药物皮肤过敏试验相关规定
关于药物皮肤过敏试验的相关规定
院属各临床科室：
为了防止药物过敏反应的发生，特别是严重过敏反应的发生，以及确保患者的用药安全，避免医疗纠纷，特制定关于药物皮肤过敏试验的相关规定如下：
一、医护人员在给患者使用药品前，应详细询问以往用药史、过敏史，个
人及家属有无变态反应性疾病，并明示记载于病历（包括电子病历）或处方、医嘱中。
二、依据《中国国家处方集》附录4（常用药物的皮肤敏感试验）规定须
做皮内试验或过敏试验的药品；在药品说明书中，明确规定或建议使用前做皮肤过敏试验者；过敏体质者。在临床使用时均应按规定的方法做皮肤过敏试验(皮试）。使用的皮试液必须使用原药按相关规定配制皮试液，现配现用，浓度与剂量必须准确，皮试结果阳性者应在病历、体温单，医嘱单、床头卡、病人一览表上醒目注明。
三、以下情况禁做药物皮试：①曾发生该药物皮试强阳性的患者；②曾因
用该药物引起过敏性休克、急性喉头水肿、急性肺水肿、剥脱性皮炎的患者。
四、口服抗菌素类药物或其他易致敏的药物时，如无特殊要求用药前无需
进行皮试，但需要严格掌握禁忌症，及时观察和反馈病人用药后的不良反应情况。
五、过敏试验结果有可能存在假阳性或者假阴性的情况。过敏试验阴性的
病人用药并非绝对安全，试验前做好急救准备，用药过程密切观察，一旦发现皮疹、瘙痒、胸闷、休克等过敏症状，应及时停药、及时处理，同时填写“药物不良反应／事件报告表”并上报。
医务处护理部药学部
2014年3月12日
头孢类药品皮肤过敏试验方法
头孢类药品皮肤过敏试验方法 关于头孢菌素类药物应用前是否需要做皮肤过敏试验，长期以来始终存在着争议。由于头孢菌素类药物过敏反应发生率明显低于青霉素类药物，所以在临床上多不做皮试，对一般青霉素过敏者也可慎用。多数头孢菌素类药品在《中国药典》也无明确规定必需做过敏试验，但在有过敏史或是过敏体质者等，可根据情况做皮肤试验，但皮试液浓度现无统一规定。参考有关资料提供以下皮试液的建议配制方法，仅供各医疗单位参考。 1、注射用头孢西丁钠皮肤过敏试验方法 规格皮试液配制步骤 1.0g （1）取本品1.0g一支，加10ml生理盐水制成100mg/ml的溶液A。 （2）用注射器取溶液A0.1ml加0.9ml生理盐水混匀制成10mg/ml的溶液B，（3）然后推出0.9ml溶液B，再加0.9ml生理盐水混匀制成1mg/ml的溶液C。（4）然后推出0.5ml溶液C，再加0.5ml生理盐水混匀制成0.5mg/ml的溶液D。 2.0g （1）取本品2.0g一支，加16ml生理盐水制成125mg/ml的溶液A。 （2）用注射器取溶液A0.1ml加0.9ml生理盐水混匀制成12.5mg/ml的溶液B，（3）然后推出0.9ml溶液B，再加0.9ml生理盐水混匀制成1.25mg/ml的溶液C。（4）然后推出0.6ml溶液C，再加0.6ml生理盐水混匀制成0.5mg/ml的溶液D。 2、注射用头孢硫脒皮肤过敏试验方法 规格皮试液配制步骤 0.5g （1）取本品0.5g一支，加5ml生理盐水制成100mg/ml的溶液A。 （2）用注射器取溶液A0.1ml加0.9ml生理盐水混匀制成10mg/ml的溶液B，（3）然后推出0.9ml溶液B，再加0.9ml生理盐水混匀制成1mg/ml的溶液C。（4）然后推出0.5ml溶液C，再加0.5ml生理盐水混匀制成0.5mg/ml的溶液D。 1.0g （1）取本品1.0g一支，加8ml生理盐水制成125mg/ml的溶液A。 （2）用注射器取溶液A0.1ml加0.9ml生理盐水混匀制成12.5mg/ml的溶液B，（3）然后推出0.9ml溶液B，再加0.9ml生理盐水混匀制成1.25mg/ml的溶液C。（4）然后推出0.6ml溶液C，再加0.6ml生理盐水混匀制成0.5mg/ml的溶液D。
抗菌药物敏感性试验的技术要求
抗菌药物敏感性试验的技术要求 1 范围 本标准规定了临床抗菌药物敏感性试验的技术要求，包括常规药敏试验的药物选择和报告、药敏试验方法、各种属细菌药敏试验、常见菌特殊耐药表型检测、药敏试验的质量控制、商品化药敏试验检测系统的性能验证。 本标准适用于开展临床微生物学检验的各级临床实验室。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 抗微生物药物敏感性试验Antimicrobial susceptibility testing 检测微生物（本文件特指细菌）对抗微生物药物（本文件特指抗菌药物）的体外敏感性，以指导临床合理选用药物的微生物学试验，简称药敏试验。 2.2 最低抑菌浓度Minimal inhibitory concentration；MIC 在琼脂或肉汤稀释法药物敏感性检测试验中能抑制肉眼可见的微生物生长的最低抗菌药物浓度。2.3 折点Breakpoint 能预测临床治疗效果，用以判断敏感、中介、剂量依赖型敏感、耐药、非敏感的最低抑菌浓度（MIC）或者抑菌圈直径（mm）的数值。 2.3.1 敏感Susceptible；S 当抗菌药物对分离株的MIC值或抑菌圈直径处于敏感范围时，使用推荐剂量进行治疗，该药在感染部位通常达到的浓度可抑制被测菌的生长，临床治疗可能有效。 2.3.2 中介Intermediate；I 当菌株的MIC值或抑菌圈直径处于中介时，该数值接近药物在血液和组织中达到的浓度，从而治疗反应率低于敏感菌群。该分类意味着采用高于常规剂量治疗时或在药物生理浓集的部位，临床治疗可能
有效。该分类同样可作为“缓冲域”，以防止由微小、不可控的技术因素导致的重大偏差，尤其是毒性范围较窄的药物。 2.3.3 剂量依赖型敏感Susceptible-dose dependent；SDD 细菌菌株对抗菌药物的敏感性依赖于抗菌药物的剂量。当某种药物对菌株的MIC或抑菌圈直径在SDD 范围时，临床可通过提高剂量和（或）增加给药频率等修正给药方案以达到临床疗效。 2.3.4 耐药Resistant；R 当抗菌药物对分离株的MIC值或抑菌圈直径处于该分类范围时，使用常规治疗方案，该药在感染部位所达到的药物浓度不能抑制细菌的生长，和（或）被测菌株获得特殊耐药机制，且治疗性研究显示该药临床疗效不确切。 2.3.5 非敏感Nonsusceptible；NS 对于那些因未现或罕现耐药，而仅具有敏感折点的抗菌药物，当该药对某分离株的MIC值高于或抑菌圈直径低于敏感折点时，此分类为非敏感。 2.4 流行病学界值Epidemiological cutoff value；ECV 将微生物群体区分为有或无获得性耐药的MIC值或抑菌圈直径，是群体敏感性的上限。根据ECV，可将菌株分为野生型和非野生型。 2.4.1 野生型 Wild-type；WT 根据ECV值，将抗菌药物（包括抗真菌药物）评估中未获得耐药机制或无敏感性下降的菌株定义为野生型。 2.4.2 非野生型Non-wild-type；NWT 根据ECV值，将抗菌药物（包括抗真菌药物）评估中获得了耐药机制或存在敏感性下降的菌株，定义为非野生型。 2.5 效价Potency 抗菌药物中具有抗菌活性的成分，通过同类标准物质测定得出。单位mg/g、IU/g或用百分比表示。
头孢类抗菌药物皮肤过敏试验高端论坛专家共识
头孢类抗菌药物皮肤过敏试验高端论坛专家共识 北京药学会抗生素专业委员会 “头孢类抗菌药物皮肤过敏试验高端论坛”会议于2008年6月2日在北京举行。中国药品生物制品检定所常务副所长金少鸿教授、抗生素室主任胡昌勤教授、解放军302医院感染科姜素椿教授、北京协和医院药剂科李大魁教授、中国医学科学院医药生物技术研究所副所长邵荣光教授、蔡年生教授、北京药学会冯国安理事长、国家食品药品监督管理局药品评审中心张哲峰教授、北京海军总医院孙忠实教授、空军总医院李忠东教授、首都医科大学附属北京天坛医院赵志刚教授等参加了此次论坛。金少鸿、胡昌勤、李忠东、赵志刚分别就头孢类抗菌药物的质量与过敏反应的关系、头孢类抗菌药物过敏反应研究进展、国外头孢类抗菌药物皮肤过敏试验情况介绍、全国部分地区医疗机构头孢类抗菌药物皮肤过敏试验调查报告做了学术报告。与会专家、学者针对学术报告和实际工作中存在的问题进行了充分的讨论，并在以下几方面达成了共识。 1 使用青霉素类抗菌药物必须进行皮肤过敏试验。原因是过敏反应的抗原一主要决定簇一青霉噻唑决定簇与次要决定簇一青霉烯酸决定簇已非常明确。皮试符合率可达70％；皮试液的浓度与皮试方法均已规范。 2 头孢类抗菌药物使用前是否需要进行皮肤过敏试验尚存在争议。原因在于引发头孢类抗菌药物过敏反应的半抗原一主要决定簇与次要决定簇尚不明确，可能有Cephalosporoyl、Cephalosporanyl和
产品中的杂质等；皮试符合率<30％；皮试液浓度与皮试方法未统一(国内皮试液和国外皮试液的种类、浓度和皮试液用量相差很大)。目前美国和大部分欧洲国家不进行皮肤过敏试验，而日本和北欧的一些国家仍规定进行皮肤过敏试验。头孢类抗菌药物是否需要做皮肤过敏试验，在我国药品说明书和参考书中现有多种描述，但中华人民共和国药典委员会编写的《临床用药须知》(2005年版)和卫生部2004年发布的《抗菌药物临床应用指导原则》均未要求头孢类抗菌药物做皮肤过敏试验。本次论坛达成的共识是：如果药品说明书明文规定使用前需做皮肤过敏试验则必须做；如果药品说明书上未明确规定，则需根据患者是否为过敏体质、既往药物过敏史、患者的患病严重程度等综合考虑是否进行皮肤过敏试验。 3 如果进行头孢类抗菌药物的皮肤过敏试验；必须使用原药配制皮试液，不能用青霉素皮试液代替，也不能用某一种头孢菌素配制成皮试液做所有头孢类抗菌药物的皮肤过敏试验。皮试液的浓度国、内外的差距较大，国内目前推荐的浓度为300～500 g〃mL ，注射量为0．1mL。 4 如果患者对青霉素类严重过敏，应禁用头孢类抗菌药物；如果患者对青霉素类一般过敏，可根据病情慎重地选用头孢类抗菌药物，现有的研究表明，青霉素类与一代头孢的交叉过敏反应发生率明显高于二代、三代和四代，因此，宜选用二、三、四代头孢，特别三、四代头孢更为安全。 5 头孢类抗菌药物的产品质量与临床上发生的过敏反应有相关
细菌药物敏感试验实验报告
细菌药物敏感试验实验报告 药物敏感性试验的基本原则 1药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药： 天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药。天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献。实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。 2药敏试验测试的前提条件： 实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。 错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。 3测试结果应准确： 实验室应遵照CLSI文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理
体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。建议保留菌株，以便复核。 具体的专业要求 1标本类型 临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。在规范临床送检的前提下，实验室进行药敏试验和报告药敏结果时，应首先考虑标本的特殊性。实际工作中需重点考虑的标本如下。 1．脑脊髓液： 正常和疾病状态不能穿透血脑屏障的药物，常规不应报告。报告审核时，对于分离自脑脊髓液的菌，下列药物不能报告：仅有口服剂型的抗菌药物、一、二代头孢菌素(除外静脉用头孢呋辛)、头霉素类、克林霉素、大环内酯类、四环素类和喹诺酮类。
皮肤变态反应试验操规
五、皮肤变态反应试验操规 目的 确定重复接触化妆品及其原料对哺乳动物就是否可引起变态反应及其程度。 范围 本操规用于动物皮肤变态反应试验的基本方法。 本操规适用于化妆品原料及其产品安全性毒理学检测。 1 依据 中华人民共与国卫生部《化妆品卫生规范第二部分第6章:皮肤变态反应试验》 中华人民共与国国家标准《GB/T16886、10-2005医疗器械生物学评价第10部分:刺激 与迟发型超敏反应试验》。 2 设备与耗材 2,4-二硝基氯代苯,肉桂醛,2-巯基苯并噻唑或对氨基苯酸乙酯,弗氏完全佐剂、无 菌水、80%乙醇、丙酮、刮毛器、脱毛膏、EP管外科手套、口罩、手术服、不同规格无 菌注射器、一次性无菌纱布等。 3 受试动物 3、1 来源:西安交通大学实验动物中心 3、2 动物种类:白化豚鼠20只:300～500 g,2~3月龄,雌雄兼半,雌鼠无孕。 3、3 饲养条件:全价营养颗粒饲料喂食,自由采食,自由饮水,室温21±2℃,相对湿度40~70% 。 4试验步骤 4、1材料制备 受试物浓度为不能引起皮肤刺激反应的最高浓度。水溶性受试物可用水或用无刺激 性表面活性剂作为赋形剂,其它受试物可用 80%乙醇 (诱导接触)或丙酮(激发接触)作 赋形剂。 4、2试验方法 4、2、1 试验准备 a、取白化豚鼠20只,随机分成2组,对照组(10只),试验组(10只)、。适应环境一周后, 正式试验前一天,每只豚鼠背前区备皮4cm×6cm。 b、无论在诱导阶段或激发阶段均应对动物进行全面观察包括全身反应与局部反应,并作完整记录。
c、试验方法可靠性的检查:实验开始前选两只备用豚鼠,使用4、2、1的局部诱导阶段方法进行预实验确定实验的可行性。 4、2、1 试验过程 (1)试验前约 24h,将豚鼠背部左侧去毛,去毛范围为 4cm2~6cm2。 (2)局部诱导阶段 对去毛区域采用75%酒精消毒,覆盖5层约8cm2的滴加适量样品浸提液的擦镜纸,使其贴敷在肩胛骨内侧皮肤上,再依次覆盖3*3cm大小的塑料薄膜、纱布,再用医用无刺激胶带固定使其不脱落封闭固定 6h。。观察记录敷贴后动物异常情况,第 7d 与第 14d 以同样方法重复一次。(对照组按照同样方法进行) (3 )激发阶段 末次诱导后 14d~28d, 将约 0、2mL 的受试物涂于豚鼠背部右侧 2cm×2cm去毛区(接触前 24h 脱毛) ,然后用二层纱布与一层玻璃纸覆盖,再以无刺激胶布固定 6h。(对照组按照同样方法进行) (4)动物观察 激发接触后 24h与 48h 观察皮肤反应,按照表1给出的分级标准对每一激发部位与每一观察时间皮肤红斑与水肿反应进行描述与分级,将观察结果填写至表2、 表1变态反应实验皮肤反应评级 表2试验结果
皮肤过敏试验专家共识
头孢类抗菌药物皮肤过敏试验专家共识 (广东省药学会2008年10月30日印发) 一、青霉素类抗菌药物使用必须进行皮肤过敏试验，原因是：过敏反应的抗原—主要决定簇-青霉噻唑决定簇与次要决定簇-青霉烯酸决定簇非常明确；皮试符合率可达70%；皮试液的浓度与皮试方法均已规范。 二、头孢类抗菌药物使用前是否需要进行皮肤过敏试验世界上尚存在争议，原因在于：引发头孢类抗菌药物过敏反应的半抗原—主要决定簇与次要决定簇尚不明确,可能有Cephalosporoyl、Cephalosporanyl和产品中的杂质等;皮试符合率<30%；皮试液浓度与皮试方法未统一（国内皮试液和国外皮试液的种类、浓度和皮试液用量相差很大）。目前美国和大部分欧洲国家不进行皮肤过敏试验，而日本和北欧的一些国家仍规定进行皮肤过敏试验。 三、头孢类抗菌药物是否需要做皮肤过敏试验，在我国药品说明书和参考书中现有多种描述，但中华人民共和国药典委员会编写的《临床用药须知》（2005年版）和卫生部2004年发布的《抗菌药物临床应用指导原则》均未要求头孢类抗菌药物做皮肤过敏试验。目前达成的共识是：如药品说明书明文规定使用前需做皮肤过敏试验的，则必须做。如药品说明书上未明确规定，则需临床根据患者是否为过敏体质、既往药物过敏史、患者的患病严重程度等综合考虑是否进行皮肤过敏试验。 四、如果进行头孢类抗菌药物的皮肤过敏试验，必须使用原药配制皮试液，不能用青霉素皮试液代替，也不能用某一种头孢菌素配制成皮试液做所有头孢类抗菌药物的皮肤过敏试验。皮试液的浓度国、内外的差距较大，国内目前推荐的浓度为300-500μg/ml，注射量为0.1ml。 五、如果患者对青霉素类严重过敏，应禁用头孢类抗菌药物；如果患者对青霉素类一般过敏，可根据病情慎重地选用头孢类抗菌药物，现有的研究表明，青霉素类与一代头孢的交叉过敏反应发生率明显高于二代、三代和四代，因此，宜选用二、三、四代头孢，特别三、四代头孢更为安全。 六、头孢类抗菌药物的产品质量与临床上发生的过敏反应有相关性。现已经从头孢噻肟等头孢类抗菌药物中收集到了能引发动物过敏反应的基本无抗菌活性的高分子聚合物。说明控制产品中高聚物的含量是质量控制的关键之一。 七、临床使用头孢类抗菌药物，必须仔细询问病人药物过敏史，不管是否进行皮肤过敏试验，或皮肤过敏试验阴性，在首次使用后的0.5-1小时内应严密观察，一旦出现过敏反应征兆，应迅速处理。过敏反应是难以预测的，过敏反应的发生不是医务人员的责任，但发生后处理不当或没有相应的救治措施，医院则要面临一定的法律风险。
-(Word版)浙江省头孢菌素类抗生素皮肤过敏试验指导意见
《浙江省头孢菌素类抗生素皮肤过敏试验指导意见》 一、基本原则 1、本指导意见所指的头孢菌素类抗生素包括第一代、第二代、第三代、第四代头孢菌素类以及头孢菌素类复方制剂，并适用于头孢素类、氧头孢烯类抗生素； 2、《中华人民共和国药典－临床用药须知（2015年版）》及《抗菌药物临床应用指导原则（2015年版）》未规定头孢菌素类抗生素使用前需进行皮试； 3、医护人员在使用头孢菌素类抗生素前，应注重对患者及其家族过敏史的询问，包括过敏药物、食物及过敏时的临床表现等，并详细记载于病历中； 4、因青霉素或头孢菌素皮试有增加患者过敏，甚至出现严重过敏反应的风险，不宜采用青霉素皮试或头孢菌素皮试筛查患者是否为过敏体质； 5、头孢菌素类抗生素皮试对过敏性休克等严重速发型过敏反应的预测作用循证证据不充分，且阳性率远高于过敏性体克等严重速发型过敏反应的实际发生率，因此不推荐在使用头孢菌素类抗生素前进行皮试普遍筛查； 6、医护人员在头孢菌素类抗生素皮试和使用期间，应注意密切观察患者状态，如发现皮、心慌、胸闷、呕吐、呼吸急促等过敏现象，及时予以相应处理，必要时立即停药，同时填写“药品不良反应报告表”； 7、鉴于不同头孢菌素不一定存在交叉过敏，皮试阳性的虑者不应在病史记中统表达为“头孢菌素类抗生素过敏”，应具体记录其品名如为“头孢XX（受试药物化学名）皮试阳性” 二、皮试指征 患者个体差异、药品的理化性质、药品的质量等多种因素均可影响头孢菌素类抗生素过敏反应的发生。从药品的理化性质未看，一般认为头孢菌素C7位侧链对于预测氨基青霉素类和头孢菌素之间的交叉反应性很重要。第二代头孢菌素的C7位侧链与青幕素类链相似，第一代头孢菌素与青霉素类的交叉过敏反应发生率约为4％，第二代头孢素与青素类的交又过敏反应发生率约为1％：第三、四代头孢菌素的C7位侧链与青霉素类侧链不同，交叉过敏反应罕见。头孢菌素类抗生素全身性一般过敏反应的发生率为0.07-2.8％，过敏性体克罕见（0.0001-0.1％），与临床所用几千种药物（尤其是抗菌药）过敏反应发生率相近。且头孢菌素类抗生素皮试目前缺乏明确的循证依据，皮试阳性预测值和灵敏度低，容易出现假阴性结果。因此建议使用头孢菌素类抗菌药物，一般情况下无须进行皮试。 但是与无青霉素过敏史者相比，有过敏史者对头孢菌素类过敏的发生危险增加8 倍；且考虑到具有相似或相同侧链的头孢菌素之间可能存在的交叉过敏反应，建议如下： 1、有以下3 种情况者需要皮试 1）药品说明书明确要求进行皮试的； 2）既往有明确?-内酰胺类抗生素速发型过敏反应史的患者； 3）既往有头孢菌素过敏史的患者，因临床情况确需使用时，应尽量选用化学结构侧链差异大（参考附表）的其他头孢以减少或避免交叉过敏反应的发生，而且使用前应用拟用药品做皮试；皮试和使用前应知情告之并请患者填写相关知情同意书。
药物过敏试验法
1．基本知识 1 2．技术14-1青霉素过敏试验法 1 3．技术14-2链霉素过敏试验法 技术14-3破伤风过敏试验法 1 4．技术14-4细胞色素C 过敏试验法 技术14-5普鲁卡因过敏试验法 技术14-5碘过敏试验法 1 5．本章小结 基本知识 一、常见药物过敏反应的发生机制
二、过敏反应的临床表现 （一）过敏性休克（allergic shock） 对机体威胁最大的反应 发生率约为5-10/万 发生于用药数秒或数分钟内，或半小时后，但大多发生在注射后30min内 主要表现有胸闷、气促、呼吸困难、面色苍白、冷汗、血压下降，甚至意识丧失，大小便失禁等。 （二）血清病型反应 一般于用药后7～14天发生， 临床表现和血清病型相似，有发热、关节肿痛、皮肤瘙痒、荨麻疹、全身淋巴肿大、腹痛等。 （三）器官或组织的过敏反应 1.皮肤反应瘙痒、荨麻疹，严重者发生剥脱性皮炎。 2.呼吸道反应哮喘或促使原有的哮喘发作。 3.消化系统反应恶心、呕吐、腹痛、腹泻等。 三、过敏性休克的急救 （一）立即停药，使病人平卧、保暖。 （二）立即皮下注射0.1%盐酸肾上腺素1ml，小儿剂量酌减，如症状不缓解，可每隔30min皮下或静脉注射该药0.5ml，直至脱离危险期。 （三）吸氧及对症处理立即氧气吸入2～4L/min。当呼吸受抑制时，应立即进行口对口人工呼吸，并肌肉注射尼可刹米或山梗菜碱等呼吸兴奋剂。有条件者可插入气管导管，借助人工呼吸机辅助或控制呼吸。喉头水肿影响呼吸致窒息时，应尽快配合施行气管切开。 （四）立即根据医嘱给予地塞米松5～10mg静脉推注，或氢化可的松200～400mg加5%或10%葡萄糖液500ml内静脉滴注；给予抗组胺类药物，如肌肉注射盐酸异丙嗪25～50mg或苯海拉明40mg。 （五）扩充血容量，静脉滴注10%葡萄糖溶液或平衡溶液，如血压仍不回升，可按医嘱给予升压药物，如多巴胺、间羟胺等静脉滴注。 （六）若发生心脏停搏，立即行心肺（气管内插管）复苏抢救。 （七）密切观察病情包括呼吸、脉博、血压、神志和尿量等变化，并认真做好记录。病人未脱离危险以前，不能搬运就诊。
AYL-S7-352 药物敏感性试验标准操作规程
编写者：沈继录审核者：批准人： 生效日期：2012.1.1 文件发放范围：微生物组 文件年度审核 审核者：审核者：审核者：审核者： 日期：日期：日期：日期： 1. 目的 规范药物敏感性试验标准操作程序，确保药敏结果准确。 2．原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后会不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制，从而产生透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映检测菌对测定药物的敏感程度，并与该药对待检菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。 3．试剂 M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、标准比浊管或比浊仪。 4．质控 4.1 常用细菌药敏质控标准菌株参见CLSI规定。 4.2 质控菌株每日随临床标本一起进行药敏试验，测定质控菌株的抑菌环。质控菌株的抑菌环在允许范围之内，说明结果可信。 4.3 质控的频率由于纸片法药敏试验是很稳定的，在不失控的时候，可以每周作1～2次质控菌株的测定。如果发现有失控的情况，就必须每日作1次，寻找失控的原因并予以纠正。如果连续30日失控<3次的，可以恢复每周1次。 5．操作步骤 5.1 挑取4～5个纯培养菌落，接种于3～5mlM-H肉汤(0．5麦氏单位)中，经35℃培养6～8 h。 5.2 用无菌生理盐水或M-H肉汤校正菌液浊度，使其与标准比浊管的浓度相同。 5.3 用无菌棉拭蘸取校正过的菌液，在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个M-H平板表面，再重复两次，每次旋转平板60°，使整个平板涂布均匀，最后用
头孢类抗菌药物皮肤过敏试验专家共识
头孢类抗菌药物皮肤过敏试验专家共识 (XX省药学会2008年10月30日印发) 一、青霉素类抗菌药物使用必须进行皮肤过敏试验，原因是：过敏反应的抗原—主要决定簇-青霉噻唑决定簇与次要决定簇-青霉烯酸决定簇非常明确；皮试符合率可达70%；皮试液的浓度与皮试方法均已规X。 二、头孢类抗菌药物使用前是否需要进行皮肤过敏试验世界上尚存在争议，原因在于：引发头孢类抗菌药物过敏反应的半抗原—主要决定簇与次要决定簇尚不明确,可能有Cephalosporoyl、Cephalosporanyl和产品中的杂质等;皮试符合率<30%；皮试液浓度与皮试方法未统一（国内皮试液和国外皮试液的种类、浓度和皮试液用量相差很大）。目前美国和大部分欧洲国家不进行皮肤过敏试验，而日本和北欧的一些国家仍规定进行皮肤过敏试验。 三、头孢类抗菌药物是否需要做皮肤过敏试验，在我国药品说明书和参考书中现有多种描述，但中华人民XX国药典委员会编写的《临床用药须知》（2005年版）和卫生部2004年发布的《抗菌药物临床应用指导原则》均未要求头孢类抗菌药物做皮肤过敏试验。目前达成的共识是：如药品说明书明文规定使用前需做皮肤过敏试验的，则必须做。如药品说明书上未明确规定，则需临床根据患者是否为过敏体质、既往药物过敏史、患者的患病严重程度等综合考虑是否进行皮肤过敏试验。 四、如果进行头孢类抗菌药物的皮肤过敏试验，必须使用原药配制皮试液，不能用青霉素皮试液代替，也不能用某一种头孢菌素配制成皮试液做所有头孢类抗菌药物的皮肤过敏试验。皮试液的浓度国、内外的差距较大，国内目前推荐的浓度为300-500μg/ml，注射量为0.1ml。 五、如果患者对青霉素类严重过敏，应禁用头孢类抗菌药物；如果患者对青霉素类一般过敏，可根据病情慎重地选用头孢类抗菌药物，现有的研究
常见细菌药物敏感性试验报告规范
常见细菌药物敏感性试验报告规范中国专家共识 微生物学检验为感染性疾病的诊断、治疗和控制提供了必不可少的证据。因此微生物学检验报告是临床和实验室等多方共同关注的焦点。国内临床微生物学检验发展较为薄弱，报告存在着种种不足。同时，临床与实验室的沟通存在一定不足，密切协作非常必要。基于实际存在的问题，为规范国内临床微生物学检验药物敏感性试验报告，加强临床与实验室合作，发挥检验医师作用，特制订本共识，以期指导相关报告的规范化，减少错误，增加专业信息，提高服务质量，为临床医学诊、治、控提供坚实的科学依据。本共识限于常见细菌的药物敏感性报告。 一、药物敏感性试验的意义和基本原则 (一)意义 药物敏感性试验可以检测细菌对于抗细菌药物的敏感性，为临床用药、新药研究、监测耐药变迁、发现耐药机制等提供客观证据[1]。对于经验治疗，依据一方面来自医生自身的经验，一方面是实验室长期不断提供的数据积累。临床需要考虑不同感染的病原谱和常见病原对不同药物的敏感性；对于靶向治疗，特定分离株的具体药敏试验结果可以用于判断经验治疗选药合理性、经验治疗效果分析、调整治疗选药依据等。 (二)基本原则 1．药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药： 天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药[2]。天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献[3,4]。实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。 2．药敏试验测试的前提条件[5]： 实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。 3．测试结果应准确： 实验室应遵照C L S I文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。建议保留菌株，以便复核。 二、具体的专业要求 (一)标本类型 临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。
抗菌药物皮肤过敏试验的建议
抗菌药物皮肤过敏试验的建议 一、青霉素类: 按卫生部规定，使用青霉素类抗生素前均需做青霉素皮肤试验，阳性反应者禁用。原因是:过敏反应的抗原一主要决定簇（青霉噻唑决定簇）与次要决定簇（青霉烯酸决定簇）非常明确；皮试符合率可达70％；皮试液的浓度与皮试方法均已规范。 二、头孢菌素类 头孢类抗菌药物使用前是否需要进行皮肤过敏试验世界上尚存在争议，原因在于:引发头孢类抗菌药物过敏反应的半抗原一主要决定簇与次要决定簇尚不明确，可能有Cephalosporoy1、Cephalosporanyl和产品中的杂质等；皮试符合率<30％；皮试液浓度与皮试方法未统一，目前美国和大部分欧洲国家不进行皮肤过敏试验，而日本和北欧的一些国家仍规定进行皮肤过敏试验。 头孢类抗菌药物是否需要做皮肤过敏试验，在我国药品说明书和参考书中也有多种描述，但中华人民共和国药典委员会编写的《临床用药须知》（2010年版）和卫生部2015年发布的《抗菌药物临床应用指导原则》均未要求头孢类抗菌药物做皮肤过敏试验。 由于上述原因，目前我院的要求是:如药品说明书中规定或推荐使用前做皮肤过敏试验的，则必须做；如药品说明书上未明确规定，则需临床根据患者是否为过敏体质、既往药物过敏史、患者的患病严重程度等综合考虑是否进行皮肤过敏试验。
三、头孢菌素类药物皮试液的配制方法 如果进行头孢类抗菌药物的皮肤过敏试验，必须使用原药配制皮试液，不能用青霉素皮试液代替，也不能用某一种头孢菌素配制成皮试液做所有头孢类抗菌药物的皮肤过敏试验。目前推荐的皮试液浓度为300-500ug/ml，注射量为0.1ml具体配置方法如下: ①凡头孢菌素规格（每瓶）为0.5、0.75、1g的先依次应用0.9％氯化钠注射液10、15、20ml稀释原药后，抽取0.1ml，再用0.9％氯化钠注射液稀释至10ml；抽取0.1ml做皮试。 ②规格为1.5、2g的依次用0.9％氯化钠注射液15、20ml稀释原药后，抽取0.05ml，再用0.9％氯化钠注射液稀释至10ml；抽取0.05ml做皮试。
微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程
微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程1．目的 规范药物敏感性试验标准操作规程，确保药敏结果准确。 2．原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后会不断的向纸片周围区域扩散，形成递减的浓度梯度，在纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制，从而产生透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映检测菌对测定药物的敏感程度，并与该待检菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。 3．试剂 M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、标准比浊管或比浊仪。 4．质控 4.1 常用细菌药敏质控标准菌株参见CLSI规定。 4.2 质控菌株每日随临床标本一起进行药敏试验，测定质 控菌株的抑菌环。质控菌株的抑菌环在允许范围之内，说明结果可信。 4.3 质控的频率由于纸片法药敏试验是很稳定的，在不 失控的时候，可以每周作1～2次质控菌株的测定。如果发现有失控的情况，就必须每日做1次，寻找失控的原因
并予以纠正。如果连续30日失控<3次的，可以恢复每周1次。 5.操作步骤 5.1 挑取4～5个纯培养菌落，接种于3～5ml M-H肉汤（0.5麦氏单位）中，经35℃培养6～8h。 5.2 用无菌生理盐水或M-H肉汤校正菌液浊度，使其与标准比浊管的浓度相同。 5.3 用无菌棉拭蘸取校正过的菌液，在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个M-H平板表面，再重复两次，每次旋转平板60°，使整个平板涂布均匀，最后用棉拭涂布平板四周缘一圈。 5.4 涂布菌液的平板于室温中干燥3～5分钟后，用纸片分配器或无菌镊子取药敏纸片，贴于平板表面，并用镊尖轻压一下纸片，使其贴平。每张纸片的间距不小于24mm，纸片的中心距平板的边缘不小于15mm，直径90mm的平板宜贴6张药敏纸片。 5.5 将贴好纸片的平板置35℃孵育18～24小时后，用卡尺量取抑菌圈直径。个别菌孵育温度，时间及条件应按照CLSI规定。 6.结果判断 7.根据CLSI M100最新标准将所测抑菌圈的大小，报告为敏感（S）、中介/中敏（I）或耐药（R）。
纸片法抗菌药物敏感实验操作标准
纸片法抗菌药物敏感实验操作标准 4.３标准比浊管 用硫酸钡比浊管(０、5麦氏比浊标准),标定接种菌液浓度。比浊管制备方 法如下:(１)0、048mｏl/L BaＣｌ 2,(１、175% w／v BaＣｌ 2 ·2H 2 O)0、５ml, 加到99、5ml的０、18 mol/Ｌ(0.3６N)H 2SＯ 4 (1％v/ｖ)溶液中,制成比浊管;(2) 用光径为1cｍ的分光光度计测定光吸收来标定比浊管。0、5麦氏标准比浊管在６25nｍ波长的吸收光度应为0、0８-0、1;(3)选管径与制备菌液试管相同的螺口试管,每管分装4-6ml;(4)将试管帽拧紧,放室温暗处保存;(5)用前,将比浊管在旋转振荡器上混匀。如出现大颗粒,应更换;(6)每个月更换比浊管或复检比浊管的浊度。 ５操作步骤 5、1 制备接种菌液 5、1、１增菌法步骤如下:(1)选琼脂平板上形态相同的菌落至少4-5个,用接种环挑其顶部,移至4－5ml肉汤或大豆酪蛋白消化液中;(２)置35℃培养至菌液浓度达到或超过比浊管浓度(一般需2－6小时),浓度约1－２×10８CFU/ml;(３)用生理盐水或肉汤校正菌液浓度,与比浊管相同。可用光电比浊。目测比浊须在适当光照下以黑色线条为反衬。 5、１、2 直接菌悬液法步骤如下:(1)做常规药敏试验,可直接用过夜培养的菌落(必须用无选择性培养基平板,如普通琼脂培养基)在盐水或肉汤中制备接种菌液。菌液浓度调至0、5麦氏管;(2)此法适用于在肉汤培养基中生长不好的细菌如嗜血杆菌、淋病奈瑟氏菌与链球菌及葡萄球菌的甲氧苯青霉素或苯唑青霉素的耐药试验;(３)当用此法做复方磺胺药的试验时,从平板上直接挑菌落时会携带相当量的拮抗剂,造成敏感菌株的抑菌环内出现轻微的生长菌膜。 ５.2 接种平板步骤如下:(1)校正的菌液须在15分钟内使用。用一无菌棉试子蘸取菌液并在上端管壁旋转挤压几次,去掉过多的菌液;(2)用试子涂布整个琼脂平板表面,反复涂布几次,每次将平皿旋转60度,保证涂布均匀。(3)将平皿盖打开3-5分钟,使培养基表面的水份吸收掉。然后贴药敏纸片;(4)注意:避免用过浓的菌液,禁用未经稀释菌或其她不标准菌液接种平板。 5、３贴纸片 (1)接种平板后,贴上药敏纸片。用镊子或针尖压一下纸片使其与培养基表面贴牢。纸片要贴得均匀,纸片与纸片中心距离不得小于24mm。原则上,直径150ｍm得平板贴１2张纸片,直径100mm平板贴5张纸片。纸片贴后不应再移动,因为有些药物会立即扩散;(2)贴上纸片15分钟内,须把平板倒放在35℃恒温箱中。因为抑菌环解释标准就是在普通环境中标定的,所以除嗜血杆菌与淋病 奈瑟氏菌外,平板不可放在高CO ２的环境中。ＣO 2 与某些因素作用可使抑菌环增 大。 5、4 读取结果 (１)经16-18小时培养后,观察结果。菌液浓度适合且涂得好,抑菌环规则,细菌呈融合生长。如果出现单个菌落,说明接种量小,需重做试验,测量抑菌环直径须包含纸片直径:手持平皿从背面目测检查每块平板,借反射光(黑色无放光背景),用卡尺、普通尺或特制的模板量取抑菌环直径,单位为毫米。培养基中如果加了血液,须打开平皿盖,借反射光,从正面量抑菌环。如果就是葡萄球菌或肠球菌,须培养２4小时后,经投射光检查苯唑青霉素与万古霉素的抑菌
抗菌药物敏感试验、细菌耐药性检测题库1-1-6
抗菌药物敏感试验、细菌耐药性检测题库 1-1-6
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]下列关于K-B纸片扩散法操作的描述错误的是（） A.各纸片中心距离不小于24mm B.纸片距平板内缘不应大于15mm C.直径90mm的平皿可贴6张纸片 D.纸片贴牢后避免移动 E.培养16~18小时后读结果 本题要点为纸片扩散法，其药物纸片各中心应相距24mm，纸片距平板内缘15mm，35℃培养16~18小时后阅读结果。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]培养基的pH过低时，其抑菌圈可扩大的是（） A.米诺环素 B.庆大霉素 C.红霉素 D.诺氟沙星 E.头孢菌素 本题要点为纸片扩散法的培养基要求，其pH值为7.2~7.4，过高或过低的pH值会影响药物效能。碱性可扩大氨基糖苷类药物的抑菌圈，酸性可扩大四环素类药物的抑菌圈，米诺环素为四环素类抗菌药物。
辽宁11选5 https://www.360docs.net/doc/7b2710120.html, 问题： [单选,A2型题,A1A2型题]ESBL菌株感染者治疗应选用（） A.青霉素 B.氨苄青霉素 C.头孢氨苄 D.亚胺培南-西司他丁 E.氨曲南 目前认为亚胺培南是治疗产ESBL菌感染的最佳选择，产ESBL菌重症感染的患者应首选亚胺培南治疗。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]可同时做测定某种药物对多株菌的MIC的方法为（） A.纸片琼脂扩散法 B.肉汤稀释法 C.琼脂稀释法 D.E试验 E.直接药敏试验 琼脂稀释法是将不同剂量的抗菌药物，加入融化并冷至50℃左右的定量MH琼脂中，制成含不同递减浓度抗菌药物的平板，接种受试菌，孵育后观察细菌生长情况，以抑制细菌生长的琼脂平板所含最低药物浓度为MIC。本法优点是可在一个平板上同时做多株菌MIC测定，结果可靠，易发现污染菌；缺点是制备含药琼脂平板费时费力。
常用药物的皮肤过敏试验法
常用药物的皮肤过敏试验法 药品名称皮试液配制及皮试方法结果观察 青霉素皮试液浓度：500U/ml 如青霉素1瓶为80万U，注入4ml生理盐水，则1ml含20万U。 ①取0.1ml，加生理盐水至1ml，则1ml含2万U； ②取0.1 ml，加生理盐水至1ml，则1ml含2000 U； ③取0.25 ml，加生理盐水至1ml，则1ml含500 U； 皮内试验：用75%酒精消毒一侧前臂曲面腕关节上6cm处皮肤， 抽取皮试液0.1ml，做皮内试验，使成直径0.5cm的皮丘，拔针 后勿按揉；注射后20min观察结果。 1、阳性反应：局部皮丘隆起，红晕变硬， 有红肿，肿块直径超过1cm，或红晕 周围有伪足、痒感。严重时可发生过 敏性休克。 2、阴性反应：皮丘无改变，周围不红肿， 无自觉症状。 头孢菌素类皮试液浓度：500u g/ml 皮试液配制方法（一） ①取头孢菌素0.5g，加生理盐水10ml溶解（如药品含量1g， 加生理盐水20ml）,则1ml含50mg； ②取0.1ml，加生理盐水至10ml，则1ml含0.5mg（即500ug/ml） 皮试液配制方法（二） ①药品含量0.5g+2ml溶媒／／药品含量1g+4ml溶媒 →A液（250mg/ml） ②吸取A液0.2ml+0.8ml溶媒→B液（50mg/ml） 观察方法和标准与青霉素相同
③推掉0.9ml，余0.1ml+0.9ml溶媒→C液（5mg/ml） ④推掉0.9ml，余0.1ml+0.9ml溶媒→D液（500ug/ml）皮试方法：每次用0.05-0.1ml，皮内注射，15～20分钟后观察结果。
破伤风抗毒素以NS稀释10倍（0.1ml加0.9mlNS），取皮 试液0.05ml在前臂作皮内试验。 观察30分钟，如注射部位出现皮丘增大超过1cm、红肿、 浸润，特别是形似伪足或有痒感者，为阳性反应。如皮试 为阳性，应采用脱敏注射。如有注射局部反应特别严重或 伴有全身症状则为强阳性反应，应避免使用。 脱敏疗法：第1次取抗毒素0.1ml加0.9%氯化钠注射液 0.9ml肌注；第2次取抗毒素0.2ml加0.9%氯化钠注射液 0.8ml肌注；第3次取抗毒素0.3ml加0.9%氯化钠注射液 0.7ml肌注；第4次取抗毒素余量加0.9%氯化钠注射液稀释 至1ml肌注。每隔20min注射1次。在脱敏过程中，如发 现病人有全身反应，应立即停止注射，并及时处理。 抗蛇毒血清取本品0.1ml加1.9mlNS，在前臂掌侧皮内注 射0.1ml。 观察20-30分钟，如注射部位出现皮丘增大、红肿、浸润， 特别是形似伪足或有痒感者，为阳性反应。如皮试为阳性， 应采用脱敏注射。 脱敏注射法： 取氯化钠注射液将抗蛇毒血清稀释20倍。分数次做皮下注 射，每次观察10-20分钟，第一次注射0.4ml。如无反应， 可酌情增量注射。注射观察3次以上，无异常反应者，即 可做静脉、肌内或皮下注射。注射前将制品在37℃浴加温 数分钟。注射时速度应慢，开始每分钟不超过1ml，以后亦
微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程
微生物检验实验室药物敏感性试验标准操作规程 1．目的 规范药物敏感性试验标准操作规程，确保药敏结果准确。2．原理 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后会不断的向纸片周围区域扩散，形成递减的浓度梯度，在纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制，从而产生透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映检测菌对测定药物的敏感程度，并与该待检菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC 愈小。 3．试剂 M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、标准比浊管或比浊仪。 4．质控 4.1 常用细菌药敏质控标准菌株参见CLSI规定。 4.2 质控菌株每日随临床标本一起进行药敏试验，测定质控菌株的抑菌环。质控菌株的抑菌环在允许范围之内，说明结果可信。 4.3 质控的频率由于纸片法药敏试验是很稳定的，在不失控的时候，可以每周作1～2次质控菌株的测定。如果次，
寻找失控的原因1发现有失控的情况，就必须每日做 并予以纠正。如果连续30日失控<3次的，可以恢复每周1次。 5.操作步骤 5.1 挑取4～5个纯培养菌落，接种于3～5ml M-H肉汤（0.5麦氏单位）中，经35℃培养6～8h。 5.2 用无菌生理盐水或M-H肉汤校正菌液浊度，使其与标 准比浊管的浓度相同。 5.3 用无菌棉拭蘸取校正过的菌液，在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个M-H平板表面，再重复两次，每次旋转平板60°，使整个平板涂布均匀，最后用棉拭涂布平板四周缘一圈。 5.4 涂布菌液的平板于室温中干燥3～5分钟后，用纸片分 配器或无菌镊子取药敏纸片，贴于平板表面，并用镊尖轻压一下纸片，使其贴平。每张纸片的间距不小于24mm，纸片 的中心距平板的边缘不小于15mm，直径90mm的平板宜贴 6张药敏纸片。 5.5 将贴好纸片的平板置35℃孵育18～24小时后，用卡尺量取抑菌圈直径。个别菌孵育温度，时间及条件应按照CLSI 规定。 6.结果判断 7.根据CLSI M100最新标准将所测抑菌圈的大小，报告为。）
抗菌药物的体外药效试验
实验六、抗菌药物的体外药效试验 （药敏试验） 各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同，同种细菌的不同菌株对同一药物的敏感性有差异，检测细菌对抗菌药物的敏感性，可筛选最有疗效的药物，用于临床对控制细菌性传染病的流行至关重要。此外，通过药物敏感试验可为新抗菌药物的筛选提供依据。药敏试验的方法很多，普遍使用的有滤纸片扩散试验（Kirby-Baueer Dice Diffusion）；最低抑菌浓度试验（Minimum Inhibitory Concentration, MIC）和最低杀菌浓度试验（Minimum Bactericidal Concentration, MBC）。 ［目的要求］ 1、熟悉体外抗菌试验操作技术。 2、掌握药物抗菌能力体外测定的常用方法及其用途。 ［实验原理］ 常用的体外测定药物抑菌能力的方法有两大类：琼脂渗透法与浓度系列稀释法。琼脂渗透法时利用药物能够渗透至琼脂培养基的性能，将实验菌混入琼脂培养基后倾注成平板；或将试验菌均匀涂于琼脂平板的表面，然后用不同的方法将药物置于已含试验菌的琼脂平板上。根据加药的操作方法不同而有滤纸片法、打洞法、管碟法及挖沟法等。经适宜温度培养后观察药物的抑菌能力。浓度系列稀释法时把药物稀释成不同的系列浓度，混入培养基内，加入一定量的试验菌，经适宜温度培养后观察结果，求得药物的最低抑菌浓度（MIC）。 1、细菌：所用细菌应包括主要致病菌。革兰氏阳性球菌包括金黄色葡萄球菌(产酶与不产酶菌株)、表皮葡萄球菌，链球菌、肠球菌等。革兰氏阴性球菌如淋球菌等。革兰氏阴性杆菌包括流感杆菌、肠杆菌科细菌8～10种，绿脓杆菌与其它假单孢菌属及不动杆菌属等，厌氧菌包括脆弱类杆菌、消化球菌和消化链球菌等。对临床应用有代表性的菌株数量，创新药应不小于1000株。其它类新药根据新药抗菌谱宽窄可作200-500株。试验时应包括有国际公认质控菌株(如金葡菌ATCC25925，大肠杆菌ATCC25922和绿脓杆菌ATCC27853等)。 2、培养基：选MH(Muelkr-Hintop)培养基。链球菌、流感杆菌需接种到巧克力琼脂平板或加5％羊血。淋球菌接种到哥伦比亚培养基上。