分子生物学 常用试剂配制 抗生素 溶液配制
分子生物学常用试剂配制方法
庆大霉素
盐酸壮观霉素
1．称取1g粉末置于10ml塑料离心管中。
2．加入9ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至10ml。
3．0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。
100ml培养基加100ul。（在培养基中浓度为100ug/ml）
Ampicillin(氨苄青霉素)
﹡组分浓度 100mg/ml 氨苄青霉素
﹡配制量 50ml
﹡配制方法
1．称取5g Ampicillin置于50ml塑料离心管中。
2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。
3．0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。
100ml培养基加100ul。（Amp在培养基中浓度为100ug/ml）
Kanamycin（卡那霉素）
﹡组分浓度 50mg/ml卡那霉素
﹡配制量 50ml
﹡配制方法 1．称取2.5g 卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。
3．0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。
100ml培养基加100ul。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)
﹡组分浓度 24mg/ml IPTG
﹡配制量 50ml
﹡配制方法 1．称取1.2g IPTG置于50ml塑料离心管中。
2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。
3．用0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。
X-Gal (20 mg/ml)
﹡组分浓度 20mg/ml X-Gal
﹡配制量 50ml
﹡配制方法 1．称取1g X-Gal置于50ml塑料离心管中。
2．加入40ml DMF(二甲基甲酰胺)，充分混合溶解之后定容至50ml。
3．小份分装（1ml一管）后，置于-20℃避光保存。
RNase A ﹡组分浓度 10mg/ml RNase A
﹡配制量 50ml
﹡配制方法 1．取0.5g RNase A置于50ml塑料离心管中。
2．加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。
3．100℃煮沸15min,缓慢冷却至室温，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。
DTT ﹡组分浓度 1M DTT
﹡配制量 10ml
﹡配制方法 1．称取1.5 4g DTT置于15ml塑料离心管中。
2．加入8ml的10mM NaAc（pH5.2），充分混合溶解之后定容至10ml。
3．用0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml一管）后，置于－20℃保存。
EDTA溶液
﹡组分浓度 0.5M EDTA
﹡配制量 1L
﹡配制方法 1． 称取186.1g Na2EDTA·2H2O置于1L烧杯中。
2． 加入800ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。
3． 用NaOH调节调节pH值至8.0（约20gNaOH），当pH接近8.0时， EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。
4．小份分装后，高温高压灭菌，室温保存
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）
溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）
溶解1g甲氧西林钠于足量
的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）
溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）
溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）
溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素（tetracyyline）（10mg/ml）
溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
1M乙酰丁香酮：0.04g乙酰丁香酮用200微升的DMSO溶解
利福平Rifampicin：配50mg/ml的利福平50毫升，就用2.5克利福平加50毫升DMSO即可