空气细菌培养报告单
空气细菌培养报告单文档编制序号：[KKIDT-LLE0828-LLETD298-POI08]
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空气培养方法
图 1 (< 30 m2) O O O O O 图2 （大于〉30 m2）盖面朝下斜扣到底盘边上空气细菌培养 、流程: 1 1 关好门窗，用紫外线消毒1小时 1 二、注意事项： 1、取培养基时，应用手托住培养基的底座，避免污染。 2、打开培养基时，盖子向下扣放于平板旁。 3、取样后将培养基的盖子盖好，方可离开治疗室。 4、送检时间不超过6h，若样品保存于2-8度条件时，送检时间不能超过24 小时。 5、送检过程中如盖子不小心打开，应该重新留取标本送检。 三、放置培养皿示意图 操作者洗净双手，取培养基进行取样
三十三、物体表面培养（细菌） 注意事项： 1、要在台面的工作区或需重点监测的区域采取。 2、送检时间不超过6小时，若样品保存于1-4度条件时，送检时间不超过24h。 3、送检过程中如盖子不小心打开，应该重新留取标本送检。
三十四、紫外线消毒 清理及抹拭治疗室台面，关治疗室门窗，熄照明灯 注意事项： 1、在使用过程中，应保持紫外线灯表面的清洁，每日用95%勺酒精擦拭灯管一次，发现灯 管表面有灰尘，油污时，应随时擦拭。 2用紫外线等消毒室内空气时，房间内应保持清洁干燥，减少尘埃和水雾，温度低于20C 或高于40C，相对湿度大于60%寸应适当延长照射时间。 3、用紫外线消毒物品表面时，应使照射表面受到紫外线的直接照射。不得使紫外线光源 照射到人，以免引起损伤。 4、紫外线灯使用过程中其辐射强度逐渐降低（一般紫外线使用时限为1000 小时），故应定期测定消毒紫外线的强度，一旦降到要求的强度以下时，应即使更 换。 5、每月一次空气培养，空气消毒后作空气培养。 6、如消毒时，仍有补液未接完，将剩余补液放在治疗室外，备治疗盘及部分必用治疗用 物。
空气培养操作方法
空气培养操作方法 1、采样时间 I类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；II类、III类、IV类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。 2、人员要求： 测试人员穿着整洁，戴口罩，手消毒或戴手套。动作要轻，避免产生污染干扰。 3、采样方法 （1）I类环境： 被测区域洁净度级别最少培养数*（ф90 m m，沉降 计） 最大平均浓度 （个/30min·ф90 m m皿） 洁净手术室I级洁净手术 室 II级洁净收术 室 III级洁净手 术室 IV级洁净手 术室 100级区13点，周边1000级区 8点，各有一个对照皿。 1000级区5点，周边10000级 区6点，各有一个对照皿。 10000级区3点，周边100000 级区4点，各有一个对照皿。 面积>30m2时4点，面积≤30m2 时2点，各有一个对照皿。 手术区， 周边 手术区, 周边 手术区， 周边 洁I级（1000级）局部100级区13点，1000级区局面，周边
净 辅助用房II级（10000 级） III级（100000 级） IV级（300000 级） 5点 3点 2点 2点 （2）II类、III类、IV类环境采用平板暴露法。室内面积≤30m2，设内中外对角3点，内、外点应距墙壁1米处；室内面积>30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1米处。将普通营养琼脂平皿（90mm）放置各采样点，采样高度为距离地面—；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间（II类环境暴露15min；III 类、IV类环境暴露5min）后盖上平皿盖及时送检。 4、放置方法、次序：放置培养皿从平面中最靠里的房间布置，依次向外布，最后人员撤出。每间房间也是从房间最靠里的地方开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。收取培养皿时顺序相反，从最外边的房间开始收，每间房间从最靠门的培养皿开始收，最先布置的最后收。培养皿放置后后拿开皿盖，搭放在皿边上，沉降后30分钟，盖上盖子收起。
空气细菌培养的采样方法
1空气的采样方法检测空气的培养法平板暴露法。此法简便，目前大部分医疗单位采用。在处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是：空气中细菌等可随尘粒一起下降，在室内各采样点处放好平板，采样高度距地面～，采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。将平板置于37℃培养48h计算菌落数。2细菌数的细菌总数（c f u/m3=4500N/A×T）式中A=平板面积（cm2） T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数（cfu） 这个计算公式是根据在面积100cm3的表面，5min落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。 3效果和污染状况的评价
空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细菌总数≤500c f u/m3并且未检出致病菌为消毒合格。 Ⅰ类环境包括层流和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。Ⅱ类环境包括普通、产房、婴儿室、室、普通室、、烧伤病房、病房、采用循环风或式空气消毒器，这类均为有人房间，必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。Ⅲ类环境包括儿科病房、检查室、、换药室、、供应室、、、各类普通病房室和房间，采用，或喷雾消毒。 据统计，目前世界上有41种主要，其中经空气传播的就有14种，占首位［1］。空气是疾病的主要传播媒介，而儿科门诊输液室是患儿及家长聚集的地方，的好坏，不仅对患儿的影响很大，也同时给家长的健康带来威胁。这已成为重要的，也对提出严峻的考验。调查表明，空气中浮离菌数在700 cfu/m3~1 800 cfu/m3时，就有发生感染的危险性，而如果细菌总数不足180 cfu/m3时，则这种危险性似乎很小［2］。本次研究发现使用2 h后的输液室空气细菌总数平均为748 cfu/m3，并随着时间的推移，细菌总数逐步上升，在使用4 h后的细菌总数平均值达到1 785 cfu/m3。这样的环境都有可能导致疾病通过空气传播。儿科门诊患者大多是急性或，在患者咳出的、痰液及分泌物中含有多种致病菌，同时每个患儿通常都有家长陪护，导致空气细菌含量较高。因为患儿本身较低，所以儿科输液室空气质量的好坏更能影响患儿疾病的转归，这一点应该引起高度重视。本次研究发现，儿科门诊输液室空气消毒后效果监测，符合标准，而且指数较低，输液患者后细菌数逐渐上升，2 h、4 h均超标，因此，儿科门诊输液室在人员流动的情况下，无法持续进行，仅靠一天两次的紫外线消毒是不能保证空气质量。降低菌落数的效果较持久。自然通风通过换气持续30 min，可以显着减少空气中的含量，降低室内CO及废气的浓度。每天累计通风2 h~3 h，能持久降低中的菌落数。有报道通风流出和进入的空气达到本房间容积时为换气1次，可清除原细菌数的%，所以通风是最简单的消毒方法［3］。另外，也应注意及时关闭,保持已清洁消毒后的室内净化效果。通过对空气中菌落的初步鉴定发现主要以革兰阳性菌为主，其中葡萄球菌、微球菌、奈瑟
空气培养采样方法
医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法 一、采样时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。 二、采样高度 与地面垂直高度80-150厘米。 三、布点方法 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1） 2．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2） 图2 四、采样方法 用9厘米直径普通琼脂平皿，打开后盖面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后，送检培养。 五、结果分析 I类区域：<10 cfu/m3 II类区域：<200 cfu/m3 III类区域：<500 cfu/m3 六、附录 Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。
洁净室空气细菌培养监测布点与标准 一、局部百级，周围千级： 共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。 采样布置点示意图： 二、局部千级，周围万级： 共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。 采样布置点示意图： 三、局部万级，周围十万级： 共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。
四、三十万级：面积>30m2布放4点，面积≤30 m2布放2点。 五、要求： 1.送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散布置时，全室统一检测，测点可均布，不应布置在送风门正下方； 2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟； 3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养24小时； 4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。 5.放置培养皿示意图： 盖面朝下斜扣到底盘A边上 六、洁净室空气细菌菌落总数标准
空气培养操作方法
空气培养操作方法 IMB standardization office【IMB 5AB- IMBK 08- IMB 2C】
空气培养操作方法1、采样时间 I类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；II类、III类、IV类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。 2、人员要求： 测试人员穿着整洁，戴口罩，手消毒或戴手套。动作要轻，避免产生污染干扰。 3、采样方法 （1）I类环境： 被测区域洁净度级别最少培养数*（ф90mm，沉降计） 最大平均浓度 （个 /30min·ф90mm 皿） 洁净手术室I级洁净手术 室 II级洁净收 术室 III级洁净手 术室 IV级洁净手 术室 100级区13点，周边1000级区8 点，各有一个对照皿。 1000级区5点，周边10000级区 6点，各有一个对照皿。 10000级区3点，周边100000级 区4点，各有一个对照皿。 面积>30m2时4点，面积≤30m2 时2点，各有一个对照皿。 手术区， 周边 手术区,周边 手术区， 周边 洁净辅助用房I级（1000 级） II级（10000 级） III级 （100000 局部100级区13点，1000级区5 点 3点 2点 2点 局面，周边
级） IV级 （300000 级） （2）II类、III类、IV类环境采用平板暴露法。室内面积≤30m2，设内中外对角3点，内、外点应距墙壁1米处；室内面积>30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1米处。将普通营养琼脂平皿（90mm）放置各采样点，采样高度为距离地面—；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间（II类环境暴露15min；III类、IV 类环境暴露5min）后盖上平皿盖及时送检。 4、放置方法、次序：放置培养皿从平面中最靠里的房间布置，依次向外布，最后人员撤出。每间房间也是从房间最靠里的地方开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。收取培养皿时顺序相反，从最外边的房间开始收，每间房间从最靠门的培养皿开始收，最先布置的最后收。培养皿放置后后拿开皿盖，搭放在皿边上，沉降后30分钟，盖上盖子收起。 5、对照皿：对照皿放置方法为将皿盖拿开后，马上重新盖上，同样放置30分钟后，收起。目的是模拟整个检验过程，看培养皿、培养基以及人员操作过程是否对结果有影响。 附： Ⅰ级～Ⅱ级需要无菌操作的特殊用房
空气细菌总数的测定教案资料
空气细菌总数的测定
空气细菌总数的测定 一、实验原理 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。 任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。 高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以彻底高效杀死各种细菌及其高度耐热的原理。 空气是人类赖以生存的必须环境，也是微生物借以扩散的媒介。空气中存在着细菌、真菌、病毒、放线菌等多种微生物粒子，这些微生物粒子是空气污染物的重要组成部分。空气微生物主要来自于地面及实施、人和动物的蹑手呼吸道、皮肤和毛发等，它附着在空气气溶胶细小颗粒物表面，可较长时间停留在空气中。某些微生物还可以随着空气中细小颗粒穿过人体肺癌存留在肺的深处，给身体健康带来严重危害，也可以随着空气中细小颗粒物被输送到较远地区，给人体带来许多传染性的疾病和上呼吸道疾病。因此，空气微生物含量多少可以反映所在区域的空气质量，是空气环境污染的一个重要参数评价空气的清洁程度，需要测定空气中的微生物数量和空气污染微生物。 ----测定方法--平皿沉降法 二、测定原理 空气中飘浮着各种微生物，将盛有无菌培养基的平皿放于监测点上，暴露 5min，空气中的细菌便会落到培养基上，然后在37°C恒温箱中培养24h，计数每个平皿表面的菌落数，由于一个菌落由一个细菌繁殖而来，菌落总数便可认为是细菌总数。 三、试剂 营养琼脂 1、成分 A蛋白胨 1g
微生物培养及药敏结果解读内容
微生物培养及药敏结果解 读内容 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020
微生物培养、药敏试验的流程及意义 一、微生物培养及药敏试验的总述 微生物培养就是使用体外试验的方法检测可能导致感染的病原菌，并给以药敏结果，为临床医生针对某一特定的临床感染提供依据。而药敏试验则是承接微生物培养的一项工作，即对于培养得到的病原菌进行体外试验检测细菌对于抗菌药物的耐药性，来预测抗菌药物的临床治疗效果，从而为临床医生提供选用抗菌药物的依据来治疗感染。 对于检测到的可能的致病菌进行药敏试验时选择的药物是参照美国的CLSI推荐的标准制定的。尤其，使用全自动微生物分析仪进行药敏试验时有固定的药敏组合，不是人为可以随意添加或减少的。 （一）微生物的培养和药敏试验的流程基本为： ①将标本进行处理（不是所有的标本都需要处理）； ②将标本接种于不同的培养皿中在不同条件的培养箱中进行培养（不同的标本所含菌的种类不同，不同菌的生长条件不同，因此需要接种于不同的培养皿中）； ③24h后观察培养皿中细菌的生长情况： a.此时若无细菌培养，继续放回培养箱中培养24h，若仍然无细菌生长则判定为阴性结果，因此阴性结果出具的时间为48h以后。 b.若有细菌生长，要根据形态和气味等对细菌进行初步的判定，若能判定出细菌的种类，则进行相应的药敏试验。贴有药敏片的培养皿在培养箱中培养24h后进行药敏结果的解读，然后报告结果，这种微生物培养及药敏结果报告出具的时间就是48h以后。
由于不同的细菌的生长的速度不同，有些细菌在培养24h后不能完全判定结果甚者24h培养后无法观察到明显的细菌生长的则需要继续培养24h，即连续培养48h后同样根据菌落的形态、气味等来观察判定细菌的种类然后进行药敏试验。这种微生物培养和药敏试验结果出具需要72h以后。 而血液、骨髓等标本则是利用不同于上述培养方式的方法进行培养。它有专门的培养瓶和仪器。这种仪器会自动监测培养瓶中的变化来判定有无细菌生长，若有细菌生长仪器会发出警报。在培养5天内任何时间发出警报的培养瓶都要抽取瓶中的物质在培养皿中进行接种培养，同样在菌种鉴定后进行药敏试验；若在培养5天内不发出警报的培养瓶则视为阴性结果。因此血培养出具结果的时间为5～7天。 菌落的鉴定需要有雄厚的工作经验和熟练的相关基础知识。常规鉴定的方法有形态特征和理化特性。形态特征包括显微形态和培养特征；理化特性包括营养类型、碳氮源利用能力、各种代谢反应、酶反应和血清学反应。在微生物室学习时发现，很多时候在不太确定细菌的种类时，检验人员也会结合理化特性来判定细菌种类。 （二）革兰氏染色、应用及意义 由于微生物的生长有时间限定，因此微生物培养和药敏试验没有急查的说法。最快的结果也只能是通过涂片来判定有无细菌生长和细菌染色后的颜色和形态，来给临床医生的用药提供依据。 革兰氏阳性菌和阴性菌因为细胞壁的结构不同，在革兰氏染色时染成不同的颜色。革兰氏阳性菌显示紫色、革兰氏阴性菌显红色或粉色。由于细胞壁的结构不同，导致这两类细菌在染色性、抗原性、毒性、对某些药物的敏感性等方面均有较大差异。一般情况下，大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们差生内毒素，靠内毒素使人致病。
空气培养的采样方法精选版
空气培养的采样方法 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】
医院常规空气细菌培养（自然沉降法）采样方法 一、采样时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。 二、采样高度 与地面垂直高度80-150厘米。 三、布点方法 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1） 2．室内面积>30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南，北距墙均1米（图2） 四、采样方法 用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5分钟后，送检培养。 五、结果分析 I类区域：<10 cfu/m3 II类区域：<200 cfu/m3 III类区域：<500 cfu/m3 六、附录 Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。 洁净室空气细菌培养监测布点与标准 一、局部百级，周围千级： 共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。采样布置点示意图：二、局部千级，周围万级： 共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6点。采样布置点示意图：三、局部万级，周围十万级：
共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区域4点。采样布置点示意图： 四、三十万级：面积>30m2布放4点，面积≤30 m2布放2点。 五、要求： 1.送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；如送风口分散布置时，全室统一检测，测点可均布，不应布置在送风门正下方； 2.采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上，手术区域放置在四角的平皿应离手术区边缘0.12m，培养皿放置30分钟； 3.采样后的培养皿，应立即置于37度条件下培养48小时； 4.然后计数生长的菌落数，菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后１位。 5.放置培养皿示意图： 盖面朝下斜扣到底盘A边上 六、洁净室空气细菌菌落总数标准?
如何做空气培养完整版
如何做空气培养 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
如何做空气培养 1 空气细菌培养的采样方法检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。此法简 便，目前大部分医疗单位采用。在消毒处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5 点，4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是：空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降，在室内各采样点处放好营养琼脂平板，采样高度距地面～，采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。2 细菌数的计算方法细菌总数（cfu/m3=4500N/A×T）式中A=平板面积（cm2） T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数（cfu）这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表面，5min内能落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。 3 空气消毒效果和污染状况的评价空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培 养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。Ⅰ类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房、采用循环风紫外线空气消毒器或静电吸附式空气消毒器，这类均为有人房间，必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。Ⅲ类环境包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房室和房间，采用紫外线消毒，化学消毒剂熏蒸或喷雾消毒。 空气中细菌监测 在空气消毒后、操作之前，用空气采样器或空气沉降法采样。空气沉降法采样简便、经济，但不能精确定量，采样方法为：室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3点，内、外布点部位距离墙1m处；室内面积＞30m2，设4角及中央5点，4角的部点部位距离墙1m处。将直径9cm普通营养琼脂平板放在各采样点5分钟后送检。平板 放置35℃培养24～48h，计算1m3空气中的细菌数医学`教育网搜集整理。沉降法采 样菌落数根据5分钟内在100cm2培养基上降落的细菌数相当于10L空气中含的细菌数。 呼吸机管道系统清洗消毒操作规程及管理 为预防医院内感染的发生，在临床将治疗和护理病人时用过后的仪器、器械，根据其受污染的危险程度分为三类。即高度危险性器械、中度危险性器械。呼吸治疗设备属中度危险性器械。此类器械主要指不直接进入无菌组织和血管，但与粘膜接触或进入
细菌培养实验报告(新)
篇一：培养基的制备与灭菌实验报告 陕西师范大学远程教育学院 生物学实验报告 报告题目培养基的制备与灭菌 姓名刘伟 学号 专业生物科学 批次/层次 指导教师 学习中心培养基的制备与灭菌 一、目的要求 1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。 2. 掌握培养基的配置原则和方法。 3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。 二、基本原理 牛肉膏蛋白胨培养基： 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。 高压蒸汽灭菌： 主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。 三、实验材料 1. 药品：牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂、1mol/l的naoh和hcl溶液。 2. 仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三 角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。 3. 其他物品：药匙、称量纸、ph试纸、记号笔、棉花等。 四、操作步骤 （一）玻璃器皿的洗涤和包装 1．玻璃器皿的洗涤 玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再用自来水及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。 2．灭菌前玻璃器皿的包装 （1）培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，可用报纸将几套培养皿包 成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。 （2）移液管的包扎：在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉)，它的作 用是避免外界及口中杂菌进入管内，并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花应距管口约0.5cm 左右，棉花自身长度约1~1.5cm。塞棉花时．可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜，吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。 先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条，然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端，约成45℃角，折叠纸条包住尖端，用左手握住移液管身，有手将移液管压紧．在桌面上向前搓转，以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条，折叠打结，准备灭菌。 （二）液体及固体培养基的配制过程 1．液体培养基配制
空气细菌培养的采样方法
空气细菌培养的采样方 法 文档编制序号：[KKIDT-LLE0828-LLETD298-POI08]
1 空气的采样方法 检测空气的培养法平板暴露法。此法简便，目前大部分医疗单位采用。 在处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是：空气中细菌等可随尘粒一起下降，在室内各采样点处放好平板，采样高度距地面～，采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。将平板置于37℃培养48h计算菌落数。 2 细菌数的 细菌总数（cfu/m3=4500N/A×T） 式中A=平板面积（cm2） T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数（cfu） 这个计算公式是根据在面积100cm3的表面，5min落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。 3 效果和污染状况的评价
空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。 Ⅰ类环境包括层流和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。 Ⅱ类环境包括普通、产房、婴儿室、室、普通室、、烧伤病房、病房、采用循环风或式空气消毒器，这类均为有人房间，必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。 Ⅲ类环境包括儿科病房、检查室、、换药室、、供应室、、、各类普通病房室和房间，采用，或喷雾消毒。 据统计，目前世界上有41种主要，其中经空气传播的就有14种，占首位［1］。空气是疾病的主要传播媒介，而儿科门诊输液室是患儿及家长聚集的地方，的好坏，不仅对患儿的影响很大，也同时给家长的健康带来威胁。这已成为重要的，也对提出严峻的考验。调查表明，空气中浮离菌数在700 cfu/m3~1 800 cfu/m3时，就有发生感染的危险性，而如果细菌总数不足180 cfu/m3时，则这种危险性似乎很小［2］。本次研究发现使用2 h后的输液室空气细菌总数平均为748 cfu/m3，并随着时间的推移，细菌总数逐步上升，在使用4 h后的细菌总数平均值达到1 785 cfu/m3。这样的环境都有可能导致
微生物培养及药敏结果解读内容
微生物培养、药敏试验的流程及意义 一、微生物培养及药敏试验的总述 微生物培养就是使用体外试验的方法检测可能导致感染的病原菌，并给以药敏结果，为临床医生针对某一特定的临床感染提供依据。而药敏试验则是承接微生物培养的一项工作，即对于培养得到的病原菌进行体外试验检测细菌对于抗菌药物的耐药性，来预测抗菌药物的临床治疗效果，从而为临床医生提供选用抗菌药物的依据来治疗感染。 对于检测到的可能的致病菌进行药敏试验时选择的药物是参照美国的CLSI推荐的标准制定的。尤其，使用全自动微生物分析仪进行药敏试验时有固定的药敏组合，不是人为可以随意添加或减少的。 （一）微生物的培养和药敏试验的流程基本为： ①将标本进行处理（不是所有的标本都需要处理）； ②将标本接种于不同的培养皿中在不同条件的培养箱中进行培养（不同的标本所含菌的种类不同，不同菌的生长条件不同，因此需要接种于不同的培养皿中）； ③24h后观察培养皿中细菌的生长情况： a.此时若无细菌培养，继续放回培养箱中培养24h，若仍然无细菌生长则判定为阴性结果，因此阴性结果出具的时间为48h以后。 b.若有细菌生长，要根据形态和气味等对细菌进行初步的判定，若能判定出细菌的种类，则进行相应的药敏试验。贴有药敏片的培养皿在培养箱中培养24h后进行药敏结果的解读，然后报告结果，这种微生物培养及药敏结果报告出具的时间就是48h以后。 由于不同的细菌的生长的速度不同，有些细菌在培养24h后不能完全判定结果甚者24h 培养后无法观察到明显的细菌生长的则需要继续培养24h，即连续培养48h后同样根据菌落的形态、气味等来观察判定细菌的种类然后进行药敏试验。这种微生物培养和药敏试验结果出具需要72h以后。 而血液、骨髓等标本则是利用不同于上述培养方式的方法进行培养。它有专门的培养瓶和仪器。这种仪器会自动监测培养瓶中的变化来判定有无细菌生长，若有细菌生长仪器会发出警报。在培养5天内任何时间发出警报的培养瓶都要抽取瓶中的物质在培养皿中进行接种培养，同样在菌种鉴定后进行药敏试验；若在培养5天内不发出警报的培养瓶则视为阴性结果。因此血培养出具结果的时间为5～7天。 菌落的鉴定需要有雄厚的工作经验和熟练的相关基础知识。常规鉴定的方法有形态特征和理化特性。形态特征包括显微形态和培养特征；理化特性包括营养类型、碳氮源利用能力、各种代谢反应、酶反应和血清学反应。在微生物室学习时发现，很多时候在不太确定细菌的种类时，检验人员也会结合理化特性来判定细菌种类。 （二）革兰氏染色、应用及意义 由于微生物的生长有时间限定，因此微生物培养和药敏试验没有急查的说法。最快的结果也只能是通过涂片来判定有无细菌生长和细菌染色后的颜色和形态，来给临床医生的用药提供依据。 革兰氏阳性菌和阴性菌因为细胞壁的结构不同，在革兰氏染色时染成不同的颜色。革兰氏阳性菌显示紫色、革兰氏阴性菌显红色或粉色。由于细胞壁的结构不同，导致这两类细菌在染色性、抗原性、毒性、对某些药物的敏感性等方面均有较大差异。一般情况下，大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们差生内毒素，靠内毒素使人致病。 在治疗上，大多数革兰氏阳性菌对青霉素敏感（结核杆菌对青霉素不敏感），革兰氏阴性菌对青霉素不敏感（但奈瑟氏菌中德流行性脑膜炎双球菌和淋病双球菌对青霉素敏感），
教你看懂药敏和菌培报告单 !
教你看懂药敏和菌培报告单！ 药敏试验是如何测定的根据美国临床标准委员会 推荐的纸片扩散法测定。将含有一定量抗菌药的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板表面，35℃培养过夜，测量纸片周围抑菌圈的大小确定细菌对药物的敏感性，抑菌圈越大敏感性越高。不同细菌对不同抗菌药敏感性的判定标准不同，例如头孢噻肟对肠杆菌科细菌的抑菌圈≤14 mm为R, 15 mm-22 mm为I,≥23 mm为S；苯唑西林对金黄色葡萄球菌抑菌圈≤10 mm 为R, 11 mm-12 mm为I, ≥13 mm为S。药敏试验报告中S、I、R 指的是什么S（susceptible），是指细菌对抗菌药敏感，使用常规剂量时的平均血浓度超过MIC 5倍以上，用常规剂量通常有效； I（intermediate）是指细菌对抗菌药中度敏感，常规剂量时平均血浓度等于或略高于MIC，需用高剂量或对体内药物浓缩部位的感染可能有效； R（resistance）是指细菌对某种抗菌药耐药，药物对细菌的MIC 高于应用常规剂量时的血浓度，应用常规剂量治疗通常无效。测试抗菌药物的品种是如何选定的抗菌药有近200种，药敏试验中没必要也不可能包括每种抗菌药。所测试的抗菌药纸片的种类是根据各类细菌对抗菌药的敏感性 及临床可能选用的药物而确定的，同类药物通常只选择1-2
个代表品种。NCCLS对各种细菌的药敏试验中宜测试的药物品种进行了推荐，如测定葡萄球菌属的药敏试验应包括苯唑西林、青霉素、红霉素、克林霉素、复方磺胺甲噁唑（SMZ-TMP）和万古霉素；此外可根据情况增加其他品种如氯霉素、环丙沙星、庆大霉素、利福平和呋喃妥因等。为什么肠球菌属细菌药敏报告的测定药物这么少对头孢菌素类和多种抗菌药天然耐药，故药敏试验中所包括的抗菌药品种较少，NCCLS 推荐的测试品种为氨苄西林或青霉素、万古霉素（去甲万古霉素），此外亦可增加庆大霉素、氯霉素、红霉素、利福平、环丙沙星和呋喃妥因等，后两者适用于尿标本。 细菌对多种抗菌药物敏感时，如何选择最有效药物应根据感染部位、病情严重程度、药物的抗菌作用及药动学特点选择抗菌药。是否所有阳性培养均有临床意义 并非所有阳性培养都是真正的病原菌，原因可能有： ①所报告细菌为污染菌，细菌培养结果的临床意义大小与所取标本有关，如为关节液、胸腔积液、等无菌标本则临床意义较大，但即使血培养阳性也可能为污染菌，据报道单次血培养凝固酶阴性葡萄球菌、草绿色链球菌、肠球菌阳性，污染可能性分别为85%、52%、22%。某些标本易受污染如痰标本易于受咽喉部携带菌的污染，尿培养易受下尿道、尿道口寄居菌污染。②可能为应用抗菌药后的菌群交替，
院感细菌培养操作
院感细菌培养操作Newly compiled on November 23, 2020
1.目的: 医院是病原微生物较集中,抵抗力低的人群密集的地方,加之化疗、放疗等手段的采用，影响病人免疫机能下降，大量使用抗生素，引起耐药菌株增多，菌群失调，以及先进医疗仪器广泛应用等原因，增加消毒灭菌的难度，致使院内感染已成为当前医疗实践的严重障碍，直接影响医疗效果。进一步规范院内感染监测标本的程序，更好、更快检测病原微生物的生长情况，预防医院感染的发生。 2.设备、试剂与材料 VITEK 2 compact鉴定药敏分析系统 VITEK 32鉴定药敏分析系统 美国FORMAⅡ级生物安全柜 显微镜 酒精灯 接种环 恒温培养箱 各种培养基 革兰氏染色液 触酶试剂 氧化酶试剂 移液器 无菌吸嘴 3.院感标本采集 3．1空气的采样
3．1．1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 3．1．2采样高度与地面垂直高度80-150CM。 3．1．3布点方法室内面积＜30m2，设一条对角线上取三点，即中心一点，两端各距墙1m处各取一点；室内面积＞30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m。 3．1．4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。3．2物体表面采样 3．2．1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。 3．2．2采样面积被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面＞100cm2，则取100cm2。 3．2．3采样方法用5×5 cm2的标准来灭菌规格板，放在被检物体表面，用无菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积，剪支手接触部位，将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。 3．3医护人员手采样 3．3．1采样时间在接触病人、从事医疗活动前进行采样。 3．3．2采样面积及方法被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一枝在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积30 cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米（cm2）计算。 3．4医疗用品采样
空气细菌培养操作规程
病房空气细菌培养操作规程 1.定义：空气细菌培养的采样方法是一种检测空气细菌总数的细菌培养法平板 暴露法。 2.基本原理：是空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降，降落在室内各采样点 处放好的营养琼脂平板上。最后，将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。 3.采样时间：在消毒处理后，进行医疗操作前采样，静止10min采样。 4.布点方法：室内面积≤30m2，对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙 壁1m处；室内面积＞30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m 处。 5.采样高度：距地面0.8～1.5m。 6.采样方法：采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。在平皿 上注明采自的科室或科室的房间，用胶布把平皿和平皿盖子固定好以免在送检途中平皿和平皿盖子分离而造成污染。 7.标本保存：采样后必须尽快送检，并保存于2~8℃，送检时间不超过12小时。 8.注意事项： 1)培养皿盖子要反扣于培养皿边上，禁止内面向上的放于桌面。 2)培养期间禁止人员走动。 9.消毒合格标准： Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。
10.说明：Ⅰ类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房只能采用层流通风才能 空气中的微生物减到此标准以下。Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房、采用循环风紫外线空气消毒器或静电吸附式空气消毒器，这类均为有人房间，必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。Ⅲ类环境包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房室和房间，采用紫外线消毒，化学消毒剂熏蒸或喷雾消毒。 参考文献：中华人民共和国国家标准GB 15982-2010 血液层流病房 2010.4制定 1 M-血液层流-001
空气细菌培养的采样方法
空气细菌培养的采样方法Newly compiled on November 23, 2020
1 空气的采样方法 检测空气的培养法平板暴露法。此法简便，目前大部分医疗单位采用。 在处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是：空气中细菌等可随尘粒一起下降，在室内各采样点处放好平板，采样高度距地面～，采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。将平板置于37℃培养48h计算菌落数。 2 细菌数的 细菌总数（cfu/m3=4500N/A×T） 式中A=平板面积（cm2） T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数（cfu） 这个计算公式是根据在面积100cm3的表面，5min落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。 3 效果和污染状况的评价
空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。 Ⅰ类环境包括层流和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。 Ⅱ类环境包括普通、产房、婴儿室、室、普通室、、烧伤病房、病房、采用循环风或式空气消毒器，这类均为有人房间，必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。 Ⅲ类环境包括儿科病房、检查室、、换药室、、供应室、、、各类普通病房室和房间，采用，或喷雾消毒。 据统计，目前世界上有41种主要，其中经空气传播的就有14种，占首位［1］。空气是疾病的主要传播媒介，而儿科门诊输液室是患儿及家长聚集的地方，的好坏，不仅对患儿的影响很大，也同时给家长的健康带来威胁。这已成为重要的，也对提出严峻的考验。调查表明，空气中浮离菌数在700 cfu/m3~1 800 cfu/m3时，就有发生感染的危险性，而如果细菌总数不足180 cfu/m3时，则这种危险性似乎很小［2］。本次研究发现使用2 h后的输液室空气细菌总数平均为748 cfu/m3，并随着时间的推移，细菌总数逐步上升，在使用4 h后的细菌总数平均值达到1 785 cfu/m3。这样的环境都有可能导致
如何做空气培养
如何做空气培养 1 空气细菌培养的采样方法检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。此法简便,目前大部分医疗单位采用。在消毒处理后,操作前进行,室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点,内外点布位距墙壁1m处,室内面积＞30m2设4角及中央5点,4角的布点部位距墙壁1m 处。基本原理就是:空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降,在室内各采样点处放好营养琼脂平板,采样高度距地面0、8～1、5m,采样时,将平板盖打开,暴露5min或10min,盖好平板。将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。 2 细菌数的计算方法细菌总数(cfu/m3=4500N/A ×T)式中A=平板面积(cm2) T——平板暴露时间(min) N——平均菌落数(cfu)这个计算公式就是根据在面积100cm3的培养基表面,5min内能落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。 3 空气消毒效果与污染状况的评价空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养,如消毒后空气中细菌数明显下降,说明消毒效果好,下面规定适用GB15982——1995规定:Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3,并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。Ⅰ类环境包括层流洁净手术室与层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房、采用循环风紫外线空气消毒器或静电吸附式空气消毒器,这类均为有人房间,必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。Ⅲ类环境包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房室与房间,采用紫外线消毒,化学消毒剂熏蒸或喷雾消毒。 空气中细菌监测 在空气消毒后、操作之前,用空气采样器或空气沉降法采样。空气沉降法采样简便、经济,但不能精确定量,采样方法为:室内面积≤30m2,设内、中、外对角线3点,内、外布点部位距离墙1m处;室内面积＞30m2,设4角及中央5点,4角的部点部位距离墙1m处。将直径9cm普通营养琼脂平板放在各采样点5分钟后送检。平板放置35℃培养24～48h,计算1m3空气中的细菌数医学`教育网搜集整理。沉降法采样菌落数根据5分钟内在100cm2培养基上降落的细菌数相当于10L空气中含的细菌数。 呼吸机管道系统清洗消毒操作规程及管理 为预防医院内感染的发生,在临床将治疗与护理病人时用过后的仪器、器械,根据其受污染的 危险程度分为三类。即高度危险性器械、中度危险性器械。呼吸治疗设备属中度危险性器械。 此类器械主要指不直接进入无菌组织与血管,但与粘膜接触或进入机体与外界相通的管理的 医疗器械。如:麻醉设备、呼吸治疗设备等。要求达到高水平消毒。 呼吸机管道系统的清洗消毒操作步骤如下: