血细胞计数

【目的和要求】掌握计数方法,原理及临床意义.

一、红细胞计数

成熟的红细胞为一高度分化的无核细胞（骆驼和家禽除外）。动物体内每天有一定数量的红细胞因衰老而死亡，同时又有相应数量的红细胞生成进入血液循环，以维持动态平衡，当这种平衡被破坏后，即可引起红细胞数量的变化，所以临床上常把计数红细胞和测定血红蛋白结合起来诊断动物贫血并将其分型。

【原理】红细胞计数是将一定量的血液经过稀释后，充入特制的细胞计数板的计数池内，在显微镜下计数规定区域内的红细胞数，而后换算出每升血液中的红细胞数（*1012个/L）【器材与试剂】

器材：纽巴氏（Neubauor）计数板（结构见图1），沙利氏三用吸管，试管，5ml吸管，血盖玻片，手揿计数器，显微镜。

试剂：红细胞稀释液：0.85%的氯化钠溶液或赫母（Hayem）氏液（取氯化钠 1.0g、结晶硫酸钠5.0 g、氯化高汞 0.5 g，以200.0ml蒸馏水溶解，加数滴碳酸品红）两液任选一种。【操作步骤】

1. 用5ml吸管吸取红细胞稀释液3.98ml，置于试管内。

2. 用三用吸管吸取全血至20ul处，擦去管外血液，将管内血液慢慢吹入上述试管底部，吸取上层稀释液反复清洗吸管内壁，轻轻混匀。

3. 用毛细吸管（三用管亦可）吸取混匀的血液稀释液，充入已盖有血盖片的计数板的计数池内，2～3分钟后即可计数。

4.将计数板装在显微镜上，在１０倍镜下找到计数的中央大方格，选择5个中方格（四角与中央的中方格或对角线的5个中方格,见图2和图3），转至４０倍镜下计数。

5.计数规则为：计左不计右（压左线取，压右线舍），计上不计下（压上线取，压下线舍）。【计算】红细胞数/升=X*5*10*200*106=X*1010/升

X∶5个中方格中的红细胞数；*5∶1个大方格内红细胞数(1mm2)；*10:将计数池高度(0.1mm)扩大10倍变为1mm；*200:血液稀释倍数；*106为每升血液含红细胞数。

【注意事项】

１.采血及装血用具、尤其计数板要干净，且干燥；

２.吸血动作要快，尤其是未加抗凝剂的血样；

３.充计数池时，计数板要平稳，充池液体要适中，且注意不要形成气泡；

４.注意采血和稀释血液时切忌出现溶血；

５.各中方格的红细胞数相差10个以上，应重新取样计数。

【各种家畜（禽）红细胞的正常参考值单位： *10１２个/L】

奶牛5.0～8.0；水牛3.2～7.0；马属动物6.0～13.0；绵羊8.0～15.0；山羊8.0～17.0；猪5.0～8.0；猫5.0～10.0；狗5.96～7.86；鹿 8.5～10.5；兔 5.5～7.5；水貂 7.7～13.1；狐 4.9～13.6；貉 8.5～10.5；鸡（雄性3.8，雌性3.0）；北京鸭（雄性2.71，雌性2.46）；鹅2.71；鸽（雄性4.0，雌性3.07）；火鸡（雄性2.24，雌性2.37）。

【临床意义】红细胞数的变化主要受血液浓度及造血功能的影响，所以其数量的变化又可分为相对性和绝对性、生理性的和病理性的变化

（一）红细胞增多

1．相对增多指因血浆容量减少，血液相对浓稠，造成红细胞数量相对增加。见于脱水（严重呕吐、腹泻、大量出汗、大面积烧伤）、渗出性胸膜或腹膜炎、休克以及饮水、吞咽困难、慢性肾上腺皮质功能减退、甲状腺功能亢进症危象、糖尿病等。

2．绝对增多临床上称为红细胞增多症，是一种由多种原因引起红细胞增多的症候群。（1）继发性红细胞增多症：是一种非造血系统疾病，发病的主要原因是因为血液中促红细胞生成素增多。

①促红细胞生成素代偿性增加：因血氧饱和度减低，组织缺氧所引起。红细胞增多的程度与缺氧程度成正比。见于阻塞性肺气肿、肺源性心脏病，以及携氧能力低的异常血红蛋白病等。

②促红细胞生成素非代偿性增加：这类患畜无血氧饱和度减低，组织无缺氧，促红细胞生成素增加与某些肿瘤或肾脏疾患有关，如肾癌、肝细胞癌、肾盂积水、多囊肾等。

（2）原发性红细胞增多症：即真性红细胞增多症，是一种原因未明的以红细胞增多为主的骨髓增殖性疾病，目前认为是多能造血干细胞受累所致。其特点是红细胞持续性显著增多，全身总血容量也增加，白细胞和血小板也有不同程度增多。本病属慢性病和良性增生，但具有潜在恶性趋向，部分病例可转变为白血病。

（二）红细胞减少

1．生理性减少畜禽出生后因身体生长发育迅速，而红细胞生成相对不足；妊娠中、后期的患畜血浆容量增加，使血液稀释，红细胞相对减少，表现出不同程度的贫血；老年家畜因骨髓造血功能减低，导致红细胞减少。

2．病理性减少能引起红细胞生成减少或导致红细胞破坏增加的病因，均可引起红细胞减少。见于各种原因引起的溶血性贫血、再生障碍性贫血、营养性贫血等

图1.血细胞计数板构造图2.计数室的分区

二、白细胞的计数

正常血液中白细胞包括5种，其数量为一稳定值。白细胞计数就是指计算在一定积内这5种细胞的总数。

用冰醋酸液将血液稀释（使红细胞溶解破坏而白细胞形态保持不变,但此法不适用于成熟红细胞核仍不退化的动物的白细胞的计数），同时将稀释的血液混均，而后取稍许稀释的血液充入特制的血细胞计数板的计数池，在显微镜下计数一定容积中的白细胞数，经换算求得每升血液中的白细胞总数（*109/L）。

所需器材与红细胞计数相同。白细胞稀释液可用2％的冰醋酸液，内加1％结晶紫液1

1. 用0.5 ml吸管吸取2％的冰醋酸液0.38ml置于小

2.用沙利氏吸管吸取被检血至20μl

3.擦去管外粘附的血液，吹入小试管中，反复吸吹数次，以洗净管内所粘附的血细胞，轻轻振荡混合，放置5～10min

4.用毛细吸管吸取被稀释的血液，充入已盖好盖玻片的计数室内，静置2～3min后，待白细

白细胞数/L = 四个大格内的白细胞数÷4*10*20*106

式中：÷4 为每个大格内白细胞平均数；*10 将一个大格容积0.1μl换算为1.0μl *20 血液稀释倍数；*106将1μl换算为1L

1.加入白细胞稀释液后，一定要等红细胞充分破坏后再计数，防止其影响计数；

2.各大方格内白细胞数若相差10个以上，需重新计数。

3.其它注意事项基本与红细胞计数的同。

4.切忌把尘埃异物及红细胞碎片与白细胞混淆，可用高倍镜观察，白细胞有细胞核的结构，

【正常参考值*109/L

马、骡、驴约为8.5～15.5/L；牛约为7.3～11.5/L；绵羊约为6.5～10.4/L；山羊、猪约为10.1～15.1/L；狗5.6～19.2/升；猫8.0～19.2/升。鸡为19.0/L;鸭为23.0/L；鹅30.0/L

【临床意义】通常白细胞数为红细胞的1/800～1/1000，其数量的变化较红细胞更为显著。

1.白细胞增加：

（1）生理性增加：见于妊娠、分娩后及新生畜；健康家畜采食后稍多于采食前，下午比早晨稍多；免疫接种、生物制剂使用或无菌手术后一段时间内，白细胞会增多。

（2）病理性增加：见于各种感染（真菌、杆菌、某些球菌的感染）性、中毒性（代谢性酸中毒、毛地黄中毒）、急性出血性和溶血性疾病，白血病，尿毒症等。鸡白痢时白细胞总数高达245.0*109/L.

2．白细胞减少：临床较少见。主见于某些病毒感染性疾病，如流感、猪瘟、马传贫等，某些慢性中毒性疾病如汞制剂中毒，辐射线的照射、再障性贫血、病畜极度衰竭及濒死期等。禽叶酸缺乏时粒细胞明显减少,白细胞总数也减少.

微生物的计数——血球计数板法

微生物得计数——血球计数板法【摘要】测定微生物细胞数量得方法很多，有分光光度法、显微直接计数法与平板计数法。分光光度法比较简便，易操作，但就是会使数据严重偏大。而平板计数法则会使实验数据严重偏小.?显微计数法适用于各种含单细胞菌体得纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质，常不易分辨.菌体较大得酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板,一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(PetｒｏｆHausｓｅr)细菌计数板。两种计数板得原理与部件相同，只就是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。而血球计数板较厚,不能使用油镜，计数板下部得细菌不易瞧清.本实验采用血球计数板法，主要目得就是了解血球计数板法得构造与使用方法，学会用血球计数板对酵母菌细胞进行计数。一、实验目得与要求１、了解微生物计数常用得三种方法：分光光度法;平板计数法；血球计数板法。 2、了解血球计数板得构造与使用方法。 3、学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。二、基本原理利用血球计数板在显微镜下直接计数，就是一种常用得微生物计数方法。此法得优点就是直观、快速.将经过适当稀释得菌悬液（或孢子悬液）放在血球计数板载玻片与盖玻片之间得计数室中，在显微镜下进行计数。由于计数室得容积就是一定得（０、1mｍ2），所以可以根据在显微镜下观察到得微生物数目来换算成单位体积内得微生物总数目。由于此法计得得就是活菌体与死菌体得总与，故又称为总菌计数法. 血球计数板,通常就是一块特制得载玻片，其上由四条槽构成三个平台。中间得平台又被一短横槽隔成两半，每一边得平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分九个大方格,中间得大方格即为计数室，微生物得计数就在计数室中进行。计数室得刻度一般有两种规格,一种就是一个大方格分成１６个中方格，而每个中方格又分成25个小方格;另一种就是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。但无论就是哪种规格得计数板,每一个大方格中

三分类血液细胞分析仪与五分类区别

三分类血液细胞分析仪与五分类区别 This manuscript was revised by the office on December 22, 2012

三分类血液细胞分析仪与五分类区别血液细胞分析仪又名血细胞分析仪，目前市场上的血细胞分析仪主要分为全自动的和半自动的仪器。随着该仪器成为医院临床检验的必备仪器以及近几年来计算机技术的不断发展，产品也从三分群转向五分群，从二维空间转向三维空间，对于三分类血液细胞分析仪与五分类仪器有何区别呢？ 1、仪器检测原理的区别三分类的仪器大都采用电阻抗检测技术，由信号发生器、放大器、甄别器、阀值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成；五分类的产品大都采用光散射检测技术，主要由激光源（多采用氩离子激光器，以提供单色光）、检测区（主要由鞘流形式的装置构成，以保证细胞混悬液在检测液流中形成单个排列的细胞流）、检测器（散射光检测器系光电二极管，用以收集激光照射细胞后产生的散射光信号；荧光检测器系光电倍增管，用以接受激光照射荧光染色后细胞产生的荧光信号）。 2、白细胞分类方法的区别三分类产品是将白细胞分为淋巴细胞，单核细胞，粒细胞；五分类的仪器则是将白细胞分为淋巴细胞、单核细胞、粒细胞（中性细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞）。 3、适用客户的区别三分类血液细胞分析仪主要适用于三甲以下的医院、妇幼保健院、诊所以及社区服务中心等，价格相对要便宜很多；而五分类的产品主要用于三甲以上的医院，价格以及试剂方面要贵很多。随着当前临床检测的需要，各种血液细胞分析仪不断涌现，小编个人认为产品没有好坏之分，主要是选择合适自己的，客户可根据临床检测样本量的多少以及检测标准来选择

血细胞计数板的应用

血细胞计数板及其应用 (1)血细胞计数板：通常有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格。但无论哪种规格的计数板，每个大方格都有16×25＝400个小方格。一个大方格长和宽各为 1 mm，深度为0.1 mm，体积为0.1 mm3。 (2)计数方法：对于16×25的计数板而言，计四角的4个中方格共计100个小方格中的个体数量；而对于25×16的计数板而言，计四角和正中间的(共5个)中方格共计80个小方格中的个体数量。(如图所示) (3)计算方法： ①16×25型的计数板：酵母细胞个数/mL＝(100个小方格细胞总数/100)×400×10000×稀释倍数。 ②25×16型的计数板：酵母细胞个数/mL＝(80个小方格细胞总数/80)×400×10000×稀释倍数。附： 1.镜检计数方法 ①方格内细胞的计数顺序为左上→右上→右下→左下。②压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数。③酵母细胞若有粘连，要数出团块中的每一个细胞。④出芽酵母的芽体体积若超过细胞体积的1/2，则算独立个体。⑤计数总数不少于300个细胞。 2．注意事项（1）进行计数前，应先将试管摇匀，目的是使酵母菌在培养液中混合均匀，以减少计数误差。（2）显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取相邻两边及顶角计数。

（3）若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液稀释一定倍数后再计数。（4）本实验无另设对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。（5）血细胞计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和冲洗的方法清洗。例1：检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0.1 mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻个／mL。(5n×105) 例2：为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16（1mm×1mm×0.1mm）型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，理论上色细胞的个数应不少于，才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。（无30）

三分类血液细胞分析仪与五分类区别

血细胞计数板计算方法

血细胞计数板计算方法血细胞可以说是人类身体的一种微型结构，而且细胞计数吧，通常是用来计算血细胞数量的一种生物学工具。血细胞计数板计算公方法是怎样的呢？如果你对这个问题感兴趣，不妨跟小编一起来研究一下吧。 1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。 2．取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。 3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。 4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。 5．计数时若计数区是由16个中方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个中方格（即100小格）的菌数。如果是25个中方格组成的计数区，除数上述四个中方格外，还需数中央1个中方格的菌数（即80个小格）。 6．对于出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。每个样品重复计数2-3次（每次数值不应相差过大，否则应重新操作），按公式计算出每mL（g）菌悬液所含细胞数量。 7．测数完毕，取下盖玻片，用水将血球计数板冲洗干净，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干，放入盒内保存。通过上文的介绍，你对血细胞计数板的计算方法是否增加了了解呢？血细胞是存在于我们人体血液中的一种重要组成成分，对人类的健康来说具有举足轻重的影响。而医生通过测量你的血细胞分布状况和数量，对于判断身体的病灶具有重大的作用。因此我们都应该对血细胞的计算方法有所了解。

关于血球计数板的使用

关于“使用血球计数板对酵母菌进行计数”的问题探讨摘要：“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”是新课标教材“必修3：稳态与环境”中的学生分组实验，需要学生学会使用血球计数板进行准确计数酵母。通过结合“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”这一实验和有关血球计数板的命题的分析，对血球计数板的计数原理和操作方法中遇到一些问题进行探讨。在人教版高中生物教材中，“探究培养液中酵母菌种群数量变化”只作了基本的原则性指导，对一些操作过程的细节，没有作细化阐述，而这些细节都是实验成功的关键所在。如何正确使用血球计数板对酵母菌种群数量进行计数，是本实验的重点和难点。根据中学实验条件，用显微镜直接计数法相对容易，只要指导学生掌握血球计数板的正确使用便可。但学生对血球计数板结构的认识不够明确，教师也讲解不清晰。而在近年来的高考题或模拟题中多次出现相关的试题，而且不仅从如何计算酵母的数量的角度来考查学生，还从操作方法或操作过程中出现的一些问题以及处理方法来考查学生。而教师在遇到这些问题往往让学生记答案，学生对这些问题仍是感到疑惑。笔者在近年来的教学实践中，将教师和学生在做该实验和相关命题遇到的一些问题，进行了分析探讨。 1 血球计数板的构造和计数原理虽然不同版本的教材推荐使用的血球计数板的规格不同，人教版建议使用2mmx2mmx0.1mm方格，苏教版推荐使用1mmx1mmx0.1mm方格，但是血球计数板的使用原理和方法是相同的。以下以1mmx1mmx0.1mm方格的计数板为例分析结构和计数原理。每个血球计数板上有两个计数室（图1）。血球计数板上的符号和数字（图1）的含义是：XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板中计数室分25个中格；0.1mm为盖上盖玻片后计数室的高；1/400mm2表示计数室面积是1mm2（计数室边长1mm），分400个小格，每小格面积是1/400mm2（图2），9个大方格中只有中间的有小方格的中央大方格才是计数室。不要认为9个大方格都是计数室。计数室通常也有两种规格：一种是16x25型，即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格（图2）；另一种是25x16型，即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16x25=25x16=400个小方格组成。计数时，若计数室是由16个中方格组成，数左上、左下、右上、右下的4个中方格（即100个小方格）的菌数。如果是由25个中方格组成的计数室，除数上述4个中方格外，还需数中央1个中方格（即80个小格方）的菌数（图3）。计数时对压在中格四条线上的细胞只计数相邻两边及其夹角上的细胞（一般选左边和上边的线）。以1minx1mmx0.1 mm方格的计数板为例，如果是25个中格的计数室，计数的5个中格菌数共N个，那么1mL培养液中菌数=N/5x25x10000x稀释倍数。如果是16个中格的计数室，计数的4个中格菌数共N个，那么1mL培养液中菌数=N/4x16x10000x稀释倍数。 2 血球计数板操作方法的注意事项教师在介绍血球计数板的操作方法时，往往是比较简略的。学生在操作中因为对操作要求不理解而造成操作不当，或者对操作中出现的异常问题的处理不知如何处理。而通过分析近几年的有关血球计数板的相关试题，更注重操作方面的考查，而教师在这方面对学生分析阐述得少。（1）在取样计数前，为什么要将酵母菌培养液进行振荡摇匀？因为这样使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚沉淀，提高计数的代表性和准确性，减小培

血球计数法计数原理

一、血球计数板的使用原理显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上（又称计菌器），于显微镜下直接计数，然后推算出含菌数的一种方法。血球计数板是常用的计菌器之一。血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室。这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其容积为0.1mm3，即1mm×1mm×0.1mm方格的计数板；大方格的长和宽各2mm，深度为0.1mm，其容积为0.4mm3，即2mm×2mm×0.1mm方格的计数板。在血球计数板上，刻有一些符号和数字(见图一)，其含义是：XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格；0.1mm 为盖上盖玻片后计数室的高；1/400mm2表示计数室面积是1mm2，分400个小格，每小格面积是1/400 mm2。计数室通常也有两种规格：一种是16×25型，即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是25×16型，即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由 16×25=25×16=400个小方格组成。 1．16×25型的计数板将计数室放大，可见它含16中格，一般取四角：1、4、13、16四个中方格（100个小方格）计数（见图二）。将每一中格放大，可见25个小格。计数重复3次，取其平均值。计数完毕后，依下列公式计算：酵母细胞个数／1mL=100个小方格细胞总数/100 ×400×10000×稀释倍数

细胞数的测定(血球计数板的使用方法)

、目的与要求了解血球计数板计数的原理，学会测定细胞总数方法。二、原理用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。血球计数板是一块特制的厚载玻片，其上由四条槽构成三个平台，中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分为9个大方格，中间的大方格即为计数室。计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，每个中方格又分成25个小格（即16x25），另一种是一个大方格分成25个中方格，每个中方格又分为16个小方格（即25X 16），但无论是哪一种规格的计数板，每一个大方格中的小方格都是400个，每一个大方格边长为 1 mm则每一个大方格的面积为 1 mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度为0.1mm,所以计数室的容积为0.1 mm3 实磴圈-石血球计弦板杓构jfi 三、血球计数板的使用方法（一）菌悬液的制备为便于计数，对样品进行适当稀释，稀释程度以每小格内含5?10个酵母为宜，可采用10倍系列稀释法。（二）加菌悬液样品将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛细滴管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，用吸水纸吸去多余水液。由盖玻片边缘或槽内加入计数板来回推压盖玻片，使其紧贴在计数板上，计数室内不能有气泡。静置5-10分钟。（三）显微镜计数在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观察计数，上下调动细螺旋，以便看到小室内不同深度的菌体。位于分格线上的菌体，只数两条边上的，其余两边不计数。如数上线就不数下线，数左边线就不数右边线。当芽抱菌体达到母细胞大小的二分之一时，可记作两个细胞。（四）计数时若使用刻度为25X 16 （大格）的计数板，则数四角的4个大格（即100小格）内的菌数。如用刻细胞数的测定 D申決甌裕牧我

血细胞的种类和生理功能

红细胞的生理功能红细胞的主要功能是运输O2和CO2，此外还在酸碱平衡中起一定的缓冲作用。这两项功能都是通过红细胞中的血红蛋白来实现的。如果红细胞破裂，血红蛋白释放出来，溶解于血浆中，即丧失上述功能。白细胞的功能白细胞是机体防御系统的一个重要组成部分。它通过吞噬和产生抗体等方式来抵御和消灭入侵的病原微生物。 1.吞噬作用吞噬作用是生物体最古老的，也是最基本的防卫机制之一。对于其要消灭的对象无特异性，在免疫学中称之为非特异性免疫作用。中性粒细胞和单核细胞的吞噬作用很强，嗜酸性粒细胞虽然游走性很强，但吞噬能力较弱。白细胞可以通过毛细血管的内皮间隙，从血管内渗出，在组织间隙中游走。它们吞噬侵入的细菌、病毒、寄生虫等病原体和一些坏死的组织碎片。一般认为，白细胞能向异物处聚集，并将其吞噬，这是因为白细胞有趋化性。由于细菌体或死亡的细胞所产生的化学刺激，诱发白细胞向该处移动（图5－5）。组织发炎时产生一种活性多肽，也是白细胞游动的诱发物质之一。中性粒细胞内的颗粒为溶酶体，内含多种水解酶，能消化其所摄取的病原体或其他异物。一般一个白细胞处理5～25个细菌后，本身也就死亡。死亡的白细胞集团和细菌分解产物构成脓液。单核细胞由骨髓生成，在血液内仅生活3～4天，即进入肝、脾、肺和淋巴等组织转变为巨噬细胞。变为巨噬细胞后，体积加大，溶酶体增多，吞噬和消化能力也增强。但其吞噬对象主要为进入细胞内的致病物，如病毒、疟原虫和细菌等。巨噬细胞还参与激活淋巴细胞的特异免疫功能。此外，它还具有识别和杀伤肿瘤细胞，清除衰老与损伤细胞的作用。 2.特异性免疫功能淋巴细胞也称免疫细胞，在机体特异性免疫过程中起主要作用。所谓特异性免疫，就是淋巴细胞针对某一种特异性抗原，产生与之相对应的抗体或进行局部性细胞反应，以杀灭特异性抗原。血液中淋巴细胞按其发生和功能的差异，分为T淋巴细胞和B淋巴细胞两类。（1）细胞免疫细胞免疫主要是由T细胞来实现的。这种细胞在血液中占淋巴细胞总数的80％～90％。T细胞受抗原刺激变成致敏细胞后，其免疫作用表现以下三个方面。直接接触并攻击具有特异抗原性的异物，如肿瘤细胞，异体移植细胞；分泌多种淋巴因子，破坏含有病原体的细胞或抑制病毒繁殖；B细胞与T 细胞起协同作用，互相加强，来杀灭病原微生物。（2）体液免疫体疫免疫主要是通过B细胞来实现的。当此细胞受到抗原刺激变成具有免疫活性的浆细胞后，产生并分泌多种抗体，即免疫球蛋白，以针对不同的抗原。B细胞内有丰富的粗面内质网，蛋白质合成旺盛。抗体通过与相应

血球计数板的使用

血球计数板生物实验用具血球计数板是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量. 血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3. 计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方

格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图. 血球计数板的使用以计数酵母菌为例 (1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数. (2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可. (3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片. (4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内. (5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数. (6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞). (7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数. 3.计算公式

血球计数板的使用(有图指导)

血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3. 计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.

血球计数板的使用以计数酵母菌为例 (1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数. (2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可. (3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央计数室上加盖专用的厚玻片. (4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内. (5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.

(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞). (7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数. 3.计算公式 (1)16格×25格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.

微生物的计数——血球计数板法

微生物的计数一一血球计数板法【摘要】测定微生物细胞数量的方法很多，有分光光度法、显微直接计数法和平板计数法。分光光度法比较简便，易操作，但是会使数据严重偏大。而平板计数法则会使实验数据严重偏小。显微汁数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有朵菌或杂质，常不易分辨。菌体较大的酵母菌或覆菌抱子可釆用血球讣数板，一般细菌则釆用彼得罗夫?霍泽（Petrof Hausser）细菌讣数板。两种讣数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，可以使用油镜观察。而血球讣数板较厚，不能使用油镜，计数板下部的细菌不易看清。本实验采用血球计数板法，主要U的是了解血球计数板法的构造和使用方法，学会用血球讣数板对酵母菌细胞进行计数。一、实验目的与要求 1、了解微生物汁数常用的三种方法：分光光度法；平板计数法；血球计数板法。 2、了解血球计数板的构造和使用方法。 3、学会用血球讣数板对酵母细胞进行计数。二、基本原理利用血球讣数板在显微镜下直接讣数，是一种常用的微生物讣数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液（或泡子悬液）放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的（0.1mm'）,所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数LI来换算成单位体积内的微生物总数Uo III于此法计得的是活菌体和死菌体的总和，故乂称为总菌计数法。血球计数板，通常是一块特制的载玻片，其上山四条槽构成三个平台。中间的平台乂被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数室，微生物的计数就在计数室中进行。计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格乂分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格乂分成16个小方格。但无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方

细胞计数方法------细胞计数板法.

细胞计数方法------细胞计数板法实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。具体操作： 1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。 2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。 3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算：细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml (注：当细胞很多时，可在四个格中选一定数目较平均的小格，由于每大格中有16个小格，然后计左侧和上方的细胞数，求出每小格的细胞数，取平均值m，m ×16即每个格的平均值。所以，细胞密度=m×16×104个/ml) 说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为： 1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3而1ml=1000ul=1000mm3 （注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液。） ================================================ 细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。

血细胞计数板的构造和使用方法简介(必3)

血细胞计数板的构造和使用方法一、血细胞计数板的构造血细胞计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台；中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网（见图B ——侧视图、图A ——俯视图；1.计数板 2.盖玻片 3.计数室）。方格网上刻有9个大方格（见图C 、E ），其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物（细胞）计数用。计数室通常有两种规格：一种是 25×16型，即大方格内分为25个中方格（中方格之间用双线分开，见图C 、D ），每一中方格又分为 16个小方格；另一种是16×25型，即大方格内分为16个中方格（见图E ），每一中方格又分为25个小方格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点：即每一大方格都是由25×16=16×25=400个小方格组成（见图D ）。计数室边长为1mm （或2mm ），面积为l mm 2（或4 mm 2），盖上盖玻片后，计数室的深度为0.1mm ，所以计数室的容积为0.1mm 3（或0.4 mm 3）。（图A ——俯视图：XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格；0.1mm 为盖上盖玻片后计数室的深度；1/400mm 2表示计数室面积是1mm 2，分400个小格，每小格面积是1/400 mm 2）。 C D E

二、血细胞计数板的使用（以计数酵母菌为例） (1)视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释。样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数，以每小方格内含有4—5个酵母细胞为宜。 (2)将血细胞计数板用擦镜纸擦净，在计数室上盖上一块专用的盖玻片。 (3)将稀释后的酵母菌悬液摇匀，用吸管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数室，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。 (4)静置片刻，待酵母菌全部沉降到计数室低部，将血细胞计数板置载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数室后，再转换高倍镜观察并计数。由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。 (5)计数时若计数室是由16个中方格组成（见图E），数左上、左下、右上、右下的4个中方格（即100个小方格）的菌数；如果是由25个中方格组成的计数室，除数上述四个中方格外，还需数中央l个中方格（即80个小方格）的菌数（见图C、D）。若菌体位于中方格线上，一般只计数中方格的上方和左方线上的酵母细胞（如右图用圈标出者），以减少误差。计数时应不时调节细准焦螺旋，才能观察到不同深度的菌体。 (6)计数一个样品要以两个计数室中计得的平均数值来计算，每个样品计数应重复3次（每次数值不应相差过大，否则应重新操作），再取其平均值，最后换算出10毫升（或其他体积）（10毫升等于104mm3）菌悬液所含酵母菌细胞数量（注意考虑稀释倍数）。 (7)测数完毕，取下盖玻片，用清水将血细胞计数板冲洗干净，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干，放入盒内保存。

血涂片与分类流程

血涂片与分类流程Revised on November 25, 2020

血涂片和分类计数的质量控制流程1、目的：规范血涂片评价和分类计数的质量控制管理流程，确保检验质量。 2、适用范围：检验科门诊化验室、细胞室 3、职责：检验科门诊化验室、细菌室检验人员均须熟知并遵守本程序。 4、质量控制流程：血涂片的制备玻片：保持中性、洁净、无油腻制备血涂片：血涂片外观应头、体、尾分明，分布均匀，边缘整齐，两侧留有空隙。血膜外观应厚薄适宜。血膜厚度、长度和血滴的大小、推片与玻片之间的角度、推片时的速度及血细胞比容有关。一般血滴大、角度大、推片速度快则血膜厚；反之，则血膜薄。血细胞比容低于正常时，血液粘度高，宜保持较小的角度，可得满意结果；相反，血细胞比容低于正常时，血液较稀，则需用较大的角度和较快的推片速度，才可得满意的血涂片。良好的血涂片的“标准”为血膜由厚到薄逐渐过渡。染色：血涂片应在1h内完成染色，或在1h内用无水甲醇固定后染色。血涂片分类计数质量控制流程

血涂片白细胞分类计数方法：是有血涂片经瑞氏染色后，在油镜下根据白细胞形态特点逐个分类计数（一般计数100-200个白细胞），并观察其形态变化，然后求各种白细胞的比值。血涂片分类计数注意事项：血涂片进行白细胞分类科稳定6-8h，但2h后粒细胞形态即有变化，故需要镜检分类应及早分血片：正确判断是否需要人工显微镜复查，凡出现以下情况之一者，都应当进行显微镜复查。（1）血细胞计数结果明显异常（WBC<×109/L，WBC>×109/L，Hb<50g/L，PLT<50×109/L）。（2）血细胞直方图异常：红细胞、白细胞、血小板任何一项直方图的峰值出现偏移。（3）出现警示信号。这需要我们操作人员在日常生活中严格执行，注意分析检验结果各参数之间的关系，才能对异常结果做出正确判断。加强与医护人员的联系：对在检测中出现的异常和阳性结果，要及时主动和临床医生取得联系，与临床资料进行相关性分析，对有疑问的做到合理解释。 1 、目的：

血细胞计数板相关知识及练习

血细胞计数板一、血细胞计数板的构造血细胞计数板被用以对人体内红、白血细胞进行显微计数之用，也常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量，是一种常见的生物学工具。血细胞计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面，刻有一个方格网。方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用。这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为0.1mm 3。计数室通常有两种规格?一种是大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16 X 25=25 X 16=400个小方格组成，见图：血细胞计数板(25格X16格) 、血细胞计数板的使用以计数酵母菌为例 1. 使用 (1) 用血细胞计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数。

一般稀释10倍即可。 (3) 将血细胞计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室上加盖专用的厚玻片。 (4) 将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水纸吸取，捎待片刻，使酵母菌全部沉降到血细胞计数室内。 (5) 计数时，如果使用16格X 25格规格的计数室，要按对角线位，取左上，右上，左下，右下 4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格X 16格的计数板，除了取其4个对角方位外，还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。 (6) 当遇到位于大格线上的酵母菌，一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞)。 (7) 对每个样品计数三次，取其平均值，按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。 2、计算公式： (1) 16格X 25格的血细胞计数板计算公式：酵母细胞数/ml=100 小格内酵母细胞个数/100 X 400 X 10四次方X稀释倍数 (2) 25格x16格的血细胞计数板计算公式：酵母细胞数/ml=80 小格内酵母细胞个数/80 X 400 X 10四次方X稀释倍数 3 .血细胞计数板的清洁：血细胞汁数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇，无水乙醇，丙酮等有机溶剂脱水使其干燥?通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物?若不干净，则必须重复清洗直到干净为止? 三、不足之处血细胞计数板在显微镜下直接进行测定。它观察在一定的容积中的微生物的个体数目，然后推算出含菌数，简便快捷。但是在计数时包括死活细胞均被计算在内，还有微小杂物也被计算在内。这样得出结果往往偏高，因此适用于对形态个体较大的菌体或孢子进行计数。四、相关练习： 1 .在一定量的酵母菌培养液中放人活酵母菌若干，抽样镜检，视野下如图甲所示(图中小点代表酵母菌)。将容器放在适宜温度下恒温培养5小时后，稀释100倍，再抽样镜检，视野下如乙图所示。根据实验结果判断，以下叙述正确的是( ) 甲乙

计数原理(公开课)

分类加法计数原理与分步乘法计数原理熊向前208班【教材分析】“分类加法计数原理和分步乘法计数原理”是人教A版高中数学课标教材选修2-3“第一章计数原理”第1.1节的内容，教学需要安排4个课时，本节课为第1课时．两个计数原理不仅是继续学习排列、组合和二项式定理的理论依据，更是处理计数问题的两种基本思想方法，在本章中是奠基性的知识．两个计数原理的灵魂是划归与转化的思想、分类与整合的思想和特殊与一般的思想的具体化身．从数学本质的角度看，以退为进，以简驭繁，是理解和掌握两个计数原理的关键，运用两个计数原理是知识转化为能力的催化剂．【学情分析】在高中数学《必修2》中学习“古典概型”时，已学会了用列举法解决最简单的计数问题；同时在学习和生活中，学生已经不自觉地会使用“分类”和“分步”的方法来思考和解决问题，这些都是学生学习两个计数原理的认知基础．两个计数原理虽简单朴素，易学好懂，但如何让学生借助已有的数学活动经验，抽象概括出两个计数原理，并领悟其中重要的数学思想方法，则是本课必须要突破的难点．为此，抓住以下两个要点尤为重要：一是要通过典型丰富的实例来帮助学生完成归纳提炼的过程，加强学生应用两个计数原理解决问题的意识——这是有效提升学生抽象概括能力的契机；二是要在解决问题的过程中，始终突出两个计数原理的核心要素，即弄清“完成一件事”的含义和区分“分步”与“分类”的特征——这是如何选择两个计数原理的关键．【教学目标】知识与技能：理解分类加法计数原理与分步乘法计数原理；会利用两个原理分析和解决一些简单的实际问题．过程与方法：通过诱导，探索得出结论，培养学生的理解能力和抽象概括能力；通过知识应用培养学生的分析和解决问题的能力．情感、态度与价值观：通过实例引入体会数学来源生活，并为生活服务，激发学生学习本章的兴趣；通过探索与发现的过程，使学生体会数学研究的成功与快乐，学会提出问题、分析问题、解决问题，激发学生勇于探索，敢于创新的精神，优化学生的思维品质．【教学重点】归纳出两个计数原理，并能初步用其解决一些简单的实际问题．【教学难点】准确区分“分类”和“分步”．【教学方法】本节课是概念原理课的教学典范．采用问题式教学为主，辅以启发式、探究式、自助式、讨论式的教学方式．【教学用具】粉笔、多媒体等．【教学过程】 1．创设情境，提出问题 “日”字加一笔能够组成多少个常见的汉字？（田、申、甲、由、电、旧、旦、白、目共9个．）我们将这种方法数的计算问题都称之为计数问题．生活中还有很多计数问题，如：（1）座子上有多少本书？（2）教室里面坐了多少个人？（3）从甲、乙、丙中选一个人当班

实验8 血细胞计数板的使用

血球计数板的使用 Questions： 1.亚甲蓝染色液怎么配制？ 2.计数时是全部计数还是选取其中一部分计数？ 3.菌悬液怎么制备？ 4.加样时可以先加样再盖玻片么？ 5.计数时，若有菌体处于边界线上应怎么计数？一、实验目的 1.能正确进行染色操作； 2.能正确使用显微镜； 3.能用血球计数板对微生物进行计数。二、实验原理血球计数板可计算活菌和死菌的数目，其用优质厚玻璃制成。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱，将特制的专用盖玻片覆盖其上，形成高0.10mm的计数池。计数池画有长、宽各3.0mm的方格，分为9个大方格，每个大格面积为1.0mm².容积为0.1mm（ul），其中，中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域，用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16个中方格。根椐国际标准局（NBS）规定，大方格每边长度允许误差为±1%。三、实验仪器

显微镜、血球计数板、接种环、酒精灯四、实验步骤 1.菌悬液的制备用平板培养的微生物怎么制备菌悬液？操作过程中是否需要无菌操作？ 2.染色注意染色剂浓度过稀菌体不能充分染色的情况。 3.血球计数板计数室洁净度检查若有污染，清洗吹干后方能使用。 4.加样血球计数板盖上盖玻片后，从盖玻片边缘加入菌液，此过程不可有气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽内多余菌液。用什么加样？ 5.显微计数静止5min后，观察技术，以每小格内有5-10个菌体为宜。先用低倍镜，再用高倍镜。观察时注意调整光源亮度（可适当调弱）。为什么要静止5min？ 6.计算 7.清洗血球计数板用水冲洗，不要用硬物擦洗，以免损坏网格刻度。自行晾干或吹干放入盒内保存。五、注意事项

血细胞计数板的构造和使用方法简介

血细胞计数板的构造和使用方法简介【摘要】人民教育出版社高中生物教材必修3《稳态与环境》中“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验用到血细胞计数板（血球计数板），教材中没有介绍其构造和用法，学生对此感到很生疏。本文简要介绍血细胞计数板的构造和使用方法。【关键词】血细胞计数板的构造计数方法使用方法人民教育出版社高中生物教材必修3《稳态与环境》中“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验用到血细胞计数板（血球计数板），教材中没有介绍其构造和用法，学生对此感到很生疏。下面简要介绍血细胞计数板的构造和使用方法。 1.血细胞计数板的构造血细胞计数板(血球计数板)是显微镜上的外挂物件，可用来测量细胞、细菌等一些微小物体的长度，测量单位体积细胞的数量等。血细胞计数板是由一块比普通玻片大而厚的特制玻璃片制成的，它的两边有两个凸起部分，中间有四条槽沟构成三个平台，中央的平台较宽，而且被一短槽隔成两半，每个半边上各刻有一个方格网，每个方格网共有九大格，中央的大格就是计数室、中央的平台比两边稍低，加盖盖玻片后，中央平台要比两边平台低0.1mm,也就是盖上盖玻片后计数室深度为0.1mm.。（见图A、B、C、D） 1.1 计数室的规格有两种，一种是由25中格组成，每个中格又分为16个小格（共25×16＝400小格）（见图E）；另一种是由16中格组成，每个中格又分成25个小格（共16×25＝400小格）(见图F)。可见，尽管计数室有两种规格，但是，不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是16×25=25×16=400个小方格组成。 1.2 计数室的大小有两种，一种是边长为1mm,则计数室面积为1mm2,每个小格面积为〖SX(〗1〖〗400〖SX)〗mm 2 ，盖上盖玻片后，计数室的高度为0.1mm。所以，一个计数室的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为〖SX(〗1〖〗4000〖SX)〗mm 3 ；另一种是边长为2mm，则计数室的面积为4mm2，每个小格面积为〖SX(〗1〖〗100〖SX)〗mm2，盖上盖玻片后计数室的高度为0.1mm，所以，一个计数室的体积为0.4mm3，每个小方格的体积为〖SX(〗1〖〗1000〖SX)〗mm3。〖XC12.TIF；%50%50〗 2.计数方法 2.1 25×16计数室：显微镜下数左上、右上、左下、右下和中央共五个中格，即5×16＝80个小方格的细菌数，若这80个小方格细菌数为A(对每个样品计数三次,取其平均值)。①若计数室的边长为1mm,则每毫升菌液的含菌量计算公式为〖SX(〗A〖〗80〖SX)〗×400×10×1000=50000A（若菌液被稀释，还要乘以