化验室检项流程图总汇

化验室检验流程图

1蛋白质的测定方法（半微量凯氏定氮法）--------------------------------------------------------------------3 2食品中脂肪测定方法（酸水解法）-------------------------------------------------------------------------------5 3总糖测定方法(直接滴定法)----------------------------------------------------------------------------------------6 4食品中蔗糖的测定方法---------------------------------------------------------------------------------------------8 5食品中还原糖测定方法（直接滴定法）------------------------------------------------------------------------9 6食品中的灰分的测定方法----------------------------------------------------------------------------------------11 7不溶于水杂质（白砂糖）测定方法----------------------------------------------------------------------------12 8干燥失重测定方法-------------------------------------------------------------------------------------------------13 9脲酶的测定方法----------------------------------------------------------------------------------------------------14 10菌落总数的测定----------------------------------------------------------------------------------------------------16 11霉菌检测-------------------------------------------------------------------------------------------------------------18 12食品卫生微生物学检验大肠菌群测定-------------------------------------------------------------------------19

蛋白质的测定方法

一．试剂

除非另有规定，本方法中所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的三级水。

1．硫酸铜

2．硫酸钾

3．硫酸

4．硼酸

5．甲基红指示剂

6．溴甲酚绿指示剂

7．亚甲基蓝指示剂

8．氢氧化钠（NaOH ）。

9．95%乙醇

10．硼酸溶液（20 g/L）：称取20 g 硼酸，加水溶解后并稀释至1000 mL。

11．氢氧化钠溶液（400 g/L）：称取40 g 氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀

释至100 mL。

12．硫酸标准滴定溶液（0.0500 mol/L）或盐酸标准滴定溶液（0.0500 mol/L）。

13．甲基红乙醇溶液（1 g/L）：称取0.1g 甲基红，溶于95%乙醇，用95%

乙醇稀释至100 mL。

14．亚甲基蓝乙醇溶液（1 g/L）：称取0.1g 亚甲基蓝，溶于95%乙醇，用95%

乙醇稀释至100 mL。

15．溴甲酚绿乙醇溶液（1 g/L）：称取0.1g 溴甲酚绿，溶于95%乙醇，用95%

乙醇稀释至100 mL。

16．混合指示液：2 份甲基红乙醇溶液（4.13 ）与1 份亚甲基蓝乙醇溶液

（4.14 ）临用时混合。也可用1 份甲基红乙醇溶液（4.13 ）与5 份溴甲酚绿

乙醇溶液（4.15 ）临用时混合。

二．仪器和设备

1 天平：感量为1mg。

2 定氮蒸馏装置

3 自动凯氏定氮仪

2.1计算

C----盐酸标准溶液的实际浓度，N

m---基准无水碳酸钠的质量g ， V---盐酸标准溶液的用量，ml V 0---试剂空白试验中盐酸标准溶液的用量ml ，

0.0530---与1ml 盐酸标准溶液

=1mol/L 相当的无水碳酸钠的质量g ； 2.2硫酸（分析纯）. 3操作步骤 3.1样品处理：

3.2装好定氮装置

3.3样品蒸馏

3.4 试剂空白试验：同时吸取5.0ml 试剂空白消化液按上操作作空白。 3.5计算

蛋白质（%）=

×100

W ×V 取/V 定

V ——样品消耗盐酸标准溶液的体积，ml ； V 0——试剂空白消耗盐酸标准溶液的体积，ml ； N ——盐酸标准溶液的当量浓度；

0.014——1N 盐酸标准溶液1ml 相当于氮克数； W ——样品的质量（体积），g （ml ）； F ——氮换算为蛋白质的系数。

注：蛋白质换算系数：蛋白质的氮含量一般为15——17.6%，按16%计算乘以6.25为蛋白质，乳制品为6.38，面粉为5.70，玉米、高梁为6.24，花生为5.46，米为5.95，大豆及其制品为5.71，大麦、燕麦、裸麦为5.83，芝麻、向日葵为5.30。

食品中脂肪测定方法（酸水解法）

1主要试剂

盐酸 95%乙醇 乙醚 石油醚 2仪器

恒温水浴锅 干燥箱 天平 100ml 具塞刻度量筒 3操作步骤

4

．计算

X （%）

总糖测定方法(直接滴定法)

原理：样品经除去蛋白质后，原有的和经盐酸水解后产生的转化糖为还原糖量。

主要仪器：电炉、坩埚夹

试剂：

1、碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（cuso4、5H20）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀

释至1000ml。

2、碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸甲钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁

氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml贮于橡胶塞玻璃瓶内。

3、乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加入3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100ml。

4、10.6%亚铁氰化钾溶液：称取10.6克亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100ml。

5、盐酸。

6、葡萄糖标准溶液：精密称取1.000g经过98-100℃干燥至恒量的纯葡萄糖,加水溶解后加

入5ml盐酸,并以水稀释至1000ml,此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖。（此溶液用来标定碱性酒石酸铜甲、乙液）

7、甲基红指示液：0.1%乙醇溶液。

8、40%氢氧化钠溶液。

操作步骤1

步骤2

步骤3：标定碱性酒石酸铜溶液

步骤4：样品溶液预测

步骤5：样品溶液滴定

计算：

式中：X——样品中总糖的含量，%

m——10ml碱性酒石酸铜溶液(甲、乙液各5ml)相当于还原糖（以葡萄糖）的质量，mg

W——样品的质量，g

V——测定时平均消耗样品溶液体积，ml

V（定）——样品处理时定溶的体积，ml。

食品中蔗糖的测定方法

原理：样品经除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖，再按还原糖测定。水解前后还原糖的差值为蔗糖含量。

1主要试剂

1.1碱性酒石酸铜甲液

称取15g硫酸铜（CuSO4.5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水并稀释至1000ml。

1.2碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75gNaOH，溶于水后加入4g亚铁氰化钾，稀释至1000ml 。

1.3乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100ml

1.4 10.6%亚铁氰化钾溶液

1.5 6N盐酸

1.6 葡萄糖标准溶液

98-100℃干燥至恒重的纯葡萄糖精确称取1.000g 加水溶解后加入5ml盐酸稀释至1000ml （此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖）

1.6 甲基红指示液：0.1%乙醇溶液。

1.7 20%氢氧化钠溶液。

2仪器

1000W电炉

操作步骤

计算：

X=(R2—R1)×0.95

X---样品中蔗糖的含量，%；R1---不经水解处理还原糖含量,%；

R2---水解处理后还原糖含量,%；0.95---还原糖(以葡萄糖计)换算为蔗糖的系数。

食品中还原糖测定方法（直接滴定法）

原理：样品经除去蛋白质后，其中还原糖把铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸亚铁后氧化亚铜被氧化为铜盐，以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量，计算CuO含量，再查表得还原糖量。

1主要试剂

碱性酒石酸铜甲液

称取15g硫酸铜（CuSO4.5H2O）+0.05g次甲基蓝溶于水并稀释至1000ml

碱性酒石酸铜乙液

50g酒石酸钾钠+75gNaOH 溶于水加入4g亚铁氰化钾稀释至1000ml 贮存于橡胶塞玻璃瓶内

乙酸锌溶液

称取21.9g乙酸锌加3ml冰乙酸加水溶解并稀释至100ml

10.6%亚铁氰化钾溶液

盐酸

葡萄糖标准溶液

98-100℃干燥至恒重的纯葡萄糖精确称取1.000g 加水溶解后加入5ml盐酸稀释至1000ml （此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖）

2仪器

1000W电炉

操作步骤

约200ml水

X3---样品中还原糖的含量（以葡萄糖计）%

m3---10ml碱性酒石酸铜溶液（甲、乙各5ml）相当于还原糖（以葡萄糖计）的质量，mg；m4---样品质量，g

V2---测定时平均消耗样品溶液体积，ml

食品中的灰分的测定方法

原理：食品经灼烧后的残留的无机物质称为灰分。 主要仪器 高温炉 操作方法

计算

X=（m1-m2）/（m3-m2）×100 X---样品中灰分的含量（%） m1---坩埚和灰分的质量，（g ） m2---坩埚和灰分的质量，（g ） m3---坩埚和样品的重量，（g ）

不溶于水杂质（白砂糖）测定方法

设备

① 干燥箱 ②干燥器 ③1000ml 烧杯 ④称量皿 ⑤漏斗 ⑥滤纸 ⑦玻棒 操作流程

计算

不溶于水杂质 = （m 2-m 1）/m 0×106 m 1---干燥滤纸连同称量皿的质量g

m 2---干燥滤纸连同称量皿与不溶于水杂质质量g m 0---所称量白砂糖样品质量g

干燥失重测定方法

原理：采用常压烘箱干燥技术烘干后，冷却，本法主要是测定样品的“表面”水分。

主要仪器

干燥箱：测定过程中，离称量瓶上面2.5+0.5cm处的温度要保持在105±1℃（或130±1℃）。带温度计干燥器

扁型称量瓶：直径为6-10cm，深度为2-3cm。

操作步骤

计算

干燥失重= （m2-m3）/（m2-m1）×100

式中：m1——称量瓶的质量，g

m2——称量瓶及干燥前样品的质量，g

m3——称量瓶及干燥后样品的质量，g

脲酶的测定方法

1、原理：脲酶在适当的PH和温度下催化尿素，转化成碳酸铵，碳酸铵在碱性条件下形成氢氧化铵，再与钠氏试剂中的碘化钾汞复盐作用形成碘化双汞铵。如样品中脲酶活性消失，上述反应即不发生。

2、试剂

2.1 1%尿素溶液（临时配）：称1g尿素溶于99ml水中。

2.2 10%钨酸钠溶液:称10g钨酸钠溶于90 ml水中。

2.3 2%酒石酸钾钠溶液:称2g酒石酸钾钠溶于98ml水中。

2.45%硫酸:量5ml硫酸.缓缓注入蒸馏水中至于100ml冷却,摇匀即可。

2.5中性缓冲液 2.5.1 1M/15（0.067mol/L）磷酸氢二钠溶液:称取无水磷酸氢二钠9.47g溶于1000ml

蒸馏水中. 2.5.2 1M/15(0.067mol/L)磷酸二氢钾溶液:称取磷酸二氢钾9.07g溶于1000ml蒸馏水中。

2.5.3 取磷酸氢二钠溶液611 ml和389 ml磷酸二氢钾溶液两种溶液混合均匀。

2.5.4钠氏试剂:称取红色碘化汞（HgI2）55g,碘化钾41.25g,溶于250ml蒸馏水中,溶解后,倒入1000ml容量瓶中.再称取氢氧化钠144g溶于500ml水中,溶解并冷却后,再缓缓地倒入上述1000ml容量瓶中,加水至刻度,摇匀倒入试剂瓶静置后,用上清液.

3操作步骤

4、观察结果:

注意：试剂、试管受污染也出现黄色，所以无法相信就用试剂做空白检验。

食品卫生微生物学检验 菌落总数的测定

所需设备

温箱：36±1℃、冰箱：0-4℃、天平、电炉、吸管、广口瓶或三角瓶（500ml ）、玻璃珠、平皿、放大镜、菌落计数器、酒精灯、试管架、灭菌刀或剪子、灭菌镊子 培养基和试剂 营养琼脂培养基 生理盐水 75%乙醇

检验操作步骤 检样稀释及培养

菌落计算报告

1、选取菌落数在30~300之间的平板作为测定标准,乘以稀释倍数报告之（见表中例1）。

2、若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30~300之间，则视两者之比如何来决定。若其比值小于或等2，应报告其平均数；若大于2，则报告其中较小的数字（见表中例2及3）。

3、若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中例4）。

4、若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中例5）。

5、若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之（见表中例6）。

6、若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中例7）。

稀释度选择及菌落数报告方式表

霉菌检测

1、试剂：虎红营养琼脂

2、设备：

①温箱25~28℃②振荡器③天平④显微镜⑤玻塞三角瓶（300ml）⑥试管：15mm×150mm ⑦平皿：直径9cm ⑧吸管：1ml和10ml

⑨酒精灯⑩载玻片⑾广口瓶⑿牛皮纸袋（121℃灭菌）⒀金属勺⒁刀等⒂试管架⒃接种针⒄橡皮乳球3、检验程序：

食品卫生微生物学检验

大肠菌群测定

所需设备：

①温箱（36±1℃） ②冰箱（0-4℃） ③恒温水浴（44.5±0.5℃） ④天平 ⑤显微镜 ⑥平皿（90mm ） ⑦试管 ⑧吸管 ⑨广口瓶或三角烧瓶（500ml ） ⑩载玻片 ⑾酒精灯 ⑿试管架 ⒀接种环 ⒁玻片搁架 ⒂玻璃缸 所需培养基和试剂 ①乳糖胆盐发酵管

②伊红美蓝琼脂平板 ③乳糖发酵管 ④生理盐水 ⑤革兰氏染色液 样品稀释：

乳糖发酵试验

分离培养

证实