谷胱甘肽的提取方法
细胞外泌体提取方法
外泌体提取详细步骤及方法 1、差速离心 差速离心仍然是最常见的外泌体分离技术之一。该方法包括几个步骤，包括低速离心去除细胞和凋亡碎片；更高速离心以消除更大的囊泡；最后高速离心沉淀外泌体： 300×g离心10分钟，取上清。 2000×g离心10分钟，取上清。 10，000×g离心30分钟，取上清。100，000×g，在4℃下持续离心90分钟，去掉上清，留下的沉淀PBS重悬后，再次以100，000×g离心90分钟。 2、密度梯度离心 该方法将超速离心与蔗糖密度梯度相结合，实现外泌体与非囊泡颗粒分离，例如蛋白质和蛋白质/RNA聚集体。因此，该方法将囊泡与不同密度的颗粒分开，能够提取含量低的外泌体。但是，合适的离心时间非常重要，否则如果它们具有相似的密度，则仍可在外泌体中发现污染颗粒。 3、尺寸排阻色谱 尺寸排阻色谱（Size-exclusion chromatography，SEC）是基于大小而非分子量实现分离大分子。该技术应用填充多孔聚合物微球的柱子，分子根据其直径通过微球，半径小的分子需要更长的时间才能通过色谱柱的孔隙迁移，而大分子则从色谱柱中更早地洗脱。尺寸排阻色谱可以精确分离大小分子。此外，可以将不同的洗脱溶液应用于该方法。与离心方法相比，色谱分离已被证明具有更多优势，因为通过色谱分离的外泌体不受剪切力的影响，这可能会改变囊泡的结构。目前，SEC是一种广泛接受的分离血液和尿液中外泌体的技术。不过，该方法耗时较长，不适合大量样本处理。 4、过滤 超滤膜也可用于分离外泌体。根据外泌体的大小，从蛋白质和其他大分子中分离外泌体。最常见的过滤膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔径，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌体，也有设计成微柱多孔硅纤毛结构以分离40-100nm外泌体：不过，该方法由于过滤膜的粘附，可能会损失外泌体，并且过滤时的压力和剪切力，可能会使外泌体变形受损。 5、基于聚合物的沉淀技术 基于聚合物的沉淀技术通常包括将样本与含聚合物的沉淀溶液混合，在4℃温育并低速离心。用于聚合物沉淀的最常见聚合物之一是聚乙二醇（PEG）。用
麻黄碱两种来源途径的最新概述
一：麻黄碱两种来源途径简介： 麻黄碱为麻黄草主含生物碱, 主要是1-麻黄碱、d-伪麻黄碱、麻黄次碱及甲基麻黄碱和去甲基麻黄碱等, 另含少量的挥发油、有机酸等成分。其中主要药用成分为麻黄碱和伪麻黄碱。麻黄碱是植物麻黄的主要药用成分之一。麻黄是一种药用植物, 为麻黄科植物草麻黄或木贼麻黄或中麻黄的干燥草质茎。麻黄是一种与麻黄碱同效的草药, 而麻黄碱是其主要有效成分之一, 5中国药典6 规定麻黄草中麻黄碱( C10H15NO) 的含量018% 以上才符合药用标准。中国是世界上惟一的天然麻黄碱生产国，麻黄为我国特产中药。我国麻黄的主要产地是内蒙古，其次是新疆、山西、吉林、辽宁、宁夏、甘肃、陕西、河北、河南等地。草麻黄产量最大，麻黄商品主流；中麻黄次之，木贼麻黄产量最小。其他药源：丽江麻黄产云南，四川，贵州。表面具较粗深的纵沟纹。膜质叶先端2裂。麻黄碱含量不少于0.6％。每年仅新疆地区，消耗麻黄草的用量在8～10万吨左右。由于生长麻黄草的主产区是中国沙漠化最为严重的地方。而麻黄草又是这些地区的主要固沙植物，所以，近年来麻黄草的过度采挖，已经对这些地区的生态环境造成了严重影响。因此。以化学合成手段生产符合市场要求的麻黄碱将是减少麻黄草的采挖，保护生态环境，满足市场需求的有效途径。目前，化学合成手段生产麻黄碱面临的主要问题是如何低成本地得到光学纯的
产物。 赤峰制药集团所属的艾克制药科技股份有限公司通过引进海南、深圳等地的风险投资解决了百吨合成麻黄素项目所需资金，2001年9月合成麻黄素车间顺利投产。当年爱克公司的主营收入就达到2951万元，实现利税645万元。目前公司的二期工程正在招商，投产后，合成麻黄素的年产量将达到400吨。根据预测，公司将拥有国际麻黄素市场霸主地位的前景。麻黄碱可以从麻黄植物中提取麻黄碱, 也可以有机合成法合成麻黄碱、微生物发酵生成麻黄碱、细胞培养法生成麻黄碱。经过多年科研攻关，赤峰市制药集团取得全化学法合成生产麻黄素的成功，并在关键技术上获得专利，拥有自主知识产权。该研究项目是国家“双高一优”和火炬计划中的项目。这是继德国之后，我国成为世界上第二个全化学法合成生产麻黄素的国家。据了解，以往生产麻黄素的原料是麻黄草。大量采集麻黄草已经严重破坏了草场、田野的生态平衡。为保护环境及可持续发展，赤峰市制药集团自1998年以来，先后投入资金1亿多元，对企业进行了大规模的技术改造和大修。目前，除了合成麻黄素以外，盐酸土霉素、灰黄霉素、土霉素的生产过程，都得到了良好的技术改造，经济效益明显增长。 二：麻黄碱的合成技术趋势：
GSH含量的测定.doc
主要目的： ——测定物质还原性谷胱甘肽（GSH）的含量。 主要原理： 参照 GSH检测分析试剂盒说明书， 5,5 ’–二硫代–双–（2–硝基苯甲酸）能和 谷胱甘肽（GSH）反应产生 2–硝基– 5–巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物（ GSSG）， 由于 2–硝基– 5–巯基苯甲酸是一黄色产物，通过测定其在412 nm处的最大吸 收可确定样品中谷胱甘肽的含量用纯化的谷胱甘肽（GSH）抗体包被微孔板，制 成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入谷胱甘肽（GSH），再与HRP标记的谷胱甘 肽（ GSH）抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。 TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽（GSH）呈正相关。用酶标仪在412 nm波长下测定吸光度（ OD值），通过标准曲线计算样品中谷胱甘肽（GSH）的含量。
实验室签章
一、试剂 ——谷还原性胱甘肽（ GSH）测定试剂盒（南京建成生物研究所） 二、仪器设备 —— 96 孔酶标板 —— UV-Vis 可见多功能酶标 仪——旋涡混匀器——离心机 ——移液枪及其相应量程枪头
三、实验方法 根据试剂盒说明书具体操作步骤如下: 1.上清液的制备：取稀释后的血清或组织匀浆液 mL，加试剂一应用液 2 mL 混匀， 4000 rpm 离心 10 分钟，取上清液 1 mL 进行显色反应。 2.显色反应：空白管中加入 1 mL 试剂一，标准管加入 20μmol/LGSH标准 液 1 mL，测定管加入上步骤得到的上清液 1 mL，然后各管中分别加入mL 试剂 二、试剂三、 mL 试剂四。 3.混匀，室温静置 5 分钟后，在 412 nm处将酶标板空板进行扫描，准确吸 取 mL 各管反应液加入到新的 96 孔板中，酶标仪测定各孔吸光度（ OD值）。 4.血清中 GSH含量计算公式 GSH含量（ mg/L） 测定 OD值 -空白 OD 值 -3 mmol/L） ×标准品浓度（ 20×10 标准 OD值-空白 OD值 ×GSH分子量（ 307）×样本测试前稀释倍数 组织中 GSH含量公式 测定OD值-空白OD值 -3 GSH含量（mg/gprot ）×标准品浓度（20×10 mmol/L） ×GSH分子量（ 307）×样本测试前稀释倍数÷待测组织匀浆液蛋白浓度 （gprot/L ） 参考文献 Lapshina E A, Sudnikovich E J, Maksimchik J Z, et al. Antioxidative enzyme and glutathione S-transferase activities in diabetic rats exposed to long-term ASA treatment [J]. Life sciences, 2006, 79(19): 1804-1811.
实验四 种子粗脂肪的提取
实验四种子粗脂肪的提取 一、实验目的 脂肪广泛存在于油料植物种子和果实中，测定脂肪的含量，可以鉴别其品质的优劣，也是油料作物选种和种质资源调查的常规测定项目。 二、实验原理 在了解了实验目的之后，关于这个实验有以下几个问题需要大家思考： 1.种子成分很复杂，脂肪的提取如何进行？ 2.什么是粗脂肪？ （答：脂肪不溶于水，易溶于有机溶剂（如石油醚）。利用这一特性，选用有机溶剂直接浸提出样品中的脂肪进行测定。提取物中除脂肪之外，还有游离脂肪酸、石蜡、磷脂、固醇、色素、有机酸等物质，故浸提物称粗脂肪。）通过以上问题的思考，我们知道了脂肪的提取主要是利用其易溶于有机溶剂的特性。具体的实验操作粗脂肪的提取，一般采用索氏脂肪提取器。 利用脂类物质溶于有机溶剂的特性。在索氏提取器中用有机溶剂（本实验用石油醚，沸程为 30 ～ 60 ℃）对样品中的脂类物质进行提取。 图索氏脂肪提取器 1. 浸提管 2. 通气管 3. 虹吸管 4. 小烧瓶 5. 冷凝管 索氏提取器是由提取瓶、提取管、冷凝器三部分组成的，提取管两侧分别有
虹吸管和连接管。各部分连接处要严密不能漏气。提取时，将待测样品包在脱脂滤纸包内，放入提取管内。提取瓶内加入石油醚，加热提取瓶，石油醚气化，由连接管上升进入冷凝器，凝成液体滴入提取管内，浸提样品中的脂类物质。待提取管内石油醚液面达到一定高度，溶有粗脂肪的石油醚经虹吸管流入提取瓶。流入提取瓶内的石油醚继续被加热气化、上升、冷凝，滴入提取管内，如此循环往复，直到抽提完全为止。 三、材料、仪器与试剂 （一）实验材料 大豆、花生、蓖麻、向日葵、芝麻等油料种子。 （二）仪器设备 索氏提取器（ 50 mL ），烧杯，干燥器，脱脂滤纸，镊子，分析天平，烘箱，恒温水浴，脱脂棉。 （三）试剂 石油醚（化学纯，沸程 30 ～ 60 ℃）。 四、实验操作 1.将洗净、晾干的芝麻种籽放在 80 ～ 100 ℃烘箱中烘 4 小时。待冷却后，准确地称取 2 ～ 4 g ，置于研钵中研磨细，将研碎的样品及擦净研钵的脱脂棉一并用脱脂滤纸包住用丝线扎好，勿让样品漏出。或用特制的滤纸斗装样品后，斗口用脱脂棉塞好。放入索氏提取器的提取管内，最后再用石油醚洗净研钵后倒入提取管内。 2. 洗净索氏提取瓶，在 105 ℃烘箱内烘干至恒重，记录重量。将石油醚加到提取瓶内约为瓶容积的 1/2 ～ 2/3 。把提取器各部分连接后，接口处不能漏气。用 70 ～ 80 ℃恒温水浴加热提取瓶，使抽提进行 16 小时左右，直至抽提管内的石油醚用滤纸检验无油迹为止。此时表示提取完全。 3. 提取完毕，取出滤纸包，再回馏一次，洗涤提取管。再继续蒸馏，当提取管中的石油醚液面接近虹吸管口而未流入提取瓶时，倒出石油醚。若提取瓶中仍有石油醚，继续蒸馏，直至提取瓶中石油醚完全蒸完。取下提取瓶，洗净瓶的外壁，放入 105 ℃烘箱中烘干至恒重，记录重量。 五、注意事项
(完整版)情感语音信号中共振峰参数的提取方法毕业设计
太原理工大学 毕业设计（论文）任务书毕业设计（论文）题目： 情感语音信号中共振峰参数的提取方法毕业设计（论文）要求及原始数据（资料）： 要求： 1：大量查阅关于共振峰提取技术的资料（通过Internet或图书馆）。 2：分析总结各种共振峰的提取方法。 3：用一种共振峰提取方法实现情感语音中共振峰的提取。 4：写一篇论文并给出共振峰提取结果。 原始数据： 1：共振峰研究意义 随着多模态人机交互技术的发展，新型人机交互模式的应用前景更加广阔。语音作
为一种自然有效的人机交互方式，成为当前的研究热点。语音信号不仅包含语音信息， 还包含着说话人的情感信息。语音情感信息处理技术的研究对于提高计算机的智能化具 有重要的现实意义。 语音情感信息处理技术作为一个重要的研究领域已经有很长时间的研究历史了，然 而在传统语音信号处理中往往忽略了在语音信号中的情感因素。共振峰是反映声道谐振 第1页
特性的重要特征，它代表了发音信息的最直接的来源，而且人在语音感知中利用了共振峰信息。所以共振峰是语音信号处理中非常重要的特征参数，已经广泛地用作语音识别的主要特征和语音编码传输的基本信息。人在语音感知中也利用了共振峰信息。所以共 振峰已经广泛地用作语音识别的主要特征和语音编码的基本信息。 语音的频率特性主要是由共振峰决定的，当声音沿声管传播时，其频谱形状就会随声管而改变。如果讲话者的发音中包含喜、怒、哀、乐等情感信息，那么讲话者的声道形状就会发生不同的变化。共振峰作为情感特征信息的非韵律特征参数，我们研究提取它的方法对包含在语音信号中的情感信息分析和处理时及其有意义的。 2：共振峰的几种提取方法 （1）谱包络提取法：共振峰信息包含在语音频谱包络中，因此共振峰参数提取的关键是 估计自然语音频谱包络，并认为谱包络中的最大值就是共振峰。 （2）倒谱法提取共振峰：因为倒谱运用对数运算和二次变换将基音谐波和声道的频谱包 络分离开来。去除了激励引起的谐波波动，所以可以更精确地得到共振峰参数。（3）LPC法提取共振峰：从线性预测导出的声道滤波器是频谱包络估计器的最新形式，线 性预测提供了一个优良的声道模型（条件是语音不含噪声）。 （4）求根法提取共振峰：找出多项式复根的过程通常采用牛顿—拉夫逊（Newton-Raphson）
食品脂质提取
一、如何提取食品中的总脂质？ 1.脂类的共同特点是在水中的溶解度非常小，能溶于有机溶剂中，因此可以根据相似相溶 的原理选取合适的有机溶剂提取食品中的脂质。常用来提取脂类的有机溶剂有乙醚、石油醚、氯仿-甲醇。 (1)乙醚-应用最多，国标采用。 ①优点沸点低；溶解脂肪的能力强于石油醚。 ②缺点能被2%水饱和，含水的乙醚抽提能力降低；非脂成分的溶解；易燃 (2)石油醚-稳定性好，测定较准确 ①优点沸点高，不易燃；吸收水分少；没有胶溶现象 ②缺点溶解脂肪的能力弱于乙醚 ③适用于已烘干磨碎样品，不适用于潮解结块的样品 ④只能提取游离态脂肪 (3)氯仿-甲醇 优点一种有效的溶剂，获得的脂质提取物纯净，不仅能提取游离脂，对脂蛋白、磷脂等结合脂的提取效率较高。 2.下面介绍几种提取脂质的方法： (1)索氏提取法：适用于脂类含量较高，结合态脂类含量少或经水解处理过的，样品应能 烘干、磨细、不易吸湿结块。适用于肉制品、豆制品、坚果制品、谷物油炸制品、糕点等食品中粗脂肪的测定。 (2)酸水解法：酸水解法测定的是食品中的总脂肪, 包括游离脂肪和结合脂肪。适用于各类、 各种状态的食品中脂肪测定，不适于测定含磷脂高含糖高的食品。 (3)氯仿/甲醇法：提取效率高，获得的脂质提取物纯净，不仅能提取游离脂，对结合脂的 提取也十分有效。适用于含结合态脂类，特别是含磷脂多的样品。 (4)碱水解法：本法适用于各种液状乳、各种炼乳、奶粉、奶油及冰淇淋等能在碱性溶液中 溶解的乳制品，也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。 二、如何提取鸡肉、鱼肉中的总脂质，选用什么提取剂？ 采用氯仿-甲醇法，提取剂为氯仿-甲醇-水的配比为1∶2∶0.8的氯仿-甲醇提取剂。具体实验步骤如下： ?样品→组织捣碎机捣碎成浆→取10 g →烧杯→加60 mL 甲醇→搅拌2 min→加氯仿30 mL搅拌（先后分两次）→静置2 min →布氏漏斗抽滤→残渣用氯仿抽提→搅拌后抽滤。?收集滤液，转移到分液漏斗中，加35 mLZn(AC)2（0.5％），振荡混合充分，放置24 h。
外泌体提取方法总结
1、细胞培养上清：即在4℃下，首先300×g离心10 min，吸取 上清液，然后2 000×g离心10 min；吸取上清液后，10 000×g 高速离心30 min，吸取上清液；140000×g超速离心90 min；除去上清液，所获得的沉淀即为外泌体。用PBS缓冲液洗涤沉淀并重悬后，140 000×g 再次离心90 min，100 μL PBS缓冲液重悬沉淀，冻存于-80℃备用。 2、将小鼠或人血收集在1.5mL管中，并使其在37℃下凝结1小 时而不进行抗凝。此后，将其以2,000×g离心持续10分钟获得血清。接着将血清以3,000×g离心10分钟。将上清液以无菌PBS 以1：1的比例稀释并离心再次以10,000×g保持30分钟，然后以200,000×g进行2小时超速离心。将颗粒在a中洗涤大量PBS，通过0.2-μm注射器过滤器过滤，并以200,000×g离心1小时，然后收集沉淀并重悬于PBS或PBS中用于后期功能或生化测定的培养基。 3、 为了从体液（例如尿液，支气管肺泡灌洗液，血清，血浆，肿瘤腹水）中纯化外泌体，只需通过常规方法收集液体即可。血浆用紫色的管子，EDTA抗凝，血清的话不抗凝直接离心。在4°C下在玻璃瓶中储存长达5天，直至进行外泌体纯化。 外泌体纯化的原理与从组织培养条件培养基开始时的原理相同，但由于某些流体的粘度，必须稀释它们，并增加离心的速度和长度。该方案已在作者的实验室中用于从人血浆中纯化外泌体（Caby等，2005）。
基本方案1中指出的所有预处理也适用于该方案。材料液体（例如，血浆：通过Ficoll离心与血细胞分离;淋巴，血清，尿液，细支气管灌洗或肿瘤腹水）磷酸盐缓冲盐水（PBS;附录） 2A）冷冻离心机 50毫升聚丙烯离心管0.22微米过滤装置（如Steritop，Millipore）超速离心机和固定角度或摆动式转子（见表 3.22.1）适用于超速离心机转子的聚合物管或聚碳酸酯瓶（见表3.22） 0.1） 注意：所有离心均应在4℃下进行。 1.用等体积的PBS稀释液体。将稀释的液体转移到50毫升管中。在2,000×g，4℃下离心30分钟。 2.将上清液转移到超速离心管或瓶中，没有颗粒污染（参见基本方案1，步骤3注释）。在12,000×g，4℃下离心45分钟。 3.小心地将上清液转移到超速离心管或瓶中（根据处理的液体体积，可参见表3.22.1中的管）。在110,000×g，4℃下离心2小时。 4.将沉淀重悬于1ml PBS中，并将其在其中一个管中汇集。用PBS填充管以大量稀释再悬浮液。 5.通过0.22-μm过滤器过滤悬浮液，并收集在新鲜的超速离心管或瓶中。 6.在110,000×g，4℃下离心70分钟。倒出上清液。 7.将沉淀重悬于1ml PBS中，然后用PBS填充管。在110,000×g，4℃下离心70分钟。倒出上清液。 8.将沉淀重悬于50至200μlPBS中。在-80℃下储存长达1年。
谷胱甘肽含量测定
【实验目的】 了解植物组中中抗坏血酸-谷胱甘肽循环代谢过程，学习还原型谷胱甘肽含量的测定原理和方法。 【实验原理】 谷胱甘肽是有谷氨酸（Glu）、半胱氨酸（Gly）组成的天然三肽，是一种含巯基（—SH）的化合物，广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。谷胱甘肽能和5,5’-二硫代-双-（2-硝基苯甲酸）（5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB）反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物（GSSG）。2-硝基-5-巯基苯甲酸为一黄色产物，在波长412nm处具有最大光吸收。因此，利用分光光度计法可测定样品中谷胱甘肽的含量。 【器材与试剂】 1.实验仪器与用具 研钵、高速离心机、移液管、离心管、试管、分光光度计 2.实验试剂 还原型谷胱甘肽标准液；偏磷酸溶液；磷酸溶液缓冲液（pH7）；二硫代硝基苯甲酸（5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB）溶液；蒸馏水。 3.实验材料 小麦叶片 【实验步骤】 1.标准曲线制作 取7支试管，编号，按照下表加入各种试剂，混匀，25℃保温反应10min。以1号管为参比调零，测定显色液在412nm处的吸光度。以吸光度为纵坐标，还原型谷胱甘肽物质的量（μmol）为横坐标，绘制标准曲线。 试管号 试剂（ml） 1 2 3 4 5 6 7 10μg/ml GSH标准液0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
蒸馏水 2.0 1.9 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 pH7磷酸缓冲液 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 DTNB试剂0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 GSH浓度μg/2ml 0 1 2 4 6 8 10 2.提取 取材后，称取0.2g样品置于研钵中，加入少量5%偏磷酸研磨成匀浆后，定容至6ml, 8000转离心10min。收集上清液来测定谷胱甘肽含量，测量提取液体积。 3.测定 取上清液2ml，显色，操作同标准曲线。重复3次。 显色反应后，分别记录样品管混合液的吸光度和空白对照管反应混合液的吸光度。根据吸光度差值，从标准曲线上查出相应的还原型谷胱甘肽量，计算还原型谷胱甘肽含量（μmol/g）。 4.计算 GSH含量（μmol/g）=（C x×V t）/ （FW×V S） 式中，C x为2ml样品中GSH的含量（μg）；V t为样品提取液总体积（ml）；V s为显色时样品液体积（ml）；FW为样品质量（g）。 【实验结果】 1.标准曲线 试管编号 1 2 3 4 5 6 7 GSH浓度（μg/2ml）0 1 2 4 6 8 10 吸光度值A 0 0.067 0.134 0.314 0.452 0.579 0.723 以GSH浓度（μg/2ml）为横坐标，吸光度值为纵坐标，建立标准曲线。
不同地方区域麻黄中麻黄碱含量的测定
中国是世界上惟一的天然麻黄碱生产国，麻黄为我国特产中药。我国麻黄的主要产地是内蒙古，其次是新疆、山西、吉林、辽宁、宁夏、甘肃、陕西、河北、河南等地。草麻黄产量最大，麻黄商品主流；中麻黄次之，木贼麻黄产量最小。其他药源：丽江麻黄产云南，四川，贵州。表面具较粗深的纵沟纹。膜质叶先端2裂。麻黄碱含量不少于0.6％。 每年仅新疆地区，消耗麻黄草的用量在8～10万吨左右。由于生长麻黄草的主产区是中国沙漠化最为严重的地方。而麻黄草又是这些地区的主要固沙植物，所以，近年来麻黄草的过度采挖，已经对这些地区的生态环境造成了严重影响。因此。以化学合成手段生产符合市场要求的麻黄碱将是减少麻黄草的采挖，保护生态环境，满足市场需求的有效途径。目前，化学合成手段生产麻黄碱面临的主要问题是如何低成本地得到光学纯的产物。后面合成的时候我们再具体介绍。 三种麻黄的性状比较：草麻黄（1）呈细长圆柱形，略扁，少分枝，直径 l～2 mm。（2）表面淡绿色至黄绿色，有细纵棱线，触之微有粗糙感。（3）节明显，节间长2～6cm。节上有膜质鳞叶，裂片2（稀3），锐三角形，先端灰白色，反曲，基部连合成筒状，红棕色。（4）体轻，质脆，易折断。断面近圆形，略呈纤维性，周边黄绿色，中央髓部红色或红棕色，类圆形。（5）气微香，味涩、微苦。 选择时：以干燥、茎淡绿、内心充实红棕、手拉不脱节、味苦涩者为佳。 中麻黄：（1）多分枝，直径1.5mm～3mm，有粗糙感。（2）节间长2cm～6cm。（3）膜质鳞叶长2mm～3mm，裂片3（稀2），先端锐尖、断面髓部呈三角状圆形。
茎节表面观 木贼麻黄：（1）较多分枝,直径1～1.5mm，无粗糙感。（2）节间上1.5cm～3cm，膜质鳞叶长1～2mm，裂片2（稀3），上部为短三角形，灰白色，先端多不反曲，基部棕红色至棕黑色。
常用单元音共振峰研究
常用单元音共振峰研究 浙江中医药大学,听力语言与科学学院刘凯 【摘要】目的通过研究正常人单元音共振峰，来了解正常人共振峰的频率， 为临床嗓音测试及评估提供参考标准。观察普通话语音共振峰和语图模式（宽带、窄带）。 【关键词】共振峰单元音基频 The study about commonly vowels formants Zhejiang Chinese Medical University ， Auditory And Speech Science Academy Liu Kai 【 Abstract 】Objective By studying the normal people vowels formants to understand normal people formant frequencies, to establish the normal values for the use of voice assessment.Observation mandarin formants and sonogram mode (broadband、 narrowband). 【Key words】Vowel Formant Base frequency 语言是人类最重要的交际和思维工具，是人类进化最主要的标志和人类社会沿用下来 的最方便、最快捷、最常用的传递信息的交流方式[1]。而语言是又单个的语音组成，元音 是组成语音的基本音素之一, 在振动特性上比较稳定而便于分析[2] 。诸多国家都对本国的 语言有了一定的研究。在语音数字信号处理的研究中，语音信号的共振峰是一个十分重要 的性能参数。共振峰是准周期脉冲激励进入声道时产生的一组共振频率。共振峰参数包括 共振峰频率和频带宽度，它是区别不同韵母的重要参数[3]。对认识汉语普通话单元音共振 峰的群体特征会有所帮助，同时对普通话语音参数标准的研究也是有意义的。因此我们有 必要进行些常用单元音的共振峰的研究。 1.资料与方法 元音的声源是声带颤动产生的周期性声带音，声带音通过声腔时产生共振作用，和声 腔固有频率相同或相近的一些频率得到加强，另外有一些频率则减弱甚至消失。声腔形状 的改变使得它的固有频率发生变化，声带音通过声腔时所产生的共振作用也随之发生变化，原来比较强的频率可能减弱，原来比较弱的频率可能反而加强，元音的音色自然也随之发 生改变。[4] 1.1实验对象 正常青年一名 1.2仪器 语音工作站和voice3.0 1.3方法 1.3.1.双击桌面文件voice3.0
GSH-Px活力的测定SOP
主要目的： ——测定物质谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px ）活力。 主要原理： ——谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px ）可以促使过氧化氢（H 2O 2）与还原性谷胱甘肽（GSH ）反应生成H 2O 及氧化性谷胱甘肽（GSSG ）,谷胱甘肽过氧化物酶的活力可用其酶促反应的速度来表示，测定此酶促反应中还原型谷胱甘肽的消耗，则可求出酶的活力。 H 2O 2+2GSH 2H 2O+GSSG GSH-Px 的活力以催化GSH 的反应速度来表示，由于这两个底物在没有酶的条件下，也能进行氧化还原反应（称为非酶促反应），所以最后计算此酶活力时必须扣除非酶促反应引起的GSH 减少的部分。而GSH 含量的测定可以跟据GSH 和二硫代二硝基苯甲酸作用生成5-硫代二硝基苯甲酸阴离子呈现较稳定的黄色，在412nm 处测其吸光度即可计算出 实验室签章 GSH-Px
一、试剂 ——谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）测定试剂盒（南京建成生物研究所） 二、仪器设备 ——96孔酶标板 ——UV-Vis可见多功能酶标仪 ——旋涡混匀器 ——离心机 ——水浴锅 ——移液枪及其相应量程枪头
三、实验方法 根据试剂盒说明书具体操作步骤如下: 1. 非酶管和酶管各加入1 mmol/LGSH 0.2 mL ，酶管加入稀释后的待测血清和组织匀浆液0.2 mL ，37 oC 水浴预温5分钟，酶管和非酶管分别加入试剂一应用液0.1 mL ，37 oC 水浴准确反应5分钟，酶管和非酶管分别加入试剂二应用液2 mL ，同时非酶管加入待测细胞上清液0.2 mL 。混匀，3500-4000转/分，离心10分钟，取上清1 mL 作显色反应。 2. 空白管加入1 mL GSH 标准品溶剂应用液，标准管加入1 mL 20 μmol/LGSH 标准液，非酶管和酶管各加入上一步骤1 mL 上清液，然后空白管、标准管、非酶管和酶管各加入1 mL 试剂三应用液，0.25 mL 试剂四应用液和0.05 mL 试剂五应用液。 3. 混匀，室温静置15分钟后，在412 nm 处将酶标板空板进行扫描，准确吸取 0.2 mL 各管反应液加入到新的96孔板中，酶标仪测定各孔吸光度（OD 值）。 4. 血清中GSH-Px 活力计算公式 GSH-Px 活力（U/mgprot ）--OD = 非酶管值酶管OD 值标准管OD 值空白管OD 值 ×标准品浓度（20 μmol/L ）×稀释倍数 组织中GSH-Px 活力计算公式 GSH-Px 活力（U/mgprot ） --OD =非酶管值酶管OD 值标准管OD 值空白管OD 值×标准品浓度×min 稀释倍数（5）反应时间（5) ÷[取样量（0.2 mL ）×待测组织蛋白浓度（mgprot/ mL ）] 参考文献 Oliveira Lazarin M, Ishii-Iwamoto E L, Yamamoto N S, et al. Liver mitochondrial function and redox status in an experimental model of non-alcoholic fatty liver disease induced by monosodium L-glutamate in rats [J]. Experimental and molecular pathology, 2011, 91(3): 687-694.
exosomes外泌体实验方案
外泌体分离提纯草案 By 朱旭峰 一、以超高速离心的方法来分离外泌体（细胞上清） 1.1细胞培养液(CM)是来自无菌的80%-90%的培植细胞，并用浓度比 1:1.000的蛋白酶抑制剂混合。（sigma） 1.2快速地将CM用0.22μm 的过滤筛(Millipore)过滤，来分离完整地 细胞和残渣。超速离心于120,000_g (Sorvall WXULTRA SERIES, rotor A-641) 4 ℃.2 小时 1.3用1mL 冷的PBS 重悬和清洗小囊泡，再次超速离心120,000_g (Sorvall WXULTRA SERIES, rotor A-641) 4 ℃.2 小时 1.4再用100μL 冷的PBS 重悬后转移到低粘附的管中 1.5快速地使用或置于-80℃中待用为检测外泌体的蛋白浓度，取2μL 的样品置于卡上，用Direct Detect?(Millipore) 2材料 a)细胞培养液 b)蛋白酶抑制（Sigma） c)过滤筛(Millipore) d)冷的PBS e)低粘附的管 f)Direct Detect?(Millipore) 二、以超高速离心的方法来分离外泌体（人血浆） 1.1在提取外泌体之前应该向血浆里添加1;500浓度比的蛋白酶抑制剂 (Sigma) 1.2将上清液移至一个新的管中离心200*g 20分钟4℃ 1.3小心地再将上清液移至新的管中离心10000*g 30分钟于4℃来去 除较大的囊泡、 1.4此阶段的样品可以 1.5将样品用0.22μm的注射器滤筛(Millipore)过滤并且离心110000g (Sorvall WX ULTRA SERIES, rotor F65L) 2小时4℃ 1.6用冷的PBS重悬后再次超速离心(110,000g, 1 h, 4 ℃).， 1.7将外泌体小心干燥并且用冷的PBS重悬 1.8外泌体应该立即使用或-80摄氏度冷藏 2.材料
提取锂的方法总结
提取锂的方法总结 矿石提锂的方法主要有硫酸法、硫酸盐法、石灰烧结法、氯化焙烧法，纯碱压煮法等，现综述如下： （一）、硫酸法 硫酸法从锂辉石中提取碳酸锂是当前比较成熟的矿石提锂工艺，其工艺流程如图1-1所示。此方法先将天然锂辉石在950-1100℃焙烧，使其由单斜晶系的α-锂辉石转变成四方晶系的β-锂辉石，由于晶型转变，矿物的物理化学性质也随着晶体结构的变化而产生明显变化，化学活性增加,能与酸碱发生各种反应。然后将硫酸与β-锂辉石在250-300℃下焙烧，通过硫酸化焙烧发生置换反应，即可生成可溶性硫酸锂和不溶性脉石，反应方程式如下： β-Li2O·Al2O3·4SiO2+H2SO4=Li2SO4+H2O·Al2O3·4SiO2 以上即为硫酸法从锂辉石中提取碳酸锂的工艺原理。 由文献：田千秋，陈白珍，陈亚，马立文，石西昌.锂辉石硫酸焙烧及浸出工艺研究. 稀有金属，2011，35(1)：118-123.得到具体操作步骤如下： ①焙烧，称取一定质量的锂辉石放于回转窑中1000-1100℃焙烧30min； ②冷却磨细，将其磨细到200目以下； ③酸化焙烧，硫酸（93%-98%）用量为理论用量的140%，焙烧温度250℃，焙烧时间为30min； ④水浸，将酸化熟料用去离子水进行搅拌浸出，浸出最佳条件为：常
温反应15min，液固比为； ⑤分离，浸出结束后加入C aCO3迅速中和至pH 左右，使部分铁铝进入渣中，过滤得到浸出液；浸出液通过净化后即可用于碳酸锂的提取。 图1-1 （二）硫酸盐法 硫酸盐法是用硫酸钾与天然锂辉石烧结，使矿石中的锂转变为硫
酸锂，通过熟料溶出即可使锂从矿石中进入溶液。在处理锂辉石时，烧结过程中不仅伴随着α-锂辉石的晶型转变，同时也存在着离子交换反应。实际上，该反应是α-锂辉石先转换成结构较疏松且易于反应的β-锂辉石,然后发生离子交换反应的。在加热烧结过程中，总的化学反应是： α-Li2O·Al2O3·4SiO2+K2SO4=Li2SO4+K2O·Al2O3·4SiO2 该反应是可逆的，为了使反应更加充分地向右进行，在工艺上需加入过量的K2SO4，然而由于K2SO4价格贵，故常常采用以Na2SO4部分替代K2SO4。但如果全部用Na2SO4代替K2SO4，可能生成“锂辉石玻璃”严重影响后续浸出工序，所以只能以Na2SO4部分替代K2SO4。硫酸盐法不仅可以处理硅酸盐矿，而且也可以处理憐酸盐矿。 此方法的优点是它具有通用性，几乎能分解所有的含锂矿石。缺点是若不用Na2SO4替代部分K2SO4，即消耗大量的钾盐，最终导致生产成本较高、产品也常被钾污染。 由文献：张婉思，王远明，李擎.硫酸盐法从锂云母中制取碳酸锂的工艺路线研究. 化学世界，2010，34-36.得到具体操作步骤如下：①焙烧，焙烧阶段的优化条件为：温度940℃，时间120 min，配比 锂云母：K2SO4：Na2SO4：CaO=20：：:； ②浸出，第一步：水浸。将焙烧产物按液固比3：1溶于水中，搅拌 半小时，然后静置抽滤。对滤渣进行三级浸取，将滤液合并； 第二步：酸浸。由于水浸使得80%的Li、80%的Na、30%的钾进入溶液中，需要进一步酸浸，以提高Li的浸出率，浸出操作同上，
谷胱甘肽含量测定
植物生理学模块实验指导 玲主编 科学 还原型谷胱甘肽含量的测定方法（分光光度计法） 【实验目的】 了解植物组中中抗坏血酸-谷胱甘肽循环代过程，学习还原型谷胱甘肽含量的测定原理和方法。 【实验原理】 谷胱甘肽是有谷氨酸（Glu）、半胱氨酸（Gly）组成的天然三肽，是一种含巯基（—SH）的化合物，广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。谷胱甘肽能和5,5’-二硫代-双-（2-硝基苯甲酸）（5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB）反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物（GSSG）。2-硝基-5-巯基苯甲酸为一黄色产物，在波长412nm处具有最大光吸收。因此，利用分光光度计法可测定样品中谷胱甘肽的含量。 【器材与试剂】 1.实验仪器与用具 研钵、高速冷冻离心机、微量移液枪、离心管、试管、水浴锅、容量瓶（100ml、200ml、1000ml）、分光光度计 2.实验试剂 50g/L三氯乙酸（TCA）溶液（含5mmol/L Na 2 -EDTA）：称取5g三氯乙酸，用蒸馏水溶 解稀释至100ml。再称取186mg Na 2-EDTA·2H 2 O，加入到100ml 50g/L三氯乙酸溶液中溶解。 0.1mol/L磷酸钠溶液缓冲液（pH7.7）：配制方法见附录。 0.1mol/L(pH6.8)磷酸钠缓冲液：配制方法见附录。 4mmol/L二硫代硝基苯甲酸（5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB）溶液：称取15.8mg DTNB，用0.1mol/L、pH6.8磷酸缓冲液溶解，定容至10ml，混匀，4℃保存。现用现配。
外泌体捕获分离
外泌体，带来革命变革的小不点（三）——外泌体捕获分离 外泌体天然存在于体液中，在包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁等体液中广泛分布，而且，所有培养的细胞类型均可分泌外泌体；但是，想要研究这个分布广泛的小不点可不是一件容易的事情，其中，最为困难的就是从体液或者细胞培养基中分离出高纯度的外泌体。今天，小优专题给您带来的就是外泌体研究的最关键步骤——外泌体捕获与分离这一部分的技术讲解与解决方案。 外泌体分离的传统方法为差速超速离心法和密度梯度超速离心法等，差速超速离心法是目前外泌体提取最常用的方法。简单来说是将细胞培养液或体液等样本依次在300 g、2 000 g、10 000 g离心去除细胞碎片和大分子蛋白质，最后100 000 g离心得到外泌体。此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块，质量不好，由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种方法得到的是微泡不是外泌体。另一种常用的外泌体分离方法为密度梯度离心法，将样本和梯度材料一起超速离心，样品中的不同组分沉降到各自的等密度区，分为连续和不连续梯度离心法。用于密度梯度离心法的介质要求对细胞无毒，在高浓度时粘度不高且易将pH调至中性。实验中常用蔗糖密度梯度离心法，在离心法的基础上，预先将两种浓度蔗糖溶液(如2.5 M 和0.25 M)配成连续梯度体系置于超速离心管中，样本铺在蔗糖溶液上，100 000 g离心16 h，外泌体会沉降到等密度区(1.10~1.18 g/ml)。用此种方法分离到的外泌体纯度高，但是前期准备工作繁杂，耗时，产量少。而且，这两种传统方法都需要用到超速离心机，设备昂贵，耗时长，一次最多只能做6个样品，效率低，并且需要大量的样品才能得到足够多的外泌体。 接下来小优就为您带来优宁维为您提供的高效外泌体捕获与分离技术，帮您远离枯燥乏味的超速离心，快速高效制备高质量的外泌体。话不多说，亮技术，上产品：首先闪亮登场的是简单的一步法分离外泌体，实验原理如下图： 一步法分离外泌体原理示意图 该技术的优势有节省时间，小体积样本适用（可从100 μl血浆中分离出足量外泌体），无需超速离心和其他预富集方式，试剂方便储存于运输（4℃保存）等。 除了一步法分离外泌体的技术外，小优还为您提供免疫捕获法，包括免疫微球产品与免疫预制板产品。首先我们来看免疫微球捕获分离外泌体的技术原理：
蛋白质提取的几种简单方法
蛋白质的提取方法 选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析，有机溶剂提取，层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理力场的作用使各组分分配于来同区域而达到分离目的，如电泳，超速离心，超滤等。在所有这些方法的应用中必须注意保存生物大分子的完整性，防止酸、硷、高温，剧烈机械作用而导致所提物质生物活性的丧失。蛋白质的制备一般分为以下四个阶段：选择材料和预处理，细胞的破碎及细胞器的分离，提取和纯化，浓细、干燥和保存。 微生物、植物和动物都可做为制备蛋白质的原材料，所选用的材料主要依据实验目的来确定。对于微生物，应注意它的生长期，在微生物的对数生长期，酶和核酸的含量较高，可以获得高产量，以微生物为材料时有两种情况： （1）得用微生物菌体分泌到培养基中的代谢产物和胞外酶等； （2）利用菌体含有的生化物质，如蛋白质、核酸和胞内酶等。植物材料必须经过去壳，脱脂并注意植物品种和生长发育状况不同，其中所含生物大分子的量变化很大，另外与季节性关系密切。对动物组织，必须选择有效成份含量丰富的脏器组织为原材料，先进行绞碎、脱脂等处理。另外，对预处理好的材料，若不立即进行实验，应冷冻保存，对于易分解的生物大分子应选用新鲜材料制备。 蛋白质的分离纯化 一，蛋白质（包括酶）的提取 大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中，因些，可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。 （一）水溶液提取法 稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂，通常用量是原材料体积的1-5倍，提取时需要均匀的搅拌，以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性质而定。一方面，多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大，因此，温度高利于溶解，缩短提取时间。但另一方面，温度升高会使蛋白质变性失活，因此，基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低温（5度以下）操作。为了避免蛋白质提以过程中的降解，可加入蛋白水解酶抑制剂（如二异丙基氟磷酸，碘乙酸等）。 下面着重讨论提取液的pH值和盐浓度的选择。
如何分离纯化、鉴定外泌体(借鉴材料)
如何分离纯化、鉴定外泌体 外泌体相关研究逐渐从小众走向大众，受到越来越多的关注，涌现了一大批的外泌体课题。但大家还是感觉外泌体研究好难啊！为什么呢？首要原因就在于该领域里还木有统一的、简单可行且纯度很高的分离方法。今天就来给大家聊一聊如何搞定外泌体研究中的第一步。 一、分离 超速离心法: 超速离心法是外泌体分离最常见的技术之一。据不完全统计，约有1/2的研究者会选择该种方式分离外泌体。该方法由几个离心步骤组成，可分步去除细胞、细胞碎片和大囊泡，沉淀外泌体（如图所示）。但该种方法用于血浆和血清等粘性生物液体时效率较低，且重复离心操作有可能对外泌体造成损害，从而降低其质量。 如将超速离心配合蔗糖溶液进行梯度密度离心可得到纯度更高的外泌体，是公认可以得到最高纯度的分离方法。但此法对离心时间非常敏感，一般需要8-30h，产率较低，同样不适用于血浆和血清等粘性生物液体中外泌体的分离，因此难以广泛普及。 聚合物沉淀法: 第二大主流的外泌体分离技术就是基于聚合物的沉淀法了，最常见的聚合物是聚乙二醇（PEG）。通常将含有聚合物的沉淀溶液与生物体液混合，4℃温育，低速离心，沉淀外泌体（如图所示）。目前已有成熟的PEG-base商业试剂盒，比如图中的ExoQuick?（System Biosciences）。这类试剂盒使用容易和快速，不需要额外的设备，且随着产品不断更新换代，提取效率和纯化效果逐渐提高，因而逐渐取代超速离心法并推广开来。沉淀法的主要缺点是分离物中会有少量的聚合物存在。不过大家不用担心，一般来说这些物质不会干扰下游分析，使用商业试剂盒提取外泌体也受到越来越多杂志的认可。
二、鉴定 外泌体的鉴定是继分离后又一个困扰研究者的问题。如果大家看过外泌体研究相关的文献，就肯定对一张图印象深刻。 不错，想发外泌体文章，光找到高效率的分离方法还不够，要过的第二关就是证明你分离得到的就是外泌体。鉴定方式不外乎就是下面这三种：1. 形态学（电镜）；2. 粒子大小（径粒分析）；以及3. 标志蛋白（WB）。综合来说，透射电镜可以清楚的看到外泌体的大小、形态等，属于鉴定方法中的金标准，其他两种方式则常常作为辅助使用。
麻黄碱理化性质
麻黄中含有多种生物碱，以麻黄碱和伪麻黄碱为主，其次是甲基麻黄碱、甲基伪麻黄碱和去甲基麻黄碱、去甲基伪麻黄碱。麻黄生物碱分子中的氮原于均在侧链上，属于有机胺类生物碱。麻黄碱和伪麻黄碱属仲胺衍生物，且互为立体异构体，它们的结构区别在于 Cl的构型不同。 理化性质 挥发性：麻黄碱和伪麻黄碱的分子量较小，具有挥发性。盐酸麻黄碱为无色针状结晶,无挥发性。 碱性：麻黄碱和伪麻黄碱为仲胺生物碱，碱性较强。由于伪麻黄碱的共轭酸与 C2-OH形成分子内氢键稳定性大于麻黄碱，所以伪麻黄碱的碱性强于麻黄碱。 溶解性：由于麻黄碱和伪麻黄碱的分子较小，其溶解性与一般生物碱不完全相同，既可溶于水，又可溶于氯仿，但伪麻黄碱在水中的溶解度较麻黄碱小。麻黄碱和伪麻黄碱形成盐以后的溶解性能也不完全相同，如草酸麻黄碱难溶于水，而草酸伪麻黄碱易溶于水；盐酸麻黄碱不溶于氯仿，而盐酸伪麻黄碱可溶于氯仿。
25 麻黄非麻黄碱部分中黄酮、生物碱和有机酸的分析李姿娇[1] 杨屹[1]... 分析试验室-2005-4 27 风湿关节炎片中麻黄碱的HPLC测定胡爽李晓妮... 中草药-2005-1 28 茶碱麻黄碱片的HPLC测定杨颖中国医药工业杂志-2005-6 29 HPLC测定青石冲剂中麻黄碱的含量张继敏王二虎辽宁中医杂志-2005-1 30 HPLC测定小儿化痰止咳颗粒剂中盐酸麻黄碱的含量田静许亚玲... 中成药-2005-7 31 HPLC测定苏杏胶囊中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量王瑞明张玲... 中成药-2005-6 32 药材、制剂、半成品中麻黄碱、伪麻黄碱和苦杏仁苷的同时定量研究韩桂茹[1] 赵志军[1]... 中成药-2005-4 33 HPLC测定咳喘宁口服液中盐酸麻黄碱的含量祝璇[1] 黄喆裕[1]... 中成药-2005-4 34 HPLC测定麻杏止咳糖浆中盐酸麻黄碱的含量景金柱[2] 余卫兵[1]... 齐鲁药事-2005-7 35 防风通圣颗粒中盐酸麻黄碱的双波长薄层扫描测定张岱州李振志... 齐鲁药事-2005-6 36 HPLC测定美敏伪麻口服液中盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬及马来酸氯苯那敏的含量张德强陈运刚广东药学-2005-3 37 麻黄碱印迹聚合物合成条件对其形态及结合特性的影响董襄朝王薇... 色谱-2005-1 38 高效液相色谱法同时测定双酚伪麻干混悬剂中的盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬李克色谱-2005-1 39 测定0．5％盐酸麻黄碱滴鼻液含量方法比较分析林晶陈渝军... 中国药师-2005-4 40 麻黄碱对脑缺血大鼠运动功能恢复的影响及分子机制研究赵晓科肖农... 中国康复医学杂志-2005-3期 41 HPLC法测定呋麻滴鼻剂中盐酸麻黄碱及呋喃西林的含量金辉王建首都医药-2005-10 42 离子对反相高效液相色谱法测定镇咳宁糖浆中盐酸麻黄碱的含量臧玲玲[1] 闫广利[1]... 黑龙江医药-2005-3 43 HPLC法测定磺胺嘧啶麻黄碱滴鼻液的含量黄滔敏杨蓓... 中国临床药学杂志-2005-4 44 去甲基麻黄碱在薄层色谱原位的表面增强拉曼光谱研究汪瑗王英锋... 首都师范大学学报：自然科学版-2005-2 45 HPLC法测定盐酸伪麻黄碱缓释片的相关物质吕竹芬谢清春... 广东药学院学报-2005-3 46 HPLC测定犬血浆中盐酸伪麻黄碱浓度及西嗪伪麻缓释片的初步体内药动学研究汪维鹏[4] 古卓良[2]... 中国药学杂志-2005-7 47 盐酸麻黄碱稳定性试验姚新标张文文新疆中医药-2005-2 48 复方盐酸伪麻黄碱缓释胶囊的含量测定刘国祥赵翠玲中国现代医药-2005-2 49 反相高效液相色谱法测定咳喘灵口服液中麻黄碱的含量张国阳王利江苏药学与临床研究-2005-1 50 麻黄汤中麻黄碱、伪麻黄碱在人体药代动力学研究贺丰罗佳波... 中药药理与临床-2005-1 51 紫外分光光度仪快速测定麻黄组织中总麻黄碱含量崔东亚[1] 董超[2]... 河北职工医学院学报-2005-2 52 薄层扫描法测定消炎止咳贴中麻黄碱的含量罗新舟高华宏... 湖北中医学院学报-2005-2 53 高效液相法测定复方参贝止咳颗粒中盐酸麻黄碱的含量彭松[1] 陈永刚[2]... 湖北中医学院学报-2005-1 54 HIV和去氧麻黄碱成瘾性对认知功能有损害无传染病网络动态-2005-6