环境水样中多氯联苯类化合物的检测
环境水样中多氯联苯类化合物的检测
---应用Sepaths测定多氯联苯类化合物
前言：多氯联苯(PCBs)目前已知的有209种同类物,具有高毒、难降解、强脂溶和生物累积等特性,因此不仅被联合国环境规划署列入第一批持久性有机污染物,也被世界野生动物基金会(WWF)列为67种(类)环境激素中的一种。目前有关多氯联苯检测的国家标准如下:《海产食品中多氯联苯的测定》(GB/T5009.190-2003)、《纺织品多氯联苯的测定》(GB/T20387-2006)和《饲料中多氯联苯的测定气相色谱法》(GB/T8381.8-2005),目前水中多氯联苯的测定还没有国家或行业的标准方法,甚至尚未出现多个实验室验证,证明是较成熟的统一方法,国内已经开展了一些关于水中多氯联苯测定方法的研究,较为权威的是《水和废水监测分析方法(第四版)中的固相圆盘萃取气相色谱质谱法》。本文中应用了47mm的C18固相萃取盘,上样速度控制在40-60mL/min之间，在选取的26种同类物质中，结果稳定，回收率良好。
实验部分：
1.1仪器与试剂
Sepaths全自动固相萃取系统（莱伯泰科有限公司，美国波士顿）
DryVap多通道定量浓缩系统（Horizon Technology公司，美国波士顿）
Aglient7890A(GC)-5975C（MS）（安捷伦气质联用仪）
Aglient19091J-433,30m*250um*0.25um（安捷伦气相色谱柱）
C18固相萃取盘47mm(Horizon Technology公司，美国波士顿）
乙酸乙酯（色谱纯，Fischer公司）
甲醇（色谱纯，Fischer公司）
二氯甲烷（色谱纯，Fischer公司）
去离子水
1.2样品制备
取有代表性的环境水样500mL，加20%甲醇进行样品改性，调pH值到4.5
固相萃取步骤如下：
收集洗脱液，除水，浓缩至1mL，二氯甲烷定容，待测。
1.3检测仪器的检测条件
1.3.1气相色谱条件
升温程序：80℃，保持2分钟，8℃/min升至300℃，保持5min。
1.3.2质谱分析条件
扫描范围45—550m/z；离子源温度：250℃；离子化能量：70eV；扫面方式：定性分析为全扫描（SCAN），定量分析为选择离子（SIM）扫描。
1、结果
图150ppb同一水平下样品和标准品（ZK）对比
图2100ppb同一水平下样品和标准品（ZK）对比
2、结论：
本文建立了盘式固相萃取法检测法测定环境水样中多氯联苯类化合物的分析方法。两组加标水平，26种物质总的平均回收率在102.12%-112.64%之间，总重复性（RSD）平均在10.81%-16.15%之间。实验结果表明，该方法稳定良好。
测试环境管理规范
软件测试环境重要性及意义 稳定、可控勺测试环境，可使测试人员花费较少时间完成测试用例勺执行 可保证每一个被提交勺缺陷被准确勺重现 ; 经过良好规划和管理勺测试环境， 可以尽可能勺减少环境勺变动对测试工作 勺不利影响， 1. 测试环境重要性及意义 稳定、可控勺测试环境，可使测试人员花费较少时间完成测试用例勺执行 可保证每一个被提交勺缺陷被准确勺重现 ; 经过良好规划和管理勺测试环境， 可以尽可能勺减少环境勺变动对测试工作 勺不利影响，并可以对测试工作勺效率和质量勺提高产生积极勺作用。 2. 测试环境搭建原则 测试环境搭建之前，需要明确以下问题： 所需计算机数量，以及对每台计算机勺硬件配置要求，包括 存和硬盘勺容量、网卡所支持勺速度等 ; 部署被测应用勺服务器所必 需勺操作系统、数据库管理系统、中间件、 WEB 服务器以及其他必需组件勺名称、版本，以及所要用到勺相关补丁勺版本 ; 用来执行测试工作勺计算机所必需勺操作系统、数据库管理系统、中间件、 WEB 艮务器以及其他必需组件的名称、版本，以及所要用到的相关补丁的版 本; 是否需要专门的计算机用于被测应用的服务器环境和测试管理服务器的环 境的备份; 测试中所需要使用的网络环境 ; 执行测试工作所需要使用的文档编写工具、测试管理系统、性能测试工具、 缺陷跟踪管理系统等软件的名称、版本、 License 数量，以及所要用到的相 关补丁的版本。对于性能测试工具，则还应当特别关注所选择的工具是否支 持被测应用所使用的协议 ; 测试数据的备份与恢复是否需要 ; 模拟实际生产环境或用户环境搭建。 3. 测试环境管理 、设置专门勺测试环境管理员 每条业务线或测试小组应配备一名专门勺测试环境管理员，其职责包括： u 测试环境搭建。包括操作系统、数据库、中间件、 WE 曲艮务器等必须软件 的安装，配置，并做好各项安装、配置手册编写 ； u 记录组成测试环境的各台机器硬件配置、 IP 地址、端口配置、机器的具 体用途，以及当前网络环境的情况 ； 管理规 范 CPUl 勺速度、内
环境中微生物的地检测和分离纯化
环境中微生物的检测和分离纯化 姓名：王韬 班级：生76 组号：7-2组 同组人：袁堂谧 实验日期：2009-11-12 一、实验目的： 1.熟悉常用微生物培养基配置方法。 2.联系无菌操作技术。 3.学习单菌落划线分离法。 4.通过实验认识环境中微生物的分布。 二、实验原理： 1.微生物的分离与纯化：从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的 过程称微生物的分离与纯化。常用的是平板分离法。为了获得某种微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养、酸碱度、温度和氧的条件要求不同，而供给他们适宜 的培养条件，或加入某些抑制剂造成一支其他菌生长而利于此菌生长的环境。 2.平板菌落计数法：平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释，使其中的微生物充分 分散成单个细菌，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长 繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品的一个单细胞。该计数法 最大的优点是可以获得活菌的信息。 三、实验材料： 土壤悬液（稀释100倍），未知菌菌落平板，无菌水，取液器，培养箱，培养皿，无菌涂棒，接种环，接种针，酒精灯。 四、实验步骤： (一)培养基的制备（提前准备）： 肉汤蛋白胨培养基： 牛肉膏 2g 蛋白胨 4g NaCl 2g 蒸馏水 400mL 琼脂 8g 1.称量：按上述配方称量各类物质。 2.溶解：在400mL水中溶解牛肉膏、蛋白胨和NaCl，混合加热溶解。 3.调pH值：调至7.2-7.4 4.过滤（本实验无需过滤） 5.加凝固剂：加入称量好的琼脂，混合均匀。 6.分装 7.包扎和灭菌 8.倒平板 (二)从土壤中分离微生物 1.采土样（已事先准备）：选择较肥沃的土壤，铲去表层土，挖5-20cm深度的或
实验3-环境微生物的检测
实验三环境微生物的检测 一、实验目的 1.了解周围环境中微生物的分布情况。 2.懂得无菌操作在微生物实验中的重要性。 3.了解四大类微生物的菌落特征。 二、实验原理 在我们周围的环境中存在着种类繁多的、数量庞大的微生物。土壤、江河湖海、尘埃、空气、各种物体的表面以及人和动物体的口腔、呼吸道、消化道等都存在着各种微生物。由于它们体积微小，人们用肉眼无法观察到它们个体的存在。但是只要稍加留意，我们就可以在发霉的面包、朽木上看到某些微生物群体。这些现象表明，自然界只要有微生物可以利用的物质和环境条件，微生物就可以在其上生长繁殖。据此，我们在实验室里就可以用培养基来培养微生物。 培养基是用人工配制的、适合微生物生长繁殖和产生代谢产物用的混合养料。其中含有微生物所需要的六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、生长因子、气体和水分。此外，根据不同的微生物的要求，在配制培养基时还需用酸液或碱液调节至适宜的pH。配制好的培养基必须进行灭菌。所谓灭菌是指采用各类的物理或化学因素，使物体内外的所有微生物丧失其生长繁殖能力的措施。经过灭菌后的物体是无菌的。消毒是与灭菌完全不同的概念，它是指用较温和的物理因素杀死物体表面和内部病原微生物的一种常用的卫生措施。 灭菌的方法较多，广泛使用的是高温灭菌，其中最常用的是高压蒸汽灭菌法。此法是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的。在1.05kg/cm2的蒸汽压力下，温度可达121℃。一般只要维持15~20min，就可杀死一切微生物的营养体和它们的各种孢子。 微生物的接种技术是生物科学研究中的一项最基本操作技术。为了确保纯种不被杂菌污染，在整个接种过程中，必须进行严格的无菌操作。在实验过程中必须牢固树立无菌概念，经常保持实验台及周围环境的清洁，严格无菌操作，避免杂菌的污染，这是保证实验成功的必要条件。
EPA 8082气相色谱法测定多氯联苯
USEPA 8082A-2007 气相色谱法测定多氯联苯 1.0适用范围 方法8082用于检测多氯联苯浓度如固-液萃取物中的亚老格尔或单独的多氯联苯化合物。开口毛细管柱用于电子捕获器或电解传导检测器。对比于填充柱，熔融石英开口毛细管柱提高了检测性能，即更好的选择性、更好的灵敏度及更快的检测速度。下表所列的目标化合物都可由单柱或者双柱分析系统来检测。这些PCB化合物都有此法试验过，且此法还适用于其它的化合物。
International Union of Pure and Applied Chemistry 国际理论和应用化学联合会 1.2亚老格尔是种多组分的混合物。当样品中含有多于一种的亚老格尔，就需要更好的分析技术人员来进行定性及定量分析。对于环境降解中的亚老格尔或者人为降解中的亚老格尔分析也需要专门分析技术人员，因为降解后的多组分混合物对比于亚老格尔标准峰参数将有显著不同。 1.3作为亚老格尔的PCBs定量分析与很多常规仪器检测类似，但当亚老格尔在环境中暴露而降解后则有很大的不同。因此，本方法提供了从检测结果中挑选单个PCB化合物的程序。上面所列的19种PCB化合物均用此法进行了检测。 1.4当知道PCB存在的情况下，PCB化合物的检测可以得到更高的精确度。因此这种方法依据需求的计划需要，可以用于检测亚老格尔、单个PCB化合物或者PCBs总合。此化合物的方法对降解的亚老格尔检测具有特殊意义。然而，分析者在使用这个化合物分析方法时应当谨慎，即在调整条件时应基于亚老格尔的浓度。 1.5基于单柱分析的化合物确定应当由另一根柱子来验证，或者有至少一种定性方法来支持。第二根气相色谱柱的分析条件能够确认第一根柱子的检测法。在灵敏度允许的情况下气相色谱质谱（GC/MS）8270方法可以作为一个确认方法。 1.6此方法同样描述了一个双柱方法选择。这个方法需要配置一个硬件是两根分析柱相连成为单一进样口。此法需要在双柱分析时使用一个进样口。分析者应当注意的是在仪器受机械压力影响一些样品进样周期短，或者分析高污染的样品时，双柱方法可能并不合适。 1.7分析者必须针对所研究的目标分析物选择柱子、检测器、校准方法。必须建立特殊基质操作步骤、针对每个分析基质的稳定的分析系统及仪器校准系统。提供色谱实例和气相色谱条件。 1.8亚老格尔的方法检出限变化范围在水中为0.054到0.90μg/kg ，在土壤中为57到70μg/kg。可以利用表一来估计定量限。 1.9这个方法在使用时受到限制，或者在监督之下才能使用。分析者要在使用气相色谱方面有丰富的经验，又或者能熟练的阐述气相色谱原理。每个分析人员都必须能够证明具有使用这个方法得到合理的数据的能力。 2.0方法概述 2.1用适当的样品基质萃取技术对一定量体积或一定质量的样品（液体1升，固体2到30克）进行萃取。 2.2液体样品在中性条件下用二氯甲烷依据方法3510（分液漏斗）、方法3520（连续液液萃取），或其他适合的方法进行萃取。 2.3固体样品以正己烷-丙酮（1∶1）或者二氯甲烷-丙酮（1∶1），用方法3540（索氏法），
多氯联苯
多氯联苯化学品安全技术说 明书 第一部分：化学品名称化学品中文名称：多氯联苯 化学品英文名称：polychorinated biphenyls 中文名称2：氯化联苯 英文名称2：polychlorodiphenyls 技术说明书编码：2197CAS No.： 1336-36-3 分子式： C 12H 10-xCIx 分子量：第二部分：成分/组成信息 有害物成分含量CAS No. 第三部分：危险性概述健康危害：本品可经呼吸道、胃肠道和皮肤吸收。长期接触能引起肝脏损害和痤疮样皮炎。中毒症状有恶心、呕吐、腹痛、水肿、黄疸等。本品可经过胎盘影响胎儿。环境危害：对环境有严重危害，对水体和大气可造成污染。燃爆危险：本品可燃，高毒。第四部分：急救措施皮肤接触：脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗。就医。眼睛接触：提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。就医。吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。如呼吸停止，立即进行人工呼吸。就医。食入：饮足量温水，催吐。洗胃，导泄。就医第五部分：消防措施危险特性：遇明火、高热可燃。与氧化剂可发生反应。受高热分解放出有毒的气体。若遇高热，容器内压增大，有开裂和爆炸的危险。有害燃烧产物：一氧化碳、二氧化碳、氯化氢。灭火方法：消防人员必须佩戴过滤式防毒面具(全面罩)或隔离式呼吸器、穿全身防火防毒服，在上风向灭火。尽可能将容器从火场移至空旷处。喷水保持火场容器冷却，直至灭火结束。处在火场中的容器若已变色或从安全泄压装置中产生声音，必须马上撤离。灭火剂：雾状水、泡沫、干粉、二氧化碳、砂土。第六部分：泄漏应急处理 有害物成分 含量 CAS No.: 多氯联苯 1336-36-3
什么是微生物检验
什么是食品微生物检验 吴崇食质12级1班学号：20122629 微生物是个体难以用肉眼观察的一切微小生物之统称。微生物包括细菌、病毒、真菌、和少数藻类等。（但有些微生物是肉眼可以看见的，像属于真菌的蘑菇、灵芝等。）病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的“非细胞生物”，但是它的生存必须依赖于活细胞。根据存在的不同环境分为空间微生物、海洋微生物等，按照细胞机构分类分为原核微生物和真核微生物。 微生物对人类最重要的影响之一是导致传染病的流行。在人类疾病中有50%是由病毒引起。微生物导致人类疾病的历史，也就是人类与之不断斗争的历史。在疾病的预防和治疗方面，人类取得了长足的进展，但是新现和再现的微生物感染还是不断发生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治疗药物。一些疾病的致病机制并不清楚。大量的广谱抗生素的滥用造成了强大的选择压力，使许多菌株发生变异，导致耐药性的产生，人类健康受到新的威胁。一些分节段的病毒之间可以通过重组或重配发生变异，最典型的例子就是流行性感冒病毒。每次流感大流行流感病毒都与前次导致感染的株型发生了变异，这种快速的变异给疫苗的设计和治疗造成了很大的障碍。而耐药性结核杆菌的出现使原本已近控制住的结核感染又在世界范围内猖獗起来。 微生物千姿百态，有些是腐败性的，即引起食品气味和组织结构发生不良变化。当然有些微生物是有益的，它们可用来生产如奶酪，面包，泡菜，啤酒和葡萄酒。微生物非常小，必须通过显微镜放大约1000 倍才能看到。比如中等大小的细菌，1000个叠加在一起只有句号那么大。想像一下一滴牛奶，每毫升腐败的牛奶中约有5千万个细菌，或者讲每夸脱牛奶中细菌总数约为50亿。也就是一滴牛奶中可能含有50 亿个细菌。 微生物能够致病，能够造成食品、布匹、皮革等发霉腐烂，但微生物也有有益的一面。最早是弗莱明从青霉菌抑制其它细菌的生长中发现了青霉素，这对医药界来讲是一个划时代的发现。后来大量的抗生素从放线菌等的代谢产物中筛选出来。抗生素的使用在第二次世界大战中挽救了无数人的生命。一些微生物被广
多氯联苯类污染物的分析进展
多氯联苯类污染物的分析进展 姚宁波 摘要：多氯联苯(polychlorinated biphenyls ，PCBs)是一类典型的持久性有机污染物，具有稳定的理化性质。它的难降解性和在环境中的高残留性，使其成为最受关注的污染物之一。目前, 国内外环境介质已普遍受到了PCB s的污染。本文总结了我国水体、大气、土壤和生物体内PCBs的污染水平，简要概述了环境中pcbs 的分析方法以及发展方向。 关键词：多氯联苯(PCBs) 持久性有机污染物分析方法 PCBs 是一类以联苯为原料在金属催化剂作用下, 高温氯化生成的氯代芳烃, 分子式为( C12H10) nCln , 根据氯原子取代数和取代位置的不同共有209 种同类物, 结构式可表示为 PCBs 具有良好的化学惰性、抗热性、不可燃性、低蒸气压和高介电常数等优点, 因此曾被作为热交换剂、润滑剂、变压器和电容器内的绝缘介质、增塑剂、石蜡扩充剂、粘合剂、有机稀释剂、除尘剂、杀虫剂、切割油、压敏复写纸以及阻燃剂等重要的化工产品, 广泛应用于电力工业、塑料加工业、化工和印刷等领域[ 1]。PCBs 的商业性生产始于1930 年, 据估计，全世界PCBs的总产量约120万t，其中约30 %已释放到环境中，60 %仍存在于旧电器设备或垃圾填埋场中，并将继续向环境中释放[2]。我国于1965 年开始生产多氯联苯, 日本的“米糠油事件”后，人们开始关注PCBs的环境污染问题，世界各国陆续停止了多氯联苯的生产和使用，我国也于70年代中后期停止生产和进口以多氯联苯为介质的电器设备，到80 年代初国内基本已停止生产PCBs, 但由于其溶解性、高稳定性和半挥发性，使其参与气团运动，并在生物体内蓄积，从而扩大污染范围，造成“全球性多介质(水、气、土壤、底泥及生物体)污染。 PCBs具有强烈的致畸、致癌、致突变作用, 可以通过皮肤、呼吸及肠胃等进入人体并在脂肪组织中富集[ 3]。动物实验表明, PCBs 对皮肤、肝脏、胃肠系统、神经系统、生殖系统、免疫系统的病变甚至癌变都有诱导效应。一些PCBs 同类物会影响哺乳动物和鸟类的繁殖, 对人类健康也具有潜在致癌性。历史上曾有过几次污染教训, 。1968年在日本和1979年在中国台湾都曾发生过因食用受PCBs污染的“米糠油”而导致上千人中毒、近百人死亡的恶性事件[ 4]。深刻的教训、沉重的代价使PCBs 的污染日益受到国际上的关注。美国环保局及我国环保部门已把或已建议把PCBs 列入优先控制的有机污染物的名单。环境中PCBs 的主要来源有变压器与电容器的冷却剂、耐腐蚀涂料、造纸工业、垃圾焚烧等[ 5]。 一．多氯联苯污染现状分析
环境微生物监测标准操作规程
环境微生物监测标准操作规程 一、监测指征 1．感染暴发或感染流行时，环境因素在感染传播中有流行病学意义。 2．监测潜在的危险环境状况，证明有危险的病原体存在或证明危险的病原体已被成功清除。 3．当某项感染控制措施改变时，评估其效果；或者根据规范要求，仪器设备或系统启用时监测。 4．目标性监测的需要。 5．循证医学证据支持。 二、空气监测(沉降法) (一)采样时间：消毒处理后与进行医疗活动之前。 (二)采样高度：距地面垂直高度80～150 cm。 (三)采样点设置 1．非洁净房间：室内面积≤30 ㎡，在对角线上设里、中、外3点。里、外两点位置各距墙1 m；室内面积>30 ㎡，设东、西、南、北、中5点。其中东、西、南、北4点均距墙1 m。9 cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5 min后送检培养。 2．洁净房间：清洁房间在空态或静态条件下，根据房间的不同清洁级别进行布点，操作按照GB 50333—2002。9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露30 min后送检培养。 (四)采样注意事项 1．采样人员做好手部卫生，佩戴口罩、帽子等个人防护装备。进入清洁房间采样须穿洁服。 2．皿盖打开顺序应先内后外；手臂及头不可越过培养皿上方；行走及放置动作要轻，尽量减少对空气流动状态的影响；皿盖应扣放，以防污染。 3．采样结束后，由外向内合上皿盖。 4．采样完毕的培养皿应在6 h内培养。 (五)实验室检验 1．培养皿在37℃培养48 h后，进行菌落计数和致病菌检验。普通营养琼脂培养基的配制按照GB／T 4789．28—2003；菌落计数方法按照GB\T 7918．2—1987；致病菌检验：溶血性链球菌检验按照GB／T 4789．11—2003，沙门菌检验按照CB\T 4789．4—2003，铜绿假单胞菌检验按照GB／T7918．4—1987，金黄色葡萄球菌检验按照CB\T 7918．5—1987,， 2．计算结果：非洁净房间以100 c㎡的平皿在空气中暴露5 min即相当于10 L 空气中的细菌数，计算公式为： 细菌数(cfu／m3)=1 000÷(A／100×t×10／5)×N=50 000N／At 式中：t——平皿暴露于空气中的时间(min)；N—一培养后平皿上的菌落数(cfu／平皿)；A——所用平皿的面积(c㎡)。 洁净房间直接以“个／(30 min·Φ90)”平皿为单位计算结果。 (六)结果判断： 参照GB 15982—1995《医院消毒卫生标准》。 三、物体表面监测 (一)采样时间： 消毒处理后4 h内。 (二)采样方法 被采样本面积<100 c㎡取全部表面；如采样面积≥100 c㎡，连续采样4个位置(不可有重叠)，每个位置采5 cm×5 cm的大小，用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10 ml无菌生理盐水试管内。不规则的物体表面，用棉拭子直接涂擦，采样面积≥30 c㎡ (三)采样注意事项
水产品中多氯联苯的检测条件
水产品中多氯联苯的检测条件 1.多氯联苯的概述 多氯联苯（polychlorinated biphenyl，简称PCB），又称多氯联二苯，是许多含氯数不同的联苯含氯化合物的统称。在多氯联苯中，部份苯环上的氢原子 被氯原子置换，一般式为 C1 2H n Cl (10-n) (0≦n≦9)。依氯原子的个数及位置不同， 多氯联苯共有209种异构体存在。 多氯联苯在常温下是比水重的液体，多氯联苯耐热性及电绝缘性能良好，化学性质稳定。多氯联苯不溶于水，易溶于有机溶剂及脂肪，常用作加热或冷却时的热载体、电容器及变压器内的绝缘材料，也常作为涂料及溶剂使用，应用的范围很广。 多氯联苯是德国人H·施米特和G·舒尔茨在1881年首次合成的。1892年，美国开始工业生产多氯联苯。1968年及1979年，日本及台湾分别出现米糠油中毒事件，原因是在生产过程中有多氯联苯漏出，污染米糠油。因此各国纷纷禁止多氯联苯生产及使用。 多氯联苯属于致癌物质，容易累积在脂肪组织，造成脑部、皮肤及内脏的疾病，并影响神经、生殖计免疫系统。多氯联苯异构体有209种可能，这些异构体从单个氯原子的取代到全取代十氯联苯。 多氯联苯(Polychlorinated Biphenyls，以下简称PCBs)是工业合成的产物，同时也是环境持久性污染物之--(Persistent Organic Pollutants简称POPs)。2001年5月23日，在瑞典首都斯德哥尔摩召开的全球外交全权代表大会，通过了《关于持久性有机污染物的斯德哥尔摩公约》(简称《公约》)，至今已有156个国家签署该项国际公约。《公约》首次确定的POPs包括多氯联苯、艾氏齐lJ(Aldrine)、狄氏剂(Dieldrine)、异狄氏剂(Endrine)、滴滴涕(DDT)、氯丹(Chlordane)、六氯苯(HCB)、灭蚁灵fMirex)、毒杀芬(Toxaphene)、七氯
环境保护检查标准表.doc
百色百矿集团有限公司环境保护检查标准表 受检单位： 序号检查项目1机构设置 2制度建设3责任落实 隐患排查4 治理 检查日期：年月日检查标准存在问题备注1.各单位是否设置环境保护机构，是 否明确分管领导、配备环境管理人员 及环保岗位人员（查资料） 1.各单位是否制定环境保护管理办法、 环保管理制度（包括环保“三同时 ”、清洁生产、废气 / 废水 / 固废 / 噪声 管理、在线监测、环保会议、环保检 查、环保培训、环保奖惩、应急管理 、脱硫脱硝管理等内容），是否建立 相关记录台账（查资料） 2.各单位是否建立环境保护责任制 度，明确单位负责人及相关责任人责 任（查资料） 3.各单位制订环保岗位操作规程，是 否建立相关记录台账（查资料） 4.环保要害场所是否制度上墙、是否 落实到位（查现场） 1.是否落实环境保护管理制度（查现 场，查资料） 2.是否落实环保经费投入（查资料） 3.是否组织环境保护岗位人员每季度 开展培训、是否按照操作规程施工作 业、记录是否齐全（查资料、查现 场） 4.是否制定年度环境保护工作计划、 月度计划，是否按照计划开展并对环 保工作进行总结（查资料） 1、分（子）公司是否每季度开展一次 环保专项检查，基层单位是否每月开 展一次环保专项检查，排查出的环境 隐患是否按照“五落实”要求落实整 改，有整改记录、销号表形成闭环管 理（查资料） 2.对环境敏感点是否增设检测点、 线、面，每月定期行检测或委托第三 方检测，建立记录档案（查资料） 3.各项环境污染源防控措施是否落实 到位（查现场） 4.上级监管部门督查存在环保整改文 书是否落实整改、验收、及时反馈整 改情况（查资料） 5.对不能立即整改消除的隐患问题， 是否制定相应防范措施和整改计划， 限期整改，并在有关规定进行评估、 报告、整治和销号（查资料） 6.各环保岗位人员是否在岗，值班期 间严禁出现脱岗、串岗、睡岗等行为 （查现场）
微生物检验(完整版)
微生物检验（完整版） 名解 微生物：是一群个体微小结构简单肉眼不能看见的微小生物的总称 种：亲缘关系较近的微生物群体在进化发育阶段上有一定的共同形态和生理特征 微生物学：生物学的一个分支是研究微生物在一定条件下的形态结构生理生化遗传变异特性及微生物的进化分类生态等生命活动规律以及微生物之间与人类动植物自然界互相关系的一门科学 抗生素：是由某些微生物在代谢过程中产生的能抑制或杀灭某些其他微生物和肿瘤细胞的微量生物活性物质 细菌素：是某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质 条件致病菌：正常菌群在宿主体内具有相对稳定性一般不致病 消毒：指杀死物体上的病原微生物但不一定能杀死细菌芽孢的方法 灭菌：指杀灭物体上所有的微生物的方法 防腐：指防止或抑制微生物生长繁殖的方法 无菌：指没有货的微生物的存在 质粒：是细菌染色体外的遗传物质也是环状闭合的双联DNA分子比染色体小存在于细胞质中可自主复制 突变：是指细菌遗传物质的机构发生突然而稳定的改变所致的变异现象可遗传给后代 基因转移：外源性物质由供体菌转入受体细胞内的过程 基因重组：供体菌的基因进入受体菌细胞并在其中自行复制与表达或矛受体菌DNA整合在一起的过程 病毒：是一类个体微小结构简单只含一种核酸只能在活的易感细胞内以复制方式增殖的
非细胞型微生物 复制周期：病毒的增殖被人为分成吸附穿入脱壳生物合成装配成熟与释放七个步骤的完整过程 缺陷病毒：是指因病毒基因组不完整或因基因某一点改变而不能进行正常增殖的病毒 顿挫感染：病毒进入宿主细胞若细胞缺乏病毒复制所需的酶能量和必要成分等则病毒无法合成自身成分不能够装配和释放子代病毒的现象 干扰现象：两种病毒感染同一种细胞时可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象 人工自动免疫：是将疫苗等免疫原接种于人体刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答使机体获得特异性免疫力 人工被动免疫：是指注射含某种病毒特异性中和抗体的免疫血清等一系列细胞因子是机体立即获得特异性免疫 干扰素：是由病毒或干扰素诱生剂作用于中性粒细胞成纤维细胞或免疫细胞产生的一种糖蛋白 致病性：一定种类的病原微生物在一定的条件下能在特殊的宿主体内引起特定疾病的能力半数致死量：在规定时间内通过一定途径能使一定体重或年龄的某种动物半数死亡或感染需要的最小病原体数量或毒素量 急性感染：发作突然病程较短一般是数天或数周 局部感染：病原体侵入机体后局限就在一定部位生长繁殖引起病变的一种感染类型 毒血症：致病菌侵入宿主体后只在机体局部生长繁殖病菌不进入血液循环但其产生的外毒素入血引起特殊的毒性症状 败血症：致病菌侵入血流后在其中大量繁殖并产生毒性产物引起全身性毒性症状 内毒素血症：革兰阴性菌侵入血流并在其中大量繁殖崩解后释放出大量毒素也可有病灶
EPA8082气相色谱法测定多氯联苯(中文版)
方法8082 气相色谱法测定多氯联苯 1.0适用范围 方法8082用于检测多氯联苯浓度如固-液萃取物中的亚老格尔或单独的多氯联苯化合物。开口毛细管柱用于电子捕获器或电解传导检测器。对比于填充柱，熔融石英开口毛细管柱提高了检测性能，即更好的选择性、更好的灵敏度及更快的检测速度。下表所列的目标化合物都可由单柱或者双柱分析系统来检测。这些PCB化合物都有此法试验过，且此法还适用于其它的化合物。
International Union of Pure and Applied Chemistry 国际理论和应用化学联合会 1.2亚老格尔是种多组分的混合物。当样品中含有多于一种的亚老格尔，就需要更好的分析技术人员来进行定性及定量分析。对于环境降解中的亚老格尔或者人为降解中的亚老格尔分析也需要专门分析技术人员，因为降解后的多组分混合物对比于亚老格尔标准峰参数将有显著不同。 1.3作为亚老格尔的PCBs定量分析与很多常规仪器检测类似，但当亚老格尔在环境中暴露而降解后则有很大的不同。因此，本方法提供了从检测结果中挑选单个PCB化合物的程序。上面所列的19种PCB化合物均用此法进行了检测。 1.4当知道PCB存在的情况下，PCB化合物的检测可以得到更高的精确度。因此这种方法依据需求的计划需要，可以用于检测亚老格尔、单个PCB化合物或者PCBs总合。此化合物的方法对降解的亚老格尔检测具有特殊意义。然而，分析者在使用这个化合物分析方法时应当谨慎，即在调整条件时应基于亚老格尔的浓度。 1.5基于单柱分析的化合物确定应当由另一根柱子来验证，或者有至少一种定性方法来支持。第二根气相色谱柱的分析条件能够确认第一根柱子的检测法。在灵敏度允许的情况下气相色谱质谱（GC/MS）8270方法可以作为一个确认方法。 1.6此方法同样描述了一个双柱方法选择。这个方法需要配置一个硬件是两根分析柱相连成为单一进样口。此法需要在双柱分析时使用一个进样口。分析者应当注意的是在仪器受机械压力影响一些样品进样周期短，或者分析高污染的样品时，双柱方法可能并不合适。 1.7分析者必须针对所研究的目标分析物选择柱子、检测器、校准方法。必须建立特殊基质操作步骤、针对每个分析基质的稳定的分析系统及仪器校准系统。提供色谱实例和气相色谱条件。 1.8亚老格尔的方法检出限变化范围在水中为0.054到0.90μg/kg ，在土壤中为57到70μg/kg。可以利用表一来估计定量限。 1.9这个方法在使用时受到限制，或者在监督之下才能使用。分析者要在使用气相色谱方面有丰富的经验，又或者能熟练的阐述气相色谱原理。每个分析人员都必须能够证明具有使用这个方法得到合理的数据的能力。 2.0方法概述 2.1用适当的样品基质萃取技术对一定量体积或一定质量的样品（液体1升，固体2到30克）进行萃取。 2.2液体样品在中性条件下用二氯甲烷依据方法3510（分液漏斗）、方法3520（连续液液萃取），或其他适合的方法进行萃取。 2.3固体样品以正己烷-丙酮（1∶1）或者二氯甲烷-丙酮（1∶1），用方法3540（索氏法），
多氯联苯的污染与危害
学院：经济管理学院班级：12级经济学类27班姓名：洪加灿学号：201231142706 多氯联苯的污染与危害 洪加灿 摘要：对于多氯联苯，大多数人会不太熟悉，但这种有害物质在我们的身边无处不在，并对我们的环境和健康造成了极大的影响。本文简要介绍了多氯联苯的性质，对环境的污染，以及对生物和人体的危害，还有现今对多氯联苯的环境治理方法。 关键词：多氯联苯环境污染危害环境治理 目录 1. 多氯联苯 (1) 2. 多氯联苯对环境的污染 (2) 3. 多氯联苯的危害 (3) 4. 对多氯联苯的治理 (3) 5. 参考文献 (4) 1.多氯联苯 多氯联苯（Polychlorinated biphenyls; PBC）是联苯苯环上的氢被氯取代而形成的多氯化合物，对生物体有积蓄性毒害作用的一类持久性有机污染物的总称。例如三氯联苯(PCB3)、四氯联苯(PCB4)、五氯联苯(PCB5)、六氯联苯(PCB6)、七氯联苯(PCB7)、八氯联苯(PCB8)、九氯联苯(PCB9)、十氯联苯(PCB10)]。PBCs 理论上有209种同系物异构体。目前已鉴定出130种同系物和异构体的单体，其中大多数是非平面化合物。 多氯联苯外观呈流动的油状液体或白色结晶固体或非结晶性树脂，具有较好的粘结性和伸展性，难溶或不溶于水，易溶于有机溶剂，燃点高；物理化学性质高度稳定，耐热、耐酸、耐碱、耐腐蚀和抗氧化，而且对金属无腐蚀性；高介电常数，绝缘性极好，因此曾广泛用于制作热载体、绝缘油和润滑油，变压器和电容器的浸渍液。
多氯联苯是德国H.施米特和G.舒尔茨于1881年首先合成的。美国于1929年最先开始生产，60年代中期，全世界多氯联苯的产量达到高峰，年产约为10万吨。据估计，全世界已生产的和应用中的PCB远超过100万吨，其中已有1/4至1/3进入人类环境，造成危害。 2.多氯联苯对环境的污染 PCB对环境的污染是在1960年前后研究有机氯农药污染中出现的一组未知色谱峰而发现的，1966年由瑞典的S.延森研究证实为PCB。以后的研究表明，从1944年前后PCB就明显地污染生态系统,而且污染的严重程度远远地超出预料。据估计存在于全世界海洋、土壤、大气中的PCB总量达到25～30万吨以上,污染的范围很广，从北极的海豹、加拉帕戈斯的黄肌鲔，到南极的海鸟蛋，以及从日本、美国、瑞典等国人的乳中都能检出PCB，其污染成为了全球性的问题。 PCB世界性污染主要来源于大量使用PCB的工厂，如用PCB作绝缘油的电机工厂，大量使用PCB作热载体和润滑油的化学工厂,造纸厂特别是再生纸厂。船舶的耐腐蚀涂料中含有PCB,被海水溶出也是相当大的污染源。这些污染源以废油、渣浆、涂料剥皮等形式通过各种渠道进入了环境中并导致了的水污染、土壤污染、水底底部的沉积泥污染等严重问题。 PCB在大气中主要附着在颗粒物上,在水中则附着在悬浮颗粒物上。在强烈搅动或存在表面活性剂的情况下，PCB也可部分地溶于水（有时达10～ 20ppm）。污染海洋的石油能促使PCB分散于水中，并随海水的流动而迁移。大量PCB溶于海面漂浮的油膜,又能使海洋表层浮游生物受到严重的危害。PCB 污染大气、水、土壤后,通过食物链的传递，富集于生物体内。例如美国某地小麦、麦蒿中含PCB0.3ppm，牛乳中PCB含量高达28ppm。 PCB的严重污染问题引起了全世界的关注，截至1989年，除少量特殊用途外，世界各国因公害原因停止其生产，但之前已生产以及排放的PCB量不仅数量庞大，而且在环境中将长期存在，问题仍不容乐观。2001年5月，联合国环境规划署在瑞典斯德哥尔摩组织召开了《关于持久性有机污染物的斯德哥尔摩公约》外交全权代表会议，并通过了这项公约，公约禁止使用或者严格限制使用12种毒性极强且难降解的化学物品，其中就包括PCB。PCB的危害性和治理也引起了全世界关注和研究的热点。
环境水样中多氯联苯类化合物的检测
环境水样中多氯联苯类化合物的检测 ---应用Sepaths测定多氯联苯类化合物 前言：多氯联苯(PCBs)目前已知的有209种同类物,具有高毒、难降解、强脂溶和生物累积等特性,因此不仅被联合国环境规划署列入第一批持久性有机污染物,也被世界野生动物基金会(WWF)列为67种(类)环境激素中的一种。目前有关多氯联苯检测的国家标准如下:《海产食品中多氯联苯的测定》(GB/T5009.190-2003)、《纺织品多氯联苯的测定》(GB/T20387-2006)和《饲料中多氯联苯的测定气相色谱法》(GB/T8381.8-2005),目前水中多氯联苯的测定还没有国家或行业的标准方法,甚至尚未出现多个实验室验证,证明是较成熟的统一方法,国内已经开展了一些关于水中多氯联苯测定方法的研究,较为权威的是《水和废水监测分析方法(第四版)中的固相圆盘萃取气相色谱质谱法》。本文中应用了47mm的C18固相萃取盘,上样速度控制在40-60mL/min之间，在选取的26种同类物质中，结果稳定，回收率良好。 实验部分： 1.1仪器与试剂 Sepaths全自动固相萃取系统（莱伯泰科有限公司，美国波士顿） DryVap多通道定量浓缩系统（Horizon Technology公司，美国波士顿） Aglient7890A(GC)-5975C（MS）（安捷伦气质联用仪） Aglient19091J-433,30m*250um*0.25um（安捷伦气相色谱柱） C18固相萃取盘47mm(Horizon Technology公司，美国波士顿）
乙酸乙酯（色谱纯，Fischer公司） 甲醇（色谱纯，Fischer公司） 二氯甲烷（色谱纯，Fischer公司） 去离子水 1.2样品制备 取有代表性的环境水样500mL，加20%甲醇进行样品改性，调pH值到4.5 固相萃取步骤如下： 收集洗脱液，除水，浓缩至1mL，二氯甲烷定容，待测。 1.3检测仪器的检测条件 1.3.1气相色谱条件 升温程序：80℃，保持2分钟，8℃/min升至300℃，保持5min。 1.3.2质谱分析条件 扫描范围45—550m/z；离子源温度：250℃；离子化能量：70eV；扫面方式：定性分析为全扫描（SCAN），定量分析为选择离子（SIM）扫描。 1、结果
电子电气产品中多氯联苯的测定 气相色谱-质谱法(标准状态：现行)
I C S31.020 L10 中华人民共和国国家标准 G B/T32887 2016 电子电气产品中多氯联苯的测定 气相色谱-质谱法 D e t e r m i n a t i o no f p o l y c h l o r i n a t e db i p h e n y l s i n e l e c t r i c a l a n d e l e c t r o n i c p r o d u c t s G a s c h r o m a t o g r a p h y-m a s s s p e c t r o m e t r y 2016-08-29发布2017-03-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
前言 本标准按照G B/T1.1 2009给出的规则起草三 本标准由全国电工电子产品与系统的环境标准化技术委员会(S A C/T C297)提出并归口三 本标准起草单位:深圳市计量质量检测研究院二中国电子技术标准化研究院二广东出入境检验检疫局二工业和信息化部电子第五研究所三 本标准主要起草人:幸苑娜二冯岸红二林志惠二萧达辉二高坚二黄秋鑫二张旭二程涛二周明辉二李涵二陈泽勇三
电子电气产品中多氯联苯的测定 气相色谱-质谱法 警示 使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验三本标准并未指出所有可能的安全问题三使用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关法规规定的条件三 1范围 本标准规定了电子电气产品聚合物材料中多氯联苯的气相色谱-质谱测定方法三 本标准适用于电子电气产品聚合物材料中多氯联苯的测定,定量限为0.5m g/k g三 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的三凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件三凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件三 G B/T26572 2011电子电气产品中限用物质的限量要求 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件三 3.1 多氯联苯p o l y c h l o r i n a t e db i p h e n y l s;P C B s 联苯苯环上的氢被氯取代而形成的多氯化合物的统称,分子式为C12H(10-n)C l n(1?n?10)三 4原理 粉碎后的样品用有机溶剂超声萃取,萃取液经浓缩二净化二定容后,用气相色谱-质谱联用仪测定,采用目标分析物的保留时间结合质谱图定性,外标法定量三 5试剂或材料 除非另有说明,所有试剂均为色谱纯三 5.1丙酮:分析纯三 5.2正己烷三 5.3二氯甲烷:分析纯三 5.4甲苯三 5.5丙酮+正己烷(1+1):由丙酮(5.1)和正己烷(5.2)按体积比配制三 5.6二氯甲烷+正己烷(2+8):由正己烷(5.2)和二氯甲烷(5.3)按体积比配制三 5.7多氯联苯标准物质:多氯联苯标准物质及其纯度信息参见附录A三 5.8多氯联苯单标储备液:分别准确称取适量的多氯联苯标准物质(5.7),用少量的正己烷(5.2)溶解,
多氯联苯概述
多氯联苯概述 摘要：多氯联苯具有高毒、难降解、强脂溶和生物累计等特性，被联合国列为第一批持久性有机污染物，本文就多氯联苯的性质、来源、分布及迁移转化、化学转化和国内外的最新研究进展等方面进行了探讨和研究。 关键词：多氯联苯；性质；来源分布；化学转化 1多氯联苯简介 多氯联苯(PCBs)是广泛存在于环境中的持续性有机污染物,它是以联苯为原料在金属催化剂作用下,高温氯化合成的氯代联苯同系物与商业混合物的混合体系。 PCB的分子式为C l2H 10-m-n Cl m+n (m+n<10),根据氯原子取代数目和取代位置的不同,PCB共 有209种同系物。Mills等对它们进行了编号,从1-209,其中,大概有180种PCB的同系物是以混合物的形式存在【1】。 图1 多氯联苯的分子结构 1.1多氯联苯的物理性质 根据氯原子取代数目的不同,PCBs的存在状态从流动的油状液体至白色结晶固体或非结晶性树脂,并具有有机氯的气味。PCBs的Mr在188.7～498.7之间,比重为1.4～1.5 (30℃),密度为1.44g/cm3（30℃），沸点340～375℃。PCB极易溶解于非极性的有机溶剂和生物油脂, PCBs在水中的溶解度极小,25 ℃的Sw为0.01～0.0001 ug/L,并且Sw值随着氯化程度的增加而减小。 1.2多氯联苯的化学性质
PCBs遇高热分解放出有毒的烟气,甚至分解为毒性更大的物质。它的化学性质稳定,但遇到紫外光会发生反应,能与强氧化剂反应。Arodorl254不能与强氧化剂共存,它能够攻击一些塑料、橡胶以及涂料等,具有耐热、抗氧化的性质以及耐强酸强碱的攻击等特点【1】。 1.3多氯联苯的环境特性 1.3.1长期残留性 也称为持久性,PCBs由于化学性质极其稳定,耐热性极强,对于自然条件下生物代谢、光分解、化学降解等都具有很强的抵抗能力,一旦其排放进环境中便会长久存在,且一般条件很难将其分解。 1.3.2生物蓄积性 PCBs具有低水溶性且高脂溶性的特点,因而能在脂肪中进行生物蓄积,从而导致其从周围媒介中富集到生物体内,并且通过食物链的生物放大作用在食物链的高营养级达到中毒浓度。 1.3.3半挥发性 PCBs可以从土壤或者水体中通过蒸发进入大气环境或吸附在大气顆粒物上,在大气环境中进行远距离的迁移,所具备的挥发性适度又使之不可能永久停留在大气中,并能通过沉降重新回到地面,使得PCBs分布几乎遍及世界的各个角落,造成全球范围内的污染问题【2】。 1.3.4高毒性 多氯联苯的毒性主要表现为:致癌性,国际癌症研究中心已将多氯联苯列为人体致癌物质;生殖毒性,多氯联苯能导致人类精子数量减少、精子畸型的人数增加,女性不孕,动物生育能力减弱;神经毒性,多氯联苯能对人体造成脑损伤、抑制脑细胞合成、发育迟缓、降低智商;内分泌系统干扰毒性【3】。需要指出的是,有些PCBs虽然本身并无直接毒性,但其可通过对生物体的酶系统产生诱导作用而间接引起毒性,且某些PCBs能够经过光解的作用产生毒性较高的PCBs同系物【4】。 2多氯联苯的来源 PCBs是人类自己发明制造出来的化合物, PCBs第一次被合成是在20世纪20年代, 随后便开始被大量地使用。尽管到了20世纪70年代至80年代大部分国家已经禁止使用 ,但资料表明,迄止1996 年, PCBs在全球范围内的总量已达到120万t。
2017年Word版食品中指示性多氯联苯含量的测定
一、编制目的 为规范单位对食品中指示性多氯联苯含量的检验方法，编制本指导书。 二、适用范围 本指导书适用于食品中指示性多氯联苯含量的测定。 三、编制依据 GB 5009.190-2014《食品安全国家标准食品中指示性多氯联苯含量的测定》 四、实验原理 本方法以PCB198为定量内标，在试样中加入PCB198，水浴加热振荡提取后，经硫酸处理、色谱柱层析净化，采用气相色谱-电子捕获检测器法测定，以保留时间定性，内标法定量。 五、试剂和材料 5.1试剂 5.1.1正己烷 5.1.2二氯甲烷 5.1.3丙酮 5.1.4无水硫酸钠：优级纯 5.1.5浓硫酸：优级纯 5.1.6碱性氧化铝 5.2标准溶液 指示性多氯联苯的系列标准溶液。 六、仪器方法 6.1气相色谱仪 6.2色谱柱
6.3组织匀浆机 6.4绞肉机 6.5旋转蒸发仪 6.6氮气浓缩器 6.7超声波清洗器 6.8旋涡振荡器 6.9分析天平 6.10水浴振荡器 6.11离心机 6.12层析柱 七、操作步骤 7.1 试样的制备 7.1.1提取:固体试样：称取固体试样5g-10g(精确到0.1g)，置具塞锥形瓶中，加入定量内标PCB198后，以适量正己烷+二氯甲烷（50+50）为提取溶液，于水浴振荡器上提取2h，水浴温度为40度，振荡速度为200r/min。 7.1.2液体试样(不包括油脂类样品)，称取试样10g(精确到0.1g)，置具塞离心管中，加入定量内标PCB198和草酸钠0.5g，加甲醇10ml摇匀，加20ml 乙醚+正己烷（25+75）振荡提取20min，以3000r/min离心5min，取上清液装有5g无水硫酸钠的玻璃柱；残渣加20ml乙醚+正己烷（25+75）重复以上过程，合并提取液。 7.1.3将提取液转移到茄形瓶中，旋转蒸发浓缩至近干。如分析结果以脂肪计，则需要测定试样脂肪含量。 1
环境中微生物的检测和分离纯化实验报告
环境中微生物的检测和分离纯化 一．实验原理 1.微生物的分离与纯化 土壤中含有丰富的微生物，可以从中分离纯化得到很多有价值的菌株。 微生物常用的分离方法是平板分离法，根据某种微生物对生长条件的不同要求供给它适宜的培养环境，再用稀释涂布平板法或稀释后平板划线分离，纯化该微生物，直到得到纯菌株。 2.平板菌落计数法 将待测样品经适当稀释后，其中微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中含的菌落数。 二．实验材料与试剂 1.土壤稀释溶液 2.取液器（1000ml 1支），培养箱，培养皿（12个），无菌有帽试管，三角瓶，无菌涂 棒，接种环，1000ml无菌吸头若干，记号笔，酒精灯，火柴，试管架。 三．实验步骤 （一）.无菌平板制备 1.采用叠皿法把牛肉冻蛋白膏培养基倒入灭好菌的培养皿中，制作无菌平板 （二）.周围环境中微生物的检测 2.取一平板，分成6个区，做好标记。同一个人同一根手指头按如下要求用力一致进 行操作：分别用未洗过的手指头，自来水打湿的手指头，自来水认真洗过的手指头，洗手液洗过一遍的手指头，洗过两遍的，洗手液洗过又用酒精棉球消毒后的手指头 在六个区上涂抹。（平板1） 3.取一平板，分区，分别用使用过的纸巾，硬币，旧纸币，餐卡在不同区拖动。（平 板2） 4.在培养基上方抖动头发数次。（平板3） 5.取一平板，分区，用无菌接种环分别蘸一滴自来水，河水，豆浆在不同区划线。（平 板4） 6.用无菌牙签取一点牙垢在培养基上划线。（平板5） 7.取两个平板，一个打开在实验台上放置30分钟，另一个在酒精灯火焰边打开皿盖1 分钟。（平板6） 8.取一平板，打开盖，咳几下。（平板7） （三）.从土壤中分离微生物 1.采土样 2.制备土壤稀溶液 3.涂布 吸取100ml稀释好的土壤稀溶液，较均匀地滴在平板上，再用无菌涂棒涂布均匀，涂1—2分钟 4.培养 将培养基平板倒置于37℃下培养24小时 5.菌落计数 四．实验结果