101.硒的测定(3,3'-二氨基联苯胺光度法)
硒的测定（3，3’-二氨基联苯胺光度法）
一、填空题
1.测定硒的水样采集后，最好尽快分析，否则必须贮于经1+1盐酸或1+1硝酸浸泡4h以上，然后用大量清洁水、纯水冲洗干净的玻璃瓶或塑料瓶中。
2.强氧化剂能将3，3’-二氨基联苯胺试剂氧化产生棕红色，因此水样用混合酸液消解时一定要加热至大量硝酸被赶走，少量的强氧化剂可用盐酸羟胺消除。
3. 3，3’-二氨基联苯胺光度法适用于各种天然水、饮用水及炼油、硫酸制造、特种玻璃等工业废水中总硒的测定，方法最低检出限为2.5μg/L，测定上限为50μg/L。
4.3，3’-二氨基联苯胺光度法测定硒时，用30mm比色皿，于450nm波长处，以甲苯作参比，测量吸光度，并做空白校正。
5.显色时，在预处理后的样品瓶中加入混合试液20ml，溶液呈桃红色，用10%（m/V）氢氧化钠溶液调pH值至2—3，溶液呈浅橙黄色。加入3，3’-二氨基联苯胺溶液3.5ml，摇匀，在暗处放置30min。
二、选择题
1.水样浓缩之前应先测一下pH值，若其pH值在6—7之间可不必调节。
2. 3，3’-二氨基联苯胺光度法测定硒灵敏度低，适合于测定含硒量在5μg/L以上的水样。
三、判断题
1.微量硒是生物必需的营养元素，但过量的硒却又能引起中毒。（√）
2. 3，3’-二氨基联苯胺溶液配制后可长期保存使用。（×）
3.用甲苯萃取时，溶液pH值应控制在6—7，不可过高，否则会使测定结果偏低。（×）
四、问答题
1. 3，3’-二氨基联苯胺光度法测定硒的原理是什么？
答：3，3’-二氨基联苯胺在酸性条件下与四价硒反应生成黄色化合物，在pH7左右时能被甲苯萃取，进行比色定量。水样需要经混合酸液消解后，将四价以下的无机和有机硒氧化至四价硒，再盐酸反应将六价硒还原至四价硒，然后测定总硒含量。
2.萃取时若产生乳化现象应怎样处理？
答：萃取时若产生乳化现象，放出水相后，加入少许无水硫酸钠，振摇分层后，从分液漏斗上口倾出甲苯层。
3.怎样去除较大量的铁、铜、钼及钒等重金属离子的干扰？
答：若存在较大量的铁、铜、钼及钒等重金属离子时，可用Na2-EDTA消除。
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紫外分光光度法测定蛋白质含量
上海百贺仪器科技有限公司提供ｗｗｗ．ｓｏｕｔｈｈｋ．ｃｎ 紫外分光光度法测定蛋白质含量 摘要： 考马斯亮兰G250与蛋白质结合，在0－1000ug/ml范围内，于波长595nm 处的吸光度与蛋白质含量成正比，可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250 与蛋白质结合迅速，结合产物在室温下10分钟内较为稳定，是一种较好的蛋白 质定量测定方法。 1.实验部分 1.1仪器与试剂： Labtech UV POWER紫外分光光度计；玻璃比色皿一套；考马斯亮蓝G250； 牛血清蛋白；超纯水。 1.2试液的制备： 牛血清蛋白标准溶液（1000ug/ml）的制备称取100mg牛血清蛋白置100ml 容量瓶中，加入超纯水溶解并定容。 考马斯亮兰G250试剂称取100mg考马斯亮兰G250，溶于50ml95％的乙 醇后，加入120ml85％的磷酸，用水稀释至1升。 2.结果与讨论 2.1校正曲线的绘制 准确吸取1000ug/ml牛血清蛋白标准溶液0.0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml 分别加入到6只10ml试管中，然后用超纯水补充到0.1ml，各试管分别加入5ml 考马斯亮兰G250试剂，混合均匀后，即可依次在595nm处测定吸光度。以浓度 为横坐标，吸光度为纵坐标绘制校正曲线如下图，校正曲线方程为 A=0.613556C+0.001008，R=0.9994。
上海百贺仪器科技有限公司ｗｗｗ．ｓｏｕｔｈｈｋ．ｃｎ 2.2精密度 配制0.6mg/ml牛血清蛋白的考马斯亮兰溶液连续进样6次，得到吸光度的 相对标准偏差。 表1精密度测定结果 次数123456RSD% A0.26260.26220.26200.26280.26290.26260.13 2.3稳定性 取1mg/ml牛血清蛋白标准溶液每十分钟测定一次，50分钟内的吸光度变化 如下表2。 表2稳定度测定结果 时间（min）A1A2A3A平均 00.55110.55230.55160.5517 100.52040.51840.51680.5185 200.49100.49010.49030.4905 300.47650.47160.47210.4734 400.45240.44750.44400.4480 500.39820.39350.40310.3983 3.结论 该方法测定快速、简便，干扰物少，是目前灵敏度较高的蛋白质含量测定 的紫外分光光度法。
细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)使用说明
细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)使用说明 货号：G2410 有效期：6个月。 产品组成： 产品名称规格保存 试剂(A):CO清除液2×50ml4℃避光 试剂(B):DAB 孵育液B1:DAB染色液45ml-20℃避光B2:DAB增强剂5ml RT B3:DAB反应液100μl RT 按B1:B2:B3=9000:1000:3混合，即为DAB孵育液，即配即用。 试剂(C):苏木素染色液50ml4℃避光 试剂(D):CO对照液1ml RT 产品说明： 细胞色素氧化酶(Cytochrome Oxidase，CO)被认为是线粒体膜固有的酶，在含有大量线粒体的细胞(如心肌、肾小管上皮以及胃壁细胞、肝细胞)内都具有高度活性。此酶活性往往作为细胞内氧化代谢的指标，亦作为线粒体的标志酶之一。 细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)染色原理是细胞色素氧化酶催化3,3-二氨基联苯胺(DAB)使其侧链的氨基氧化，进行反复的氧化性聚合和氧化性环化形成不溶性的棕色Phenazine 聚合物。此酶对固定剂敏感，故须用新鲜切片。 自备材料： 1、恒温培养箱
2、光学显微镜 操作步骤(仅供参考)： 1、冰冻切片，厚6μm，不固定。 2、滴加CO清除液于切片上，铺满整个样品表面。 3、切片入DAB孵育液中，37℃避光孵育45～60min。 4、移去切片上的染色液，滴加CO清除液于切片上，铺满整个样品表面。 5、蒸馏水稍洗3～5s。 6、(可选)滴加苏木素染色液浅染细胞核3～5min。 7、流水冲洗10min。常规脱蜡透明，中性树胶封固。 染色结果： CO酶活性部位棕色 心肌、肾小管上皮内颗粒(线粒体)蓝色 阴性对照(可选)：取新鲜配制好的DAB孵育液，按DAB孵育液:CO对照液=50:1的比例混合，即为CO对照工作液。相同切片入CO对照工作液，室温孵育30～60min，其余同上，呈阴性反应。 注意事项： 1、本染色液适用于冰冻切片，同时应减少切片在室温暴露的时间。 2、CO孵育液孵育时间因组织而异，心肌、肾孵育约20～30min，肝脏约50～60min，甲状腺滤泡上皮约2h。 3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
TMB配方大全
1 。称取TMB １７．２mg(固体），加ＤＭＳＯ１ml 溶解，然后加醋酸钠缓冲液（０．１ｍｏｌ／ｌ，ｐＨ５．５）６６ml，此为底物A 底物B ,取双蒸水100ml，加３０％H2O2１７微升 使用时A：B 液等体积混匀即可． 称取TMB 20mg(固体），先用无水乙醇10ml 溶解，充分振荡（试剂瓶要干净，干燥），加双蒸水定容到100 ml，此为底物A 底物B ,取1水柠檬酸 2.1g，无水Na2HPO4 2.82g，0.75%的过氧化氢尿素0.64ml，双蒸水定容至100ml(无须调PH值，应在4.5-5.0范围。 使用时A：B 各取5ml 混匀，可用于一块96孔板显色。 过氧化氢脲比H2O2稳定，不必如H2O2现用现配，都起供氢体的作用。 2 TMB(10mg/5ml无水l乙醇) 0.5ml 底物缓冲液10ml 0.75%过氧化氢32ul 底物缓冲液: 0.2M磷酸氢二钠25.7ml 0.1M柠檬酸24.3ml 加蒸馏水50ml TMB使用液： TMB （10mg/5ml，无水乙醇）0.5ml 底物缓冲液10ml 0.75% H2O2 32 Ul 3. TMB加入2.5ml无水酒精中,可加热至37℃～40℃直到TMB完全溶解。 将TMB配成1%浓度，4 ℃保存半年以内使用。 使用前，用pH5.0磷酸—柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml（1mgTMB）1%TMB液，再按每毫升TMB加入30% H2O21ul混匀后立即使用。 2NH2SO4终止后，450nm测定OD值。 4. HRP的底物： A液：0.02%H2O2 ；用0.1M柠檬酸-0.2M磷酸氢二钠，PH4.5～5.0稀释。 B液：TMB-HCl：0.4‰；用50mM柠檬酸钠，浓HCl调PH值为2.8的溶液溶解。 A液，B液各50ul使用。可使用起来显色比较缓慢，OD值较PIERCE的底物稍偏低一点。 5. 1、TMB粉末，溶于N，N－二甲基甲酰胺，配成10mg/mL。 2、底物缓冲液：0.2Mol/LNa2HPO4 25.7mL 0.1Mol/L柠檬酸24.3mL 水50mL 3、H2O2 用时10mg/mL TMB 165uL 底物缓冲液11mL
紫外-可见分光光度法测定有色溶液 (2)
紫外-可见分光光度法测有色溶液最大吸收波波长 一、实验目的 1.学习紫外-可见分光光度法的原理； 2.掌握紫外-可见分光光度法测定的实验技术； 3.了解掌握U-3010型紫外-可见分光光度仪的构造及使用方法。 二、实验原理 1.紫外-可见吸收光谱法(称紫外-可见分光光度法)以溶液中物质的分子或离 子对紫外和可见光谱区辐射能的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析法。根据最大吸收波长可做定性分析；根据朗伯-比尔定律（标准曲线法和标准加入法）可做定量分析。紫外-可见分光光度法定性分析原理：根据吸收曲线中吸收峰的数目、位置、相对强度以及吸收峰的形状进行定性分析。 2.紫外-可见分光光度法定量分析原理，根据朗伯－比耳定律：A=εbc，当入 射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。定量分析常用的方法是标准曲线法即只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。 3.仪器由五个部分组成：即光源、单色器、吸收池、检测器和信号显示记录装 置。 三、仪器与试剂 日立U-3010型紫外-可见分光光度仪；吸量管；乙醇；待测溶液；烧杯等。 四、实验步骤 1.接通电源，启动计算机，打开主机电源开关，启动工作站并初始化仪器，预 热半小时。 2.在工作接口上选择测量项目为光谱扫描，设置扫描参数（起点：650nm，终 点：250nm，速度：中，间隔：1.0nm，单次扫描） 3.将两个均装有无水乙醇的1cm石英比色皿放入测量池中，进行基线扫描。 4.基线做好后，按下面的顺序进行操作：做Baseline→换样（换上待测样品置 于Sample池）→进入Analysis Method对相关的参数进行设定→Sample命名→Ready→Measure进行测量，寻找待测溶液的最大吸收波长，再在最大吸收波长处分别测定待测溶液的吸光度。
盐酸联苯胺法测定硫酸根
本文经大量试验，采用硫酸联苯胺法测定原盐中的SO42-。试样溶解后，在微酸性溶液中，加入盐酸联苯胺，与SO42-生成硫酸联苯胺： C12H8(NH2)2·2HCl + SO42-= C12H8(NH2)2·H2SO4↓ + 2Cl- 沉淀过滤并溶于热水中后，以酚酞为指示剂，用NaOH标准溶液进行滴定： C12H8(NH2)2·H2SO4+2OH- = C12H8(NH2)2 + SO42- +2H2O 1实验部分 1.1 主要试剂 1.1.1盐酸联苯胺溶液25g·L-1，25g盐酸联苯胺（AR）于瓷研钵中，加10mL 二次去离子水及10mL1:1HCl，小心研至糊状，移入盛有400mL纯水的烧杯中，搅拌溶解，用定性滤纸过滤，滤液用二次去离子水稀释至1000mL，贮于棕色试剂瓶中。 1.1.2 硫酸联苯胺溶液饱和溶液，量取10mL1:1 H2SO4溶液，加入盛有70mL 纯水的烧杯中，加1:1HCl1.0mL，25g·L-1的盐酸联苯胺溶液40mL，搅拌溶解至沉淀析出，静置5min后用定性滤纸过滤，用二次去离子水洗涤沉淀至无酸性反应。沉淀溶于水中至达到饱和，用NaOH溶液中和至呈中性。 1.1.3 其他溶液HCl溶液（1:1）；H2SO4溶液（1:1）；NaOH标准溶液， 0.10mol·L-1；酚酞指示剂，2g·L-1的乙醇溶液。 1.2 分析方法 1.2.1 NaOH标准溶液浓度的标定 准确称取在100~125℃烘干2h的邻苯二甲酸氢钾基准物质0.4~0.5g(准至0.0001 g)于250mL锥形瓶中，加20~30mL水，温热使之溶解，冷却后滴加2~3滴酚酞指示剂，用NaOH溶液滴定至溶液呈微红色，半分钟不褪色，即为终点（平行标定3~5份）。并按下式计算其NaOH标准溶液的浓度C ： 式中：m ——称取邻苯二甲酸氢钾的质量，g ； M ——邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量，g·mol-1 ； V ——滴定时消耗的NaOH标准溶液的体积，mL 1.2.2 试样分析 准确称取粗食盐10~12g(准至0.0001g)于400mL烧杯中，加入100mL二次去离子水溶解（如有泥、沙等杂质时，应予以过滤），加入HCl溶液10.0mL，加入20mL盐酸联苯胺溶液，搅拌后，静置10~15min，过滤，用硫酸联苯胺饱和溶液洗涤烧杯及沉淀至无酸性反应（精密pH试纸）。小心取出滤纸，展开后贴于原烧杯壁，用去离子水将沉淀冲入烧杯中，加入煮沸过的热水100~120mL，置于电炉上低温加热至沸，滴加2~3滴酚酞指示剂，在玻璃棒搅拌下，立即用标定好的NaOH标准溶液滴定至溶液呈微红色，用玻璃棒将滤纸搅碎，投入溶液中，继续用NaOH滴定至微红色，半分钟不褪色，即为终点。 1.2.3 硫酸根含量计算 可按下式计算原盐中SO42-离子的质量分数ω%： 式中：C、V—分别表示NaOH标准溶液的浓度（mol·L-1）和滴定时用去的体积，mL； M——SO42-的摩尔质量，为96g·mol-1 ； ms ——称取样品的质量，g 2 结果与讨论 2.1 测定结果的比较 本文以某盐厂的原盐为试样，分别用重量分析标准法和本法同时测定样品5
(PAS反应与联苯胺反应)
实验三PAS反应与联苯胺反应 一：实验目的： 掌握显示细胞中多糖和过氧化物酶反应的原理和方法。 二：实验原理： 1、高碘酸—希夫试剂反应简称PAS（Periodic Acid Schiff reaction）反应。组织内的多糖等都用PAS法来显示。其化学基础是利用过氧酸的氧化作用打开C—C键，将CH2OH—CH2OH变成CHO—CHO。同样，对CH2OH—CHO，CH2OH—COOH，CH2OH—CH2NH2等物质均有氧化作用而放出醛基，这种新生的醛基和无色品红作用形成紫红色化合物（见图1）。颜色的深浅与糖类的多少有关。 2、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类化合物氧化为有色化合物（见图2），用联苯胺处理样本，细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为兰色的苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判断过氧化物酶的有无或多少。 三：实验材料与试剂 1.材料：土豆块茎、洋葱根尖或鳞茎表皮。 2.器具：显微镜、载波片、单面刀片、培养皿、镊子、染色钵、盖玻片、吸水纸。 3.试剂： （1）过碘酸酒精溶液： 过碘酸（高碘酸）0.4g 95%酒精35ml 0.2 mol/L醋酸钠5ml （即17.2g醋酸钠溶于1000ml 蒸馏水） 蒸馏水10ml 该液需保存于冰箱，包黑纸，如变黄则失效。 （2）Shiff试剂（详见指导书P75页） （3）0.1%钼酸铵溶液：称取0.1 g钼酸铵溶于100 ml 0.85%盐水 （4）联苯胺混合液（临用前配制） 联苯胺0.2g 95%乙醇100ml 3%H2022滴 （5）亚硫酸水溶液：取200ml自来水，加10ml10％的偏重亚硫酸钠水溶液和10ml1mol/L 的HCl，三者于使用前混匀。
ELISA稀释液配制
https://www.360docs.net/doc/6918095391.html,/techniquezones/66 抗体稀释液和ELISA相关溶液的配制 1、抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2PBS NaH2PO4·2H2O 0.39克 Na2HPO4 1.27克 NaCl 0.85克 NaN3 200mg H2O（蒸馏水）至1000ml 2、ELISA洗液及HRP标记抗体稀释液pH7.4，PBST NaCl 2.0克 KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 KCl 0.2克 NaN3 0.2克 H2O 至1000ml 吐温（Tween）20 0.5ml 4°C保存备用 3、包被液（简称CB）pH9.6 Na2CO3 1.59克NaHCO3 2.93克 NaN3 0.2克 H2O 至1000ml 密封盖好，4°C存放备用 4、ELISA底物液（可溶性底物） 磷酸-柠檬酸缓冲液pH5.0 0.1mol/L柠檬酸（21.014克/100ml) 24.3ml 0.2mol/L Na2 HPO4（28.4克/1000ml) 25.7ml H2O 50ml 4°C存放备用 5、DAB底物液（不溶性底物，组化病理等）
0.05mol/L pH7.6 Tris-HCL Tris 6.05克 HCL(36%) 3.15克（约2.7ml浓HCL） H2O 至1000ml DAB为3′，3′二氧基联苯胺，不溶性底物，呈棕红色 6、DAB溶液配制：（组化及Western blot 显色） 称DAB30mg，用0.05mol/L pH7.6Trs-HCL缓冲液100ml溶解,如有沉淀，过滤后使用，一般新鲜配制使用。用前加入1%H2O2 1-1.5ml,H2O2浓度为0.01%，混均后使用。 7、3′，3′，5′，5′，-四甲基联苯胺（TMB）溶液配制： 用二甲基甲酰胺（dimethylformamide，DMF)或无水乙醇，将TMB配成1%浓度，4°C保存半年以内使用。使用前，用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1%TMB液，再按每毫升TMB加入30%的H2O2 1ul，混匀后立即使用。2N H2SO4终止后，450nm测定OD值。 8、1%离子琼脂胶配制液 作免疫双相扩散，单相扩散及免疫电泳中使用。 0.05UpH8.6巴比妥钠-HCL缓冲液 巴比妥钠23.8克 1mol/L HCL 34.5ml H2O 2150ml
常用紫外分光光度法测定蛋白质含量
6种方法测定蛋白质含量 一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法 样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so2+4h2o+nh3 (1) 2nh3+h2so4——(nh4)2so4 (2) (nh4)2so4+2naoh——2h2o+na2so4+2nh3 (3) 反应（1）、(2)在凯氏瓶内完成，反应（3）在凯氏蒸馏装置中进行。 为了加速消化，可以加入cuso4作催化剂，k2so4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液，滴定则用强酸。实验和计算方法这里从略。 计算所得结果为样品总氮量，如欲求得样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白 氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6．25即得。 二、双缩脲法（biuret法） （一）实验原理 双缩脲（nh3conhconh3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与cuso4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。 此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。 （二）试剂与器材 1. 试剂： （1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（bsa）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml的标准蛋白溶液，可用bsa浓度1mg/ml的a280为0.66来校正
化妆品中4-氨基偶氮苯和联苯胺的检测方法
附件6： 化妆品中4-氨基偶氮苯和联苯胺的检测方法 1 范围 本标准规定了使用气相色谱–质谱法测定化妆品中4-氨基偶氮苯和联苯胺的含量。 本标准适用于粉、霜、露、膏、乳、油、液类化妆品中4-氨基偶氮苯和联苯胺的测定。 本标准的浓度适用范围为0.5 mg/Kg～10 mg/Kg，4-氨基偶氮苯及联苯胺的检出限（3σ）均为0.5 mg/Kg，定量下限（10σ）分别为2.0 mg/Kg、2.5 mg/Kg。 2 原理 试样在氨水-氯化铵缓冲溶液（pH = 9.5）中经叔丁基甲醚超声萃取后，使用硅胶-中性氧化铝混合填充的固相萃取小柱进行净化，叔丁基甲醚为淋洗液，浓缩后进样，经气相色谱分离、质谱检测器测定，使用保留时间、待测组分特征离子丰度比双重模式进行定性，外标法对各组分定量离子峰面积进行定量。 3 试剂及材料 除特别说明外，所有试剂均为分析纯；水为符合GB/T 6682规定的一级水。 3.1 标准物质：4-氨基偶氮苯，纯度≥99.0%。 3.2 标准物质：联苯胺，纯度≥98.5%。 3.3 正己烷：色谱纯。 3.4 甲醇：色谱纯。 3.5 叔丁基甲醚：色谱纯。 3.6 无水硫酸钠。 3.7 氯化铵。 3.8 氨水：25%。 3.9 氯化钠。 3.10 硅胶：100～200目，使用前于160 ℃下烘12 h。
3.11 中性氧化铝：100～200目，使用前于180 ℃下烘12 h。 3.12 氨水–氯化铵缓冲溶液：称取13.4 g 氯化铵、量取18.5 mL氨水于250 mL 烧杯中，加水溶解后转移至500 mL容量瓶，定容，配制成pH=9.5的缓冲溶液。 3.13 标准溶液 3.13.1 4-氨基偶氮苯标准储备溶液：准确称10.0 mg 4-氨基偶氮苯准品于10 mL 容量瓶中，加入少量甲醇溶解，并用甲醇定容至刻度，溶液浓度为1 mg/mL。将标准溶液转移到安瓿瓶中于4℃保存。 3.13.2 联苯胺标准储备溶液：准确称10.0 mg联苯胺准品于10 mL容量瓶中，加入少量甲醇溶解，并用甲醇定容至刻度，溶液浓度为1 mg/mL。将标准溶液转移到安瓿瓶中于4℃保存。 3.13.3 混合标准中间溶液：取一定量4-氨基偶氮苯和联苯胺的储备液，用甲醇稀释成混合标准中间溶液，溶液浓度为0.1 mg/mL。将混合标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4℃保存。 3.13.4 混合标准工作液：用甲醇将一定量的混合标准中间溶液配制成相应浓度的混合标准工作液。将混合标准工作液转移至安瓿瓶中于4℃保存。 4 仪器和设备 4.1 气相色谱-质谱仪。 4.2 分析天平：感量0.0001 g。 4.3 超声波振荡器。 4.4 离心机。 4.5 氮气吹扫装置。 4.6 玻璃固相萃取柱：内径1 cm，长度10 cm。 4.7 圆底螺口玻璃离心管：50 mL。 4.8 滤膜：0.45 μm有机相滤膜。 4.9 分液漏斗振荡器。 4.10 K-D浓缩瓶：30 mL。 5 分析步骤 2
细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)
细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法) 简介： 细胞色素氧化酶(Cytochrome Oxidase ，CO)被认为是线粒体膜固有的酶，在含有大量线粒体的细胞(如心肌、肾小管上皮以及胃壁细胞、肝细胞)内都具有高度活性。细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)染色原理是细胞色素氧化酶催化3,3-二氨基联苯胺(DAB)使其侧链的氨基氧化，进行反复的氧化性聚合和氧化性环化形成不溶性的棕色Phenazine 聚合物。此酶对固定剂敏感，故须用新鲜切片。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 2、 冰冻切片，厚6μm ，不固定。 3、 滴加CO 清除液于切片上，铺满整个样品表面。 4、 切片入DAB 孵育液中37℃避光孵育。 5、 移去切片上的染色液，滴加CO 清除液于切片上，铺满整个样品表面。 6、 蒸馏水稍洗。 7、 (可选)滴加Lea 苏木素染色液浅染细胞核。 8、 流水冲洗。常规脱蜡透明，中性树胶封固。 染色结果： CO 酶活性部位 棕色 心肌、肾小管上皮内颗粒(线粒体) 蓝色 编号 名称 DE0031 4×50ml Storage 试剂(A): CO 清除液 2×50ml 4℃ 避光 试剂(B): DAB 孵育液 B1: DAB 染色液 45ml -20℃ 避光 B2: DAB 增强剂 5ml RT B3: DAB 反应液 100μl RT 按B1:B2:B3=9000:1000:3混合，即为DAB 孵育液，即配即用。 试剂(C): Lea 苏木素染色液 50ml 4℃ 避光 试剂(D): CO 对照液 1ml RT 使用说明书 1份
注意事项： 1、本染色液适用于冰冻切片，同时应减少切片在室温暴露的时间。 2、CO孵育液孵育时间因组织而异，心肌、肾孵育约20～30min，肝脏约50～60min， 甲状腺滤泡上皮约2h。 3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
紫外可见分光光度法含量测定
【含量测定】照紫外-可见分光光度法(附录V A)测定。 1.仪器与测定条件：室温：____℃相对湿度：____% 分析天平编号：；水浴锅编号：； 紫外可见分光光度计编号：； 2.对照品溶液的制备： 取西贝母碱对照品适量，精密称定，加三氯甲烷制成每1ml含_______mg的溶液，即得。 3. 供试品溶液的制备： 取本品粉末(过三号筛)约______g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液3ml，浸润1小时。加三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液40ml，置80℃水浴加热回流2小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用适量三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液洗涤药渣2～3次，洗液并入同一量瓶中，加三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液至刻度，摇匀,即得。 4.标准曲线的制备： 精密量取对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、1.0ml，置25ml具塞试管中，分别补加三氯甲烷至10.0ml，精密加水5ml、再精密加0.05％溴甲酚绿缓冲液(取溴甲酚绿0.05g，用0.2mol／L氢氧化钠溶液6ml使溶解，加磷酸二氢钾1g，加水使溶解并稀释至100ml，即得)2ml，密塞，剧烈振摇，转移至分液漏斗中，放置30分钟。取三氯甲烷液，用干燥滤纸滤过，取续滤液，以相应的试剂为空白。 5.测定法： 照紫外-可见分光光度法(附录ⅤA），在nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含西贝母碱的重量，计算，即得。 6.结果与计算 6.1 标准曲线制备：
对照品批号 纯 度 S 对照品来源 干燥条件 对照品称重W 对(mg) 各浓度点稀释倍数f 对 溶液浓度C 对(ug/ml) 吸光度A 对 线性回归方程 A=( )C ＋/-（ ） r ＝（ ） 计算公式： W S C f ?= 对对对 C 对= 6.2 样品测定： 水分Q 取样量W 样（g ） 样品稀释倍数f 样 样品吸光度A 样 样品平均吸光度A 样 浓度C(ug/ml) 含量X （%） 平均含量X （%） 计算公式：() %100Q 110W f C X 6 ?-???= 样样 样 X 1= X 2= 7.本品按干燥品计算，含总生物碱以西贝母碱(C 27H 43NO 3)计，不得少于0.050％。 结果: 规定 检验人： 检验日期： 复核人： 复核日期:
高效液相色谱法测定废水中苯胺类化合物
高效液相色谱法测定废水中苯胺类化合物的实验模拟 作者：李佛军，班级：2班，学号：211103350 摘要：苯胺类化合物作为工业原料被广泛用于多种行业，它的大量使用对环境和人类的饮用水安全造成了很大的危害。本文以高效液相色谱法(HPLC)检测水中5种苯胺类化合物的方法，该方法等5种苯胺类的检出限为0.10～0.52 μg／L，回收率为70.2％～95.6％，相对标准偏差(RSD)为3.68％～8.79％，线性范围为1.0～10.0 mg／L。 关键词：苯胺类化合物；水；环境；高效液相色谱法。 Measuring the aniline compound in water experiment simulation with high performance liquid chromatography Fo jun LI Abstract：As industrial raw material，aniline compound is widely used in many industries，and it's heavy use causes great harm to environment and the safety of human's drinking water。This paper establishes the method，of measuring 5 kinds of aniline compound in water with HPLC。In this method，for the 5 kinds of aniline categories，detection limit is 0.10～0.52，recovery rate is 70.2％-95.6％，relative standard deviation (RSD) is3.68％-8.79％，linear range is 1.0 - 10.0 mg／L。 Keywords：aniline compound；water；environment；high performance liquid chromatography。 一、前言 1.1 技术发展 苯胺类化合物是致癌物质，它对环境造成的污染随着它的广泛应用而日趋严重，因此对这类化合物的监测已越来越受到重视。美国、日本等国把苯胺类化合物列入主要监测项目或优先监测的污染物黑名单[1]。在我国，苯胺类化合物也被列为环境重点污染物并制定了最高容许排放浓度。在已颁布的污水综合排放标准(GB 8978-88)中规定了苯胺类化合物的排放标准，并制订了分析苯胺类化合物的标准方法——萘乙二胺偶氮光度法[2]，但不足的是该方法只能分析总的苯胺类化合物，不能对单个的苯胺类化合物进行定性和定量分析。高效液相色谱法能弥补这个不足。目前，用高效液相色谱法测定废水中苯胺类化合物已有报道，但未见同时测定苯胺、对硝基苯胺、间硝基苯胺、联苯胺、邻硝基苯胺、2,4-二硝基苯胺、Ν，Ν-二甲基苯胺等7种物质的报道[3]。我们用更简单、快速、准确的方法来测定这7种物质。
紫外分光光度法测定未知物
紫外分光光度法测定未知物 1.仪器 1.1紫外分光光度计（UV-1801型）；配石英比色皿（1cm）2个 1.2容量瓶（100mL）：10个；容量瓶（250mL）1个 1.3吸量管（10mL、5mL）：各1支 1.4移液管（20mL、25mL、50mL）：各1支 2.试剂 2.1标准溶液（1mg/mL）：维生素C、水杨酸、苯甲酸、山梨酸、邻二氮菲分别配成1mg/mL的标准溶液，作为储备液。 2.2未知液：浓度约为（40~60ug/mL）。（其必为给出的五种物质之一） 3.实验操作 3.1比色皿配套性检查 石英比色皿装蒸馏水，以一只比色皿为参比，在测定波长下调节透射比为100%，测定其余比色皿的透射比，其偏差应小于0.5%，可配成一套使用。 3.2未知物的定性分析 将五种标准储备液均稀释成10ug/mL的试液（配制方法由选手自定）。以蒸馏水为参比，于波长200~350nm范围内扫描五种溶液，绘制吸收曲线，根据所得到的吸收曲线对照标准谱图，确定被测物质的名称，并依据吸收曲线确定测定波长。五种标准物质溶液的吸收曲线参五种标准物质溶液的吸收曲线参五种标准物质溶液的吸收曲线参五种标准物质溶液的吸收曲线参考考考考附图附图附图附图。。。。 3.3未知物定量分析 根据未知液吸收曲线上测定波长处的吸光度，确定未知液的稀释倍数，并配制待测溶液3份，进行平行测定。 推荐方法 3.3.1维生素C含量的测定：准确吸取1mg/mL的维生素C标准储备液50.00mL，在250mL容量瓶中定容（此溶液的浓度为200ug/mL）。再分别准确移取1、2、4、6、8、10mL上述溶液，在100mL容量瓶中定容（浓度分别为2、4、8、12、16、20 ug/mL）。准确移取20.00mL维生素C未知液，在100mL容量瓶中定容，于
HZ HJ SZ 水质 硒的测定 ' 二氨基联苯胺分光光度法
HZHJSZ00123 水质硒的测定 分光光度法 HZ-HJ-SZ-0123 水质3, 3’-二氨基联苯胺分光光度法 1 范围 本方法测硒的最低检出浓度为2.5ìg/L 本方法已用于各种天然水硫酸制造 水中常见离子一般不干扰本法测定硒铜 对本法有干扰EDTA消除３ 因此水样用混合酸液消解时一定要加热至大量硝酸被赶掉 2 原理 3, 3’-二氨基联苯胺(3,3’-Diaminobenzidine)在酸性条件下与四价硒反应生成黄色化合物 进行比色定量将四价以下的无机和有机硒氧化至四价硒然后测定总硒含量 准确称取纯度加入2mL高氯酸稍冷后加入少量水和8.4mL盐酸 然后转移至1000mL容量瓶此溶液每毫升含硒100.0ìg ????±ê×??ü±?èüòoó?0.1mol/L盐酸溶液稀释成每毫升含硒1.0ìg 3.3 氢氧化钠溶液 ３．４ １＋１硝酸-高氯酸 3.5 1+4盐酸溶液 3.6 甲酚红溶液将20mg甲酚红(C22H18O5S)溶于少量水中加1滴氨水 加水稀释至100mL ??10g Na2?óèèèü?a HCl)及10mL甲酚红溶液(3.6)贮于冰箱内 3.8 3-二氨基联苯胺盐酸盐溶液因此溶液易变质 3.9 甲苯 5 试样制备 取200mL或适量水样(含硒量为1~10ìg)置250mL具塞锥形瓶中 3.3加热浓缩至约10mL(注意取下放冷高氯酸5mL è???继续加热至再冒浓白烟时放冷备测 于上述瓶中加入混合试液20mLó?10%(m/V)氢氧化钠溶液调pH至2~3±?òaê±Dèó?pH0.5~5.0精密pH试纸检查３ 摇匀
6.1.2 萃取 必要时需用pH5.4~7.0的精密pH试纸检查振摇2min ′y·?2?oó???×±?2?·?è?10mL具塞刻度管中待测 用30mm比色皿以甲苯作参比并作空白校正 分别加入0 1.00 3.007.00及10.00mL 硒标准使用溶液以下按照上述第5条和6.1进行操作 7 结果计算 c硒(Se m由校准曲线查得的硒量(ìg) 8 精密度和准确度 单一实验室用本法测定545ìg/L硒的标准溶液的相对标准偏差分别为31 5.5%?????????°á?óí3§o???á??a?′?ì3??á21.3ìg/L 对自来水矿泉水 加入2~5ìg硒 注意事项 其pH值在6~7之间可不必调节 因水样pH太低蒸发时可能会使低价硒损失浓缩后过碱 影响样品消解效果 高氯酸消解不完全时杂质荧光高所以消解快到终点时不要过多摇动瓶应立即取下 前者是由桃红色变为黄色 pH 3~6为黄色３二氨基联苯铵在pH2~3条件下反应 用甲苯萃取时不可过高因此采用由黄色变成浅橙黄色(黄色刚刚消失)为宜 放出水相后振摇分层后 9 参考文献 ±à?ˉ?á±àμúèy°?pp. 202~204 ±±??
PH1138 过氧化物酶染色液联苯胺法实验方法
PH1138|过氧化物酶染色液（联苯胺法） Peroxidase Staining Solution Catalog No：PH1138Size：?4×10mL|?4×20mL Store at RT 过氧化物酶(Peroxidase，简称POX或MPO)是由微生物或植物所产生的一类能催化很多反应的以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶氧化还原酶，主要存在于细胞的过氧化物酶体中，以铁卟啉为辅基，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。 过氧化物酶染色液(联苯胺法)是ICSH推荐采用的POX染色液，其原理是细胞内的过氧化物酶能将无色的3,3-二氨基联苯胺(DAB)的氢原子传递给过氧化氢，使前者催化成有色染料沉积在细胞质中的POX所在部位。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片过氧化物酶染色,POX活性部位呈棕黄色。 试剂组分 Components4×10ml4×20ml Storage 试剂(A):BFA固定液10ml20ml4℃避光 B1:DAB染色液10ml20ml4℃避光 试剂(B):POX孵育液 B2:DAB氧化剂2×100μl4×100μl RT 临用前，按B1:B2=1000:1比例混合，即为POX孵育液，即配即用 试剂(C):WG染色液10ml20ml RT避光 试剂(D):WG Buffer10ml20ml RT Manual1份 有效期12个月 1、血液、骨髓或细胞涂片滴加预冷的BFA固定液，4℃固定30～60s，稍水洗。 2、滴加配制好的POX孵育液，室温(20～25℃)避光孵育10～15min，水洗2min。 3、滴加WG染色液，孵育30～60s。 4、直接滴加等量WG buffer，染色10～15min。 5、水洗、晾干、镜检。 染色结果 POX活性部位棕黄色 细胞核蓝色 粒细胞系除早期原粒细胞阴性外，分化好的原粒细胞以下阶段细胞随细胞成熟而阳性反应增强，衰老中性粒细胞反应程度减弱单核细胞系弱阳性，淋巴细胞系为阴性。浆细胞及巨核细胞均为阴性。嗜酸性粒细胞和Auer小体呈强阳性反应。
紫外分光光度法测定蛋白质含量实验报告.docx
紫外分光光度法测定蛋白质含量 一、实验目的 1.学习紫外光度法测定蛋白质含量的原理； 2.掌握紫外分光光度法测蛋白质含量的实验技术。 二、实验原理 1.测蛋白质含量的方法主要有：①测参数法：折射率、相对密度、紫外吸收等；②基于化学反应:定氮法、双缩脲法、Folin―酚试剂法等。本实验采用紫外分光光度法。 2.蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环中含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，其最大吸收峰位于280nm附近（不同蛋白质略有不同）。在最大吸收波长处，吸光度与蛋白质溶液的浓度服从朗伯―比尔定律。 利用紫外吸收法测蛋白质含量的准确度较差，原因有二：①对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，有一定误差，故该法适于测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质；②样品中含有的嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物质，会出现较大干扰。 三、仪器与试剂 TU―1901紫外可见分光光度计、标准蛋白质溶液3.00mg·mL-1、0.9%NaCl 溶液、试样蛋白质溶液。 10mL比色管、1cm石英比色皿、吸量管。 四、实验步骤 1.绘制吸收曲线 用吸量管吸取2mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用0.9%NaCl溶液稀释至刻度，摇匀。用1cm石英比色皿，以0.9%NaCl溶液作参比溶液，在190~400nm间每隔5nm测一次吸光度Abs，记录数据并作图。 2.绘制标准曲线 用吸量管分别吸取1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL3.00mg·mL-1标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用0.9%NaCl溶液稀释至刻度，摇匀。用1cm石英比色皿，以0.9%NaCl溶液作参比溶液，在波长280nm处分别测其吸光度，记录数据并作图。 3.样品测定 取适量浓度试样蛋白质溶液，在波长280nm处测其吸光度，重复三次。在已经得到标准曲线的情况下，为了使测量结果准确度高，待测溶液的浓度需在标准曲线的线性范围内，所以，先测定试样蛋白质原液的吸光度（1.363），估算浓度为2.0960 mg·mL-1，再将原试液稀释至5倍（即取2mL试液，用0.9%NaCl 溶液稀释至刻度，摇匀），估算浓度为0.4192 mg·mL-1，测吸光度，重复三次五、数据处理与结果分析
二甲氧基联苯胺监测分析方法
3,3?-甲氧基联苯胺 1简介 英文名称：3,3'-Dimethoxybenzidine CAS登记号:119-90-4 2监测分析方法 3,3?-甲氧基联苯胺常见于纺织品中，本方法为对纺织品中的3,3?-甲氧基联苯胺进行测定的方法。 2.1 试剂及分析方法 2.1.1 标准样品溶液的制备 称取3,3?-甲氧基联苯胺标准样品，用甲醇配制成浓度为1000mg/L的标准储备液，并用甲醇稀释成各种浓度的标准溶液。 2.1.2 样品前处理、萃取及浓缩 取有代表性试样，剪成约5 mm ×5 mm的小片，混合。从混合样中称取1.0g，精确至0.01g，置于反应器中，加入17 mL预热到(70±2)℃的柠檬酸盐缓冲溶液，将反应器密闭，用力振摇，使所有试样浸于液体中，置于已恒温至(70±2)℃的水浴中保温30 min，使所有的试样充分润湿。然后，打开反应器，加入3. 0 mL连二亚硫酸钠溶液，并立即密闭振摇，将反应器再于(70士2)℃水浴中保温30 min，取出后2 min内冷却到室温。 用玻璃棒挤压反应器中试样，将反应液全部倒人提取柱内，任其吸附15 min，用4× 20 mL 乙醚分四次洗提反应器中的试样，每次需混合乙醚和试样，然后将乙醚洗液灌人提取柱中，控制流速，收集乙醚提取液于圆底烧瓶中。 将上述收集的盛有乙醚提取液的圆底烧瓶置于真空旋转蒸发器上，于35℃左右的温度低真空下浓缩至近1 mL，再用缓氮气流驱除乙醚溶液，使其浓缩至近干（其中各种溶液的制备标准参见GB/T17952-2011）。 2.2 分析方法 2.2.1 HPLC/DAD分析方法 a)色谱柱:ODS C18 (250 mm × 4. 6 mm ×5 μm)，或相当者； b)流量:0. 8 mL/min-1. 0 mL/min； c)柱温:40℃；
实验一 紫外分光光度法测定苯甲酸
实验一紫外分光光度法测定苯甲酸 一、实验目的 学习、了解紫外分光光度法原理 了解紫外分光光度计的结构和使用方法 二、实验原理 当辐射能（光）通过吸光物质时，物质的分子对辐射能选择性的吸收而得到的光谱称为分子吸收光谱。分子吸收光谱的产生与物质的分子结构、物质所在状态、溶剂和溶液的PH等因素有关。分子吸收光谱的强度与吸光物质的浓度有关。表示物质对光的吸收程度，通常采用“吸光度”这一概念来量度。 根据朗伯－比尔定律，在一定的条件下，吸光物质的吸光度A 与该物质的浓度C和液层厚度成正比。即A＝ LC 因此，只要选择一定的波长测定溶液的吸光度，即可求出该溶液浓度，这就是紫外－可见分光光度计的基本原理。 在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长为225nm。因此，采用紫外分光光度计测定苯甲酸在225nm处的吸收度就能进行定量分析。 三、仪器与主要试剂 TU-1810紫外可见分光光度计1cm石英比色皿 0.1M氢氧化钠溶液 苯甲酸(AR) 四、实验步骤 1、苯甲酸标准溶液的制备 称取苯甲酸(105℃烘干)100mg,用0.1M氢氧化钠溶液100ml溶解后,转入1000ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度.此溶液1ml含0.1mg 苯甲酸. 2、制作苯甲酸吸收曲线,选择最大吸收波长 ①移取苯甲酸标准溶液4.00ml于50ml容量瓶中,用0.01M氢氧化钠溶液定容,摇匀,此溶液1ml含苯甲酸8ug. 以氘灯为光源,用0.01M氢氧化钠溶液作为参比,改变测量波长(从210-240nm)测量8ug/ml苯甲酸的吸光度. ②以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制苯甲酸的紫外吸收曲线,并找出最大的吸收波长 (是否是225nm). 3﹑样品的测定 ①取10.00ml苯甲酸样品,放入50ml容量瓶中,用0.01M氢氧化钠
101.硒的测定(3,3'-二氨基联苯胺光度法)
硒的测定（3，3’-二氨基联苯胺光度法） 一、填空题 1.测定硒的水样采集后，最好尽快分析，否则必须贮于经1+1盐酸或1+1硝酸浸泡4h以上，然后用大量清洁水、纯水冲洗干净的玻璃瓶或塑料瓶中。 2.强氧化剂能将3，3’-二氨基联苯胺试剂氧化产生棕红色，因此水样用混合酸液消解时一定要加热至大量硝酸被赶走，少量的强氧化剂可用盐酸羟胺消除。 3. 3，3’-二氨基联苯胺光度法适用于各种天然水、饮用水及炼油、硫酸制造、特种玻璃等工业废水中总硒的测定，方法最低检出限为2.5μg/L，测定上限为50μg/L。 4.3，3’-二氨基联苯胺光度法测定硒时，用30mm比色皿，于450nm波长处，以甲苯作参比，测量吸光度，并做空白校正。 5.显色时，在预处理后的样品瓶中加入混合试液20ml，溶液呈桃红色，用10%（m/V）氢氧化钠溶液调pH值至2—3，溶液呈浅橙黄色。加入3，3’-二氨基联苯胺溶液3.5ml，摇匀，在暗处放置30min。 二、选择题 1.水样浓缩之前应先测一下pH值，若其pH值在6—7之间可不必调节。 2. 3，3’-二氨基联苯胺光度法测定硒灵敏度低，适合于测定含硒量在5μg/L以上的水样。 三、判断题 1.微量硒是生物必需的营养元素，但过量的硒却又能引起中毒。（√） 2. 3，3’-二氨基联苯胺溶液配制后可长期保存使用。（×） 3.用甲苯萃取时，溶液pH值应控制在6—7，不可过高，否则会使测定结果偏低。（×） 四、问答题 1. 3，3’-二氨基联苯胺光度法测定硒的原理是什么？ 答：3，3’-二氨基联苯胺在酸性条件下与四价硒反应生成黄色化合物，在pH7左右时能被甲苯萃取，进行比色定量。水样需要经混合酸液消解后，将四价以下的无机和有机硒氧化至四价硒，再盐酸反应将六价硒还原至四价硒，然后测定总硒含量。 2.萃取时若产生乳化现象应怎样处理？ 答：萃取时若产生乳化现象，放出水相后，加入少许无水硫酸钠，振摇分层后，从分液漏斗上口倾出甲苯层。 3.怎样去除较大量的铁、铜、钼及钒等重金属离子的干扰？ 答：若存在较大量的铁、铜、钼及钒等重金属离子时，可用Na2-EDTA消除。 1