培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告
篇一：《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告
《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告
实验目的
1.学习和掌握配制培养基（以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例）的一般方法和原理。
2.了解消毒和灭菌的原理，掌握常用灭菌方法的操作步骤。
实验原理
培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。在自然界中．微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多。但是，不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。不同微生物对PH要求不一样．雷菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的，而细菌和放线菌的培养基的pH一般为中性或微碱性的(嗜碱细菌和嗜酸细菌例外)。所以配制培养基时，都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适的范围。此外，由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物，因此，已配制好的培养基必须立即灭菌．如果来不及灭菌，应暂存冰箱内，以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。
高压蒸气灭菌是将持灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅套间的水沸腾而产生蒸气。待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀．继续加热，此时由于蒸气不能道出，而增加了灭菌器内
的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供作微生物生长繁殖之用。基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂，琼脂在常用浓度下96℃时溶化，实际应用时，一般在沸水浴中或下而垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌，因此要用稀酸或稀碱将其PH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：
牛肉膏 3.0g
蛋白胨 10.0 g
NaCl 5.0g
水1000ml
pH7.4—7.6
实验仪器与药品
1.溶液或试剂：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol／L NaOH、1mol／L HCl。
2.仪器或其他用具：试管、三角瓶、1000ml烧杯（或1000ml刻度搪瓷杯）、量筒、玻棒、培养基分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH试纸（pH 5.5-9.0）、普通棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布等。
实验步骤
（一）牛肉膏蛋白胨培养基的制备
1.称量（假定配制1000ml培养基）
按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯（或1000ml 刻度搪瓷杯）中．牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上，称量后直接放人水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。
2.溶化
在上述烧杯中先加入少于所需要的水量（如约700ml），用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解，将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积（1000ml）；如果配制固体培养基时，将称好的琼脂放人已溶的药品中，再加热溶化，最后补足所损失的水分。
3.调pH
在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸．用滴管向培养基中逐滴加入1mol／LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其PH，直至pH达7.4-7.6。反之，用1mol／LHCl进行调节。
4.过滤
趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利某些实验结果的观察。可以省去(本实验勿需过滤)。
5.分装
液体分装
分装高度以试管高度的1／4左右为宜。分装三角瓶的虽则根据需要而定，一般以不超过三角瓶容积的一半为宜，如果是用于振荡培养用，则根据通气量的要求酌情减少；有的液体培养基在灭菌后，需要补加一定量的其他无菌成分，如抗生素等，则装量一定要准确。
固体分装
分装试管，其装量不超过管高的1／5，灭菌后制成斜面。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
半固体分装
一般以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。
6.加塞
培养基分装完毕后，在试管口或三角瓶口上塞上棉塞(或硅胶塞、金属或高温塑料试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内面造成污染，并保证有良好的通气性能(棉塞制作方法附本实验后面)。
7.包扎
加塞后，将全部试管放入铁丝筐或用麻绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、配制日期。三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、配制日期。
8.灭菌
将上述培养基以0.103MPa，l21℃，20min高压蒸气灭菌。
9.摆斜面
将灭菌的试管培养基冷至50℃左右(以防斜面上冷凝水太多)，将试管口端搁在玻棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜 l0.无菌检查
将灭菌培养基放入37℃的恒温箱中培养24-48h．以捡查灭菌是否彻底。
注意事项
1.蛋白胨很容易吸湿，在称取时动作要迅速，另外，称量时严防药品混杂．一把牛角匙用于一种药品．或称取一种药品后，洗净——擦干——再称职另一药品——瓶盖也不要盖错。
2.在琼脂溶化过程中．应控制火力，以免培养基因沸腾而溢出容器。同时，需不断搅拌，以防琼脂糊底烧焦，制培养基时，不可用铜或铁锅加热溶化，以免离子进入培养基中，影响细菌生长。
3.对于有些要求PH较精确的微生物，其PH的调节可用酸度计进行(使用方法、可参考有关说明书)。pH不要调过头，以避免回调而影响培养基内各离子的浓度。配制pH低的琼脂培养基时．若预先记好PH并在高压蒸汽下灭菌，则琼脂因水解不能凝固。因此，应将培养基的成分和琼脂分开灭菌后再混合，或在中性pH条件下灭菌，再调整pH。
4.分装过程中，注意不要使培养基沾在管(瓶)口上，以免沾污面塞而引起污染。
（二）高压蒸汽灭菌法步骤
1.加水
使用前在锅内加入适量的水，加水不可过少，以防将灭菌锅烧干，引起炸裂事故。加水过多有可能引起灭菌物积水。水面与三角架相平为宜
2.装料
将灭菌物品放在灭菌桶中，不要装得过满。
3.加盖
盖好锅盖，按对称方法旋紧四周固定螺旋，打开排气阀。
4.加热排气
加热后水蒸气与空气一起从排气孔排出，待锅内沸腾并有大量蒸汽自排气阀冒出时，排出的气流很强并有嘘声时，维持2—3min以排除冷空气。如灭菌物品较大或不易透气，应适当延长排气时间，务必使空气充分排除，然后将排气阀关闭。
5.加压
将排气阀关闭
6.保压
当压力升至0.1MPa时，温度达121℃，此时应注意观察，控制热源。保持压力稳定，维持20-30min后，切断热源。
7.自然降压
当压力表降至“0”处，稍停，使温度继续降至100℃以下后，打开排气阀，旋开固定螺旋，开盖，取出灭菌物。注意：切勿在锅内压力尚在“0”点以上，温度也在100℃以上时开启排气阀，否则会因压力骤然降低，而造成培养基剧烈沸腾冲出管口或瓶口，污染棉塞，以后培养时引起杂菌污染。压力降到“0”时，方可打开排气阀。
8.保养
灭菌完毕取出物品后，将锅内余水倒出，以保持内壁及内胆干燥，盖好锅盖。
9.培养基无菌检查五、关键步骤及注意事项
1.要严格按配方配制。
2.调pH不要过头。
3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧，注意温度的时间控制，70oC以下放物、取物。
4.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零取物。
5.过滤除菌要注意各部件灭菌，压滤时，压力要适当，不可太猛太快，滤膜要注意清洗保存。
陕西师范大学远程教育学院
生物学实验报告
报告题目《培养基的制备与消毒灭菌》
姓名学号
专业
批次/层次
指导教师学习中心实验报告
篇二：培养基的常规配置程序实验报告
培养基的常规配置程序
一、目的要求
1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2. 掌握培养基的配置原则和方法。
3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
二、基本原理
营养琼脂培养基：
是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌：
主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。
三、实验材料
1. 药品：营养琼脂、蒸馏水。
2. 仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿等。
3. 其他物品：药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。
四、操作步骤
（一）玻璃器皿的洗涤和包装
1．玻璃器皿的洗涤
将玻璃器皿浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。再置于烘箱中烘干后备用。
2．灭菌前玻璃器皿的包装
（1）培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，用报纸按传统包月饼的方法，将几套培养皿包成一包，准备灭菌。
（2）移液管的包扎：
先将报纸裁成宽约5cm的长纸条，然后将移液管尖端放在长条报纸的一端，约成45℃角，折叠纸条包住尖端，用左手握住移液管身，右手将移液管压紧。在桌面上向前搓转，以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条，折叠打结，准备灭菌。（3）无菌水的制备：往两支洁净的试管中分别加入10ml蒸馏水，用试管塞塞好，准备灭菌。
（二）固体培养基的配制过程
1．培养基配制
（1）称取4g营养琼脂，溶于125ml的蒸馏水中，加热使其完全溶解。
（2）培养基的分装
分装时，将4支洗净的试管放置在试管架上，用5ml的移液管分别移取适量的上述溶液于试管中（装入量不宜超过试管高度的1/5）；将剩余溶液倒入锥形瓶中（装入量以锥形瓶总体积的一半为限度），用橡皮塞塞好瓶口。
（3）试管、锥形瓶的包扎
将上述所有试管（包括盛装无菌水的试管）捆成一捆。然后，将捆好的试管与锥形瓶标明组别与日期。
（4）培养基的灭菌
将包扎好的玻璃器皿与捆好的试管与锥形瓶在高压灭菌锅中常压，121℃条件下灭菌20min。
（5）斜面的制作
将已灭菌装有琼脂培养基的试管，趁热置于木棒或玻棒上，使成适当斜度（斜面长度不超过试管长度l／2为宜），凝固后即成斜面。。
（6）平板的制作
在火旁进行，左手拿培养皿，右手拿三角瓶的底部，左手同时用小指和手掌将塞子打开，灼烧瓶口，用左手大拇指将培养皿盖打开一缝，至瓶口正好伸入，将装在锥形瓶中已灭菌的培养基，待冷至50℃左右分别倾入10~12mL培养基，于2个无菌培养皿中，迅速盖好皿盖，置于桌上，轻轻旋转平皿，使培养基均匀分布于整个平皿中，冷凝后即成平板。
五、实验过程原始记录
营养琼脂：4g
1、4g黄色营养琼脂粉，完全溶于125ml蒸馏水后，得到橙黄色的，透明的胶体溶液。
2、将营养琼脂液按实验步骤操作，冷却至室温后，即得到无色（略带黄色）的胶状培养基。
六、结果及讨论
（一）实验结果
成功的制备出了斜面和固体培养基，使后续细菌接种试验顺利进行。但仍存在些缺陷，有待改进。
1、理论上，培养基分装于试管后，应用棉塞封好试管口，且棉塞的质量好坏直接影响试验结果。但试验时，使用试管塞封口，由于试管塞一般不透气，在灭菌的升温和降温过程中，试管内外压力会有差异，当管内压力大于管外压力时可能使塞子飞出或试管爆裂。而棉花塞透气，能保持内外压平衡，且阻止细菌进入。
2、动手能力差，有时不知所措；且操作粗心大意，损坏玻璃器皿。
（二）、注意事项：
1、在琼脂加热溶解的整个过程用玻棒不断搅匀，防止琼脂粘在烧杯底部而使烧杯破裂；同时也使其充分溶解，避免培养基制作失败，必要时可补足因蒸发而失去水分至总体积。
2、一般情况下在配制固体培养基时，溶解的琼脂液无须过滤。必要时，可趁热用4—5层纱布过滤。
3、根据不同需要，可将已配好培养基分装入试管或锥形瓶内，分装时注意不要使培养基沾污管口或瓶口，造成污染，如操作不小心，培养基沾污管口或瓶口时，可用镊子夹一小块脱脂棉，擦去管口或瓶口的培养基，并将脱脂棉弃去。
4、平板制作时，将已灭菌的培养基待冷至50℃时倾入培养皿；若温度过高时，则皿盖上的冷凝水太多；反之，培养基易于凝固而无法制作平板。
5、灭菌时，以灭菌最彻底而营养破坏最少，且方法最简便为原则。加压之前，冷空气一定要完全排尽，以提高灭菌效果；恒温灭菌时，最好等自然使表压减至“0”以后，才能打开灭菌锅盖。
（三）思考题回答
1、霉菌时，塞试管的棉塞是否可以用橡皮塞代替？为什么？
答：不可以，因为橡皮塞不透气，在灭菌的升温和降温过程中，试管内外压力会有差异。当管内压力大于管外压力时可能使塞子飞出或试管爆裂。而棉花塞透气，能保持内外压平衡，且能阻止细菌进入。
2、如何检查所配置的培养基无菌？
若没有灭菌，一定有菌。而有灭菌，则置于37℃恒温箱中培养，两三天观察表面有无菌落形成。若无，证明培养基无菌，反之亦然。
篇三：选择性培养基的配制实验报告
实验4选择性培养基的配制
【目的】
了解选择性培养基的原理，并掌撮配制选择性培养基的方法和步骤。
【概述】
选择性培养基是一类根据某微生物的特殊营养要求或对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合苗样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。选择性培养基均含有增菌剂和选择剂Y样接种子这类培养基后，由于抑荫剂的选择性抑制作用.使所要分离的目的菌得到较好的繁殖，而其他菌被抑制。经过一定的培养时间后.再将目的菌接种到鉴别培养基上，可以提高目的菌的分离阳性率。抑菌剂的种类很多，如孔雀绿、煌绿、亚硒酸钠、去氧胆酸钠、胆盐、四硫磺酸钠或抗生素等，但加人量需准确，有的可以水溶液无菌配制冷藏备用。以上成分的用量、加人方法均按各类配方进行。
马丁氏培养基常用于从自然环境中分离真菌，培养基中的去氧胆酸钠和链霉素不是微生物的营养成分。由于去氧胆酸钠为表面活性剂，不仅可防止霉菌菌丝蔓延，还可抑制G一细菌生长，而链霉素对多数G一细菌具抑制生长作用，所以它们是用于抑制细菌和放线菌的生长，而对于真菌的生长则没有影响，从而达到分离真菌的目的。
Ashby无氮培养基常用于从自然界环境中分离固氮菌。培养基中只含有基本的碳源和无机盐，没有氮源。一般的细菌不能在此培养基上生长，一些固氮的细
菌可以利用空气中的氮气作为氮源，可以在此培养基上生长，从而达到分离固氮菌的目的。
【材料和器皿】
(1)试剂:蛋白胨，葡萄糖，甘露醇，孟加拉红，链霉素，去氧胆酸钠，KH2PO4，MgSO4·7H2O, NaC1，CaSO4·2H2O，CaCO3，琼脂。
(2)器皿:台秤，烧杯，共角烧瓶，量筒，漏斗，试管，玻棒，加压蒸汽灭菌锅等。
(3)其他:药匙，pH试纸，称量纸，记号笔，棉花塞，纱布，线绳，不锈钢试管帽，牛皮纸，报纸等。
【方法和步骤】
1.马丁氏培养基的配制
(l)培养基成分:
葡萄糖 10g
蛋白胨5g
KH2PO4 1g
MgSO4·7H2O 0.5g
0.1％孟加拉红溶液3.3ml
琼脂 16g
蒸馏水1000ml
自然PH
2％去氧胆酸钠溶液20ml（预先灭菌，临用前加入）
链霉素溶液(10000U/ml) 3.3ml（临用前加入）
(2)配制方法:
①称量:称取培养基各成分的所需量。
②溶化:在烧杯中加入约2/3所需水量，然后依次逐一加人并溶化培养基各成分，再按每1000ml培养基加人3.3 ml的0.1%孟加拉红溶液。
③定容:待各成分完全溶化后，补足水量至所需体积。
④加琼脂:加人所需琼脂量，加热融化，补足失水。
⑤分装，加塞，包扎。
⑥加压蒸汽灭菌;12I℃灭菌20min。
⑦临用前，加热融化培养基，待冷至60℃左右，按每1000ml培养基以无菌操作加入20ml 2%去氧胆酸钠溶液及3. 3ml的链霉素溶液，迅速混匀。
2.Ashby氏无氮培养基的配制
(l)培养基成分:
甘露醇10g
KH2PO4 0.2g
MgSO4·7H2O 0.2g
NaCl0.2ml
CaSO4·2H2O 0.1g
CaCO3 5g
琼脂 15~20g
蒸馏水1000ml
pH 7.2~7.4
(2)配制方法:
①称量:称取培养墓各成分的所需量。
②溶化:在烧杯中加人约2/3所需水量，依次逐一溶化培养基各成分。
③定容。
④调pH至7 .2一7 .4。
⑤加琼脂:加入所需琼脂量，加热融化，补足失水。
⑥分装，加塞，包扎。:
⑦加压蒸汽灭菌;121℃(0.07MPa)灭菌20min。
【结果记录】
记录本实验配制培养基的时问、名称和数量。
【注意事项】
1.称药品用的牛角匙不要混用。
2.称完药品应及时盖紧瓶盖。
3.调pH时要小心操作，避免回调。
【思考题】
1.何谓选择性培养基?
2.在马丁氏培养基中的孟加拉红、链霉素各起什么作用?
3. Ashby氏无氮培养基为什么可以分离固氮菌?
WWW服务器配置实验报告
信息科学与技术学院实验报告 课程名称: 计算机网络应用技术教程实验项目: WWW服务器配置 实验地点:指导教师: 日期: 2013/10/29 实验类型:验证性实验（验证性实验综合性实验设计性实验）专业: 班级: 11级姓名: 学号: 一、实验目的及要求 1.实验目的： 1.正确理解WWW服务的运行机制，了解常用的wed服务器软件。 2.掌握IIS服务器的安装和管理，创建wed站点利用IIS在一台服务器上运行多个网站。 3.掌握虚拟机主机和虚拟目录的创建删除。 2.实验要求： 1.理解IIS服务的概念及其所具有的功能。 2.掌握IIS服务的安装方法。 3.掌握WWW服务的配置包括IP地址、端口号、默认文档、安全等设定，以及如何应用WWW服务的方法。 4.了解虚拟目录服务的作用。 二、实验仪器、设备或软件 1.实验仪器：电脑一台 三、实验内容及原理 1.实验内容： (1).学会安装IIS。 (2).掌握www服务器的配置和使用。 (3).创建虚拟目录。 2.实验原理： 万维网WWW（World Wide Web）服务，又称为Web服务，是目前TCP/IP互联网上最方便和最受欢迎的信息服务类型，是因特网上发展最快同时又使用最多的一项服务，目前已经进入广告、新闻、销售、电子商务与信息服务等诸多领域，它的出现是TCP/IP互联网发展中的一个里程碑。 WWW服务采用客户／服务器工作模式，客户机即浏览器（Browser）,服务器即Web服务器，它以超文本标记语言（HTML）和超文本传输协议（HTTP）为基础，为用户提供界面一致的信息浏览系统。信息资源以页面（也称网页或Web页面）的形式存储在Web服务器上（通常称为Web站点），这些页面采用超文本方式对信息进行组织，页面之间通过超链接连接起来。这些通过超链接连接的页面信息既可以放
常用培养基的制备及注意事项(1)
常用培养基的制备及注意事项 一、实验目的 了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。 二、实验原理 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢 产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培 养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。 干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。 三、试剂与器材 1.器材试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH度纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊子等。
2.试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂 四、实验内容 1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 五、关键步骤及注意事项 1.要严格按配方配制。 2.调pH不要过头。 3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧，注意温度的时间控制，70oC以下放物、取物。 4.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零取物。 5.过滤除菌要注意各部件灭菌，压滤时，压力要适当，不可太猛太快，滤膜要注意清洗保存。
PDA培养基
gus基因存在于E.coli等一些细菌基因组内，编码β-葡萄糖苷酸酶。β-葡萄糖苷酸酶是一个水解酶，以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物，其反应产物可用多种方法检测出来。由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此这个基因被广泛应用于基因调控的研究中。可作为GUS报告基因 检测方法 根据gus基因检测所用的底物不同，可以选择三种检测方法：组织化学法、分光光度法和荧光法（灵感度为分光光度检测法最高），其中最为常用的是组织化学法。 组织化学法检测以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸（X-Gluc）作为反应底物。将被检材料用含有底物的缓冲液浸泡，若组织细胞发生了解gus 基因的转化，并表达出Gus，在适宜的条件下，该酶就可将X-Gluc水解生成蓝色产物，这是由其初始产物经氧化二聚作用于形成的靛蓝染料，它使具Gus活性的部位或位点呈现蓝色，用肉眼或在显微镜下可看到，且在一定程度下根据染色深浅可反映出Gus活性。因此利用该方法可观察到外源基因在特定器官、组织，甚至单个细胞内的表达情况。 CTAB法的全称是十六烷基三甲基溴化铵法（Hexadecyltrimethy Ammonium Bromide）。主要用于提取生物DNA 步骤（1）2%CTAB抽提缓冲液在65℃水浴中预热。 （2）取少量实验材料（约300mg）置于研钵中，用液氮磨至粉状； （3）加入700ul的2%CTAB抽提缓冲液，轻轻搅动； （4）将磨碎液分倒入1.5 ml的灭菌离心管中，磨碎液的高度约占管的三分之二； （5）置于65℃的水浴槽或恒温箱中，每隔10 min轻轻摇动，30~60min 后取出； （6）冷却2 min后，加入氯仿-异戊醇（24：1）至满管，剧烈振荡2~3 min（若提取的是总基因组，则不能剧烈震荡。），使两者混合均匀； （7）放入离心机中10 000 rpm离心10 min，与此同时，将600 ul的异丙醇加入另一新的灭菌离心管中； （8） 10 000 rpm离心1 min后，移液器轻轻地吸取上清夜，转入含有异丙醇的离心管内，将离心管慢慢上下摇动30 sec，使异丙醇与水层充分混合至能见到DNA絮状物； （9）10000 rpm离心1 min后，立即倒掉液体，注意勿将白色DNA沉淀倒出，将离心管倒立于铺开的纸巾上；
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法 Ampicillin (100 mg/ml) IPTG (24 mg/ml) X-Gal (20 mg/ml) LB培养基■组份浓度 100 mg/ml Ampicillin ■配制量 50 ml ■配制方法 1. 称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。 2. 加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。 3. 用0.22 μm滤器过滤除菌。 4. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃保存。 ■组份浓度 24 mg/ml IPTG ■配制量 50 ml ■配制方法 1. 称量1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。 2. 加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。 3. 用0.22 μm滤器过滤除菌。 4. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃保存。 ■组份浓度 20 mg/ml X-Gal ■配制量 50 ml ■配制方法 1. 称量1 g X-Gal置于50 ml离心管中。 2. 加入40 ml DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解后， 定容至50 ml。 3. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃避光保存。 ■组份浓度 1%（W/V）Tryptone，0.5%（W/V）Yeast Extract， 1%（W/V）NaCl ■配制量 1 L ■配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。 Tryptone 10 g Yeast Extract 5 g NaCl 10 g 2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 滴加5 N NaOH（约0.2 ml），调节pH值至7.0。 4. 加去离子水将培养基定容至1 L。 5. 高温高压灭菌后，4℃保存。
FTP服务器配置实验报告
F T P服务器配置实验报告 Prepared on 22 November 2020
实验报告 课程：计算机网络实验 实验名称： FTP服务器配置与管理 系别 : 电子信息工程系 实验日期 : 专业班级 : 03通信师 组别 : 第10组 实验报告日期 : 姓名 : 学号 : (40) (41) 报告退发 : ( 订正、重做 ) 第1页共 12 页 FTP服务器配置与管理 一.题目: FTP服务器配置与管理 二.环境: Sever2000 三.试验目的 1.掌握FTP服务的基本概念与工作原理 2.懂得安装FTP服务器的过程 3.配置与管理FTP服务器 四.试验内容及步骤 1.的安装，具体步骤如下： (1)运行“控制面板”中的“添加或删除程序”，点击“添加/ 删除Windows组件”按钮。 第 2 页共 12页 (2)在出现组件安装向导中，选择“Internet信息服务 （IIS）”，单击“下一步”开始安装，单击“完成”结 束。 第 3 页共 12 页 系统自动安装组件，完成安装后，系统在“开始”/“程序”/“管理工具”程序组中会添加一项“Internet服务管理器”，此时服务器的WWW、FTP等服务会自动启动。 2.设置FTP站点 第 4 页共 12 页 (1)使用IIS默认站点
①将制作好的主页文件（html文件）复制到 \Inetpub\ftproot目录，该目录是安装程序为默认FTP站点 预设的发布目录。 ②将主页文件的名称改为。IIS默认要打开的主页文件是 或，而不是一般常用的。 完成这两个步骤后，打开本机或客户机浏览器，在地址栏 中输入FTP服务器的 IP地址（）或主机的FQDN名字（前 提是DNS服务器中有该主机的记录），就会以匿名的方式 登录到FTP服务器，根据权限的设置就可以进行文件的上 传和下载了。 (2)添加新的FTP站点 ①打开“Internet信息服务窗口”，鼠标右键单击要创建 新站点的计算机，在弹出菜单中选择“新建”/“FTP站 点”，出现“FTP站点创建向导”，单击“下一步”继 续。 第 5 页共 12 页 ②输入FTP站点说明,单击下一步 第 6 页共 12 页 ③ 单击下一步 ④指定FTP输入主目录的路径(如选择新建文件夹),单击下一步 第 7 页共 12 页 ⑤设置访问权限为读取和写入,并单击下一步,完成FTP站点创建向导 第 8 页共 12 页 站点的管理 (1)本地管理 通过“开始”/“程序”/“管理工具”/“Internet服务管理 器”，打开如图9-1的“Internet信息服务”窗口，在要管 理的FTP站点上单击鼠标右键，选择“属性”命令，出现如下 图所示对话框。 第 9 页共 12 页 ①“FTP站点”属性页 IP地址：设置此站点的IP地址，即本服务器的IP地址。 如果服务器设置了两个以上的IP站点，可以任选一个。FTP 站点可以与Web站点共用IP地址以及DNS名称，但不能设置 使用相同的TCP端口。 TCP端口：FTP服务器默认使用TCP协议的21端口，(若端口号21以被配置,则需更改此端口，用户在连接到此站点时，
实训五 常用培养基的制备
实训五常用培养基的制备 目的要求熟悉培养基制备的基本程序，会制备常用的培养基，会测定并矫正培养基的pH。 仪器及材料高压蒸汽灭菌器、电热干燥箱、电炉、天平、量筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶、标准比色管、精密pH试纸、纱布、牛肉膏、蛋白胨、琼脂粉、氯化钠、氢氧化钠、脱纤绵羊血等。 方法与步骤培养基制备的基本程序配料→溶化→测定及矫正pH→过滤→分装→灭菌→无菌检验→备用。 (一)肉膏汤培养基 1．成分牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml。 2．制法将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠加水后，加热溶解。矫正pH至7.4～7.6，过滤分装。置高压蒸汽灭菌器内，121.3℃20min灭菌即成。 3．用途可供一般细菌生长，同时也是制作一般培养基的基础原料。 (二)营养琼脂培养基 1．成分肉膏汤1000ml，琼脂粉20～30g。 2．制法将琼脂粉加入肉膏汤内，煮沸使其完全溶解，矫正pH7.4～7.6，过滤分装于试管或三角烧瓶中，以121.3℃灭菌20min。可制成试管斜面、高层培养基或琼脂平板。 此培养基可供一般细菌的分离培养、纯培养，观察菌落特征及保存菌种等，也可作特殊培养基的基础。 (三)血液琼脂培养基将灭菌的营养琼脂冷至45～50℃,以无菌操作，加入5%～10%的无菌血液(或脱纤血)，然后倾注灭菌平皿或分装试管制成斜面。供营养要求较高的细菌分离培养，亦可供溶血性的观察和保存菌种用。 (四)半固体培养基肉汤培养基中加入0.3%～0.5%琼脂粉制成，用于菌种的保存或细菌运动性观察。 (五)肉渣汤(疱肉)培养基于每支试管中加入2～3g牛肉渣及肉膏汤5～6ml，液面盖以一薄层石蜡油，经121.3℃20～30min灭菌后保存冰箱备用。此培养基用于厌氧菌的培养，必须注意，此培养基在使用时，将肉渣培养基置水浴锅煮沸10min，以驱除管内存留的氧气。 (六)pH的测定与矫正 1．精密pH试纸法取精密pH试纸一条，浸入欲测的培养基中，半秒后取出与标准比色卡比较，如为酸性，滴加1mol/L氢氧化钠中和酸。在滴加1mol/L氢氧化钠后，应充分摇匀，再用试纸测定，直至调到pH在所需的范围内。 2．标准比色管法 (1)取与标准比色管大小一致的试管2支，按(实图5-1)每管内加入不同的溶液。①培养基5ml(对照管)；②标准比色管；③培养基5ml加0.02%酚红指示剂0.25ml；④蒸馏水管。 (2)对光观察比较两侧观察孔内颜色是否相同，培养基若为酸性(一般呈酸性)，则向③管中慢慢加0.1mol/L氢氧化钠，每滴一次，将试管内液体摇匀，直至③④两管
PDA培养基的配制及试管斜面制作
PDA培养基的配制及试管斜面制作 1.实验材料 1.1试剂材料 土豆，葡萄糖，琼脂，试管，试管架，天平，注射用硫酸链霉素，注射用青霉素钠，三角瓶，灭菌锅，电磁炉，超净工作台，烧杯，1mL移液器，培养皿 1.2PDA培养基配方 土豆（去皮）200g 葡萄糖20g 琼脂15-20g 蒸馏水1000mL pH 自然 2.实验方法与步骤 2.1称量和熬煮 将土豆去皮，按自己所需的量（例如配制1L）称取土豆，将土豆切成小块放入锅内，加入适量的蒸馏水，在电磁炉上加热至沸腾，30min后用4层纱布在大量杯上过滤，弃掉滤渣，滤液用蒸馏水补足1L。 2.2溶解 用天平称取20g葡萄糖加入滤液中，用玻璃棒搅拌，使其完全溶解。 2.3分装 称取8-10g琼脂，加入所用三角瓶中，然后将滤液分装到三角瓶中，每瓶500mL，用玻璃棒将琼脂搅匀。 2.4加棉塞 培养基分装完毕后，在三角瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性。 2.5包扎 加塞后，在棉塞外用两层报纸包裹，其外用橡皮筋包扎好，标记。 2.6灭菌 将配制完成的培养基，包好的平板及其他所需用品一起放入灭菌锅灭菌（见灭菌锅使用方法）。 3.试管斜面制作方法与步骤
3.1前两步同2.1，2.1步骤 3.2加热溶解 量取500mL滤液到1000mL的烧杯中，再加入8-10g的琼脂，用玻璃棒搅匀，放入微波炉缓慢加热溶解，加热其间注意不要让培养基溢出烧杯，不时用玻璃棒搅拌。 3.3分装 等琼脂溶解后，将培养基分装到事先准备好的试管中。分装量约占试管高度的1/4，管口尽量不要沾染培养基。 3.4加塞 培养基分装完毕后，在试管口上塞上棉塞或橡胶塞，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性。 3.5包扎 加塞后，试管7-9支捆用橡皮筋捆好，在塞外用两层报纸包裹，其外用橡皮筋包扎好，标记。 3.6灭菌 将包好的试管和其他所需灭菌物品一同放入灭菌锅灭菌。 3.7摆斜面 灭菌完成后，将试管拿出，在超净工作台下摆成斜面，根据自己需要选择合适的倾斜度。
植物常用培养基附加配制说明
备注：培养基和激素母液配制方法 （1）母液配制时，先向容量瓶中注入1/3定容体积的蒸馏水，再一一称取各种盐放入烧杯中溶解，装入容量瓶， 不得一次称取所有盐，混合溶解！在配制大量母液时，氯化钙最后加入。 （2）200×Fe盐溶液 称取1.39g FeSO4?7H2O溶于水（A液）；称取1.865 g Na2?EDTA溶于热水（B液）； 将A液缓慢倒入正在加热的B液中，加水接近250ml，煮沸，混合液颜色变深，冷却到室温，定容到250ml后,置于棕色试剂瓶内4℃保存。 （3）0.5mg/ml 2,4-D母液的配法 称取50mg 2,4-D，置于小烧杯内；加少量无水乙醇或95%乙醇使之完全溶解； 加水定容至100ml，4℃保存。如果出现沉淀，需要重新配置。 （4）0.5mg/ml α-NAA母液的配法 称取100mgNAA置于小烧杯内；用1N的KOH溶液溶解NAA；用水定容至200m l，4℃保存。 （5）0.5mg/ml 6-BA母液的配法 称取100mg 6-BA置于小烧杯中；加少量的浓盐酸，用玻棒研磨成糊状，再加入少量浓盐酸，使之完全溶解；用水稀释并定容至200ml，4℃保存。 （6）100mM乙酰丁香酮（As）的配制 称取196.2mg As，用5ml DMSO直接溶解，再加水定容至10ml，过滤灭菌后，分装入无菌小管，-20℃冰冻保存。使用前加入灭菌培养基。 （7） 0.5mg/ml KT和ABT的配法 称取50mg kenetin或ABT生根粉，先用少量1N KOH溶解，再用水稀释定容至100ml，4℃保存。 （8）其他附加物的溶解及配制 A、称取吗啉乙磺酸（MES）5g溶于水中，定容至10mL。4℃保存。 B、称取1g L-半胱氨酸(Cys) 溶于2mL 0.2mol/L或10%的NaOH溶液, 用蒸馏 水稀释定容至10mL，现用配制。4℃保存。 C、称取850mg硝酸银，用蒸馏水溶解后定容至100mL。4℃保存。 D、头孢霉素（cefotaxime）2500mg，用蒸馏水溶解后定容至10mL。4℃保存。 E、潮霉素（Hyg B），商品已溶解，筛选时一般加5、8、12mg/L梯度浓度。
Apache服务器配置实验报告
在Linux下配置Apache服务器 一、实验目的 完成本次实训，将能够: ●配置基本的Apache服务器 ●配置个人用户Web站点。 ●配置虚拟目录别名功能。 ●配置主机访问控制。 ●配置用户身份验证功能.。 ●配置基于IP地址的虚拟主机. 二、实验环境 1、RedHat Linux4AS. 2、Apache 2.0 三、实验内容 1.配置基本的Apache服务器 2.配置个人用户Web站点。 3.配置虚拟目录别名功能。 4.配置主机访问控制。 5.配置用户身份验证功能.。 6.配置基于IP地址的虚拟主机。 四、实验要求 在Linux操作系统下配置Apache服务器。 五、注意事项 1.在修配置文件下注意区分大小写、空格。 2.在每次重新开机后都必须启动Apachec服务器。 3.在每次修改完主配置文件后保存起来，必须重启Apachec服务器，如果不重启会 导致配置无效，最终导致实验失败。 六、实验步骤 1、检测是否安装了Apache软件包: A、首先为服务器网卡添加一个固定的IP地址。 B、在Web浏览器的地址栏中输入本机的IP地址，若出现Test Page测试页面（该 网页文件的默认路径为var/www/html/index.html）如下图1所示就说明Apache 已安装并已启动。
另一种方法是使用如下命令查看系统是否已经安装了Apache软件包： [root@rhe14~]# rpm –aq | grep httpd Httpd-suexec-2.0.52-9.ent Httpd-manual-2.0.52-9.ent System-config-httpd-1.3.1-1 Httpd-devel-2.0.52-9.ent 出现以上内容表明了系统已安装Apache软件包。 2、安装Apache软件包 超级用户（root）在图形界面下选择“应用程序”|“系统设置”|“添加/删除应用程序”命令，选择“万维网服务器”软件包组，在单击“更新”按钮就可以安装与Apache相关的软件包。 3、Apache的基本配置 （1）打开终端输入[root@rhe14~]# /etc/rc.d/init.d/httpd start //启动Apache 或者 [root@rhe14~]# apachectl start //启动Apache [root@rhe14~]# apachectl stop //停止Apache服务 [root@rhe14~]# apachectl restart //重启Apache服务 [root@rhe14~]# apachectl configtest //测试Apache服务器配置语法（2）在httpd.conf将Apache的基本配置参数修改、将一些注释的语句取消注释，或将某些不需要的参数注释掉。 （3）将包括index.html在内的相关网页文件复制到指定的Web站点根目下（var/www/html/index.html） （4）重启httpd进程 (5) 在Web浏览器下输入配置的ip地址出现如下图2，那表明基本配置成功了:
PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法 一、目的要求 1．学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。 2．学习并掌握棉塞的制作方法。 二、培养基的配制原理 培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多样，加上实训 和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，但不论是何种培养基，均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。不同微生物对pH值要求不一样，所以配制培养基时，还应根据不 同微生物对pH值的要求，将培养基调到合适的pH值范围。 三、实训材料和用具 琼脂，可溶性淀粉，葡萄糖，10﹪NaOH，10﹪HCl，1mol／L NaOH，lmol／L HCl，KNO3，NaCl，K2HPO4·3H20，MgSO4·7H20，FeSO4·7H2O；试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻璃棒，天平，牛角匙，PH试纸，棉花，牛皮纸，记号笔，纱布， 四、操作方法与步骤 (一) 培养基的配制 PDA培养基的配制其配方如下：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000mL，pH值自然。 (1)称量和熬煮药品实际用量计算后，按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小 块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20－30min，用可用2层纱布趁 热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。 (2)加热溶解把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g（提前搞碎），然后放 在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再 补充水分至所需量。 (3)分装按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用 三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。 分装量：固体培养基约为试管高度的1／5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超 过其容积的一半为宜；半固体培养基以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。 (4) 加棉塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试 管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。 (5)包扎加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防 止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。 (二) 棉塞的制作 棉塞的作用有二：一是防止杂菌污染；二是可过滤空气，保证通气良好，并可减缓培养基
常用细菌培养基配方
常用抗生素 氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml） 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml） 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 甲氧西林（methicillin）（100mg/ml） 溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。 卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml） 溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml） 溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 链霉素（streptomycin）（50mg/ml） 溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml） 溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 四环素（tetracyyline）（10mg/ml） 溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨10g 酵母提取物5g 氯化钠10g 如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。(实验室一般都不调PH) SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨20g 酵母提取物5g 氯化钠0.5g 1 mol/L 氯化钾2.5ml
web服务器的配置实验报告doc
web服务器的配置实验报告 篇一：计算机网络实验报告——Web服务器的配置 实验2 web服务器配置 一、实验目的： 掌握如何使用windows XX server的IIS5.0配置出web 服务器 二、实验内容： 1、创建一个web站点，并且可以实现在别人的计算机上访问该站点 2、使用不同的ｉｐ建立多个站点 3、在一个站点下建立多个子站点（使用虚拟目录实现） 4、在同一个套接字（即ip地址+端口）上建立多个站点（使用加主机头名方法实现） 5、对站点进行安全管理（如浏览权限、帐号的使用、ｉｐ地址的设定） 三、实验要求： 一定要保证让别人正常的访问你建立的站点，并使实验结果达到预期的目的！ 四、实验步骤： 1. 使用当地IP地址建立web站点 （1）准备工作： ①关闭Windows 防火墙
实验中，为了我们所建的站点能够被成功访问，先将Windows 防火墙关闭。如图： ②IIS功能设置 控制面板\所有控制面板项\程序和功能---“打开或关闭windows所有功能”： 出现了安装Windows功能的选项菜单，在“Internet信息服务”中手动选择需要的功能，如下图： ③下载“花生壳软件”到本地，申请免费域名mqqfhg。 这样，完成了前期的所有准备工作，开始进行web服务器的建设。 （2）开始建立web站点 ①创建web站点“酒窝” 打开“控制面板”——“管理工具”—“ Internet 信息服务(IIS)管理(本文来自：小草范文网:web服务器的配置实验报告)器”——右击“网站——“添加网站——选择“IP地址”及“物理路径”： 篇二：实验六web服务器配置实验报告 XX-XX学年第一学期课程实验报告课程名称：计算机网络 实验名称： 篇三：Web服务器的配置实验报告 实验5 Web服务器的配置
常用培养基的配制
常用培养基的配制 （一）营养琼脂培养基 【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基基础之用。 【成分】牛肉膏 3g NaCl 5g 蛋白胨 10g 琼脂 20g 【pH值】7.2±0.2 【制法】上述成分称取38g加蒸馏水1000ml，经121.3℃ 30min高压灭菌备用。 （二）蛋白胨水培养基 【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。 【成分】蛋白胨 10g 氯化钠 5g 【pH值】7.6 【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中，过滤，分装于试管，每管2～3ml，经121.3℃20min高压灭菌备用。 （三）半固体培养基 【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H抗原位相变异试验等。 【成分】蛋白胨 10g 氯化钠 5g 琼脂 2.5～3g 【pH值】7.6 【制法】上述成分加入1000ml蒸馏水中，加热溶解，分装于试管，每管3～4ml，经121.3℃ 20min高压灭菌备用。 （四）营养肉汤培养基 【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等，也可用于消毒效果的测定。 【成分】蛋白胨 10g 氯化钠 5g 牛肉粉（牛肉浸汁） 3g 【pH值】7.2±0.2 【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中，分装小试管，每管2～3ml，经121.3℃ 20min 高压灭菌备用。 （五）葡萄糖蛋白胨水培养基 【用途】供甲基红试验及V-P试验之用。 【成分】蛋白胨5g 葡萄糖5g K2HPO4 (K2HPO4·3H2O) 5g (0.65g) 【pH值】7.0～7.2 【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中，过滤，分装试管，每管2～3ml，经112.6 ℃ 20min高压灭菌备用。 （六）伊红美蓝培养基（EMB培养基）
培养基的制备
培养基的制备 一、配制原则和种类 （一）培养基配制原则 １、培养基：培养基是提供食用菌等生物生长发育所需的营养与特定环境条件的基质，如蘑菇菌是有机营养型中的草腐生菌。制备培养基不仅要考虑它所需要的含碳化合物、含氮化合物、矿物盐类、生长因子，还要考虑水与pH环境，同时还应考虑它们培养方式是固体培养还是液体培养。因此，可以把按菌类生长发育需要比例配制的灭菌营养基质，称为培养基。换言之，培养基必须具备三个条件：含有菌株生长发育所需要的营养物质；具有菌类生长环境条件；经过灭菌，并保持无菌状态。 ２、培养基的选择：在整菌种制备过程中，从母种到原种、栽培种，各个阶段的目的要求有所不同，所选用的培养基的配比也应有所区别。一般母种初生菌丝较嫩弱，分解养分能力差，要求营养丰富、完全，氮源、维生素的比例应高。须选用易于被菌丝吸收利用的物质，如葡萄糖、蔗糖、马铃薯、蛋白胨、无机盐类及生长素等为等而原种、栽培种所需数量较多，且菌丝分解能力强，可利用大量农作物秸秆、粪草、棉籽壳、麸皮、米糠等原料作为培养基。 （二）培养基的种类 １、根据营养物质的来源，可以把培养基分炎天然培养基、半合成培养基和合成培养基。 （１）天然培养基天然培养基是指用化学成分还不清楚或化学成分不恒定天然有机物配制而成的培养基，如各种农副产品及其下脚料──小麦、大豆、玉米粉、麸皮、米糠、作物秸秆、木屑、棉籽壳、甘蔗渣等，以及动植物组织的浸出液──牛肉膏、肉汤、马铃薯汁、麦芽汁、豆芽汁等都可以用来配制天然培养基，这种培养基来源广，成本低，营养丰富，适合于在生产上大规模培养菌类使用，但这些天然有机物质因产地、品种、生长期的不同，化学成分不能宣。每批成分也不稳定，不宜用来做精细的科学实验。以分离驯化食用菌培养基（２）半合成培养基为了促进食用菌菌丝的生长发育，常在天然培养基中添加适量的无机盐类，或在合成培养基中添加适量的某些天然有机物，就成为半合成培养基。这类培养基种类繁多，应用广泛，也是生长菌种和实际栽培最常用的培养基。 （３）合成培养基是指采用化学成分已知的有机物（碳水化合物、含氮化合物、有机酸类）或无机物配制而成的培养基。这类培养基组成和含量明确，价格较贵，一般用于在实验室范围内做有关营养、代谢、菌种鉴定等有关于食用菌的生理生化研究。 ２、根据培养基制成后的物理状态，可将培养基分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。 （１）液体培养基根据食用菌所需的营养物质，扫一定比例配成营养液，叫液体培养基。液体培养基可进行营养源的筛选实验，以及生理生化方面如酶活力等研究，应用液体培养基生产的菌种也可在生产中进行使用。 （２）固化培养基将各种营养成份按比例配制成营养液后，加入适量固化剂，如琼脂，即可配成固化培养基。利用这种斜面试管可保藏及扩大菌种，同时亦可制成各种平皿固化培养基分离菌种。 （３）固体培养基利用各种富含纤维素和木质素的农林废弃物如木屑、棉籽壳、秸秆、玉米蕊等作为主要原料，再加入适量的米糠或麸皮和无机盐类制成固体培养基。该培养基可作为二、三级菌种生产用的培养基，也可以用它制成发酵草粉保藏菌种用的培养基。 二、一级种培养基 一级种又称母种，其培养基一般用试管作为容器，所以又称试管斜面培养基，这类培养
(完整版)PDA培养基的配方及配制方法
PDA培养基的配方及配制方法 PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。它属于固体培养基、半合成培养基。PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。 PDA培养基的配方 土豆 200g 葡萄糖 20g 琼脂 15～20g 水 1000mL pH值自然 PDA培养基的配制 (1)称量和熬煮 按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。 (2)加热溶解 把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。 (3)分装 按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。 分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
(4)加棉塞 培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。 (5)包扎 加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
实验一常用器皿包扎与培养基的配制和灭菌
实验一常用器皿包扎与培养基的配制和灭菌 一、实验目的 1学会常用器皿包扎方法 2学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤 3学会实验室灭菌锅的使用方法 二、常用器具和仪器 试管(testtube)，德汉氏小管(Durhamtube)，玻璃吸管 (glasspipette)，吸器，微量加样器(micropipette)，吸嘴(tip)，培养皿(petri dish)，三角瓶(erlenmeyer flask)，接种铲(inoculatingshovel),玻璃涂布器(glassspreade)，接种环(inoculatingloop)，接种钩(inoculating hook)，接种针(inoculating needle)，小塑料离心管(Eppendorf tube)，滴瓶(dropper bottle )，双层瓶(double bottle)，酒精灯⑻ cohol burner)，煤气喷头(coal gas sprinklerhead，试剂瓶，量筒，烧杯，温度计，石棉网，漏斗，烘箱，卧式灭菌锅，手提式灭菌锅，无菌操作台/ 室，过滤除菌设备，厌氧操作设备，小型发酵罐，离心机，培养箱/摇床，冷冻干燥机，蒸馏水器，超声波清洗仪，磁力搅拌器。 三、玻璃器皿的包装 1、培养皿的包装方法一：用旧报纸密密包紧，一般以5-8 套培养皿作一包。包好后用干热或湿热灭菌(见无菌操作技术)。 方法二：将培养皿放入金属(不锈钢)筒内，干热灭菌。金属筒配有盖子，内部还有一个可以放培养皿的带底框架。框架可以从筒内提出，以便装取培养皿。 包好的培养皿 金属筒和内部的框架 塑料培养皿架 2、吸管的包装
培养基的制备程序
培养基的制备程序不同类型培养基制备的程序也不尽相同。但一般培养基的程序主要可分为：配料、溶化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。 （一）配料 按培养基处方准确称取各种成分，先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水，再加入各种成分，以防蛋白胨等粘附于瓶底，然后再以剩余的水冲洗瓶壁。 （二）溶化 将各种成分混匀于水中，最好以流通蒸气溶化半小时，如在电炉上溶化应随时搅拌，如有琼脂成分时更应注意防止外溢。溶化完毕，补足失去的水分。 （三）矫正pH 1.pH测定 取与标准管同口径的试管（通常用华氏试管）3支，于第1、3管各加入欲测定pH的的培养基5ml，并于第一管中加入0.2g／L的酚红0.25ml作为测定管，混匀；于第2管加入蒸馏水5ml，第4管为pH标准比色管。 2.pH的校正 若测定管过酸或过碱可用0.1mol／L氢氧化钠或0.1mol／L盐酸溶液矫正，直至颜色与标准管相同为止，加碱或加酸时要精确缓慢，每加1滴后要充分混匀，比色后再加第2滴（有时仅加半滴）准确记录加入的量。 3.计算 设5ml培养基矫正pH至7.4时需0.1mol／L氢氧化钠0.15ml，现有培养基4990ml，需加氢氧化钠的量可按下列方法计算：5∶4990＝0.15∶X X＝0.15×4990/5＝149.7（ml） 如将此0.1mol／L的氢氧化钠改用1mol／L的氢氧化钠时，则需14.9ml即可。 （四）过滤澄清 培养基配制后一般都有沉渣或混浊出现，需过滤成清晰透明后方可使用，常用的过滤方法如下： 1.液体培养基 液体培养基必须清晰，以便观察细菌的生长情况，常用滤纸过滤，亦可在加热前加入用水稀释的鸡蛋白（1000ml培养基用1个鸡蛋白）在100℃加热后保持60～70℃40～ 60分钟，使其不溶性物质附于凝固的蛋白上而沉淀，然后再用虹吸法吸出上清液或以滤纸过滤。 2.固体培养基
36种常用微生物培养基配制汇总
36 种微生物常用培养基配制 1. 牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养） 牛肉膏3g,蛋白胨10g, NaCI 5g ,水1000mL pH7.4?7.6。 2. 高氏1 号培养基（用于放线菌培养） 可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCI 0.5g ，K2HPO4?3H2O0.5g，MgS04?7H200.5gFeS04?7H200.01,水1000mL pH7.4?7.6。配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。 3. 马丁氏（Martin ）培养基（用于从土壤中分离真菌） K2HPO41g MgSO4?7H2O0.5g蛋白胨5g,葡萄糖10g, 1/3000 孟加拉红水溶液100mL水900mL自然pH, 121C湿热灭菌30min。待培养基融化后冷却55?60C时加入链霉素（链霉素含量为30 卩g/mL）。 4. 马铃薯培养基（PDA）（用于霉菌或酵母菌培养） 马铃薯（去皮）200g，蔗糖（或葡萄糖）20g，水1000mL配制方法如下： 将马铃署去皮，切成约2cm2的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸 30mi n,注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加
糖，再补足至1000mL自然pH,霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。 5. 察氏培养基（蔗糖硝酸钠培养基）（用于霉菌培养） 蔗糖30g, NaNO32g, K2HPO41g, MgSO4?7H2O0.5,gKCl 0.5g, FeSO4?7H2O0.1,水1000mL pH7.0?7.2。 6. Hayflik 培养基（用于支原体培养） 牛心消化液（或浸出液）1000mL,蛋白胨10g,NaCI 5g,琼脂15g, pH7.8?8.0，分装每瓶70mL 121C湿热灭菌15min,待冷却至80C 左右，每70mL中加入马血清20mL 25%羊酵母浸出液10mL 15醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液（20万单位以上）0.5mL ,以上混合后倾注平板。 *注意：醋酸铊是极毒的药品，需特别注意安全操作。 7. 麦氏（McCLary）培养基（醋酸钠培养基） 葡萄糖0.1g, KCl 0.18g ，酵母膏0.25g，醋酸钠0.82g，琼脂 l.5g，蒸馏水l00mL。溶解后分装试管，1l5 C湿热灭菌15min 8. 葡萄糖蛋白胨水培养基（用于V.P.反应和甲基红试验） 蛋白胨0.5g，葡萄糖0.5g, K2HPO4 0.2g,水100mL pH7.2,
(完整版)《ftp服务器的配置》实验报告
实验报告 课程名称计算机网络基础实验项目 FTP服务器的配置 专业班级 0906603 姓名学号 27 指导教师陈伟宏老师成绩日期2011.11.12 一、实验目的 掌握如何在局域网内配置FTP服务器。 二、实验设备和环境 局域网内多台个人计算机、Windows 2003操作系统。 三、实验内容 1、安装IIS或Serv-U； 2、配置及管理FTP服务器； 3、使用FTP服务。 四、实验过程 1、安装IIS V5.1 for 2003 截图如下： 点“详细信息”
选择Internet 信息服务(IIS),点详细信息.再选择“文件传输协议（FTP）服务” 2、FTP服务器的配置 启动IIS信息管理：控制面板——管理工具——IIS信息管理，选择FTP站点。右键新建FTP站点。
3.右击FTP站点的默认FTP站点的属性设置主目录F:\学习资料 4、设置安全账户为只允许匿名连接
5、测试本地ftp站点：在浏览器中输入ftp://192.168.137.3访问结果如下：
五、实验心得 这次试验为FTP服务器的配置。总的来说，由于上次已经做过web服务器的配置，而ftp的配置跟它大致相同，所以过程相对来说还是比较顺利，出现的问题也不多。 不过在实验过程中，自己只是按照老师的《FTP服务器的配置示例》一步步去做，实验虽然很成功地完成了，但在实验过程中我感觉自己并没有完全的、真正的“消化”理解好其中的含义，于是又反复地理解了一下各个步骤的原理。 通过这次实验理解了FTP服务器的工作基本原理，以及匿名访问和非匿名访问的一些相关设置，文件具有长传和下载的权限，对文件安全性的控制等等。 同时，也让我又学会了一种传送文件的新方法：只需要通过构建局域网，然后通过FTP就可以实现资源共享啦。感觉非常有用。 能把知识用到实处才是真正的学好了知识，这也是我们做实验的真正目的。以后我会继续努力提高自己的动手操作能力，把知识付诸于实践，同时在实践中更加深刻地理解知识。
FTP服务器配置实验报告
F T P服务器配置实验报 告 Company Document number：WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT
实验报告 课程：计算机网络实验 实验名称： FTP服务器配置与管理 系别 : 电子信息工程系 实验日期 : 专业班级 : 03通信师 组别 : 第10组 实验报告日期 : 姓名 : 学号 : (40) (41) 报告退发 : ( 订正、重做 ) 第1页共 12 页 FTP服务器配置与管理 一.题目: FTP服务器配置与管理 二.环境: Sever2000 三.试验目的 1.掌握FTP服务的基本概念与工作原理 2.懂得安装FTP服务器的过程 3.配置与管理FTP服务器 四.试验内容及步骤 1.的安装，具体步骤如下： (1)运行“控制面板”中的“添加或删除程序”，点击“添加/ 删除Windows组件”按钮。 第 2 页共 12页 (2)在出现组件安装向导中，选择“Internet信息服务 （IIS）”，单击“下一步”开始安装，单击“完成”结 束。 第 3 页共 12 页 系统自动安装组件，完成安装后，系统在“开始”/“程序”/“管理工具”程序组中会添加一项“Internet服务管理器”，此时服务器的WWW、FTP等服务会自动启动。 2.设置FTP站点 第 4 页共 12 页 (1)使用IIS默认站点
①将制作好的主页文件（html文件）复制到 \Inetpub\ftproot目录，该目录是安装程序为默认FTP站点 预设的发布目录。 ②将主页文件的名称改为。IIS默认要打开的主页文件是 或，而不是一般常用的。 完成这两个步骤后，打开本机或客户机浏览器，在地址栏 中输入FTP服务器的 IP地址（）或主机的FQDN名字（前 提是DNS服务器中有该主机的记录），就会以匿名的方式 登录到FTP服务器，根据权限的设置就可以进行文件的上 传和下载了。 (2)添加新的FTP站点 ①打开“Internet信息服务窗口”，鼠标右键单击要创建 新站点的计算机，在弹出菜单中选择“新建”/“FTP站 点”，出现“FTP站点创建向导”，单击“下一步”继 续。 第 5 页共 12 页 ②输入FTP站点说明,单击下一步 第 6 页共 12 页 ③ 单击下一步 ④指定FTP输入主目录的路径(如选择新建文件夹),单击下一步 第 7 页共 12 页 ⑤设置访问权限为读取和写入,并单击下一步,完成FTP站点创建向导 第 8 页共 12 页 站点的管理 (1)本地管理 通过“开始”/“程序”/“管理工具”/“Internet服务管理 器”，打开如图9-1的“Internet信息服务”窗口，在要管 理的FTP站点上单击鼠标右键，选择“属性”命令，出现如下 图所示对话框。 第 9 页共 12 页 ①“FTP站点”属性页 IP地址：设置此站点的IP地址，即本服务器的IP地址。 如果服务器设置了两个以上的IP站点，可以任选一个。FTP 站点可以与Web站点共用IP地址以及DNS名称，但不能设置 使用相同的TCP端口。 TCP端口：FTP服务器默认使用TCP协议的21端口，(若端口号21以被配置,则需更改此端口，用户在连接到此站点时，