质谱原理简介
质谱原理简介: 质谱分析是先将物质离子化，按离子的质荷比分离，然后测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。以检测器检测到的离子信号强度为纵坐标，离子质荷比为横坐标所作的条状图就是我们常见的质谱图。
常见术语: 质荷比：离子质量（以相对原子量单位计）与它所带电荷（以电子电量为单位计）的比值，写作m/Z.
峰：质谱图中的离子信号通常称为离子峰或简称峰离子丰度：检测器检测到的离子信号强度.
基峰：在质谱图中，指定质荷比范围内强度最大的离子峰称作基峰总离子流图；质量色谱图；准分子离子；碎片离子；多电荷离子；同位素离子总离子流图: 在选定的质量范围内，所有离子强度的总和对时间或扫描次数所作的图，也称TIC图.
质量色谱图指定某一质量（或质荷比）的离子其强度对时间所作的图.
利用质量色谱图来确定特征离子，在复杂混合物分析及痕量分析时是
LC/MS测定中最有用的方式。当样品浓度很低时LC/MS的TIC上往
往看不到峰，此时，根据得到的分子量信息，输入M+1或M+23等数值，观察提取离子的质量色谱图，检验直接进样得到的信息是否在
LC/MS上都能反映出来，确定LC条件是否合适，以后进行MRM等
其他扫描方式的测定时可作为参考。
1.0
指与分子存在简单关系的离子，通过它可以确定分子量.液质中最常
见的准分子离子峰是[M+H]+或[M-H]-.
在ESI中，往往生成质量大于分子量的离子如
M+1,M+23,M+39,M+18......称准分子离子，表示为：[M+H]+,[M+Na]+
等碎片离子: 准分子离子经过一级或多级裂解生成的产物离子碎片峰的数目及其丰度则与分子结构有关，数目多表示该分子较容易断裂,丰度高的碎片峰表示该离子较稳定，也表示分子比较容易断裂生成该离子。
Ep hedri ne, MW = 165
多电荷离子:
指带有2个或更多电荷的离子，常见于蛋白质或多肽等离子.有机质谱中,单电荷离子是绝大多数，只有那些不容易碎裂的基团或分子结构
-如共轭体系结构-才会形成多电荷离子.它的存在说明样品是较稳定
的?采用电喷雾的离子化技术，
可产生带很多电荷的离子，最后经计算机自动换算成单质/荷
比离子。
同位素离子由元素的重同位素构成的离子称为同位素离子各种元素的同位素，基本上按照其在自然界的丰度比出现在质谱中，这对于利用质谱确定化合物及碎片的元素组成有很大方便，还可利用稳定同位素合成标记化合物，如:氘等标记化合物，再用质谱法检出这些化合物，在质谱图外貌上无变化，只是质量数的位移，从而说明化合物结构，反应历程等
如何看质谱图:
(1)确定分子离子，即确定分子量
氮规则：含偶数个氮原子的分子，其质量数是偶数，含奇数个氮原子
的分子，其质量数是奇数。与高质量碎片离子有合理的质量差，凡质量差在3~8和10~13，21~25之间均不可能，则说明是碎片或杂质。
(2)确定元素组成，即确定分子式或碎片化学式
高分辨质谱可以由分子量直接计算出化合物的元素组成从而推出分子式低分辨质谱利用元素的同位素丰度，例
(3)峰强度与结构的关系
丰度大反映离子结构稳定
在元素周期表中自上而下，从右至左，杂原子外层未成键电子越易被电离，容纳正电荷能力越强，含支链的地方易断，这同有机化学基本
致，总是在分子最薄弱的地方断裂。
不同类型有机物有不同的裂解方式相同类型有机物有相同的裂解方式，只是质量数的差异需要经验记忆。
质谱解析的一般步骤
(适于低分辨小分子谱图，若已经是高分辨质谱图得到元素组成更好) (1)核对获得的谱图，扣除本底等因素引起的失真，考虑操作条件是否
适当⑵综合样品其他知识：例如熔点，沸点，溶解性等理化性质，样品来源，光谱，波谱数据等.
(3)尽可能判断出分子离子。
(4)假设和排列可能的结构归属：高质量离子所显示的，在裂解中失
去的中性碎片，女口M-1，M-15，M-18，M-20，M-31……意味着失H ,
CH3，H20，HF，0CH3
(5)假设一个分子结构，与已知参考谱图对照，或取类似的化合物,
并作出它的质谱进行对比。
有机质谱的特点
优点:
(1)定分子量准确，其它技术无法比。
⑵灵敏度高，常规10-7 —10-8g,单离子检测可达10-12g。
⑶快速，几分甚至几秒。
⑷便于混合物分析，LC/MS，MS/MS对于难分离的混合物特别有效，其它技术无法胜任。
(5)多功能，广泛适用于各类化合物。
局限性:
(1)异构体，立体化学方面区分能力差。
⑵重复性稍差，要严格控制操作条件。所以不能象低场NMR，IR等
自己动手，须专人操作。
(3)有离子源产生的记忆效应，污染等问题。
⑷价格稍显昂贵，操作有点复杂。
质谱仪器: 质谱仪由以下几部分组成
数据及供电系统
进样系统离子源质量分析器检测接收器
真空系统
真空系统质谱仪的离子源、质量分析器和检测器必须在高真空状态下工作, 减少本底的干扰，避免发生不必要的离子-分子反应。所以质谱反应属于单分子分解反应。利用这个特点，我们用液质联用的软电离方式可以得到化合物的准分子离子，从而得到分子量。
由机械真空泵（前极低真空泵），扩散泵或分子泵（高真空泵）组成真空机组，抽取离子源和分析器部分的真空。
只有在足够高的真空下，离子才能从离子源到达接收器，真空度不够则灵敏度低。
进样系统
把分析样品导入离子源的装置，包括：直接进样，GC，LC及接口,
加热进样，参考物进样等。
离子源使被分析样品的原子或分子离化为带电粒子（离子）的装置，并对离子
进行加速使其进入分析器，根据离子化方式的不同，有机质谱中常用的有如下几种，其中EI, ESI最常用。
EI(Electro n Imp act loni zatio n):电子轰击电离一硬电离。
CI（Chemical Ionization）:化学电离一核心是质子转移。
FD（Field Desorption）:场解吸一目前基本被FAB取代。
FAB（Fast Atom Bombardment）:快原子轰击一或者铯离子（LSIMS, 液体二次离子质谱）。
ESI（Electrospray lonization）:电喷雾电离一属最软的电离方式。适宜
极性分子的分析，能分析小分子及大分子（如蛋白质分子多肽等）
AP CI(Atmos pheric P ressure Chemical loni zati on): 大气压化学电离
—同上，更适宜做弱极性小分子。
APPI (Atmos pheric P ressure P hotoS pray loni zatio n): 大气压光喷雾电离一同上，更适宜做非极性分子。
MALDI(Matrix Assisted Laser Desor ptio n): 基体辅助激光解吸电离。通常用于飞行时间质谱和FT-MS，特别适合蛋白质，多肽等大分子. 其中ESI, APCI , APPI统称大气压电离（API）
实验室现有的离子源：
ESI电喷雾电离源
APCI大气压化学电离源
电喷雾（ESI）的特点通常小分子得到[M+H]+ ]+,[M+Na]+ 或[M-H]-单电荷离子，生物大分子产生多电荷离子，由于质谱仪测定质/荷比，因此质量范围只有几千质量数的质谱仪可测定质量数十几万的生物大分子。
电喷雾电离是最软的电离技术，通常只产生分子离子峰，因此可直接
测定混合物，并可测定热不稳定的极性化合物；其易形成多电荷离子的特性可分析蛋白质和DNA等生物大分子；通过调节离子源电压控
制离子的碎裂（源内CID）测定化合物结构。
大气压化学电离（APCI）特点大气压化学电离也是软电离技术，只产生单电荷峰，适合测定质量数小于2000Da的弱极性的小分子化合物；适应高流量的梯度洗脱/高低水溶液变化的流动相；通过调节离子源电压控制离子的碎裂。
电喷雾与大气压化学电离的比较电离机理：电喷雾采用离子蒸发，而APCI电离