LncRNA PVT1在肾癌中的作用及其机制研究
LncRNA PVT1在肾癌中的作用及其机制研究目的探索LncRNA PVT1在肾癌中的作用及其机制研究,探讨PVT1作为肾癌预后中生物标志物的意义。方法分析TCGA肾透明细胞癌RNA-seq数据,挑选出感兴趣的lncRNA PVT1,在肾癌组织及细胞系中进行定量PCR检测PVT1表达,基因富集分析(GSEA)PVT1高表达和低表达样本中KEGG通路的富集情况,对786-0和ACHN肾癌细胞系分别干扰和过表达PVT1后进行细胞增殖实验、Edu、细胞集落形成、流式测细胞周期等功能实验,检测PVT1对肾癌细胞786-O和ACHN细胞增殖功能的影响,Transwell迁移及侵袭实验以及划痕试验检测PVT1对肾癌细胞系的迁移及侵袭能力的影响,western blot检测周期及EMT 相关蛋白的表达,裸鼠皮下荷瘤实验检测PVT1对786-0肾癌细胞系异位成瘤能力的影响,结合临床数据分析PVT1对肾癌预后及肿瘤分级、分期的影响。结果筛选出差异表达的有命名的lncRNA 159个,其中上调的82个,下调的77个。上调的基因中包含PVT1、MALAT1、XIST、CRNDE等常见的lncRNA。定量PCR检测表明PVT1在肾癌细胞系及肾癌组织中高表达,GSEA富集分析表明细胞周期通路相关基因集在
PVT1高表达样本中明显富集,过表达PVT1明显促进细胞增殖,迁移和侵袭,促进裸鼠异位成瘤的能力,干扰PVT1后则抑制相关功
能,western blot检测表明干扰PVT1后
CDK6,CCND2,p-Rb,N-cadherin及vimentin的表达下
调,E-cadherin,p21及P16表达上调。过表达PVT1则相反。
Kaplan-Meier生存分析表明PVT1高表达患者总生存及无进展生存时
间更短,单变量和多变量Cox回归分析表明PVT1高表达和差的预后相关。结论PVT1在肾透明细胞癌中高表达,并促进肾癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,促进裸鼠异位荷瘤的形成,PVT1表达水平和临床预后及肿瘤分级、分期相关,是一个潜在的肾透明细胞癌治疗及预后的生物标志物。目的证明PVT1及其剪切转录本PVT1AE4通过竞争性吸附miR-200家族,调控BMI1、ZEB1及ZEB2的表达,从而影响肾癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。方法分析TCGA肾透明细胞癌RNA-seq及miRNA-seq数据,筛选出与lncRNAPVT1表达负相关并结合生物信息学分析找出与PVT1有相应结合位点的miRNA,构建含有相应靶序列的双荧光素酶报告质粒与相应的miRNA mimics或对照mimic共转染肾癌细胞系,检测双荧光素酶的活性。抗AG02RNA免疫共沉淀检测转染不同miRNA mimics的786-0细胞中AG02结合的内源性PVT1含量,定量PCR检测肾癌组织中PVT1与miR-200c及相关靶基因的相关性,共转染PVT1过表达质粒和miR-200c mimic进行功能回复实验。半定量PCR检测新转录本PVT1AE4在肾癌组织中的表达情况,MTS、集落形成及Transwell侵袭试验检测PVT1AE4在肾癌中的功能。最后共转染PVT1AE4过表达质粒和miR-200c mimic进行功能回复实验。结果miR-20b/106b-5p/203a及miR-200s在肾癌中与PVT1表达负相关,并且与PVT1有相应的结合位点,双荧光素酶实验证明miR-200s尤其是miR-200c能够明显降低双荧光素酶活性,抗AG02 RNA免疫共沉淀检测转染miR-200s mimics后与AG02结合的PVT1含量较对照mimic明显升高,miR-200cmimic效果最明显。MTS、集落形成及Transwell迁
移及侵袭实验表明miR-200c能够明显抑制肾癌细胞增殖,迁移及侵袭能力。定量PCR检测表明50对肾癌组织中PVT1和BMI1、ZEB1和ZEB2表达正相关,miR-200c表达和PVT1、BMI1、ZEB1及ZEB2表达负相关,相关功能回复实验表明,PVT1能上调BMI1、ZEB1和ZEB2的mRNA 及蛋白水平,共转染miR200c mimic后能够部分抵消这种上调,并且部分抵消PVT1对肾癌细胞增殖,迁移及侵袭能力的促进作用,另外发现PVT1ΔE4作为PVT1 一个新的转录本在肾癌组织中明显高表达,并且具有促癌作用,同样也能与miR-200c结合。结论lncRNAPVT1及其剪切转录本PVT1ΔE4在肾癌中具有明显的促癌作用,其作用机制可能是通过PVT1作为竞争性内源RNA吸附miR-200s来调控BMI1、ZEB1及ZEB2表达从而调控肾癌细胞增殖、迁移及侵袭能力。
甘草酸药理作用及机制的研究
甘草酸药理作用及机制的研究 摘要：甘草是我国著名的传统，通经脉，利血气，清热解毒，具有降血脂、抗癌、抗干扰素诱生剂及增强细胞免疫调节等多种活性。现代药研究表明，甘草酸是甘草中的主要活性成分，具有显著的肾上腺皮质激素样作用，可用于人体抗衰老、抗炎、降压、增强肌体免疫力、提高生理机能、抑制癌细胞生长等，上的应用表明了确实的疗效。本文对甘草酸丰富的药理作用及机制研究进行了综述。 关键词甘草酸药理作用机制研究进展 甘草为多年生草本植物甘草Glycyrrhiza urlensis的根及根茎，性味甘平，归心、肺、脾、胃经，为我国著名的大宗常用中药材和原料,国内、国际需求量都很大，为临床上最为常用的中草药之一。甘草具有补脾益气、润肺止咳、通经脉，利血气，清热解毒，止血祛痰润肺的功效，广泛地被用丁保肝、降血脂、抗癌、抗干扰素诱生剂及增强细胞免疫调节等方面。现代科学研究表明，甘草中含有100多种有效化学成分，其中以甘草甜素、甘草次酸、甘草苷元和甘草多糖为主。甘草酸(Glycyrrhizic Acid,GA)是一个最重要的甘草甜素类化合物，有显著的肾上腺皮质激素样作用，可用丁人体抗衰老、抗炎、降压、增强肌体免疫力、提高生理机能、抑制癌细胞生长等，它以18-H的两种差向异构体存在(α体和β体)，两者均具有一定的生理活性，如甘草酸_铵(甘利欣)为α体制剂，具有明显的降酶、抗炎和保肝作用；而强力宁和复方甘草甜素则为β体制剂。甘草酸在临床上的应用表明了其确实的疗效，本文就近年来对甘草酸丰富的药理作用及机制研究进行了综述。 1 抗肿瘤作用 体内外抗肿瘤药理模型的研究中，GA对不同肿瘤细胞株均显示了较强的细胞毒作用，通过致细胞变异及诱导细胞凋亡等多种机制，抑制肿瘤细胞增殖，发挥细胞毒作用。利用细胞胞质溶胶混悬培养液以及完整的结肠细胞培养物两种模型体系研究后发现，GA通过抑制人体结肠肿瘤细胞中N-乙酰基转移酶活性和DNA-2氨基芴的内敛可产生抗该肿瘤株增值的药理作用，显著降低乙酰转移酶类在人体结肠肿瘤细胞清除系统的Km和Vmax的有效值［1］,在亚细胞毒性浓度时，显著性抑制芳香胺N-乙基酰转移酶在人体结肠肿瘤细胞瘤株(colo205)的活性，且这一抑制作用呈现出剂量依赖性。同时，DNA-2-氨基芴内敛结构也受到了有效的抑制。该研究首次阐明GA通过抑制乙酰转移酶活性和DNA加合物生成来抑制肿瘤的恶化，为临床上GA的应用提供厂新的思路。另外，GA可通过刺激黑色素瘤细胞B16所含的黑色素生成，加速肿瘤细胞的“老化”。GA可剂量依赖性增加酪氨酸酶的表达信使RNA(mRNA)在细胞间质中的水平，进而提高蛋白质、酶活性、黑色素含量。研究过程中还发现，GA能增加络氨酸酶依赖性蛋白质-2(tyrosinasc-rclatcd protcin-2,TRP-2)的mRNA的表达，对TRP-1却无显著影响，说明GA在有效浓度范围内无细胞毒性，因此在无毒性浓度内等量使用GA对正常黑色素生成无影响，以上结论表明GA通过转录激活机制进而诱导刺激黑素产生，发挥抗黑色素瘤的作用［2］。 GA的抗肿瘤药理作用是多样的，CHUNG等进行系统的研究后，得出的构效关系结论为进一步以GA前体结构开发新药物提供丁思路：①GA能减灭细胞癌变刺激物(如乙醇、丙酮、醋氨酚、CCl4等)活化：酶学测定，通过抑制肝微粒体细胞色素P450(CYPlA，)活性减少前致癌物的活化，GA具有化学性防癌的作用，可对抗四氯化碳、半乳糖胺及丙烯基甲酸盐等化学物质所致肝细胞癌变性损伤。α构型既抑制“增毒”的细胞素P450同工酶活性，减
吸附剂及其作用机理研究与探讨
吸附剂及其作用机理研究与探讨 王丁明 （河北理工大学市政工程系） 摘要：本文全面叙述与探讨了吸附剂的作用机理和物理性质，并对几种常见 的吸附剂给予了介绍。 关键词：吸附剂作用机理活性炭 1前言 任何一对原子（或分子）间均有相互吸引的作用。如果一对原子有一方是固体表面原子，另一方是气体分子，那它们相互作用的结果是将气体束缚于固体表面或使被束缚分子与气体体相内的分子成某种动态平衡。这种气体分子在固体表 面上发生的滞留现象称为气体在固体表面的吸附作用。换言之，气体在固体上的 的吸附作用是发生在两相界面上的行为，使气相中的某种组分在此界面上浓集。吸附作用使固体表面能降低，因而吸附过程是自发过程。 在工农业生产活动和日常生活中，吸附现象是普遍存在的。为了研究方便，通常将被吸附的物质称为吸附质，能有效地吸附吸附质的物质称为吸附剂。吸附质可以是气体、蒸气和液体，吸附剂大多为多孔性大比表面积的固体。 本文将全面叙述与探讨吸附剂的作用机理和物理性质，并对几种常见的吸附剂予以介绍。 2吸附剂的作用机理 吸附是一种建立在分子扩散基础上的物质表面现象。以固体表面和吸附分子 间作用力的性质区分，吸附作用大致可分为物理吸附、化学吸附和离子交换吸附。 2.1物理吸附 有关物理吸附的许多实验结果表明，物理吸附具有吸附热较小、吸附速度快、吸附无选择性、吸附可以是多层的等特点。因此人们认为引起物理吸附的力是普遍存在于各种原子和分子之间的范德华力。范德华力来源于原子与分子间的取向力、诱导力和色散力三种作用。 极性分子可视作偶极子，其极性用偶极矩卩=qd来衡量，即正或负电荷电量（q）与电荷中心间距d的乘积。卩=0的分子为非极性分子，卩越大，分子极性越大。测定分子偶极矩是确定分子结构的一种实验方法。德拜因创立此方法而荣获1936年诺贝尔化学奖。极性分子相互靠近时，因分子的固有偶极之间同极相斥异极相吸，使分子在空间按一定取向排列，使体系处于更稳定状态。这种极性分子之间靠永久偶极与永久偶极作用称为取向力，其实质是静电力。
腐植酸为什么能提高植物的抗逆性
腐植酸为什么能提高植物的抗逆性？ 腐殖酸是一种天然的有机大分子化合物的混合物，广泛存在于自然界中，由于其具有独特的生理功能，近年来被广泛应用于农业生产。除了改良土壤、提高肥效、促进作物生长等方面，它在植物抗逆性中的作用也越来越受到关注。 关于植物抗逆性 植物体是一个开放体系，生存于自然环境之下，难免会遭到恶劣环境的伤害。通常我们把这些对植物产生伤害的环境称之为逆境(或胁迫)，细分起来有以下几类： 生物 物理 化学 温度 病害、虫害、杂草 阴雨、雪、冰雹、机械伤害、洪涝、干旱 除草剂及化肥的副作用、药害、土壤酸化、板结、盐碱化 高温、低温 当这些逆境出现时，植物会产生一些列的变化，如干旱会导致叶片和嫩茎萎蔫；淹水使叶片黄化，枯干，根系褐变甚至腐烂；高温下叶片变褐，出现死斑，树皮开裂；病原菌侵染叶片出现病斑。
轻则影响植物的生长发育及产量和品质，严重时甚至直接导致其死亡。 与人和动物不一样是，植物无论遇到什么危险，都无法逃离，既然跑不掉，植物只能退而求其次，练就了一身“挨打”的本领，这便是植物抗逆性的由来。 如干旱情况下植物通过控制叶片的气孔的开关，来维持水分的平衡；受到高盐度的环境胁迫，通过改善细胞膜的通透性，来阻止大量盐溶液进入植物体内；甚至遭受病虫害时，部分植物也可产生化学物质去抵抗，或吸引病虫害的天敌来消灭它们。 一般来说，植物在生长盛期抗逆性比较小，进入休眠以后，则抗逆性增大；营养生长期抗逆性较强，开花期抗逆性较弱。但如果逆境超出了其耐受能力，植物也是难逃厄运。 逆境一旦出现，我们无法改变，但若能提升植物自身的抗逆性，或许是不错的办法！ 腐植酸在各种逆境中的作用
抗氧化剂的作用机理研究进展
抗氧化剂的作用机理研究进展 摘要：食品抗氧化剂的作用比较复杂。BHA和BHT等酚型抗氧化剂可能与油脂氧化所产生的过氧化物结合，中断自动氧化反应链，阻止氧化。抗坏血酸、异抗坏血酸及其钠盐因其本身易被氧化，因而可保护食品免受氧化。另一些抗氧化剂可能抑制或破坏氧化酶的活性，借以防止氧化反应进行。研究食品抗氧化剂的作用机理并合理使用抗氧化剂不仅可延长食品的贮存期，给生产者、经销者带来良好的经济效益，也给消费者提供可靠的商品。 关键词：抗氧化剂作用机理自由基现状前景展望 食品的变质，除了受微生物的作用而发生腐败变质外，还会和空气中的氧气发生氧化反应。食品氧化不仅会使油脂或含油脂食品氧化酸败(哈败)，还会引起食品发生退色、褐变、维生素破坏，从而使食品腐败变质，降低食品的质量和营养价值，氧化酸败严重时甚至产生有毒物质，危及人体健康。防止食品氧化变质，在食品的加工和储运环节中，除采取低温、避光、隔绝氧气以及充氮密封包装等物理的方法还可以配合使用一些安全性高、效果大的食品抗氧化剂以防止食品发生氧化变质。 1 食品抗氧化剂的定义 食品抗氧化剂是指防止或延缓食品氧化，提高食品稳定性和延长食品储藏期的食品添加剂。具有抗氧化作用的物质有很多，但可用于食品的抗氧化剂应具备以下条件：①具有优良的抗氧化效果； ②本身及分解产物都无毒无害；③稳定性好，与食品可以共存，对食品的感官性质(包括色、香、味等)没有影响；④使用方便，价格便宜。[1] 2 食品抗氧化剂的分类 目前，对食品抗氧化剂的分类，按来源可分为人工合成抗氧化剂和天然抗氧化剂(如茶多酚、植酸等)。按溶解性可分为油溶性、水活性和兼溶性三类。油溶性抗氧化剂有BHA、BHT等；水溶性抗氧化剂有维生素C、茶多酚等；兼溶性抗氧化剂有抗坏血酸棕榈酸酯等。按作用方式可分为自由基吸收剂、金属离子螯合剂、氧清除剂、过氧化物分解剂、酶抗氧化剂、紫外线吸收剂或单线态氧淬灭剂等。[2] 3 食品抗氧化剂的作用机理 由于抗氧化剂种类较多，抗氧化的作用机理也不尽相同，归纳起来，主要有以下几种： 一是抗氧化剂可以提供氢原子来阻断食品油脂自动氧化的连锁反应，从而防止食品氧化变质； 二是抗氧化剂自身被氧化，消耗食品内部和环境中的氧气从而使食品不被氧化； 三是抗氧化剂通过抑制氧化酶的活性来防止食品氧化变质。 四是将能催化及引起氧化反应的物质封闭，如络合能催化氧化反应的金属离子等。[3]
肿瘤细胞株
Tca8113-P160人舌癌细胞株 TSCCA人舌鳞癌细胞株 CaES-17人食管癌细胞株 Ec109人食管癌细胞株 Hep-2人喉癌细胞株 SPC-A1人肺癌细胞株 A549人肺癌细胞株 GLC-15人肺腺癌细胞株 HAC-84人肺泡癌细胞株 ACC-M人唾液腺性肺癌高转移细胞株NCL-H446人肺癌细胞株 M14人肺癌细胞株 H460人大细胞肺癌细胞株 Calu-6人肺癌细胞系未分化癌细胞株 95-D人高转移肺癌细胞株 95-C人低转移肺癌细胞株 H292人表皮肺癌细胞株 DMS153人小细胞肺癌细胞株 PG49人肺腺癌细胞株 PG-BE1人肺巨细胞癌PG的高转移亚系PG-LH7人肺巨细胞癌PG的低转移亚系A2人肺腺癌细胞株 973人肺腺癌细胞株 LTEP-a-2人肺腺癌细胞株 Z-HL16C人胚肺成纤维细胞突变癌细胞株HS-746T人胃癌细胞株 AGS人胃腺癌细胞株 Hs746T人胃癌细胞株 MGC-803人胃腺癌细胞株 SGC7901人胃癌细胞株 BSG823人胃癌细胞株 T-24人移行细胞膀胱癌细胞株 BIU-87膀胱癌细胞株 HT-1376人膀胱癌细胞株 MG-63人成骨肉瘤细胞株 Saos-2人生骨肉瘤细胞株 HOS人骨肉瘤细胞株 U-2OS人骨肉瘤细胞株 OS-732人骨肉瘤细胞株 RPMI-8226人多发骨髓瘤 A-204人横纹肌肉瘤细胞株 HT1080人纤维肉瘤细胞株 HT-1080人纤维肉瘤细胞株 U251星形胶质瘤细胞株
DaudiBurkitts淋巴瘤细胞株 CA46Burkitts淋巴瘤细胞株 ACHN人肾癌细胞株 769-P人肾癌细胞株 A498人肾癌细胞株 786-O人肾透明细胞腺癌细胞株 SW13人肾上腺皮质瘤细胞株 Ketr-3人肾癌瘤株细胞株 RCC-krause人肾癌细胞株 SK-RC-42人肾癌细胞株 H4人脑神经胶质瘤细胞株 BT-325人脑多形性胶质母细胞瘤细胞株SGH44人脑胶质细胞瘤细胞株 TJ905人脑恶性胶质瘤细胞株 U-373MG人脑胶质瘤细胞株 SF126人脑瘤细胞株 SF17人脑瘤细胞株 SF763人脑瘤细胞株 SF767人脑瘤细胞株 SH-SY5Y人成神经细胞瘤细胞株 M17人神经母细胞瘤细胞株 LAN-5人神经母细胞瘤细胞株 SK-N-SH人神经母细胞瘤细胞株 LAN-6人神经母细胞瘤细胞株 SK-N-DZ人成神经瘤细胞-骨髓 PC-3人前列腺癌细胞株 DU145人前列腺癌细胞株 LNCaP人前列腺癌细胞株LNCaPCloneFGC人前列腺癌细胞株 Tsu-Prl人非雄激素依赖型前列腺癌细胞株22RV1人前列腺癌细胞株 PC-3M1E8人前列腺癌细胞高转移亚系PC-3M2B4人前列腺癌细胞低转移亚系SW1990人胰腺腺癌细胞株 PANC-1人胰腺腺癌细胞株 PL45人胰腺导管腺癌细胞株 HPAC人胰腺癌细胞株 Panc03.27人胰腺癌细胞株 Panc08.13人胰腺癌细胞株 Panc10.05人胰腺癌细胞株 Panc05.04人胰腺癌细胞株 Panc02.03人胰腺癌细胞株 F56人腺癌细胞株 ACC-2人诞腺腺样囊性癌细胞株
腐植酸与土壤中重金属离子的作用机理研究概况
腐植酸与土壤中重金属离子的作用机理研究概况* 卢 静 朱 琨 侯 彬 赵艳锋 （兰州交通大学环境与市政工程学院 兰州 730070） 摘 要：在分析我国农田土壤重金属污染状况的基础上，阐述了腐植酸与铬、镉、锌等金属离子在土壤中的作用机理研究现状，认为通过范德华力、氢键、静电吸附、阳离子键桥等形成土壤有机-无机复合体，使腐植质的胶团被吸附在土壤颗粒表面，使带正电的金属离子更牢固地与土壤结合，从而有效防止被农作物吸收。文章指出，腐植物质的结构及其与金属离子作用机理的研究，对于促进腐植酸土壤环境保护领域的应用与相关的技术开发具有重要意义。 关键词：腐植酸 土壤 重金属离子 作用机理 中图分类号：TQ320.6 文献标识码：A 文章编号：1671-9212(2006)05-0001-05 General Situation of the Reaction Mechanisms of Humic Substances with Heavy Metal Ions in Soil Lu Jing, Zhu Kun, Hou Bin, Zhao Yanfeng (School of Environmental and Municipal Engineering Lanzhou Jiaotong University, Lanzhou, 730070) Abstract: On the basis of analyzing the exact contamination situation of agricultural soils in China, the utilization of humic substances to prevent heavy metal contamination from wastewater irrigation is reviewed while the reaction mechanisms of humic substances with heavy metal ions, such as Cr, Cd and Zn, are supposed including formation of organic-inorganic complexes by hydrogen bonds, static electrical adsorption and cation bond etc. As a result, colloidal structural groups of humic substances are adsorbed on the soil surfaces in addition to adsorb metal cations to promote them binding ef? ciency. Finally, the heavy metals that retain in the soil matrix can be prevented crops from absorption. Furthermore, the investigations on the reaction of humic substances with metal ions play an important role in environ-mental protection and the relative technical development. Key words: humic acid; soil; heavy metal ion; reaction mechanism 随着工业发展及城市化程度的不断提高,水资源日趋紧张。水资源的匮乏，使污水成为灌溉用水的来源之一。这对于解决我国水资源短缺问题起到了重要作用。2005年全国废水排放总量为524.5亿吨，其中工业废水排放量为243.1亿吨[1]。目前，我国污水处理率低，灌溉水中有害物质严重超标。 根据我国第二次污灌区环境质量状况普查统计结果（基准年为1995年），我国利用污水灌溉的农田面积为361.84×104h m2，占我国总灌溉面积的7.33%，占地表水灌溉面积约10%[2]。该资料表明，我国37个主要污灌区中有明显污染点22个，其中多半是积累性重金属超标[3]。据我国农业部进行的全国污灌区调查，在约140万公顷的污水灌区中，遭受重金属污染的土地面积占污水灌区面积的64.8%，其中轻度污染的占46.7%，中度污染的占9.7%，严重污染的占8.4%[4]。因盲目使用污水作为灌溉水源，导致农作物品质产生严重的影响[5]。 腐植质是一种广泛存在于水体、土壤中的有机化合物，是动、植物残体通过微生物分解、合成的高分子有机物。 根据在酸碱性水溶液中的溶解度，可以将腐植质分类为：胡敏酸（humic acid，即腐植酸，H A）溶于碱溶液，但不溶于酸性溶液（一般p H ＜2）；富里酸（fulvic acid，煤化学中称黄腐 *甘肃省自然科学基金资助项目，编号：3ZS06-A25-025。
溶菌酶作用机理研究
裂解酶PlySs2裂解细菌的作用机理研究 1.实验目的 PlySs2是从猪链球菌（Streptococcus suis）噬菌体中分离到的一种裂解酶，对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant streptococcus aureus,MRSA）、万古霉素中介耐药 金黄色葡萄球菌（V ancomycin-intermediate streptococcus aureus,VISA）、猪链球菌、李斯特 菌（Listeria）、模仿葡萄球菌（Streptococcus simulans）等细菌具有抑制活性，活性高，抗菌谱广[1, 2]。研究发现，PlySs2由两个功能结构域构成，即催化结构域（Catalytic domain,CD,PlySc）和细胞壁结合结构域（Cell wall binding domain,CBD,PlySb）[1, 2]。CBD结构域负责与细胞壁上相应基质结合，CD结构域侧催化相应的化学反应促使细胞壁上特定物质分解，从而破坏细胞壁结构并裂解细胞。PlySs2的N端为半胱氨酸-组氨酸氨基水解酶（Cysteine-histidine amidohydrolase/peptidase，CHAP）催化结构域，C端为SH3 5型结合结构域。CHAP结构域即具有丙氨酸酰胺酶活性，也具有肽桥内切酶活性[2]。研究发现，只有完整的PlySs2才能 保持其较高的溶菌活性，PlySs2属于结合结构域PlySb依赖型，单独的催化结构域PlySc的溶解活性很小或者基本无活性[1]，说明PlySb对底物的识别十分重要。PlySs2能识别多种菌的细胞壁并产生裂解活性，但是不同菌之间存在活性差异，这即体现了其广谱性，又体现了活性差异性。相关报道表明，多数裂解酶与细菌细胞壁中肽聚糖的特定位点结合并破坏其结构，从而裂解细菌。不同菌株之间细胞壁的组成成分具有差异，导致裂解酶存在活性差异[3]。目前推测，PlySs2的结合位点在细胞壁肽聚糖上，并破坏其结构以裂解细菌。本研究的目的是找到PlySs2与肽聚糖相互作用的结合位点，分析PlySs2裂解细菌的作用机理。 2.实验思路 根据实验室已有的方法诱导表达和纯化PlySs2，备用。选择PlySs2裂解活性最高的金 黄色葡萄球菌作为实验菌，在最适条件下培养并获得菌体。 实验思路一：PlySs2直接与金黄色葡萄球菌相互作用。 在最适条件下孵育PlySs2和金黄色葡萄球菌的混合物，离心并收集上清液。由于PlySs2与金黄色葡萄球菌细胞壁上某种物质相互结合并反应，可能存在PlySs2与底物结合在一起 的复合物，离心后收集上清液，其中可能存在少量该复合物，再采用非变性聚丙烯酰胺凝胶
生化腐植酸的肥效及作用机理研究
生化腐植酸的肥效及作用机理研究 贾爱萍 赵 冰 廖宗文 （华南农业大学资源环境学院新肥料资源研究中心 广州 ５１０６４２） 摘 要：采用温室盆栽的方法，研究了施用生化黄腐酸（ＢＦＡ）对番茄生长和防病的影响。结果表明：ＢＦＡ能明显提高番茄的株高、生物量，土壤微生物群落的结构组成发生了明显变化，土壤微生物的各项多样性指数都有所提高，并降低了番茄青枯病的发生率。关键词：生化腐植酸 番茄 防病功能 Ｂｉｏｌｏｇ 多样性指数 Ａｂｓｔｒａｃｔ： The effects of B FA o n tomato g rowth and disease resistance were studied through pot experiment in a greenhouse. The results showed that the application of BFA could increase the plant height and biomass significantly, change the soil microbial c ommunity structure, and enhance the soil microbial diversity index. The severity of tomato wilt was also reduced. Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： BFA; tomato; disease resistance; Biolog; diversity Index 生化腐植酸（ＢＦＡ）是一种有机肥，其成分和功效均有突出的优点。我国上世纪５０年代末和７０年代，都曾大搞腐植酸的群众运动。８０年代，在进行了长达４年的大规模应用试验和较深入的理论研究之后，总结出腐植酸在农业方面有五大功效：改良土壤、增强肥效、增加产量、提高作物抗病力和改善品质。近年来，随着环保意识增强和绿色食品、有机食品的发展，包括ＢＦＡ在内的绿色环保肥倍受关注。在国家和地方科技立项和企业新产品开发中，ＢＦＡ成为一个活跃的前沿。 ＢＦＡ有别于传统的腐植酸产品，它不是由矿物（泥炭、风化煤）通过化学方法提取的，而是由作物秸秆、木屑、蔗渣等农业废弃物通过化学或微生物发酵工艺制取。其重要成分为腐植酸中最具活性的黄腐酸，研究表明，ＢＦＡ含有多种氨基酸和有益微生物种群，是一种混合物，其缩合程度和碳含量较低，分子量较小，而含有活性基团较多，表现出色泽较浅，水溶性较好，易于被动植物组织吸收及生物活性较高等特点［１］。十多年来的大量事实证明，与矿物腐植酸（包括矿物黄腐酸）相比，ＢＦＡ活性更高，具有更优良的应用效果，而且开拓了一条资源化治污的新路，把废弃物转化为一种极有价值的新资源。 ＢＦＡ的出现和发展晚于矿物腐植酸，对其功能、效果及制造的研究亦较为薄弱。加强这方面的研究，对于推进ＢＦＡ及整个有机肥的发展，都有重要作用。本研究在几种腐植酸肥的肥效对比基础上，应用Ｂｉｏｌｏｇ方法探讨其肥效机理，并分析其应用前景。 １ ＢＦＡ的生产特点 ＢＦＡ的原料取自生物残体，如秸秆、木屑、蔗渣和一些工业废渣废液如味精、酒精废液。对这类废物资源的利用还有环保效益。而且这类资源充裕，与矿物（泥炭、风化煤）等不可再生资源相比，一般不存在枯竭的问题。 ＢＦＡ的制造，通常要对原料进行水解，然后提取黄腐酸（ＦＡ），江苏南通市绿色肥料研究所开发“化学氧化降解法”技术，大大提高了产品得率，快速高效［２］。
动态能力与知识管理比较研究及其作用机理
动态能力与知识管理比较研究及其作用机理 0 引言 环境的复杂性和不确定性对企业的长久生存和持久的竞争优势提出了挑战。而自从Teece等首次提出动态能力，并认为其是企业维持竞争优势的来源以来，动态能力理论已成为战略和组织研究领域的一大热点。随着动态能力理论的发展，学者们根据自己研究的需要，分别从演化经济学角度、战略管理角度或是实证角度等对企业动态能力进行界定，但至今对其内涵和维度构成没有形成一致的公论，其科学性受到了质疑，大大削弱了动态能力理论对企业经营实际的解释性与指导性。而从知识管理视角来解释动态能力成为理论研究的一个新方向，但理论尚未成熟且面临着诸多置疑。因此，本文研究的目的在于揭示动态能力与知识管理的作用机理，以正确界定动态能力的概念，为实践操作中提升动态能力提供启迪。本文的研究思路如下：首先对动态能力“知识观”进行界定及述评；其次对动态能力与知识管理理论进行比较研究；最后引入组织学习概念，构建了知识管理、组织学习与动态能力的相互作用机理模型，剖析三者之间的作用机理及其对持续组织绩效的影响关系。 1 基于知识观的动态能力理论的逻辑演进 Teeee等首次提出了动态能力的概念：为了适应快速变化的外部环境，构建、整合和重构企业内外部竞争力的能力。然而有些学者指出这个概念存在同义反复的嫌疑，因此以惯例、流程、集体行为等为切入点，试图定义企业的动态能力，其中知识角度也是一个重要的切入点。Subba和Narasimha将动态能力定义为组织知识的一种特殊属性，这种属性体现为一种为应对动荡环境而产生的变革能力，帮助企业具有先动优势并及时适应环境变化。Zollo和Winter从学习和组织知识演化的角度将企业的动态能力定义为一种稳定的集体学习(活动)模式。Nielsen直接将动态能力视为一组具体的、典型的知识管理活动，包括知识发展、知识再整合、知识运用。国内学者董俊武等。也从知识载体的角度提出，能力可以被看作为企业知识的集合，而改变能力的能力也就是动态能力的背后也是知识。 企业改变能力的过程就是企业追寻新知识的过程，改变能力的结果是企业建立了一套新的知识结构。总的来看，从知识视角来解释动态能力的这一类观点，大多是基于Teece等学者的观点，并有所延伸。强调知识获取、整合、运用及创新等活动，并指出知识是动态能力的核心。因此我们将其总称为动态能力“知识观”，进而本研究将动态能力“知识观”的内容整合归纳为：企业是一个知识系统，知识管理是一种集体的学习方式，通过识别市场机会和应对外部环境变化，从企业外部获取知识，并在内部整合与配置现有知识以创造新知识，进而创造新的资源配置方式与新的组织能力。 在对动态能力“知识观”进行归纳的基础上。我们进一步研究发现，动态能力“知识观”具有明显的优点：动态能力与知识管理都是静态因素与动态因素的组合，从知识角度来
深水作用机制研究进展讲解
深水作用机制研究进展 过去几十年里深海沉积理论在沉积学领域取得的进展有目共睹，进入21世纪以来有关论文发表数量跨入了一个崭新的阶段，充分显示了国际上在深海沉积作用研究成果及发展趋势，尽管我国相关方面的学术研究不尽如意。其中，三个方面受到了特别关注：一是与“鲍玛序列”有关的重力流沉积作用，20世纪90年代后期沉积学界展开了大讨论(参见《AAPG Bulletin》)1997，81卷；1997年AAPG年会：Shanmugam及其同时系列论著)；二是深海牵引流相关的沉积作用；三是深海层序地层方面。然而，目前国内外对深海沉积作用理论的概念和模式还存在较大分歧，甚至在关键术语和概念模式方面还存在认识上的偏差，从而影响人们对深海沉积油气预测与勘探方向的把握。本文主要对近几年国内外专家学者在深海沉积理论中对深水作用机制的研究进行了总结和归纳。 1 陆坡倾向的重力作用机制和相应沉积作用 1.1 深水重力作用认识进展 沉积物重力流中的颗粒流和液化流由于地质历史时期的实例少和应用价值不高故不受关注，碎屑流和浊流及其沉积物则是争论的主题。1997年AAPG年会上，Cliffton召集组织了题为“深水碎屑沉积作用与储层关系：我们能预测什么?”(Processes of deepwater clastic sedimentation and their reservoir implica-tions：whatcanwe predict ?)的讨论会，试图为解决这些争议找出一些关联答案。参加这次讨论会的正是相关领域的著名沉积学家如Bouma、Damuth、Lowe、Parker、Shanmugam等，但双方未能就自己的观点说服对方。那么，争论的焦点是什么呢?正是我们熟知的“鲍玛序列”!此次会议之后，Shanmugam在其系列文章中阐述了“鲍玛序列”并不都是浊流成因的思想，矛头直指“鲍玛序列是浊流形成的浊积岩所具有的特征层序”经典论断，而该论断和相关的“浊积扇”模式广泛流行于沉积学界，并在各个时期沉积学论著中大都能看到这种主流观点盛行的体现。 Shanmugam (2002)在对“鲍玛序列”经典剖面——法国海事阿尔卑斯
肾细胞癌分子生物学研究进展与病理分型
肾细胞癌分子生物学研究进展与病理分型 肾细胞癌(renalcellcarcinoma,RCC)是泌尿系统常见的恶性肿瘤之一,长期危害着人类健康。近十年来,对肾细胞癌的分子生物学研究取得了长足的进展,使我们对肾细胞癌有了更深刻的认识。本文就肾细胞癌各种病理分型的分子生物学研究进展进行综述。 1肾细胞癌发生的分子生物机制 肾癌的发生发展是多阶段、多步骤的过程,包括癌基因激活和抑癌基因(tumorsuppressorgene,TSG)失活在内的一系列遗传学改变。抑癌基因的缺失或失活是肿瘤发生发展过程中重要的分子事件之一。肿瘤常在抑癌基因位点出现染色体基因缺失,表现为等位基因杂合性缺失(lossofheterozygosity,LOH),通过检测分析肿瘤LOH及其规律,可在染色体一定范围内发现肿瘤的抑癌基因及易感基因。为了能较全面的了解导致肾细胞癌发生发展的关键分子事件,不同学者对肾细胞癌全基因组进行了不同的研究,发现肾细胞癌发生高频率LOH主要见于以下几个染色体:3p、5q、8p、9p、10q、14q、17和18q染色体。 1.13号染色体:3号染色体短臂的部分缺失是肾癌基因改变中的高发事件。其中定位于3p25-26的VHL抑癌基因被认为是这些基因改变的首要目标。在以前的研究中,VHL在肾透明细胞癌(cc-RCC)中的失活机制主要为等位基因缺失和突变,DNA超甲基化很少见。刘宁等利用PCR限制性片段长度多态性法对3号染色体上的VHL基因的两个单核苷酸多态性位点进行检测来分析VHL基因的杂合性缺失失情况,发现,42%(8/19)发生VHL基因LOH,并未发现VHL基因失活与肿瘤的分期、分级存在联系。 有杂合性缺失研究显示,有可能在染色体3p上存在另外的RCC相关抑癌基因。定位于染色体3p14.2上包含最常见的FRA3B脆性位点的FHIT基因作为候选抑癌基因日益受到关注。Velickovic等通过选择性的检测FHIT区域的LOH发生情况认为这个基因在ccRCC的发展过程中起到很重要的作用。并且发现在cc-RCC中染色体3p的LOH发生率达76%。Farkas等对88例肾细胞癌病例进行LOH研究,选取了3p14.2-p25范围内16个位点采用PCR技术进行LOH分析,结果显示VHL基因和FHIT基因区域,透明细胞癌的LOH发生率高达96%,而乳头状细胞癌和嫌色细胞癌仅为10%和18%,并且LOH的发生率与肿瘤大小、分期、分级无关。从而认为VHL和FHIT的等位基因缺失是肿瘤发生的早期事件。 1.25号染色体:1986年APC基因首次在一位患有息肉病及多种其它先天性畸形患者的5号染色体长臂片段先天性中间缺失中得到证实,确切的基因位点随后由定位克隆确定。Pecina-SlausN等利用相对外显子11和15的特殊寡核苷酸引物
核心力量的定义及作用机制探讨
核心力量的定义及作用机制探讨 关亚军,马忠权 (哈尔滨工业大学体育部,黑龙江哈尔滨150001) 摘要:主要采用文献资料法和逻辑推理法,总结和分析前人从人体的重心,脊柱,人体的腰椎、骨盆和髋关 节联合的周围与重心位置的关系,整体肌群与局部肌群的关系四个角度对核心力量的定义进行研究。在此 基础上,以人体的核心部位与非核心部位之间的关系为视角,提出了核心力量的新见解。最后,总结和分析 了前人的解剖学,生理学,神经学,生物力学四个领域对核心力量的作用机制。 关键词:核心力量;定义;作用机制 中图分类号:G808.12文献标识码:A文章编号:1007-3612(2010)01-0106-03 On the Definition and Mechanism of Core Strength GUAN Y a-jun, MA Zhong-quan (Harbin Institute of Technology, Harbin 150001, Heilongjiang China) Abstract:By methods of literature review and logical analysis, the paper has studied the definition of core strength which is carried out by predecessors from the body’s gravity center, the spine, the relations among the lumbar spine and the pelvis and the hip joint position and the gravity center, the relationship between the overall muscle groups and local muscle groups. On the basis of their perspective, it proposes new definition of core strength from the relation between the parts of core body and the parts of non-core body. Finally, it has studied the mechanism of core strength carried out by predecessors from anatomy, physiology, neurology and bio-mechanism. Key words:core strength; definition; mechanism 核心力量的概念最早源于核心稳定性,核心稳定性的提出源于脊柱稳定性。1985年Panjabi首次提出脊柱稳定性的概念,他认为脊柱稳定性包括被动脊椎骨、主动脊柱肌肉和神经控制单元三个系统;1992年,在脊柱稳定性的启发下,核心稳定性随之被其提出。Kibler首次将核心稳定性的概念引人竞技运动训练,其认为核心稳定性有产生力量、传递力量和控制力量三方面功能。核心稳定性是核心力量的结果,核心力量是核心稳定性的具体表现形式。[1] 1核心力量的定义探究 1.1以人体的重心为角度,阐述了核心肌群的范围Ian Hasegawa以腹部、臀部、腰骶部、胸部和背部上的肌肉称为核心肌肉[2];Travis Brown则以位于腹部和脊柱附近的大肌肉为核心肌肉,其中腹直肌、腹外斜肌、腹内斜肌、腹横肌和竖脊肌等是最主要的核心肌肉[3];Paul J·Goodman以联合体上的腹直肌、腹外斜肌、腹内斜肌、腹横肌、胸腰筋膜、腰方肌、髂腰肌、臀大肌、臀中肌和竖脊肌等29块肌肉称为核心肌肉[4]。 纵观以上学者,核心肌群的范围是从胸的中部到大腿中部,包括正面、两侧、后面能够调控人体重心达到维持躯干平衡稳定的肌肉的统称。 1.2以脊柱为角度,阐述了核心肌群的范围MARJORIE,JOHN D WILLSON, JEFFREY M WILLARDSON, KIM MSAMSON[5-8]等学者将核心肌群确定在腰椎-骨盆-髋关节部位,认为
近十年腐植酸应用研究综述_李威
专题评述 近十年腐植酸应用研究综述 李 威 邹立壮 朱书全 钱芬芬 （中国矿业大学化学与环境工程学院 北京 １０００８３） 摘 要：综述了近十年腐植酸应用研究的进展，介绍了其在农业、园林业、工业、环境工程、医药卫生等领域的研究成果，着重介绍了腐植酸基保水剂，并对其研究前景作一展望。 关键词：腐植酸 进展 保水剂 中图分类号：ＴＱ３１１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７１－９２１２（２００６）０３－０００３－０６ The General Statement on Humic Acid Application in Recent Ten Years Li Wei, Zou Lizhuang, Zhu Shuquan, Qian Fenfen (School of Chemical and Environmental Engineering, China University of Mining and Technology, Beijing, 100083) Abstract: It reviews the progress in humic acid application in recent ten years, and introduces the achievements made on agriculture, horticulture, industry, environmental engineering, and pharmaceuticals etc., and absorbents of humic and acrylamide is introduced stressly. The potential development of the research on humic acid is also prospected. Key words: humic acid; progress; superabsorbent polymer 腐植酸广泛存在于土壤、湖泊、河流、海洋中。自然界中的泥炭、褐煤和风化煤中含有丰富的腐植酸［１，２］。它是影响环境生态平衡的重要因素，也是潜在的、可大力开发和综合利用的有机资源［３］。近些年来，在广大科技工作者的不懈努力下，腐植酸的开发利用工作取得了长足进步，使得腐植酸类物质在农业、园林业、畜牧业、养殖业、医药卫生、工业、环境工程等领域的研究与应用都有了新的进展。 １ 腐植酸在农业领域的应用 １．１ 制造腐植酸类肥料 腐植酸在农业领域的研究开发利用是最多的，也是我国２０世纪７０年代开展腐植酸综合利用的初衷，目的是为了缓解当时化肥总量不足的困难［４，５］。实践证明，腐植酸对西红柿、棉花、葡萄等作物的生长具有类似于荷尔蒙的刺激作用［６］。目前，腐植酸已成为农业上应用的抗旱剂、叶面肥、调整剂及复配产品的主要成分［７］。 １．１．１ 制造腐植酸类液肥 腐植酸喷洒在叶面上后，能使叶面气孔缩小，减少水分蒸腾，提高农作物抗旱能力。腐植酸已主要作为植物调整剂用于叶面肥的组分，在农业上正获得越来越广泛的应用［２，４］。如中国科学院化学研究所的“华硕８２８”、广东的“叶面宝”、北京的“万得福”、保定的“万家宝”和河北的“高美施”等叶面肥均属此列。自１９９７年１２月至２００１年７月，在我国农业部登记的各种形式的叶面肥生产企业已有５３家。白燕等［８］利用改性泥炭提取出的腐植酸，溶于水后加入常量、微量元素配制成的液体肥料，在蔬菜上施用后能改善蔬菜品质，增加产量２０％左右。关敏等［９］在腐植酸溶液中复配ＮＰＫ常量元素和络合铜、铁、锌、锰等微量元素制成的腐植酸植物营养液具有改良土壤、对氮磷钾肥增效、刺激作物生长、增加产量、改善农产品品质等优点。 生物技术如能充分利用黄腐酸分子量小、生物活性高、水溶性好、抗硬水能力强以及螯合能力强等特点，制成生物技术黄腐酸微肥，既能补充农作物所需的微量元素，又能发挥黄腐酸对植物的生长调节作用［１０，１１］，比传统腐植酸类叶面肥具有更优异的提高作物微量元素吸收率、增强抗病性和抗硬水能力强等特点。因此研究开发此类液体微肥对农业节水及农作物质量和产量的提高均有着重要意义。
miRNA地作用机制及功能研究进展
中国科学C辑:生命科学2009年第39卷第1期: 109 113 .scichina. life.scichina. 109 《中国科学》杂志社SCIENCE IN CHINA PRESS MicroRNA作用机制研究的新进展爽默芳中国科学院生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室200031 联系人E-mail: mfliusibs.ac. 收稿日期: 2008-09-04 接受日期: 2008-11-28 国家重点基础研究发展计划批准号: 2005CB724603和国家自然科学基金批准号: 30770474资助项目摘要microRNAmiRNA是一种非蛋白质的新型基因表达调控因子对真核生物基因表达起非常重要的调控作用. 关于miRNA 的功能及作用机制方面的研究是当前生命科学研究的前沿 热点研究人员陆续提出了一些假说模型诸如翻译起始抑制、翻译起始后抑制、mRNA降解、P小体Processing Body SGStress Granules颗粒扣押靶mRNA等来阐述miRNA 如何抑制其靶基因的表达. 此外最近还有文献报道了一些全新 的miRNA作用方式如去抑制和miRNA 激活作用等. 本文将简要介绍一些miRNA作用机制研究的新进展及相关作用模型. 关键词miRNA 负调控去抑制正调控P小体SG颗粒准确的基因表达调控对生物体的生长发育和功能至关重要基因表达调控异常是疾病发生的主要原因. 在过去的数 十年间对基因表达调控的研究主要集中在蛋白质转录因子介导的基因表达调控方面. 研究发现它们通过激活或抑制基
因转录控制基因的表达在基因组信息转化为分子效应和生物效应过程中发挥着重要的作用. 最近在动、植物及病毒等生物中发现了一系列小分子非编码RNA small noncoding RNA 包括miRNAmicroRNA siRNA small interfering RNA piRNApiwi-interacting RNA和esiRNA endogenous siRNA等它们分别在转录水平、转录后水平及表观遗传水平等方面控制基因的表达组成了RNA 调控网络调控包括细胞增殖、分化和凋亡等一系列生理进程影响生物体的生长发育并与多种人类疾病的发生密切相关1. 这些小分子RNA的发现揭示了真核生物一种新的基因表达调控方式. miRNA是小分子非编码RNA家族的重要成员. miRNA与siRNA共用生成途径和作用途径中多种蛋白质因子. 但二者也有一些明显的区别如siRNA主要是由外源提供的小分子RNA 通过引发靶mRNA的切割负调控靶基因的表达而miRNA是基因组编码的源性小分子RNA 通常在翻译水平负调控靶mRNA的表达. miRNA基因由RNA聚合酶Ⅱ或/和Ⅲ转录23. 动物miRNA加工成熟一般需要两个RNase Ⅲ家族酶——Drosha 和Dicer参与. 最近发现AgoAr- gonaute蛋白在miRNA加工成熟中也发挥作用4. miRNA调控是通过RNA诱导基因沉默复合物RNA- induced silencing complex RISC完成的复合物的核心成员是Ago 家族蛋白还有一些功能未知、非RISC 核酸酶活性必需的蛋白成分如FXRP RNA 解旋酶等也存