蜂蜜的抗氧化活性

蜂蜜的抗氧化活性
蜂蜜的抗氧化活性

蜂蜜的抗氧化活性

蜂蜜是一种药食两用的保健食品,在国内外深受消费者的青睐。本文主要介绍世界范围内蜂蜜的抗氧化活性的最新科学研究。

1.蜂蜜的体外抗氧化活性

一般来说,蜂蜜的颜色越深,总酚与总黄酮的含量越高,抗氧化能力越强,但蜂蜜中的多肽、有机酸、酶和美拉德反应产物对于清除自由基也有一定作用。Estevinho等人发现深色蜂蜜对DPPH自由基的清除能力高于浅色蜂蜜。Zhou等人研究了荞麦蜜的抗氧化活性,发现荞麦蜜对DPPH的清除率随总酚含量增高而上升。Vela等人研究了西班牙的36种花蜜和蜂蜜的抗氧化活性,认为植物源、地理源、蜂蜜颜色的深度均为影响清除DPPH自由基活性的因素。Moniruzzaman

等人认为生产季节对蜂蜜清除DPPH自由基的活性也有影响。研究发现不同产地的蜂蜜对DPPH自由基均有清除活性,如土耳其红松蜂蜜、阿拉伯蜂蜜、巴基斯坦蜂蜜、古巴麻藤蜜、葡萄牙蜂蜜和斯洛文尼亚蜂蜜。蜂蜜即使在经过辐照和热处理后依然保持较高的清除DPPH自由基活性。

蜂蜜对ABTS自由基也有较强的清除活性,Baltru?aityt?等人研究了35种来源不同的蜂蜜对ABTS自由基的清除活性,结果表明不同的蜂蜜其清除活性存在较大差异。Lachman等

人对40种捷克蜂蜜对ABTS自由基的清除活性的研究也得出了相似结果,这种差异可能与其抗氧化剂的含量及种类有关。

DNA分子也容易受到活性氧的攻击而发生氧化损伤,例如,羟基自由基攻击超螺旋质粒DNA后会断裂为两种形式:开环形式和线性形式。DNA损伤会对细胞和组织的功能造成严重的影响。Zhou等人发现,荞麦蜜对羟基自由基诱导的大肠杆菌质粒DNA氧化损伤有显著的保护作用。在定位体系中保护作用显著高于非定位体系,表明荞麦蜜主要通过清除羟基自由基来保护DNA免受自由基诱导的氧化损伤,而不是通过络合过渡金属途径,这可能与荞麦中的抗氧化成分主要以酚酸类化合物为主,黄酮类含量很少,而前者对过渡金属的络合力很弱。

相反,蜂蜜可以引起肿瘤细胞的DNA损伤,Wen等人发现,产自马来西亚的革木蜜和菠萝蜜蜂可以引起结肠癌细胞的DNA损伤进而引起癌细胞凋亡,可能与其中存在的黄酮类化合物有关,蜂蜜的这种功能有可能使其成在抗癌方面发挥一定的作用,但其分子机制有待进一步研究。

2.蜂蜜的体内抗氧化活性

Jubri等人研究了麦卢卡蜂蜜对小鼠氧化损伤的保护作用,发现蜂蜜能够降低小鼠体内的丙二醛(MDA)含量,显著增加小鼠红细胞内GSH-Px的活性,降低过氧化氢酶(CAT)的

活性。Gheldof等人报道了荞麦蜜能够增加人体内血清抗氧化能力,并且与茶具有抗氧化协同效应。Schramm等人给40名志愿者分别服用玉米糖浆和荞麦蜜,数小时后测定血液的抗氧化活性,发现荞麦蜜能提高人体内抗氧化活性且呈量效关系,而同剂量的玉米糖浆没有影响。Yao等人研究了马来西亚革木蜜对小鼠氧化损伤的影响,发现革木蜜能够显著降低小鼠血清的MDA水平,呈量效关系。这可能与革木蜜能够调节小鼠红细胞的抗氧化酶活性有关。

蜂蜜的抗氧化活性越来越引起人们的关注,蜂蜜中的抗氧化成分也逐渐明晰。尽管国内外已有大量关于蜂蜜抗氧化的研究报道,但多数集中在体外方面,关于蜂蜜中抗氧化成分在人体内的吸收、代谢及其抗氧化的分子机制仍不清楚。因此,需要进一步研究蜂蜜抗氧化的分子机制,从而为蜂蜜的药理活性、保健功能提供科学依据。

ABTS_法测定葡萄酒抗氧化活性的研究

第37卷 第11期2009年11月 西北农林科技大学学报(自然科学版) Journal of Northwest A&F University(Nat.Sci.Ed.) Vol.37No.11 Nov.2009 ABTS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的研究3 李 华,李 勇,吴 莹,王 华 (西北农林科技大学葡萄酒学院,陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心,陕西杨凌712100) [摘 要] 【目的】确定AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数。【方法】应用福林肖卡比色法(FC)测定36种葡萄酒样品的总酚含量(Total phenol index,TPI),从中选出9种总酚含量具代表性的葡萄酒样品,并采用AB TS?+法测定反应不同时间和稀释不同倍数葡萄酒样品的抗氧化活性。【结果】AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间为2~5min;红葡萄酒的最佳稀释倍数为0.2∶10~0.4∶10,桃红葡萄酒的最佳稀释倍数为1∶10~4∶10,白葡萄酒的最佳稀释倍数为3∶10~7∶10。【结论】得到了AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数,且无需事先测定总酚含量,简化了试验步骤。 [关键词] 葡萄酒;抗氧化活性;AB TS?+法;反应时间;稀释倍数 [中图分类号] TS262.6[文献标识码] A[文章编号] 167129387(2009)1120090208 Research of antioxidant activity of wine s determined by the ABTS?+method L I Hua,L I Y ong,WU Y ing,WAN G Hua (College of Enolog y,Engineering Research Center f or V iti2V i nicult ure,N ort hwest A&F universit y,Yangli ng,S haanx i712100,China) Abstract:【Objective】The p resent st udy aimed to confirm t he best reaction time and wine dilution of t he AB TS?+met hod.【Met hod】The Folin2Ciocalteu colorimetry was used to measure t he total p henol in2 dex of36kinds of wines and t hen9kinds of rep resentative samples were selected f rom t hem,AB TS?+ met hod was used to measure t he antioxidant activities of wines wit h different reaction time and different di2 lutio ns,and was analyzed t he experiment result.【Result】The result s showed t hat t he best reaction time of t he AB TS?+met hod is2to5minutes,t he best dilution range,0.2∶10to0.4∶10for red wines,1∶10to 4∶10for ro se wines,and3∶10to7∶10for white wines.【Conclusion】The st udy has obtained t he best re2 action time and wine dilution to measure antioxident activity of wines by AB TS?+met hod,and t here is no need to measure total p henol content beforehand,so t he test p rocedure is simplified. K ey w ords:wine;antioxidant activity;AB TS?+met hod;reaction time;dilution 经过研究和分析发现,葡萄酒中含有大量的多酚类物质,如白藜芦醇、儿茶酚、表儿茶精、槲皮酮和芸香苷等,这些多酚类物质具有抗氧化活性,除了抑制低密度脂蛋白的氧化、预防心血管疾病以外,还有抗癌、抗炎症和抗血小板凝聚等功能[1],但不同的品种、气候、地理条件和工艺措施,导致葡萄酒中酚类物质在数量和种类上都有明显不同[223]。因此,如何评价葡萄酒中酚类物质的抗氧化活性很有现实意义。 AB TS?+在414,645,734和815nm处均有特征吸收[4]。Miller等[5]在1993年首次介绍了用AB TS?+法来评价一些化合物的抗氧化活性,即根据待测化合物清除AB TS?+引起的吸光度变化来评价其抗氧化活性。此后,AB TS?+法成为一种被广泛采用的抗氧化活性测定方法,用于饮料和食 3[收稿日期] 2009203206 [基金项目] 陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项“陕西省葡萄与葡萄酒产业关键研究”(2007ZD KG209) [作者简介] 李 华(1959―),男,重庆市梁平人,教授,博士生导师,主要从事葡萄与葡萄酒研究。 E2mail:lihuawine@https://www.360docs.net/doc/767858718.html,

生物活性肽的研究及其进展汇总

生物活性肽的研究及其进展 摘要:生物活性肽作为一种来源广泛、种类繁多、功能性良好的生命因子,目前已成为全球范围内的研究热点。研究表明这些肽除具有常规的生物活性,如增加矿物质吸收、调节血压、抗菌、抗氧化、降胆固醇、免疫调节之外还对人类营养有调节作用,因而受到广泛关注。本文综述了生物活性肽的种类、生理功能、吸收、制备研究进展,以期为生物活性肽的进一步研究和应用提供参考。 关键词:生物活性肽,生理活性,吸收 Research and progress of biological active peptide Abstract:Bioactive peptides as one rich sources, wide variety, good functional life factors have been a global research hot spot. Studies have shown that these peptides have some conventional biological activities, such as increase mineral absorption, adjust blood pressure, antibacterial, antioxidant, decrease cholesterol, regulate immune. What’s more, they also have a regulating effect on human nutrition, so they have attracted widely attention. The kinds of bioactive peptides was reviewed in this paper, preparation research progress of physiological function, absorption and biological active peptide in order to provide reference for further research and application. Key words:Biological active peptide, Physiological activity, Absorb 1.功能肽的简介 肽(peptides)是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物,是蛋白质的结构与功能片段,并使蛋白质具有数以千万计的生理功能。肽本身也具有很强的生物活性。是由蛋白质中20种天然氨基酸以不同的组合和排列的方式构成的,从二肽到复杂的线性或者环状的多肽的总成。一般说来,肽链上氨基酸数目在10个以内的叫寡肽,10~50个的叫多肽,50个以上的叫蛋白质。人们习惯上也把寡肽中的二、三肽称为小肽。由于构成肽的氨基酸种类、数目与排列顺序的不同,决定了肽纷繁复杂的结构与功能。 生物活性肽( biologically active peptide/ bioactive peptide/ biopeptide) 是指对生物机体的生命活动有益或具有生理作用的肽类化合物,又称功能肽(functional peptide)[1]。肽由氨基酸组成,人体存在20 种氨基酸,由不同的氨基酸的种类排列,加上数量排列形成,再加上还可能有的二级、三级结构,其种类是十分庞大的[2,3]。每一种活性肽都具有独特的组成结构,不同活性肽的组成结构决定了其功能。此外活性肽在生物体内的含量是很微量的,但却具有显著的生理活性。据研究,有些多肽在10 - 7mol/ L 的浓度时仍具有生理活性,就是说1 mL 的多肽用60 倍水稀释后,仍然具有生理功能。功能肽是源于蛋白质的多功能化合物,是多样化且来源充足的食品原料,具有多种人体代谢和生理调节功能,如易消化吸收、促进免疫、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等[4] 现代营养学研究发现,人体摄入蛋白质经消化道中的酶作用后,大部分是以寡肽的形式

植物提取物抗氧化成分及研究进展

植物提取物抗氧化原理及成分研究 抗氧化是抗氧化自由基的简称。因为人体常与外界接触,平时的呼吸、外界污染、放射线照射等因素会导致人体内产生自由基,过量的自由基会导致人体癌症、衰老和其它疾病,而抗氧化自由基(以下简称“抗氧化”)可以有效克服这些危害。因此,抗氧化已成为保健品和化妆品市场的主要研究课题之一。 本文从多种类植物提取物抗氧化成分及其原理出发,阐述了各界近年来利用植物对抗自由基的研究进展。 一、植物提取物抗氧化原理 不同的植物提取的有效成分不尽相同,同样,抗氧化作用的植物提取物也有很多不同成分,其作用机理也有所区别,西安源森生物从以下几方面进行了总结阐述: (一)作用于与自由基有关的酶 与自由基有关的酶类分为氧化酶与抗氧化酶两类,植物提取物的抗氧化作用体现在抑制相关氧化酶的活性和增强抗氧化酶活性两方面。 1. 抑制氧化酶的活性 生物体内许多氧化酶,如P-450 酶、黄嘌呤氧化酶(XOD)、脂氧化酶、髓过氧化酶(MPO)和环氧酶等,与自由基的生成有关,能诱发大量的自由基。 另外,诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在缺血再灌注时活性增加,产生大量NO而导致氧化损伤。 研究表明,许多植物提取物对上述各种氧化酶有抑制作用,从源头抑制自由基生成。黄酮类化合物中的槲皮素、姜黄素在缺血再灌注损伤时可抑制iNOS 的活性,从而起到抗氧化作用;绞股蓝皂苷可以降低异常增高的XOD 和MPO 的活性,改善糖尿病大鼠肾脏的氧化应激,延缓肾脏损害的进展。 2. 增强抗氧化酶活性 机体存在具有防护、清除和修复过量自由基伤害的抗氧化酶类,如过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶等。SOD 是体内超氧阴离子的主要清除者,将其催化分解为H2O2,但H2O2也具有氧化损伤作用,CAT 将其转化为O2和H2O。同时H2O2也可通过GSH-Px 的催化和还原型谷胱甘肽(GSH)反应生成H2O,同时生成氧化型谷胱甘肽。 许多研究表明,植物提取抗氧化成分不仅能防护体内抗氧化酶,还能增强机体内抗氧化酶活性,如黄酮类中的槲皮素能减少胰岛β细胞的氧化损伤,同时还能恢复Fe2+致肾细胞损伤动物的SOD、GSH-Px 和CAT 的活力;皂苷类物质对氧自由基本身影响较少,但大多能提高体内SOD、CAT 等抗氧化酶的活性,从而增强机体抗氧化系统功能。 此外,一些天然物质可在基因与转录水平上诱导体内抗氧化酶如SOD 的表达,发挥其抗氧化作用。 (二)抗氧化成分之间互补和协同作用 植物提取物抗氧化成分之间存在相互补充、相互协调的关系,在体内通过电子和/ 或质子转移、作用于氧化酶和抗氧化酶、螯合钝化过渡金属离子、影响基因表达等途径联合发挥抗氧化作用。 研究发现不同浓度的茶多酚和西洋参之间均存在明显的协同增效作用,并且随着浓度上升,协同增效作用也相应增强。VE 和VC对鹰嘴豆抗氧化多肽的还原能力有显著的增效作用,且VC与鹰嘴豆抗氧化多肽的协同作用较VE更强,所有的协同作用随添加量和作用时间的增加而增强。 (三)直接清除或抑制自由基 植物提取物能够作为氢质子或电子的供给体,直接猝灭或抑制自由基,终止自由基的连

猴头菌提取物抗氧化活性研究

猴头菌提取物抗氧化活性研究 分别采用还原力测定法、Fenton法、2,2-二苯基-1-苦肼基(DPPH)分析法和改良邻苯三酚自氧化法,对猴头菌子实体水提物和醇提物的总还原力,清 除?OH、DPPH?和O - 2?自由基的能力进行测定。结果表明:醇提物还原力 较强,且还原力大小与浓度成正比;猴头菌水提物和醇提物均有清除?OH、DPPH? 和O - 2?自由基的能力,且水提物的效果比醇提物好;水提物和醇提物对?OH、DPPH?和O - 2?的清除能力依次为DPPH?、?OH和O - 2?,并且在一定浓 度范围内,清除率与浓度成正比。 猴头菌;清除自由基;抗氧化活性 人体持续暴露在活性氧与促氧化剂中时,很容易引起机体组织产生氧化应激,导致代谢性功能紊乱以及一系列的慢性疾病[1]。食用一些富含具有抗氧化活性物质的功能性食品可以减轻机体组织氧化应激或预防损伤。一些合成抗氧化剂与天然抗氧化剂相比,尽管具有很强的清除自由基活性,但同时也具有强的毒副作用,因此人们倾向于从自然界中寻求更安全的抗氧化剂。LEE等[2]从桦褐孔菌(Inonotus obliquus)中分离到一些具有较强活性的抗氧化成分(多酚类化合物)。MAU等[3]研究表明灵芝(Ganoderma lucidum)是很好的天然抗氧化剂。同为食用菌的猴头菌(Hericium erinaceus)是著名的药膳两用真菌,具有抗溃疡、抗炎症、抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳、提高机体耐缺氧能力、增加心肌血液输出量、加速机体血液循环、降血糖、保肝护肝和降血脂、降血压等作用[4]。笔者通过对猴头菌子实体的水提物和醇提物总还原力、清除?OH、2,2-二苯基-1-苦 肼基自由基(DPPH?)及O - 2?自由基的研究,旨在为其在医药保健方面的 利用提供理论依据。 1 材料与方法 1.1材料 猴头菌(H. erinaceus)子实体由上海市农业科学院食用菌研究所提供。 1.2主要试剂与仪器 柠檬酸、Na 2HPO 4、NaH 2PO 4、六氰合铁酸钾(铁氰化钾)、醋酸、三氯化铁、维生素C、FeSO 4?7H 2O、30%H 2O 2溶液、水杨酸、无水乙醇、95%乙醇等(国药集团化学试剂有限公司),DPPH(美国Sigma公司),实验用水(娃哈哈纯净水);infinite M200 PRO酶标仪(瑞士TECAN公司);UVmini-1240分光光度计(日本SHIMADZU 公司)。 1.3提取物的制备 1.3.1水提物 干燥猴头菌子实体,用粉碎机粉碎,称取50 g粉末,加1 L蒸馏水超声20 min,过滤,滤液减压浓缩,反复3次,合并浓缩液,转至蒸发皿中,60 ℃水浴蒸干,备用。 1.3.2醇提物 同样称取50 g猴头菌子实体粉末,加1 L 95%乙醇超声20 min,过滤,其

植物源活性肽研究进展

植物源生物活性肽的研究进展 多肽是由天然氨基酸以不同组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称,其中可调节生物体生理功能的多肽称为生物活性肽。与蛋白质相比,活性肽不仅有比蛋白质更好的消化吸收性能,还具有促进免疫、调节激素、抗菌、抗病毒、降血压和降血脂等生理机能。此外活性肽还有较好的酸、热稳定性,水溶性及粘度随浓度变化迟钝等优点,易于作为功能因子添加到各种食品中。我国农作物种类品种繁多,利用这些廉价的植物蛋白开发具有高附加值的生物活性肽产品,越来越受到重视。本文重点综述了降血压肽、抗氧化钛、降胆固醇肽这3类生物活性肽的研究进展,将其结构特征与生理功能的关系进行了归纳,同时归纳了活性肽的生理功能,并指出其发展应用前景。 1. 生物活性肽的生理功能 1.1 抗菌活性 抗菌活性肽通常由细菌、真菌产生,或从动植物体中分离。它们尽管在结构上千差万别,但几乎所有的抗菌肽都是阳离子型的,两亲结构是它们的共同特征[1]。国内外研究成果表明,抗菌肽对部分细菌、真菌、原虫、病毒及癌细胞等均具有强大的杀伤作用。临床试验也表明,抗菌肽能够增强机体抵抗病原微生物的能力,而且在体内还不容易产生耐药性。 1.2 免疫活性[2] 免疫活性肽能够刺激机体淋巴细胞的增殖,增强巨噬细胞的吞噬功能,提高机体抵御外界病原体感染的能力,降低机体发病率。从人乳和牛乳的酪蛋白中已检测到具有免疫刺激活性的肽片段,这些肽具有刺激巨噬细胞吞噬能力的作用。另外,乳蛋白、大豆蛋白和大米蛋白等通过适当酶解处理也可产生具有免疫 活性的肽类物质。 1.3 抗高血压活性 血压是在血管紧张素转换酶(angiotensin-convertion enzyme,ACE)的作用下进行调节的,血管紧张素Ⅰ在A C E的作用下可转化为有活性的血管紧张素Ⅱ,使血管平滑肌收缩,引起血压升高。降血压肽是具有抑制ACE活性的肽类, 来源广泛,ACE 抑制肽的主要来源是乳制品和鱼蛋白(沙丁鱼、金枪鱼、

菊花提取物的抗氧化活性研究

!::::::==:=:2::!垒曼型兰!蚤茎熊匹塞 菊花提取物的抗氧化活性研究 张尔贤方黎张捷俞丽君肖湘汕头大学理学院生物学系汕头515063摘要通过菊花提取物对Fe2+诱发卵黄脂蛋白PuFA过氧化体系、TBAs生成体系和邻苯三酚一L吼in。l发光体 系的抑制作用,研究了菊花的不同提取物的抗氧化活性。结果表明.菊花黄酮类化合物有清除?oH、0?:的能力, 且有着较强的抗氧化活性,并且发现菊花抗氧化活性与黄酮类化合物含量相关。 关键词菊花黄酮类化合物抗氧化活性脂质过氧化硫代巴比妥酸反应物 AbstractAstIld”vascarriedonanti-oxidativoactivityofFloschrysantllemumextractChrysanthemumextractwas允】I ot、naVonesS0mepreccsscstoextracIaavOnes打Omchl)%anthemumforscavengingactivcoxygenradicalwerereporced1兀 【hlsp印crTheresultsshowedthatchrysanthemumnavonescouldscavenge?OH、O=2andaf诧ctthcanti.oxjdative actn7Ity KeywordsFlosChrysanthemumAn“O一0xidativeFJavonesOxy鼬nradical 菊花是菊科植物菊(chry8anchemummorif01iumRamat)的头状花序.为多年生草本,在我国大部分地区有栽培。传统医学认为菊花的功效包括清热、明目、解毒,治疗头疼、眩晕、心胸烦热、疗疮等作用,民间更以饮用菊花水来解暑热。菊花含黄酮类化合物,本研究通过对菊花的抗氧化作用的初步研究.为进一步开发菊花的保健效用提供理论依据。 1材料与方法 二.二材料、试剂与仪器 千杭自菊:购于市场.绞碎备用。 卵黄悬液:新鲜鸡蛋去卵清,卵黄用等体积的pH7.45,o二_。一,L磷酸钠缓冲液(PBs)配成1:i的悬液,磁力搅拌10m址再用pBs稀释成1:25的悬液(置于冰箱中备用)。 次黄嘌呤【Fluka公司)、黄嘌呤氧化酶(酶活力5u,ml,广卅1军事医学研究所)、2一脱氧一D核糖(feinbiochemica二e二。÷一。erg,newyork)、硫代巴比妥酸(生化试剂,上海试剂二厂。 75i—Gw型分光光度计(上海分析仪器厂)、GHG—c型生物化学发光测量仪(上海市检测技术所检测仪器厂)、DGJo.5一I|冷冻干燥机(军事医学科学院实验仪器厂)、旋转蒸发器(Ro=jryEvaporatorRE一47,YAMAT0SCIENTIFICc。,二二dToky。,Japan)、BeckmanJ2—21M高速冷冻离心机3e:息an,USA)。 ::方法 二.:二提取工艺。1。’ 干菊花绞碎,加入15倍体积7o%乙醇热浸提12h.抽滤,滤渣用热水冲洗,滤液减压浓缩.蒸去乙醇,3ooor/min离心:o-二j上清液保存待用(样品I)。取一定量样品I,用2倍 体积100%的正丁醇萃取2次,萃取液蒸干溶剂,再用水定容,得样品II。取一定量样品I,用2倍体积100%的乙酸乙酯。萃取2次.萃取液蒸干溶剂,再用水定容,得样品III。取一定量样品I,用2倍体积100≈的氯仿,萃取2次.萃取液薰干溶剂,再用水定容,得样品Ⅳ。 干菊花绞碎,15倍体积水直接浸提12h,低温浓缩获得样品V(作为对照)。 1.2.2Fen诱发卵黄脂蛋白PUFA过氧化体系…。 选用1:25的卵黄悬液吸取o.2ml,加入一定量的样品.加入o,2mlFeso.25衄ol/L,用pH7.4,o1mol/L的PBs补充至2m!,37℃振荡15min,取出后加人o.5ml三氧乙酸(简写TcA),3500r/min离心10min,吸取2ml上清液加入lml硫代巴比妥酸(简写TBA).加塞,放人沸水浴中15min,冷却后,于532nm处比色测出吸光度(A)值:以不加样品管的吸光度为(A.)。样品抗氧化活性(AoA)用对卵黄脂蛋白LPo的抑制率表示: AOA(%)=(A0一A)/A。×100% 1.2.3Fe“次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶一TBAs生成体系n4加样顺序为:Feso.(2mm。1,L)o.04ml、黄嘌呤氧化酶(简写:xo)(5u/m1)3.5ul、脱氧核糖(30mm01,L)o2ml、EDTA(5吼ol,L)O.04m1、H202(17.6黝ol,L)o01ml、加入o.1ml样品、pH7.4PBs(O.15mol/L)1.48ml、次黄嘌呤(简写:x)(2mol/L)o.2ml总体积为2ml(除PBs、Fe∞.用重蒸水配制外.其它试剂均用pH7.4PBso.15mol/L配制)。然后,35℃温浴15mim.取lml反应液加1%w/vTBA(NaoHo05mol/L配制)及冰醋酸lml,混匀后放人沸水浴30min,冷却。在532nm处测其吸光度A,以不加样品管的吸光度为k:清除活性以抑制TBAs生成量As32n。值的抑制百分率表示即(A。一A)/A。×loo%。1.2.4超氧阴离子的邻苯三酚“uInin。l发光体系  万方数据

活性肽的神奇功效

小分子活性肽的神奇功效 经研究表明,小分子活性肽辅以多种维生素和复合微量元素可诱导和促进T淋巴细胞分化、成熟;调节T淋巴细胞群比例,使CD4/CD8趋于正常。同时,增强巨噬细胞的吞噬能力和红细胞免疫功能。可显着增加淋巴细胞功能,并能有效地防止辐射和放化疗及其他污染中毒后白细胞数量的减少,有效地抑制肿瘤细胞生长,起到改善免疫功能的作用。从间接作用而言,小分子活性肽可促使粪便排泄,降低血清胆固醇浓度,使甾醇排泄增加和肝脏高胆固醇浓度下降,对治疗原发性高血压有一定的功效。能抑制脂肪的积蓄,抑制有害菌,排除毒素,促进其对食物营养的消化吸收,以提高人体对药物有效成分的吸收,具有很高的生理活性,人们经常食用小分子活性肽,在强身保健方面有如下功效: 1、主动吸收,迅速恢复体能 肽是蛋白质与氨基酸的中间物质,由数个氨基酸结合而成。分子大小介于蛋白质与氨基酸之间。但是,比氨基酸分子大的肽在人体内被吸收的速度反而比氨基酸更快,原因就在于:小分子活性肽是数个氨基酸分子集中起来被整体吸收,而氨基酸需要一个一个地

被吸收,小分子活性肽能比氨基酸更迅速地被人体吸收。 在恢复体力方面,小分子活性肽也发挥着优异的功效。人体在进行激烈运动时,为了补给能量就需要消耗肌肉中的氨基酸。就是说,身体需要能量的时候就会从肌肉中获取。肌肉中的氨基酸被消耗掉后,肌肉组织就会受到损伤、肌肉产生疲劳感、难以发挥原有的力量。服用小分子活性肽3分钟进入血液,5分 钟转换为体能,在运动前、运动中补给活性肽可以给身体提供充足的能量,能够抑制肌肉力量的下降、长时间维持充沛的体力。 2、消除疲劳 疲劳是由大脑感知的。当人体感到疲劳的时候,疲劳的机体部位向大脑发出疲劳信息,于是人就感到疲劳。从这个意义上说,感知疲劳的中心就在大脑里。如果没有疲劳这种生理反应,我们就会无休止的劳动下去,直至死亡。 大脑疲劳是由氧化血红蛋白浓度的上升引起的,服用小分子活性肽可以抑制氧化血红蛋白浓度的上升,因而能够缓和大脑的精神压力,使人在学习时保持沉着冷静、清醒的记忆,能够减轻工作造成的大脑疲劳。

抗氧化活性测定方法的比较

抗氧化活性测定方法的比较 人体衰老和多种疾病均与自由基有关,寻找天然抗氧化剂具有重要意义。黄酮、多糖、多肽、酚类等生物活性成分均具有抗氧化活性,抗氧化活性的筛选方法可分为体外和体内2种测试体系。 体外:抗氧化活性可以用在特定条件下,样品对检测体系中自由基的清除能力、抗油脂过氧化能力及样品的还原能力、总抗氧化能力等来衡量和表征。常用的方法有羟基自由基(·OH)清除能力法、1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH法)、2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐(ABTS 法)、超氧阴离子自由基法(O2-·)、邻苯三酚自氧化法、β-胡萝卜素漂白法、硫代巴比妥酸法、铁离子还原能力测定(FRAP法)、总酚测定法、ORAC法等方法。体内:主要有DNA氧化损伤法、蛋白质氧化损伤法、线粒体氧化损伤法。 其中DPPH法和ABTS法操作较简单便捷,不需要特殊的检测设备,只在需固定时间下记下其紫外分光光度测量值后计算其自由基清除率,缺点是不同物质具有组成和结构的差异,与DPPH·、ABTS+·的反应速率不同,反应到达平衡的时间不同,将反应时间固定在某一值时,可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断,且DPPH自由基会和其他自由基发生反应。邻苯三酚自氧化法缺点是检测波长、缓冲液的组成及pH值、邻苯三酚浓度等关键测定条件存在

着较大差异。β-胡萝卜素漂白法的缺点是β-胡萝卜素本身有抗氧化活性,对样品活性的测定结果有影响。FRAP法主要用于食品业,优点是简单易操作、可以重复,缺点是无法测定硫醇化合物的还原能力。ORAC法是国际上通用的评价食品氧化的标准方法,缺点是仪器成分较复杂,检测成本较高。 目前普遍使用的体外抗氧化活性指标一般都采用分光光度法,使用分光光度计测量各种颜色成分含量的变化。分光光度法操作较简单、便捷,不需要特殊的检测设备,只在需固定时间下记下其紫外-可见分光光度测量值后计算其活性大小,具有成本低、效率高、样品量少等优点。分光光度法缺点是会受到样本自身颜色和浑浊度的影响和限制,颜色深的样品测得的数据误差大,甚至得到错误的结果;不同物质组成和结构存在差异,与各种自由基的反应速率不同,反应到达平衡的时间不同,将反应时间固定在某一值时,可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断。外界环境因素对实验结果也存在一定程度的影响,有些抗氧化活性实验在冬天低温时不易成功,测得的数据往往没有规律。 我觉得在测定样品的抗氧化活性时,各种方法都有自己的优缺点,要根据需测物质来决定用什么方法,比如DPPH 法的自由基选择性强,不和只有一个羟基的芳香酸、无羟基的类黄酮反应,这类物质需用其他方法测定。若对检测结果

有关抗氧化能力分析

有关抗氧化能力分析 ORAC (Oxygen radical absorbance capacity) 即抗氧化能力指数,是目前抗氧化研究领域一个重要的评价方法。该方法以偶氮类化合物AAPH作为过氧自由基来源,以荧光素Fluorescence为荧光指示剂,维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准,使用荧光微孔板分析仪进行分析。与其他抗氧化能力分析方法相比, ORAC方法具有诸多显著的优点。该方法自1993年建立以来,经过不断发展和完善,可以说ORAC方法是目前评价抗氧化物质的抗氧化活性的最为简单、准确、灵敏度高、应用范围广和最具影响力的抗氧化能力研究方法之一。目前,ORAC方法已成功应用于生物样品、植物或食品提取物和纯化合物等多种样品的体内外抗氧化能力分析。 科标检测,其团队通过多年的研究沉淀,通过模拟各种氧自由基在人体内的产生机制产生各种氧自由基,而这些自由基可破坏荧光探针的结构从而造成荧光信号的衰减。当具有抗氧化活性的样品加入到实验体系中时,可以不同程度的保护荧光探针不被氧自由基所损坏,因而通过检测荧光信号的不同,便可以计算出某种样品的抗氧化活性。在ORAC实验中,以水溶性维生素E(Trolox)为标准品,因此最终样品的抗氧化实验结果最终以每克或是每毫升样品含有多少Trolox当量的形式表示。通过ORAC5.0检测样品的抗氧化活性,为抗氧化食品、保健品、化妆品以及药品的研发提供了有效的检测手段。 ORAC(Oxgen Radical Absorbance Capacity)指氧自由基吸收能力,即测试食品药品中抗氧化物的含量的国际通用标准单位。ORAC的含量超高,抑制自由基的抗氧化能力就越强。 对于一个未知样品,ORAC化学方法测试出样品的理论抗氧化值,并测出对各种自由基作用的具体数值,以寻找研发方向。然后通过ORAC生物细胞方法测试其生物利用度(被人体细胞所吸收的值),以验证其真实的效果。最后进行动物临床或人体临床,证实样品(产品)的实际效果。通过这种循序渐进、符合逻辑的研发方案步骤,企业可以安全、有效的研发出符合预期的新产品,建立起一套扎实的数据支撑体系。ORAC已建立从化学层面、生物细胞层面、临床层面纵向立体的分析方法。 常见蔬菜或水果的ORAC: "ORAC-total"是指总抗过氧化自由基能力值;“ORAC-5.0”是指总抗自由基能力值; 芦荟: ORAC-total :2737 μmol TE/g ORAC-5.0 :135,647 μmol TE/g

抗氧化剂抗氧化活性的测定方法

1.抗氧化剂是指在低浓度下能有效延缓或阻止底物氧化的物质。被氧化的底物包括蛋白质、脂质、糖和DNA。 2.初始型抗氧化剂(AH)可通过与脂质自由基L.、过氧自由基LOO.或烷氧自由基LO.反应抑制脂质氧化链反应。 L.+ AH--- LH + A. LOO.+ AH--- LOOH + A. LO.+ AH--- LOH + A. 抗氧化剂自由基A.也能与过氧自由基、烷氧自由基反应从而终止脂质氧化反应。 LOO.+ A.---LOOA LO.+ A.---LOA 次级型抗氧化剂可通过各种机理延缓脂质氧化,如螯合过渡金属、给初始型抗氧化剂补充氢、清除氧以及使活性物质失活等。 抗氧化剂的活性分为在生物体外(如食品中)的活性和在生物体内的活性。本文综述了体外测定抗氧化剂抗氧化活性的方法,不包括在生物体中测定生物活性的方法。 3.评价或表征抗氧化活性的方法为了说明在特定条件下被测物抑制底物氧化的效力或清除自由基的能力 实际测定时至少要说明在测试条件下被测物是抗氧化剂还是促氧化剂;在指定浓度下比较不同测试材料(如被测物与标准抗氧化剂或添加有被测物的测试体系与空白体系)对底物的作用。 评价或表征抗氧化活性的方法有: (1)在指定的时间测量氧化产物或官能团的浓度或吸光度值;( 2)测量反应的速率;

( 3)测量诱导期(延滞期)或氧化达到一定程度所需的时间;( 4)测量速度的积分(即动力学曲线下的面积) ; ( 5)测量被测物产生与标准抗氧化剂相当作用的浓度。4.参数 4.1诱导期( induction period) 诱导期tIND(也叫延滞期, lag period)常定义为化学反应的速度。诱导期是一个相当不确定的值,受检测方法、使用仪器的灵敏性以及一些其他因素的影响。对于脂质氧化,诱导期通常是指链增长阶段动力学曲线的切线和时间轴的交点。 4.2抑制率( percentag e of inhibition)和IC50 抑制率和IC50 (抗氧化剂提供50%抑制作用时的浓度,也可用EC50表示的)常用来表征抗氧化能力。它们不仅与被测抗氧化剂的反应性能和氧化的底物有关,而且受其他因素的影响,如脂质氧化链反应的长度和抑制速率等。此外,用IC50表征抗氧化剂 的活性与比较活性的时间点有关。只有在其他参数相同的情况下,在某一研究中测得的抑制率和IC50才可以与另一研究中测得的值进行直接比较。TEC50是指抗氧化剂提供50%抑制作用所需的时间,也常用来表征抗氧化活性 5.对测定方法的要求 测定抗氧化剂抗氧化活性的方法应满足如下要 求: ( 1)能说明测试体系中发生的反应,并能用明确的动力学图解描述;( 2)测试要有再现性; ( 3)测试效率要足够高; ( 4)方法要相对简单; ( 5)能连续检测; ( 6)应使用与体内或食品有关的活性自由基;

生物活性肽的应用综述

生物活性肽的功能和应用研究 摘要:生物活性肽(bioactive peptides)是指具有生物活性的多肽, 是指对生物体的生命活动有益或具有生理作用的肽类化合物。本文主要介绍目前主要的一些生物活性肽的生理功能及应用研究,介绍生物活性肽在食品中一些简单的应用。简单展望一下生物活性肽以后的研究进展。 关键词:生物活性肽;功能;应用; 生物活性肽(bioactive peptides)是指具有生物活性的多肽, 是指对生物体的生命活动有益或具有生理作用的肽类化合物。它是一类由20种天然氨基酸以不同的组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同的肽类的总称。生物肽与蛋白质没有本质的区别,但又不同于蛋白质,比蛋白质校、生理活性强。根据肽链上氨基酸的数目,通常把具有2~10个氨基酸、分子量<2000Dalton的肽成为寡肽(oligpeptide),讲氨基酸数目10~50个、分子量2000~10000Dalton的称为多肽(polypeptide)。 这些活性肽小到只有2个氨基酸的双肽,也可以大到复杂的长链或环状多肽,而且常经过糖苷化、磷酸化或酰化衍生,在细胞生理及代谢功能的调节上具有重要的作用,这些调节作用几乎涉及到人体所有的生理活动,如神经系统、消化系统、循环系统、内分泌系统等。不仅如此,其中许多活性肽还具有原蛋白质或其组成氨基酸所没有的新功能。特别是以数个氨基酸结合生成的低聚肽不仅有比蛋白质更好的消化吸收性能,还具有促进免疫、调节激素、抗菌、抗病毒、降血压和降血脂等生理机能,食用安全性极高。目前人们认同的活性肽的定义是对肌体构成一套高度自动化的物质,是沟通细胞间、血管间联系的信使,为外分泌、内分泌、神经系统行使传递功能,从而使肌体组成了高度严密的系统,促使生物体生长、发育、繁殖正常进行。 生物活性肽的生理功能 1.1抗高血压活性 血管紧张素转化酶(ACE)在血压调节过程中起着非常重要的作用。人体的肾脏可以分泌肾素,作用于血管紧张素释放出无活性的血管紧张素Ⅰ。ACE可以从无活性的血管紧张素Ⅰ的C-末端水解掉2个氨基酸,形成有活性的血管紧张素Ⅱ。血管紧张素Ⅱ是已知最强的缩血管物之一,可以导致血管收缩,引发高血压。同时ACE可水解血管舒缓激肽使其失活,而血管舒缓激肽可以舒张血管、使血压降低。因此ACE在肾素-血管紧张素目前主要的活性肽及其应用体系、血管舒缓素-激肽体系中起着重要的作用。已知抗高血压肽大致上有4种来源:来自乳蛋白的肽类;来自酸奶的肽类;来自鱼贝类(沙丁鱼、金枪鱼)的肽类;来自植物的肽类(玉米醇溶蛋白、无花果)等。 1.2抗菌活性 1972年,瑞典科学家在果蝇中首次发现抗菌肽,随后得到第1个真正意义上的抗菌肽天蚕素(cecropins)。后来科学家们在昆虫、被囊动物、两栖动物、鸟类、鱼类、哺乳动物、植物乃至人等多种生物体内发现了至少800多种抗菌肽,并且某些抗菌肽在临床应用中已取得良好的疗效,如Oren等从豹鳎中分离得到一种33肽的抗菌肽,具有比蜂毒素更强的抗菌活性,其抑菌机理是溶解细菌的细

抗氧化活性测定方法

抗氧化方法 一、Determination of Superoxide Anion Scavenging Ability(超氧阴离子清除能 力) 1、determined by a CL method in the pyrogallol-luminol system on a BPCL Ultra-weak luminescence analyzer。(焦性没食子酸-发光胺,荧光检 测) 2、步骤:10μL sample (不同浓度) + 50 μL焦棓酸(6.25*10-4 mol/L) + 0.94 mL of a mixture containing luminol (0.05 mol/L) and carbonate buffer (pH 10.2) (发光胺用pH 10.2碳酸盐缓冲液配成0.05 mol/L) 3、Hi-V, 800; Kv, -1; the spectral range of CL(波长范围)180-800 nm; 温 度:30 ° C.总时间:300S,每2S读数一次。 4、对照:不加样品(样品用水代替)。空白不加焦棓酸(用来调零)。 二、Determination of Scavenging Ability on Hydroxide Radicals(羟基自由基清除能力) 1、CuSO4-Phen-Vc-H2O2 CL system(1 mL体系) 2、50 μL of sample solution (样品液)+ 50 μL of a 1.0 mmol/L CuSO4 solution (CuSO4 溶液)+ 50 μL of a 1 mmol/L 1,10-phenanthroline solution(邻二氮菲溶液)+ 700 μL of a 0.05mol/L borate buffer (pH 9.0) (硼酸缓冲液)+ 100 μL of a 1 mmol/L ascorbate solution + 50 μL of a 0.15% H2O2 solution 3、总时间400S,间隔3S。Hi-V, 800; Kv, -1; the spectral range of CL(波长范围)180-800 nm; 温度:30 ° C. 4、阳性对照:不加样品(样品用水代替)。空白不加H2O2(用来调零)。 三、Determination of Scavenging Effect on Hydrogen Peroxide(过氧化氢清除 能力) 1、luminol-H2O2 system

抗氧化物活性测定方法总结

抗氧化物活性测定方法(倾向于考虑DPPH法和ORAC法) 1.FRAP法:铁离子还原抗氧化能力测定法[1] FRAP(ferric ion reducing antioxidant power)方法,在低pH值的溶液中, Fe3+-TPTz(Fe3+-三吡啶三嗪)被抗氧化剂还原成有色的Fe2+-TPTZ。反应的结果常以Fe2+当量或标准物质的抗氧化能力表示。 该法快速简便、易于操作、重复性好,但FRAP反应属于电子转移(SET)反应,因此FRAP方法不能够测定氢转移反应(HAT)起作用的物质。而且该法实际测定的是待测生物活性物质将Fe3+还原为Fe2+的能力,因此没有抗氧化能力的生物学相关性。 2.TEAC法(trolox equivalent antioxidant capacity) ABTS(2,2'-amino-di(2-ethyl-benzothiazoline sulphonic acid-6)ammonium salt,2,2'氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)铵盐)与过氧化物酶和氢过氧化物在一起形成ABTS+阳离子自由基。在抗氧化剂存在时,这种自由基混合物的光吸收值下降,下降程度取决于抗氧化剂的抗氧化能力,测得的结果以TEAC表示,即被测抗氧化剂清除ABTS·+的能力(吸光度大小的变化)与标准抗氧化剂trolox(VE的水溶性类似物)清除ABTS·+的能力的比值。 TEAC法十分简单,适用于大量样品的分析检测。但是,ABTS·+并非生理自由基,缺乏生理相关性,而且与FRAP方法相似,ABTS·+与不同抗氧化剂问的氧化反应时间不同,因此,只能定性不能定量评价样品的抗氧化能力。 3.DPPH法[2,3](2,2-diphenyt-l-picrylhydrazyl radical scavenging capacity) DPPH·(二苯代苦味肼基自由基)法是较常用的方法之一。DPPH·是一种稳定的以氮为中心的自由基,其醇溶液呈深紫色,在517nm 处有一吸收峰。当反应系统中存在自由基清除剂时,它可以和DPPH·的单电子配对而使517nm 处的吸收峰渐渐消退。而且,这种颜色变浅的程度与配对电子数成化学计量关系。因此,根据吸光度的变化可测得抗氧化剂的活性。通过计算DPPH自由基剩余一半时所需抗氧化剂的浓度(EC50)以及时间(TEC50)反应抗氧化物的活性。 DPPH法快速、简单,仅需要一台紫外分光光度计就可以测定,但DPPH方法存在的不足是,当被测物与DPPH紫外吸收有重叠时,将会影响测定结果,比如类胡萝卜素。此外,由于空间位阻决定反应的倾向,小分子化合物由于更易接近自由基而拥有相对较高的抗氧化能力。此外该方法线性范围也相对较窄,而且所有还原剂都能够对DPPH起作用,因此结果并不能完全代表抗氧化能力。

黄檗叶提取物的体外抗氧化活性研究

Botanical Research 植物学研究, 2018, 7(3), 233-240 Published Online May 2018 in Hans. https://www.360docs.net/doc/767858718.html,/journal/br https://https://www.360docs.net/doc/767858718.html,/10.12677/br.2018.73030 Study on Antioxidant Activity in Vitro of Extract from Phellodendron amurense Leaves Chunjing Wang, Yuhong Zhang* Key Laboratory of Forest Plant Ecology of Ministry of Education, Northeast Forestry University, Harbin Heilongjiang Received: Mar. 19th, 2018; accepted: Apr. 11th, 2018; published: Apr. 18th, 2018 Abstract Aim: To investigate antioxidant activities in vitro of different polarity fractions of extract from ethanol extract of Phellodendron amurense leaves. 4 extractions were obtained in different fractions by using different polarities of solvents such as petroleum ether, ethyl acetate, butanol and water. The antioxi-dant activity capacity of 4 different polarity fractions from ethanol extract of P. amurense leaves was evaluated by detecting scavenging abilities for 1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine (DPPH) radi-cal, hydroxyl radical (?OH), ABTS+? radical and Ferric Reducing Antioxidant Power method(FRAP) assay. The results showed that the different fractions of extract from P. amurense leaves had re-vealed antioxidant activity and showed a significant concentration-effect relationship (p < 0.05). The antioxidant effects of 4 fractions from P. amurense leaves all had different antioxidant effects in different reaction systems. There were differences in antioxidant activities among 4 fractions. Ex-tracts of ethyl acetate fraction and butanol fraction had better scavenging effects than petroleum ether fra ction and water fraction for DPPH, ?OH, ABTS+? and FRAP. The extract from the ethyl ace-tate and butanol of P. amurense has a strong antioxidant activity and is a source of natural antioxi-dants. Keywords Phellodendron amurense Leaves, Antioxidant Activity, Ethanol Extract, DPPH, Hydroxyl Radical, ABTS, FRAP 黄檗叶提取物的体外抗氧化活性研究 王春晶,张玉红* 东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨

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