5～7.5，以pH试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。 【方法】 1.将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30℃）浸泡2～6h，使种子充分吸胀。 2.随机取种子2份，每份50粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。 3.把切好的种子分别放在培养皿中，加TTC溶液，以浸没种子为度。 4.放入30～35℃的恒温箱内保温30min.也可在20℃左右的室温下放置40～60min. 5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗2～3次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表32-1内。 表32-1 染色法测定种子生活力记载表 方法种子名称供试粒数有生活力种 子粒数 无生活力 种子粒数 有生活力种子 占供式粒数的% 【注意事项】 1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。 2.染色温度一般以25～35℃为宜。 3.判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。 4.判断无生活力的种子应具备：胚全部或大部分不染色；胚根不染色部分不限于根尖；
实验三 种子活力测定
实验三种子活力测定 一、实验目的 种子活力是指种子在田间快速均匀发芽和出苗的潜在能力。活力是种子质量最本质的反应。测定种子活力的方法很多，本实验的目的是学习几种种子活力测定的方法。 二、实验要求 掌握种子活力的测定原理和方法，以及判断种子活力高低的标准和依据。 三、实验材料和仪器试剂 大麦、豌豆种子样品、天平、发芽纸、灭菌沙、发芽盒、尺子、培养箱、盘子、镊子等。 四、实验方法和步骤 1.幼苗分级评定测定 （1）数取碗豆种子50粒，2次重复。 （2）取长宽高分别约为15cm、20cm、10cm的聚乙烯盒，加入湿润砂 2cm，将种子播入砂中，再盖上湿砂3cm，加盖。 （3）在温度20℃及光照条件下培养。 （4）第5d数初期发芽数,计算发芽势。 （5）7d后取出幼苗洗净，然后进行幼苗评定。 先将种子分成发芽和未发芽两类，再将幼苗分成3级： ①健壮幼苗： 胚芽健壮，深绿色，初生根健壮或初生根少但有大量次生根。 ②细弱幼苗：
胚芽短或细长，初生根少或细弱。 ③不正常幼苗： 根或芽残缺或根芽破裂，苗色褪绿等。 第1级为高活力种子，第2级为低活力但具有发芽力的种子， 1、2级相加即为种子发芽率，活力以健壮幼苗百分率表示，其百分率高，则表明该批种子活力强。 2.发芽速度测定 （1）数取大麦种子100粒，4次重复。 （2）置于纸上发芽床，20℃培养。 （3）第2天起每天记载发芽总数，计算出当天新发芽的种子数，至第7天结束。 同时第7天每盒随机选取10株测量幼苗长度。 （4）分别计算： ①初期发芽率②发芽日数③发芽指数④活力指数。 其中： ①初期发芽率大麦采用4d发芽率，也可采用计算发芽势或初次计算发芽率。 ②发芽日数发芽达90％所需日数或达50％所需日数测定，后者可适用于发芽率较低的种子样品。 ③发芽指数 式中： Gt在不同（7d）的发芽数；
简单测定种子的生活力
8种子生活力测定 Z—1概述 种子生活力（Seed viability）是指种子发芽的潜在能力。种子生活力测定在农业生产上具有重要的意义：①测定休眠种子的生活力。许多植物种子因存在休眠，暂时不能萌发，因此发芽率很低，尤其是新收获的和野生性较强的种子，必须进行生活力测定，才能了解种子的发芽潜力，以便合理利用种子。播种前对发芽率低而生活力高的种子，应进行适当处理。种子检验时，若发芽试验末期有新鲜不发芽种子或硬实种子，也应接着进行生活力测定，以正确评定种子品质。②快速预测种子的发芽力。休眠种子可借助于各种处理措施打破休眠，然后进行发芽试验，但所需时间较长。而种子贸易中，有时因时间紧迫，不可能采用标准发芽试验来测定发芽力，因为发芽试验所需时间更长，如小麦需8d，水稻需14d，某些蔬菜和牧草种子需2～3周，而多数林木种子则需要更长的时间。在这种情况下，可用生物化学速测法测定种子生活力作为参考。 种子生活力测定方法有10多种，根据其测定原理可大致分为4类：①生物化学法，如四唑测定法、溴麝香草酚蓝法、甲烯蓝法、中性红法和二硝基苯法等。②组织化学法，如靛蓝染色法、红墨水染色法和软x射线造影法等。③荧光分析法。④离体胚测定法。本节主要介绍四唑测定法、离体胚测定法、染料染色法和软x射线造影法。 Z—2生活力测定方法 一、测定原理 有生活力的种子，其活细胞原生质膜具有选择透性，当种子浸入染料后，染料大分子不能进入活细胞内，所以胚部等活组织不能被染料染色，而死的种胚细胞因原生质膜丧失选择吸收能力，故可被染料染色。 二、测定方法 （一）染色法 1．靛蓝染色法 此法适用于豆类、谷类、棉花、瓜类和林木等大粒种子的生活力测定。所用试剂为靛蓝（或称靛蓝洋红），分子式为C18H8O2N2（SO5Na）2，系蓝色粉剂，能缓慢溶于水。测定方法如下： (l) 种子预处理：将种子浸人30℃水中，水稻、向日葵、蓖麻、花生和棉籽等种子须先去壳再浸种，浸种时间因种子不同而异，小麦、大麦、大豆、豌豆和向日葵等为3h，燕麦、芝麻等4h，油菜、花生、棉籽等6 h，蓖麻、红麻、大麻等7 h、黍8 h、水稻12 h、玉米20 h将充分吸胀的种子(100粒2次重复），沿胚中线纵切（如禾谷类）或剥去种皮（如双子叶种子），以备染色用。
0.708甜玉米种子活力测定及其田间成苗能力的评估
植物生理学通讯 第41卷 第4期，2005年8月 444甜玉米种子活力测定及其田间成苗能力的评估 赵光武 王建华* 中国农业大学种子科学系，北京100094 提要 室内和田间条件下检测18种基因型甜玉米种子活力状况的结果表明：不同甜玉米种子基因型间的活力差异显著，但均以品种京科甜116较佳。用电导率、糖含量、脱氢酶活性、醛含量、穿纸和老化发芽率均可评估田间出苗率，且前三者还可评估出苗速度，尤以电导率最佳。建立回归方程可对田间成苗能力进行预测。关键词 甜玉米；种子活力；田间成苗能力；评估 Seed Vigor Test of Sweet Corn (Zea mays L. saccharata Sturt) and Evaluation of Its Field Survival Ability ZHAO Guang-Wu, WANG Jian-Hua * Department of Seed Science, China Agricultural University, Beijing 100094, China Abstract In laboratory and field conditions, the results of seed vigor test of sweet corn (Zea mays L. saccharata Sturt) showed that there were significant differences in seed vigor among 18 genotypes while that of the hybrid of “Jingketian11” was higher. Electrical conductivity, soluble sugar content, dehydrogenase activity, volatile aldehyde content, through paper and ageing germination percentage could be all used for evaluation of field emergence percentage. Besides, the former three indexes could be also used for evaluation of field emergence speed and the first was the best. Furthermore, regression equations were built to forecast its field survival ability. Key words sweet corn (Zea mays L. saccharata Sturt); seed vigor; field survival ability; evaluation 常用的测定玉米种子活力的方法有发芽测定、抗冷测定、加速老化试验、电导率测定和酶活性测定等。其中，抗冷测定、电导率测定和加速老化试验等方法也适于甜玉米(Zea mays L.saccharata Sturt)种子的活力测定及其田间成苗能力的评估[1,2]。发芽试验可用于评估种子的播种质量[3]，刘萍等[4]将其用于玉米种子活力测定并预测其田间出苗率。甜玉米种子最突出的特点是糖含量高，但糖含量是否可以作为活力指标还未见报道。此外，种子萌发过程中挥发性醛类生成量的多寡与种子活力呈负相关，因此，有人认为测定挥发性物质是一种具有潜力的活力测定方法[5]。但这些活力指标是否适于甜玉米种子活力测定并用来评估其田间成苗能力，还有待进一步研究。 目前，有关种子活力测定和田间成苗能力评估的研究报道中，大多仅考虑田间出苗率，却忽视了出苗速度。对越来越受消费者青睐的甜玉米来说，其种子活力测定和田间成苗能力的评估研究更是缺乏系统性和完整性，因而建立评估甜玉 米种子活力及其田间成苗能力的有效方法和体系显得尤为重要而迫切。本文通过室内发芽试验、抗逆性试验、生理生化试验和田间试验，对来自中国9个省(市、区)的18种甜玉米种子的活力状况进行了检测，分析了不同基因型甜玉米种子的活力差异，并进一步探讨了室内指标与田间成苗能力(田间出苗率和出苗速度)的相关性。在此基础上，建立回归方程，对其田间成苗能力进行预测，以期能为精量播种和一次播种保全苗提供参考。 材料与方法 2002 年，从北京、河北、陕西、新疆、
实验 植物种子生活力快速测定 (1)
实验十一植物种子生活力快速测定 一、实验目的 掌握植物种子生活力检测的基本原理及快速鉴定植物种子生活力的方法。 二、实验原理 种子活力是决定种子在发芽和出苗期间的活性强度和种子特性的综合表现（指田间条件下的出苗能力及与此有关的其他特征和指标），种子生活力是指种子的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力（通常指一批种子中具有生命力种子数占种子总数的百分率）。种子贮藏过程中必须维持种子是有活力的，因此定期进行生活力和活力的检测是非常重要的。测定种子生活力方法常用发芽率测定法，该法是指在最适宜的条件下，在规定天数内发芽的种子占供试种子的百分数。它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据，与播种时的用种量直接有关。但是常规方法（直接发芽）测定种子发芽率所需的时间较长，对于处于深休眠状态的种子，几乎难于应用。特别是有时为了应急需要，没有足够的时间来测定种子发芽率，所以有必要根据种子的生理特性建立起一套快速测定种子生活力的方法。 红墨水染色法 凡是生活的活细胞的原生质膜都具有选择吸收能力，它对某些染料不让透过，因此用这类染料(如红墨水、酸性靛蓝等)不能使种胚染色。而死种子的胚细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，于是染料进入死细胞，将胚完全染色。因此，可根据种胚或子叶对染料的着色情况判断种子的发芽率。 三、实验材料 小麦种子、大麦种子、籼稻种子、玉米种子、粳稻种子、蚕豆种子、大豆种子。 四、设备与试剂 恒温箱，培养皿，烧杯，镊子，刀片，紫外荧光灯，滤纸（无荧光），琼脂，沸水。 5％红墨水：市售红墨水5 mL加95 mL自来水。 五、实验步骤 1．红墨水染色法 将待测种子在30～35℃温水中浸种（小麦、大麦、籼稻种子6～8h；玉米种子5 h 左右；粳稻种子2 h），以增加种胚的呼吸速率，使显色迅速；取吸胀的种子200 粒，沿种子胚的中心线纵切为二半，将其中的一半置于红墨水培养皿中5～10 min；用红墨水染色后，倒去废液，用水冲洗多次，至冲洗液无色为止，并检查种子死活。凡种胚不着色或着色很浅的为活种子，种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。也可用沸水杀死的种子作为对照观察。
8、种子生活力的快速测定(TTC法)
华南农业大学实验报告 专业班次11农学1班组别201130010110 题目种子生活力的快速测定（TTC法）姓名梁志雄日期2012-11-21 一、实验原理 有活力种胚中的脱氢酶可以将TTC还原成不溶性的红色TTF，如果种胚死亡或种胚生活力衰退，则不能染色或染色较浅，因此，可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生活力 二、实验材料与实验器材 水稻种子、恒温箱、小白瓷碗、镊子、小烧杯 三、实验步骤 1、实验之前将种子放在微波炉里稍微加热，将水稻种子用温水（30~35℃）浸泡2~6h，使 种子充分吸涨 2、随机抽取30粒水稻种子，小心剥去种皮，千万不要伤害种胚，然后把处理好的种子置 于小白瓷碗中，加入0.5%TTC溶液，以刚好浸没种子为度，与恒温箱中（30~35℃）中保温0.5-1h。 3、染色结束后要立即进行鉴定，因放置太久会褪色。倒出TTC溶液，再用清水将种子清 洗1~2次，观察种胚染色的情况。凡种胚全部或大部分被染成红色即为具有生活力的种子，种胚不被染色的为死种子。 四、数据记录记录 本实验测得染色种子25粒，无色种子5粒，其中染色的25粒种子中有19粒种子染色是比较深的，说明其生长活性物质多，生命力强。根据以下公式 种子活力（％）＝有活力的种子数/种子总数×100%
可以知道种子活力=25/30*100%=83.3% 六、实验总结 有生活力的种子能够进行呼吸代谢，在呼吸过程中的代谢物质跟TTC反应生成红色TTF，且代谢物质越多，颜色越深，代谢强度越大。从本实验结果来看，种子生命力总体上时比较强的，且其中的19粒染色较深的那些则更高。另外TTC法还可以运用于花粉活力的测定。
种子活力测定
实验六种子活力测定 一、原理 由于指示活力特性和指标是多种多样，而且因不同作物或种子生理发芽特性不同，幼苗生长表现各异，因此活力测定的方法也是种类很多。大致可将这些方法分为直接法和简接法两大类：所谓直接法，是利用实验室可控制的条件，模拟田间不良的因素，观察种子田间出苗能力或幼苗生长的整齐健壮的程度。如玉米低温试验、棉花低温发芽，及大小麦砖砂试验（低温及机械抑制力）等。间接法是在实验室中测定与田间出苗力相关的种子特性、生理生化特性指标，如酶的活性、呼吸强度、种子浸泡液的电导率等。如何正确选用活力测定方式是很重要的，通常应该考虑以下几点：首先是所采用的方法，其测定结果能否真正反映一批种子的活力水平；其次是所用方法要简单易行，节用费用；第三是测定方法最好能快速及时；最后是测定结果要有重演性，即不同地区、不同实验室所测结果比较一致。 二、目的要求 1、了解种子活力测定原理和生产意义。 2、掌握重要种子活力测定方法和评定标准。 三、材料和器具 1、材料准备不同活力的大麦、小麦、玉米、大豆和豌豆等种子样品。 2、器具培养箱、老化箱、老化盒、电导仪、天平、玻璃培养皿、发芽纸或滤纸、烧杯、镊子、尺子等。 四、方法和步骤 （一）幼苗生长测定 本法适用于具有直立胚芽和胚根的禾谷类和蔬菜类作物种子。 其测定方法是取试样4份，各25粒种子。取发芽纸3张（30cm×45cm），取其中1张画线，先在纸长轴中心画一条横线，距顶端15cm。并在其上、下每隔1cm画平行线。在中心线上平均间隔画25点，在每点上放1粒种子，胚根端朝向纸卷底部，再盖二层湿润发芽纸，纸的基部向上折叠2cm，将纸松卷成4cm直径的筒状，用橡皮筋扎好，将纸卷竖放容器内，上用塑料袋覆盖。置于黑暗恒温箱内培养7d，温度为正常发芽所规定温度，然后统计苗长：计算每对平行线之间的胚芽或胚根尖端的数目，按下列公式求出幼苗平均长度： 式中：L 胚芽平均长度（cm）； n 每对平行线之间的胚芽尖端数； x 中点至中线之间的距离（cm）。 发芽试验中不正常幼苗不统计长度。 直根作物种子可用直立玻板发芽法测定其幼根长度：取滤纸2张，其中1张划1条中线，用水湿润贴在玻板上。将25粒种子等距排列在中心线上，将另1张滤纸湿润后盖上，将玻板以70o角直立置于水盘内，放在25℃黑暗下培养3d后测量根的长度，计算平均值。据报道莴苣种子发芽3d的根长与田间出苗密切相关。 （二）幼苗评定试验 幼苗评定试验适用于大粒豆类种子，这些种子不能用幼苗长度表示活力，因其细弱苗可达相当的长度。此法是采用标准发芽方法，幼苗评定时分成不同等级。豌豆种子试验方法如下：取试样4份，各50粒种子。将1~2mm的粗沙清洗消毒后加水，使保持最大持水力约15％（W/W），放入4个容积为15cm×20cm×10cm的聚乙烯盒中，移于生长箱或培养箱中，于
种子活力测定方法研究
种子活力测定方法研究 摘要本文基于国内外种子生活力和活力测定技术的最新研究进展，介绍了目前常用的种子活力测定方法，并分析提出了种子活力测定技术的未来发展趋势。关键词种子活力；测定方法；研究进展 种子活力是种子生理学的一个新领域，以植物生理学、生物化学和遗传学为基础，与农、林、园艺生产关系十分密切，是检验种子质量高低的一项最可靠的指标。长期以来人们对种子发芽情况的研究主要集中在发芽率上[1]，但随着研究的逐步深入，人们逐渐发现发芽率并不能很好地反映田间实际出苗情况，出现这种情况主要是因为发芽率是在种子最适宜萌发条件下测定的[2]，这与复杂的大田气候条件下的出苗率相差很大。因此，人们试图寻找一种能够代替发芽率并能较好反映种子质量的标准，从而提出了种子活力的概念。 种子活力是种子生命过程中十分重要的特性之一，它与种子发育、成熟、萌发及种子储藏寿命和劣变等生理过程[3]有着紧密的联系。因此，重视种子活力测定方面的研究，充分了解各类种子活力测定方法，在实际操作中合理选用，对提高种子活力测定效率，明确种子种用价值，推进科学选种，实现丰产有着积极的现实意义。本文介绍了国内外对种子活力研究的最新进展以及常用的测定种子活力的方法。 1.种子活力定义及国内外对其研究的最新进展 官方种子分析家协会(AOSA)(北美)于1980年对种子活力采用了较为简单直接的定义(McDonald，1980)：“种子活力是指在广泛的田间条件下，决定种子迅速整齐出苗和长成正常幼苗潜在能力的总称[4]。” 种子活力(Seed vigour)是种子质量的重要指标之一，早已引起世界种子科学家的广泛注意和研究。ISTA和AOSA在2O世纪50年代就成立了活力测定委员会，8O年代，在总结活力测定研究成果的基础上，分别编写了《活力测定方法手册》和AOSA(活力测定手册》，现在已有很多活力测定方法用于实际种子质量检验。