离子对反相高效液相色谱法测定阿仑膦酸钠含量及其有关物质
离子对反相高效液相色谱法测定
阿仑膦酸钠含量及其有关物质
蒋 晔# 谢 赞 张嫡群
（河北医科大学药学院分析化学教研室，石家庄050017）
摘 要 以挥发性的正戊胺作为离子对试剂，
采用离子对反相高效液相色谱法，配以蒸发光散射检测器（ELSD ）检测，建立了用于阿仑膦酸钠含量测定及相关物质检查的分析方法。以Iintersil C 8柱为固定相，流动相为50mmol /L 正戊胺水溶液（用乙酸调节pH 至7.0）-甲醇（98:2），流速为1.0mL /min ，柱温为室温。方法
的线性范围为200～1000mg /L ；回归方程为lg A =2.5884lg C -0.243，r =0.9990；方法的平均回收率为
100.4%；RSD 为0.65%。在该色谱条件下，阿仑膦酸钠与其有关物质（包括残留的合成原料亚磷酸及氧化分
解产物磷酸盐）的分离良好，且样品测定不受辅料干扰。样品测定结果满意。本法不需特殊的样品处理过
程，快速，特异性好，适用于阿仑膦酸钠的常规检测及有关物质检查，为该药的质量控制提供了可靠的分析手段。关键词 阿仑膦酸钠，离子对色谱，蒸发光散射检测器
2005-08-09收稿；2005-11-20接受
本文系河北省自然科学基金资助项目（No.200400562）
1 引 言
阿仑膦酸钠（Alendronate ）为第三代双膦酸类药物，临床上用于治疗骨质疏松、变形性骨炎、恶性肿
瘤所致高钙血症及肿瘤骨转移性骨痛等疾病
［1］。阿仑膦酸钠分子结构中含有两个膦酸基团，极性强，易电离，不能在反相色谱柱上保留；由于其结构中无生色团，因此不能直接用常规的紫外检测器和荧光
检测器测定。目前该药物的分析方法有酸碱电位滴定法［2］、钼黄［3］或钼蓝［4］比色法、离子交换色谱
法［5～7］、毛细管电泳法［8］及柱前［9～11］或柱后［12］衍生的RP-HPLC 法。但这些方法均不能同时检测阿仑膦酸钠合成过程中残余的原料亚磷酸和分解产物磷酸盐等有关物质，这些有关物质的存在影响了临床用药的安全有效性，因此应予以控制，但由于其同样无可检测的生色团且极性较强，它们的保留及检测问题难以解决。目前关于研究阿仑膦酸钠及其有关物质同时分离检测的色谱分析方法未见报道。本实验采用离子对反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法（RPIC-ELSD ）测定了阿仑膦酸钠及其制剂的含量，并对其有关物质进行了研究。该法有效解决了阿仑膦酸酸钠及其有关物质的保留、分离与检测问题，避免了复杂的样品预处理过程。方法简便快速，准确可靠，为阿仑膦酸钠原料药和制剂的常规检查及质量控制提供了较好的分析手段。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
液相色谱仪系统：SP8810高效液相色谱仪（美国光谱物理）、Waters 2420型蒸发光散射检测器（美国Waters 公司）；HW-2000色谱工作站（南京千谱软件有限公司）。阿仑膦酸钠对照品（纯度为99.7%）、阿仑膦酸钠原料药、阿仑膦酸钠片剂均由河北医科大学生物医学工程中心提供；正戊胺（纯度99%）（美国Acros Orgaincs 公司）；亚磷酸、磷酸二氢钾均为分析纯，实验用水为二次重蒸水，甲醇为色谱纯（美国Tedia 公司）。
2.2 色谱条件和ELSD 参数
色谱柱：
InertsilC8高效液相色谱柱（150mm ×4.6mm i.d.；5mm ）（Gc Science Inc ，日本）。流动相：50mmol /L 正戊胺水溶液（用乙酸调节pH 至7.0）-甲醇（98:2）。流速：1.0mL /min 。进样量：20μL 。柱温：室温。
第34卷
2006年6月 分析化学（FENXI HUAXUE ） 研究简报
Chinese Journal of Analytical Chemistry 第6期
835～838
蒸发光散射检测器：漂移管温度100℃；雾化器温度48℃；N 2压力0.174MPa ；增益1。
2.3 溶液配制 精确称取阿仑膦酸钠对照品39mg 置于25mL 量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。分别精确量取不同体积的储备液于10mL 量瓶中，以流动相稀释，得到浓度分别为984.4、787.5、590.6、39
3.8、196.9mg /L 的溶液作为一系列标准溶液。取本品20片，精确称定，研细，精确称取细粉适量（约相当于阿仑膦酸钠10mg ），置10mL 量瓶中，加流动相适量溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液5mL 至10mL 量瓶中，流动相定容，作为供试品溶液。
3 结果与讨论
3.1 检测器与离子对试剂的选择
阿仑膦酸钠及其有关物质分子结构中均无可检测的生色团，都不能采用紫外或荧光检测器直接测定，并且磷酸盐、亚磷酸无可衍生的基团，因此无法经柱前衍生后采用紫外或荧光检测器间接测定。蒸发光散射检测（ELSD ）是通用型质量检测器，其响应不依赖于样品的光学特征，对所有在检测室当中的
非挥发性化合物都有响应，对所有组分响应因子几乎相同，在有关物质研究时无需测定校正因子
［13］，因此对于无生色团的阿仑膦酸钠及磷酸盐、亚磷酸等有关物质可同时直接测定。ELSD 灵敏度较折光检测器高，且仪器设备要求较质谱检测器、电导检测器简单，样品不需预处理，避免了衍生等步骤给分析带来的不便，简化了药品常规分析中的操作。
双膦酸（盐）类药物的离子对反相液相色谱法已有报道［9～11］。采用的离子对为四丁基季铵盐，但由
于流动相不具有挥发性。因此，不能直接应用于ELSD 。虽采用除盐技术可消除流动相中大部分不挥发盐类的干扰，但该方法需在色谱柱出口与检测器入口之间联接一离子抑制柱，由于抑制柱的抑制容量有限、再生程序繁琐且所需仪器设备复杂，因此，该技术也不适用于实验室的常规分析。本研究采用可挥发的正戊胺作为离子对试剂，结合ELSD 检测器，建立了新的离子对反相高效液相色谱法，克服了传统的离子对反相高效液相色谱法流动相与蒸发光散射检测器不相匹配的缺点，使得阿仑膦酸钠及其有关物质（包括无紫外吸收的磷酸和亚磷酸）在反相色谱柱上得到了同时的分离与检测。
3.2 色谱分离条件优化及ELSD 参数优化
考察了离子对试剂浓度、pH 值、有机改性剂比例对阿仑膦酸钠、磷酸盐、亚磷酸色谱行为的影响。三者保留时间随离子对试剂浓度、pH 值的增大而增加，随有机相比例的增加而减小，且流动相的pH 值对色谱峰峰形影响较大。兼顾阿仑膦酸钠及其有关物质的保留时间、分离度和色谱峰峰形，选择了最佳的色谱条件为：50mmol /L 正戊胺水溶液（用乙酸调节pH 至7.0）-甲醇（98:2，V /V ）。
图1 阿仑膦酸钠对照品（A ）、阿仑膦酸钠原料药（B ）、阿仑膦酸钠片剂辅料（C ）、阿仑膦酸钠片剂（D ）及阿仑膦酸钠与其有关物质（E ）的色谱图Fig.1 Chromatography of alendronate reference sub-stance （A ），bulk material （B ），blank excipients of alendronate tablet （C ），alendronate tablet （D ），and mixture of alendronte and its related substances （E ）1.阿仑膦酸钠（alendronate ）；2.磷酸盐（phosphate ）；
3.亚磷酸（phosphite acid ）。ELSD 的参数选择主要有雾化气体压力和漂移管温
度［14］，以信噪比为指标，考察了漂移管温度和雾化气体
压力对阿仑膦酸钠色谱峰的影响。选择漂移管温度为
100℃，N 2压力：
0.174MPa 。3.3 系统适用性实验
在上述色谱条件下，阿仑膦酸钠对照品、原料药、阿
仑膦酸钠片剂辅料、阿仑膦酸钠片剂的色谱图分别见图
1A ～图1D ，阿仑膦酸钠、亚磷酸及磷酸盐混合液的色谱图见图1E 。由图中可以看出，阿仑膦酸钠的片剂辅料及其有关物质（亚磷酸、磷酸盐等）对阿仑膦酸钠的测定
均无干扰。阿仑膦酸钠的保留时间约为8.2min ，色谱
柱的理论塔板数以阿仑膦酸钠峰计约为7000，阿仑膦酸
钠色谱峰与最近杂质色谱峰的分离度大于2.0。
3.4 线性范围、检出限和测量精密度分别精确量取不同浓度的标准溶液20μL 注入液
相色谱仪，平行3次，记录色谱图。以峰面积对数值lg A 对浓度对数值lg C 进行回归计算，得线性方程638 分析化学第34
卷
为：lg A =2.5884lg C -0.243，r =0.9990。阿仑膦酸钠在200～1000mg /L 范围内呈现良好的线性关系。以S /N >3计，阿仑膦酸钠的检出限为98.4mg /L 。
取浓度为590.6mg /L 的阿仑膦酸钠对照品溶液，连续进样分析5次，测定峰面积，计算得峰面积的RSD 为0.53%。
3.5 回收率实验
按阿仑膦酸钠片剂处方，分别精确称取阿仑膦酸钠对照品与片剂辅料适量，精确称定，配成标示量80%、100%和120%3个浓度的溶液，分别称取3份，共9份，每份相当于1片量。按供试品制备项下操作，进样20μL 。测得平均回收率为100.4%，RSD 为0.65%。
3.6 样品测定
分别取浓度为590.6mg /L 和393.8mg /L 的阿仑膦酸钠对照溶液各20μL 注入液相色谱仪，记录峰面积；另取阿仑膦酸钠原料药、阿仑膦酸钠片剂适量，加流动相均制成每1mL 含500μg 的供试品溶液，各精确量取20μL 注入液相色谱仪，依法测定，记录峰面积。按两点法计算样品含量，原料药以干燥品计，阿仑膦酸钠片剂以标示量计。结果见表1。
表1 样品测定结果（n =5）
Table 1 Assay result of samples （n =5）
样品
Sample
批号Lot No.含量Content （%）RSD （%）样品Sample 批号Lot No.含量Content （%）RSD （%）原料药
Bulk drug 04091204091304091498.999.399.50.890.971.0片剂Tablet 04122004122104122299.299.5100.3 1.10.911.3
3.7 阿仑膦酸钠的稳定性和强化分解实验
3.7.1 稳定性实验 取浓度为590.6mg /L 的阿仑膦酸钠对照品溶液，分别于0、1、2、4、6、8h 测定，所 图2 阿仑膦酸钠降解产物的色谱图Fig.2 Chromatogram of the degradation production of alendronate A.原料药（bulk material ）；B.光照32h （under ultraviolet for 32h ）；C.光照56h （under ultraviolet for 56h ）；D.3%H 2O 2氧化（treated under 3%H 2O 2）；E.15%H 2O 2氧化（treated un-der 15%H 2O 2）。1.阿仑膦酸钠（alendronate ）；2.有关物质（related substance ）。
得峰面积的RSD 为0.61%，说明阿仑膦酸钠溶液在
8h 内稳定。
3.7.2 光破坏 精确称取阿仑膦酸钠对照品10mg ，
置于10mL 量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，置紫外
灯下照射，于不同时间取样测定，样品稀释1倍后进
样20μL ，记录色谱图。原料药、光破坏32h 、光破坏
56h 的色谱图分别如图2A 、2B 和图2C 。
3.7.3 氧化破坏 精确称取阿仑膦酸钠对照品
10mg ，分别置于10mL 量瓶中，分别加入不同浓度
的双氧水溶液溶解并稀释至刻度，室温下放置5d ，
样品稀释1倍后进样20μL ，记录色谱图。原料药、
3%H 2O 2氧化、
15%H 2O 2氧化的色谱图分别如图2A 、2D 和图2E 。
实验结果表明，强化分解所产生的杂质峰均不干扰阿仑膦酸钠的测定，方法特异性好，且随着光破坏时间的延长和氧化条件加剧，阿仑膦酸钠降解程度加大，其色谱峰逐渐降低，同时有一杂质峰逐渐增加，该杂质峰的出峰位置与磷酸盐基本一致。因此，阿仑膦酸钠的降解产物可能是磷酸盐。
阿仑膦酸钠的有关物质研究未见报道，关于其降解产物、降解机理及稳定性等目前还不清楚。强化分解实验初步证明了其降解产物可能为磷酸盐，并且由于ELSD 与质谱检测器的色谱要求基本一致［13］。因此，该实验方法及结果可为进一步采用质谱检测器研究该药的降解产物、降解机理、稳定性及有效期提供参考。
738第6期蒋 晔等：离子对反相高效液相色谱法测定阿仑膦酸钠及其有关物质
838分析化学第34卷
References
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Determination of Alendronate and Its Related Substances by Ion-pair Reversed Phase-High Performance Liquid Chromatography
Jiang Ye#，Xie Zan，Zhang Diqun
（Department of Analytical Chemistry，Insititute of Pharmacy，Hebei Medical University，Shijiazhuang050017）
Abstract An isocratic liquid chromatographic method with evaporative light scattering detection（ELSD）was developed for analysis of alendronate and its related substances which are not retained on non-polar column and lack chromophore for detection.Volatile n-amylamine was used as ion-pairing agent.Separations were
column（4.6mm×150mm，5μm）with a mobile phase of50mmol/L amylamine performed on an Inertsil C
8
aqueous solution（adjusted to pH7.0with acetic acid）-methanol（98:2）.The flow rate was1.0mL/min. The linearity range was200-1000mg/L（r=0.9990，n=5）.The average recovery was100.4%with RSD of0.7%.The active ingredient-alendronate was successfully separated from its related substances，including remained phosphoric acid in the synthesis of alendronate and other possible impurities of oxidation and decom-position such as phosphate.The method is rapid，simple，accurate and reproducible and provides a new and reliable means for the quality control of alendronate.
Keywords Alendronate，reversed phase ion chromatography，evaporative light scattering detection
（Received9August2005；accepted20November2005）
(完整)高效液相色谱法
仪器分析练习题（二）——高效液相色谱法部分 一、选择题 1. 分离一组高聚物（分子量>2000）时最宜采用的色谱方法是（D ） A. 气固色谱 B. 反相键合相色谱 C. 离子交换色谱 D. 凝胶色谱 2. Si-O-Si-C型的18烷基固定相可用于（ B ） A. 正相色谱 B. 反相色谱 C．离子交换色谱 D. 空间排阻色谱 3. 反相离子对色谱法分离试样组分时，随着对离子浓度的增大，组分的保留时间（A ）。 A. 增大 B. 减小 C. 不变 D. 不能确定 4. 下列试剂中可作为正相色谱流动相的是（C D ）。 A. 水 B. 甲醇 C．乙腈 D. 正已烷 5. 在惰性担体表面健合上基团－SO3ˉ后的离子交换树脂称为（ B ）。 A．强碱性阳离子交换树脂 B. 强酸性阳离子交换树脂 C．强碱性阴离子交换树脂 D. 强酸性阴离子交换树脂 6. 分离一组高沸点的物质时最宜而是采用的色谱方法是（D ）。 A. 气液色谱 B. 气固色谱 C. 毛细管气相色谱 D. 液相色谱 7. 应用正相色谱法分析一组组分时，组分的出峰顺序为（A ）。 A. 极性小的组分先出峰 B. 极性大的组分先出峰 C. 分子量小的先出峰 D. 分子量大的先出峰 8. 火焰光度检测器是（ C ）检测器。 A. 通用型、质量型 B. 通用型、浓度型 C. 选择型、质量型 D. 选择型、浓度型 9. 梯度洗脱适用于下列哪种色谱分析方法是（ C ）。 A. 气液色谱 B. 液液分配色谱 C. 凝胶色谱 D. 反相键合相色谱 10. 下列试剂中最适宜作为反相色谱流动相的是（ A ）。 A. 甲醇水 B. 环已烷 C．四氯化碳 D. 正已烷 11. 在惰性担体表面健合上基团－NR3＋后的离子交换树脂称为（ C ）。 A．强碱性阳离子交换树脂 B. 强酸性阳离子交换树脂 C．强碱性阴离子交换树脂 D. 强酸性阴离子交换树脂 12. 分离一组难挥性、可离解的物质时最宜而是采用的色谱方法是（ C ）。 A. 气液色谱 B. 正相色谱 C. 离子交换色谱 D. 气固色谱 13. 应用反相键合相色谱分离R-CH3、R-COOH及R-COCH3（R为一长碳链）时出峰顺序为（ A ）。 A. R-COOH、R-COCH3 、R-CH3 B. R-CH3 、R-COCH3 、R-COOH、 C. R-COCH3 、R-COOH、R-CH3 D. R-CH3 、R-COOH、R-COCH3
离子色谱法测定土壤提取液中的无机阴离子
离子色谱法测定土壤提取液中的无机阴离子 谢春生a赵杰b徐新华a郝志伟c a浙江大学环境工程研究所，杭州，310027，xiechsh@https://www.360docs.net/doc/609384050.html, b浙江理工大学生命科学学院，杭州 310018， c瑞士万通中国有限公司，上海，200335，sh.haozw@https://www.360docs.net/doc/609384050.html, 摘要：离子色谱法是利用离子交换的分离原理，进行离子测定的液相色谱法。该方法灵敏度高，准确性高，稳定性好，检测限低，样品预处理简单，操作简单迅速，能多种离子同时测定。本文采用离子色谱法对土壤提取液中的F-，Cl-，NO2-, NO3-, HPO42-和SO42-等无机阴离子进行分析。样品经过IC-RP预处理小柱过滤后，通过万通的A Supp 4型阴离子分离柱进行测试，1.8mM碳酸钠/1.7mM碳酸氢钠淋洗液，流速为1.0ml/min，进样量40μl。实验结果令人满意。 关键词：离子色谱；土壤提取液；无机阴离子 1 前言 土壤农化分析工作在提高农业生产上具有极其重要的作用，它为土壤分类、土地资源开发利用、土壤改良、合理施肥等提供依据。因此，使用先进科学的现代分析仪器，探讨新的测定手段，以加快分析工作速度，提高分析结果的精密度和准确度至关重要。土壤中可溶性无机阴离子以F- , Cl- , NO2-，NO3-, HPO42-和SO42-最为常见，其含量与土壤的性质和外来因素有关，其分析工作在农业生产上具有重要作用，能为土壤分类、土地资源开发利用、土壤污染分析、土壤改良和合理施肥等提供依据．传统的分析方法操作技术水平要求较高，操作步骤繁琐，药品和试剂消耗量大，不利于快速分析。离子色谱法操作简便、快速，可使多种离子同时分离测定，已广泛用于医学研究、常规化学分析检测等方面，但在土壤中无机阴离子的分析方面还较为少见。因此，本文采用离子色谱测试土壤提取液中6种常见阴离子的含量，以探索快速、准确地测定土壤中无机阴离子含量的方法。 2 实验部分 2.1 仪器及试剂 Metrohm-792 Basic 型离子色谱仪（瑞士万通）配有电导检测器、化学抑制器、低脉冲串联式双活塞往复泵、双通道蠕动泵、数据采集/处理软件等。标准样：F-，Cl-，NO2-, NO3-, HPO42-和SO42-均按标准方法配制成1000mg/L储备液备用。所有药剂均为分析纯，溶液均用电阻率大于18M?超纯水配制。 2.2 色谱条件 色谱柱：Metrosep A Supp 4 250 型阴离子分析柱（250×4mm），Metrosep A Supp 4/5 Guard 保护柱（50×4mm）；流动相：1.8mmol/L碳酸钠+1.7mmol/L碳酸氢钠淋洗液，50mM 硫酸抑制器再生液，进样体积：40μL，流速：1.0 mL/min。 2.3 分析步骤 2.3.1 样品制备 称取通过20目筛子的风干土样5.0g（精确到0.001g）于100 mL离心管中，加入50ml 超纯水，塞紧瓶塞，在25℃恒温振荡器上振荡16h。振荡时间到后，在4000rmp下离心15分钟，取上清液。用0.45μm的滤膜过滤上清液，经此处理后的样品再进行下一步的测试。 2.3.2 样品前处理 测试前，须采样IC-RP预处理小柱对制备好的土壤提取液进行预处理。在使用 RP 柱前，需按以下步骤对其进行活化后方可处理样品： （1）用 5 mL 甲醇活化 RP 小柱，推动速度每分钟不超过 3 mL； （2）用 10 mL 去离子水冲洗 RP 小柱，推动速度每分钟不超过 3 mL； （3）将小柱平放 20 分钟； （4）将 5 mL 样品缓慢推入小柱，推动速度每分钟不超过 3 mL，弃去前 3 mL； 收集2 mL经IC-RP预处理后的样品直接进样。
高效液相色谱法简介
高效液相色谱法简介 “色谱”一词是由俄国科学家斯威特提出的。色谱法是基于补充物质在相对运动物的两相之间分布时，物理或物理化学性质的微小的差异而使混合物相互分离的一类分离或分析方法。发展与上世纪初，飞速发展于五十年代，有超过30位科学家家因为它而获得诺贝尔奖，其有自己的理论和研究方法，同时也有众多的应用领域。 色谱法常见的方法有：柱色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。 柱色谱：柱色谱法是最原始的色谱方法，这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中，将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端，以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种，一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱，一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法，一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液，另一种方法是烘干固定相后用机械方法分开各个色带，以合适的溶剂浸泡固定相提取组分分子。柱色谱法被广泛应用于混合物的分离，包括对有机合成产物、天然提取物以及生物大分子的分离。 薄层色谱：薄层色谱法是应用非常广泛的色谱方法，这种色谱方法将固定相图布在金属或玻璃薄板上形成薄层，用毛细管、钢笔或者其他工具将样品点染于薄板一端，之后将点样端浸入流动相中，依靠毛细作用令流动相溶剂沿薄板上行展开样品。薄层色谱法成本低廉操作简单，被用于对样品的粗测、对有机合成反应进程的检测等用途。
气相色谱：GC主要是利用物质的沸点、极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离。待分析样品在汽化室汽化后被惰性气体（即载气，也叫流动相）带入色谱柱，柱内含有液体或固体流动相，由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性能不同，每种组分都倾向于在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于载气是流动的，这种平衡实际上很难建立起来。也正是由于载气的流动，使样品组分在运动中进行反复多次的分配或吸附/解吸附，结果是在载气中浓度大的组分先流出色谱柱，而在固定相中分配浓度大的组分后流出。当组分流出色谱柱后，立即进入检测器。检测器能够将样品组分的与否转变为电信号，而电信号的大小与被测组分的量或浓度成正比。当将这些信号放大并记录下来时，就是气相色谱图了。气相色谱被广泛应用于小分子量复杂组分物质的定量分析。 高效液相色谱：高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9-107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。高效液相色谱（HPLC）是目前应用最多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，为了减低柱压高效
实验四邻菲罗啉分光光度法测定铁的含量(精)
实验四邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁 一、实验目的： 1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法； 2、学会标准曲线的绘制方法及其使用。 二、原理： 亚铁离子（Fe2+）在pH=3~9时与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，应用此反应可用比色法测定铁。橙红色络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-比耳定律。若用还原剂（如盐酸羟胺）把高铁离子还原为亚铁离子，则此法还可测定水中的高价铁和总铁的含量。 三、仪器： 721型分光光度计、1cm比色皿、具赛比色管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。 四、试剂： 1、铁贮备液（100μg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵 [（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的 NH4Fe(SO42·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为 100.0μg/mL。（实验室准备好） 2、铁标准使用液（20μg/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液中Fe2+的质量浓度为20.0μg/mL。（学生配制）
3、0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。（临用时配制） 4、10%盐酸羟胺水溶液： 5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH=4.6）：称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。 五、测定步骤： 1、标准曲线的绘制： （1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7支50ml比色管中，加水至刻度； （2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加入5ml醋酸－醋酸铵缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀，（3）放置15分钟后，在510nm波长处，用1cm比色皿，以空白作为参比，测定各溶液的吸光度。 （4）以吸光度为纵坐标，铁含量（μg，50ml）为横坐标，绘制出标准曲线。 2、试样中铁含量的测定 吸取待测水样溶液10.00ml于50ml比色管中，按绘制标准曲线的操作，测得水样的吸光度Ａ，由标准曲线查得相应的铁含量，计算出试样的铁的质量浓度。做平行样。 实验四邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁原始记录表
离子色谱法测定水中四种阴离子
龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/609384050.html, 离子色谱法测定水中四种阴离子 作者：刘松欢林仰锋 来源：《南北桥》2017年第24期 【摘要】目的通过离子色谱法测定水中四种阴离子。方法 ICS-900型离子色谱仪（美国DIONEX），选用Ionpac AS19分离柱，Ionpac AG22保护柱，流速1.0mL/min，流速等度。结论该方法操作简单，省时省力，分离效果好，重现性好，符合国家标准要求。 【关键词】离子色谱法阴离子 中图分类号：G4 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1672-0407.2017.24.204 前言 近年来饮用水标准不断提高，离子色谱法（Ion Chromatography ）是美国人SMALL1972 年发明的，是高效液相色谱（HPLC）的一种，是主要用来分离极性和部分弱极性化合物的一种分离技术，是色谱技术在离子型物质检测领域的一种突破[1]。本文采用近年来发展起来的广泛应用于分析化学和生物医学领域的高效、快速新型分离技术离子色谱法，来测定GB5749-2006生活饮用水卫生标准中的常规必检项目：氟化物，氯化物，硝酸盐，硫酸根这四种阴离子。 一、原理与材料 1.1 原理 根据分离柱对各种阴离子的亲和力不同，从而使样品中各种待测阴离子随淋洗液进入离子交换系统之后分离开来，已分离的阴离子流经阳离子交换柱或抑制器系统转换成具高电导度的强酸，淋洗液则转变为弱电导度的碳酸。电导检测器测量电导率之后以相对保留时間定性，峰面积定量[2]。 1.2 仪器 ICS-900型离子色谱仪（美国DIONEX）； 淋洗液自动发生器（KOH）； AERS 300 4mm阴离子抑制器； 分离柱：Ionpac Dionex AS19；
2015年版药典高效液相色谱法、质谱法.doc
2015 年版药典高效液相色谱法、质谱法
2015 版药典 --- 高效液相色谱法、质谱法 0512 高效液相色谱法 高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。 注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处 理色谱信号。 1.对仪器的一般要求和色谱条件 高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。色谱柱内径一般为 3.9 ～ 4.6mm，填充剂粒径为 3～lOμm。超高效液相色谱仪是适应小粒径（约 2μm）填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。 （1）色谱柱 反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物 等；常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。 正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰 基键合硅胶等。氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反相色谱。 离子交换色谱柱：用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。 手性分离色谱柱：用手性填充剂填充而成的色谱柱。 色谱柱的内径与长度，填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残 留量，填充的致密与均匀程度等均影响色谱柱的性能，应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。 温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。为改善分离效果可适当 提高色谱柱的温度，但一般不宜超过 60℃。 残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱，流动相 pH 值一般应在 2～8 之间。残余硅羟基已封闭的硅胶、聚合物复合硅胶或聚 合物色谱柱可耐受更广泛 pH值的流动相，适合于 pH 值小于 2 或大于 8 的流动相。 （2）检测器最常用的检测器为紫外 - 可见分光检测器，包括二极管阵列检测器，其他常见的检测器有荧光检测器、 蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器等。 紫外- 可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器为选择性检测器，其响应值不仅与被测物质的量有关，还与 其结构有关；蒸发光散射检测器和示差折光检测器为通用检测器，对所有物质均有响应，结构相似的物质在蒸发光散射 检测器的响应值几乎仅与被测物质的量有关。 紫外 - 可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器和示差折光检测器的响应值与被测物质的量在一定范围内呈 线性关系，但蒸发光散射检测器的响应值与被测物质的量通常呈指数关系，一般需经对数转换。 不同的检测器，对流动相的要求不同。紫外 - 可见分光检测器所用流动相应符合紫外 - 可见分光光度法（通则 0401）项下对溶剂的要求；采用低波长检测时，还应考虑有机溶剂的截止使用波长，并选用色谱级有机溶剂。蒸发光散射检测 器和质谱检测器不得使用含不挥发性盐的流动相。 （3）流动相反相色谱系统的流动相常用甲醇 - 水系统和乙腈 - 水系统，用紫外末端波长检测时，宜选用乙腈 - 水系统。流动相中应尽可能不用缓冲盐，如需用时，应尽可能使用低浓度缓冲盐。用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱时，流动 相中有机溶剂一般不低于 5%，否则易导致柱效下降、色谱系统不稳定。
分光光度法测定水中铁离子含量.
专业项目课程课例 项目十二分光光度法测定水中铁离子含量 一、项目名称：分光光度法测定水中铁离子含量 二、项目背景分析 课程目标：本课程是培养分析化学操作技能和操作方法的一门专业实践课，以定量分析的基本理论为基础，以实验强化理论，以期提高化工工作者的分析操作能力。 功能定位：在定量分析中我们常常用到分光光度分析法，它具有操作简便、快速、准确等优点，在工农业生产和科学研究中具有很大的实用价值。是仪器分析的基础实验，也是一种重要的定量分析方法。分光光度法测定水中铁离子含量的测定项目综合训练了学生分光光度计使用、系列标准溶液配制、标准曲线绘制等多个技能。 学生能力：学生通过相关基础学科的学习已经具备了相应的化学知识和定量分析知识，也具备一定的独立操作和思维能力。 项目实施条件：该项目是仪器分析的基础实验，一般中职学校具备相关的实训实习条件，学生有条件完成相应的实习任务。 三、教学目标 1、了解721可见分光光度计的构造 2、了解分光光度法测定原理 3、掌握721可见分光光度计的操作方法 4、掌握分光光度法测定分析原始记录的设计 5、掌握分光光度法测定分析报告的设计 6、掌握分光光度法测定水中铁离子含量的测定方法 7、掌握分光光度法测定水中铁离子含量的分析原始记录和分析报告的填写 四、工作任务 1
2 五、参考方案 参考方案一 1、邻二氮杂菲-Fe 2+ 吸收曲线的绘制 用吸量管吸取铁标准溶液（20μg/mL ）0.00、2.00、4.00mL ，分别放入三个50mL 容量瓶中，加入1mL 10%盐酸羟胺溶液，2mL 0.1%邻二氮杂菲溶液和5mL HAc-NaAc 缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀。放置10min ，用3cm 比色皿，以试剂空白（即在0.0mL 铁标准溶液中加入相同试剂）为参比溶液，在440～560nm 波长范围内，每隔20～40nm 测一次吸光度，在最大吸收波长附近，每隔5～10nm 测一次吸光度。在坐标纸上，以波长λ为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制A 和λ关系的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定Fe 的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax 。 2、标准曲线的制作 用吸量管分别移取铁标准溶液（20μg/mL ）0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL ，分别放入6个50mL 容量瓶中，分别依次加入1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，稍摇动；加入2.00mL 0.1%邻二氮杂菲溶液及5.00mL HAc-NaAc 缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀。放置10min ，用1cm 比色皿，以试剂空白（即在0.00mL 铁标准溶液中加入相同试剂）为参比溶液，选择λmax 为测定波长，测量各溶液的吸光度。在坐标纸上，以含铁量为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制标准曲线。 3、水样中铁含量的测定 取三个50mL 容量瓶，分别加入5.00mL （或10.00mL 铁含量以在标准曲线范围内为合适）未知试样溶液，按实验步骤2的方法显色后，在λmax 波长处，用1cm 比色皿，以试剂空白为参比溶液，平行
采用配位滴定和氧化还原滴定两种方法分别测定混合溶液中Fe2+,Fe3+的含量(混合铁溶液自配)111(1)(1)
测定混合溶液中Fe2+，Fe3+的含量 黄沁清陆珣 【目前有关该元素常量测定方法的概述】 常量铁分析的主要方法有邻菲啰啉分光光度法、磺基水杨酸分光光度法、硫氰酸钾比色法、铁离子测定仪法、重量法、EDTA络合滴定法、硫酸铈滴定法、硫代硫酸钠滴定法和重铬酸钾滴定法等。其中最经典的方法是重铬酸钾法。本实验采用配位滴定(EDTA络合滴定法)和氧化还原滴 定(重铬酸钾滴定法)两种方法分别测定混合溶液中Fe2+，Fe3+的含量 【实验原理】 配位滴定法 溶液中Fe3+可与EDTA形成稳定的1:1络合物，lgK稳为25.1，其溶液颜色为黄色[1]。 磺基水杨酸为无色结晶，可与溶于水。在pH=1.5~2.5时与Fe3+形成紫红色的络合物FeSSA+，可用作滴定Fe3+的指示剂，终点由红色变为亮黄色。且在此条件下，Fe2+则不显示颜色[1]。 EDTA与Fe3+络合能力强于磺基水杨酸，故滴定终点时，Fe3+会优先于EDTA反应形成亮黄色络合物，使原来的紫红色消失[2]。 溶液中有Fe2+，可先测出Fe3+的含量，再用强氧化剂（NH3）2S2O8将Fe2+氧化为Fe3+，继续用标准EDTA溶液滴定，则可测出Fe2+的含量[2]。 氧化滴定法 SnCl2将Fe3+还原成Fe2+，并过量1~2滴，用甲基橙为指示剂。还原反应为 2FeCl4-+SnCl42-+2Cl--===2FeCl42-+SnCl62- 使用甲基橙指示SnCl2 还原Fe3+ 的原理是：Sn2+ 将Fe3+ 还原完后，过量的Sn2+ 可将甲基橙还原成氢化甲基橙而褪色，不仅指示了还原的终点，Sn2+还能继续使氢化甲基橙还原成N,N-二甲基对苯二胺和对氨基苯磺酸，过量的Sn2+则可以消除。且甲基橙的还原产物不消耗K2Cr2O7。 盐酸溶液浓度应控制在4mol/L，若大于6mol/L，Sn2+ 会先将甲基橙还原为无色，无法指示Fe3+的还原反应。盐酸浓度低于2mol/L，则甲基橙褪色缓慢。 溶液温度用控制在60~90℃，温度低于60℃，SnCl2 先还原甲基橙，终点无法指示，且还原Fe3+ 速度慢，还原不彻底。 滴定反应为： 6Fe2+ +Cr2O72-+14H+===6Fe3++2Cr3++7H2O 滴定突跃范围为0.93~1.34V，使用二苯胺磺酸钠为指示剂时，由于它的条件典韦是0.85V，因而要加入H3PO4 ，使滴定生成[Fe(HPO4)]2- ，降低Fe3+ 浓度，从而降低Fe3+/ Fe2+ 电对的电位，使反应的突跃范围变成0.71~1.34V，指示剂可以在这个范围内变色；同时消除了[FeCl4]-的黄色对终点观察的干扰。Sb(Ⅲ)、Sb(Ⅴ)干扰实验，不应存在。 室温下，Cr2O72- 不氧化Cl- ，所以用H2SO4做酸性介质。 K2Cr2O7 化学性质稳定，组成与化学式一致，相对分子质量较大，易提纯，可直接配制。
离子色谱法测水中阴离子
离子色谱法测水中阴离子 指导老师：郭文英 实验人：王壮 同组实验：余晓波 实验时间：2016.3.21 一． 实验目的 1. 掌握离子色谱法分析的基本原理。 2. 掌握常见阴离子的测定方法。 3. 掌握离子色谱的定性和定量分析方法 二．实验原理 离子色谱法中使用的固定相是离子交换树脂。离子交换树脂上分布有固定的带电荷的基团和能离解的离子。当样品加入离子交换树脂后，用适当的溶液洗脱，样品离子即与树脂上能离解的离子进行交换，并且连续进行可逆交换分配，最后达到 平衡。不同阴离子（32,,,F Cl NO NO ---- 等）与阴离子树脂之间亲和力不同，其在 交换柱上的保留时间不同，从而达到分离的目的。根据离子色谱峰的峰高或峰面积可对样品中的阴离子进行定性和定量分析。离子色谱法应用电导检测器。 三．仪器与试剂 仪器：离子色谱仪；阴离子分析色谱柱；阴离子分析色谱保护柱；超声波发生器；真空过滤装置；注射器 试剂：20ppm 、30ppm 、40ppm 、50ppm Cl -和3NO -标准溶液、未知样。 五．实验内容 1. 打开电脑，打开power ，后打开IC 软件，等power 灯不闪后，就可以使用了。 2. 按下列条件设置仪器参数：淋洗液流量为0.8mL/min ；数据采集时间为10min ，设置完后扫基线。 3. 阴离子的定性分析：分别吸取0.5mL 各浓度的标准溶液，进样，记录保留时间 4. 测定未知水样。取0.5mL 未知样按同样实验进样，记录保留时间。
表1. 不同浓度F-保留时间和出峰面积 表2.不同浓度Cl-保留时间和出峰面积 表3. 不同浓度 NO-保留时间和出峰面积 3 对不同浓度的标准样品所测得的保留时间和出峰面积绘制标准工作曲线：
高效液相色谱法(HPLC)的概述
此帖与GC版的对应，是为了让大家更好的学习和了解LC 主要内容包括： 1.高效液相色谱法（HPLC）的概述 2. 高效液相色谱基础知识介绍（1——13楼） 3. 高压液相色谱HPLC发展概况、特点与分类 4. 液相色谱的适用性 5.应用 高效液相色谱法（HPLC）的概述 以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法（HPLC）。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂泵入装有填充剂的色谱柱，经进样阀注入的样品被流动相带入色谱柱内进行分离后依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色信号或进行数据处理而得到分析结果。 由于高效液相色谱法具有分离效能高、选择性好、灵敏度高、分析速度快、适用范围广（样品不需气化，只需制成溶液即可）、色谱柱可反复使用的特点，在《中国药典》中有5 0种中成药的定量分析采用该法，已成为中药制剂含量测定最常用的分析方法。 高效液相色谱法按固定相不同可分为液-液色谱法和液-固色谱法；按色谱原理不同可分为分配色谱法（液-液色谱）和吸附色谱法（液-固色谱）等。 目前，化学键合相色谱应用最为广泛，它是在液－液色谱法的基础上发展起来的。将固定液的官能团键合在载体上，形成的固定相称为化学键合相，不易流失是其特点，一般认为有分配与吸附两种功能，常以分配作用为主。C18（ODS）为最常使用的化学键合相。 根据固定相与流动相极性的不同，液-液色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法，当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法，主要用于极性物质的分离分析；当流动相
的极性大于固定相的极性时称反相色谱法，主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。 在中药制剂分析中，大多采用反相键合相色谱法。 系统组成： （一）高压输液系统 由贮液罐、脱气装置、高压输液泵、过滤器、梯度洗脱装置等组成。 1.贮液罐 由玻璃、不锈钢或氟塑料等耐腐蚀材料制成。贮液罐的放置位置要高于泵体，以保持输液静压差，使用过程应密闭，以防止因蒸发引起流动相组成改变，还可防止气体进入。2.流动相 流动相常用甲醇-水或乙腈－水为底剂的溶剂系统。 流动相在使用前必须脱气，否则很易在系统的低压部分逸出气泡，气泡的出现不仅影响柱分离效率，还会影响检测器的灵敏度甚至不能正常工作。脱气的方法有加热回流法、抽真空脱气法、超声脱气法和在线真空脱气法等。 3.高压输液泵 是高效液相色谱仪的关键部件之一，用以完成流动相的输送任务。对泵的要求是：耐腐蚀、耐高压、无脉冲、输出流量范围宽、流速恒定，且泵体易于清洗和维修。高压输液泵可分为恒压泵和恒流泵两类，常使用恒流泵（其压力随系统阻力改变而流量不变）。 （二）进样系统 常用六通阀进样器进样，进样量由定量环确定。操作时先将进样器手柄置于采样位置（L OAD），此时进样口只与定量环接通，处于常压状态，用微量注射器（体积应大于定量环体积）注入样品溶液，样品停留在定量环中。然后转动手柄至进样位置（INJECT），使定量环接入输液管路，样品由高压流动相带入色谱柱中。 （三）色谱柱 由柱管和填充剂组成。柱管多用不锈钢制成。柱内填充剂有硅胶和化学键合固定相。在化学键合固定相中有十八烷基硅烷键合硅胶（又称ODS柱或C18柱）、辛烷基硅烷键合硅
铁矿─ 全铁含量的测量 ─ 三氯化钛还原滴定法
铁矿─ 全铁含量的测量─ 三氯化钛还原滴定法 1 范围 本推荐方法用氯化亚锡和三氯化钛还原重铬酸钾滴定法测定铁矿中全铁含量 本方法适用于天然铁矿铁精矿烧结矿及球团矿中质量分数为20% 75 的全铁含量 的测定 2 原理 试样用酸分解熔融残渣或碱熔融分解氯化亚锡将大量铁还原后加三氯化钛还原少 量剩余铁用稀重铬酸钾溶液氧化(方法一方法二)或用高氯酸氧化(方法三)过量的还原剂 以二苯胺磺酸钠作指示剂重铬酸钾标准溶液滴定 3 试剂 3.1 碳酸钠(Na2CO3) 无水粉末 3.2 过氧化钠(Na2O2) 干粉 3.3 盐酸为1.19g/mL 3.4 盐酸1+9 1+50 3.5 硫酸1+1 3.6 氯化亚锡60g/L 称取6g 氯化亚锡(SnCl2)溶解于20mL 热盐酸( 为1.19g/mL)中加水稀释至100mL 混匀加一锡粒贮于棕色瓶中 3.7 三氯化钛溶液1+14 取2mL 三氯化钛溶液[质量浓度为15% 20%] 用盐酸(1+5)稀释至30mL 在冰箱中保存3.8 硫磷混酸 边搅拌边将150mL 硫酸( 为1.84g/L)慢慢注入700mL 水中加150mL 磷酸( 为 1.7g/mL) 混匀 3.9 高氯酸1+1 3.10 过氧化氢体积分数为30% 3% 3.11 高锰酸钾溶液40g/L 3.12 重铬酸钾溶液0.5g/L 3.13 氢氧化钠溶液20g/L 3.14 硫酸亚铁铵溶液c[(NH4)2Fe(SO4)2 6H2O]=0.05mol/L 称取19.7g 硫酸亚铁铵溶解于硫酸(5+95)中稀释至1000mL 混匀 3.15 重铬酸钾标准溶液c(1/6K2Cr2O7)=0.05000mol/L 称取2.4518g 预先在150 烘干2h 并在干燥器中冷却至室温的重铬酸钾[质量分数至 少99.9%] 溶解在适量水中移入1000mL 容量瓶中用水稀释至刻度混匀 3.16 钨酸钠溶液250g/L 称取25g 钨酸钠(Na2WO4)溶于适量水中加5mL 磷酸( 为1.7g/mL) 用水稀释至100mL 混匀 3.17 靛蓝溶液1g/L 称取0.1g 靛蓝(C16H8O8N2S2Na2)溶解于100mL 硫酸(1+1)中混匀 3.18 二苯胺磺酸钠(C6H5NHC6H4SO3Na)溶液2g/L 4 操作步骤 4.1 称样 称取0.20g 试样精确至0.0002g 4.2 空白试验 随同试样做空白试验 4.3 试样处理 4.3.1 分解 4.3.1.1 酸分解[钒的质量分数小于0.08% 钼和铜的质量分数均小于0.1%的试样] 将称取的试样置于250mL 烧杯中加30mL 盐酸(1+1) 盖上表面皿低温加热分解(<100 ) 用水淋洗表面皿及烧杯壁至体积约40mL 用中速滤纸过滤不溶残渣用热盐酸(1+50)洗烧杯3 次残渣7 次再用热水洗残渣6 次滤液为主液 将残渣及滤纸置于铂坩埚中灰化在800 灼烧20min 冷却加硫酸(1+1)润湿残渣 加5mL 氢氟酸( 为1.15g/mL) 低温加热至白烟冒尽加2g 焦硫酸钾于冷却后的坩埚中 在650 左右熔融至溶液澄清冷却将坩埚放入原烧杯中加5mL 盐酸( 为1.19g/mL) 加 热浸取熔融物用水洗出坩埚将溶液合并入主液低温蒸发至体积约100mL 注盐酸分解试样后如有少量白渣可以不用回渣对结果无显著影响 4.3.1.2 熔融酸化[钒的质量分数小于0.08% 钼和铜的质量分数均小于0.1 的试样] 将称取的试样置于刚玉坩埚中加3g 混合熔剂(过氧化钠+碳酸钠=2+1) 充分混匀上 盖1g 混合熔剂在800 熔融约15min 冷却 将坩埚置于300mL 烧杯中加100mL 热水加热浸取并煮沸数分钟分解过氧化氢加 20mL 盐酸( 为1.19g/mL) 取出并用热水洗涤坩埚低温蒸发试液至体积约为100mL 4.3.1.3 熔融过滤[钒的质量分数大于0.08% 钼的质量分数大于0.1% 铜的质量分数小 于0.1%的试样] 按4.3.1.2 熔融完毕冷却 将坩埚置于300mL 烧杯中加100mL 热水煮沸数分钟浸取熔融物取出坩埚并用热水 洗涤用中速滤纸过滤用氢氧化钠溶液(20g/L)洗涤2 次弃去滤液用20mL 热盐酸(1+1) 和热水分数次交替洗涤将沉淀洗入原烧杯中用热盐酸(1+1)将坩埚中残余熔融物溶解并洗入主液中低温加热溶解沉淀并蒸发至体积约100mL 4.3.2 还原 将试液加热至近沸 注如试样含砷和有机物加3 滴高锰酸钾溶液(40g/L) 并保持近沸5min 边搅拌边滴加氯化亚锡溶液(60g/L)至溶液呈浅黄色用少量水吹洗烧杯壁 注如果加入过量氯化亚锡溶液变为无色则滴加过氧化氢溶液[体积分数为3%]至 溶液呈浅黄色 任选下列方法之一氧化过量的三氯化钛
离子类高效液相色谱法
离子类高效液相色谱法 1308102-19 彭陈 摘要：离子色谱是高效液相色谱的一种，是分析阴离子和阳离子的一种液相色谱方法。 离子色谱的分离机理主要是离子交换。分离方式有3种：离子交换色谱，离子排斥色谱和离子对色谱。其中离子交换色谱用低容量的离子交换树脂，分离机理主要是离子交换;离子排斥色谱用高容量的树脂，分离机理主要是离子排斥；离子对色谱用不含离子交换基团的多孔树脂，分离机理主要是基于吸附和离子对的形成。 一，离子对色谱 离子对色谱法是将一种（或多种）与溶质分子电荷相反的离子（称为对离子或反离子）加到流动相或固定相中，使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物，从而控制溶质离子的保留行为。 在色谱分离过程中，流动相中待分离的有机离子A+（也可以是带负电子的离子）与固定相或流动相中带相反电荷的对离子B-结合，形成离子对化合物A+B-，然后在两相间进行分配： 若固定相为有机相，流动相为水溶液，就构成反相离子对色谱，此时A= 的分布系数B-为： 当流动相的pH值、离子强度、有机改性剂的类型、浓度及温度保持恒定时，k'与对离子的浓度［B- ］w成正比。因此通过调节对离子的浓度，就可改变被分离样品离子的保留时间Tr。
离子对色谱法，特别是反相离子对色谱法解决了以往难以分离混合物的分离问题，诸如酸、碱和离子、非离子的混合物，特别是一些生化试样如核酸、核苷、儿茶酚胺、生物碱以及药物等的分离。另外，还可以借助离子对的生成给试样引入紫外吸收或发荧光的基团，以提高检测的灵敏度。 二，离子交换色谱法以及离子色谱法 （1）离子交换色谱法 离子交换色谱利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。离子交换色谱的固定相一般为离子交换树脂，树脂分子结构中存在许多可以电离的活性中心，待分离组分中的离子会与这些活性中心发生离子交换，形成离子交换平衡，从而在流动相与固定相之间形成分配，固定相的固有离子与待分离组分中的离子之间相互争夺固定相中的离子交换中心，并随着流动相的运动而运动，最终实现分离。 离子交换色谱的固定相是交换剂，根据交换剂性质可分为： 阳离子交换剂和阴离子交换剂。 交换剂由固定的离子基团和可交换的平衡离子组成。当流动相带着组分离子通过离子交换柱时，组分离子与交换剂上可交换的平衡离子进行可逆交换，最后达到交换平衡，阴阳离子的交换平衡可表示为： 阳离子交换：R+Y-+ X-= R+X-+ Y- 阴离子交换：R-Y++ X+= R-X++ Y+ R+、R-—为交换剂上的固定离子基团，如RSO3-或RNH3+； Y+、Y-—为可交换的平衡离子，可以是H+、Na+或OH-、Cl-等 X+、X-—为组分离子。 组分离子对固定离子基团的亲和力强，分配系数大，其保留时间长；反之，分配系数小，其保留时间短；因此：离子交换色谱：是根据不同组分离子对固定离子基团的亲和力的差别而达到分离的目的。
水质铁的测定 EDTA滴定法
HZHJSZ00119杭州环境水质 ：水质铁的测定EDTA滴定法 1 范围 本方法适用于炼铁矿山电镀酸洗等废水中铁的测定测定铁的适宜含量为 5~20mg 在测定条件下铜铝离子含量较高大于5.0mg 时产生正干扰其它多数离子对本方法没有影响 2 原理 水样经酸分解使其中铁全部溶解并将亚铁氧化成高铁用氨水调节至pH2 左右用磺基水扬酸作指示剂用EDTA 络合物滴定法测定样品中的铁含量 3 试剂硝酸硫酸盐酸氨水精密pH 试纸磺基水扬酸溶液50g/L 六次甲基四胺溶液300g/L 4 铁标准溶液称取4.822g 硫酸高铁铵[FeNH4(S04) 12H20]溶于水中加1.0mL 硫酸移入1000mL 容量瓶中加水至标线混匀此溶液的浓度为0.010mol/L 5 0.01mol/L EDTA 标准滴定溶液: 称取3.723g 二水合乙二胺四乙酸二钠盐溶于水中稀释至1000 mL 贮于聚乙烯瓶中按下法标定： 标定吸取20.00mL 铁标准溶液置锥形瓶中加水至100mL 用精密pH 试纸指示滴加1+1 氨水调至pH=2 左右在电热板上加热试液至60 左右加磺基水扬酸溶液3.6 2mL 用EDTA 标准滴定溶液滴定至深紫红色变浅放慢滴定速度至紫红色消失而呈淡黄色为终点记下消耗EDTA 标准滴定溶液的毫升数(V0) 计算EDTA 标准滴定溶液的准确浓度 c Na2-EDTA =0.010mol/L 20.00/ V0 4 仪器 25 或50mL 酸式滴定管 5 水样处理 如果水样清澈且不含有机物或络合剂，则可取适量水样(合铁量约为5~20mg) 于锥形瓶中，加水至约100mL 如果水样混浊或有沉淀或含有机物则分取适量混匀水样置锥形瓶中加硫酸3mL 硝酸5mL 徐徐加热消解至冒三氧化硫白烟试样应呈透明状否则再加适量硝酸继续加热消解得透明溶液为止冷却加水至100mL 往上述处理过的水样中滴加1+1 氨水调节至pH2 左右(用精密pH 试纸检验) 6 操作步骤 将调节好pH 的试液加热至60 加磺基水扬酸溶液3.6 2mL 摇匀用EDTA 标准滴定溶液滴定至深紫红色变浅放慢滴定速度至紫色消失而呈现淡黄色为终点记录消耗EDTA 标准滴定溶液的毫升数V2) 7 结果计算 c 铁Fe, mg/L = c 55.847 1000 V1/ V2 式中V1 滴定所消耗EDTA 标准滴定溶液体积(mL)V2 水样体积(mL) EDTA 标准滴定溶液的摩尔浓度(mol/L) (Fe)的摩尔质量(g/mol) 8 精密度和准确度
离子色谱法测定水中常见阴离子教学要求(精)
项目三景观湖水质监测 任务8离子色谱法测定水中常见阴离子 单元教学要求 一、教学目标 该项目是环境监测工作的核心技能之一。通过实施该项目使得学习者进一步巩固前面所学知识，在进行校园景观湖水质监测中，增强对《环境监测》方面的基本方法和监测点位的选择设计，提高学习者调查和动手实验能力。同时根据监测结果，找出污染因子，了解水质现状及其变化趋势，为学院后勤管理部门提供可靠依据。 1. 知识目标 （1）理解离子交换色谱分析的基本原理； （2）掌握离子色谱仪的基本组成和操作方法； （3）掌握离子色谱法测定水中常见阴离子的测试方法。 2. 技能目标 （1）根据相关规范、标准，选择水中常见阴离子的测定方法； （2）能根据离子色谱分析方法，制订水中常见阴离子的监测方案； （3）能依据标准方法，完成常见阴离子等水样预处理及测定； （4）正确处理数据表达结果，并能进行初步质量评价工作； （5）能够根据分析情况，采取一定质量控制措施。 3. 素质目标 （1）培养学生认真负责的工作态度； （2）提高学生的团队合作精神； （3）培养分析问题、解决问题的能力。 二、教学条件 （1）主讲教师：有相关专业的学历背景，有从事环境监测工作岗位的经历，最好有熟练的用离子色谱仪操作经验；并经过高职教育教学的培训，能胜任“教学练做”一体化的教学模式。 （2）教学材料：正式出版的高职类环境监测规划教材、离子色谱法测定水样中阴离子的国家标准测定方法及工学结合特色明显的案例。 （3）实验实训设备条件：学习场地、教学设施设备要适应“教、学、练、做”项目化的要求，配置一定的多媒体、仿真、实训场地。实验仪器及实验试剂符合国标规定。
高效液相色谱仪简介
高效液相色谱仪简介 系统组成、工作原理 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。 高效液相色谱 （high performance liquid chromatography, HPLC）也叫高压液相色谱（high pressure liquid chromatography）、高速液相色谱（high speed liquid chromatography）、高分离度液相色谱（high resolution liquid chromatography）等。是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。 高效液相色谱是目前应用最多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，为了减低柱压高效液相色谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱。HPLC应用非常广泛，几乎遍及定量定性分析的各个领域。 使用高效液相色谱时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待侧物所含有的物质。高效液相色谱作为一种重要的分析方法，广泛的应用于化学和生化分析中。高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有本质的差别，它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相，适于分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。 发展历史
电位滴定法测定铁离子含量的应用研究
- 39 - 第5期2018年10月No.5 October，2018 金属材料受周围介质的作用而损坏，称为金属的腐蚀，腐蚀现象非常普遍，其中用量最大的金属—铁制品的腐蚀最为常见。常见的铁的腐蚀分为析氢腐蚀和吸氧腐蚀。而在酸性较强的溶液中发生电化学腐蚀时放出氢气，这种腐蚀叫作析氢腐蚀。 实验原理：通常析氢腐蚀只会产生Fe 2+，而Fe 2+在空气中易被氧化，所以采用液封的方法来隔绝空气。用K 2Cr 2O 7 溶液把Fe 2+完全氧化成Fe 3+，再用SnCl 2将Fe 3+ 还原为Fe 2+，通 过电位的突越来确定终点，并通过滴定剂的用量确定Fe 2+ 浓度，以此来得到腐蚀速率。 主要反应式：Fe+2H +→Fe 2++H 2↑ 6Fe 2+ + Cr 2O 72-+14H +→6Fe 3+ +2Cr 3++7H 2O Sn 2++2Fe 3+→Sn 4++2Fe 2+ 分析溶液中亚铁离子含量的方法有很多种，例如原子吸收分光光度法，该方法虽然测量在小含量时精确度高、稳定性好，但实验条件较苛刻，成本较昂贵，稳定性好且使用条件固定，不能改变温度，不宜直接用于计算平均腐蚀速率。电位滴定法是电位分析法的一种，是以测量电池电动势为基础的定量分析法，从滴定剂的体积和浓度来计算待测物的含量，在滴定到达终点前后，滴液中的待测离子浓度往往连续变化n 个数量级，引起电位的突跃，以此来指示滴定终点。该方法温度、液体接界电位的影响并不重要，其准确度优于直接电位法，被测成分的含量仍然通过消耗滴定剂的量来计算，可用于有色或混浊的溶液的滴定，还可用于浓度较稀的试液或滴定反应进行不够完全的情况；灵敏度和准确度高。而普通滴定法是依靠指示剂颜色变化来指示滴定终点，如果待测溶液有颜色或浑浊时，终点的指示就比较困难，或者根本找不到合适的指示剂。此实验中，待测溶液本身就有颜色，用指示剂可能会导致滴定终点不易观察。 采用普通滴定管的电位滴定法，无法在进行了液封的待测溶液中直接滴加滴定剂。如果把滴定管底部直接插入溶液中，则会因为气压原因无法加入滴定剂。所以，本实验主要采用注射器来代替滴定管进行滴定。注射器具有可以 外部施压的优点，同时刻度精确，且易控制注射量，采用 不锈钢针头，防止有些针头会被高浓度的盐酸腐蚀，影响测定结果。1 实验部分1.1 仪器和试剂 仪器：雷磁PHS-2F 型PH 计；雷磁232甘汞参比电极；雷磁213铂电极；IKA RCT 基本型加热磁力搅拌器；磁石；恒温水浴锅；兽用不锈钢注射器。 试剂：盐酸；N80钢；K 2Cr 2O 7固体；SnCl 2·2H 2O 固体；锡粒；液体石蜡。1.2 溶液的配置 标准重铬酸钾溶液的制备：将少量K 2Cr 2O 7固体至于干燥器干燥（T =120 ℃）2 h ，待冷却至室温，用分析天平准确称取1.860 2 g K 2Cr 2O 7药品用蒸馏水溶解，并洗涤3次，定容于1 L 量瓶中待用。 稀释：取125 mL 上述的K 2Cr 2O 7于500 mL 量瓶内进行定容。 C =0.001 580 mol/L 。SnCl 2溶液的配置：称取1.161 0 g SnCl 2于200 mL 烧杯中。加入30 mL 浓盐酸，用恒温水浴锅加热（50 ℃），边加热边搅拌，直到溶液澄清透明，待冷却至室温，移至500 mL 量瓶中用1∶1的盐酸洗涤3次并定容至刻度线。加入两粒锡粒并用液体石蜡液封防止SnCl 2被空气氧化。取用时倒入烧杯，用液体石蜡液封备用（由于SnCl 2不稳定，极易被氧化，不易保存，所以每次需现配现用）。2 实验内容2.1 实验操作 将N80钢预先称重，并用细绳悬挂卡入磨口锥形瓶加入1∶2的盐酸作腐蚀介质1 h 后取出挂片，用棉球擦洗，无水乙醇擦拭，吹干后称量挂片损失的质量。后搭建如图1的电位滴定装置，预热装置。在常温下，用移液管移取25 mL 腐蚀液放入100 mL 烧杯中，液面下加入磁石并插入已在饱和KCl 溶液里浸泡了2 h 的参比电极和清洗干净的铂电极。接着用液体石 蜡覆盖腐蚀液表面进行液封，防止Fe 2+ 被空气氧化。记下初 电位滴定法测定铁离子含量的应用研究 胡 箫，朱锦旗，周永博，鲁凯能 （长江大学 工程技术学院，湖北 荆州 434020） 摘 要：本实验采用稍加改良的电位滴定法研究不同条件对铁的腐蚀速率的影响，该实验模拟在实验条件相对简便的条件下 高效、相对准确地测定铁的平均腐蚀速率，并测定电位滴定法滴定亚铁离子浓度实验的灵敏度，即采用电位滴定法在一定条件下所能准确测定的最低亚铁离子浓度。最后,通过与失重法对比研究了滴定法测定腐蚀速率的可行性，结果表明，电位滴定法与失重法测得的腐蚀速率有较高的一致性，相对平均偏差未超过4％。关键词：析氢腐蚀；电位滴定法；失重法基金项目：长江大学工程技术学院大学生创新创业计划（201813245005）；长江大学工程技术学院科研基金项目（2018KY05）作者简介：胡箫（1997— ），男，湖北黄石人，本科生；研究方向：分析化学。 现代盐化工 Modern Salt and Chemical Industry