岛津紫外可见分光光度计 UV-1750

UV-2600型紫外分光光度计操作指导书

UV-2600型紫外分光光度计操作指导书 1概况 仪器概况： UV-2600型紫外分光光度计是由日本岛津（Shimadzu）生产制造，与功能强大的操作软件UVProbe结合，操作简单方便，且符合SH/T0181方法的测量精度要求。 主要技术参数 波长范围185nm～900nm （使用积分球附件ISR- 2600Plus时220nm～1400nm） 分辨率 波长准确性± 谱带范围、、、1、2、5nm测光方式双光束方式 杂散光%以下检测器光电倍增管R-928 测光范围-5～5Abs比色池1cm 光源50W卤素灯、氘灯单色器切尼尔-特纳单色器 主电压AC100V～240V主频率50/60Hz 使用条件 操作温度：15～35℃ 操作湿度：30%～805% 2仪器结构 仪器由UV-2600型紫外分光光度计和计算机组成。 3操作步骤 开机 在使用前先确认仪器和计算机的工作电源，检查仪器样品室应无遮挡光路的物品。确认后先开启计算机，然后开启仪器电源。待分光光度计外侧的指示灯显示绿色时，启动电脑桌面上的UVPROBE程序。 首先从下拉式菜单的仪器项上追加需要的仪器，操作完毕如下图①所示，然后点击上图

的连接键②，这样仪器与计算机连接（当然，中间的通讯电缆的连接、通讯口的指定等都是必须的，此处不再赘述）并开始下示的初始化面。 初始化大约需要5分钟左右，进行一系列的检查和初置，如一切顺利通过就可以开始测定。 测定 首先选择测定的方式，在主菜单上能发现右图所示的各键，自左至右 分别为： ①报告生成器：用于制作各种格式的报告。 ① ② ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦ ⑧ ⑨ ⑩ ⑾ ⑿ ⒀ ⒁

紫外可见分光光度计常见故障的排除

紫外可见分光光度计常见故障的排除 光源部分： （1）故障：钨灯不亮； 原因：钨灯灯丝烧断（此种原因几率最高）； 检查：钨灯两端有工作电压，但灯不亮；取下钨灯用万用表电阻档检测。 处置：更换新钨灯； （2）故障：钨灯不亮； 原因：没有点灯电压； 检查：保险丝被熔断； 处置：更换保险丝，（如更换后再次烧断则要检查供电电路）； （3）故障：氘灯不亮； 原因：氘灯寿命到期（此种原因几率最高）； 检查：灯丝电压、阳极电压均有，灯丝也可能未断（可看到灯丝发红）； 处置：更换氘灯； （4）故障：氘灯不亮； 原因：氘灯起辉电路故障； 检查：氘灯在起辉的过程中，一般是灯丝先要预热数秒钟，然后灯的阳极与阴极间才可起辉放电，如果灯在起辉的开始瞬间灯内闪动一下或连续闪动，并且更换新的氘灯后依然如此，有可能是起辉电路有故障，灯电流调整用的大功率晶体管损坏的几率最大。 处置：需要专业人士修理； 二．信号部分： （1）故障：没有任何检测信号输出； 原因：没有任何光束照射到样品室内；

检查：将波长设定为530nm，狭缝尽量开到最宽档位，在黑暗的环境下用一张白纸放在样品室光窗出口处，观察白纸上有无绿光斑影像； 处置：检查光源镜是否转到位？双光束仪器的切光电机是否转动了（耳朵可以听见电机转动的声音）？ （2）故障：样品室内无任何物品的情况下，全波长范围内基线噪声大； 原因：光源镜位置不正确、石英窗表面被溅射上样品； 检查：观察光源是否照射到入射狭缝的中央？石英窗上有无污染物？ 处置：重新调整光源镜的位置，用乙醇清洗石英窗； （3）故障：样品室内无任何物品的情况下，仅仅是紫外区的基线噪声大； 原因：氘灯老化、光学系统的反光镜表面劣化、滤光片出现结晶物； 检查：可见区的基线较为平坦，断电后打开仪器的单色器及上盖，肉眼可以观察到光栅、反光镜表面有一层白色雾状物覆盖在上面；如果光学系统正常，最大的可能是氘灯老化，可以通过能量检查或更换新灯方法加以判断； 处置：更换氘灯、用火棉胶粘取镜面上的污物或用研磨膏研磨滤光片（注意：此种技巧需要有一定维修经验者来实施）； （4）故障：样品室放入空白后做基线记忆，噪声较大，紫外区尤甚； 原因：比色皿表面或内壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白样品对紫外光谱的吸收太强烈，使放大器超出了校正范围； 检查：将波长设定为250nm，先在不放任何物品的状态下调零，然后将空比色皿插入样品道一侧，此时吸光值应小于0.07Abs；如果大于此值，有可能是比色皿不干净或使用了玻璃比色皿；同样方法也可判断空白溶液的吸光值大小； 处置：清洗比色皿，更换空白溶液； （5）故障：吸光值结果出现负值（最常见）； 原因：没做空白记忆、样品的吸光值小于空白参比液； 检查：将参比液与样品液调换位置便知； 处置：做空白记忆、调换参比液或用参比液配置样品溶液； （6）故障：样品信号重现性不良；

岛津UV-1800紫外可见分光光度计操作规程(仪器版)

岛津UV-1800紫外可见- 分光光度计操作规程（仪器版） 一、操作步骤 1、开启主机电源，分光光度计进行自检和初始化。 2、初始化结束后，出现“用户、密码输入”界面，直接按下【ENTER】键完成后进入到“模式菜单”。 3、进入“模式菜单” 3.1、单波长下，测定样品的吸光度，则选择【1.光度】； 3.2、制作标准曲线和样品的测定，则选择【3.定量】。 4、单波长下，样品吸光度的测定 4.1、在“模式菜单”下，选择【1.光度】，继续选择【1.光度】。 4.2、按下【GOTO WL】键，输入测定波长。 注：当需要空白校正时，在样品之前放置空白样品，按下【AUTO ZERO】键），测定值将被设置为0Abs。 4.3、然后按下【F3】或【START/STOP】键，进入测定界面。 4.4、放入样品，再次按下【START/STOP】键，即可完成一次样品吸光度的测定。 5、标准曲线的制作 5.1、在“模式菜单”下，按【3.定量】键选择进入“测量参数配置屏幕”，在对话框中设置不同测量参数选项，输入选项编号选择需要设置的参数。 5.2、按【1.测定】键选择“1λ”测量方法，然后按屏幕提示输入测量波长，按【ENTER】键返回参数配置屏幕。 5.3、按【2.方法】键选择定量法。 （1）当K、B值已知时，选“K系数法”，手动输入K、B值制作曲线。 （2）当K、B值未知时，选“多点校正曲线法”，根据指示和实际输入标准样品数目，校准曲线方程的次数和零截距条件，然后按【ENTER】键返回参数配置屏幕。 5.4、按【3.测定次数】键设置重复测量次数，然后按【ENTER】键返回参数配置屏幕。 5.5、按【4.单位】键选择样品浓度单位，然后按【ENTER】键返回参数配置屏幕。 5.6、按【START/STOP】键时出现标准样品浓度（浓度表）输入屏幕，按顺序输入标样浓度完成后，出现“键入”或“测定”吸光度值的选项。若已知每个标样对应的吸光度值，选

752紫外可见分光光度计使用方法解析

752紫外可见分光光度计 一、仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理—一比耳定律。 τ=I/Io log I/Io=KCL A= KCL 从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时．透过的光是根据溶液的浓度而变化的，752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。 二、仪器的安装、使用、安装 1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查，电源电压是否正常，接地线是否牢固可靠，在得到确认后方和接通电源使用。 2 仪器经过运输和搬运等原因，会影响波长准确度，应进行仪器调校后使用。 使用：仪器使用前需开机预热30min。 本仪器键盘共有4个键，分别为； 1 A /τ/C/F 1SD 2 ▽／0％ 3?／100％ 4 A /τ/C/F键：每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。 A——吸光度（Absorbance） T——透射比（Trans） C——浓度（conc） F——斜率（Factor） (2)F值通过按键输入（后面介绍如何设置） 5SD键：该键具有2个功能 a)用于RS232串行口和计算机传输数据（单向传输数据，仪器发向计算机）。 b)当处于F状态时，具有确认的功能，即确认当前的F值，并自动转到C，计算当前的C 值（C=F*A）。 6 ▽／0％键：该键具有2个功能 a）调零；只有在τ状态时有效，打开样品室盖，按键后应显示0.000。 b）下降键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动减1，如果按住本键不放，目动减1会加快速度；如果F值为0后，再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。 7 ?／100％键；该键具有2个功能 a）只有在A、τ状态时有效，关闭样品室盖，按键后应显示0.000、100.0。 b）上升键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动加1，如果按住本键不放，自动加1会加快速度，如果F值为1999后，再按键它会自动变为0，再往键开始自动加l。 例如：设置斜率为1500。 方法一 T）按A／τ／C／F键切换到F状态。 b）如果当前F值为1000，则按?／100%键，直到F值为1500。 C）再按SD键，表示当前的F值为1500，然后自动回到C状态，假如所测的A值为0．234，则此时显示C值为0351。

岛津UV2501PC型紫外可见分光光度计配置

岛津UV-2501PC型紫外可见分光光度计配置 1.工作条件： 1)电源：220V AC（交流），±10%，50Hz 2)环境温度：15--35?C 3)相对湿度：45-85%（但温度小于30?C时，湿度应小于70％） 2.分光光度计： 1)波长范围：190—900nm 2)谱带宽度：0.1，0.2，0.5，1，2，5nm可调 3)分辨率：0.1nm 4)波长表示：至0.1nm 5)波长设置：扫描开始波长和结束波长能够以1nm单位设置，其他为0.1nm单位 6)波长精度：±0.3nm （狭缝宽度为0.2nm），内装优自动波长校正功能 7)波长重现精度：±0.1nm 8)波长扫描速度：Goto WL(波长移动)命令：大约2400nm/min Pop Up San 大约1400nm/min(进样间隔2nm) FAST 大约550nm/min MIDDLE 大约210 nm/min SLOW 大约140 nm/min VERY SLOW 大约85 nm/min 9)光源转换：和波长同步自动转换，转换波长可在282-293nm范围任意设定（0.1 nm/min单位） 10)杂散光：<0.015%（NaI,220nm;NaNO2,340nm） 11)波长移动速度：4500nm/min 12)吸光度量特性 测量范围：-2.0~3.0ABS（吸光度单位） 测量精度：± 0.002ABS(D 0—0.5AU时) 基线稳定性：±0.0004ABS/小时（340nm） 基线平直度：± 0.001ABS 基线校正：由数据处理系统控制自动校正 3.数据处理系统：

1)工作站PC： CPU≥PⅣ HD≥40G RAM≥256M 2)应用软件： 要求对仪器的各项操作进行编程控制，通过数据处理系统设定仪器分析条件，包括设定波长扫描，单组分或多组份、多皮长测定其他装置的工作条件和参数。 具备数据采集与分析、样品定性和定量测定、报告制作、实时显示、紫外/可见光吸收谱图的储存和检索功能。自动记录和审核分析过程中的所有分析数据，提供功能完整的质量控制软件。 仪器操作人可设计、改进和储存适合自己的分析方法。当调出已存方法时，所有仪器 参数可自动调节至该方法所贮存的数值。 4.配置 主机1台 UV-Probe英文版操作控制系统 四联池架(用于方形10mm比色皿系列)1个 10mm 方形石英比色皿5个 消耗品：卤素灯1个，氘灯1个，0.5A保险丝5根 中国制造的品牌电脑与打印机

紫外可见分光光度计的校正

实训二紫外可见分光光度计的校正 一、实训目的 1、了解紫外-可见分光光度的基本构造。 2、熟悉紫外可见分光光度计的操作技术。 3、熟悉校正波长和测量吸收值精度的原理和方法。 二、仪器与试剂 1、仪器：紫外-可见分光光度计，石英吸收池（1cm），容量瓶（1000m1），烧杯。 2、试剂：0.0600g→1000ml的K2Cr2O7的硫酸标准溶液（0.005mol/L），NaI溶液（10g/L），NaNO2溶液（50g/L）。 三、实训原理 紫外-可见分光光度计是单光束手工操作仪器，备有钨灯及氢灯两种光源，可用于可见及紫外光区。它是具有色散能力较高的单色器，狭缝可调，可得到较纯的单色光，适用于定性鉴别和定量分析。 新仪器启用前或仪器修理后或长期使用后均需对仪器的性能进行检定。仪器的性能主要是波长准确度与重现性、单色器的分辨能力、吸光度的准确性和重现性及杂散光等。 四、实训操作 1、吸收池配对性试验 每次测定前，应先用蒸馏水做吸收池配对性试验。两个吸收池透光率T相差应＜0.5％。 2、波长准确性与重现性 校验波长是否准确，可用谱线校正法。在吸收池中置一白纸挡住光路，转动波长至486nm附近，遮光观察白纸上蓝色斑。轻微移动波长，至使此蓝色光斑最亮时止。根据调整的波长范围观察所得到的相应颜色，并进行对比核对，判断波长的准确性。 3、吸收度的准确性与透光率重现性 在紫外-分光光度计中用作读取透光率的电位器的精度可达到0.2％，但是，由于其他原因，例如电压变化等，实际测得的透光率误差大于0.2％。一般要求透光率的精度、稳定性和重现性不超过0.5％。透光率的准确性可用已知吸光系数的物质核对，常用的是重铬酸钾。取在120℃干燥至恒重的基准K2Cr2O7约60mg，精密称定，用H2S04溶液(0.005mol／L)溶解并稀释至1000ml，摇匀。按下表规定的吸收峰与谷波长处测定。 将测得的吸光度，计算出其吸光系数，取平均值与表中规定值核对，如相对偏差在土1％以内，则透光率准确性好。K Cr O的H S0溶液（0.005mol／L)的E cm1% 透光率重现性可结合透光率准确性实验同时进行，即在固定波长、溶液浓度以及狭

岛津紫外-可见分光光度计uv-2550

岛津UV-2550 仪器说明书 一、仪器简介 岛津UV-2550是一款博得了用户高度评价的紫外可见分光光度计，性能卓越且操作简单方便，与功能强大的操作软件UVProbe结合，可以具备强大的功能。小光斑的光学系统使得微量的测定更为方便。 1）高水平的超低杂散光 UV-2550采用优异的DDM（双闪耀衍射光栅、双单色器）技术实现了超低杂散光（％以下）和高光通量。低的杂散光可以对高浓度的样品不进行稀释而直接测定。 2）通用型的软件UVProbe UV-2550通过新一代的中英文双语操作软件UVProbe控制，包含光谱测定、光度测定、动力学测定和报告处理四大模块，从基本的测定到研究解析都可以通过它实现。UVProbe实现了真正的QA/QC功能，完全支持GLP、GMP。另外还可以加载膜厚测定、色彩分析等软件。 3）丰富的附件选择和广泛的应用领域 生命科学领域：可对从生命体内得到的微量样品进行测试。 积分球测试：可以对浑浊样品和粉末状的样品进行测试。 反射附件：可以对光学材料进行相对反射和绝对反射的测定。 二、主要技术指标 三、操作流程 1、开机预热 1.1先打开电脑显示器和主机，再打开仪器的电源（仪器左侧），双击桌面上的图标UVProbe , 出现“运行身份”对话框，选中“当前用户”，把“保护我的计算机”前的“√”去掉，否则进不去程序，点“确定”，进入软件；

1.2点击屏幕下方的“连接”，出现“UV-2550PC 系列– (FD 00)”对话框，仪器开始初 始化，所有项目前显示绿灯，则初始化通过，点击“确定”，仪器连接成功； 1.3初始化结束后，仪器需预热15min。预热结束，即可往下操作。 2、基线校正 2.1点击菜单栏中的“窗口”，在下拉菜单中，点击“光度测定”，打开光度模块； 2.2点击屏幕下方光度计按键栏的“基线”，弹出“基线参数”对话框，输入波长范围（实 验所需的波长范围），点击“确定”，启动基线校准操作，在基线扫描过程中，注意波长的变化范围，读数变化≤3nm可接受。扫描结束后，点击输出窗口的“仪器履历”，查看基线扫描结果。 3、光度测定 首先选择测定方式，即编方法。 在菜单栏的“编辑”下拉菜单中，选择“方法”，弹出“光度测定方法向导-[波长]”对话框，在波长类型中，可设定测定的波长范围（点或范围）。 如果选择波长类型为“点”，则输入目标波长，点击“加入”，即出现在“条目”中；若选择波长类型为“范围”，则输入波长范围，点击“加入”。完成后，点击“下一步”； 设置类型及定量法等；点击“下一步”，设置标准样品重复次数，点击“下一步”，设置未知样品重复次数；点击“下一步”，设置方法的保存位置，点击“完成”，方法即保存。 标准曲线的绘制。 在标准表中，输入标准品信息。 点击光度计按键栏的“读取Std.”,开始测定。测定时，可以自动测定（把样品全部放入样品盒，一次可放6个，点击方法中的附件，选择“六联池” ,软件自动测定各标准溶液的吸光度，并自动绘制标准曲线。所配标准溶液的吸光度在～范围内，吸收测定的精密度约为%（注：当摩尔吸收系数为105L/、石英皿的光程为1cm、浓度在1×10-5～×10-6mol/L范围时，即可得到～范围的吸光度）。标准测定完毕，工作曲线自动显示。接下去测定未知样品的浓度。），也可手动测定（把单个样品放入光路，点击方法中的附件，选择“无”），但是自动测定可能会在光路转换过程中产生误差。测定结束，点击菜单栏的“图像”，在下拉菜单中“标准曲线统计”，可查看标准曲线的相关信息。

岛津傅立叶红外分光光度计IRAffinity-1IRprestige-21

岛津傅立叶红外分光光度计
IRAffinity-1 IRprestige-21基本操作

目录
第一章 傅立叶红外光谱仪基本原理………………………………1 第二章 傅立叶红外光谱仪基本操作………………………………2
2.1 开启傅里叶变换红外光谱仪……………………………………….2 2.2 启动IRsolution 软件……………………………………………….2 2.3 图谱扫描………………………………………………………….....2 2.4 显示图谱…………………………………………………………….4 2.5 图谱处理…………………………………………………………….7 2.6 图谱检索…………………………………………………………….9 2.7 图谱保存…………………………………………………………...10 2.8 图谱打印…………………………………………………………...10 2.9 退出系统…………………………………………………………...12
第三章 日常维护及注意事项…………………………………….13

傅立叶红外光谱仪基本操作
第一章 傅立叶红外光谱仪基本原理
1.1 基本工作原理：
用一定频率的红外线聚焦照射被分析的试样，如果分子中某个基团的振动频率与 照射红外线相同就会产生共振，这个基团就吸收一定频率的红外线，把分子吸收的红外 线的情况用仪器记录下来，便能得到全面反映试样成份特征的光谱，从而推测化合物的 类型和结构。IR 光谱主要是定性技术，但是随着比例记录电子装置的出现，也能迅速 而准确地进行定量分析。
1.2 特点和主要用途：
一般的红外光谱是指 2.5-50 微米（对应波数 4000--200 厘米-1）之间的中红外光 谱，这是研究研究有机化合物最常用的光谱区域。红外光谱法的特点是：快速、样品量 少（几微克-几毫克），特征性强（各种物质有其特定的红外光谱图）、能分析各种状 态（气、液、固）的试样以及不破坏样品。红外光谱仪是化学、物理、地质、生物、医 学、纺织、环保及材料科学等的重要研究工具和测试手段，而远红光谱更是研究金属配 位化合物的重要手段。
1.3 傅立叶变换红外光谱仪的构成：
图中光源发出的光被 分束器分为两束，一束经 反射到达动镜，另一束经 透射到达定镜。两束光分 别经定镜和动镜反射再 回到分束器。动镜以一恒 定速度 vm 作直线运动,因 而经分束器分束后的两 束光形成光程差δ，产生 干涉。干涉光在分束器会 合后通过样品池，然后被 检测。
图 1 傅立叶红外光谱仪的原理图
岛津企业管理（中国）有限公司
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紫外可见分光光度计 文档

紫外可见分光光度计 一．基本简介 紫外可见分光光度计简介1852年，比尔(Beer)参考了布给尔(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所发表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液层厚度相等时，颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例，从而奠定了分光光度法的理论基础，这就是著名的比尔朗伯定律。1854年，杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人将此理论应用于定量分析化学领域，并且设计了第一台比色计。到1918年，美国国家标准局制成了第一台紫外可见分光光度计。此后，紫外可见分光光度计经不断改进，又出现自动记录、自动打印、数字显示、微机控制等各种类型的仪器，使光度法的灵敏度和准确度也不断提高，其应用范围也不断扩大。 [1]从仪器理论上讲，各种紫外可见分光光度计，都是根据比耳定律设计的；而比耳定律研究的是在平行光、单色光的条件下，物质对光的吸收。但是，紫外可见分光光度计的单色器不可能得到真正的单色光。并且，单色器系统不同，它产生的单色光的纯度（光谱带宽）也不同，并且光通过物质时，也不可能是真正的平行光。因此，严格地说，实际工作中，任何紫外可见分光光度计，都不可能真正满足比耳定律。所以，紫外可见分光光度计都是针对近似平行光、近似单色光的条件设计的。所以，就看谁设计、制造仪器最能满足或接近比耳定律（或产生的比耳定律的偏离最小），谁的仪器到了使用者手里，由于非平行光或非单色光产生的分析误差最小，谁的仪器就最好（当然还有杂散光、噪声、稳定性等要求）。这就是从仪器学理论，去看紫外可见分光光度计的设计、制造误差的最根本、最本质的问题；也是使用者从仪器学理论去看紫外可见分光光度计的分析误差的最根本、最本质的问题。 二．工作原理 吸收光谱 物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。

岛津UV-1800紫外可见分光光度计操作规程(仪器版)

xxUV-1800紫外可见- 分光光度计操作规程（仪器版） 一、操作步骤 1、开启主机电源，分光光度计进行自检和初始化。 2、初始化结束后，出现用户、密码输入”界面，直接按下【ENTER键完成后进入到“模式菜单”。 3、进入“模式菜单” 3. 1、单波长下，测定样品的吸光度，则选择【1.光度】； 3. 2、制作标准曲线和样品的测定，则选择【3.定量】。 4、单波长下，样品吸光度的测定 4. 1、在“模式菜单”下，选择【1.光度】，继续选择【1.光度】。 4. 2、按下【GOTO WL键，输入测定波长。 注： 当需要空白校正时，在样品之前放置空白样品，按下【AUTO ZERO键），测定值将被设置为0Abs。 4. 3、然后按下【尸3】或【START/STOP键，进入测定界面。 4、放入样品，再次按下【START/STO】P 键，即可完成一次样品吸光度的测 4. 1/ 6

5、标准曲线的制作 5. 1、在“模式菜单”下，按【3.定量】键选择进入“测量参数配置屏幕”，在对话框中设置不同测量参数选项，输入选项编号选择需要设置的参数。 5. 2、按【1?测定】键选择“1测量方法，然后按屏幕提示输入测量波长，按 【ENTER】 键返回参数配置屏幕。 5. 3、按【2.方法】键选择定量法。 （1）当K、B值已知时，选“K系数法”手动输入K、B值制作曲线。 （2）当K、B 值未知时，选“多点校正曲线法”，根据指示和实际输入标准样品数目校准曲线方程的次数和零截距条件，然后按【ENTER键返回参数配 置屏幕。 5. 4、按【3?测定次数】键设置重复测量次数，然后按【ENTER键返回参数配置屏幕。 5、 5、按【4?单位】键选择样品浓度单位，然后按【ENTER键返回参数配置屏幕。 5. 6、按【START/STO P键时出现标准样品浓度（浓度表）输入屏幕，按顺序输入标样浓度完成后，出现“键入”或“测定”吸光度值的选项。若已知每个标样对应的吸光度值，选择“键入”；若未知每个标样的吸光度值，选择“测定”，参数设定后应进行一次空白调零，消除皿差。 2/ 6

紫外-可见光分光光度计

紫外-可见光分光光度法 一、技术原理 紫外-可见分光光度法是在190?800mn波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmix。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。 二、浓度测定基本原理 朗伯一比尔（Lambert - Beer）定律是分光光度法的基本原理。当一束单色光通过一均匀的溶液时，一部分被吸收，一部分透过，设入射光的强度为I0，透射光强度为I，则I/I0为透光度，用T表示。 当溶液的液层厚度不变时，溶液的浓度越大，对光的吸收程度越大，则透光度越小。 即：-lgT=a1*c（式中a1为常数，c为浓度） 当溶液浓度不变时，溶液的液层厚度越大，对光的吸收程度越大，则透光度越小。

即：- lgT=a2*b（b为液层厚度） 将以上两式合并可用下式表示：lgT=a*b*c 研究表明：溶液对光的吸收程度即吸光度（A）又称消光度（E）或光密度（OD）与透光度（T）呈负对数关系，即：A=-lgT 故A=a3*b*c（a3为吸光系数）。 上式为朗伯比尔定律，其意义为：当一束单色光通过一均匀溶液时，溶液对单色光的吸收程度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。 三、仪器的矫正和检定 1.波长矫正 常使用高氣酸钦溶液校正双光束仪器，以10%高氯酸溶液为溶剂，配制含氧化钬（Ho2O3 ) 4 % 的溶液，该溶液的吸收峰波长为241. 13nm，278. 10nm，287. 18nm，333. 44nm，345. 47nm，361. 31nm，416. 28nm，451. 30nm，485. 29nm，536. 64nm和640. 52nm。仪器波长的允许误差为：紫外光区±1nm，500nm附近±2nm。 2.吸光度的准确度 可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000mL，在规定的波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，应符合表中的规定。

(完整版)紫外分光光度计的使用方法

UV2600型紫外分光光度计操作规程 一、开机 1.打开仪器电源。 2.打开电脑，点击UV Analyst 进入光谱分析软件。 3.软件将自动搜索仪器端口，点击“联机”，软件与仪器联机成功。 二、选择测试模式 根据实验需求选择测试模式。仪器提供的测试模式有“波长扫描”“时间扫描”“定点测量”“定量测量”“核酸测量”和“蛋白质测量” 【波长扫描】主要用以检测样品对一定范围波长光的吸收情况，以便对样品进行定性测量。 1.点击左侧主功能栏中的“波长扫描”即可进入波长扫描界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以扣除空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 注意：在“基线测量”中所选择的基线必须与参数设置中基线一致！ 【时间扫描】是检测样品在特定波长范围内吸光度（或透过率）随时间的推移而发生变化情况。主要用以检测样品的稳定性或进行化学动力学研究。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以后扣除样品空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 【定点测量】是检测样品在特定波长中的吸光度（或透过率）。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“自动校零”，以扣除该波长中空白溶液的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“测量”，以完成样品的吸光度（或透过率）的测量。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存测量结果。 【定量测量】可通过检测标准样品或输入特定的系数建立标准曲线后测量样品的浓度值。

岛津UV-2450(2600)型紫外分光光度计操作规程

一、目的： 1、制订详尽的工作程序，规范操作人员日常仪器设备操作，保证仪器设备稳定可靠。 二、范围： 2、适用于岛津UV-2450/2600型紫外分光光度计的操作、清洁和维护、维修。 三、职责： 1、操作人：严格执行本规程，认真、及时、准确地填写相关记录； 2、化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程。 四、内容： 1、操作： 1.1 依次分别开启仪器电源，电脑，双击电脑桌面【UVProbe】快捷图标，输入账号密码即可启动UV-2450/2600的控制程序。点击连接，仪器进行自检，约4分钟 (期间勿开样品室) 后完成自检，通过后点击确认进入操作界面。 1.2 光谱测定 1.2.1选择光谱测定，点击菜单编辑或标准工具条“M”(数据采集方法)，输入测定：波长范围、扫描速度、采样间隔、扫描方式(选单个或自动)；仪器参数：测定方式选吸收度，狭缝(一般为2nm)后（可根据需要设定）, 选择好文件保存路径后点击确认。 1.2.2 在样品室放入空白对照，点击“基线校正”，确认后开始基线校正。 1.2.3 基线校正完毕，取出样品侧的空白，换成被测样品。点击开始键扫描，扫描完成后，点击“处理”选择对应的处理指令。即可在检测表上看到相应结果。 1.2.4 打印：点击报告模块，打出相应的光谱模板（可自行编辑报告模板）。点打印预览，确认无误后打印。 1.3 光度测定 1.3.1指定波长处测定样品的吸光度的操作 1.3.1.1选择光度测定，点击菜单编辑或标准工具条“M”(光度测定方法)，在指定的波长数据采集输入框内，输入波长(W) (NM)并点击加入；标准类型上选原始参数。仪器参数：测定方式选吸收值。其他的参数设置一般为默认设置（可根据需要设定）。选择好文件保存路径后点击“确认”。 1.3.1.2 确认后弹出方法信息界面，确认无误，点击“关闭”。数据采集方法如储存，以后可调出使用。选择文件另存为，输入文件名，在另存为类型列表框中，点击方法文件(*.PMD)，点击储存。 1.3.1.3 在样品室放入空白对照，点击“自动调零”。 1.3.1.4 在样品表中输入样品ID(标识符) 1.3.1.5 取出样品侧的空白，放入待测样品溶液，点击“读取”。逐个把样品依次放入样品室，同上采集读数。

722可见光分光光度计操作规程

722可见光分光光度计操作规程 环境要求 1、仪器应安装在无震动，无强烈电磁场干扰、无强光照射的室内工作台上，避免灰尘及腐蚀性气体。 2、室内环境温度为5-35℃，相对湿度小于85%。 3、电源电压220V±22V，频率50HZ±1HZ。 操作要点： 1、插上电源，打开开关，打开试样室盖，按“A/T/C/F”键，选择“T%”状态，选择测量所需波长，预热20分钟。 2、调节波长旋钮至测定波长，并稍等几分钟。 3、开始测量前要先调节仪器的零点，方法为： 保持在“T%”状态，使光路通畅，当关上试样室盖时，屏幕应显示“100.0”，如否，按“T100%”键；打开试样室盖，屏幕应显示“000.0”，如否，按“0%”键，重复2-3次，仪器本身的零点即可调好，可以开始测量。 以标准对比法为例： 3、用空白溶液润洗一个比色皿，装样到比色皿的3/4处（必须确保光路通过空 白溶液中心），用吸水纸吸干比色皿外部所沾的液体，将比色皿的光面对准光路 放入比色皿架，用同样的方法将所测样品装到其余的比色皿中并放入比色皿架中。4、将装有待测溶液的比色皿拉入光路，关上试样室盖，按“A/T/C/F”键，调 到“Abs”，按“Abs0”键，屏幕显示“0.000”，将其余测试样品一一拉入光路，记下测量数值即可（不可用力拉动拉杆）。 5、测量完毕后，将比色皿清洗干净（最好用乙醇清洗），擦干，放回盒子，关 上开关，拔下电源，罩上仪器罩，并打扫卫生，才可离开。 6、本操作要点只针对测量吸光度而言。 注意事项： 1、仪器使用前需开机预热20分钟。 2、开关试样室盖时动作要轻缓。 3、不要在仪器上方倾倒测试样品，以免样品污染仪器表面，损坏仪器，一定 要将比色皿外部所沾样品擦干净，才能放进比色皿架进行测定。 4、每套仪器所配套的变色皿，不能与其它仪器上的比色皿单个调换。 5、如大幅度改变测试波长，在调整“0”和“100%”后稍等片刻，稳定后重新调整即可工作。 6、仪器表面宜用温水擦拭，请勿使用酒精、丙酮等溶剂清洁，不使用时请加防尘罩。比色皿每次使用后应清洗干净，并用镜头纸轻拭干净，存于比色皿盒中备用。 7、有任何疑问请报告指导老师。

分光光度计的性能检查

分光光度计的性能检查 （1）波长校正：使用光电比色计或分光光度计，在更换光源灯、重新安装、搬运或检修后，以及仪器工作不正常时，都要进行波长校正。就是正常工作的仪器，每隔一个月也要检查一次波长，必要时进行校正，这样才能保证波长读数与通过样品的波长符合，保证仪器的最大灵敏度。方法常用谱钕滤光片校正法，适用于721型仪可见光区的波长校正，常以585nm 或529nm处的吸收峰或T%为标准。鉴于721型仪器的出射光波长较宽，不易将573nm和585nm 的两峰或两谷分开，校正时易产生误差，故推荐用529nm处的峰或谷为标准来进行波长校正。校正时，将仪器按要求预热。要求电源电压稳定。波长度盘置580nm处，T%调至最大，在比色杯处放一白纸条，观察是否有光强均匀、边缘无光晕或杂光的光斑，如不符合要求，可调节灯泡位置使其符合要求，是为波长校正的粗调。再把灵敏度扭置于“1”（最低档），波长度盘对准529nm，电表机械零点为零，在光路空白时调T%为100%T，并反复查零点和100%T 稳定情况。将谱钕滤光片插入光路，慢慢旋转波长度盘，找到透光率最低的一点（向左右微旋波长度盘时，该点透光率值均增加），这一点即为波长529nm。检查波长度盘的指示值是不是529nm，如指示值为534nm，此时波长工误差为5nm，超出规定（±1nm）必须进行调整。 调整方法：将波长度盘对准529nm，从光路取出谱钕滤光片，光路空白时调电表指针到100%T，再将谱钕滤光片插入光路。打开仪器左侧小盖板，找到波长校正螺丝（3个中左侧柄长的一个）；反时针方向微微调节（负误差时顺时针方向），使电表指针的指示T%为最低。反复检查波长误差情况，直到符合仪器技术指标为止。盖好左侧小盖板，校正结束。 有些高档仪器如岛津UV-260型双光束分光光度计，可使用氢灯或置谱钕滤光片于测定比色槽内，编入滤工扫描程序后，仪器即可自动地在一定波长范围内进行波长校正。高档分光光度仪的光学系统密封在一个单元组件内，若发生故障，波长不准，常须请制造商派专人修理。其它尚有谱线校正法、干涉滤光片校正法和有色溶液校正法等，可参考有关资料。 （2）线性检查：线性检查包括仪器线性及测定方法线性两个方面的检查。线性误差表现为溶液的浓度与吸光度不成线性关系，出现正偏离或负偏离的现象。这种偏离，按比耳定

紫外可见分光光度计及其应用

紫外可见分光光度计及其应用 科技论文写作期末作业 西北民族大学生命科学与工程学院 11级生物技术(1)班 符朝方 学号:P112114841 紫外可见分光光度计及其应用 李诗哲 西北民族大学生命科学与工程学院兰州 730100 摘要:紫外可见分光光度计对于分析人员来说是最有用的分析工具之一，几乎每一个分析实验室都离不开紫外可见分光光度计。下面介绍了紫外分光光度计的原理、结构及其特点，并介绍了它在生物领域的应用及其他方面的应用1引言:紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器，无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域，还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理行业，紫外可见分光光度计都获得了日益广泛的应用。 2原理:紫外可见分光光度法 【1】紫外可见分光光度法是根据物质分子对波长为200~760nm的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长的光线能量小，波长短的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了人射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有不同的分子、原子和不同的分

子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的 某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。 【2】2.1有机化合物的紫外可见吸收光谱 有机化合物的电子跃迁 与紫外可见吸收光谱有关的电子有三种[[4]，即形成单键的σ电子、形成双键的π电子以及未参与成键的n电子。 跃迁类型有:σ?σ*、n?σ*，π?π*、n?π四种。 饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ?σ*，n?σ*跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区，吸收峰低于200nm，实际应用价值不大。不饱合机化合物的电子跃迁类型为n?π*，π?π*跃迁，吸收峰一般大于200nm. 2.2有机化合物的吸收带 吸收带(absorption band):在紫外光谱中，吸收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分子轨道的种类，可将吸收带分为四种类型。 (1)R吸收带 (2)K吸收带 (3)B吸收带 (4)E吸收带 2.3无机化合物的紫外可见吸收光谱 无机化合物的UV-Vis光谱吸收光谱主要有:电荷 迁移跃迁及配位场跃迁。 (1)电荷迁移光谱

岛津UV-2600型紫外可见光光度计标准操作规程

1 目的 建立岛津UV-2600型紫外可见光光度计标准操作规程。 2 范围 适用于岛津UV-2600型紫外可见光光度计的操作。 3 责任 分析人员负责本规程的实施。 4 内容 4.1准备工作 4.1.1打开计算机电源。 4.1.2打开紫外可见光光度计主机电源。 4.1.3双击桌面上的【UV Probe】图标，即可启动UV-2600的控制程序。 4.1.4单击【连接】，光度计开始自检，自检过程中切勿打开样品室。自检完毕后单击【确认】进入检测界面。 4.2光度测量 4.2.1方法建立 （1）选择【工具栏】中的【光度测量】，点击菜单栏中的【M】键，弹出光度测量参数设置窗口。 （2）在【波长】窗口中【波长类型】选择【点】，在【波长（nm）】设置测量波长值，单击【加入】，使所设波长值添加于【条目】项中。 （3）【测量参数（样品】窗口中【数据获得】选择【仪器】，在【样品】中输入测定次数。 （4）在【校正曲线】窗口中【类型】选择【原始数据】。 （5）在【仪器参数】窗口中，【测量模式】选择【吸收值】，在【狭缝宽】选择狭缝宽度。 （6）单击【关闭】，进入光度测定界面。 4.2.2样品测试 （1）空白校正样品池和参比池均盛以空白溶液，分别置于光路中，单击【自动调零】按钮，进行空白校正。 （2）在测试表格的【样品ID】项下输入供试品的名称，单击测试栏的任一项，【读取Unk】按钮被激活。 （3）将样品池盛以对照品或供试品溶液，单击【读取Unk】，分别对对照品或供试品进行测量。 4.2.3单击工具栏【打印】，选择打印模式，打印测量结果。 4.3定量测定

4.3.1方法建立 （1）选择【工具栏】中的【光度测量】项，点击菜单栏中的【M】键，弹出光度测量参数设置窗口。在【波长】窗口中【波长类型】选择【点】，在【波长（nm）】设置测量波长值，单击【加入】，使所设波长值添加于【条目】项中。 （2）【测定参数（样品）】窗口中【数据获得】选择【仪器】，在【样品】中输入测定次数。 （3）【校正曲线】窗口中【类型】选择【多点】；在【定量法】选择【固定波长】；在【WL 1.】输入测量波长值；在【参数】选择【吸收值】；在【曲线次数】输入次数。 （4）【仪器参数】窗口中，【测定方式】选择【吸收值】在【狭缝宽】选择狭缝宽度。 （5）点击【关闭】，进入光度测定界面。 4.3.2样品测试 （1）空白校正样品池和参比池均盛以空白溶液，分别置于光路中，单击【自动调零】按钮，进行空白校正。 （2）标准品测量单击【标准品表】表格任意处，激活标准品表，在【样品ID】项下输入标准品名称，在【浓度】输入标准品浓度，【读取Std】按钮被激活。将样品池分别盛以各浓度标准品溶液，单击【读取Std】，测量标准品。 （3）供试品测量单击【样品表】表格任意处，激活样品表，在【样品ID】项下输入供试品名称，单击测试栏的任一项，【读取Unk】按钮被激活。将样品池盛以供试品溶液，单击【读取Unk】，对供试品进行测量。 4.3.3单击工具栏【打印】，选择打印模式，打印测量结果。 4.4光谱测量 4.4.1方法建立 （1）选择【工具栏】中的【光谱测量】项，点击菜单栏中的【M】键，弹出光谱测量参数设置窗口。 （2）单击【测定】，在【波长范围（nm）】中设置波长测定范围；在【扫描速度】中选择扫描速度；在【择扫描方式】中选择扫描方式；在【文件名称】中输入文件名称。 （3）在【仪器参数】窗口中，【测定方式】选择【吸收值】，在【狭缝宽】选择狭缝宽度。 （4）单击【关闭】，进入光谱测定界面。 4.4.2样品测试 （1）空白校正样品池和参比池盛以空白溶液，分别置于光路中，单击【基线】，

72型分光光度计工作原理

72型分光光度计工作原理 72型分光光度计是可见光分光光度计，波长范围为420nm～700nm，它由三大部分组成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。 72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律，它是根据相对测量原理工作的，即先选定某一溶剂作为标准溶液，设定其透光率为100%，被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的，即让单色光分别通过被测试样和标准溶液，二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率。如图所示，白色光源经入射狭缝、反射镜和透光镜后，变成平行光进入棱镜，色散后的单色光经镀铝的反射镜反射后，再经过透镜并聚光于出射狭缝上，狭缝宽度为0.32nm。反射镜和棱镜组装在一可旋转的转盘上并由波长调节器的凸轮所带动，转动波长调节器便可以在出光狭缝后面选择到任一波长的单色光。单色光透过样品吸收池后由一光量调节器调节为适度的光通量，最后被光电电池吸收，转换成电流后由微电计指示，从刻度标尺上直接读出透光率的值。 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。 分光光度计的简单原理 分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被

吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，尔后测试空白液和样品液。然而，实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器，表现出的吸光值漂移越大。 事实上，分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定的准确度和精确度。如EppendorfBiophotometer的准确度≤1.0%（1A）。这样多次测试的结果在均值 1.0%左右之间变动，都是正常的。另外，还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值，离子浓度等：在测试时，离子浓度太高，也会导致读数漂移，因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液，如TE，可大大稳定读数。样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素：由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒，尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了最大程度减少颗