α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测(教学方案)
《α-淀粉酶的固定化与淀粉水解作用的检测》
教
学
方
案
第二实验班一组
2013．10.22
教学课题
α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测
教材分析：
1、教学内容分析：本节课是高中生物浙科版选修1《生物技术实践》模块实
验6“α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测”实验。高中生物选修1是根据新课标《普通高中生物课程标准（实验）》开设的以技术实践为主题的课程，该实验中涉及到的α-淀粉酶水解淀粉是中学生在必修一中学习到的与酶相关的理论知识，本次实验是将生产中对酶的利用发放搬到实验室中，能够让学生对固定化酶有深入的了解并对酶的作用有一个具体的印象，同时，让学生掌握固定α-淀粉酶的方法，来便于此次实验的进行。由此可见该实验的进行对于中学生物教学来说是很有必要的。
2、课程标准要求：
具体内容标准活动建议
简述酶的固定化；
介绍淀粉和糊精之间的关系，以及淀粉和糊精分别与KI-I2反应的颜色变化。
验证酶是否被固定。设计实验探究“α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测”。
利用固定后的α淀粉酶进行淀粉的水解实验；
3、课程目标的能力标准
发展科学探究能力，初步学会做出假设与预期；设计可行的实验方案；
实施实验方案，收集证据；利用科学方法处理、解释数据或现象；根据证据作出合理的判断；用准确的术语或图表介绍研究发现和结果，阐明观点。教学目标：
【知识目标】
1、学生通过实验等教学活动，掌握酶的固定化技术、以及通过对实验结果的
分析检测，能得出酶是否被固定，固定后的酶对底物是否产生了作用；2、学生通过实验探究，设置对照，对此项生物学的研究方法有了更深的认识；【能力目标】
1、学生通过实验过程的体验，提高实验设计能力，学会描述实验研究的基本
过程；
2、学生通过实验的探究和操作过程来提高实验动手操作能力；
3、学生通过对本节课研究的原理在生物学里领域以及生活领域的实例分析，
提高了学生的只是知识应用与分析能力。
【情感目标】
1、学生通过实验探究活动中的分工协作，形成合作的团队意识；
2、引导学生思考实验部分内容，提高学生的思维能力，引导学生确认固定后
的α-淀粉酶能是淀粉变为糊精；
3、通过实验培养学生的思考能力，以及学生能够养成做事认真、细心的习惯。教学重点：
1、掌握α淀粉酶的固定化技术；
2、利用固定后的α淀粉酶进行淀粉的水解实验，并验证固定化酶是否有效。教学难点：
1、淀粉酶固定化的过程中，学生需要掌握和理解这种固定化方式。
2、学生需要理解实验中相关步骤的中注意事项，由于实验教学课课时较少，
本次实验操作过程比较繁杂，因此要掌握好讲授实验和实验期间辅导的内容。
教学方法：
1、探究式教学模式：通过教师的指导，学生根据实验材料和“方案”，设计“探
究实验”的研究过程，再以“自主、探究、合作”的方式看开展实验；
教学用具：
黑板、教案、部分实验材料（层析柱、烧杯、滤布、滴管、试管）
教学板书：
黑板分成三个板块：
左边板块：一、实验目的
二、实验原理：
1、固定化酶、吸附法
2、石英砂
α-淀粉酶
3、淀粉（遇碘变蓝）→→→→糊精（遇碘变红）
注：α-淀粉酶的最适温度为50~75℃
中间板块：三、流程
α-淀粉酶+ 石英砂—————固定
（搅拌？静置？清洗？）
淀粉+ 固定化酶—————反应装柱（放液）
过柱
（放液-静置-放液）
碘液+ 产物（淀粉？糊精？）————检测
右边板块：
层析柱示意图
作业题：（1）配置好的淀粉溶液为何放入60℃的水浴锅？
（2）查阅资料，简述还有哪些固定酶的方法。
教学流程：
1、题目和已有知识引入，牵入本次实验的主要思路；
2、教学环节1：介绍α-淀粉酶的固定方法，以及注意事项；
3、教学环节2：介绍为何使用层析柱，以及部分操作注意事项，期间提出问
题引发学生思考；
4、教学环节3：检测酶对淀粉的水解作用，依据实验原理，让学生自主探究
如何检验淀粉是否水解；
5、教学环节5：学生开始实验；
6、总结。
课前准备：
1、在进行实验前，应先将实验所需的仪器给每个小组都准备好，由于淀粉的溶解和保存较为简单，但实验耗时较长，所以第一步可以先为学生准备好配好的淀粉溶液。同时，可将实验步骤适当调整，为了实验时能更好的发散学生思维，可以将实验的第六步做一些适当调整，即调整为打开调节装置，流出3ml反应液后（让塑料管中的溶液流出），用支管接取0.5ml溶液，下面，请自己设计实验对照，证明淀粉是否发生了水解，并生成了糊精。而第7步，由于条件有限，可以省去。
2、准备小黑板：
程度分类游离酶固定化酶
产物底物分离难易
酶的回收难易
教学进程：
教学程序教师行为学生活动设计意图
引入（5min）
进入课题“α-淀粉酶的固定化与淀粉水
解作用的检测”。
已了解的：酶、淀粉、水解作用
未接触过的：固定化
通过现实中对固定的理解引到实验中的
“固定化”；
阅读课本上的原理和资料，学生理解：
固定化酶、固定化酶的方法、吸附法、吸
附剂（期间请同学起来分享自己了解到的
相关信息、在对固定化酶的理解上借助磁
铁和大头针的关系辅助理解）
引出石英砂，简要解释石英砂的优势；
游离酶与固定化酶的比较（为何用固定
化酶）：此处通过讨论游离酶的不足引出固
定化酶的优势。
听和理解教师介
绍的基本的实验
思路
让学生理解本
次实验的思路，
方便后面比较
对实验具体步
骤比较零散的
讲解。
实验思路（2min）
观察课题，分为两大板块：
其一：α-淀粉酶的固定
其二：淀粉水解作用的检测
两个板块中间起桥梁作用的是：淀粉与α-淀粉酶的反应。
介绍原理：淀粉经α-淀粉酶作用产生糊精，碘液遇糊精变红。
引领学生理出实验流程：
α-淀粉酶+石英砂→固定化酶+淀粉→产物→检测（酶是否被固定在了石英砂上）
α-淀粉酶的固定化（1min）
演示固定操作步骤，让学生思考“固定
过程中为何搅拌？
让学生了解淀粉
酶的固定方式，从
中跟着老师的思
路积极的进行思
考，更加深入的了
解实验步骤。
让学生在教师
的讲解中不断
进行思考，进一
步了解实验的
步骤，在讨论中
使自己的实验
反应（3min）
淀粉与固定化酶反应：
淀粉从水浴锅中去取，让学生思考“为何在水浴锅中进行保存？”
通过“将淀粉直接倒入固定化酶的烧杯中进行反应”这项错误操作，引出层析柱的使用。
介绍层析柱的结构，让学生思考如何使用层析柱使淀粉和酶进行反应并得到产物。（装柱、过柱的过程）
产物得出后进行：检测设计能力得到锻炼。
细节补充（4min）未提到的操作有三部分：
（1）固定时，固定后要清洗（让学生观察烧杯中物质的状态，提示学生上
清液中的物质，引出游离酶的存在，
结合原理让学生思考如何检测游离
酶的存在？通过怎样的操作出去游
离酶并验证游离酶是否被除去？）（2）装柱过程中的放液（多余的水）的操作；
（3）过柱过程中，对胶管中多余液体的处理；
检测（1min）
通过实验目的引发学生对检测产物的
理解，并让学生自行设置对照来清晰的看
到淀粉是否经过水解。
学生通过老师的
引导以及对实验
原理的理解设计
方案来验证淀粉
发生了水解。
学生展开实验（50min）学生在实验过程中，教师给予部分细节上的指导，同时引发同学的思考。
小结（5min）
请小组分享他们检测过程中的实验设
计，并叙述实验结果。并分享实验当中出
现的问题以及处理办法。
强调实验报告的书写（作业题+实验分析
[分析中要包括对实验过程中对某些操作
的理解等]）。
汇报实验结果，并
做出总结。
培养学生发现
问题和总结的
能力。
课后反思：
开设实验课的目的是培养学生的探究意识和习惯，在整个实验教学的过程中，有目的的去引导学生能够自己理清实验的目的和操作思路，不至于在动手操作的
过程中失去思路，不知道该进行怎样的操作。
针对本次课堂的教学设计，总结以下几点不足：
（1）本节课中有些步骤补充的过于详细，让学生在实验的过程当中缺乏部分思考而对操作步骤孤注一掷，导致操作中出现了很多问题，并且太过依赖老师；
（2）没有把握好队“细节”的理解，盲目的以为讲清楚每一步如何具体操作才是“细节”，却忽略的真正的细节方面的讲解，如：没有强调碘液的滴数、没有强调放液的快慢速度等。虽然如此，但在学生实验过程中却发现，学生会在不知道这些细节的情况下，进行各种不同的尝试，边尝试边思考怎样才能更好的得出反应结果；
（3）教学过程中，对问题的提出在之前没有进行严密的考虑，导致表达的时候思路混乱，让学生不理解问题的根本是什么，导致学生无法进行正确和积极的思考，对实验的进行造成了不好的影响；
（4）没有介绍实验来源（结合生活实际），可能导致学生对本次实验的兴趣不大；（5）实验过程中，实验助手没有充分的发挥作用，例如：实验期间，应单独坐，而不该穿插在学生中间，防止学生在听课过程中直接询问并寻求解答的现象发生，这种行为妨碍了学生的独立思考，同时没有跟进老师的思路，导致在实验过程中对流程没有清晰的认识；其次，在实验操作过程中，没有及时的对学生不规范的操作进行引导；除此之外，不明确在实验过程中该强调什么问题，不该强调什么问题等。
整个实验教学，学生都验证了固定化酶对淀粉有水解作用，因此是比较成
功的。希望能够在今后的教学中，能够继续探究出一条更加有利于学生进行实验探究的教学设计方案。
测定α淀粉酶活力的方法
实验五激活剂、抑制剂、温度及PH对酶活性的影响 一、目的要求通过实验加深对酶性质的认识，了解测定α-淀粉酶活力的方法。 二、实验原理 酶是生物体内具有催化作用的蛋白质，通常称为生物催化剂。酶催化的反应称为酶促反应。生物催化剂催化生化反应时具有：催化效率好、有高度的专一性、反应条件温和、催化活力与辅基，辅酶，金属离子有关等特点。 能提高酶活力的物质，称为激活剂。激活剂对酶的作用有一定的选择性，其种类多为无机离子和简单的有机化合物。使酶的活力中心的化学性质发生变化，导致酶的催化作用受抑制或丧失的物质称为酶抑制剂。氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。应注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的，有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂，而在高浓度时则为该酶的抑制剂。如氯化钠达到约30%浓度时可抑制唾液淀粉酶的活性。 酶促反应中，反应速度达到最大值时的温度和PH值称为某种酶作用时的最适温度和PH值。温度对酶反应的影响是双重的：一方面随着温度的增加，反应速度也增加，直至最大反应速度为止；另一方面随着温度的不断升高，而使酶逐步变性从而使反应速度降低。同样，反应中某一PH范围内酶活力可达最高，在最适PH的两侧活性骤然下降，其变化趋势呈钟形曲线变化。 食品级α-淀粉酶是一种由微生物发酵生产而制备的微生物酶制剂，主要由枯草芽孢杆菌、黑曲霉、米曲霉等微生物产生。但不同菌株产生的酶在耐热性、酶促反应的最适温度、PH、对淀粉的水解程度，以及产物的性质等均有差异。α-淀粉酶属水解酶，作为生物催化剂可随机作用于直链淀粉分子内部的α-1,4糖苷键，迅速地将直链淀粉分子切割为短链的糊精或寡糖，使淀粉的粘度迅速下降，淀粉与碘的反应逐渐消失，这种作用称为液化作用，生产上又称α-淀粉酶为液化淀粉酶。α-淀粉酶不能水解淀粉支链的α-1,6糖苷键，因此最终水解产物是麦芽糖、葡萄糖和α-1,6键的寡糖。 本实验通过淀粉遇碘显蓝色，糊精按其分子量的大小遇碘显紫蓝、紫红、红棕色，较小的糊精（少于6个葡萄糖单位）遇碘不显色的呈色反应，来追踪α-淀粉酶作用于淀粉基质的水解过程，从而了解酶的性质以及动力学参数。 三、激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活力的影响
C肽的测定和临床意义
C肽的测定和临床意义 LIA正常值：空腹：1.0±0.23ng/ml；当口服葡萄糖后，60分中出现高峰血值： 3.1ng/ml 所谓C肽是指胰岛素原（由86个āā组成，分子量9000道尔顿，它的结构是由Ins及连接肽两部分组成，连接肽有35个āā组成）它在胰岛素原转化酶作用于分解时，与Ins的AB 两链相接的CA1赖、CA2精、Bc1精及Bc2精等四个氨基酸分离形成的31个氨基酸的多肽。 正常人24小时尿中排出C肽为36±4ug。幼年型糖尿病者为 1.1±0.5ug.；成年型糖尿病者为24±7ug。C肽清除率与肌酐清除率无明显关系。C肽的清除滤较Ins微高。C肽为 5.1±0.6ml/min,后者为 1.1±0.2ml/min.每日C肽排出量相当于胰岛分泌量的5％，占Ins 总量的0.1％，因此C肽的测定可应用于临床。 C肽具有如下特点：（1）在胰岛的?细胞的分泌中，Ins与C肽总克分子量相等。（2）胰岛素半衰期为 4.8min,而C肽为11分钟胰岛素原为17.5分钟。 (3) 胰岛素在肝肾内分解 而C肽不被分解是完整链从肾脏排出。(4) C肽无生物学活性,但具有很强的种属特异性,与抗胰岛素无交叉免疫反应。.由于胰岛素原的浓度还不到C肽的十分之一,故一般测得C肽(总C肽)可代表血中的游离C肽. C肽测定的临床意义: （1）可反映机体胰岛?细胞的分泌功能，特别是对外源性胰岛素治疗的病人,可测定C肽,因为外源性胰岛素制剂中不含C肽，以及?-细胞分泌时胰岛素和C肽分子数相等.经临床上同时测定血清胰岛素和C肽浓度是平行相关的.由此可推断内源性胰岛素分泌情况. 胰岛素和C肽是等摩尔浓度由胰岛?-细胞分泌.在达到体循环前途径肝脏,肝对C肽的摄取量很少,而对胰岛素的摄取约20-40%。C肽在外周血的降解较胰岛素慢，于是外周血中C肽和胰岛素相比C肽要高数倍。故C肽更能反映?-细胞的分泌功能。 （2）C肽测定对糖尿病患者的分型和低血糖症的鉴别有指导意义 成年型糖尿病患者内源性胰岛素分泌量比常人稍高，葡萄糖浓度也高，胰岛素和C肽浓度也上升。在幼年型糖尿病引起胰岛素绝对分泌不足，故血清C肽浓度明显降低。 幼年型糖尿病根据病情可分为易变和稳定二类亚型。有的幼年型糖尿病抗－胰岛素效价升 高，而C肽浓度不升高，给与糖负荷后，58％的稳定性幼年型糖尿病患者C肽浓度升高，而易变型患者不升高。可见稳定性幼年型患者虽然在基础情况下内源性胰岛素分泌不足，但胰岛的?-细胞上有一定的储备能力.这些患者在治疗时可给予适量的口服降糖药. 在成年型糖尿病患者血循环中C肽浓度与是否需用胰岛素治疗有关.需用胰岛素治疗患者,在负荷试验后,C肽浓度未见升高,而能为口服药物控制患者,C肽浓度升高.所以对成年型患者测定C肽 ,可为患者选择胰岛素或口服降糖药提供有力的参考.
α-淀粉酶抑制剂的研究进展
目录 摘要 (1) 关键词 (1) Abstract (1) Key words (1) 引言 (2) 1 α-淀粉酶抑制剂的介绍 (2) 1.1 α-淀粉酶抑制剂的来源 (2) 1.2 α-淀粉酶抑制剂的特性研究 (3) 2 α-淀粉酶抑制剂的制备 (4) 2.1 来源于天然植物的α-淀粉酶抑制剂 (4) 2.11 豆类植物 (5) 2.12 麦类植物 (5) 2.13 齿苋类植物 (6) 2.14 其他植物 (7) 2.2 来源于微生物的α-淀粉酶抑制剂 (7) 3 α-淀粉酶抑制剂的分离纯化 (8) 4 α-淀粉酶抑制剂的检测方法 (9) 4.1 碘比色法 (9) 4.2 3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法 (9) 5 α-淀粉酶抑制剂的筛选方法 (10) 6 α-淀粉酶抑制剂的研究进展 (11) 6.1 国内外研究概况 (11)
α淀粉酶抑制剂的研究进展 摘要：α-淀粉酶抑制剂是一种糖苷水解酶抑制剂。抑制糖类消化吸收药物，减少糖分的摄取，降低血糖和血脂含量，还可作为抗虫基因。目前在医学和农业上具有广泛的用途。本文对α-淀粉酶抑制剂的制备、检测、筛选方法、特性以及发展进行了综述，并对其前景作了展望。 关键词：α-淀粉酶抑制剂，制备，检测，筛选方法，特性Research progress of α-amylase inhibitor Abstract:α-amylase inhibitor is a kind of glycoside hydrolase inhibitor, It can be potentially use as medicines of diabetes owing to inhibiting glucose from being absorbed in the digestive tracts. Which can reduce ingestion of sugar and blood fat contet and has hypoglycemic activity, and its gene can be used as insect-resistant genes in crops breeding. There is comprehensive, application in agriculture and medicine . The preparation、detection、screening methods、characteristics and development of the α-amylase inhibitors were reviwed in this paper, and the prospects were forecasted. Key words:α-amylase inhibitor, preparation, detection, screening methods, characteristics .
七年级生物：探究唾液对淀粉的消化作用(附教学反思)
初中生物新课程标准教材 生物教案( 2019 — 2020学年度第二学期 ) 学校： 年级： 任课教师： 生物教案 / 初中生物 / 七年级生物教案 编订：XX文讯教育机构
探究唾液对淀粉的消化作用(附教学反思） 教材简介:本教材主要用途为通过学习生物这门课程，可以让学生打开对世界的认识，提高自身的见识，本教学设计资料适用于初中七年级生物科目, 学习后学生能得到全面的发展和提高。本内容是按照教材的内容进行的编写，可以放心修改调整或直接进行教学使用。 〖教学目标〗 1.知识： 通过探究唾液对淀粉的消化作用，说明淀粉在口腔中已经开始被消化。 2.能力： 通过探究活动使学生掌握科学研究的基本方法，让学生针对实际现象做出合理的解释和验证，以培养学生解决实际问题的能力和决策能力，培养创新精神。 3.情感态度与价值观： 通过探究活动培养学生的团结协作精神；通过收集唾液等操作活动培养学生严谨求实的科学态度。 〖设计思路〗 本节探究活动以“分组探究”模式开展，因为探究唾液对淀粉的消化作用关键有三步：一是制备淀粉糊并取定量；二是收集唾液；三是水温调节控制。所以我把学生分成三人一组，
每人做一步，这样既可保证每个环节都得到探究又可节省时间。该模式突出以学生为主体的原则，使每个学生都有参与的机会，都能掌握一些科学研究的方法。淀粉糊的制备、唾液的收集方法由教师提供并指导学生完成。教学中应注意的问题是淀粉糊的浓度不宜太大，以免消化不完全。还应给学生解释不同人的唾液中唾液淀粉酶的含量不等，为确保淀粉消化完全，收集的唾液应尽可能纯一些，这样就要求学生在收集唾液之前要漱口。 〖学校及学生状况分析〗 我校地处太行山脚下，教学条件与城市相比较为简陋，但我校为重点中学，教学设施与本县其他学校相比又较为优越，但还不能满足每个学生的探究需求，只能以小组探究模式展开，由于教学资源有限，探究的内容也要受到限制，不能一课多探。 学生大多来自农村，求知欲望强烈，学习态度积极，回答问题踊跃，但学习方法相对比较传统，缺乏创新意识，质疑能力差，在教学过程中需要教师引导才能发现问题。 〖教学设计（课堂实录）〗 〖教学反思〗 通过这次探究活动，锻炼了学生的探究技能，提高了组织能力，并激发了学生的创造性思维，培养交流协作精神。假设的提出、方案设计和验证假设等是教师引导的结果，也是学生利用科学研究方法主动探究的结果。学生们掌握了这种方法后，就能够利用这种方法和已
(整理)α-淀粉酶综述
α-淀粉酶综述 佚名2013-10-06 摘要：α-淀粉酶分布十分广泛，遍及微生物至高等植物。α-淀粉酶是一种十分重要的酶制剂，大量应用于粮食加工、食品工业、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业等，是应用最为广泛的酶制剂之一。本文概述了α-淀粉酶的发现和应用发展史、分离纯化及结构的研究史、催化机制及其研究史、工业化生产和应用现状与发展趋势等。 关键词：α-淀粉酶发现应用分离纯化结构催化机制研究史发展趋势 α- 淀粉酶( α- 1,4- D- 葡萄糖- 葡萄糖苷水解酶) 普遍分布在动物、植物和微生物中, 是一种重要的淀粉水解酶。其作用于淀粉时从淀粉分子的内部随机切开α-1，4糖苷键，生成糊精和还原糖。由于产物的末端残基碳原子构型为α构型，故称α-淀粉酶。现在α-淀粉酶泛指能够从淀粉分子内部随机切开α-1，4糖苷键，起液化作用的一类酶。 1 α-淀粉酶的发现和应用史 1.1 α-淀粉酶的发现 啤酒是最古老的酒精饮料，发酵是其关键步骤，其中所包含的糖化过程就是把淀粉转化为糖。这个转化过程的机理一直都没有被弄清楚，直到淀粉的发现。 在19世纪早期，许多科学家都在研究谷物提取物中淀粉的消化机理。Nasse（1811年）发现，从生物体中提取的淀粉能过被转化为糖，而从被沸水杀死的植物细胞中提取的淀粉不能被转化为糖。Kirchhoff（1815年）做了一个巧妙的实验。他将4份的冷水加入到2份的淀粉中，并边加边搅拌。之后加入20份的沸水使其形成一层厚厚的淀粉糊。在淀粉糊还是余温的时候，加入被粉碎的麸质（或麦芽），然后在40－60°列式温度下水浴。1－2小时后发现，淀粉糊开始缓慢液化。8－10小时后，淀粉糊被转化为一种甜的溶液。之后，他将其通过过滤和蒸发浓缩得到了糖浆，品尝后发现，其和发酵液一样甜。在操作的过程中，他注明了实验过程中仅添加了非常少的麸质，并且得到的糖浆与淀粉的量成正比。此外，如果在加入麸质前加入几滴高浓度的硫磺酸，最终就没有糖生成。从这个实验中他得到结论1）麸质是一种能够使温水中的淀粉粉末转化为糖的物质。2）作为种子发芽的结果，相比种子内的物质而言，麸质能过将更多的淀粉转化为糖。至此,Kirchhoff奠定了发现谷物中一种能够将淀粉转化为糖的蛋白质的基础。
胰岛素检测的临床意义
胰岛素检测的临床意义集团标准化工作小组 #Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#
胰岛素检测的临床意义 一、血胰岛素检查 血胰岛素检查，可以判定糖尿病患者是1型患者还是2型患者。主要适合于没有使用胰岛素治疗的患者，可在空腹及餐后2小时抽血进行测定，正常情况下空腹胰岛素水平应该为5～30μu/ml，而餐后水平应比空腹高出4～5倍。如果病友的胰岛素水平明显降低，就称之为绝对缺乏，可见于1型糖尿病；如果并没有明显减少，而表现为血糖升高，就称为相对缺乏，是因为胰岛素发挥作用的环节出现故障，常见于存在胰岛素抵抗的2型糖尿病病友。 二、糖尿病是由于人体胰岛素的绝对或相对缺乏引起的。也许糖尿病病友们很想知道自己到底能生产多少胰岛素，是绝对缺乏胰岛素还是相对缺乏胰岛素，很想知道自己患的是1型糖尿病还是2型糖尿病怎样才能知道就非常有必要接受血胰岛素检查或C肽检查。 一般说来，血胰岛素检测，主要适合于没有使用胰岛素治疗的患者，可在空腹及餐后2小时抽血进行测定，正常情况下空腹胰岛素水平应该为10-25mU/dL，而餐后水平应比空腹高出4-5倍。如果病友的胰岛素水平明显降低，就称之为绝对缺乏，可见于1型糖尿病；如果并没有明显减少，而表现为血糖升高，就称为相对缺乏，是因为胰岛素发挥作用的环节出现故障，常见于存在胰岛素抵抗的2型糖尿病病友。
C肽检测：即使在糖尿病病友接受外来胰岛素治疗的情况下，也不影响C 肽检测结果。此时如果通过检查血中的胰岛素水平来评价机体产生胰岛素的能力，显然就要受到注射胰岛素的影响，结果肯定不准确。而通过C肽检查则仍能准确的反映机体自己产生胰岛素的量，不会受外来胰岛素的影响。C肽检测测定方法与胰岛素检测相同，也是在空腹及餐后某时刻抽血。正常情况下，餐后C肽比空腹C肽水平要高4-5倍。 总的说，胰岛素测定，可评定尚未用胰岛素治疗病友的胰岛功能；而C肽测定，可评定已用胰岛素治疗病友的胰岛功能。
淀粉酶及其应用
淀粉酶及其应用 0 引言 淀粉酶分布非常广泛，是人们经常研究的一种酶。从纺织工业到废水处理，这些酶都有不同规模的应用。 淀粉酶是淀粉降解酶。它们广泛存在于微生物、植物和动物体中。它们将淀粉及相关的聚合物分解为带有具体淀粉分解酶特征的产品。最初，淀粉酶一词用来指可以水解直链淀粉、支链淀粉、肝糖及其降解产品中α-1，4-糖苷键的酶(本菲尔德(Bernfeld)，1955年；费希尔(Fisher)和斯坦(Stein)，1960年；迈拜克(Myrback)和纽慕勒(Neumuller)，1950年)。它们水解相邻葡萄糖单体之间的键，产生带有具体用酶特征的产品。 近年来，人们发现了很多与淀粉及相关多糖结构降解有关的新型酶，并对其进行了研究(鲍伊(Boyer)和英格尔(Ingle)，1972年；博诺考尔(Buonocore)等人，1976年；格里芬(Griffin)和福格蒂(Fogarty)，1973年；福格蒂(Fogarty)和格里芬(Griffin)，1975年)。 (1)有一些微生物源可以劈开这些结构中的α-1，4或α-1，4和／或α-1，6键，人们将现在已经或将来可能对这些微生物源工业化生产有重大影响的酶分为六种(福格蒂(Fogarty)和凯利(Kelly)，1979年)。 (2)水解α-1，4键和绕过α-1，6键的酶，比如α-淀粉酶(内作用淀粉酶)。 (3)水解α-1，4键，但不能绕过α-1，6键的酶，比如β-淀粉酶(把麦芽糖当作一个重要的终端产品来生产的外作用淀粉酶)。 (4)水解α-1，4和α-1，6键的酶，比如淀粉葡糖苷酶(葡萄糖淀粉酶)和外作用淀粉酶。 (5)仅水解α-1，6键的酶，比如支链淀粉酶和其它一些脱支酶。 (6)优先水解其它酶对直链淀粉和支链淀粉所起的作用产生的短链低聚糖中α-1，4键的酶，比如α-葡萄糖苷酶。 (7)将淀粉水解为一连串非还原环状口葡糖基聚合物，称为环糊精或塞查丁格(Sachardinger)糊精的酶，比如浸麻芽孢杆菌(Bacillus macerans)淀粉酶(环糊精生成酶)。 1 淀粉 在描述淀粉分解酶的作用方式和性质前，有必要来讨论一下这种天然基一一淀粉的特性。淀粉是所有高等植物中主要储备碳水化合物的。在有些植物中，淀粉占整个未干植物的70％。淀粉是不溶于水的细小颗粒。这些颗粒的大小和形状常常由植物母体决定，具有植物品种的特征。当把淀粉颗粒置于水中加热时，颗粒中的连接氢键变弱，颗粒开始膨胀、凝胶化。最终，它们根据多糖的浓度或形成糊状物或形成弥散现象。淀粉来自于植物，比如玉米、小麦、高梁、稻米的种子，或木薯、马铃薯、竹芋的茎根，或来自于西谷椰子的木髓。玉 米是淀粉的主要商业原料，通过湿磨生产工艺便可获得商品淀粉(博考特(Berkhout)，1976年)。直链淀粉和支链淀粉的特性见表1。 表1直链淀粉和支链淀粉的比较 性质 直链淀粉 支链淀粉 基本结构 基本直线 分岔 在水溶液中稳定性 回生 稳定 聚合度 C.103 C.104～105 平均链长 C.103 C.20～25 β淀粉酶水解 87％ 54％
淀粉酶
一、淀粉 ?1、淀粉的性状及组成 ?淀粉为白色无定形结晶粉末 ?形状有圆形、椭圆形和多角形三种 ?一般含水分高、蛋白质少的植物的淀粉颗粒比较大些，多成圆形或椭圆形，如马铃薯、木薯等。 淀粉的性状及组成 ?碳44.4％，氢6.2％，氧49.4％ ?分为直链淀粉和支链淀粉 ?普通谷类和薯类淀粉含直链淀粉17％～27％，其余为支链淀粉； ?而粘高粱和糯米等则不合直链淀粉，全部为支链淀粉。 ?直链淀粉聚合度约100～6000之间 ?遇碘反应是纯蓝色 淀粉的性状及组成 ?支链淀粉是由多个较短的α-1,4糖苷键直链结合而成。每2个短直链之间的连接为α-1,6糖苷键。 ?聚合度约1000～3000,000之间，一般在6000以上。 ?遇碘呈紫红色反应。 2、淀粉的特性 ?糊化：淀粉在热水中能吸收水分而膨胀，最后淀粉粒破裂，淀粉分子溶解于水中形成带有粘性的淀粉糊。 ?第一阶段：淀粉缓慢地可逆地吸收水分 ?第二阶段：当温度升到大约65℃时，淀粉颗粒经过不可逆地突然很快地吸收大量水分后膨胀，粘度增加很大。 ?第三阶段：当温度继续升高，淀粉颗粒变成无形空囊，可溶性淀粉浸出，成为半透明的均质胶体。 3、酶解法 酶解法是利用专一性很强的淀粉酶及糖化酶将淀粉水解为葡萄糖的方法。 酶解法可分为两步： 第一步，利用α-淀粉酶将淀粉液化； 第二步，利用糖化酶将糊精或低聚糖进一步水解转化为葡萄糖。生产上这两步分别称为液化和糖化。由于在该过程中淀粉的液化和糖化都是在酶的作用下进行的。因此酶解法又称为双酶法或多酶法。 ?优点：1、酶解法是在酶的作用下进行的，反应条件较温和，不需要耐高温高压或酸腐蚀的设备； ?2、酶作为催化剂的特点是专一性强，副反应少，故水解糖液纯度高，淀粉转化率高； ?3、可在较高的淀粉乳浓度下水解。 ?4、酸解法一般使用10-12Bx（含18%--20%淀粉）的淀粉乳，而酶解法可用20—23Bx （含34%--40%淀粉）的淀粉乳，并且可以采用粗原料。 ?5、用酶解法制得的糖液较纯净、颜色浅、无苦味、质量高，有利于糖液的充分利用。 ?6、双酶法工艺同样适用于大米或粗淀粉原料，可避免淀粉在加工过程中的大量流失，减少粮食消耗。 缺点：酶解法反应时间较长，设备要求较多，且酶是蛋白质，易引起糖液过滤困难。当然，随着酶制剂生产及应用技术的提高，酶解法制糖将逐渐取代酸解法制糖。 葡萄糖的分解反应 葡萄糖（失水）5`-羟甲基糠醛+甲酸
胰岛素释放的测试
胰岛素释放的测试 Final revision on November 26, 2020
胰岛素释放的测试 本试验做法与注意事项均与葡萄糖耐量试验相同。已确诊为可吃含面粉100克的馒头，未确诊者用75克葡萄糖。 正常人口服葡萄糖后，随血糖的上升，血浆胰岛素水平也迅速上升，高峰一般在服糖后1小时出现且为空腹值的5－10倍，然后逐渐下降，至3小时应接近空腹水平，即胰岛素释放试验与糖耐量试验同步。 1、糖尿病病人的胰岛素释放试验曲线可分三种类型： （1）胰岛素分泌减少型。患者空腹血浆胰岛素水平很低，口服100克馒头后，仍然很低，无高峰出现，说时患者胰岛素分泌绝对不足，β细胞的功能衰竭，见于胰岛素2型糖尿病病人或2糖尿病病人的晚期，提示必需采用胰岛素治疗。 （2）胰岛素分泌增多型。患者空腹血浆胰岛素水平正常或高于正常，刺激后曲线上升迟缓，高峰在2小时或3小时，其峰值高于正常（但仍低于无糖尿病而体重相似的单纯肥胖者），提示患者胰岛素相对不足，多见于非胰岛素依赖型的肥胖者，应严格控制饮食，增加运动，积极减轻体重。
（3）胰岛素释放障碍型。患者空腹血浆胰岛素可高可低，但刺激后曲线上升延缓，且峰值低于正常人，此型应用磺脲类药物治疗有效。 2、参与正常值及参考病理值（x±SD）μu/ml 葡萄糖-C肽释放试验的参考值和临床意义 参考值： 空腹C肽／L（±／ml）。 峰时在30～60min，峰值达基础值的5～6倍以上。临床意义： C肽释放试验的做法与注意事项与葡萄糖耐量试验，胰岛素释放试验相同，它的临床意义是：（1）测定C肽，有助于糖尿病的临床分型，有助于了解患者的胰岛功能。 （2）因为C肽不受胰岛素抗体干扰，对接受胰岛素治疗的患者，可直接测定C肽浓度，以判定患者的胰岛β细胞功能。
淀粉酶活力测定实验报告
淀粉酶活力测定实验报告 淀粉酶活力测定实验报告实验三、淀粉酶活性的测定实验报告 实验四、淀粉酶活性的测定 一、实验目的: 1、了解α - 淀粉酶和β - 淀粉酶的不同性质及其淀粉酶活性测定的意义; 2、学会比色法测定淀粉酶活性的原理及操作要点。 二、实验原理: 淀粉酶存在于几乎所有植物中，特别是萌发后的禾谷类种子，淀粉酶活力最强，其中主要是α-淀粉酶和β-淀粉酶。根据α-淀粉酶和β-淀粉酶特性不同，α-淀粉酶不耐酸，在pH3.6以下迅速钝化;β-淀粉酶不耐热，70? 15min 则被钝化。测定时，使其中一种酶失活，即可测出另一种酶的活性。 淀粉在淀粉酶的催化作用下可生成麦芽糖，利用麦芽糖的还原性与3,5-二硝基水杨酸反应生成棕色的3-氨基-5-硝基水杨酸，测定其吸光度，从而确定酶液中淀粉酶活力(单位重量样品在一定时间内生成麦芽糖的量)。 三、实验用具: 1、实验设备 研钵,具塞刻度试管,离心管，分光光度计，酸度计，电热 恒温水浴锅，离心机，电磁炉。 2、实验材料与试剂 (1)0.1mol/l pH5.6的柠檬酸缓冲液:A液:称取柠檬酸20.01g，定容至 1000ml;B液:称取柠檬酸钠29.41g，定容至1000ml;取A液55ml与B液145ml混匀。 (2)1%可溶性淀粉溶液:1g淀粉溶于100ml 0.1mol/l pH5.6
的柠檬酸缓冲液; (3)1%3,5-二硝基水杨酸试剂:称取3,5-二硝基水杨酸1g、NaOH 1.6g、酒石酸钾钠30g，定容至100ml水中，紧盖瓶塞，勿使CO2进入; (4)麦芽糖标准溶液:取麦芽糖0.1g溶于100ml水中; (5)pH 6.8的磷酸缓冲液: 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解，用 0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至 6.8，加水稀释至1000ml即得。 (6)0.4mol/L的NaOH溶液; (7)1%NaCl溶液。 (8)实验材料:萌发的谷物种子(芽长约1cm) 四、操作步骤 1、酶液提取:取6.0g浸泡好的原料，去皮后加入10.0mL 1%的NaCl 溶液，磨碎后以2000r/min 离心10min，转出上清液备用。取上清液1.0ml，用pH 为6.8的缓冲溶液稀释5倍，所得酶液。 2、a- 淀粉酶活力测定 (1) 取试管4支,标明2支为对照管,2支为测定管。 (2) 于每管中各加酶液lml ,在 70?士0.5? 恒温水浴中准确加热15min ,取出后迅速用流水冷却。 (3) 在对照管中加入4m1 0.4mol/L氢氧化钠。 (4) 在4支试管中各加入1ml pH5.6的柠檬酸缓冲液。 (5) 将4支试管置另一个40?士 0.5? 恒温水浴中保温15min ,再向各管分别加入40?下预热的1,淀粉溶液 2m1,摇匀,立即放入40?恒温水浴准确计时保温 5min。取出后向测定管迅速加入4ml 0.4mol/L氢氧化钠,终止酶 活动,准备测糖。
淀粉酶抑制剂-来自baidu百科
能抑制α-淀粉酶的抑制剂 如链霉菌YM-25菌株产生的hairm；链霉菌S. corchoruchii菌株产生的paim以及链霉菌S. dimorph ogenes菌株产生的萃他丁(trestatin)等都是α-淀粉酶抑制剂，它们对不同来源的α-淀粉酶均显示出强的抑制作用，但不抑制β-淀粉酶和β-糖苷酶。 以萃他丁为例：它含有A,B,C三个组分的α-淀粉酶抑制剂属于低聚糖同系物。它是无色粉末，紫外光谱呈末端吸收，对蒽酮、酚-硫酸呈阳性反应，对坂口、红四唑呈阴性反应。Trestatin对猪胰α-淀粉酶、曲霉α-淀粉酶、枯草杆菌α-淀粉酶都有抑制作用，但不抑制β-淀粉酶和β-葡萄糖苷酶。 国外α-淀粉酶抑制剂研究起步较早，早在上世纪四十年代就有小麦种子中α-淀粉酶抑制剂的报道[5~7]。它是一种电迁移率为0.2，分子量为21000的蛋白质。但在随后的25年间很少有这方面的报道[8]。之后Shainkin和Birk[9]提出小麦粉中存在两种α-淀粉酶抑制剂，并阐述了它们的分离和性质。它们的电迁移率不同，对不同来源的α-淀粉酶专一性不同。从后来的研究[10~14]知道：它们在小麦种子中是多分子形式的蛋白质，能不同程度的抑制昆虫和哺乳动物的淀粉酶。 1945又在普通大豆上有过报道[15~16]，1972年α-淀粉酶抑制剂曾经在微生物上有过报道，因其在医药上的价值而被广泛研究。α-淀粉酶抑制剂在20世纪70年代被深入研究，在20世纪80年代和90年代，由于发现其在医学上的重要性，尤其在抑制糖尿病和高血糖以及对昆虫选择性控制等方面具有重要作用而加速研究[17]。 70年代以来，已研究发现100多种来自植物和微生物的抑制α-淀粉酶的活性物质，有的已经进入临床实验[18]。微生物来源的糖苷水解酶抑制剂的筛选研究在近些年来已成为比较活跃的领域之一，尤其在联邦德国和日本。现已报道的这类酶抑制剂20~30种。Namiki等报道从一株链霉菌发酵液中分理出一种新的寡糖类α-糖苷水解酶抑制剂Adiposin。体内实验Trestatins对胰腺或唾液的α-淀粉酶有很强的抑制作用，并能降低血糖和血脂的浓度，是一种新的α-淀粉酶抑制剂[19]。 国内酶抑制剂方面的研究始于70年代末，福建省微生物所从土壤中筛选到产生的淀粉酶抑制剂的产生菌S-2-35菌株，并对其代谢产物的分离及其理化性质进行深入研究，研究成果显著[20]，上海医药工业研究所在80年代初就开始与日本东京微生物化学研究所，日本麒麟啤酒和美国辉瑞公司等合作从土壤中寻找新的有为生物产生的生理物质的研究，建立淀粉酶抑制剂等的筛选模型。国内研究突出得是河北科学院生物研究所从链霉菌中获得产生α-淀粉酶抑制剂的菌种S-19-1，是国内首次从淡紫灰类群中筛选出该抑制剂菌株，建立适合S-19-1菌株的发酵工艺，并对其化学性质进行研究。发酵滤液中的α-淀粉酶抑制剂活性超过70％。经BALB小鼠试
唾液淀粉酶对淀粉的消化作用要点
“唾液淀粉酶对淀粉的消化作用”的实验改进 北京市八角中学刘馥花 前言： 北京版初中生物教材（第一册）第四章生物的营养，第二节人和动物的营养中的[实验]唾液的消化作用。要求学生分组实验，人人动手。但是由于上课时间有限，且学生在取唾液时有一定的难度，需要教师上课时做思想工作；再有本次实验所需的实验用具过多，教师在准备时也有很大的难度。于是，我们针对学生的实际情况，根据学校的设备进行了实验改进。保证了学生实验的顺利进行并达到了预期的实验结果。 1.进行实验改进的原因： 1.1 做这个实验所需的仪器很多： 本实验需要的仪器有：大、小烧杯、试管、酒精灯、温度计、三脚架。我校初一每班平均近40人，那么所需的仪器如下：（以人教版教材为例计算） 仪器名称酒精灯试管温度计大烧杯小烧杯三脚架总计 需要数量（个）20 40 20 20 20 20 140 从表中可以很清楚地看到酒精灯、试管、温度计、烧杯总计有140件。对于实验设备齐全地学校来说，是不成问题的，对于我们普通学校，就有一定的难度，而且教师准备实验也要花去很多时间。 1.2 制备淀粉浆糊与取唾液需要一定的教学时间。 实验步骤的第一步是：将淀粉煮成浆糊，需要6——10分钟，之后还要取唾液，时间也需要6——8分钟。即便两步同时做，也需要10分钟左右。这样就占了一节课近1/4的时间。后边的步骤还很多，一节课下来根本就做不完实验，常常是同学们没看到结果就下课了，不能进行实验分析，不能达到实验目的。 1.3取唾液的过程中，学生的纪律不易保证。 取唾液的过程，要做好学生的思想工作和指导。有的学生觉得有趣，互相取笑，有的同学觉得恶心、不愿意做，不能保证实验的顺利进行。教师要在课前拿出一定的时间来进行学生的思想教育工作，组织教学。 2.实验的改进： 2.1 用淀粉纸代替淀粉浆糊效果比较好。 选择淀粉纸的标准：吸水性强、有韧性、洁白。通过多次实验比较了白报纸、过滤纸后发现用过滤纸做淀粉纸效果最好。
实验七尿淀粉酶活性测定
实验七尿淀粉酶活性测定 淀粉酶（AMY或AMS在体内的主要作用是水解淀粉，它随机地作用于淀粉分子内的 a—1, 4糖苷键生成葡萄糖、麦芽糖、寡糖及糊精。血清中的淀粉酶主要有胰型（P型）和 唾液型（S型）及其亚型同工酶组成，P型淀粉酶主要来源于胰腺，S型淀粉酶主要来源于唾 液腺。正常淀粉酶因分子量小，故可从肾小球滤过而由尿中排出。 【目的】 1、验证淀粉酶的催化作用。 2、观察淀粉及其水解产物分别与碘反应呈现的颜色变化。 【原理】血清及尿中的淀粉酶来源于胰腺和唾液腺，正常血清与尿中有一定活性。 Winslow 氏法测定尿和血清中淀粉酶活性是将试样作等比稀释，观察一系列试样在规定的 37C、30分钟的条件下，恰好能将0.1%淀粉溶液1ml水解（指加入碘液后不再呈蓝色）的 酶量定为淀粉酶的一个活性单位，乘以尿的稀释倍数，即可得知每项ml 尿液中的淀粉酶活性。 【器材】 试管（10mn X 100mr）、试管架、电热恒温水浴箱、吸管、洗耳球、滴管。 【试剂】 1 、 9%NaCl 2、0.3%碘液 3、0.1%淀粉溶液 【操作】 1 、准备尿液（自备）。 2、取 10支试管，编号，用吸管向管中加入0.9%NaCl 1ml。 3、用1ml吸管（注意应用刻度到头的）向第一管加尿液1ml，混合，再将试管中的液 体吸起，然后任其流回试管，如此重复三次，以便全管混匀，并借此冲洗吸管内壁。吸出此混合液1ml 移入第二管中。 4、用同法处理第二管使之混匀，并取出1ml 置于第三管中。依此类推，如此继续稀释 至第九管后，吸出1ml混合液弃之，这样既可获得分别含原尿液为1/2ml,1/4ml,1/8ml, ... 1/512ml 的不同浓度的尿稀释液。第十管不加尿液作为对照管。 5、从第十管起依次向各管迅速准确加入0.1%淀粉液2ml，迅速摇匀（是否充分混匀往
减肥降糖材料a-淀粉酶抑制剂简介g
白芸豆提取物 (高比例α-淀粉酶抑制剂) 产品说明与营养标签 （α--淀粉酶抑制剂（α-AI）≥40000 IU/g ，两小时淀粉糖化阻断率≥80%。） 〖警示〗：常规提取技术与一般饮食烹饪会完全破坏α-淀粉酶抑制剂活性，请认真阅读本文，并谨慎选择采购合作。 胡小能．2020年C版
白芸豆提取物(高比例α-淀粉酶抑制剂) 【简介】白芸豆提取物（主含α--淀粉酶抑制剂，俗称“淀粉阻断剂”），因提取时利用分层技术分离除去了杂质与大部分淀粉，同步利用酶解技术析出并保护了活性白芸豆水解蛋白粉（保留活性才是a--淀粉酶抑制剂），因此，本提取物主要有效成分为活性水解蛋白粉（化学名称是α--淀粉酶抑制剂，它是一种糖蛋白，分子量为56KDa）。反映在下表中即蛋白质。科学证明α--淀粉酶抑制剂具有非常强大的抑制淀粉酶水解淀粉转化为碳水化合物的能力。 【重要提示】 1）同样是叫白芸豆提取物，不要以为都有降糖减肥功能，是只有激活了白芸豆中的á--淀粉酶抑制剂，并在后续工序中分离并保护下来的提取物才有此功能。激活与保护活性牵涉到特殊提取工艺，一般提取工厂根本不知道此奥秘。 2）白芸豆提取物有没有降糖减肥功能，重要看两个指标，其一，蛋白质（活性水解蛋白粉）含量，这个近似于α-淀粉酶抑制剂的占比；其二，α-淀粉酶抑制剂活性（α-AI），单位IU/g。尤其是后者，最为关键。 3）白芸豆中同时含有白芸豆凝集素，这种植物凝集素（普通扁豆同）是一种防御性蛋白（就是植物的抵御外力侵害时的自毒护体能力），对人体尤其是心血管病人有一定危害，在加工工艺中往往通过高温灭其活性，一般水提取过程会经过高温，但α-淀粉酶抑制剂如遇高温也一样会失去活性。所以除去白芸豆凝集素必须用其它方法。一般提取工厂生产的白芸豆提取物（包括直接食用熟的白芸豆）不具备活性，原因也在此。 4）以上3条告诉你，激活与保护a--淀粉酶抑制剂活性在提取过程中，并不简单，不是谁都能生产出有活性或高活性的a--淀粉酶抑制剂。 5）并不是只有白芸豆才有a--淀粉酶抑制剂，实际上谷物（小麦、玉米、大米）与部分豆科含量都较高，但它们的提取工艺难度是一样的，只是出粉率（主要指α-淀粉酶抑制剂含有量）有差异，选择哪种提取源可以因需要决定，白芸豆并不是唯一的选择。 【产品基础信息】 商品名称：白芸豆提取物（主要成分α-淀粉酶抑制剂，占近半）
实验三、淀粉酶活性的测定实验报告
实验四、淀粉酶活性的测定 一、实验目的： 1、了解α - 淀粉酶和β - 淀粉酶的不同性质及其淀粉酶活性测定的意义； 2、学会比色法测定淀粉酶活性的原理及操作要点。 二、实验原理： 淀粉酶存在于几乎所有植物中，特别是萌发后的禾谷类种子，淀粉酶活力最强，其中主要是α-淀粉酶和β-淀粉酶。根据α-淀粉酶和β-淀粉酶特性不同，α-淀粉酶不耐酸，在pH3.6以下迅速钝化；β-淀粉酶不耐热，70℃ 15min 则被钝化。测定时，使其中一种酶失活，即可测出另一种酶的活性。 淀粉在淀粉酶的催化作用下可生成麦芽糖，利用麦芽糖的还原性与3,5-二硝基水杨酸反应生成棕色的3-氨基-5-硝基水杨酸，测定其吸光度，从而确定酶液中淀粉酶活力（单位重量样品在一定时间内生成麦芽糖的量）。 三、实验用具： 1、实验设备 研钵,具塞刻度试管,离心管，分光光度计，酸度计，电热恒温水浴锅，离心机，电磁炉。 2、实验材料与试剂 （1）0.1mol/l pH5.6的柠檬酸缓冲液：A液：称取柠檬酸20.01g，定容至1000ml；B液：称取柠檬酸钠29.41g，定容至1000ml；取A液55ml与B液145ml混匀。 （2）1%可溶性淀粉溶液：1g淀粉溶于100ml 0.1mol/l pH5.6的柠檬酸缓冲液； （3）1%3,5-二硝基水杨酸试剂：称取3,5-二硝基水杨酸1g、NaOH 1.6g、酒石酸钾钠30g，定容至100ml水中，紧盖瓶塞，勿使CO2进入； （4）麦芽糖标准溶液：取麦芽糖0.1g溶于100ml水中； （5）pH 6.8的磷酸缓冲液:取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8，加水稀释至1000ml即得。 （6）0.4mol/L的NaOH溶液； （7）1%NaCl溶液。 （8）实验材料：萌发的谷物种子（芽长约1cm） 四、操作步骤 1、酶液提取：取6.0g浸泡好的原料，去皮后加入10.0mL 1%的NaCl 溶液，磨碎后以2000r/min 离心10min，转出上清液备用。取上清液1.0ml，用pH 为6.8的缓冲溶液稀释5倍，所得酶液。 2、a- 淀粉酶活力测定 (1) 取试管4支,标明2支为对照管,2支为测定管。 (2) 于每管中各加酶液lml ,在 70℃士0.5℃恒温水浴中准确加热15min ,取出后迅速用流水冷却。 (3) 在对照管中加入4m1 0.4mol/L氢氧化钠。 (4) 在4支试管中各加入1ml pH5.6的柠檬酸缓冲液。 (5) 将4支试管置另一个40℃士 0.5℃恒温水浴中保温15min ,再向各管分别加入40℃下预热的1％淀粉溶液2m1,摇匀,立即放入40℃恒温水浴准确计时保温5min。取出后向测定管迅速加入4ml 0.4mol/L氢氧化钠,终止酶
影响淀粉酶酶活性的因素
影响淀粉酶酶活性的因素 一、目的 了解淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察温度、pH、激活剂与抑制剂对淀粉酶活性的影响。 二、原理 人唾液中淀粉酶为α—淀粉，在唾液腺细胞中合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉水解，经过一系列被称为糊精的中间产物，最后生成麦芽糖和葡萄糖。 淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖 淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色，麦芽糖、葡萄糖遇碘不变色。 唾液淀粉酶的最适温度为37－40℃，最适pH为。偏离此最适环境时，酶的活性减弱。 低浓度的氯离子能增加淀粉酶的活性，是它的激活剂。铜离子等金属离子能降低该酶的活性，是它的抑制剂。 三、试剂和仪器 1．碘液：称取2g碘化钾溶于5ml蒸馏水中，再加1g碘。待碘完全溶解后，加蒸馏水295ml，混合均匀后贮存于棕色瓶内。 2．1％淀粉溶液：称取1克可溶性淀粉放入小烧杯中，加少量蒸馏水做成悬浮液。然后在搅拌下注入沸腾的蒸馏水中，继续煮沸1分钟，冷后再加蒸馏水定容至100ml。 3．％的盐酸溶液 4．％的乳酸溶液。 5．1％的碳酸钠溶液。 6．％的氯化钠溶液。 7．％的硫酸铜溶液。 8．仪器：试管试管架吸管玻璃棒白磁板烧杯漏斗恒温水浴量筒冰浴四、操作步骤 1．淀粉酶液的制备：实验者先用蒸馏水嗽口，然后含一口蒸馏水于口中，轻嗽一、二
分钟，吐入小烧杯中，用脱脂棉过滤，除去稀释液中可能含有的食物残渣。最后将数人的稀释液混合在一起，再进行过滤，以避免个体差异。 2．pH对酶活性的影响 取4支试管，分别加入%盐酸（pH＝1），％乳酸（pH＝5），蒸馏水（pH＝7），与1％碳酸钠（pH＝9）各2毫升，再向以上四支试管中各加入2毫升淀粉溶液及淀粉酶液。混合摇匀后置于37℃水浴中保温。2分钟后，从蒸馏水试管中取出一滴溶液，置于白磁板上，用碘液检查淀粉的水解程度，待蒸馏水试管内的溶液遇碘不再变色后，取出所有的试管，各加碘液2滴，观察溶液颜色的变化。根据观察结果说明pH对酶活性的影响。 3．温度对酶活性的影响 取3支试管各加入3毫升2％淀粉溶液，另取三支试管，各加入1毫升淀粉酶液。将6支试管分为三组，每组中盛放淀粉溶液与淀粉酶液的试管各1支。三组试管分别置于0℃、37℃、70℃的水浴中，5分钟后将各组中的淀粉溶液到入淀粉酶液中，继续保温。2分钟后从37℃试管中取出一滴溶液，置于白磁板上，用碘液检查淀粉的水解程度，待37℃试管内的溶液遇碘不再变色后，取出所有的试管，各加碘液2滴，观察溶液颜色的变化。根据观察结果说明温度对酶活性的影响。 4．激活剂与抑制剂对酶活性的影响 取3支试管按下表的规定加入各种试剂。混匀后置于37℃的水浴中保温，1分钟后从1号试管中取出一滴溶液，置于白磁板上，用碘液检查淀粉的水解程度，待一号试管内的溶液遇碘不再变色后，取出所有的试管，各加碘液2滴，观察溶液颜色的变化。根据观察结果说明激活剂与抑制剂对酶活性的影响。
血糖监测的临床意义
血糖监测的临床意义 血糖监测在时间安排上并不是随意的，这里面很有讲究。那么，临床上通常选择哪些时间点检测血糖？这些时点的血糖又分别代表什么意义呢？血糖高低是反映糖尿病患者病情控制及治疗效果的可靠指标。把血糖监测简单地理解为定期查空腹血糖，这是非常片面的。理想的血糖监测应当是全天候实时监测，但在动态血糖仪（CGMS）临床尚未普及的情况下，我们只能通过选择一天中具有特殊意义的若干时点进行血糖检测，来反映患者一天当中血糖变化的全貌。血糖监测在时间安排上并不是随意的，这里面很有讲究。那么，临床上通常选择哪些时间点检测血糖？这些时点的血糖又分别代表什么意义呢？1.空腹血糖 1.1 严格地讲，空腹血糖是指隔夜禁食（饮水除外）8～12小时之后于次日早餐前所测的血糖（通常不超过早晨8点），午餐前和晚餐前的血糖不在此列。 1.2 检测空腹血糖的意义： 主要是为了了解基础状态（即非进餐状态）下的清晨血糖水平，用以评估头天晚上降糖药用量是否合适？此外，空腹血糖还可以间接反映患者基础胰岛素的分泌水平。另外，空腹血糖也可作为糖尿病的诊断标准之一。 1.3 空腹血糖升高有三种常见情况： ①药量不足：特点是睡前血糖高于空腹或与空腹血糖相差无几。原因是晚间胰岛素（或口服降糖药）用量不足或进食过多；
②黎明现象：与凌晨生长激素分泌增加有关，后者可加重肝脏和肌肉的胰岛素抵抗，导致清晨高血糖。"黎明现象"的特点是：患者凌晨4点到8点之间血糖突然明显升高，而之前未曾发生低血糖； ③苏木杰反应：是由于夜间发生低血糖以后引起空腹血糖反跳性升高，特点是凌晨3:00左右血糖低于3.9mmol/L，而空腹血糖较高。 1.4 注意：测空腹血糖最好在清晨6:00～8:00取血，采血前不用降糖药、不吃早餐、不运动。如果空腹抽血的时间太晚，所测的血糖值很难反映患者的真实情况，其结果可能偏高或偏低。偏高者主要见于"黎明现象"比较明显的糖尿病人；偏低者一般认为与空腹时间过久、肝糖元储备不足有关。 2.餐后2小时血糖 2.1 "餐后2小时血糖"是指从吃第一口饭开始计时，2小时后准时采血所测得的血糖值。如果是正在治疗的糖尿病人，查餐后2小时血糖时要跟平时一样进餐、用药。 2.2 "餐后2小时血糖"的意义： ①可以反映患者进食及降糖药用量是否合适； ②可以反映患者胰岛细胞的储备功能（即进食后食物刺激胰岛细胞追加分泌胰岛素的能力）； ③有助于2型糖尿病的早期诊断，这是因为许多早期糖尿病患者空腹血糖正常，而首先表现为餐后血糖升高； ④餐后高血糖还是导致糖尿病慢性并发症的重要因素。
唾液淀粉酶实验(借鉴文章)
唾液淀粉酶最适pH值的测定实验 实验目的 1．掌握设计性实验的基本思路，并完成设计报告。 2．掌握唾液淀粉酶最适PH的测定原理和方法。 3．熟悉影响酶促反应速度的因素。 实验原理 1．酶促反应速度受到许多因素的影响，如温度、PH、激动剂和抑制剂等。上述诸因素对唾液淀粉酶催化淀粉水解反应速度的影响，可用定性或定量的反应来观察。利用碘与淀粉机器不同程度纾解产物反应的颜色，来衡量酶促反应的速度的快慢。蓝色—紫红色—黄色，颜色由蓝变黄，表示酶促反应速度由慢到快。此为定性观察。 2.进一步利用郎伯—比尔定律来判定溶液的吸光度与溶液的浓度符合一定的比例关系。由于在被水解的程度也不一样。当唾液淀粉酶不能将完全水解时，淀粉遇碘呈蓝色，吸收波长位于660nm处。不同PH环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应程度不同，吸光度值也不同。因此，通过测量660nm处的吸光度值，可以了解PH对酶促反应的影响，吸光度最小的溶液其PH即为唾液淀粉酶的最适PH。
实验器材 仪器材料：方盘，试管架，中试管，毛刷，吸耳球，玻璃铅笔，小烧杯，白瓷板，坐标纸，漱口杯。0.1ml、0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml刻度吸管，胶头滴管，37 C恒温水浴箱，分光光度计，电磁炉。 试剂药品：0.02％淀粉溶液. 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液碘液；称取碘1g,碘酸钾2g，溶于300ml蒸馏水中。
实验步骤： 1、缓冲液的配置 pH 0.2mol/L 0.2mol/L NaH2PO4(ml) Na2HPO4(ml) 5.7 93.5 6.5 5.8 92.0 8.0 5.9 90.0 10.0 6.0 8 7.7 12.3 6.1 85.0 15.0 6.2 81.5 18.5 6.3 7 7.5 22.5 6.4 73.5 26.5 6.5 68.5 31.5 6.6 62.5 3 7.5 6.7 56.5 43.5 6.8 51.0 49.0