发酵豆粕工艺参数优化及指标相关性

发酵豆粕各项指标检测方法与实用实用标准

发酵豆粕各项指标检测方法与标准 发酵工艺2010-12-31 15:16:17 阅读86 评论0 字号：大中小订阅 1、水份、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、灰份、钙和磷的分析方法全部采用国标法。 2、总有机酸测定采用氢氧化钠滴定的方法和乳酸测定采用气象色谱。 3、pH的测定采用玻璃电极pHS-3C型pH计测定。 4、可溶蛋白的测定方法 5、小肽含量的测定 水份的测定 水份测定直接参见国标 测定完水分后的样品需要测定其中的总有机酸的含量，其数值为A，并计算有机酸的挥发量。 水份含量的计算时应当扣除这部分有机酸的挥发量，否则会出现水分超标现象。 总有机酸检测 试剂：NaOH标准溶液（邻苯二甲酸氢钾标定），酚酞指示剂 仪器:磁力搅拌器离心机 方法： （1）取发酵后鲜样品15g 置于150ml烧杯中加入溶于100ml去离子水，在磁力搅拌器上浸提30min。（2）取部分浸提样离心10min(3000r/min)。 （3）取上清液15ml, 加30ml去离子水稀释（以消除底色的影响），加酚酞指示剂四滴，用0.1molNaOH 标准溶液滴定，并记录到终点消耗NaOH体积。（终点到溶液呈现粉红） 计算 乳酸（％）＝N(NaOH)×V(NaOH) ×0.09008/15×115/15g N(NaOH):NaOH标准溶液的浓度； V(NaOH) ：消耗NaOH标准溶液体积； 0.09008：乳酸的毫克当量。 0.1mol氢氧化钠的配制与标定 1、配制：称取9.6g氢氧化钠，溶于100ml水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。用塑料管虹吸5ml的上清液，注入2000ml无二氧化碳水中(将去离子水煮沸5分后冷却)，摇匀。 2、标定 称取0.67g于105~110℃烘至恒重的基准的邻苯二甲酸氢钾，准确至0.0001g，溶于50ml的无二氧化碳水中，加4滴酚酞指示剂（0.1％），用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，同时作空白试验。 3、计算 氢氧化钠标准溶液的浓度按下式计算 c（NaOH）=m/（V1-V2）×0.2042 式中c（NaOH）——氢氧化钠标准溶液之物质的量的浓度，mol/l； V1——滴定用邻苯二甲酸氢钾之用量，ml； V0——空白试验氢氧化钠溶液之用量，ml； m——邻苯二甲氢钾之质量，g； ? 0.2042——与1.00ml氢氧化钠标准液[c（NaOH）=1.000mol/l]相当的以克表示的邻苯二甲氢钾之用量。 0.1％酚酞指示剂的配制：称取1.000克酚酞，溶解与100ml95％的试剂酒精中，混匀即得。

生产工艺流程控制的规程

生产工艺流程控制的规程（草稿） 一、目的 为加强企业的生产工艺流程控制，全面提升产品的制作质量，降低生产成本，各相关部门和人员按照优化5M1E（注1）的原则进行生产活动，增强企业的竞争力，特制订本规程。 ——注1：5M1E分别是英文-人员、机器、材料、方法、测量和环境的单词首位字母。 二、使用范围 本集团下属各公司的应依据本规程来制订、执改进行、生产工艺流程、对其结果进行考核、奖惩，除另有规定外，均以本规程执行； 三、规程的内容： 1、工艺流程涉及的部门（体系化） 工艺流程涉及的部门有：各公司的技术部、生产部、质检部、和集团采购部。 2、管理责任（制度化） （1）各公司技术部责任 a,制定合理的工艺流程文件 各公司的技术部依据产品任务单，制定生产工艺流程的文件，工艺流程文件的主要是以下三种类： ——工艺过程卡片；

——工序卡片； ——操作说明书； 工艺流程的卡片和操作说明书中应包含：图纸（加工的工件图纸以及关键步骤和重要环节都有图纸说明）、加工工序、加工方法及对环境的要求、检验及方法、产品的包装、工时定额、材料和物耗定额、使用的设备和工装、加工工具、对特殊工件的吊装位置及方法、包装方法、加工的起始时间、责任者的签名等，总之应当是实际工作中涉及的工序和各个工序中要点（5M1E）都要简约地反映在流程中；——注2：工时定额和物耗定额：在实际中灵活应用和执行，对于首件和单件生产可以是定性管理；对于3-5件的小批量生产应当是首件完成后，对出其余件进行的半定量管理，就是给个范围值；对于成熟的大批量生产件应当是定量管理，就是应当给出固定的定额；——注3：可以有空项，按实际生产中需要的项目编写，应当简要全面部不应当有漏项；各个公司在制定工艺流程时，可以是表格式、卡片式、文字表述式，只要能在实际生产中，对生产的产品有以下作用即可--加工的指导、检验指导、记录完整（可以追溯产品的加工历史）；b,根据生产出现的问题，可以用工艺流程附加单的形式进行补充及修改，必要时废除老工艺，重新制定新工艺； c,会同质检部门处理质量异常问题。 （2）各公司生产部责任

最新发酵饲料生产工艺与应用

发酵饲料生产工艺与 应用

灵璧县立腾同创农牧科技有限责任公司 二0一二年十一月

目录 安徽省立腾同创农牧科技有限公司简介 安徽省立腾同创农牧科技有限公司企业文化 安徽省立腾同创农牧科技有限公司的十年发展战略————— 安徽省立腾同创农牧科技有限公司的第一个发展五年发展计划第一章发酵饲料生产的菌种及发酵工艺 第二章发酵饲料生产技术

第一章发酵饲料生产的菌种及发酵工艺 第一节概述 一、发酵饲料的定义 发酵饲料的定义是：在人为可控制的条件下，以植物性农副产品为主要原料，通过微生物的代谢作用，降解部分多糖、蛋白质和脂肪等大分子物质，生成有机酸、可溶性多肽等小分子物质，形成营养丰富、适口性好、活菌含量高的生物饲料或饲料原料。 采用发酵技术生产的动物饲料或饲料原料，其特性主要是：（1）含有大量的活性微生物； （2）多数以厌氧发酵方式进行生产； （3）未经干燥的物料含水量通常在30%以上； （4）物料的酸性物质明显增加，营养组成更合理； （5）生产原料以植物性农副产品为主。 也有发酵成品是经过干燥处理的，比较典型的有发酵豆粕和发酵棉粕。在发酵过程中有大量的活性乳酸菌和酵母菌发生的代谢作用，经过干燥以后，乳酸菌基本都失活了，但是它们也属于发酵饲料。 二、发酵饲料的概述 发酵饲料的生产工艺基本都是以固态发酵的方式进行的，生产菌种以乳酸菌、芽孢杆菌和酵母菌为主，绝大多数采用厌氧或

兼性厌氧发酵。发酵物料的含水量为30%~50%，发酵时间和温度受环境影响很大，基本不进行人为控制和调节。 在实际生产中也有采用好氧发酵方式进行的，生产菌种以霉菌和假丝酵母为主，生产用的蛋白原料主要是一些乳酸菌和酵母菌难以降解的杂粕和胶质蛋白。但是生产设备复杂，物料温度和湿度变化很大，控制及其困难。成品主要是作为饲料蛋白原料的替代物，能降低饲料生产成本，但基本不具备生物学活性和功能。 本节主要论述厌氧固态发酵工艺，常规的发酵饲料生产流程如： 原料→消毒→冷却接种→培养→干燥→包装 工业化规模的微生物发酵过程基本上都是纯培养过程，原料需要消毒，空气需要过滤等。这些操作都是为了确保在发酵产品生产和储存过程中不受杂菌的侵袭和干扰，但也正是这些常规操作使产品的生产成本居高不下，影响了微生物发酵产品在动物饲养中的大剂量使用。 大量试验证明，在不考虑动物饲养成本的前提下，大剂量（在配合饲料中添加5.0%以上）使用高活菌含量的微生物发酵饲料可以明显改善动物的生产性能，提高动物的健康水平，甚至可以进行无抗生素饲养。但是采用传统的生产工艺获得的高活菌产品其生产成本通常都在10元/kg以上，如果以10%的比例使用在配合饲料中，每吨配合饲料的成本至少需要增加800元，这个增加值对传统的畜禽养殖业来说是难以接受的。降低发酵

豆粕营养成份及标准

豆粕营养成份及标准 [关键词]豆粕标准 植物蛋白类 植物性蛋白亦是提供饲料蛋白质的主要来源，其与鱼粉在饲料的关系中互为消长，而豆类及油实类等油脂含量丰富者，在采油后所得到的油粕类，通常蛋白质含量高，普通用来补给蛋白质，是极有用处的饲料来源。惟这些油粕类的饲料价值常视其成分、营养价，适口性、不良因子等而有差异。 豆粕 系指大豆采油过的残渣经过适度加热、干燥、粉碎者。大豆粕是鸡、猪、牛适口性良好的蛋白质源。黄豆粕之粗蛋白质含量约45％，其消化率高达 85-92％。黄豆内存在着非营养成分的urease等酵素，trypsin inhibiter，且活性很高，在生的情况下会阻碍消化率，雏鸡、子猪的发育。黄豆粕经过某种程度加热后，成长阻碍因子即失去活性，且饲料价值提高，但视其制造工程宫之加热条件面品质受到影响。其指标是使用水溶性氮素指数（NSI），ursease活性，trypsihn inhibiter含量，通常NSI 25％以下为一个指标。牛方面，加热不充分之urease活性高者不能使用于尿素配合饲料。 豆粕的自然属性 1、物理性质 颜色：浅黄色至浅褐色，颜色过深表示加热过度，太浅则表示加热不足。整批豆粕色泽应基本一致。 味道：具有烤大豆香味，没有酸败、霉败、焦化等异味，也没有生豆腥味。 质地：均匀流动性好，呈不规则碎片状、粉状或粒状，不含过量杂质。 比重：0.515?/FONT>0.65Kg/l 2、化学成份 豆粕中含蛋白质43％左右，赖氨酸2.5％～3.0％，色氨酸0.6％～0.7％，蛋氨酸0.5％～0.7％，胱氨酸 0.5％～0.8％；胡萝卜素较少，仅0.2～0.4mg/Kg，流胺素、核黄素各3～6mg/Kg，烟酸15～30mg/Kg，胆碱2200～2800mg/Kg。豆粕中较缺乏蛋氨酸，粗纤维 去皮与带皮豆粕组成比较 原蛋白 质Crude Protein Extract 以太纤 维Ether Fiber % 粗纤维 Crude % 能量 Energy (kcal/kg) 带皮豆 粕 44.0（8）0.5（10）7.0（7）2240（8）去皮豆 粕 48.5（10）1.0（7）3.0（10）2475（10） 带皮与去皮豆粕氨基酸组成比较 带皮豆粕去皮豆粕精氨酸 3.4 3.8 赖氨酸 2.9 3.2 蛋氨酸0.65 0.75 胱氨酸0.67 0.74 色氨酸0.6 0.7 组氨酸 1.1 1.3 亮氨酸 3.4 3.8 异亮氨酸 2.5 2.6 苯丙氨酸 2.2 2.7 苏氨酸 1.7 2 总价值 2.4 2.7

发酵豆粕中抗原蛋白和不良寡糖的检测

发酵豆粕中抗原蛋白的定性检测 ——SDS-PAGE法 1．适用范围 本标准适用于测定发酵豆粕中抗原蛋白的定性检测。 2．仪器设备 2.1蛋白电泳仪： 2.1.1 电泳仪；（建议使用：北京六一仪器DYY-2C型） 2.1.2 电泳槽；（建议使用：美国伯乐公司的mini型） 2.2 25μl微量进样器； 2.3 制胶装置；（与电泳槽配套出售，包括玻璃板(厚度分别为1.0 mm和 1.5mm各一套)，梳子，拨胶板） 2.4 移液枪(1000μl,200μl,10μl)以及其配套枪头；（属于常规实验耗材） 3．试剂 3.1 丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、过硫酸铵、TEMED；（建议购至上海申能博彩，Chemisonic 进口分装，必须要进口的产品！国产做出来的结果很差）；分析纯； 3.2 无水酒精，分析纯； 3.3 甘氨酸，分析纯； 3.4 Tris，分析纯； 3.5 考马斯亮兰R250，分析纯； 3.6甲醇，分析纯； 3.7 冰醋酸，分析纯； 3.8 甘油（丙三醇），分析纯； 3.9 β-巯基乙醇，分析纯； 3.10 溴酚蓝，分析纯； 3.11 HCl，分析纯； 4.试剂的配置 4.1 SDS-PAGE溶液的配制： 30%丙烯酰胺的配制：丙烯酰胺 30.0g N’N-甲叉双丙烯酰胺 0.8g

去离子水定容至100ml 4.2 10%过硫酸铵：将1g过硫酸铵溶于10.00ml去离子水中。 2.00mol/L Tris-HCl(pH=8.8)：称取Tris 121.14g溶于500mL蒸馏水中，用浓盐酸 调节pH至8.8(要求准确)。 1.00mol/L Tris-HCl(pH=6.8)：称取Tris 60.57g溶于500mL蒸馏水中，用浓盐酸 调节pH至6.8(要求准确)。 10%SDS：称取5gSDS溶于50ml蒸馏水中。 1.0% 溴酚兰：称取0.05g溴酚兰溶于5ml蒸馏水中。 4.3 染色液：考马斯亮兰R250 0.25g 甲醇 45.40ml 冰醋酸 9.20ml 水 45.40ml 4.4 脱色液：甲醇 456.0ml 冰醋酸 72.0ml 水 472.0ml 4.5 4×分离胶缓冲液：2.00mol/L Tris-HCl(pH=8.8) 75ml 10%SDS 4ml 蒸馏水 21ml 10%过硫酸铵 5ml 4.6 4×堆积胶缓冲液：1.00mol/L Tris-HCl(pH=6.8) 50ml 10%SDS 4ml 蒸馏水 46ml 10%过硫酸铵 5ml 4.7 电泳缓冲液： Tris 3.0g 甘氨酸 14.4g SDS 1.0g 定容至1L，用HCl调节pH为8.3。

QBHHS JC006-2013 发酵豆粕中小肽的检测办法(三氯乙酸法)

1原理 利用三氯乙酸作蛋白质沉淀剂，将发酵大豆蛋白中的蛋白质和肽链较长的肽沉淀，并将其中的短链小肽用酸溶解出来，经过滤、离心、消化、蒸馏，测定其蛋白质含量，并以其占样品粗蛋白质的百分数来表示含量。本方法是参照中华人民共和国轻工行业标准大豆肽粉标准(QB/T 2653-2004)基础上修订而来。 2 试剂及仪器2.1 100ml 烧杯；2.2 10ml，50ml 移液管；2.3 干过滤装置；2.4 半微量法或全量法粗蛋白质测定的试剂和装置；2.5 15％三氯乙酸溶液；2.64000r/min 的离心机。 3操作步骤 准确称取样品6g 于100mL 烧杯中，准确加入15%三氯乙酸溶液50mL，混合均匀，静置5min，以中速定性滤纸干过滤，弃去少许初始滤液，将滤液转移至离心管，在4000r/min 下离心10min，准确移取其上清液10mL 于消化管中，按半微量法（消化后定容至100mL，准确移取其中10mL 进行蒸馏）或全量法粗蛋白质测定方法测定其粗蛋白质含量。同时做空白试验、测定样品的粗蛋白质的含量。 4结果与计算 小肽%（半微量法）=（V1－V0）×C×6.25×0.014×10×5÷m×100%÷cp×100% 小肽%（全量法）=（V1－V0）×C×6.25×0.014×5÷m×100%÷cp×100% 式中： V1-----------------馏出液消耗盐酸标准液的体积，ml；V0-----------------空白试验消耗盐酸标准液的体积，ml；检测技术规范与标准方法 编号：QB/HHS JC006-2013修订：第1版第1次修改发酵豆粕中小肽的测定方法 （三氯乙酸法）起草：赵丽霞审核：刘永垒 批准： 执行日期：2013年6月15日

基于ECRS的气箱生产流程优化

基于ECRS的气箱生产流程优化 第1章绪论 1.1 当前制造业生产普遍存在的问题 制造业是指将物料、能源、设备、工具、资金、技术、信息和人才等制造资源，根据市场的需求，通过生产制造，转化为可以提供给人们使用的工业品、大型工具和生活消费产品的一门行业。它既是国民经济最重要的物质保障，也是一个国家国际竞争力和综合实力的重要体现，还是先进科学技术的实践载体。 改革开放至今，中国制造业迅猛发展，在短短的时间内，取得了令人瞩目的工业成就，已成为世界制造业大国之一，并且促进中国经济又好又快发展和工业化体系完全建设，制造业已经成为推动我国国民经济和社会发展的核心动力。随着制造业的不断发展，导致越来越多的制造型企业的兴起，使得制造型企业数量不断增多，市场竞争不断加强。企业要想不断保持市场竞争力，在激烈的市场竞争中始终屹立不倒，必须不断提高产品质量，不断提高生产效率，不断降低生产成本。而要想提高生产效率、降低生产成本，就必须优化企业生产流程。 当前我国制造型企业虽然发展势头强劲，但与国外同类型企业相比仍有一定差距。这主要体现在产品质量和产品生产成本两个方面，产品质量与国外出产的比较起来还是存在些许差距的，而且我国产品生产成本相对较高，这些都是我国制造业急需改善的问题。一些企业为了降低成本打起了使用较差质量物料的主意，又希望产品生产后的效果不受影响，但事实证明这个是行不通的。使用低质量物料生产的产品是无法满足规定质量标准的，也无法使得客户满意，也就无法在市场上搏得大众的芳心。因此，要想提高产品质量、降低产品成本，首先必须优化产品生产流程，这是核心问题。 1.2 研究的内容 本文针对我国制造业车间生产流程普遍存在的问题进行分析，并选取上海广电电气AEG环网中压配电气箱生产流程存在的问题，基于ECRS原则进行生产流程优化改善的方法，分析实施流程优化可能遇到的问题，针对相关问题制定新的生产作业流程。 （1）研究重点主要为以下几个方面： ①充分了解当前车间生产现状。 ②分析当前车间生产流程所存在的问题。 ③提出合理的生产流程优化方案，提高生产效率。 （2）研究方法： ①参考相关文献，结合相关文献生产流程优化的案例进行研究。 ②运用秒表测时法、图表法和统计法对相关数据进行分析，便于研究。 ③基于ECRS原则和生产线平衡理论对生产流程的作业工序进行分析。（3）技术路线：

发酵豆粕的研究与应用

发酵豆粕的研究与应用 [提要] 豆粕是饲料工业中常用的一种优质植物蛋白原料，其营养丰富，蛋白质含量高，氨基酸组成比例合理，但是豆粕中存在多种抗营养因子，降低了畜禽对其营养的吸收和利用。用微生物发酵的方式处理豆粕，不仅可以有效去除豆粕中的抗营养因子，还能够将豆粕的蛋白质降解成小肽，更利于消化吸收，同时还能够产生有益的微生物代谢产物，大大提高了豆粕的营养价值。本文从豆粕营养价值、发酵豆粕特点、发酵豆粕的应用等方面进行阐述。 关键词：发酵豆粕；抗营养因子；营养价值 一、豆粕的营养特点 豆粕是大豆榨油之后的副产品，一般其粗蛋白含量在43%～48%之间，含有人体所必需的8种氨基酸，尤其是赖氨酸的含量比较高，其含量约为2.5%～2.8%。目前豆粕在饲料工业和畜牧养殖上有广泛的应用。与棉粕、菜粕、花生粕相比，豆粕具有氨基酸含量平衡、消化率高、适口性好等特点；与动物来源蛋白（如鱼粉、骨肉粉、血浆蛋白粉等）相比，豆粕具有货源充足、不易被病原菌污染或氧化腐败，含毒害物质概率低、安全系数高等特点。所以豆粕是一种优良的植物性蛋白饲料源。 （一）豆粕中的抗营养因子。豆粕虽然营养价值很高，但是豆粕中还存在着许多抗营养因子。这些抗营养因子会影响动物对豆粕营养成分的消化。在豆粕中主要有胰蛋白酶抑制剂、植酸、大豆凝血素、脲酶、低聚糖、脂肪氧化酶、大豆抗原蛋白及致甲状腺肿素等多种抗营养因子。它们的存在，一方面对动物体内某些消化酶起抑制作用或与营养物质络合成不易消化的成分等，使得豆粕的消化率和动物的吸收率下降；另一方面对动物体内的某些器官起到破坏作用，对动物的生理、生长、健康造成不良的影响。 豆粕中常见抗营养因子有以下几类： 1、胰蛋白酶抑制因子（TI）。这是大豆中的主要蛋白类抗营养因子。胰蛋白酶抑制剂会造成动物出现消化吸收功能紊乱，抑制鸡、猪等畜禽的生长、抑制动物体内胰蛋白酶活性，刺激胰腺大量分泌胰蛋白酶，引起胰腺的肿大。 2、植酸。能在肠胃中与多种二价阳离子结合，形成难溶性的植酸盐络合物，大大降低了动物对微量矿物质的吸收与消化，会使动物出现矿物质缺乏症状，如厌食、消瘦、生长迟缓和脱毛等。 3、脲酶。本身是没有毒性，但能将豆粕中部分含氮化合物分解成氨，降低氮的利用率，大量氨的存在会引起肌体氨代谢障碍，可引起动物中毒。 4、脂肪氧化酶。约占豆粕蛋白质的2%左右，能使大豆产生豆腥味和苦涩味，

豆粕的质量指标以及验收指标

豆粕的质量指标以及验收指标 1主题内容与适用范围 本标准规定了饲料用大豆粕的质量指标,适用山东省明发同茂饲料有限公司所用的大豆粕（注：经预压-浸提法或浸提法提取油后的饲料用大豆粕）。 2 感官性状 浅黄色不规则碎片状，色泽一致，新鲜，有豆粕的特殊香味。无发酵、霉变、结块、虫蛀及异味异臭。不得掺入饲料用大豆粕以外的物质，若加入抗氧化剂、防霉剂等添加物时，应做相应的说明。 3 质量指标（暂行标准） 水分≤14.5% ； 粗灰分≤7.0%; 粗蛋白质≥42.0%； 65%≤蛋白质溶解度≤85% 0.03 Nmg/分钟·克≤脲酶活性≤0.3% Nmg/分钟·克 4 验收指标 感官性状，水分，粗灰分，粗蛋白，蛋白溶解度，脲酶活性。 5 卫生指标 滴滴涕（mg/kg）≤0.02 ，其余卫生指标应符合中华人民共和国《饲料卫生标准》GB 13078有关的规定。 6 检验 水分、粗蛋白质、粗纤维、粗灰分等指标按《饲料工业标准汇编》2002版执行。对公司不能检测的项目或有争议的检测结果，根据需要可送相应的检测机构进行检测。

饲料用花生粕 1主题内容与适用范围 本标准规定了饲料用花生粕的质量指标，用于明发同茂饲料公司所用的花生粕。 2 感官性状 碎屑状，色泽呈新鲜一致的黄褐色或浅褐色，无发酵、霉变、虫蛀、结块及异味异臭。不得掺入饲料用花生粕以外物质，若加入抗氧化剂，防霉剂等添加剂时，应做相应的说明。 4 质量指标 水分≤12.0% 粗蛋白质≥45.0% 粗纤维< 6.5% 粗脂肪≤2.0% 粗灰分< 8.0% 5 卫生指标 黄曲霉毒素B1（mg/kg）≤0.05，其它卫生指标应符合中华人民共和国《饲料卫生标准》GB 13078的有关规定 6 检验 水分、粗蛋白质、粗纤维、粗灰分等指标按《饲料工业标准汇编》2002版执行。对公司不能检测的项目或有争议的检测结果，根据需要可送相应的检测机构进行检测。

发酵豆粕检测方法

发酵豆粕检测方法 （参考）

目录 1.检测用仪器简介 (2) 2.变性聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳 (3) 3.Elisa 大豆球蛋白（酶联免疫法） (6) 4.小肽的检测（酸溶蛋白） (10) 5.寡糖的检测——薄板层析法（TLC） (11) 6.乳酸的检测 (12) 7.蛋白溶解度的检测（PS） (13) 8.发酵豆粕蛋白溶解度的检测（改良） (14) 9.水溶性蛋白的检测 (15) 10.挥发性盐基氮（VBN） (17) 11.PH 值测定 (19) 12.水苏糖含量的测定 (20) 13.水分、粗蛋白、粗灰分、粗纤维、尿素酶活性的检测 (20)

1、检测用仪器简介

2、变性聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳 聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）是对蛋白质进行量化，比较及特性鉴定的一种经济、快速而且可重复的方法。通过对电泳条带的观察和分析，可以很明显的看出发酵前后或不同产品的抗原蛋白含量。 一、原理 SDS—聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳主要依据蛋白质的分子量对豆粕中的抗原蛋白进行分离。SDS 与蛋白质的疏水部分相结合，破坏其折迭结构，并使其稳定地存在于一个广泛均一的溶液中。SDS—蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。由于在样品介质和聚丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂，蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小，而电荷因素可以被忽略。SDS—PAGE 因易于操作和用途广泛，成为许多研究领域中一种重要的分析技术。 二、仪器 1、电泳仪及电泳槽 2、振荡器 3、离心机（10000 转） 4、移液枪（大、中、小） 5、离心管（7ml、5ml 或 1.5ml、1ml） 三、试剂： 1、单体母液：100ml 丙烯酰胺（ACR）30g 甲叉双丙烯酰胺0.8g 去离子水定容至100ml，棕色瓶4℃下存放。可保存 3 个月。 2、分离胶缓冲液（4×）（PH=8.8）100ml Tris-base（1.5mol/L）18.17g SDS 0.4g 浓 HCL 调节 PH 至 8.8，定容至 100ml，过滤，4℃存放。 3、浓缩胶缓冲液（4×）（PH=6.8）100ml Tris-base（0.50mol/L） 6.06g SDS 0.4g 浓 HCL 调节 PH 至 6.8，定容至 100ml，过滤，4℃存放。 4、10%（w/v）过硫酸铵1ml 过硫酸铵0.1g

豆粕发酵产业现状、存在问题及发展对策

豆粕发酵产业现状、存在问题及发展对策 陇东学院2013级农学石锁强 【摘要】：本文综述了发酵豆粕的生产现状及其生产工艺，分析了影响发酵豆粕品质的发酵菌种、水分、温度、批量大小、发酵设备等因素及传统发酵豆粕生产过程中存在的不足，如蛋白质含量低、抗营养因子去除不彻底、适口性差及成本高等问题，并对发酵豆粕的市场前景做了进一步展望。 【关键词】：豆粕固体发酵饲料抗营养因子 1.1 豆粕及发酵豆粕简介 1.1.1 豆粕简介 豆粕是大豆经提取豆油后得到的副产品。研究表明，其营养成分主要有蛋白质40%～44%，脂肪1%～2%、碳水化合物10%～15%，赖氨酸2.5%～3.5%，色氨酸0.6%～0.7%，蛋氨酸0.5%～0.7%，胱氨酸0.5%～0.8%，以及多种矿物质、维生素和必需氨基酸，营养成分比较齐全且均衡，还含有异黄酮、磷脂等生物活性物质[l]。 1.1.2 我国饼粕资源开发利用现状 因为饼粕在生产应用中的诸多优势，使得其在代替鱼粉制造发酵蛋白饲料方面的应用开始受到了越来越多的关注，虽然饼粕的发酵生产发展迅猛，但毕竟还处于发展的初期，还存在许多问题[2]，主要包括：①粗纤维含量高达14%以上，蛋白质含量20%-40%不等，有效能值不到豆粕的70%，由于残留皮壳，饼粕颜色发黑，严重影响其商品价值；②饼粕的蛋白质（氨基酸）消化利用率低，只有30%-60%，均明显低于鱼粉及豆粕等优质蛋白质饲料资源；③低质饼粕中有毒有害物质含量高。不仅严重影响畜禽生产性能，还会损害动物器官，影响动物的生长发育，甚至导致动物死亡。

1.1.3 发酵豆粕简介 (1) 发酵豆粕 发酵豆粕又名生物肽，生物豆粕，生物活性小肽，大豆肽[3]。是指利用有益 微生物发酵低质豆粕，去除多种抗营养因子，同时产生微生物蛋白质，丰富并平 衡豆粕中的蛋白质营养水平，最终改善豆粕的营养品质，提高饲料效率。发酵豆 粕含益生菌、酶、水溶性维生素、肽、氨基酸、大豆异黄酮等功能成分。这对动 物的生长十分有利。另外在发酵过程中产生的酸味物质，对于幼龄动物，具有明 显的诱食效果。并且，由于部分碳水化合物被降解，豆粕致密结构变得疏松，适 口性显著提高。 (2) 发酵豆粕的特点 豆粕经过发酵产生了一减一增的双重功效[4]：一减，是将豆粕中的抗营养因 子降解为动物可利用的营养素；一增，是较普通豆粕增加了活菌、肽、氨基酸、 活性酶、乳酸、维生素、大豆异黄酮等活性因子。相比于普通豆粕，发酵豆粕具 有以下优点。 ①能有效去除豆粕中的抗营养因子，其对动物的生理效应[5]见表1-1。通过 微生物发酵技术,可将豆粕中目前已知的多种抗原进行降解，有效去除豆粕中的 抗营养因子。微生物发酵法降解豆粕中抗营养因子主要通过微生物及其产生的代 谢产物对抗营养因子的降解来实现，部分对热敏感的抗营养因子，通过加热途径 即可将其去除。 表1-1 大豆中抗营养因子及其对动物的生理效应 抗营养因子名称生理效应 降低胰（糜）蛋白酶活性，生长迟缓，胰腺增生、肿大胰蛋白酶抑制因 子 大豆凝集素肠壁损伤，免疫反应，增加内源氮排出量，增加内源蛋白分泌 抗原蛋白免疫反应，影响肠壁完整性 单宁通过形成蛋白质－碳水化合物复合物，影响蛋白质和碳水化合物的 消化 皂甙溶血，影响肠道渗透性

发酵豆粕品质的评价与应用体系

发酵豆粕品质的评价与应用体系 技术部整理 用现代生物技术处理豆粕，在我国还处于大规模产业化初期，迄今为止国内生产发酵豆粕的企业只有几十家，且品质参差不齐，主要是因为对饲用发酵豆粕的功能、特性认识不足而无法制定统一的国家标准或行业标准，以至监管部门对鱼龙混杂的发酵豆粕市场无法进行有效监管，而饲料生产企业在选择产品上也无据可依。现就发酵豆粕的营养特性及其品质评定等做一些介绍。 1.发酵豆粕的营养特点及其功能 应用多菌种组合固态发酵技术处理豆粕所生产的功能大豆寡肽蛋白饲料，较之普通豆粕，具有“安全+营养”的双重功能。 豆粕中的抗营养因子已基本破坏 豆粕中主要的抗营养因子如胰蛋白酶抑制因子、低聚糖、凝集素、植酸与尿酶等，通过微生物、酶及发酵产生的有机酸作用，使得抗营养因子被降解（90%以上）或被钝化，从而得到破坏。 豆粕蛋白的抗原性基本消除 豆粕中含有的11S和7S蛋白（约5%左右）具有很强的抗原性，幼龄动物对其尤其敏感，通过发酵降解而使其失去抗原性，至大豆肽蛋白饲料中抗原蛋白含量约0.5%。 大分子蛋白质被降解为氨基酸及各种肽 豆粕中大分子蛋白质主要是11S和7S抗原蛋白，分子量分别为350KD和180KD，通过发酵酶解，分子量小于10000Da，蛋白质的KOH溶解度为95%以上，大分子蛋白质被降解为氨基酸及各种肽，氨基酸的平衡更好，有利于动物吸收，从而提升大豆肽蛋白的营养功能。 含有丰富的各种有益发酵产物 用现代生物技术处理豆粕生产功能大豆寡肽蛋白饲料所采用的菌株为复合菌株，其组成为乳酸菌、枯草芽孢杆菌、粪链球菌、黑曲霉与酵母菌等安全菌株，固态发酵豆粕制备的功能大豆寡肽蛋白饲料，含有益生菌、有机酸、蛋白酶等代谢产物这类“多功能添加剂”，从而实现功能大豆寡肽蛋白饲料“安全+营养”的双重功能。功能大豆寡肽蛋白饲料生产过程中生成的这类“多功能添加剂‘的主要成分为：益生菌、包括蛋白酶在内的复合酶、未知生长因子、有机酸、抗氧化成分、酵母培养物与发酵混合物等代谢产物。

微生物发酵提高玉米_豆粕型日粮营养价值的初步研究

微生物发酵提高玉米－豆粕型日粮营养价值的初步研究 摘要: 对玉米－豆粕型日粮进行混菌固态发酵，以去除其中的抗营养因子。研究结果表明，发酵饲料的抗原蛋白发生了大幅的降解，发酵后蛋白质相对分子质量主要集中在 18 kDa 以下，小于5 kDa的小分子肽含量从发酵前的 1． 35%提高到了 3． 60%，蛋白质的体外消化率提高了 4． 0 个百分点。发酵饲料的棉子糖家族寡糖被彻底降解，其淀粉含量降低了 3． 5 个百分点，直链淀粉含量提高了4． 13 个百分点，有益的代谢产物乳酸等有机酸的含量达到 2． 78% ，pH 下降至 4． 43。 关键词: 玉米; 豆粕; 微生物; 发酵 Abstract: Corn － soybean meal diet was fermented by mixed strains via solid state fermentation to remove the anti － nutrient factor． The results showed that antigen proteins in fermented feed were degraded sharp- ly． The relative molecular weight of proteins after fermentation were gathered below 18 kDa，and peptides below 5 kDa were increased from 1． 35% to 3． 60% ，accordingly the protein digestibility in vitro was in- creased 4． 0% ． Besides，raffinose family oligosaccharides were degraded thoroughly，while the starch con- tent decreased 3． 5% ，the amylose increased 4． 13% ，organic acids content including lactic acid reached to 2． 78% ，and the pH decreased to 4． 43． Key words: corn; soybean meal; microbe; fermentation 目前，国内饲料主要以玉米－豆粕型为主，其中 玉米作为主要的能量饲料，常常占到日粮组成的 60% 左右，而豆粕是动物日粮中蛋白质的主要来源， 提供饲料工业 75% 的饲用蛋白 ［1］

发酵豆粕饲用品质的评定指标及其应用

发酵豆粕饲用品质的评定指标及其应用 摘要植物肽蛋白饲料发酵豆粕用品质的评定指标主要有感官指标、常规理化指标、非常规理化指标与尝试检测指标等，本方就这些指标的应用及应注意的问题进行了讨论，指出要正确认识植物肽蛋白饲料发酵豆粕的饲用品质，必须从感观、抗营养因子去除程度、小分子蛋白含量、挥发性盐基氮及有益菌、乳酸含量等方面对其饲用品质进行综合的整体评定。 关键词植物肽蛋白发酵豆粕饲用品质评定指标应用 植物肽蛋白饲料发酵豆粕的饲用品质评定指标主要有感官指标、常规理化指标、非常规理化指标与尝试检测指标等。 1.感官指标及其在植物肽蛋白饲料发酵豆粕饲用品质评定上的应用 1.1正常植物肽蛋白饲料发酵的色、香、味与粘度 色：植物肽蛋白饲料发酵皆为棕黄色，这是由于豆粕经过发酵干燥颜色变深所致。如果颜色较浅且不均匀，或与豆粕一致，有可能发酵程度不够或掺入生豆粕或其它浅色蛋白原料。此外，同一批产品颜色应一致，不同批的产品颜色也应一致或接近一致。 香：淡淡的酸香味，无异味与霉味。加适量的水煮开后有很强且愉快的发酵酸香气，无氨臭。掺入了载机酸的植物肽蛋白饲料发酵豆粕，酸味较刺激且不均匀。 味：品尝正常无异物感，略带酸涩味。 粘度：植物肽蛋白饲料发酵豆粕按1：1~2加水调和后可感觉其粘度。 水泡评定：将植物肽蛋白饲料发酵豆粕放置到透明烧杯中用水泡，如果溶液及固体植物颜色金黄或灰黄且均匀，又无发黑杂志和黒（硬颗粒则为未发酵或发酵不彻底的豆粕），表明烘干时加热均匀，没有烘干过度，对营养成分保存较好。闻之有酸香味但无刺鼻感。上浮的杂质中无赖皮及其它植物杂质，手捏揉觉柔软但无明显颗粒感。用水不断轻柔冲洗发现水溶物质较多，最后剩下较少渣滓，则质量较好。这样的豆粕发酵程度较深，经发酵的其高分子蛋白（﹥66.2ku）、中分子蛋白（25~66.2ku）减少，小分子蛋白（﹤25ku）提高，还有更小的物质如肽、氨基酸等，水解度提高，故手捏无硬物颗粒感。 1.2凭感官指标对植物肽蛋白饲料发酵饮用品质评定的局限性 常见的植物肽蛋白饲料发酵掺假是往豆粕中掺入其它非豆粕蛋白原料，常见的有玉米蛋白、大米蛋白、棉粕、菜粕与花生粕等植物源蛋白，或肉骨粉、氨基酸菌体蛋白、水解羽毛粉、水解皮革粉与劣质蛋白胨等以提高蛋白含量，但却降低了植物肽蛋白饮料发酵豆粕的饲用品质。 这类产品可以通过显微镜观察或全氨基酸检测进行判定。纯豆粕发酵产品其氨基酸比例类似豆粕原料，这是因为植物肽蛋白饲料发酵豆粕的氨基酸是豆粕氨基酸的浓缩，如果氨基酸组成比例出现较大差异，掺入杂粕等的可能性较大。由于植物肽蛋白饲料发酵豆粕产品一般都粉得很细（一般90%过80目筛），粒度过

活性发酵豆粕

活性发酵豆粕（生物活性菌体蛋白）介绍 第一部分豆粕为什么要发酵 【豆粕发酵的目的】 一、破坏豆粕中抗营养因子 豆粕中含有胰蛋白酶抑制因子、低聚糖、凝集素、植酸、脲酶等抗营养因子，在发酵过程中通过微生物作用、酶及发酵产生有机酸的作用，使得抗营养因子被降解或者钝化，从而得到破坏。 豆粕中的抗营养因子的危害(综述) 1、胰蛋白酶抑制因子IT，抑制生长。大豆中最重要蛋白类抗营养因子，约占大豆蛋白6%，IT通过对胰蛋白酶的抑制，引起胰腺肥大和增生，甚至产生腺瘤，引起动物生长抑制。 2、大豆凝集素(SBA)，影响消化吸收及免疫抑制:脱脂豆粕中约含3%，难以完整吸收进入血液，引起红细胞凝集，在消化道中损坏小肠壁粘膜结构，影响多种酶的分泌，对肠道的消化和吸收功能有严重的抑制作用，凝集素也对动物的免疫系统产生不良影响，抑制动物生长。 3、低聚糖，胃肠胀气因子:豆粕富含棉子糖与水苏糖等低聚糖，人和动物不能消化这些低聚糖，结果它们进入结肠被细菌发酵产生大量二氧化碳和氢，少量甲烷，从而引起肠道胀气，并导致腹痛、腹泻、肠鸣等。 4、脲酶:影响蛋白吸收利用，是豆粕类蛋白原料质量重要影响因素。 5、植酸:与饲料原料中的磷结合,形成难于被动物消化吸收的植酸磷，降低动物对磷的消化吸收。 6、非淀粉多糖(NSP):是植物细胞壁物质主要成分，难以被单胃动物自身分泌的消化酶水解，能在消化道形成粘性食糜，降低饲料脂肪、淀粉和蛋白等养分营养价值。 7、酚类化合物:大豆中酚类化合物如单宁可以与蛋白质如赖氨酸、甲硫氨酸相结合，使蛋白质的利用率降低。 二、消除豆粕蛋白的抗原性 豆粕蛋白具有很强的抗原性，在发酵过程中，主要是通过降解而使其失去抗原性。大量研究表明，豆粕中存在的抗原物质能引起仔猪等幼龄动物的肠道过敏--损伤，进而引起腹泻。已证实，引起断奶仔猪过敏反应的主要抗原是大豆球蛋白和β--伴大豆球蛋白。 三、降解大分子蛋白质，形成易吸收的小肽蛋白 豆粕中主要组分11S 和7S 是大分子蛋白，分子量分别为350K D 和180K D，通过发酵酶解，被降解为可溶于水的小分子氨基酸及小肽，利于动物的吸收利用。S是蛋白质超速离心机组份分离时的单位,1S=1/1013秒。豆粕蛋白应用超速离心分离方法进行分离分析，按照沉降模式,可分为2S、7S、11S和15S 共4个主要的组份，它们的比例成分为9.4%,43%,43.6%和4.6%，7S、11S含量达86%以上。

发酵豆粕各项指标检测方法与标准

发酵豆粕各项指标检测方法与标准 发酵豆粕各项指标检测方法与标准 1、水份、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、灰份、钙和磷的分析方法全部采用国标法。 2、总有机酸测定采用氢氧化钠滴定的方法和乳酸测定采用气象色谱。 3、pH的测定采用玻璃电极pHS-3C型pH计测定。 4、可溶蛋白的测定方法 5、小肽含量的测定 水份的测定 水份测定直接参见国标 测定完水分后的样品需要测定其中的总有机酸的含量，其数值为A，并计算有机酸的挥发量。 水份含量的计算时应当扣除这部分有机酸的挥发量，否则会出现水分超标现象。 总有机酸检测 试剂：NaOH标准溶液（邻苯二甲酸氢钾标定），酚酞指示剂 仪器:磁力搅拌器离心机 方法： （1）取发酵后鲜样品15g 置于150ml烧杯中加入溶于100ml去离子水，在磁力搅拌器上浸提30min。 （2）取部分浸提样离心10min(3000r/min)。 （3）取上清液15ml, 加30ml去离子水稀释（以消除底色的影响），加酚酞指示剂四滴，用0.1molNaOH标准溶液滴定，并记录到终点消耗NaOH体积。（终点到溶液呈现粉红） 计算 乳酸（％）＝N(NaOH)×V(NaOH) ×0.09008/15×115/15g N(NaOH):NaOH标准溶液的浓度； V(NaOH) ：消耗NaOH标准溶液体积； 0.09008：乳酸的毫克当量。 0.1mol氢氧化钠的配制与标定 1、配制：称取9.6g氢氧化钠，溶于100ml水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。用塑料管虹吸5ml的上清液，注入2000ml无二氧化碳水中(将去离子水煮沸5分后冷却)，摇匀。 2、标定 称取0.67g于105~110℃烘至恒重的基准的邻苯二甲酸氢钾，准确至0.0001g，溶于50ml的无二氧化碳水中，加4滴酚酞指示剂（0.1％），用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，同时作空白试验。 3、计算 氢氧化钠标准溶液的浓度按下式计算 c（NaOH）=m/（V1-V2）×0.2042 式中c（NaOH）——氢氧化钠标准溶液之物质的量的浓度，mol/l； V1——滴定用邻苯二甲酸氢钾之用量，ml； V0——空白试验氢氧化钠溶液之用量，ml； m——邻苯二甲氢钾之质量，g； ?0.2042——与1.00ml氢氧化钠标准液[c（NaOH）=1.000mol/l]相当的以克表示的邻苯二甲氢钾之用量。 0.1％酚酞指示剂的配制：称取1.000克酚酞，溶解与100ml95％的试剂酒精中，混匀即得。

豆粕营养成份及标准

豆粕营养成份及标准集团档案编码：[YTTR-YTPT28-YTNTL98-UYTYNN08]

豆粕营养成份及标准 植物蛋白类 植物性蛋白亦是提供饲料蛋白质的主要来源，其与鱼粉在饲料的关系中互为消长，而豆类及油实类等油脂含量丰富者，在采油后所得到的油粕类，通常蛋白质含量高，普通用来补给蛋白质，是极有用处的饲料来源。惟这些油粕类的饲料价值常视其成分、营养价，适口性、不良因子等而有差异。 系指大豆采油过的残渣经过适度加热、干燥、粉碎者。大豆粕是鸡、猪、牛适口性良好的蛋白质源。黄豆粕之粗蛋白质含量约45％，其消化率高达85-92％。黄豆内存在着非营养成分的urease等酵素，trypsininhibiter，且活性很高，在生的情况下会阻碍消化率，雏鸡、子猪的发育。黄豆粕经过某种程度加热后，成长阻碍因子即失去活性，且饲料价值提高，但视其制造工程宫之加热条件面品质受到影响。其指标是使用水溶性氮素指数（NSI），ursease活性，trypsihninhibiter含量，通常NSI25％以下为一个指标。牛方面，加热不充分之urease活性高者不能使用于尿素配合饲料。 豆粕的自然属性 1、物理性质 颜色：浅黄色至浅褐色，颜色过深表示加热过度，太浅则表示加热不足。整批豆粕色泽应基本一致。 味道：具有烤大豆香味，没有酸败、霉败、焦化等异味，也没有生豆腥味。 质地：均匀流动性好，呈不规则碎片状、粉状或粒状，不含过量杂质。 比重：0.515?/FONT>0.65Kg/l 2、化学成份 豆粕中含蛋白质43％左右，赖氨酸2.5％～3.0％，色氨酸 0.6％～0.7％，蛋氨酸0.5％～0.7％，胱氨酸0.5％～0.8％；胡萝卜素较少，仅0.2～0.4mg/Kg，流胺素、核黄素各3～ 6mg/Kg，烟酸15～30mg/Kg，胆碱2200～2800mg/Kg。豆粕中较缺乏蛋氨酸，粗纤维主要来自豆皮，无氮浸出物主要是二糖、三糖、四糖，淀粉含量低，矿物质含量低，钙少磷多，维生素A、B、B2较少。表2反映的是豆粕与其他各种油粕的组成比较。 去皮与带皮豆粕组成比较 原蛋白质 CrudeProteinExtract 以太纤维 EtherFiber% 粗纤维 Crude% 能量 Energy(kcal/kg)带 皮 豆 粕 44.0（8）0.5（10） 7.0 （7） 2240（8） 去 皮 豆 粕 48.5（10） 1.0（7） 3.0 （10） 2475（10） 带皮与去皮豆粕氨基酸组成比较 带皮豆粕去皮豆粕精氨酸 3.4 3.8 赖氨酸 2.9 3.2 蛋氨酸0.650.75 胱氨酸0.670.74 色氨酸0.60.7 组氨酸 1.1 1.3 亮氨酸 3.4 3.8 异亮氨酸 2.5 2.6 苯丙氨酸 2.2 2.7 苏氨酸 1.72 总价值 2.4 2.7 豆粕在饲养中的应用 大约85%的豆粕用于家禽和猪的饲养。豆粕中富含的多种氨基酸对家禽和猪摄入营养很有好处。实验表明，在不需额外加入动物性蛋白的情况下，仅豆粕中含有的氨基酸就足以平衡家禽和猪的食谱，从而促进它们的营养吸收。在生猪饲料中，有时也会加入动物性蛋白作为额外的蛋白质添加剂，但总体看来，豆粕得到了最大限度的利用。只有当其他粕类单位蛋白成本远低于豆粕时，人们才会考虑使用其他粕类作为替代品。 在奶牛的饲养中，味道鲜美、易于消化的豆粕能够提高出奶量。在肉用牛的饲养中，豆粕也是最重要的油籽粕之一。但是，在牛的饲养过程中，有些时候并不需要高质量的豆粕，用其他粕类可以达到同样的喂养效果，因此，豆粕在牛饲养的地位要略逊于生猪饲养中的地位。 最近几年来，豆粕也被广泛应用于水产养殖业中。豆粕中含有的多种氨基酸枣例如蛋胺酸和胱胺酸枣能够充分满足鱼类对氨基酸的特殊需要。由于鱼粉用鱼捕捞过度原因，造成世界鱼粉减产，供给的短缺使鱼粉价格居高不下，因此，具有高蛋白质的豆粕已经开始取代鱼粉。在水产养殖业中发挥越来越重要的作用。 此外，豆粕还被用于制成宠物食品。简单的玉米、豆粕混合食物同使用高动物蛋白制成的食品对宠物来说，具有相同的价值。美国依利诺斯大学进行的一次实验表明，豆粕具有同猪肉一样的高蛋白，却不含影响营养消化的低糖酸盐。