细胞凋亡与自噬关系的探讨论文
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细胞凋亡论文
深圳大学生命科学学院创新实验论文 □基础生物学创新实验 1.0学分 课程名称：□细胞与遗传学创新实验 1.0学分 □生化与分子生物学创新实验□生物科学1.0学分 □生物技术1.5学分实验项目来源： □创新实验课程指定实验项目 □课外科技创新实验项目：资助单位 项目编号 实验项目名称：凋亡细胞的诱导和检测 实验项目学分：0.5 指导教师：彭勇 姓名：学号：专业：生物技术 实验时间：2011年12月1日星期四 论文提交时间：2011年12月17日星期六 生物科学教学实验中心制
深圳大学生命科学学院创新实验论文 评分表 指导老师签字： 生物科学教学实验中心制
盐胁迫诱导的植物细胞凋亡 摘要：以洋葱内表皮细胞为材料，分别以0.1mol/L 0.6mol/L 1.1mol/L的NaCl溶液处理2,4,6 h后进行染色观察,以此来发现植物细胞在高盐环境下的抗逆性，并且观察细胞凋亡的典型特征。 关键词：碱性纤维素酶产生菌；分离；筛选；生长曲线 细胞凋亡或细胞程序性死亡是多细胞生物甚至单细胞生物体在内外因子的诱导下，由基因控制的一种细胞主动性死亡途径，是细胞生命活动的基本特征之一。近年来研究表明，植物的一些特定细胞除在正常生长发育的特定期间能发生细胞凋亡外，还能受理化或生物等因子所诱导发生类似细胞凋亡的典型形态和生化特征。[1]本实验旨在研究不同NaCl浓度对细胞凋亡的影响。 盐胁迫是植物的一种重要抗逆反应，对植物的生长具有重要的生理意义。盐浓度达一定值时,会破坏细胞的正常生命活动，部分细胞甚至死亡。[1]高盐胁迫下的洋葱内表皮细胞死亡也具有细胞凋亡典型的形态和生化特征。 细胞凋亡主要形态学特征有：细胞膜完整，细胞连接和微绒毛消失，细胞骨架紊乱，粘着力降低，单个细胞与临近细胞脱离；核纤层蛋白降解，染色质凝集和边缘化，裂解为碎块，细胞核最终裂解为由核膜包裹的碎块，细胞器基本保持完整，细胞皱缩，细胞膜收缩并内陷，将细胞自行分割为多个具有膜包围、内含各种细胞成分的凋亡小体。凋亡细胞不会发生细胞膜、溶酶体等膜结构的破裂，不会引起细胞内容物外溢。[2] 细胞凋亡可通过形态学观察鉴定：改良苯酚品红染色观察,可观察细胞核、染色体的形态，从而判断细胞是否凋亡。 1 材料与方法 1.1实验材料 普通洋葱1个 1.2 实验试剂 1.2.1改良苯酚品红染液： 95%乙醇、1%醋酸、Na2HPO4、Na2HPO4、1%NaOH溶液、1%HCl、甘油、苏木精、铵矾、碘酸钠（NaIO3）、冰醋酸、Hanks染液、丙醇、二甲苯、中性甲醛 1.2.2 NaCl诱导溶液： 0.1mol/L：0.2922g NaCl定容至50ml 0.6mol/L：1.7532g NaCl定容至50ml 1.1mol/L：3.2142g NaCl定容至50ml 1.3 实验预处理 取新鲜洋葱于室温下清水培养4小时，使其活化
细胞凋亡综述
Mitochondrial Roads to Ruin Two related ways in which mitochondria contribute to cell death are pictured. In the first, mitochondrial outer membrane permeabilization (MOMP) occurs when the proapoptotic Bcl-2 fami ly proteins Bax and/or Bak are activated by BH3-only proteins in response to apoptosis-induc ing signals. This results in the release of proteins of the mitochodrial intermembrane space, including cytochrome c, Smac/DIABLO, and Omi/HtrA2. Cytochrome c activates APAF-1, which ol igomerizes to form an apoptosome, that in turn recruits and activates caspase-9. The activat ed caspase-9 cleaves and activates executioner caspases. Inhibitor of apoptosis proteins (IA Ps) block caspase-9 function, and this is disinhibited by Smac and Omi. A second pathway to cell death is triggered by conditions that engage the mitochondrial permeability transition in the mitochondrial inner membrane, leading to matrix swelling and rupture of the outer mem brane. This death pathway appears to engage a necrotic form of death. While evidence suggest s that these two mitochondrial pathways are distinct, it is suspected that there is signific ant overlap between them. 综述：细胞凋亡 https://www.360docs.net/doc/8b11812908.html, 2005-8-12 18:29:15 来源：生命经纬 人体内的细胞注定是要死亡的，有些死亡是生理性的，有些死亡则是病理性的，有关细胞死亡过程的研究，近年来已成为生物学、医学研究的一个热点，到目前为此，人们已经知道细胞的死亡起码有两种方式，即细胞坏死与细胞凋亡。细胞坏死是早已被认识到的一种细胞死亡方式，而细胞凋亡则是近年逐渐被认识的一种细胞死亡方式， 细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象，在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型，而且具有重要的生物学意义及复杂的分子生物学机制。 凋亡是多基因严格控制的过程。这些基因在种属之间非常保守，如Bcl-2家族、caspase 家族、癌基因如C-myc、抑癌基因P53等，随着分子生物学技术的发展对多种细胞凋亡的过程有了相当的认识，但是迄今为止凋亡过程确切机制尚不完全清楚。而凋亡过程的紊乱可能与许多疾病的发生有直接或间接的关系。如肿瘤、自身免疫性疾病等，能够诱发细胞凋亡的因素很多，如射线、药物等。 细胞凋亡的研究历史 1．凋亡概念的形成 1965年澳大利亚科学家发现，结扎鼠门静脉后，电镜观察到肝实质组织中有一些散在的死亡细胞这些的溶酶体并未被破坏，显然不同于细胞坏死。这些细胞体积收缩、染色质凝集从其周围的组织中脱落并被吞噬机体无炎症反应。1972年Kerr等三位科学家首次提出了细胞
海商法在中国的现代起源和发展
海商法在中国的现代起源和发展 海商法是一门古老的法律，它起源于欧洲，形成于中世纪的海上贸易和运输，传播并发展到世界各地。现代海商法不仅是国内立法的渊源，而且也存在于相关的国际公约和国际惯例中，成为具有国际性和相对国际统一性的一部法律。以英国为代表的传统海商法有着悠久的历史和丰富的实践经验，长期形成的海商法教学、科研和司法与仲裁等实务，以及在国际上具有相当影响力的劳合社等机构，从各个领域推动了海商法的发展和完善。CMI和IMO等国际海事组织在推进海商法的国际化和世界统一化的进程中，制定了一系列的国际公约和规则，起到一十分重要的作用。2008年12月11日，第63届联合国大会第67次会议审议通过了联合国贸法会（UNCITRAL）提交的《联合国全程或部分海上国际货物运输合同公约》，并于2009年9月23日在荷兰鹿特丹举行签字仪式，将公约定名为《鹿特丹规则》。这是各国海商法界为海商法立法的统一和完善，在海牙规则、海牙—威斯比规则和汉堡规则的基础上进行的又一次有益的尝试。可以说，海商法的立法与实践，以及世界各国对海商法学的研究和发展，随着国际贸易的发展和人类向海洋进军的深度和广度的拓展，越来越引起法学界和实务界的关注，也为海商法这一古老法律的新发展带来了生机与活力。 海商法传入中国并见诸于法律中，最早始于清朝光绪年间。清朝政府1904年（光绪三十年）起草的《钦定大清商律》中，海船法一编便有263个条目。尽管该法律草案因清王朝的覆灭而未能颁行，但其被包含在商事立法中而且规定之具体，却成为中国海商法现代起源的标志。我国历史上第一部海商法是国民党南京政府于1929年12月30日颁布的《中华民国海商法》该法自1931年1月1日施行后又历经三次修改。[1]台湾地区的海商法沿袭了大陆法系的立法体例，以成文法典的形式制定海商法，其体例和基本内容等相对独立于其他商事立法，不仅是台湾地区的现行的重要海事法律，而且也是研究我国海商法现代起源和发展的重要法律之一。 我国是一个有着18 000多公里海岸线，470多万平方公里海域，几千个大小岛屿和60多个对外开放港口的海洋大国。广阔的水域和良好的通航条件为航运业和国际贸易业的发展提供了得天独厚的优势。同时，制定一部完整的中国海商法，也成为健全我国法律体系，保护和促进航运事业、国际贸易事业，以及开发和利用海域和海洋资源，维护海上交通安全和秩序的需要。 新中国成立后，在全面推翻旧的法律体系和废除国民党政府的六法全书后，制定一部新的[2]海商法便成为了海事立法的当务之急。1952年组建了海商法起草委员会，至1963年经
计算机网络论文-----浅析计算机网络的前沿技术
浅析计算机网络的浅析计算机网络的前沿技术计算机网络摘要：计算机网络技术是当前发展速度最快、生命力最强、对人类社会影响最大、摘要：新技术新工艺涌现最多和最猛烈的前沿技术。目前比较热门的关键技术有云计算、软交换以及IMS 等。关键词：关键词：计算机网络、云计算、软交换、IMS 21 世纪已进入计算机网络时代。计算机网络极大普及，成为了计算机行业不可分割的一部分。计算机网络，是指将地理位置不同的具有独立功能的多台计算机及其外部设备，通过通信线路连接起来，在网络操作系统，网络管理软件及网络通信协议的管理和协调下，实现资源共享和信息传递的计算机系统。而计算机网络技术则是通信技术与计算机技术相结合的产物，它在迅速地发展着，对世界、社会和人类都产生了巨大的影响。目前，计算机网络学术界和技术界对许多计算机网络的前沿技术进行着认真刻苦的研究工作。其中比较热门的研究技术涵盖了云计算、软交换以及IMS 等。一、云计算云计算(Cloud Computing)是分布式处理(Distributed Computing)、并行处理(Parallel Computing)和网格计算(Grid Computing)的发展，或者说是这些计算机科学概念的商业实现；云计算也是虚拟化(Virtualization)、效用计算(Utility Computing)、IaaS(基础设施即服务)、PaaS(平台即服务)、SaaS(软件即服务)等概念混合演进并跃升的结果。其最基本的概念，是透过网络将庞大的计算处理程序自动分拆成无数个较小的子程序，再交由多部服务器所组成的庞大系统经搜寻、计算分析之后将处理结果回传给用户。透过这项技术，网络服务提供者可以在数秒之内，达成处理数以千万计甚至亿计的信息，达到和“超级计算机”同样强大效能的网络服务。所以从最根本的意义来说，云计算就是利用互联网上的软件和数据的能力。最简单的云计算技术在网络服务中已经随处可见，例如搜寻引擎、网络信箱等，使用者只要输入简单指令即能得到大量信息。未来如手机、GPS 等行动装置都可以透过云计算技术，发展出更多的应用服务。进一步的云计算不仅只做资料搜寻、分析的功能，未来如分析DNA 结构、基因图谱定序、解析癌症细胞等，都可以透过这项技术轻易达成。笔者认为，云计算技术具备以下四个显著特征。第一，云计算提供了最可靠、最安全的数据存储中心，用户不用再担心数据丢失、病毒入侵等麻烦。大家应该都能体会到，数据保存电脑里实际上并不安全。电脑可能会因为损坏，或者被病毒攻击，导致硬盘上的数据无法恢复，而有机会接触私人电脑的不法之徒也可能利用各种机会窃取里面的数据。反之，当用户的文档保存在类似Google Docs 的网络服务上，当用户把照片上传到类似Google Picasa Web 的网络相册里，就再也不用担心数据的丢失或损坏。因
流式细胞仪检测细胞凋亡——Annexin VPI双染色法
流式细胞仪检测细胞凋亡——Annexin V/PI 双染色法 基本原理 细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，目早期识别仍有困难些细胞膜表面的改变之是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V是一种Ca+依赖的磷脂结合蛋白，最初发现是一种具有很强的抗凝血特性的血管蛋白，Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性。对PS有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此，可以建立一种用Annexin V结合在细胞膜表面作凋亡的指示并结合一种染料排除试验以检测细胞膜的完整性的检测方法。 试剂与仪器 l孵育缓冲液：10mmol/L HEPES/NaOH，PH 7.4，140mmol/L NaCl，5mmol/L CaCl2 l标记液：将FITC- Annexin V（宝灵曼公司产品）和PI加入到孵育缓冲液中，终浓度均为1ug/ml l流式细胞仪 实验步骤 1. 细胞收集：悬浮细胞直接收集到10ml的离心管中，每样本细胞为（1~5）×106，/mL 500~1000r/min离心5min，弃去培养液。 2. 用孵育缓冲液洗涤1次，500~1000r/min离心5min。 3. 用100ul的标记溶液重悬细胞，室温下避光孵育10~15min。 4. 500~1000r/min离心5min沉淀细胞孵育缓冲液洗1次。 5. 加入荧光（SA-FLOUS）溶液4℃下孵育20min，避光并不时振动。 6. 流式细胞仪分析：流式细胞仪激发光波长用488nm，用一波长为515nm的通带滤器检测FITC荧光，另一波长于560nm的滤器检测PI。 7. 结果判断：凋亡细胞对所有用于细胞活性鉴定的染料如PI有抗染性，坏死细胞则不能。细胞膜有损伤的细胞的DNA可被PI着染产生红色荧光，而细胞膜保持完好的细胞则不会有红色荧光产生。因此，在细胞凋亡的早期PI不会着染而没有红色荧光信号。正常活细胞与此相似。在
细胞凋亡及相关因素的研究进展
细胞凋亡及相关因素的研究进展 论文摘要：细胞凋亡(Apoptosis)是一种生理性死亡Physiogicalcell death，PCD)，是细胞对内外信息刺激的 应答反应，[1]它与细胞的生长、分化一样．属于最基本的 细胞学事件或过程．它决定着生物体的基本特征和转归．是胚胎发生和个体发育中清除细胞以维持细胞数目正常的调 节机制。 [2]当组织细胞发生异常调亡时，即可引起疾病的发生。一般来讲．凋亡过多会引起退行性变或早衰，调亡过少．易诱发肿瘤。[3] 因此，细胞凋亡近年来引起生命科学研究领域的广泛关注。本文仅就细胞调亡的概念及相关因素作一简要的概述。 【Summary】 Apoptosis is a kind of Physiogicalcell death and a reaction of cells to around informations stimulate .[1] It is same as cells’ growth and differentiation which belong to the basic cell subject’s incident or process.it decide living things’essential character- Istics ,and used to clear away cells to keep it rgular number’s regulation mechanism in the procees of embryo occur and individual growth.[2]there will couse ill- Ness when the organization cells come into being particularly apoptosis .Generally speaking ,more cell
高中生物 每日一题 细胞凋亡和细胞坏死的区别 新人教版必修1
细胞凋亡和细胞坏死的区别 高考频度：★★★☆☆难易程度：★★☆☆☆ 典例在线 脑缺氧、心缺血、急性胰腺炎、动脉粥样硬化等疾病都是由细胞坏死引起的。近日，厦门大学生命科学学院韩家淮教授课题组的一项研究表明，存在于人体内的一种名为RIP3的蛋白激酶，能够将细胞凋亡转换成细胞坏死，通过调控这种酶的合成，就可以调控细胞的死亡方式。下列有关叙述错误的是 A．从以上分析可知细胞坏死过程中存在基因的选择性表达 B．一些细胞的坏死对人体也有益处，比如被病原体感染的细胞在免疫系统的作用下死亡 C．抑制RIP3的活性，能在一定程度上对急性胰腺炎起治疗、防御的作用 D．在人体的癌细胞中，也可能存在控制RIP3合成的基因 【参考答案】B 基因都是一样的，D正确。 学霸推荐 1．下列有关细胞凋亡、坏死与癌变的说法，正确的是 A．细胞坏死常引起炎症；细胞癌变，代谢增强 B．细胞凋亡受基因控制；细胞癌变不受基因控制 C．细胞坏死，膜的通透性降低；细胞癌变，膜的黏着性增强 D．细胞癌变，细胞周期延长；细胞凋亡，细胞周期变短 2．下列关于细胞凋亡和细胞坏死的叙述中，错误的是 A．细胞凋亡是主动的，细胞坏死是被动的 B．细胞凋亡是生理性的，细胞坏死是病理性的 C．细胞凋亡是由基因调控的，细胞坏死是由外界因素引起的 D．细胞凋亡是急性的，细胞坏死是慢性的 3．下列实例不属于细胞凋亡的是 A．清除被病原体感染的细胞 B．骨折时造成的细胞死亡
C．成熟生物体中细胞的自然更新 D．人体内红细胞的正常死亡 4．细胞凋亡也称为细胞编程性死亡，其大致过程如图所示。下列有关叙述错误的是 A．细胞皱缩、染色质固缩表明细胞处于衰老状态 B．图示过程只发生在胚胎发育过程中 C．吞噬细胞吞噬凋亡小体与细胞膜的流动性密切相关 D．细胞凋亡是由遗传物质控制的，与细胞坏死有明显区别 5．香烟中含有大量的有害物质，如尼古丁等会造成吸烟者肺部细胞的死亡。这种细胞的死亡过程属于A．生理性死亡B．正常衰亡 C．细胞坏死D．细胞凋亡 答案 1．【答案】A 【解析】细胞坏死常引起炎症反应，以清除坏死细胞；细胞癌变时，具有无限增殖能力，代谢增强，A 正确；细胞癌变是原癌基因和抑癌基因突变的结果，导致细胞受突变后的基因的控制，B错误；细胞癌变后，细胞表面的糖蛋白减少，细胞的黏着性降低，C错误；细胞癌变后，分裂增殖失控，细胞周期变短，D错误。 2．【答案】D 3．【答案】B
海商法复习资料.(DOC)
海商法复习资料 第一章绪论（简答、论述） 1.海商法的概念： 1）最广义：海法（包括海上公法和海上私法）了解 ①海上公法： a.海洋法中有关航海的部分 b.海事行政法 c.海事经济法 d.海事劳动法 e.海上刑事法 ②海上私法：较广义层面的“海商法” 2）较广义：调整特定的海上运输关系和船舶关系的法律关系的总称。理解 3）狭义理解：理解 ①海商法：围绕海上经营活动形成的，属于私法性质的法 ②海事法：解决因海上事故而产生的纠纷的法律 总结：凡与海洋活动有关的法律都是ML，随着人类海洋活动范围的扩大而扩大， ML的含义也处于逐渐演变的过程。 2.海商法的调整对象：（是私法关系，但也涉及公法）必须掌握 1）海上运输中发生的特定社会关系 ①有关海上运输的合同关系：主要围绕着提单、租船合同、托航合同、旅客运输合同、救助合同、保险合同等所发生的合同当事方之间的民事法律关系。 ②海上侵权关系：主要指因船舶碰撞、船舶污染海洋环境等行为所引起的油污加害方与油污受害方之间的法律关系。 ③海上特殊风险产生的社会关系：如共同海损中有关各方分摊与补偿的关系，海事赔偿责任限制中的船舶所有人、救助人、责任保险人与各限制性债券人之间的关系等。 上述特定关系主要表现为民事权利义务关系，特别是债券债务关系，属民法范畴。这是海商法所调整的主要内容。 2）与船舶有关的特定社会关系（涉及公法）
①船舶的法律地位：主要围绕船舶国籍、船舶航行权、沿海运输权等方面发生的传播所有人与船旗国或沿海国有关当局之间的关系。 ②船舶物权：主要指涉及船舶所有权、船舶抵押权、船舶优先权、船舶留置权等问题时所产生的船舶所有人与各债权人，或者与法院或仲裁机构之间的关系。 ③船舶安全：主要是围绕船舶适航条件、船员配备等所发生的船舶所有人与港口有关当局的关系。 ④船舶管理：主要指国家就航运管理、航运政策以及船舶登记等方面与海上运输组织、船舶所有人和经营人等之间的关系。 3.海商法的性质：私法性质了解 1）海商法（CMC）：民法性质 2）海商法（ML）（无定论）： ①民商法特别法 ②国际经济法分支 ③国际贸易法的组成部分 a.交叉学科 b.独立法律部门 4.海商法的形式：理解 1）国内立法：（内国法） 由一国立法机关制定的法律规范 2）国际条约：两个或两个以上国家为确定相互权利义务关系而订立的协议 ①普遍性条约：1974 SOLAS（Safety of Life at Sea），1972 海上避碰规则，1989救助公约，海牙规则，汉堡规则，鹿特丹规则等 ②区域性条约：PSC东京备忘录，巴黎备忘录，印度备忘录等 ③双边条约：中英，中美，中日海运协定 3）国际航运惯例：国际航运惯例通常是指在国际航运中，对同一性质的问题所采取的类似行动，经过长期反复实践逐渐形成的，为大多数航运国家所接受的，具有法律拘束力的不成文的行为规则。了解概念4）判例 5）学说 5.我国ML的立法特点：理解 1）优点：快速建立起ML制度
新技术论文-搜索引擎研究
摘要 搜索引擎，通常指的是收集了因特网上几千万到几十亿个网页并对网页中的每一个词（即关键词）进行索引，建立索引数据库的全文搜索引擎。当用户查找某个关键词的时候，所有在页面内容中包含了该关键词的网页都将作为搜索结果被搜出来。在经过复杂的算法进行排序后，这些结果将按照与搜索关键词的相关度高低，依次排列，方便用户查找。 如何更加快捷、准确地查找到用户所需的网络信息资源，是各大搜索引擎服务提供商和计算机网络研究人员的研究热点。作为计算机专业的学生，搜索引擎技术对我们有很大的诱惑力，了解搜索引擎的发展现状、原理和技术手段，从算法的角度来认识搜索引擎，是我们必须掌握的知识之一。 文章概述了搜索引擎的出现与发展，原理与技术。 关键词：搜索引擎、基本原理、搜索算法、技术
目录 1绪论 (3) 1.1 搜索引擎的出现与发展 (3) 1.1.1 搜索引擎的出现 (3) 1.1.2 搜索引擎的发展 (4) 2 搜索引擎的原理与技术 (5) 2.1 分类目录检索 (5) 2.1.1 主题分类法 (6) 2.1.2 学科分类法 (6) 2.1.3 分面组配分类法 (6) 2.1.4 图书分类法 (6) 2.2 关键词检索 (6) 2.2.1 从互联网上抓取网页 (8) 2.2.2 建立索引数据库 (8) 2.2.3 在数据库中搜索 (8) 2.2.4 对搜索工作进行处理排序 (8) 结论 (9) 参考文献 (10)
1.绪论 近几年，随着网络的不断发展和壮大，搜索引擎越来越成为人们生活中重要的一部分，找资料、查地图、听音乐，只有想不到的，没有搜索不到的。中国十年多来互联网的不断发展,造就出1.3亿的网民，搜索引擎也出现空前的火热。在互联网出现的初期，雅虎、新浪、网易等大型门户网站拥有着绝对多的浏览量，原因在于当初的大部分网站在技术上无法与门户网站相媲美，多数质量较差，内容不丰富，所以大型门户网站优秀的网页设计风格，大量的信息及时更新赢得了用户的认可，创造了第一次互联网的高峰。然而随之近年来网络技术的普及与应用，建立一个专业的网站已经不存在太多的技术门槛。于是看好互联网前景的网站纷纷涌现在我们的面前。相对比而言在某些领域中，大型门户网站的页面风格反而不如一些中小型网站的界面漂亮，同时各种分类的行业网站也慢慢的兴起，使得搜索引擎越来越成为人们生活中必不可少的实用工具。 搜索引擎的出现，整合了众多网站信息，恰恰起到了信息导航的作用。通用搜索引擎就如同互联网第一次出现的门户网站一样，大量的信息整合导航，极快的查询，将所有网站上的信息整理在一个平台上供网民使用，于是信息的价值第一次普遍的被众多商家认可，迅速成为互联网中最有价值的领域。互联网的低谷由此演变为第二次高峰。大家熟知的搜索引擎Google、百度、雅虎等是通用搜索引擎现如今的杰出代，他们为互联网的发展做出了重要的贡献。然而，搜索引擎行业也不是一家公司就可以独撑天下的，从百度的上市、yahoo中国的并购一系列动作表明，如今的搜索引擎大战如同门户网站初期的竞争一样激烈。相信，通用搜索引擎在经历过一段时间的角逐后，也将会继续维持几大服务商各自分控一部分市场的局面。 总而言之搜索引擎改变了人们的生活给人们的生活工作学习带来了巨大的帮助。 1.1搜索引擎的出现与发展 1.1.1搜索引擎的出现 搜索引擎从1990年原型初显，到现在成为人们生活中必不可少的一部分，它经历了太多技术和观念的变革。 出现之前，互联网上就已经存在许多旨在让人们共享的信息资源了。这些资源当时主要存在于各种允许匿名访问的FTP 站点。为了便于人们在分散的FTP 资源中找到所需的东西，1990年，加拿大麦吉尔大学（McGillUniversity）的几个大学生开发了一个软件Archie。它是一个可搜索的FTP文件名列表，用户必须输入精确的文件名搜索，然后Archie会告诉用户哪一个FTP地址可以下载这个文件。Archie实际上是一个大型的数据库，再加上与这个大型数据库相关
流式细胞仪检测细胞凋亡操作流程 Annexin V 检测细胞凋亡
A n n e x i n V检测细胞凋亡 实验原理 Annexin V 是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS) 由质膜内侧翻向外侧。Annexin V 与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。由于在发生凋亡时，磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的改变，因此，与DNA 碎片检测比较，使用Annexin V 可以更早地检测到凋亡细胞。因为细胞坏死时也会发生磷脂酰丝氨酸外翻，所以Annexin V 常与鉴定细胞死活的核酸染料(如PI 或7-AAD)合并使用，来区分凋亡细胞(Annexin V+/核酸染料-) 与死亡细胞(Annexin V+/核酸染料+)。 实验用品 1. 一次性12?75mm Falcon试管。 2. PBS缓冲液：含0.1%NaN3，过滤后2-8?C保存。 3. 微量加样器和加样头。
4. Annexin V Binding Buffer缓冲液（Cat. No. 66121E）：浓度为 10?，使用时，用稀释为1?浓度的应用液。 5. Annexin V试剂与核酸染料： Annexin V 核酸染料 Annexin V-Biotin（Cat. No. 65872X）Streptavidin-FITC（Cat. No. 13024D） PI（Cat. No. 66211E）或7-AAD（Cat. No. 34321X） Annexin V-FITC（Cat. No. 65874X）PI（Cat. No. 66211E）Annexin V-PE（Cat. No. 65875X）7-AAD（Cat. No. 34321X） 6. FACS流式细胞仪：上样检测。 7. CELLQuest软件：获取和分析试验数据。 8. Annexin V检测对照管： Annexin V A-阴性对照B-补偿1 C-补偿2 Biotin SAv-FITC Annexin V-Biotin 和SAv-FITC PI 和SAv-FITC PE 未染色细胞Annexin V-PE 7-AAD FITC 未染色细胞Annexin V-FITC PI 操作步骤 1.取Falcon 试管，按标本顺序编好阴性对照管和标本管号。 2.使用冷的PBS缓冲液洗细胞两次，再用1?Binding Buffer缓冲液制成1?106 细胞/ml的悬液。 3.Falcon试管中加入100 μl细胞悬液。 4.按以下体积加入Annexin V与核酸染料： 1阴性对照-- 2单阳1 AV-FITC - 4样本AV-FITC PI 5.轻轻混匀，室温（20?C ~25?C）避光处放置15分钟。
中药诱导肿瘤细胞凋亡研究进展
中药诱导肿瘤细胞凋亡研究进展 (作者：__________ 单位：___________ 邮编：___________ ) 【关键词】中药肿瘤细胞凋亡 细胞凋亡(apoptosis)又称为程序性死亡，是由基因控制的细胞自我消亡过程。其特征是质膜保持完整性，而核染色质固缩，内源性内切酶激活，将染色质DNA降解成寡聚小体，电泳带谱表现为特征性梯状带，无整个组织的破坏和炎性反应。1992年英国科学家Hickman 等首次提出可以将诱导肿瘤细胞凋亡作为以后肿瘤治疗研究的主要目标和手段，诱导肿瘤细胞凋亡治疗逐渐成为国际肿瘤研究的一个热点。近年研究表明，许多中药的有效成分或其提取液具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用，中药诱导肿瘤细胞凋亡的作用机制主要有以下几个方面。 1阻滞肿瘤细胞增殖周期 一般而言，每一代肿瘤细胞的增殖周期都需要依次经历G1期、S期、G2期、M期四个阶段。许多中药的有效成份能够作用于细胞周期的某一环节，从而使细胞增殖周期受阻，诱导其发生凋亡。用藤梨根氯仿提取液处理人肺腺癌A549细胞，可以对细胞周期产生影响，
表现为G0/G1期细胞增多，S期和G2/M期细胞减少，出现G0/G1 期阻滞，并呈现一定的剂量依赖关系，伴PI染色检测的细胞凋亡率 增加，提示藤梨根氯仿提取液可抑制A549细胞的有丝分裂，诱导肿瘤细胞凋亡［1］。Li等［2］报道黄连提取物及其主要成分小檗碱都可以在不影响CyclinB1 mRNA表达情况下，抑制CyclinB1蛋白活性，但不抑制Cyclin A ~ Cyclin E蛋白活性，使cdc2激酶活性降低，细胞进入有丝分裂受阻滞，被阻滞在G2期。某些药物可以阻滞肿瘤细胞由S期进入G2/M期而诱发其凋亡。左云飞等［3］研究发现，榄香烯对肝癌腹水瘤细胞系Hca2F25/CL216A3的G0/G1期细胞无明显作用，主要作用在S期，阻止细胞由S期进入G2/M期，从而抑制肿瘤生长。并观察到在G0/G1期前出现一个凋亡特异的AP峰。黄志煜等［4］报道小檗胺可抑制人白血病Jurkat细胞的增殖，使细胞阻滞在S期，G0/G1期细胞比例也有减少，同时并也观察到肿瘤细胞凋亡明显增加。 较多的中药通过阻滞肿瘤细胞于G2/M期而发挥诱导细胞凋亡的作用。马东礼等［5］在研究榄香烯对HeLa细胞的作用时发现，HeLa 细胞增殖受到明显的抑制，细胞的分裂能力降低，绝大多数细胞阻滞在 G2/M期。张曼颖等⑹研究发现，刺五加叶皂苷能诱导肺癌细胞SpcjA1凋亡，细胞周期分析发现，G0/G1和S期细胞比例明显降低，G2/M期细胞明显升高，提示刺五加叶皂苷作用也是使SPC A1细胞阻滞于 G2/M期。毛兰素是从鼓槌石斛中分离得到的，也可以阻滞人 早幼粒细胞白血病HL〕60细胞于G2/M期，并伴Bcl［2表达下调，Bax 表达上调，诱导肿瘤细胞凋亡［7］。
海商法推荐书目
海商法推荐书目 海商法书目 杨良宜系列： 杨良宜.国际商务仲裁.北京：中国政法大学出版社, 1997. 杨良宜,杨大明.国际商务游戏规则-英美证据法.北京:法律出版社,2002. 杨良宜,汪鹏南.英国海上保险条款详论.大连:大连海事大学出版社,1996.杨良宜.提单及其付运单证.北京:中国政法大学出版社,2001. 杨良宜.期租合约.大连:大连海事大学出版社,1997. 杨良宜.程租合约.大连:大连海事大学出版社,1998. 杨良宜.国际商务游戏规则-英美合约法.北京:中国政法大学,1998. 杨良宜.国际货物买卖.北京:中国政法大学出版社,1999. 杨良宜.海事法.大连:大连海事大学出版社,1999. 杨良宜.外贸及海运诈骗-货物索赔新发展.大连:大连海运学院出版社,1994.杨良宜.信用证.北京:中国政法大学出版社,1998. 杨良宜.滞期费.大连:大连海事大学出版社,1996. 教材系列 司玉琢.海商法.北京:法律出版社,2003. 於世成,杨召南,汪淮江.海商法.北京:法律出版社,1997. 张湘兰,邓瑞平,姚天冲.海商法论.武汉:武汉大学出版社,2001. 赵德铭.国际海事法学.北京:北京大学出版社,1999. 张丽英,邢海宝.海商法教程.北京:首都经济贸易大学出版社,2002. 沈木珠.海商法比较研究.北京:中国政法大学出版社,1998. 蔡镇顺.海商法研究.成都:四川大学出版社,2002. 郁志轰,沈秋明.海商法学.杭州:杭州大学出版社,1996.
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计算机新技术论文云计算
前景广阔的技术---云计算 1 、什么“云计算”？ 著名的美国计算机科学家、图灵奖 (Turing Award) 得主麦卡锡 (John McCarthy, 1927-) 在半个世纪前就曾思考过这个问题。 1961 年，他在麻省理工学院 (MIT) 的百年纪念活动中做了一个演讲。在那次演讲中，他提出了象使用其它资源一样使用计算资源的想法，这就是时下 IT 界的时髦术语“云计算” (Cloud Computing) 的核心想法。 云计算中的这个“云”字虽然是后人所用的词汇，但却颇有历史渊源。早年的电信技术人员在画电话网络的示意图时，一涉及到不必交待细节的部分，就会画一团“云”来搪塞。计算机网络的技术人员将这一偷懒的传统发扬光大，就成为了云计算中的这个“云”字，它泛指互联网上的某些“云深不知处”的部分，是云计算中“计算”的实现场所。而云计算中的这个“计算”也是泛指，它几乎涵盖了计算机所能提供的一切资源。 麦卡锡的这种想法在提出之初曾经风靡过一阵，但真正的实现却是在互联网日益普及的上世纪末。这其中一家具有先驱意义的公司是甲骨文 (Oracle) 前执行官贝尼奥夫 (Marc Benioff, 1964-) 创立的Salesforce 公司。 1999 年，这家公司开始将一种客户关系管理软件作为服务提供给用户，很多用户在使用这项服务后提出了购买软件的意向，该公司却死活不干，坚持只作为服务提供，这是云计算的一种典型模式，叫做“软件即服务” (Software as a Service，简称 SaaS)。这种模式的另一个例子，是我们熟悉的网络电子邮箱 (因此读者哪怕是第一次听到“云计算”这个术语，也不必有陌生感，因为您多半已是它的老客户了)。除了“软件即服务”外，云计算还有其它几种典型模式，比如向用户提供开发平台的“平台即服务” (Platform as a Service，简称 PaaS)，其典型例子是谷歌公司 (Google) 的应用程序引擎 (Google App Engine)，它能让用户创建自己的网络程序。还有一种模式更彻底，干脆向用户提供虚拟硬件，叫做“基础设施即服务” (Infrastructure as a Service，简称 IaaS)，其典型例子是亚马逊公司 (Amazon) 的弹性计算云 (Amazon Elastic Compute Cloud，简称 EC2)，它向用户提供虚拟主机，用户具有管理员权限，爱干啥就干啥，跟使用自家机器一样。 从二十世纪末到现在的短短十来年时间里，云计算领域的发展非常迅猛，微软 (Microsoft)、谷歌、甲骨文、亚马逊等大公司都已先后杀了进去。很多大学、公司及政府部门展开了对云计算的系统研究。云计算俨然成为了 IT 领域中前途最光明的方向。受此热潮影响， 2007 年，电脑公司戴尔 (Dell) 的头脑开始发热，梦想将“云计算”一词据为己有 (申请为商标)，结果遭到了美国专利商标局的拒绝，美梦破碎。 云计算的早期服务对象大都是中小用户，但渐渐地，一些知名的大公司也开始使用起了云计算。比如纽约时报 (New York Times) 就曾利用亚马逊的云计算，将一千多万篇报道在两天之内全部转成了 PDF 文件。这项工作如果用它自己的计算机来做，起码要一个月的时间，是不可承受之重。另一方面，从亚马逊的角度讲，它提供云计算也并不是想学雷峰。为了保证自己主业——网络销售——的顺畅，亚马逊的硬件资源是按峰值需求配置的，平时所用的只有十分之一。提供云计算服务，将这部分空置资源转变为利润，赚它个盆满钵溢，对亚马逊来说无疑是很实惠的。亚马逊如此，谷歌、微软等巨头的几十
关于细胞凋亡与疾病
细胞凋亡与疾病 细胞凋亡指机体细胞在发育过程中或在某些因素作用下，通过细胞内基因及其产物的调控而发生的一种程序性细胞死亡。细胞凋亡对胚胎发育及形态发生组织内正常细胞群的稳定、机体的防御和免疫反应、疾病或中毒时引起的细胞损伤、老化、肿瘤的发生进展起着重要作用[1]。自1972年Kerr提出细胞凋亡这一概念后，从20世纪80年代末期开始成为肿瘤病因学、病理学研究热点，近几年的研究在凋亡信号转导途径、细胞凋亡的生化反应机制及细胞凋亡的调控基因，细胞凋亡与疾病的关系等方面都取得了显著的进展[2]。文章就细胞凋亡与疾病的关系进行综述。 1、概述 早在1972年，Kerr等已发现从细胞形态、超微结构和生化变化等方面来分析，细胞有两种死亡形式：一种是早被熟知的细胞坏死(Necrosis)，另一种是细胞凋亡(Apoptosis)[3]。 1.1概念 凋亡(apoptosis)一般是指机体细胞在发育过程中或在某些因素作用下，通过细胞内基因及其产物的调控而发生的一种程序性细胞死亡(programmed cell death)。一般表现为单个细胞的死亡，且不伴有炎症反应。细胞凋亡又称程序性细胞死亡(PCD)，指的是细胞将自身裂解为许多膜小泡的一种精
确调节的细胞死亡过程，是有机体为保持自身组织稳定、调控自身细胞的增殖和死亡之间的平衡、由基因控制的细胞主动性死亡，一种正常的生理过程[4]。细胞凋亡参与调节机体细胞生长与更新间的平衡稳定，在机体发育过程中和成年机体新陈代谢中都起着重要作用。但近年来的研究表明，细胞凋亡还与多种疾病(如发育畸形、神经退化症、自身免疫性疾病、肿瘤、艾滋病等)的发生发展有关，从而使细胞凋亡研究成为生命科学研究的热点之一[5]。 2、细胞凋亡的形态学和生化特征 2.1 形态学特征 细胞凋亡时伴随着细胞膜表面、细胞质和核的一系列形态学改变，首先出现细胞体缩小、胞核固缩、胞浆密度增高，继而胞膜内陷将细胞自行分割为多个有膜包绕的凋亡小体(apoptotis bodies)。凋亡小体几乎立即被邻近的吞噬细胞所吞噬。吞噬细胞内的凋亡小体能停留数小时，可借助组织切片染色用光学显微镜观察[6]。在凋亡发生的全过程中，细胞膜一直保持完整。胞内容物不释放出来，所以不引起周围的炎症反应。同一组织中，不同细胞发生凋亡的过程并不同步[7]。 2.2生化特征 细胞凋亡时，早期Ca2+内流引起胞质中Ca2+浓度持续升高，激活了Ca2+依赖性核酸内切酶，于180碱基对处将DNA 切断，胞质内蛋白质发生交联，产生单个核小体和穴聚核小
有关英美法,有关海商法学习的那些事儿
有关英美法，有关海商法学习的那些事儿 海商法（Maritime Law）在英国可谓是名副其实的历史悠久，早在16世纪意大利伦巴德商人在伦敦经商的时候，早期的海商法就已经颇具规模了。英国的海商法对世界的影响之大，是许多人未曾了解到的，我们知道，早在1860年英国人用鸦片和坚船利炮敲开中国封闭了几个世纪的封建大门的时候，国人才开始真正认识到英国人强大的海上霸权，然而早在这之前，英国的航海业就已经蓬勃发展起来了。国父孙中山上李鸿章书中曾经说过，窃尝深维欧洲富强之本，不尽在于船坚炮利、垒固兵强，而在于人能尽其才，地能尽其利，物能通其用，货能畅其流。伴随着英人航海贸易的发达，对于海上航行以及船货等要素所产生的纠纷日益增多，因此海商法也就有了它成长壮大的空间。直至今日，世界贸易及货物传递的百分之七十五以上的分额仍然依赖海上运输，而且手段及物流的程序相较百年前更加的复杂，特别是集装箱贸易在上世纪60年代兴起之后，海上贸易及海上贸易的法规出现了一个空前的发展时期。 英人的海商法之所以在世界上占有举足轻重的作用，并非仅仅由于它的渊源，而是由于世界上common wealth国家的众多，目前，新加坡、香港、马来西亚、爱尔兰、澳大利亚、加拿大完全沿用着英国的海事保险法，意大利、西班牙等欧洲国家以大于50％的比例使用英海事保险法，美国虽然与英国海商法不同，但由于同属普通法系，有的州仍可以沿用英国的判例进行判案。而享誉世界的伦敦劳合社（the Lloyd’s），更是占据着全世界海上保险市场的7成多的分额。考虑到回国就业的因素，很多人认为中国的海商法跟英国的海商法差之甚远，认为学了也是白学，我在这里不想完全否定这些摸象的盲人们，但我想在上海海事大学和大连海事大学学习的战友们他们最清楚为什么很多人互相争着复印英国海商法的著作，甚至有心人能在《中华人民共和国海商法》中找到非常多与英国海商法相类似甚至几乎一致的条文。 海商法专业（LLM）介绍 我在这里说的海商法的学习，当然就是指英国海商法的学习，首先我们必须明确这是在英国普通法下的一个法律的分支。明确了这一点，我们就会懂得要想学好这门专业是十分不容易的。 首先，英国的研究生学习决不同于本科，即使LLM被称作taught master，我们所谓的授课式教育，但研究生的学习更多的是偏重学生的自学，自我研究能力的培养，因此上课时教授完全是brief guide，重要的知识点到为止，许多次重要的或者需要拓展的一句带过甚至就不讲，因为他认为这些都是你课下应该去看应该去掌握的，这就造成了一堂课上的信息量奇大，别说很多中国学生无法承受，甚至许多外国学生跟上都很费力，中国学生往往听的都是云里雾里，本身就有语言问题，面对如此巨大的知识灌输很多人都承受不了，我所了解的大部分中国学生甚至到了最后复习课仍然连一半都听不懂。这就需要占用大量的课余时间去复习掌握，那些寄希望于课上而下课不看书的是绝对不行的。 其次，既然是一门特别法，法学知识的背景，特别是英美法知识背景就非常的重要。海商法学习中保险、租船、国际货物买卖合同，要求学生是带着学习过英国合同法、英国程序法等法律知识的背景来学习的，这就给中国学生造成了一个巨大的障碍，许多具有中国大学法学院学士文凭的学生在国内学习的是大陆法，对于英美法接触的非常少，特别是对英美法中的判例法十分的头痛，我们都知道案例在英国法律中占有极端重要的作用，但如何学习、