骨髓细胞学检查PPT课件
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四、常用细胞化学染色及 临床意义
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【原理】 粒细胞及分化较好的单核细 胞胞浆内的POX能分解H2O2,产生 新生态氧使无色的色原(如联苯胺) 氧化显色,定位于胞浆内。计数100 个原始细胞,报告阳性细胞百分率 或用-,+,++,+++,++ ++5个等级进行积分值计算
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过氧化物酶
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6.巨核细胞系统 magakarocytes
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【临床意义】同POX染色反应
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(三)中性粒细胞碱性磷酸酶染色 (NAP)
【原理】碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒
细胞(分叶核及杆状核)内,在碱性条件下 能水解基质液中的α-磷酸萘酚,产生α-萘酚, 其与重氮盐偶联,形成不溶性棕黑色偶氮染 料沉淀。阳性反应为胞质中出现灰色到棕褐 色颗粒,计数100个成熟中性粒细胞,报告阳 性细胞百分率或用-,1+,2+,3+,4+ 进行积分值计算。
骨髓细胞学检查
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主要内容
概述 骨髓检查适应症禁忌症 血细胞生成发展规律形态特点 细胞化学染色 正常骨髓象 常见血液病骨髓象
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一、概 述
骨髓是人出生后的主要造血组织。 骨髓组织由网状组织、基质、血管系统和神
经等构成的造血微环境,以及充满其间的发 育过程中的血细胞所组成。 骨髓形态学主要检查骨髓中各系列血细胞数 量的增减及其比例的改变,形态的异常,可 以了解骨髓的造血功能和病理改变。
极度活跃 >100/HP
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三、血细胞的生成,发育规律 及正常形态学特征
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(一)血细胞的生成
所有的血细胞均起源于共同的造血干细胞
①具有高度自我更新的能力,以保持干细胞池数量的 恒定,维持机体终身的稳定造血;
②具有多向分化的能力,即可向各系列祖细胞分化, 然后经过增殖、发育和成熟,成为各系细胞。
【临床意义】主要用于急粒和急单的鉴别
急单:—强阳性,被NaF抑制
急粒:-原粒阴性或弱阳性,不被NaF抑制
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醋酸萘酚酯酶和氟化钠抑制试验
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五、正常骨髓象
有核细胞增生活跃 粒系细胞占40-60%,原粒<2%,早幼粒<5%, 中幼粒、
晚幼粒<15%, 嗜酸<5%,嗜碱<1%, 细胞形态染色基本正 常 幼红细胞占20%左右,原红<1%, 早幼红<5%, 中幼红、 晚幼红各占10%,成熟红细胞大小形态染色大致正常 M:E 2~4:1 淋巴占20% 巨核7~35个,多为产板巨 可见少量单核细胞、浆细胞、网状细胞、内皮细胞、 组织细胞等
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血友病
局部皮肤感染 出血倾向者 病情危重者
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标本采集
部位:髂后上棘、髂前上棘、胸骨
量:0.2ml(涂片)
3-5ml (免疫分型、培养等)
穿刺成功标志:
抽取骨髓一瞬间,病人有特殊的疼痛感
抽取的骨髓液内含有骨髓小粒。
显微镜下可见骨髓特有的细胞如巨核细胞、浆细 胞、组织细胞等
杆状核>分叶核
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骨髓穿刺
bone marrow puncture
骨髓抽吸
Bone marrow aspiration 骨髓涂片
Bone marrow smear
骨髓活检
Bone marrow biopsy
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血液病的诊断,分期和疗效的评估 了解恶性肿瘤有无骨髓侵犯 感染性疾病或发热待查,病原生物学培养 临床疑难病例
造血干细胞:包括全能干细胞(TSC)及由其分 化的骨髓系干细胞和淋巴系干细胞。
受造血微环境、造血细胞生长因子和白细胞介素以及 神经和体液因子的调控,其中造血微环境最重要。
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造血干细胞的分化. 及增殖示意图 15
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㈢、血细胞的正常形态学特征
1、红细胞系统 erythrocytes
原红(normoblast) 早幼红(basophilic normoblast) 中幼红(polychromatic normoblast) 晚幼红(orthochromatic normoblast)
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协助红血病,红白血病的诊断以及与其它 类型良性贫血的鉴别:
红血病,红白血病幼红细胞PAS强阳性
巨幼贫,再障等呈阴性反应
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【原理】 α-醋酸萘酚酯酶又称非特异性酯酶
(NSE),能将基质内的醋酸萘酚水解,与重 氮染料偶联,形成不溶性的灰黑色或棕黑色沉 淀。但在单核细胞内此酶的活性可被氟化钠抑 制。故这两个试验常同时进行。
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骨髓涂片的显微镜检查
低倍镜
观察取才、涂片、染色情况
观察骨髓增生程度
计数巨核细胞
观察有无异常细胞
油镜
选择染色良好、分布均匀的部位,
计数200个有核细胞,分类
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骨髓标本的分类部位
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骨髓增生程度分级(高倍镜) 增生减低 5~20/HP
极度减低 1~5/HP
增生活跃明显活跃 20~50/H5P0~100/HP
【参考值】阳性率10~40% 积分40~80。
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碱性磷酸酶
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碱性磷酸酶染色(NAP)临床意义
NAP增高:
细菌感染,类白血病反应, 慢粒急变,急淋, 淋巴瘤,再障,骨纤等
NAP减低:
慢粒,急非淋,PNH及恶 组等
NAP用于鉴别:
慢粒与类白血病反应;
PNH与再障;
急淋与急非淋;
细菌感染与病毒感染(感染症状相似)
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2、粒细胞系统 granulocytes
原粒(myeloblast) 早幼粒( pro myelocyte) 中幼粒(myelocyte):中性、嗜酸、嗜碱 晚幼粒(metamyelocyte) 杆状核粒(stab granulocyte,band
granulocyte) 分叶核(Segmenteel granulocyte)
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过氧化物酶染色 (POX)临床意义
主要用于急性白细胞类型的鉴别
急性粒细胞白血病:
强阳性(颗粒较粗大,呈局灶分布)
急性单核细胞白血病:
弱阳性(颗粒细小、稀少、 散在分布)源自文库
急性淋巴细胞白血病:
阴性,ALL骨髓中残留的原粒细胞POX可为(+), 但比例小于3%
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【原理】是一种脂溶性染料,可溶于细胞 质内的含脂物质,是之呈棕黑色或深黑 色颗粒。