最新大学常规微生物实验注意事项及思考题

最新大学常规微生物实验注意事项及思考题
最新大学常规微生物实验注意事项及思考题

实验一细菌涂片的制备及革兰氏染色

1、制备细菌染色标本时应注意什么?

涂片不要太厚,要均匀,固定的时候一定按照要求,快速,染色脱色时间要控制好2涂片

2、固定的意义何在?固定时应注意什么问题?

固定目的是杀死细菌并使细菌粘附在玻片上,便于染料着色,常用加热法,即将细菌涂片膜向上,通过火焰3次,以热而不烫为宜,防止菌体烧焦、变形。此制片可用于染色。

3、革兰氏染色的原理及染色成败的关键?

机制:结果为阳性(紫色)和阴性(红色)两大类,与细菌细胞壁的结构组成有关。细菌经结晶紫初染和碘液媒染之后,所有细菌都染上不溶于水的结晶紫与碘的复合物,呈深紫色;阴菌的细胞壁含脂类较多,当以95%乙醇脱色时,脂类被乙醇溶去,而肽聚糖少,且交联疏松,不易收缩,在细胞壁中形成的孔隙较大,复合物极易被乙醇溶解洗脱,最后被红色的染料复染成红色;阳菌与阴菌相反,复合物不能脱出,经红色染料复染后仍为紫色。{(碱)结晶染色→碘媒染→酒精脱色→①可脱为G+②不脱为G—}

关键:革兰氏染色四大基本步骤: 晶紫初染 液媒染 醇脱色 黄复染 中乙醇脱色是关键 为如果脱色过度,有可能会使革兰氏阳性菌呈假阴性 果脱色不够,有可能使革兰氏阴性菌呈假阳性

实验二培养基的制备

1、为什么在校正培养基pH时,少量培养基时用0.1摩尔每升氢氧化钠,而大量

时用1摩尔每升氢氧化钠?

少量培养基在校正时,需要的氢氧化钠少,所以用浓度底的校正的结果会更准确。而大量的就需要大量的,如果还用浓度低得话,结果会准确,但是工作量极大,而换1mol/L的话,结果误差不会很大,综合考虑:在校正大量的培养基时,应使用浓度高的。

2、为什么肉汤培养基在高压灭菌之前ph要略调高些?

牛肉膏中有些物质在加热后会分解出酸性物质导致pH下降。因此初始pH 应比需要值高0.2左右。

3、试述普通肉汤和琼脂培养基的主要用途?

琼脂培养基是在实验室做实验时专门配置的,一般植物源琼脂培养基适用于培养真菌一类的微生物;动物源琼脂培养基适用于细菌类微生物培养。动物源琼脂培养基主要成分与肉汤差不多,只是培养基可以根据实验的要求进行调整营养成分,以适应实验要求。琼脂培养基一定会成“冻”,肉汤不一定。

实验三细菌分离培养、移植及培养特性观察

注意事项

1、接种环必须做得圆整平滑,使用前后须烧灼灭菌。

2、接种培养基时应严格无菌操作,要尽一切可能防止外界微生物的进入。

3、选择适宜的培养基,如果培养基选择不当,则材料中的细菌就可能难以分离。

4、要注意记录好接种名称及时间。

思考题

1、分离培养的目的是什么?何谓纯培养?

分离培养的目的是:主要是在含多种细菌的病料或培养物中挑选出某种细菌。

在分离培养时应注意:选择适合于所分离细菌生长的培养基、培养温度、气体条件等。纯培养:把从一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖而得到的后代,称纯培养。

2、在挑取固体培养物上的细菌作平板分区划线时,为什么在每区之间都要将接

种环上剩余的细菌烧掉?

在对下一个区划线之前灼烧接种环,可以杀死接种环上剩余的细菌,这样,当接种环再从上个区拉出一条线的时候,环上的细菌数目就少了很多,经过这样的灼烧、划线,环上的细菌数目逐渐减少,最终达到分离出单菌落的目的。

3、培养皿培养时为什么要倒置?

原因 1:防止凝结在皿盖上的水蒸气流到培养基表面导致染菌!

2:有利于菌种利用培养基营养,加快生长速度!

实验四细菌的生化实验

1.解释所做生化试验的原理

(1)细菌生化试验各种细菌所具有的酶系统不尽相同,对营养基质的分解能力也不一样,因而代谢产物或多或少地各有区别,可供鉴别细菌之用。用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物,从而鉴别细菌的种属,称之为细菌的生化反应。

(2)糖(醇)类发酵试验不同的细菌含有发酵不同糖(醇)的酶,因而发酵糖(醇)的能力各不相同。其产生的代谢产物亦不相同,如有的产酸产气,有的产酸不产气。酸的产生可利用指示剂来判定。在配制培养基时预先加入溟甲酚紫[P HS . 2 (黄色)一6 . 8 (紫色)] ,当发酵产酸时,可使培养基由紫色变为黄色。气体产生可由发酵管中倒置的杜氏小管中有无气泡来证明。

(3)甲基红试验(该试验简称MR 试验)很多细菌,如大肠杆菌等分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸再被分解,产生甲酸、乙酸、乳酸等,使培养基的pH 降低到4 . 2 以下,这时若加甲基红指示剂呈现红色。因甲基红指示剂变色范围是pH4 . 4 (红色)一pH6 . 2 (黄色)。若某些细菌如产气杆菌,分解葡萄糖产生丙酮酸,但很快将丙酮酸脱梭,转化成醇等物,则培养基的pH 仍在6 . 2 以上,故此时加入甲基红指示剂,呈现黄色。

(4)大分子物质代谢实验.靛基质(口引睬)试验某些细菌,如大肠杆菌,能分解蛋白质中的色氨酸,产生靛基质(叫睬),靛基质与对二甲基氨基苯甲醛结合,形成玫瑰色靛基质(红色化合物)。硫化氢试验某些细菌能分解含硫的氨基酸(肌氨酸、半肌氨酸等),产生硫化氢,硫化氢与培养基中的铅盐或铁盐,形成黑色沉淀硫化铅或硫化铁。为硫化氢试验阳性,可借以鉴别细菌。明胶液化实验某些细菌具有胶原酶,使明胶被分解,失去凝固能力,呈现液体状态,是为阳性。淀粉水解试验(在紫外诱变中做,本实验不做)细菌对大分子的淀粉不能直接利用,须靠产生的胞外酶(淀粉酶)将淀粉水解为小分子糊精或进一步水解为葡萄糖(或麦芽糖),再被细菌吸收利用,细菌水解淀粉的过程可通过底物的变化来证明,即用碘测定不再产生蓝色。

(5)有机酸盐及氨盐利用试验柠檬酸盐利用试验柠檬酸盐培养基系一综合性培养基,其中柠檬酸钠为碳的唯一来源。而磷酸二氢按是氮的唯一来源。有的细菌如产气杆菌,能利用柠檬酸钠为碳源,因此能在柠檬酸盐培养基上生长,并分解柠檬酸盐后产生碳酸盐,使培养基变为碱性。此时培养基中的溟廖香草酚蓝指示剂由绿色变为深蓝色。不能利用柠檬酸盐为碳源的细菌,在该培养基上不生

长,培养基不变色。2、生化试验在细菌鉴定中的作用和意义生化实验在细菌的鉴定中意义很大,因为要想确定一种菌具体属于哪一种就要通过一系列的生化实验几菌落形态和显微观察来确定,生化实验是非常重要的一部分. 但其实意义不是很大,一般是根据《伯氏细菌手册》看的,不过现在基本上都是用16S RNA 来鉴定,要精确一些。

实验五药物敏感试验

1、圆纸片药物敏感试验操作注意事项

药物不能靠的太近,应尽量均匀分布在纸片上。

2、试述药物敏感试验的意义

药物敏感试验是为了对临床标本中分离的菌株选择何种药物进行治疗有效而进行的一种试验。常用的有纸片扩散法和微量稀释法。根据试验结果可以判断何种药物对该菌株治疗有效(即敏感),何种药物对该菌株治疗无效(即耐药)。

实验六血凝及血凝抑制试验

1、病毒凝集红细胞是不是一种特异的抗原体反应?为什么?

不是, 些病毒具有凝集红细胞的能力,不需要与抗体结合即可以凝集血细胞,是非特异性的。 有一些病毒,当与抗体结合后,可以引起红细胞凝集反应,称为血凝试验,可用于特异性检查抗原或抗体。

2、HI试验是不是特异的抗原抗体反应?为什么?

是,因为HI实验本身就是一种测定抗原或抗体的技术,抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。这种反应即可在机体内进行,也可以在机体外进行。抗原抗体反应的过程是经过一系列的化学和物理变化,包括抗原抗体特异性结合和非特异性促凝聚两个阶段,以及由亲水胶体转为疏水胶体的变化

实验七凝集试验

注意事项

1、每次试验应设标准阳性血清、标准阴性血清和生理盐水对照。

2、抗原保存在2~8℃,用前置室温30~60min,使用前摇匀,如出现摇不散的凝块,不得使用。

3、被检血清必须新鲜,无明显的溶血和腐败现象。

4、平板凝集反应温度最好在3~5min内记录结果,如反应温度偏低,可于5~8min内判定。

5、平板凝集反应适用于普查初筛,筛选出的阳性反应血清,需做试管凝集试验,以试管凝集的结果为被检血清的最终判定.

6、结果判为可疑时,隔2~3周后采血重做。阳性畜群,重检时仍为可疑,可判为阳性。对同群中既无临床症状又无凝集反应阳性者,马、猪重检仍为可疑,判阴性;牛、羊重检仍为可疑者,可判为阳性,或以补体结合反应核对。

思考题

1、平板凝集试验和试管凝集试验的原理、操作方法及结果判定。

原理: 1.平板凝集试验颗粒性抗原在体外一定条件下(有电解质存在,pH、温度恰当)与相应抗体相遇,二者发生特异反应,出现肉眼可见的凝集物。参加凝集反应的抗原称为凝集原,而相应的抗体称为凝集素。

2.试管凝集试验试管法直接凝集试验是将已知的颗粒性抗原悬液定量

地与一系列倍比稀释的待检血清等量混合,静置一定时间后,根据各管的凝

集程度,判断待检血清中抗体的效价,常用于半定量检测。操作方法:

⑴加样每份血清用4支试管,另取1支为生理盐水对照,先加生理盐

水,然后以1ml注射器吸取待检血清0.2ml加入第1管充分混匀,吸1.5mL 弃之,再吸0.5mL加入第二管,混匀后加入第三管,依次至第4管,混匀后弃0.5mL。第5管不加血清,加0.5mL生理盐水、

⑵加抗原各管加入以生理盐水稀释20倍的布氏杆菌试管抗原0.5mL。

⑶感作各管加完后震荡,将其置37℃恒温箱作用4小时,拿出置室温

18-24小时,观察结果。结果判定:

++++: 100%菌体凝集,液体全透明、菌体伞状沉淀。

+++:75%菌体凝集,液体略混浊,菌体大部分呈伞状沉淀。

++:50%菌体凝集,液体不甚透明,管底有明显的凝集沉淀。

+:25%菌体凝集,液体不显透明,管底有少量颗粒沉淀。

-:阴性,液体不透明,管底无凝集,有时有少量沉淀摇之均匀混浊。

以出现“++”以上凝集的最高血清稀释倍数为凝集价。

人和大家畜凝集价1:100以上为阳性,猪、羊、小家畜1:50以上为阳性;大家畜1:50、小家畜1:25为可疑。可疑的半个月后重检,仍可疑,按具体情况而定(阳性群,判阳性;阴性群,判阴性)。

3、影响凝集试验的因素主要有哪些?

1 温度。温度影响酶的活性

2 时间。随着时间的延长细胞聚集程度加大

3 反应底物

4 细胞类型

5 反应培养板的质量

6 人为因素

4、凝集试验中为什么要设阳性、阴性血清及抗原对照?

某此细菌或病毒当制成细菌或病毒悬液时很不稳定,在没有特异性抗体存在下,亦可发生凝集,谓之自凝。某些理化因素亦可引起非特异性凝集,pH降至3.0以下时, 即可起抗原悬液的自凝, 称为酸凝集。因此,试验时必须设置阳性血清、阴性血清和抗原等对照是为了排除自凝干扰。。

实验八沉淀试验

注意事项

1、倒琼脂板时,要求均匀、平整、薄厚一致,无气泡。

2、琼扩试验打孔时不要把琼脂层与平皿脱离,孔的边要圆整光滑,边缘不要破裂,要补底处理。

3、滴加试剂时不能产生气泡而影响试验结果。

4、加样时每加完一个样品必须更换滴头。

思考题

1、环状沉淀试验和琼脂扩散沉淀试验的实验原理是什么?操作时应注意事项是

什么?可溶性抗原与相应抗体结合,在有适量电介质存在下,经过一定时间,形成肉眼可见的沉淀物,称为沉淀试验。沉淀反应的抗原可以是细菌的外毒素、内毒素、菌体裂解液、病毒的可溶性抗原、组织渗出液、多糖、蛋白质、类脂等。

测定时将加热溶化的琼脂或琼脂糖浇至玻片上,等琼脂凝固后,打多个小孔,

将抗原和抗体分别加入小孔内,使抗原和抗体在琼脂板上相互扩散。当二个扩散圈相遇,如抗原和抗体呈特异性的结合且比例适当时,将会形成抗原抗体复合物的沉淀,该沉淀可在琼脂中呈现一条不透明的白色沉淀线。

2、琼脂扩散沉淀试验结果为什么有时会出现沉淀带完全交叉现象?

若二孔中抗原不同,当抗血清中分别含有与抗原相应的抗体时,则出现沉淀带完全交叉现象

3、琼脂扩散沉淀试验在实际中的应用价值?

本试验主要用于检测标本中各种免疫球蛋白和血清中各种补体成分的含量,敏感性很高。通过该试验,用特异性抗体鉴定抗原,或反之用已知抗原鉴定抗体。

实验九:荧光抗体试验

注意事项

1、如果怀疑是急性猪瘟,可用活体采扁桃体进行荧光染色。

2、待检的组织病料(扁桃体、肾、淋巴结等)必须新鲜,如不能及时检查,应冷冻保存。

3、制备标本的载玻片越薄越好,应无色透明,用前洁净处理并用绸布擦净;切片或组织触片尽可能薄,太厚不易观察而影响结果的判定。

4、对含病毒较低的病理组织需先在细胞培养上培养一段时期后再用荧光抗体检测病毒抗原,可提高检出率。

5、观察标本片前荧光显微镜一般需预热15分钟,在暗室内进行,荧光显微镜安装调试后,最好固定在一个地方加盖防护,不再移动。

6、标本染色后应立即观察,放置时间过久荧光会逐渐减弱,如不能及时观察可将标本放在聚乙烯塑料袋中于4℃保存,可延长荧光保持时间。

7、不能长时间在同一个视野下观察,一般标本在高压汞灯下照射超过3min即有荧光减弱现象。

思考题

1、荧光抗体染色的基本原理及实验结果的判定。

基本原理:荧光抗体技术就是用不影响抗体活性的荧光素对抗原或抗体进行标记,当标记物与相应的抗原或抗体结合后,就会形成带有荧光素的复合物,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源激发的特定波长的光照射,荧光素就会发出明亮的荧光,这样就可以对相应的抗原或抗体分析示踪。

结果判定:

黄绿色闪亮荧光++++

黄绿色的亮荧光+++

黄绿色荧光较弱++

仅有暗淡的荧光+

无荧光-

2、请举例说明该技术在动物疫病诊断中的作用?

用猪瘟荧光抗体染色检测猪瘟病毒,特异性强、准确率高,

实验十、酶联免疫吸附试验

注意事项

1. 从冷藏环境中取出的试剂盒应平衡至室温后方可使用。

2. 未使用的预包被板条应置于封口袋,2~8℃保存。

3. 浓缩液用蒸馏水或超纯水稀释,若发现有出现结晶,请放置37℃至溶解后使用。

4. 滴加试剂时,应先摇匀,并弃去1~2滴后,垂直滴加。

5. 使用完毕后,将所有样品、洗涤液和各种废物都进行灭活处理。

6. TMB(底物B)不要曝露于强光,避免接触氧化剂。

7.待检样品较多时,应先使用血清稀释板稀释完所有要检测血清,再将稀释好的血清转移致检测板,使反应时间一致。

8. 结果判读请在15分钟内完成。

9. 不同批号的试剂组份不可混用。

思考题

1. 在实际操作中,你认为有哪些因素可以影响ELISA定量检测的结果?

一) 操作前应对实验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18 C~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等,要先查看水育箱温度,是否符合要求。

(二) 正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样次序要与说明书一致,否则可导致结果错误,实验重复性差。

(三)手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗涤次数不要超过说明书推荐的洗涤次数

(四)要保证加液量一致我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量不准,造成显色不统一,判断错误。

(五)显色液量不可过多加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反应,显色液量不能过多,以免显色过强。

2. ELISA试验的优点及应用前景?

优点: ELISA具有快速、敏感、简便、易于标准化、特异性强应用前景: 1、ELISA在饲料安全检测中的应用 2、ELISA用于农药残留的检测 3、农药的检测:4、ELISA在疾病诊断中的作用 5、ELISA在兽医诊断中的应用

大学微生物学试题及答案

第一章绪论 一、名词解释 1、微生物 2、微生物学 二、填空题 1、微生物学的先驱者是____,微生物学的奠基人是_____,细菌学的奠基人是_____ 。 2、微生物都是些个体微小、构造简单的低等生物,包括属于原核类的细菌(____和古生菌)、放线菌、蓝细菌、____、立克次氏体、____;属于真核类的真菌(____、____和蕈菌)、原生藻类和显微藻类;以及属于非细胞类的病毒和____(____、拟病毒和____)。 3、微生物由于其体形都极其微小,因而导致了一系列与之密切相关的五个重要共性,即体积小,____;____,____;生长旺,繁殖快;____,____;____,____。 4、微生物的种类多主要体现在________、生理代谢类型的多样性、代谢产物的多样性、________、________等五个方面。 5、微生物学是一门在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态构造、生理代谢、________、________和分类进化等生命活动基本规律,并将其应用于工业发酵、医药卫生、生物工程和环境保护等实践领域的科学。 6、按是否具有细胞结构,微生物可分为________型微生物和________型微生物。 7、细胞型微生物根据其细胞结构特征又可分为________微生物和________微生物。 8、按照Carl Woese 的三界论,微生物可分为________、________和________。 9、原核微生物主要包括________、________、________、________、________、________和________。 10、微生物的主要特点有:________、________、________、________和________。 三、选择题 1、适合所有微生物的特殊特征是( )。 A.它们是多细胞的 B.细胞有明显的核 C.只有用显微镜才能观察到 D.可进行光合作用 2、第一位观察到微生物的科学家是( )。 A. Robert Hooke B. Louis Pasteur C. Joseph Lister D. James T.Watson 3、细菌学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 4、Louis Pasteur对微生物学的贡献在于他( )。 A. 发现了病毒 B. 提出了自然发生说理论 C. 抨击了进化论 D. 号召人们关注微生物在日常生活中的重要性 5、Louis Pasteur采用曲颈瓶试验来( )。 A. 驳斥自然发生说 B. 证明微生物致病 C. 认识到微生物的化学结构 D. 提出细菌和原生动物分类系统 6、微生物学中铭记Robert Koch是由于( )。 A. 证实病原菌学说 B. 在实验室中成功地培养了病毒 C. 发展了广泛采纳的分类系统 D. 提出了原核生物术语 7、微生物学的奠基人是( )。 A. Louis Pasteur B. Robert Koch C. van Dyck D. van Leeuwenhoek 四、是非题

大学物理实验思考题完整版(淮阴工学院)

实验一:物体密度 1、量角器的最小刻度是0.5.为了提高此量角器的精度,在量角器上附加一个角游标,使游标30个分度正好与量角器的29个分度的等弧长。求:(1、)该角游标的精度;( 2、)如图读数 答案:因为量角器的最小刻度为30’.游标30分度与量角器29 分度等弧长,所以游标精度为30/30=1,图示角度为149。45’ 2、测定不规则的固体密度时,若被测物体浸入水中时表面吸附着水泡,则实验结果所得密度值是偏大还是偏小?为什么? 答案:如果是通过观察水的体积的变化来测量不规则物体的体积,那么计算的密度会减小,因为质量可以测出,而吸附气泡又使测量的体积增大(加上了被压缩的气泡的体积)所 以密度计算得出的密度减小 实验二:示波器的使用 1、示波器有哪些组成部分?每部分的组成作用? 答案:电子示波器由Y偏转系统、X偏转系统、Z通道、示波管、幅度校正器、扫描时间校正器、电源几部分组成。 Y偏转系统的作用是:检测被观察的信号,并将它无失真或失真很小地传输到示波管的垂直偏转极板上。 X偏转系统的作用是:产生一个与时间呈线性关系的电压,并加到示波管的x偏转板上去,使电子射线沿水平方向线性地偏移,形成时间基线。 Z通道的作用是:在时基发生器输出的正程时间内产生加亮信号加到示波管控制栅极上,使得示波管在扫描正程加亮光迹,在扫描回程使光迹消隐。 示波管的作用是:将电信号转换成光信号,显示被测信号的波形。 幅度校正器的作用是:用于校正Y通道灵敏度。 扫描时间校正器的作用是:用于校正x轴时间标度,或用来检验扫描因数是否正确。 电源的作用是:为示波器的各单元电路提供合适的工作电压和电流。 2、为什么在实验中很难得到稳住的李萨如图形,而往往只能得到重复变化的某一组李萨如图形? 答案:因为在实验中很难保证X、Y轴的两个频率严格地整数倍关系,故李莎茹图形总是在不停旋转,当频率接近整数倍关系时,旋转速度较慢; 实验三:电位差计测量电动势 1、测量前为什么要定标?V0的物理意义是什么?定标后在测量Ex时,电阻箱为什么不能在调节? 答案:定标是因为是单位电阻的电压为恒定值,V0的物理意义是使实验有一个标准的低值,电阻箱不能动是因为如果动了电阻箱就会改变电压,从而影响整个实验;为了保持工 作电流不变.设标准电压为En,标准电阻为Rn,则工作电流为I=En/Rn,保持工作电流不变,当测量外接电源时,调节精密电阻Ra,使得电流计示数为零,有E=I*Ra,若测试过程中调节了电位器Rc,则导致I产生变化,使测得的E不准(错误)

微生物检查中无菌操作注意事项

微生物检查中无菌操作注意事项 一、关于采用酒精棉球消毒的注意事项 1.用酒精棉球擦拭双手,包括手掌、手背,尤其是手指,更换一个酒精棉球擦拭酒精灯附近(约10cm)桌面。 2.点燃酒精灯,在酒精灯附近拆器皿包装,并对器皿做相应标记。 3.用酒精棉球再次擦拭双手,开始实验操作。 4.消毒用酒精棉球湿度以不挤压出酒精为宜。 二、关于酒精灯正确使用的注意事项 1.酒精量以大于1/3,小于2/3为正确量。 2.防风罩应小口朝上放置于酒精灯上,反过来放置会导致氧气没有充分燃烧。 3.使用酒精灯前要检查灯芯帽是否盖得太紧,以防酒精不能上升,影响酒精灯燃烧。点燃酒精灯时严禁两个酒精灯对点。 4.熄灭酒精灯方法:先用灯芯帽扣压并熄灭火焰,再揭帽重新扣压一次。这样可防止蒸汽倒吸灯帽,再次使用酒精灯时难以揭开灯帽。 5.做样品稀释及从试管取样实验时,酒精灯应放在操作人员和试管架之间,便于无菌操作。 三、关于吸量管使用的注意事项 1.左手拿洗耳球,右手持吸量管,用右手食指平按住吸量管的顶部。 2.吸取样品后进行定量时,吸量管吸液口应贴附于试管内壁;放样时,吸量管吸液口也应贴附于试管约1/2内壁,不应贴附在管口处放液。吸量管应尽可能垂直放液。 3.用吸量管往空平皿加入1ml溶液时,吸量管应贴附于平皿底部中央位置放液;用吸量管在平板上加入溶液做涂布接种时,吸量管应垂直、悬空放液于平板中央。 4.因吸量管拆封包装后应马上使用,故无须对吸量管吸液口过火焰消毒。 5.整个取样放样的过程应尽可能保证试管口或锥瓶口靠近酒精灯火焰附近。

四、关于样品梯度稀释的注意事项 1.从试管架上取出所需试管于酒精灯火焰附近拔出试管塞,并在火焰外焰处对试管口过火焰进行消毒。 2.将试管放回试管架后用吸量管进行取样,然后取出该试管于火焰附近调节吸量管内溶液体积。 3.取样完成后对试管口再次消毒并塞上试管塞,将试管放回试管架原处。 4.从试管架上取出所需加样的试管于火焰附近进行加样放液操作。 五、关于培养皿记号的注意事项 1.标记统一写在平皿底部边缘,以“字数少、字体小、清晰、明确”为原则。 2.标记内容包括:班级、学号、日期、培养基名称、稀释级。 六、关于平板制备的注意事项 1.打开培养皿的方法:左手小指、无名指、中指及一部分掌腹托住平皿底部,食指和拇指张开轻握皿盖侧部,以食指为支点,摆动拇指打开皿盖。打开的皿口应向着酒精灯的外焰。切勿把开口朝向操作人员。 2.手持锥形瓶中下部将瓶中培养基倾倒入平皿中央位置,锥瓶口不应接触平皿。培养基应一次注入够量,不应分次加入(除实验特殊规定)。 3.混匀培养基时应将装有混合培养基的平皿于手中顺时针轻微摇匀2-3次,平放于桌面上后再次顺时针摇匀2-3次,整个过程应在培养基尚未开始凝固时完成。学生只要有其中一个摇匀动作也算完成混匀培养基。 4.手中装有培养基的平皿应水平放置于台面上,不应从台面边缘往里推。在位置允许的情况下,应分开平摊放置待凝。 七、关于涂布方式的注意事项 型涂布棒应放平涂布。 2.涂布时应从中间按同一个方向打圈方式往周边涂布,可以重复涂布。 3.从高稀释级往低稀释级涂布时,可以不用更换涂布棒,也不用灼烧涂布棒。涂布同一个稀释级的不同平板时也不用灼烧涂布棒。但是从低稀释级往高稀释级涂

微生物实验思考题

微生物实验思考题Last revision on 21 December 2020

微生物实验思考题1、用油镜观察时应该注意哪些问题在载破片和镜头之间加滴什么油起什么作 用 答:应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油. 加滴香柏油。作用:增加,也就是增加了显微镜的分辨率. 2、根据实验体会,谈谈应如何根据所观察微生物的大小,选择不同的物镜进 行有效的观察。 答:细菌用油镜,真菌用高倍镜.都是先用低倍镜找到目标后,再用高倍镜调到合适的视野和合适的清晰度. 放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大,用放大 40 倍的物镜就可以看了,细菌小,要用放大 1000 倍的物镜看,感觉还很小。病毒那就要用电子显微镜看了。 3、哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性其中最关键的环节是什么 答:涂片环节、加热固定环节、脱色环节;其中最关键的环节是脱色环节。 4、进行革兰氏染色时,为什么特别强调菌龄不能太老,用老龄细菌染色会出 现什么问题 答:着色不均,染色效果不好。阴性阳性不明显分不太清楚,问题是:不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌。 5、革兰氏染色时,初染前能加碘液吗乙醇脱色后复染之前,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色

答:不可以。因为碘与染料会结合成大分子,使得染料分子不能穿过细胞的细胞壁,对实验结果造成影响。脱色后复染前,革兰氏阳性菌呈紫色,阴性菌无色。 6、不经过复染这一步,能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 答:不行。在复染之前,革兰氏阴性菌是无色透明的,在显微镜下很难观察到;或者脱色过度,也会造成阳性菌脱色,不经过复染,无法进一步区别。 7、你认为制备细菌染色标本时,应该注意哪些环节 答:1制备适宜的培养基 2在超净工作台上进行,保持无菌环境 3对培养基,接种环等物品的高温高压灭菌. 4倒置培养基,防止冷凝水内流 8. 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察 答:1、若未完全干燥,载玻片上的液体会污染油镜镜头。镜头非常精密,被污染后不利于下次观察;2、若未完全干燥,水滴会影响油与玻璃之间折光率,造成视野不够清晰。 9. 如果涂片未以热固定,将会出现什么问题加热温度过高、时间太长,又会怎么样呢答:如果没有加热固定的话,水分蒸发太慢或者在染色时菌体会被冲洗掉;如果加热时间过久,菌体变形或形态破坏,无法染色。 10. 制备培养基的一般程序是什么 答:称量——溶解—调 PH 值—融化琼脂—过滤分装—包扎标记——灭菌——倒平板11. 做过本次实验后,你认为在制备培养基时要注意些什么问题 答:溶解配料的水要适量;PH 要调到左右;要小心手提式高压锅的使用;倒平板时要防止培养基被污染

大学物理实验报告及答案

(此文档为word格式,下载后您可任意编辑修改!) 大学物理实验报告答案大全(实验数据及思考题答案全包括) 伏安法测电阻 实验目的(1) 利用伏安法测电阻。 (2) 验证欧姆定律。 (3) 学会间接测量量不确定度的计算;进一步掌握有效数字的概念。 U 实验方法原理根据欧姆定律,R =,如测得U 和I 则可计算出R。值得注意的是,本实验待测电阻有两只, I 一个阻值相对较大,一个较小,因此测量时必须采用安培表内接和外接两个方式,以减小测量误差。 实验装置待测电阻两只,0~5mA 电流表1 只,0-5V 电压表1 只,0~50mA 电流表1 只,0~10V 电压表一只,滑线变阻器1 只,DF1730SB3A 稳压源1 台。 实验步骤本实验为简单设计性实验,实验线路、数据记录表格和具体实验步骤应由学生自行设计。必要时,可提示学生参照第2 章中的第2.4 一节的有关内容。分压电路是必须要使用的,并作具体提示。 (1) 根据相应的电路图对电阻进行测量,记录U 值和I 值。对每一个电阻测量3 次。 (2) 计算各次测量结果。如多次测量值相差不大,可取其平均值作为测量结果。 (3) 如果同一电阻多次测量结果相差很大,应分析原因并重新测量。 数据处理 (1) 由?U =U max ×1.5% ,得到?U 1 = 0.15V,?U2 = 0.075V ; (2) 由?I = I max ×1.5% ,得到?I 1 = 0.075mA,?I 2 = 0.75mA; (3) 再由u= R ( ?U )2 + ( ?I ) 2 ,求得u= 9 ×101?, u= 1?; R 3V 3I R1 R2 (4) 结果表示R1 = (2.92 ± 0.09) ×10光栅衍射实验目的 (1) 了解分光计的原理和构造。 (2) 学会分光计的调节和使用方法。?, R 2 = (44 ±1)? (3) 观测汞灯在可见光范围内几条光谱线的波长实验方法原理

微生物实验复习题

兽医微生物学实验复习题 1、兽医微生物实验室注意事项是什么? 答:①防止病原微生物的散布;②防火;③节约;④标记;⑤记录;⑥安全;⑦清洁与秩序 2、观察细菌常用什么显微镜?它主要有哪几部分组成? 答:光学显微镜光学部分:目镜、物镜、反光镜、聚光器;机械部分:镜座、镜臂、镜筒、粗调节器、细调节器。 3、油镜用毕后,为什么必须把油镜擦净? 答:油镜的原理是通过香柏油的光路折射能更加清晰的观察微生物,油具有粘附性,且不溶于水,所以,在观察完后,香柏油会粘附在镜头上,不擦去的话,风干后镜头就变得模糊不清,甚至报废了,又因为是油所以简单的用擦镜纸擦拭是擦不干净的,二甲苯属于有机溶剂, 4、用过多的二甲苯或酒精乙醚混合液擦拭镜油有什么危害? 答:过多的二甲苯或酒精乙醚混合液容易脱胶,使油镜脱落。 5、使用油镜时用什么作为物镜与玻片间的介质,有几种? 答:可用与玻璃的折光系数相近的油类,有7种,如柏木油。 6、观察细菌时显微镜的操作步骤是什么?主意事项是什么? 答:将显微镜物镜镜头转为油镜对好光线(开高集光器,开大光圈,调好反光镜)使亮度最强在载物台上放上载玻片,并在玻片上放一滴香柏油将标本移至载物台正中转动粗准焦螺旋,使油镜浸入油滴中左眼由目镜注视镜内,慢慢地转动细准焦螺旋,直至物像清晰为止 注意事项:1.调节粗准焦螺旋的时候要慢 2.观察完后要用二甲苯擦拭油镜 7、微生物绘图要求有哪些? 答:①绘出一个视野,圆形。 ②细菌大小比例合理,必须标明名称。 ③标名显微镜的放大倍数,标明菌名。 ④绘图一律用铅笔。 8、制备细菌染色标本片时应注意哪些事项? 答:①干燥好的抹片固定时,使抹面向上,以其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回拖动过数次,略作加热,但不能太热,以不烫手为度进行固定。 9、涂片固定的意义何在?固定时应注意什么问题?有哪些固定方法?答:意义:涂片固定可将涂片上的细菌杀死,使之固定而不会到处漂移,并且死菌比活菌更容易着色,为后面染色做准备。 注意:若用火焰固定时,抹面向上,以其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回拖动过数次,略作加热,但不能太热。固定方法:火焰固定和化学固定。 10、细菌染色的原理是什么? 答:细菌的等电点较低,约在pH 2~5之间,故在中性、碱性或弱碱性溶液中,菌体蛋白质电离后带负电荷,易与带正电荷的碱性染料如龙胆紫及碱性复红等结合,使细菌被染成紫色或红色。 11、试述细菌革兰氏染色法的步骤及结果。革兰氏染色的原理是什么? 答:原理:G+菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈蓝紫色。 Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,沙黄复染后呈红色。

【高考生物】微生物实验思考题参考答案及知识要点

(生物科技行业)微生物实验思考题参考答案及知识 要点

微生物实验思考题参考答案及知识要点 (可能在整理时部分问题未能考虑全面,若有异议,请同学们自行从网络或课本上搜索查找)微生物实验思考题参考答案 一.酵母菌形态观察及死活细胞鉴别 1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。 美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 美蓝浓度高了,代谢不太活跃的活细胞也会被染色,从而使观察到的死细胞较多,活细胞较少;反之,则代谢微弱的细胞也能还原美蓝,不被染色,从而使观察到的死细胞较少,活细胞较多。 二.细菌的简单染色和革兰氏染色 1.革兰氏染色中那一步是关键?为什么?你是如何操作的? 革兰氏染色的关键步骤是:乙醇脱色(是脱色时间)。如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定(脱色是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s)。2.固定的目的之一是杀死菌体,这与自然死亡的菌体有何不同? 自然死亡的菌体本身已经部分自溶,结构已经改变。固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。 3.不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌? 能。在酒精脱色后,不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌(G+),被酒精脱色为革兰

大学环境微生物学期末考试试题

一、概念题: 病毒:没有细胞结构,专性寄生在活的宿主体内,大小在0.2 微米以下的超微小微生物。 原核微生物:指核质和细胞质之间不存在明显核膜,其染色体由单一核酸组成的一类微生物。(原核微生物的核很原始,发育不全,只有DNA链高度折叠形成的一个核区,没有核膜,核质裸露,与细胞质没有明显界限,叫拟核或似核。 原核微生物没有细胞器,只有由细胞质膜内陷形成的不规则的泡沫体系,如间体核光合作用层片及其他内折。也不进 行有丝分裂。) 真核微生物:细胞核发育完全具有核仁核膜 , 能进行有丝分裂 , 细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等细胞器的微小生 物 , 都称为真核微生物。(真核微生物由发育完好的细胞核,核内由核仁核染色质。由核膜将细胞核和细胞质分开,使两 者由明显的界限。有高度分化的细胞器,如线粒体、中心体、高尔基体、内质网、溶酶体和叶绿体等。进行有丝分裂。) 原生动物:最原始、最低等、结构最简单的单细胞动物。 光能自养:指利用光能将大气中的二氧化碳和土壤中的水合成有机物的营养类型。 光能异养:指以二氧化碳作为主要碳源或唯一碳源,利用有机物作为供氢体,利用光能将二氧化碳还原成细胞物质营 养类型。 化能自养:通过氧化无机物释放出的能量还原二氧化碳成为细胞有机物的营养类型。 化能异养:指用有机物分解时释放的能量,将有机物分解的中间产物合成新的有机物的营养类型。 芽孢某些细菌在其生长发育后期,可在细胞内形成一个圆形或椭圆形的抗透性休眠体 等电点:在某一 PH的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等,成为兼性离子,呈电中性,此时的溶 液的 PH值称为该氨基酸的等电点。 好氧呼吸 :有外在最终电子受体O2存在时,对底物(能源)的氧化过程。 无氧呼吸:又称厌氧呼吸,是一类电子传递体系末端的受氢体为外源无机氧化物的生物氧化。 质粒:在原核微生物中除染色体外,还含有另一种较小的,携带少量遗传基因的环状DNA 分子,称为质粒,也叫染色 体外的 DNA。他们在细胞分裂过程中能复制,将遗传性状传给后代。 自净容量 :指在水体正常生物循环中能够净化有机污染物的最大数值。 二、简述题: 1)细菌的一般结构 细菌是单细胞的。所有的细菌均有如下结构:细胞壁、细胞质膜、细胞质及其内含物、细胞核质。 2)细菌细胞壁的生理功能 a、保护原生质体免受渗透压引起破裂的作用; b、维持细菌形态(可用溶菌酶处理不同的细菌细胞壁后,菌体均呈现圆形得到证明); c 、细胞壁是多孔结构的分子筛,阻挡某些分子进入和保留蛋白质在间质(革兰氏阴性菌细胞壁和细胞质之间的区域); d 、细胞壁为鞭毛提供支点,使鞭毛运动。 3)酶的活性中心 酶的活性中心是指酶的活性部位,酶蛋白分子中直接与底物结合,并与酶的催化作用直接有关的部位 4)真菌的种类 酵母菌,霉菌,以及各种伞菌。 5)酵母菌的一般特征 个体一般以单细胞状态存在;多数以出芽方式繁殖,也有的可进行裂殖或产子囊孢子;能发酵糖类而产能;细胞壁常 含有甘露聚糖;喜在含糖较高、酸性的水生环境中生长。 6)在病毒中,蛋白质的功能 蛋白质的功能:保护病毒使其免受环境因素的影响。决定病毒感染的特异性,使病毒与敏感细胞表面特定部位有特异 亲和力,病毒可牢固的附着在敏感细胞上。病毒蛋白质还有致病性、毒力和抗原性。动物病毒有的含DNA,有的含 RNA。植物病毒大多数含RNA,少数含 DNA。噬菌体大多数含DNA,少数含 RNA。病毒核酸的功能是:决定病毒遗传、变异和 对敏感宿主细胞的感染力。

大学物理实验课后答案

实验一霍尔效应及其应用 【预习思考题】 1.列出计算霍尔系数、载流子浓度n、电导率σ及迁移率μ的计算公式,并注明单位。 霍尔系数,载流子浓度,电导率,迁移率。 2.如已知霍尔样品的工作电流及磁感应强度B的方向,如何判断样品的导电类型? 以根据右手螺旋定则,从工作电流旋到磁感应强度B确定的方向为正向,若测得的霍尔电压为正,则样品为P型,反之则为N型。 3.本实验为什么要用3个换向开关? 为了在测量时消除一些霍尔效应的副效应的影响,需要在测量时改变工作电 流及磁感应强度B的方向,因此就需要2个换向开关;除了测量霍尔电压,还要测量A、C间的电位差,这是两个不同的测量位置,又需要1个换向开关。总之,一共需要3个换向开关。 【分析讨论题】 1.若磁感应强度B和霍尔器件平面不完全正交,按式(5.2-5)测出的霍尔系数比实际值大还是小?要准确测定值应怎样进行? 若磁感应强度B和霍尔器件平面不完全正交,则测出的霍尔系数比实际值偏小。要想准确测定,就需要保证磁感应强度B和霍尔器件平面完全正交,或者设法测量出磁感应强度B和霍尔器件平面的夹角。 2.若已知霍尔器件的性能参数,采用霍尔效应法测量一个未知磁场时,测量误差有哪些来源? 误差来源有:测量工作电流的电流表的测量误差,测量霍尔器件厚度d的长度测量仪器的测量误差,测量霍尔电压的电压表的测量误差,磁场方向与霍尔器件平面的夹角影响等。 实验二声速的测量 【预习思考题】 1. 如何调节和判断测量系统是否处于共振状态?为什么要在系统处于共振的条件下进行声速测定? 答:缓慢调节声速测试仪信号源面板上的“信号频率”旋钮,使交流毫伏表指针指示达到最大(或晶体管电压表的示值达到最大),此时系统处于共振状态,显示共振发生的信号指示灯亮,信号源面板上频率显示窗口显示共振频率。在进行声速测定时需要测定驻波波节的位置,当发射换能器S1处于共振状态时,发射的超声波能量最大。若在这样一个最佳状态移动S1至每一个波节处,媒质压缩形变最大,则产生的声压最大,接收换能器S2接收到的声压为最大,转变成电信号,晶体管电压表会显示出最大值。由数显表头读出每一个电压最大值时的位置,即对应的波节位置。因此在系统处于共振的条件下进行声速测定,可以容易和准确地测定波节的位置,提高测量的准确度。 2. 压电陶瓷超声换能器是怎样实现机械信号和电信号之间的相互转换的? 答:压电陶瓷超声换能器的重要组成部分是压电陶瓷环。压电陶瓷环由多晶结构的压电材料制成。这种材料在受到机械应力,发生机械形变时,会发生极化,同时在极化方向产生电场,这种特性称为压电效应。反之,如果在压电材料上加交

微生物试验室安全及操作规定

微生物实验室安全及操作规定1目的: 为规范微生物实验操作,确保操作安全有效,制定本规定。 2.适用范围:化验室的微生物检测。 3.要求: 3.1无菌室的门要随手关闭,以防外界微生物的进入。 3.2微生物室内应保持清洁,不得存放与实验室无关的物品。 3.3进入无菌室前要更换经过灭菌的专用工作衣.帽.鞋。 3.4无菌室内应备有体积分数为0.1%的新吉尔灭溶液.体积分数为70~75%的酒精棉球,以便样品表面及意外污染消毒。 3.5无菌室内应备有镊子.剪刀.接种针.接种环,每次使用前后应在酒精灯火焰上灼烧至无菌。3.6检验人员在操作过程中需严格按照要求进行操作,不得随意减少工序。 3.7无菌室禁止交谈,操作过程中不得用手触摸其它未消毒.灭菌的区域,与该工作无关人员不得随便出入无菌室。 3.8微生物(无菌室.缓冲间)每次使用前,用紫外灯照射30min,要每周检测一次室内空气清洁度,确保其符合实验条件。每周对微生物室进行至少一次2h以上紫外灯消毒。微生物室内的的菌种总数>5cfu/平皿时,需要对无菌室.缓冲间用85~95%乳酸熏蒸1h,熏蒸结束后(必要时可以将空间密闭整晚),用体积分数为0.1%的新吉尔灭溶液或体积分数为70~75%的酒精棉彻底对洁净室.缓冲间及其内所有设备.物品进行清洗;后对无菌室.缓冲间进行半小时以上紫外线消毒,结束后,验证室内空气清洁度是否合格,仍不合格,则可加大乳酸熏蒸时间及紫外线灭菌时间。3.9每次微生物试验紫外灯灭菌前,需将所用的吸头.剪刀.纱布等物品浸泡于消毒剂中。 3.10接种前所用的试管.平皿及培养基必须经消毒灭菌,打开包装未使用完毕的器皿,不能再继续使用,金属用具应高压灭菌或用酒精灯过火三次后方可使用。 3.11切忌用手直接接触标本及已灭菌的器材内部,打开瓶塞或管塞时,应夹持在手中适当位置,避免污染。使用完毕的吸管.三角瓶.样品等应及时撤离,不可随意放在洁净工作台内。 3.12微生物检验每批必须做空白.对照试验(菌落总数做1个盐水对照.1个琼脂对照,大肠菌群做单料.双料各1个琼脂空白培养,整个检验过程超净台内的环境空白),同时记录。当有菌生长时必须保留样品及时汇报,分析原因再做处理,如果空白试验不符合要求,微生物结果不能出具。 3.13每次微生物实验结束后,所有物品及时撤离无菌室,并用体积分数为0.1%的新洁尔灭溶液将超净台内清理干净,酒精灯、剪刀等物品上的样品擦拭干净,用体积分数为0.1%的新洁尔灭溶液浸手或以肥皂洗手,再用清水冲洗干净。 3.14凡要丢弃的培养物,必须进行妥善处理,培养霉菌的培养物和玻璃器皿要先高压灭菌、再洗刷干净,然后再进行灭菌处理。 3.15严格控制培养箱温度以及培养时间,对培养箱的温度每个班至少监控两次。 3.16每周进行消毒剂擦拭一次培养箱内金属孔架及内壁,再有平皿破碎的情况时必须马上进行清理消毒,防止污染。.

微生物实验思考题参考标准答案及知识要点

微生物实验思考题参考答案及知识要点 一.酵母菌形态观察及死活细胞鉴别 1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。 美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 美蓝浓度高了,代谢不太活跃的活细胞也会被染色,从而使观察到的死细胞较多,活细胞较少;反之,则代谢微弱的细胞也能还原美蓝,不被染色,从而使观察到的死细胞较少,活细胞较多。 二.细菌的简单染色和革兰氏染色 1.革兰氏染色中那一步是关键?为什么?你是如何操作的? 革兰氏染色的关键步骤是:乙醇脱色(是脱色时间)。如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定(脱色是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s)。 2. 固定的目的之一是杀死菌体,这与自然死亡的菌体有何不同? 自然死亡的菌体本身已经部分自溶,结构已经改变。固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。 3. 不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌? 能。在酒精脱色后,不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌(G+),被酒精脱色为革兰氏阴性菌。最后一步用番红染液复染,是为了让结果更清楚。 4.涂片为什么要固定,固定适应注意什么问题? a 杀死细菌并使菌体黏附与玻片上;b增加其对染料的亲和力。 固定时应注意:手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次(手指触摸玻片反面,不烫手为宜),固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩。 三. 霉菌、放线菌的形态观察 1.镜检时,如何区分基内菌丝与气生菌丝? 一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗;而基内菌丝色浅、发亮,可看到横

大学物理实验思考题

测非线性电阻的伏安特性 [思考题]: ⒈从二极管伏安特性曲线导通后的部分找出一点,根据实验中所用的电表,试分析若电流表接,产生的系统误差有多大?如何对测量结果进行修正? 答:如图5.9-1,将开关接于“1”,称电流表接法。由于电压表、电流表均有阻(设为R L 与R A ),不能严格满足欧姆定律,电压表所测电压为(R L +R A )两端电压,这种“接入误差”或 “方法误差”是可以修正的。测出电压V 和电流I ,则V I =R L +R A , 所以R L =V I -R A =R L ′+R A ①。 接入误差是系统误差,只要知道了R A ,就可把接入误差计算出来加以修正。通常是适当选择电表和接法,使接入误差减少至能忽略的程度。 由①式可看出,当R A <>R A ,应采用接法。 ⒉根据实验中所用仪器,如果待测电阻为线性电阻,要求待测电阻R 的测量相对误差不大于4%,若不计接入误差,电压和电流的测量值下限V min 和I min 应取何值? 答:根据误差均分原则,电流表、电压表的准确度等级、量程进行计算.

迈克尔逊干涉仪的使用 [预习思考题] 1、根据迈克尔逊干涉仪的光路,说明各光学元件的作用。 答:在迈克尔逊干涉仪光路图中(教材P181图5.13--4),分光板G将光线分成反射与透射两束;补偿板G/使两束光通过玻璃板的光程相等;动镜M1和定镜M2分别反射透射光束和反射光束;凸透镜将激光汇聚扩束。 2、简述调出等倾干涉条纹的条件及程序。 答:因为公式λ=2△d △k 是根据等倾干涉条纹花样推导出来的,要用此 式测定λ,就必须使M1馆和M2/(M2的虚像)相互平行,即M1和M2相互垂直。另外还要有较强而均匀的入射光。调节的主要程序是: ①用水准器调节迈氏仪水平;目测调节激光管(本实验室采用激光光源)中心轴线,凸透镜中心及分束镜中心三者的连线大致垂直于定镜M2。 ②开启激光电源,用纸片挡住M1,调节M2背面的三个螺钉,使反射光点中最亮的一点返回发射孔;再用同样的方法,使M1反射的最亮光点返回发射孔,此时M1和M2/基本互相平行。 ③微调M2的互相垂直的两个拉簧,改变M2的取向,直到出现圆形干涉条纹,此时可以认为M1与M2/已经平行了。同方向旋动大、小鼓轮,就可以观察到非定域的等倾干涉环纹的“冒”或“缩”。 3、读数前怎样调整干涉仪的零点?

微生物实验室安全操作

微生物实验室的安全操作规程 1 实验室安全 1.1 微生物实验室的生物安全性 1.2 科室安全文档 (a)生物危害防护:实际操作规程见(《实验室生物安全通用要求》,中华人民共和国国家标准GB19489-2004。2004-01-05发布,2004-10-01实施。) (b)实验室安全:原则和措施见(《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》,中华人民共和国卫生行业标准WS 233-2002。2002-12-03发布,2003-08-01实施。)1.3 应用: 以上的操作规程应用于微生物科室的所有部门。工作人员或访问人员必须遵守各项规定。 1.4 关于新规定或现行规定的修改案: 任何新规定或现行规定的修改案必须通知负责科室安全的人员及相关人员,他们将建议科室主任考虑实施。 1.5 生物性危害 1.5.1 与各种操作有关的生物危害水平取决于: a.处理的传染性物质的本身: 按照传染性物质对个人和社区的潜在危险性以及经空气传播的可能性,其划分成不同等级。所采用的等级划分详见"《实验室生物安全通用要求》";原则和措施(见《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》)。 b.使用的设备和设施: 处理不同等级的传染性物质的要求在"实验室安全"中已规定。这些符合要求的设备都要承担重要临床工作,科室负责人必须保证中应污染物水平。 c.培训,特别是员工的安全性培训和安全性经验积累。所有员工应该接受一定训练,能安全处理任何实验室可能碰到的物质,避免将实验不能处理或规定之外的传染性物质暴露在实验室,即使暴露事故在实验室,即使暴露事故发生也要会正确处理。 1.5.2 传染性物质的分类 1.5. 2.1分类系统

食品微生物学思考题答案2014

2013-2014(2)《食品微生物学与实验》思考题 期末考试题型: 1、单选题(四选一) 2、多选题(两个以上) 3、填空题 4、简述题 5、绘图说明题 6、试述题或分析题 第0章绪论 1. 概念: 细胞型微生物、非细胞型微生物、单细胞微生物、多细胞微生物、原核微生物、真核微生物、种、菌株、变种、型、模式种、柯赫原则。 细胞型微生物:具有典型的细胞结构,即细胞含有真正的细胞核,有核膜、核仁和染色体。 非细胞型微生物:没有典型的细胞结构、不具备代必须的酶系统、只能在各种活的细胞中生长繁殖,病毒就属此类。 单细胞微生物:仅由一个细胞构成的生物。 多细胞微生物:由许多形态和功能发生了分化的细胞群构成的生物。 原核微生物:具有细胞结构的微生物中,原核微生物是指一类不具有细胞核膜,只有核区的裸露DNA的原始单细胞生物,核区只有一条双螺旋结构的脱氧核糖核酸构成的染色体。 真核微生物:在微生物中,大多数种群具有真核生物(Eukaryotes)的细胞结构,即细胞核具有核膜、能进行有丝分裂、细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等细胞器这些微生物被称为真核微生物。 种:是分类单元的最基本单位,是显示高度相似性、亲缘关系极其相近、与其他种有明显差异的一群菌株的总称。 菌株:它是指来源不同的同一个种的纯培养物。 变种:从自然界中分离得到的某一微生物的纯种,必须与文献上记载的典型种的特征完全一致,才能鉴定为同一个种。实际上有时分离到纯种,除了大多数指标符合典型种的特征外,还有某一个显然不同的特征,而此特征又是稳定的。就把这种微生物称为典型种的“变种”。 型:同一细菌种显示很小生物化学与生物学差异的菌株,常用于细菌中紧密相关菌株的区分。型是细菌亚种的细分。 模式种:微生物学中种带有抽象的种群概念,但在具体分类时常用一个被指定的、能代表这个种群的模式菌株或典型菌株作为该种的模式种来定种。它往往是定为一个新种的第一个种或第一批种之一,也可以是在某一已知数任意指定的种。 柯赫原则:对病原菌的研究证明了炭疽病是由炭疽菌引起的,结核病是由结核菌引起的,创立了确定某一微生物是否为相应疾病病原的基本原则——柯赫法则 2. 什么是微生物,它包括几大类群?其特点是什么?

大学微生物试卷A及答案

XX大学XX系微生物试卷A 命卷人:一、填空题(每空1分,共6小题25分) 1细菌基本形态可以分为、和。 2.霉菌菌丝有两类,一类是,如和,另一类是,例如。 3.在某些原核生物细胞壁外,会着生一些特殊的附属物,包括、、、等。 4.根据营养物质在机体中生理功能的不同,可以将它们分为、、、、______5大类。 5.微生物的系统命名采用法,即加。 6.病毒粒子衣壳对称体制包括:、和。 7.霉菌的菌丝体分为两类,它们分别是_______和________。 二、选择题(每小题1分,共25小题25分) 1. 产生假根是()的形态特征。 A.根霉 B.酵母菌 C.青霉 D.曲霉 2.革兰氏阳性菌细胞壁特有成分是()。 A.蛋白质 B.肽聚糖 C.脂多糖 D.磷壁酸 3.微生物从糖酵解途径获得()ATP分子。 A.2个 B.4个 C.36个 D.38个 4.处于对数生长期的细菌其特点是()。 A.生长缓慢 B.生长迅速 C.大多数死亡 D.繁殖代时长 5.深层穿刺接种细菌到试管半固体培养基中()。 A.可以观察细菌是否能运动 B.除去代谢废物的一个机会 C.增加氧气 D.增加钾和钠离子的数目 6.加压蒸汽灭菌锅灭菌参数是()。 A.100℃,30min B. 180℃,10min C. 121℃,20~30min D. 160℃,60min 7.霉菌适宜生长的pH范围为()。 A.<4.0 B.4.0-6.0 C.6.5-8.0 D.8.0 8.str R是()的一种菌株。 A.丙氨酸营养缺陷型菌株 B. 抗链霉素突变株 C.异亮氨酸营养缺陷型菌株 D. 抗庆大霉素突变株 9.微生物是生产以下食品时的一个重要因素,除了()之外。 A.酸菜 B. 朝鲜泡菜 C.纯牛奶 D.酸奶 10.苏云金孢杆菌作为()广泛用于现代生物学中。 A.乳酸菌 B.干酪和干酪产品的生产者 C.水系统的净化者 D. 生物杀虫剂 11.通常链霉菌可通过以下方式进行繁殖 A. 出芽繁殖; B. 分生孢子; C. 孢囊孢子; D. 芽孢子 12.自然界中分离到的细菌, 形态各种各样, 其中种类最多的是: A. 球菌; B. 螺旋菌; C. 放线菌; D. 杆菌 13.细菌的细胞核是: A 裸露的DNA 分子; B DNA 与组蛋白结合的无核膜包围的染色体.

大学物理实验思考题答案

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相关答案 力学和热学 电磁学 光学 近代物理 1. 是否可以测摆动一次的时间作周期值?为什么? 答:不可以。因为一次测量随机误差较大,多次测量可减少随机误差。 2. 将一半径小于下圆盘半径的圆盘,放在下圆盘上,并使中心一致,讨论此时三线摆的周期和空载时的周期相比是增大、减小还是不一定?说明理由。 答:当两个圆盘的质量为均匀分布时,与空载时比较,摆动周期将会减小。因为此时若把两盘看成为一个半径等于原下盘的圆盘时,其转动惯量I0小于质量与此相等的同直径的圆盘,根据公式(3-1-5),摆动周期T0将会减小。 3. 三线摆在摆动中受空气阻尼,振幅越来越小,它的周期是否会变化?对测量结果影响大吗?为什么? 答:周期减小,对测量结果影响不大,因为

本实验测量的时间比较短。 实验2 金属丝弹性模量的测量 1. 光杠杆有什么优点,怎样提高光杠杆测量的灵敏度? 答:优点是:可以测量微小长度变化量。提高放大倍数即适当地增大标尺距离D或适当地减小光杠杆前后脚的垂直距离b,可以提高灵敏度,因为光杠杆的放大倍数为2D/b。 2. 何谓视差,怎样判断与消除视差? 答:眼睛对着目镜上、下移动,若望远镜十字叉丝的水平线与标尺的刻度有相对位移,这种现象叫视差,细调调焦手轮可消除视差。 3. 为什么要用逐差法处理实验数据? 答:逐差法是实验数据处理的一种基本方法,实质就是充分利用实验所得的数据,减少随机误差,具有对数据取平均的效果。因为对有些实验数据,若简单的取各次测量的平均值,中间各测量值将全部消掉,只剩始末两个读数,实际等于单次测量。为了保持多次测量的优越性,一般对这种自变量等间隔变化的情况,常把数据分成两组,两组逐次求差再算这个差的平均值。

微生物课件思考题 -

第二章 1、为什么说Koch等建立的微生物纯培养技术是微生物学建立与发展的基石?一般可用哪些方法获得微生物的纯培养? 2、微生物的最显著特征就是个体微小,通常只能通过显微镜进行观察。试列举在显微观察中通过改变样品的反差以改善观察效果的技术及方法。 第四章: 试比较营养物质进入微生物细胞的几种方式的特点。 第五章 不同营养类型的微生物在不同条件下产生ATP和还原力的方式与特点。 第六章 细菌的生长繁殖与高等动植物的有哪些异同? 其典型生长曲线可分几期,其划分依据是什么? 第七章 思考题:试结合一步生长曲线分析病毒的特点,并与细菌进行比较。 第八章 1、如果二个不同营养缺陷标记(a - b - c + d + 和 a + b + c - d -)的菌株经混合后能产生在基本培养基平板上生长的原养型重组菌株,请设计一个实验来决定该遗传转移过程是转化、转导还是接合? 2、自然遗传转化与人工转化之间有什么关系?为什么在一般情况下它们转化质粒的成功率有如此大的差别? 第十章 1)基因工程的基本步骤是怎样的?其中哪些需涉及到微生物的参与? 2)为什么说微生物学不仅为基因工程提供了理论基础,同时也提供了操作技术? 第十一章 1)试论微生物与水体富营养化作用,你认为对此类污染该如何进行防治? 2)试用一些典型例子说明微生物与生物环境之间的相互关系。 第十二章 1. 为什么能用生物大分子作为衡量生物进化的标尺?有哪些选用原则?建立16 S r RNA 系统发育树的意义何在? 2. 为什么在现代微生物分类中,任何能稳定地反映微生物种类特征的资料,都有分类学意义,都可以作为分类鉴定的依据?你知道有哪些项目已被用于细菌学分类和鉴定?

江南大学微生物习题

江南大学微生物习题 Revised final draft November 26, 2020

名词解释 1997 1原生质体2芽孢3菌落4诱导酶5生长因素6回复突变7诱导8拮抗9血清学反应10巴斯德效应? 1998 1芽孢2菌落3质粒4回复突变5生长因子6诱导酶7拮抗8巴斯德效应9光复活作用10活性污泥? 1999? 1原生质体2菌落3质粒4芽孢5诱导酶6生长因子7巴斯德效应8营养缺陷型9B O D10血清学反应? 2000? 1温和性噬菌体2巴斯德效应3艾姆斯试验(Amestest)4ELISA?5PCR? 2001? 1类毒素2暗修复作用3巴斯德效应4诱导酶? 2002? 1转化2半抗原3活性污泥4回复突变5P C R 填空1997? 1微生物生长的特点是:_____

2微生物的学名是由_和_所组成3细菌革兰氏染色的主要原理是_。影响染色的主要因素是_和_,革兰氏染色后为红色的是_ 4酵母菌是_,其无性繁殖方式是_和_,有性繁殖是_ 5霉菌产生的无性孢子有___ 6噬菌体的特点是___,其生长繁殖过程包括_____五个步骤。7培养基按用途可分为_____ 8根据生长和O2的关系,大多数酵母属于_,大多数霉菌属于_ 9影响微生物生长的延滞期长短的因素有___等10光复活作用是指____四种情况11染色体畸变是指____四种情况12大肠杆菌是指_食品中大肠菌群测定的食品卫生含义是_ 13影响微生物的抗热性的因素是_____ 14B O D是指_ 15在空气中能较长时间的微生物类群是__特点是_ 16培养时,培养皿倒置是为了_和_ 17平板菌落计数法结果表达中常用的“c l u”的意思是_ 1998?

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