倒置显微镜

倒置显微镜
倒置显微镜

词性:名词拼音:daozhixianweijing

倒置显微镜图册

进入20世纪80年代以来,光学显微镜的设计和制作又有了很大的发展,其发展趋势主要表现在,注重实用性和多功能方面的改进。在装配设计上趋于采用组合方式,集普通光镜加相差、荧光、暗视野、DIC、摄影装置于一体,从而操作灵活,使用方便。同样倒置显微镜也结合其他技术,下面简单介绍一些:

莱卡倒置显微镜.MC006-5XB-PC金相显微镜主要用于鉴定和分析金属内部结构组织,它是金属学研究金相的重要仪器,是工业部门鉴定产品质量的关键设备,该仪器配用摄像装置,可摄取金相图谱,并对图谱进行测量分析,对图像进行编辑、输出、存储、管理等功能。

XDS-200倒置显微镜是一种载物台在物镜上面的生物显微镜,由于配有长工作距离的聚光镜,长工作距离平场消色差物镜及相衬装置,故可使用各种培养皿和培养瓶,特别适用于对活体细胞和组织,流质,沉淀物等进行显微研究,该仪器可供科研,高校,医疗,防疫,农牧等部门使用。

XDS-200C电脑型倒置显微镜是将精锐的光学显微镜技术、先进的光电转换技术、尖端的计

算机成像技术完美地结合在一起而开发研制成功的一项高科技产品。既可人工观察显微图像,又可以在计算机显示器上很方便地适时观察显微图像,并可随时捕捉记录观察图片,从而对观察图像进行分析,处理等,还可以保存或打印出高像素图像照片。

4XBC电脑型双目倒置金相显微镜是将精锐的光学显微镜技术、先进的光电转换技术、尖端

的计算机图像处理技术完美地结合在一起而开发研制成功的一项高科技产品。可以在计算机显示器上很方便地观察金相图像,从而对金相图谱进行分分析,评级等对图片进行输出、打印。显微镜成像清晰,视野宽广,整体设计符合人机功能,适合长时间操作。可广泛地应用在工厂或实验室进行铸件质量的鉴定。原材料的检验或对材料处理后金相组织的研究分析等工作。本仪器是系倒置式金相显微镜,由于试样被观察表面与工作台表面重合,因此与试样高度无关,便用方便,仪器结构紧凑,外形美观大方,仪器底座支承面积较大,弯臂坚固,使仪器的重心较低安放平稳可靠,由于目镜与支承面呈45度倾斜,使观察舒适。

倒置显微镜图册

倒置显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。

机械部分

(1)镜座:是显微镜的底座,用以支持整个镜体。

(2)镜柱:是镜座上面直立的部分,用以连接镜座和镜臂。

(3)镜臂:一端连于镜柱,一端连于镜筒,是取放显微镜时手握部位。

(4)镜筒:连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转换器。

(5)物镜转换器(旋转器):接于棱镜壳的下方,可自由转动,盘上有3-4个圆孔,是安装物镜部位,转动转换器,可以调换不同倍数的物镜,当听到碰叩声时,方可进行观察,此时物镜光轴恰好对准通光孔中心,光路接通。

(6)镜台(载物台):在镜筒下方,形状有方、圆两种,用以放置玻片标本,中央有一通光孔,我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器),推进器左侧有弹簧夹,用以夹持玻片标本,镜台下有推进器调节轮,可使玻片标本作左右、前后方向的移动。

(7)调节器:是装在镜柱上的大小两种螺旋,调节时使镜台作上下方向的移动。

①粗调节器(粗螺旋):大螺旋称粗调节器,移动时可使镜台作快速和较大幅度的升降,所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中,通常在使用低倍镜时,先用粗调节器迅速找到物象。

②细调节器(细螺旋):小螺旋称细调节器,移动时可使镜台缓慢地升降,多在运用高倍镜时使用,从而得到更清晰的物象,并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。

照明部分

装在镜台下方,包括反光镜,集光器。

(1)反光镜:装在镜座上面,可向任意方向转动,它有平、凹两面,其作用是将光源光线反射到聚光器上,再经通光孔照明标本,凹面镜聚光作用强,适于光线较弱的时候使用,平面镜聚光作用弱,适于光线较强时使用。

(2)集光器(聚光器)位于镜台下方的集光器架上,由聚光镜和光圈组成,其作用是把光线集中到所要观察的标本上。

①聚光镜:由一片或数片透镜组成,起汇聚光线的作用,加强对标本的照明,并使光线射入物镜内,镜柱旁有一调节螺旋,转动它可升降聚光器,以调节视野中光亮度的强弱。

②光圈(虹彩光圈):在聚光镜下方,由十几张金属薄片组成,其外侧伸出一柄,推动它可调节其开孔的大小,以调节光量。

光学部分

(1)目镜:装在镜筒的上端,通常备有2-3个,上面刻有5×、10×或15×符号以表示其放大倍数,一般装的是10×的目镜。

(2)物镜:装在镜筒下端的旋转器上,一般有3-4个物镜,其中最短的刻有“10×”符号的为低倍镜,较长的刻有“40×”符号的为高倍镜,最长的刻有“100×”符号的为油镜,此外,在高倍镜和油镜上还常加有一圈不同颜色的线,以示区别。

显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积,如物镜为10×,目镜为10×,其放大倍数就为10×10=100。

⒈倒置显微镜中最常用的观察方法就是相差。由于这种方法不要求染色,是观察活细胞和微生物的理想方法。在此提供各种聚光器来满足需要,这种方法提供带有自然背景色的、高对比度的、高清晰度的图像。[2]

⒉开机。接连电源。打开镜体下端的电控开关。

⒊使用

⑴准备:将待观察对象置于载物台上。旋转三孔转换器,选择较小的物镜。观察,并调节铰链式双目目镜,舒适为宜。

⑵调节光源:推拉调节镜体下端的亮度调节器至适宜。通过调节聚光镜下面的光栅来调节光源的大小。

⑶调节像距:转三孔转换器,选择合适倍数的物镜;更换并选择合适的目镜;同时调节升降,以消除或减小图像周围的光晕,提高了图像的衬度。

⑷观察:通过目镜进行观察结果;调整载物台,选择观察视野。

⒋关机

取下观察对象,推拉光源亮度调节器至最暗。关闭镜体下端的开关,并断开电源。旋转三孔转换器,使物镜镜片置于载物台下侧,防止灰尘的沉降。

⒈所有镜头表面必须保持清洁,落在镜头表面的灰尘,可用吸耳球吹去,也可用软毛刷轻轻的掸去掉。

⒉当镜头表面沾有油污或指纹时,可用脱脂棉蘸少许无水乙醇和乙醚的混合液(3:7)轻轻擦拭。

⒊不能用有机溶液清擦其它部件表面,特别是塑料零件,可用软布蘸少量中性洗涤剂清擦。

⒋在任何情况下操作人员不能用棉团、干布块或干镜头纸擦试镜头表面,否则会刮伤镜头表面,严重损坏镜头,也不要用水擦试镜头,这样会在镜头表面残留一些水迹,因而可能滋生霉菌,严重损坏显微镜。

⒌仪器工作的间歇期间,为了防止灰尘进入镜筒或透镜表面,可将目镜留在镜筒上,或盖上防尘塞,或用防尘罩将仪器罩住。

⒍微镜尽可能不移动,若需移动应轻拿轻放,避免碰撞。

⒎不允许随意拆卸仪器,特别是中间光学系统或重要的机械部件,以免降低仪器的使用性能。

[2]

倒置显微镜供医疗卫生单位、高等院校、研究所用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的观察,可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程,并可将此过程中的任一形态拍摄下来。在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛。

倒置显微镜

从用途分

生物倒置显微镜,金相倒置显微镜,偏光倒置显微镜,荧光倒置显微镜等

目镜类别

单目倒置显微镜,双目倒置显微镜,三目倒置显微镜

其中三目倒置显微镜除了双眼观察用的两目,还有一目是用来外接电脑或者数码相机,也就组成了电脑型倒置xx(生物/金相……)显微镜和数码型xx显微镜。

德国的CarlZeiss公司和Leica公司、日本的Nikon公司和Olympus公司,他们的技术比较好但价格相应也很贵。国产的上海沪杏光学仪器限公司和南京江南永新光学有限公司,他们的技术已经赶上carlzeiss公司和LEICA公司

德国CarlZeiss公司

卡尔蔡司镜头的历史是1890年,发明叫作Anastigmat的散光补偿镜头而启开。之后,卡尔蔡司作为150年传统的镜头企业来,在医学系列、双眼镜、相机镜头、扩大镜、眼镜、天象仪等光学设备领域里扬名海外。其中,相机镜头具有鲜明的分辨率、细致的描写力、均匀的光圈、T*多层膜发射的加硬处理等优点。

因为多年对光学和化学的兴趣,在学徒期满之后,卡尔长期在当地的耶拿大学旁听。1846年,30岁的卡尔创办了一个工作室,早期产品是放大镜片和简单的显微镜。得益于两位大科学家恩斯特·阿贝和奥托·肖特(光学玻璃中“肖特”玻璃的开创者)的帮助,蔡司厂光学镜头的质量一直处于领先地位。二战以前设在德累斯顿的生产车间,是世界上生产规模最大的照相机工厂。

对于这个光学巨人的财富,俄国人当然不会让“美帝国主义”染指,作为战争赔偿,苏军拆除了剩下94%的工厂设备。在基辅建立了Kiev(基辅)照相机制造厂(借着这一丝血脉,俄罗斯镜头至今还能在光学领域占有一席之地)。

但是德国人的技术好像抢不走,在耶拿大学的支持下“Carl ZeissJena”的标志很快又出现了。当初被巴顿掠走的126名蔡司关键管理人员和技师,在美国的支持下,也在联邦德国(西德)的奥伯考亨重新建厂。卡尔·蔡司在“资本主义”社会里也获得了新生,蔡司厂从此一分为二。

东德的产品冠名Carl ZeissJena(卡尔.蔡司.耶拿)史称“东蔡”,西德的产品冠名Car lZeiss,史称“西蔡”,东、西蔡都标榜自己为是蔡司正宗,其实双方在设计上都秉承了蔡司传统。“塞翁失马,焉知非福”,正是这种竞争使得蔡司在光学技术上的更臻完美。

两德统一后,东西德的蔡司厂又联系经营。总部仍在奥伯考亨,拥有员工3500名,同时在世界各地设有分厂。这时的蔡司双剑合壁,在光学领域已经是第一强者。在135领域还尚有康太克斯与徕卡抗衡(康太克斯采用卡尔蔡司),但到了120领域CarlZeiss便称雄天下:哈苏、禄徕两大120巨头都使用卡尔蔡司镜头。进入数码时代,依靠蔡司的鼎力相助,原本是光学外行的索尼,摇身一变,成为消费级数码相机的业界老大之一。

日本Nikon公司

世界著名的相机公司尼康,创建於1917年7月25日,当时名为Nippon Kogaku K.K.日本光学工业株式会社。1917年起将原自1881年创立的3家小型的光学眼镜公司重新合并,聚集了大约200名雇员和8名德国技术工程师,开始光学玻璃的铸造。最早他们的产品以显微镜、望远镜系列的视觉产品为主(例如:1921 MIKRON 4x,6x),测量设备和光测量科学装置为辅,因此NHS 的名号在科学和工业界里众所周知,这个时期一般的消费者还不

是很了解这个品牌。

1920 年Nikon力邀德籍工程师Heinrich Acht 负责设计镜头,由於当时的光学技术几乎是以德国为龙头,Acht的加入等於为Nikon 带来了宝贵的技术资源。Heinrich Acht 回国後改由日本工程师Kakuya Sunayama 接手,他根据Acht的资料在1929年完成了N ikon 第一颗120mm f/4.5镜头,1931年Kakuya Sunayama 更进一步改良这款12 0mm f/4.5镜头达到与德国Zeiss 同级的水平。

二战前後的Nikon

这款镜头一直没有进入量产,事实上Nikon 当时也平行输入德国Leitz 和蔡斯镜片在本地贩售,这个试作品很可能被用来争取成为其海外制造商验证其生产实力和品质。1930年後,Nikon 不断透过技术交流和自身的努力开始试产一系列摄影用镜头从50mm到700mm 不等,主要用於大型照相机上,也从这个时期起『Nikkor』这个字首先被使用,而这个字则是从『Nikko』早期的显微镜设备上沿用而来。1937年8月Nikon 完成了50mm/f4.5、3.5和2.0 的Nikkors镜头设计,不过真正日本Kogaku 实际上生产所有镜头原件则是到了1947中期以後的事;这个时期的产品很多都被用在二次大战军用装备上,晚期也有部分产品被Leica 生产线采用。

尽管日本Kogaku掌握了生产微型照相机的镜头技术,但是还未开始生产一架真正属於自己的照相机种。主要的关键在於第二次世界大战爆发,Nikon 成为政府最大的光学军械供应者,配合日本军事活动不断增加,Nikon 旗下也增加多达19 家工厂和23,000名雇员。由於品质优异,大战其间所生产的双筒望远镜、空照镜头,投弹瞄准镜和潜望镜等,至今仍被日本军事收藏家所珍视。

战败後另起炉灶

随著第二次世界大战的结束,Nikon在美军占领下面临解散的命运。不过,就在战争结束前不久,Nikon将其部分军用生产线改组生产平民用光学产品,虽说後来仅剩一家工厂以及大约1400个雇员,但Nikon 立即开始生产起战前许多获得好评的光学产品。1945年後到1 946初,Nikon 就决定要生产一架属於自己设计制造的照相机。最初考虑的研究对象从一台双镜头的6x6 TLR开始,同时也进行著一台135mm可交换镜头的Rangefinder 机身试作。TLR的计画後来可能因经费而被终止,取而代之的就是135mm 的设计。在1946年4月15日,Nikon 决定生产20架此型相机作为Sample,并作为後续实验改进之用。194 6年9月Nikon 的照相机计画首次在媒体曝光,也在这个时间点确立了产品和公司名字『NIKON』作为主要的商标。相机实际量产则等到了1948年初才成形,这部就是Nikon 第一台相机Nikon One。

上海沪杏光学仪器有限公司

1957年应“两弹一星”的科研要求,在机电部与中科院光电研究所的共同支持下,成立“沪星仪表厂”

1963年成功制造出第一台HT自动检测仪,用于中国第一颗原子弹的研发中

1972年响应国家备战需要,开始研发和制造军用望远镜

1978年为提高和改善光学望远镜镜头的质量问题,派遣大批技术人员去一些老牌光学仪

器厂深造学习T镜头镀膜技术

1985年应国家对武器摩托化、现代化的要求,组织大量老技术工程师定向研制和开发在狙击步枪上的定向瞄准镜

1987年扩大生产规模,工厂职员一度达到千余人

1993年按国家关于国企改革需要,企业开始进行体制改革

1998年应国家经济体制改革需要,精兵简政,大量裁员

2001年在厂领导和老工程师的共同努力下大家共同集资重新办活企业,并开始光学仪器镜头的研制和显微镜方面的专项研发

2003年更名为“上海沪杏光学仪器有限公司”

2004年开始规模制造体视显微镜、立体显微镜、显微镜,并扩大生产规模

2005年开始规模生产金相显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜。

2007年应市场需求和客户反馈信息,派遣技术工程师去德国、日本等著名显微镜厂家学习显微镜镜头精加工技术.

2009年聘请德国卡尔思鲁厄大学光学专家Dr. Alain Schweitzer来我司做技术顾问,带队研发和改善显微镜镜头的光学性能

现在我们一直努力让国内客户为使用国产显微镜而自豪,让中国光学仪器再一次腾飞而奋斗,让我们的客户对产品质量不再担心,并努力打造成国内知名品牌的显微镜厂家!

MDS实验室金相显微镜配套表

名称成套性备注

主机●

目镜WF10×-18mm ●●

10×测微目镜(0.1mm)●

5×-20mm ○○

12.5×-14mm ○○

WF16×-11mm ○○

WF10×-20mm ○○

平场消色差

物镜PLAN 2.5×/0.07 ○

PLAN 4×/0.10 ○

PLAN 10×/0.25 ●

PLAN 20×/0.35 (弹簧)●

PLAN 40×/0.65 (弹簧)●

PLAN 100×/1.25(弹簧,油)●

铰链式三目镜筒(2/8分光),45°倾斜● 安装在主机上

机械移动式载物台,平台尺寸:180×165mm,行程:50×40mm ● 安装在主机上载物环板(一)(内径Φ10)●

载物环板(二)(内径Φ40)●

试样压片●

偏光装置(起偏镜插片,检偏镜插片)●

灯箱组●

6V/30W卤素灯●●● 其中2只备用

3A保险丝(Φ5×20)●●● 其中2只备用

滤色片组(蓝,绿,灰,磨砂玻璃)● 安装在主机上

1×摄像接筒(C-Mount接口)○ 适用于数码相机

0.6×摄像接筒(C-Mount接口)○ 适用于摄像系统

数码相机接口○

0.01mm测微尺○

DV130数码摄像系统(130万像素,含OPTPro图像分析软件)○

DV200数码摄像系统(200万像素,含OPTPro图像分析软件)○

DV320数码摄像系统(320万像素,含OPTPro图像分析软件)○

专用金相分析评级软件(选购)

本软件以国家检验标准为依据,开发了百余种软件功能模块,用户可根据需要,选择检验项目,在本软件的帮助下,完成检验工作。其中自动评级:软件可自动得出最终分析结果.

辅助评级:软件可得出和分析结果有一定联系的参数;

比较评级:将采集下来的试样图像和标准图库进行比较,人工作出结果判断。

参见:https://www.360docs.net/doc/8e18132219.html,/Product/ShowProduct.asp?ID=312

附:MDS金相显微图像分析系统

名称成套性备注

MDS实验室金相显微镜● 详见MDS配套表

DV320数码摄像系统(320万像素)● 详见DV320配套表

OPTPro2008金相显微图像采集分析软件● 详见OPTPro2008金相显微图像采集分析软件说明

1250万像素数码相机(CANON650)及接口○ 可选择其它数码单反相机

电脑●

以上是供应BOYIDAMEASUREMDS倒置金相显微镜(图)的详细介绍,如果你想更详细地了解供应BOYIDAMEASUREMDS倒置金相显微镜(图) 的价格、厂家、型号及规格,请直接联系供应商苏州博尔森贸易有限公司。

XDS-1B倒置生物显微镜使用说明书(重庆光电仪器有限公司)

ISO9001国际质量体系认证 ISO14001环境体系认证 从眼前做起 XDS-1系列倒置生物显微镜 使用说明书 医疗器械生产企业许可证编号:渝食药监械生产许20060009号 医疗器械注册号:渝食药监械(准)字2011第2220106号 产品标准:YZB/ 渝0048-2007;GB/T2985-2008 在您使用XDS-1系列倒置生物显微镜之前,请您仔细地阅读本使用说明书。它可以指导您正确使用,免除错误操作造成仪器 损坏,同时帮您获得最佳观察效果。

XDS-1系列倒置生物显微镜 使 用 说 明 书 申明:此说明书中内容,如产品因技术改进发生变更,恕不预告,敬请客户谅解! 从 眼 前 做 起 地 址:重庆市北碚区歇马镇沪渝村82号 电 话:(023)67959666 68287856 传 真:(023)68283256 网 址:http//:https://www.360docs.net/doc/8e18132219.html, 邮 编:400712 生产地址:重庆北碚歇马(重庆光学仪器厂) 请珍惜您周围的环境,杜绝可以避免的污染,在产品开箱安装以后, 请将产品包装废弃物分类妥善处置。衷心感谢您的合作!

1. 用途 XDS系列实验室倒置生物显微镜配备有特殊设计的长工作距离平场消色差物镜、长工作距离聚光镜和相衬装置,采用倒置式结构,因而特别适合于附着在培养皿底或悬浮在培养基中的活体观察,是细胞培养、组织培养及微生物研究的必备仪器,在水质鉴定、食品检验、化学反应沉淀物和晶体结构分析等工作中亦可发挥巨大作用,可广泛应用于生物医学、环境保护、工农业生产、教学、科研等诸多行业和部门。 2.规格 2.1 物镜 标记类别放大倍数数值孔径 (N.A.) 工作距 离 (mm) 盖玻片厚 度 (mm) 备注 LWD PLAN 10/0.25 LWD PLAN 25/0.40 LWD PLAN 40/0.60 长距平场消色差 10? 25? 40? 0.25 0.40 0.60 7.9 5 3 1.5 LWD PLAN ph 10/0.25 LWD PLAN ph 25/0.40 LWD PLAN ph 40/0.60 长距平场消色差负相 衬 10? 25? 40? 0.25 0.40 0.60 7.9 5 3 1.5 绿色标志 2.2 目镜 标记类别放大倍数焦距(mm) 视场直径 (mm) 附注 WF10?广角目镜10?25 φ20 (图一)XDS-1B型外形图(图二)XDS-1A型外形图

细胞室无菌技术标准操作规程

细胞室无菌技术标准操作规程 一、无菌室的灭菌 1. 定期打扫无菌室:每周打扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然 后用3%。来苏尔或者新洁尔灭或者0.5 %过氧乙酸擦拭。超净台上滤网需每月清洗 1 次。 2. CO孵箱(培养箱)灭菌:用75%酒精擦拭或者0.5 %过氧乙酸,再用紫外灯照 射。 3. 实验前灭菌:打开紫外灯、超净台各20-30 分钟。在开紫外灯杀菌前,应确认无 菌室无人后方可开紫外灯杀菌。 4. 实验后灭菌:用75%酒精(3%新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物 台。 5 ?定期检测下列项目:钢瓶之CO压力;CO培养箱之CO浓度、温度、及水盘是 否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换);无菌操作台内之气流压力,定期更换紫外线灯管及HEPAi滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA。 6. 水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750 ),定期更换水槽的水。 二、实验人员的无菌准备 1. 肥皂洗手; 2. 穿好隔离衣,放好拖鞋; 3. 用75%酒精棉球擦净双手; 三、无菌操作的要点 1. 凡是带入超净工作台内的酒精、PBS培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦 拭瓶子的外表面; 2. 靠近酒精灯火焰操作; 3. 器皿使用前必须过火灭菌; 4. 继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处,使用时仍要过火; 5. 各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液

6. 吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。 细胞传代培养(消化法)标准操作规程 一、原理 细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分 瓶。 二、材料和试剂 1. 无菌磷酸生理缓冲液(PBS) 2. 胰酶-EDTA溶液(0.05%胰酶-0.53mM EDTA-4Na):以10ml 分装于15 ml 无菌离心管中,保存于-0C,使用前放在37C水槽回温。 3. 新鲜培养基 4. 无菌吸管/离心管/培养瓶 三、操作步骤 1. 传代前准备 (1)预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37 r水浴锅内预热。 (2)用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。 (3)正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染。 (4)点燃酒精灯:注意火焰不能太小。 (5)准备好将要使用的消毒后的空培养瓶。 (6)取出预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。 (7)从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。 (8)打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。

Nikon ECLIPSE Ti倒置荧光显微镜使用说明

Nikon ECLIPSE Ti倒置荧光显微镜使用说明 操作步骤: 本显微镜的荧光光路与明视场(相差、DIC也属明视场)光路相对独立。当使用明视场时,无需打开荧光光源,进打开总电源即可。当使用荧光观察时,可同时打开总电源和荧光电源。 明视场观察: 1.开机:按动总电源开关“1”处接通电源,此时开关和指示灯点亮,打开显微镜底座左侧的透射照明器开关,从小到大调节照明器开关下方的亮度调节旋钮,使照明亮度适当。 2.首先将聚光器模板A放入光路,用10×物镜对样品进行对焦,调节目镜的屈光度调节环,然后换用40×物镜观察样品。 3.关机:将亮度调节旋钮旋至亮度最暗位置,关掉显微镜底座左侧的透射照明器开关,然后按动总电源开关“0”处关闭电源。 DIC微分干涉观察: 开机、关机等与明视场观察相同,区别是要使用聚光器相对应的DIC模板N1及起偏器、检偏器,将其放入光路后,再使用专用的银白色DIC物镜对焦观察。在观察过程中可旋转起偏器,达到最佳的观察效果。 相差观察: 开机、关机等与明视场观察相同,区别是要使用聚光器相对应的相差模板PH1。 荧光观察: 1.开机:先打开荧光灯电源开关,然后按住电源开关上方的荧光灯激发按钮3秒钟后松开,即可见荧光灯点亮。 2.打开荧光转盘上的荧光拨杆至“0”位置,此时荧光光路打开。旋转荧光转盘,转入所对应的滤光片位置即可进行荧光观察;在观察过程中可插入位于荧光灯源前方的减光片,以改变荧光强度,减弱对活细胞样品的损伤。 3.关机:直接关掉荧光灯电源开关即可。 注意事项: 1.短时间内频繁开关荧光灯电源,将极大的缩短荧光灯寿命。 2.荧光光源打开后即可使用,但必须使用20分钟才可以关闭;关闭30分钟以后才可以再次打开,否则会导致荧光灯损坏。 3.不要同时反方向转动显微镜左右两侧的调焦钮,否则会导致显微镜损坏。 4.粗动调焦钮达到限定位置后,如果继续向同一方向旋转会引起显微镜故障。请不要旋转过度。 5.显微镜光源在工作时会产生高温,因此小心不要接触光源以防烫伤,也不要将易燃品如纸张、布、塑料和酒精等放置于光源附近。

OLYMPUSIX51倒置显微镜操作规程-厦门大学医学院中心试验室

倒置荧光显微镜 操作规程 Olympus IX5 厦门大学医学院中心实验室 黄静茹 2017年3月

说明: ①透射光主开关;②汞灯高压电源开关;③透射光光强控制钮;④滤色片架; ⑤光路选择杆;⑥X轴和Y轴调节钮;⑦物镜转盘;⑧粗/微调焦旋钮; ⑨双目观察筒;⑩屈光度调节环;?聚光镜高度调节钮;?聚光镜对中旋钮;?视场光阑调节杆;?孔径光阑调节杆;?聚光镜转盘;?荧光光闸(SHUTTER);?荧光激发块转盘;?荧光减光阀

正式操作仪器之前请注意如下事项: 首先要在仪器预约保护时间内及时使用本人注册的校园卡刷卡开始实验。 1.查看仪器使用记录本,如之前使用者有记录仪器异常情况,请不要开机使用。 2.查看仪器整体有无异常,周围环境是否正常,需要时要开启室内空调,检查 并清空除湿机水箱。 3.查看仪器使用记录本及刷卡机“日历”,如之前使用者刚刚关机,请等候30 分钟以上再开机使用。 一、开机 1、打开透射光源(白光)主开关①; 2、打开荧光光源(汞灯高压电源)②; 3、打开电脑,进入cellSens Standard工作站; 备注:标本为HE染色、免疫组化时,不需要打开荧光光源;标本为荧光染料染色时,一般也不需要打开白光光源。 二、明场观察(Bright Field BF) 1、正确放置标本,BF主要用于HE染色、免疫组化标本; 2、转动荧光激发块转盘?到“6”的位置; 3、转动聚光镜转盘?到“BF”位置,直到听到咔嗒声; 4、将光路选择杆⑤推进去(选择目镜观察光路); 5、转动物镜转盘⑦,选用合适的物镜,调节白光光强控制钮③至合适的强度,调节粗/细调焦旋钮⑧聚焦观察,根据需要调节瞳间距⑨和屈光度⑩; 三、相衬观察(Phase contrast PH) 1、正确放置标本,PH主要用于没有任何染色的、较透明的标本; 2、转动荧光激发块转盘?到“6”的位置; 3、转动物镜转盘⑦,选用合适的物镜; 4、转动聚光镜转盘?,使相衬光学元件与所用物镜相匹配(见表1); 5、将光路选择杆⑤推进去(选择目镜观察光路); 6、调节光强控制钮③直至合适的强度,调节粗/细调焦旋钮⑧进行聚焦观察,根

倒置荧光显微镜操作说明

显微镜及数码成像系统操作简要 第一部分观察方法步骤 1、明场观察方法步骤 2、相差观察方法步骤 3、荧光观察方法步骤 第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)

1、明场观察方法步骤 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” 准备工作:柯勒照明光轴中心调节 第一次观察须完成此调试,完成后不需要再调节,直至装卸过部件后,使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。 ① 聚光镜升高到最高位置 聚光镜高度升降旋钮 ② 用10X 物镜聚焦至清晰 ③ 视场光阑打至最小 视场光阑 ④ 逐步下降聚光镜,使视场中出现清晰正多边形图像 聚光镜升降旋钮 ⑤ 调节聚光镜中心调节旋钮,使正多边形移至视场中心 聚光镜中心调节旋钮 ⑥ 逐步打开视场光阑,使正多边形与视场边缘内切 视场光阑 ⑦ 稍加大视场光阑,使它的图象刚好与视场外切即可 视场光阑

步骤 涉及部件 I ” 载物台、标本夹 3、荧光观察方法步骤 准备工作:高压汞灯对中(第一次观察时调整,以后观察时不需调整,除非更换汞灯) 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” CD+或CD-钮

主开关拨到“I ” ND 片插槽 /孔径光阑 准备工作: 高压汞灯对中(第一次观察时调整,以后观察时不需调整,除非更换汞灯) 调整完成后,请不要触动对中部件,如汞灯对中旋钮,视场光阑对中钮等。 ,待弧 载物台

观察筒 视场光阑中心调节钮 第二部分使用IPP 拍摄图像流程 1. 在桌面点击以下图标打开IPP。 2. 在菜单栏中,(采集)Acquire 菜单下点击(视频/数字图像采集)Video/Digital Capture,或点击工具栏中,即出现控制CCD 拍照的对话框。

倒置式金相显微镜的操作规程

倒置式金相显微镜的操作规程 摘要:倒置式金相显微镜的实用操作规范, 可以保证金相显微观察的效果, 也利于设备保护。但是,更重要的是规程背后包含更加丰富的内容, 这才是金相显微镜操作过程中需要深入了解的。本文介绍了倒置式金相显微镜的操作规程, 规程细节的详细分析, 以及在实践教学中应用、维护。 关键词: 倒置式; 金相显微镜; 操作规范; 日常维护; 在有些专业显微镜的使用频率非常高的, 有必要全面提高学生的显微镜技术。生物显微镜的操作, 可参考的文献比较多, 但是文献中介绍金相显微镜操作的比较少, 特别是倒置式金相显微镜。由于对样品观察面与背面平行度没有要求, 制样困难小,倒置式金相显微镜的实际应用非常多; 但现在还看不到一个比较适用、完整的。我们根据实际操作经验, 在正确使用、维护显微镜方面介绍一些经验, 供大家参考。 1. 现有文献的不足 随着技术的提高显微镜在不断地更新换代, 显微镜使用方法也要不断地调整。生物显微镜如此, 金相显微镜也是如此。而所能见到的有关金相显微镜操作方面的国内文献在这方面动作比较慢,不适应现在的要求。 1. 1. 关于变压器 近十几年来, 金相显微镜的变压器都已经实现了内置, 操作者从一般的角度出发, 不用再关心是否要连接到一个变压器上, 是否处于安全电压伏数的问题。国外在80年代初, 国内在80年代末, 基本实现了这一设计。不过, 很多最新出版的有关这方面的专业书籍, 还是沿用陈旧的说明: 注意不要直接插到220伏的电源上, 这就太落伍了。当然, 对于早期的显微镜还是需要考虑的。不过只应在操作说明的特别关注部分注明即可, 基本操作规范还是应该跟上技术、设计的发展。 1. 2. 偏重于正置式金相显微镜 在较早的文献中, 关于金相显微镜的操作类似如下的说明是主流, 为保证在聚焦过程中使物镜触及试样, 操作的次序应该是先调节粗动螺丝, 使物镜接近试样的表面, 再通过目镜观察试样, 调整粗动旋钮, 使物镜朝着离开试样的方向移动。必须养成这种操作习惯。有关金属显微组织检验方法的国家标准中也是这样的叙述: 聚焦调节时, 物镜头部不能与试样接触, 应先转动粗调旋钮使物镜尽量接近试样(目测), 然后从目镜中观察的同时调节粗调旋钮, 使物镜渐渐离开样品直到看到显微组织映像时, 再使用微调旋钮调至映像清晰为止。这样的描述, 适用于正置式金相显微镜, 而不太适用于倒置式金相显微镜, 因为使用者根本无法实现这样的操作, 尤其是在采用高倍物镜时, 根本无法观察到物镜与样品表面的距离变化。 1. 3. 操作、维护混杂在一起 这是最常见的。维护工作对一般操作者来讲不必一定了解, 混杂在一起, 容易干扰重点关注的地方。应单独列出管理者、维护者关注的部分。 1. 4. 没考虑不同厂家的金相显微镜在机械构造上的差异

细胞传代标准操作规程版

细胞传代培养SOP(消化法) 具体步骤如下: 1. 传代前准备: 1.1预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37C水浴锅内预热。 1.2 用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。 1.3 正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染。 1.4 点燃酒精灯:注意火焰不能太小。 1.5 准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8 分钟再次消毒。 1.6 取出预热好的培养用液:取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。 1.7 从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。 1.8 打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。 2. 胰蛋白酶-EDTA消化: 2.1加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶-EDTA液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37T < 2.2 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。 2.3 吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。 3. 吹打分散细胞: 3.1 吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。 3.2吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。 3.3 平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8 分钟。 3.4弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。 4. 分装稀释细胞: 4.1 分装:将细胞悬液吸出分装至2-3 个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。 4.1 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5X 105/ml。最后要做好标记。 5. 继续培养: 用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO培养箱中继续培养。传代细胞 2 小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时

尼康Ti倒置显微镜简易操作流程

尼康Ti倒置显微镜简易操作流程 明场观察方法: 1.开机程序:打开电源控制器上开关至1位置接通电源,此时开关指示灯(绿灯亮),按下机身左前方的照明器开关下方的亮度调节旋钮,使照明亮度达到适当位置。 2.先将聚光器转盘转至A位置 3.根据需要再将10X物镜放入光路,旋转粗微调节旋钮对样品进行对焦,可根据各自情况将目镜调整至适合自己的焦距。另外,可根据每人不同视力调节目镜上的屈光度调节环,以调节最清楚状态。 4.之后便可根据样品要求选择合适的物镜进行观察。 5.关机程序:先将亮度调节旋钮旋到最暗处,然后关闭机身左前方的照明器开关(白色),最后关闭控制器上开关至0处,绿色指示灯即可。 微分干涉(DIC)观察法: 6.先将聚光器上的DIC起偏器和荧光转盘下的DIC检偏器同时插入光路。 7.同时将聚光器转盘上对应DIC摸块转至光路。 8.对焦步骤与明场观察相同 9.使用DIC方式观察时,需将物镜上所标注的DIC标识(如N1或N2)和聚光器上DIC标识模块对应使用即可。本机使用10X,20X物镜时将聚光器转盘旋至N1位置。 霍夫曼观察法: 1.先取下聚光器上方的DIC起偏器,然后装上霍夫曼(HMC)专用起偏器。 2.拔出荧光转盘下的DIC检偏器,同时将聚光器转盘上对应的霍夫曼模块转至光路 3.对焦步骤与明场观察相同。 4.使用霍夫曼方式观察时,需将物镜上所标注的霍夫曼标示和聚光器上的霍夫曼标识模块对应使用即可。 荧光观察法: 1.开机程序:先打开汞灯开关1位置接通电源,此时面板上绿色开关指示灯亮,然后按住 汞灯触发按钮2至3秒,待黄色指示灯亮了即可使用汞灯进行荧光观察。 2.旋转荧光滤色块转盘将所需的荧光块放入光路,然后将荧光滤色块转盘上的荧光闸拨至 0位置即可进行荧光观察。 3.在观察过程中入需要,可根据荧光强度插入相应的减光片 4.关机程序:直接关掉汞灯电源开关即可。 CCD使用时(软件)开机顺序: 1.先将计算机打开,然后打开CCD U2控制器待绿色指示灯不再闪烁,再双击软件图标打 开软件。 2.关机则相反,先关软件,再关CCD U2控制器,最后关闭电源。 汞灯使用特别注意事项: 使用荧光进行观察时,开机后必须运行或工作半小时后方可关机(汞灯电源),关机后必须间隔半小时后才可再次开机使用。

细胞冻存与细胞复苏标准操作规程(SOP)

背景知识: 细胞培养的传代及日常维持过程中,在培养器具、培养液及各种准备工作方面都需大量的耗费,而且细胞一旦离开活体开始原代培养,它的各种生物特性都将逐渐发生变化并随着传代次数的增加和体外环境条件的变化而不断有新的变化。因此及时进行细胞冻存十分必要。细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;细胞储存在液氮中,温度达-196℃,理论上储存时间是无限的。 原理: 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。 主体内容(操作步骤): 一、材料 (一)仪器 1. 净化工作台 2. 离心机 3. 恒温水浴箱 4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃) 5. 倒置相差显微镜 6. 培养箱 7. 液氮冰箱 易生物仪器库:https://www.360docs.net/doc/8e18132219.html,/yp/product-list-42.html (二)玻璃器皿 1. 吸管(弯头、直头) 2. 培养瓶 3. 玻璃瓶(250ml、100ml) 4. 废液缸 (三)塑料器皿 1. 吸头 2. 枪头 3. 胶塞 4. 移液管(10ml) 5. 15ml离心管 6. 冻存管(1~2ml) (四)其他物品 1. 微量加样枪 2. 红血球计数板 3. 记号笔 4. 医用橡皮膏 5. 移液枪 (五)试剂 1. D-Hanks液 2. 小牛血清

olympus_i71倒置显微镜操作规程

OLYMPUS IX71倒置显微镜操作规程 编写人:於锋时间 一、目的 正确使用倒置显微镜对细胞标本的形态特征进行观察,为生命科学的研究提供更多可靠的实验数据。 二、原理 倒置显微镜系统(IX71系列)是在透镜成像原理基础上发展起来的显微观察系统,利用卤素灯为光源,光线经过聚光镜汇聚后透过标本,通过物镜对标本进行聚焦放大成像,最后通过目镜把物镜所成的像再次放大,从而使实验者能够清晰的分辨体外培养的细胞的形态以及内部结构,主要用于体外活细胞培养形态观察,根据实验需求配置了明场、暗场、相差、荧光等技术模块。 三、主要操作规程 相差观察: 1.打开主开关 2.转动光路选择盘到“眼睛”位置。 3.装上观察样本。使用10X物镜,将聚光镜转盘转到“BF”位置。 4.瞳距调节 5.屈光度调节:通过螺旋目镜屈光度调节环。 6. 通过粗微调对样本准确调焦。选择所用物镜,10X,20X,40X。 相差观察时转动聚光镜转盘到“PH”位置。相差只能用10X,20X物镜观察和摄影。 7. 调节光线强度:明场观察时,调节孔径光栏。相差观察时,打开孔径光栏 8. 观察。 荧光观察步骤: 1.打开荧光供电装置开关,关掉显微镜主开关。等大约10分钟后电弧稳定。 2.连接UV防护板 3.把光路选择转盘和选择杆转到“眼睛”位置。 4.使相应的荧光激发滤色镜进入光路 5.根据标本不同,选择U,B,G激发。

6.打开激发光光闸使光通过把所用物镜推入光路10X,20X,40X。 7.把标本放在载物台上,对标本进行调焦,如果荧光衰退快,请将激发光光闸推入光路 使用1小时后关掉电源开关。 普通明场观察: 1.打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关) 2.将样品置于载物台上 3.将光路选择旋钮调至观察位置 4.从低倍镜开始观察,相差环拨到明场(BF)位置,荧光滤色块转盘拨到“1”的位置 5.调节透射光光强,调焦,找到预观察视野 6.依次换到高倍镜,观察样品 7.拍照时将光路选择旋钮调至相机位置 关机: 1. 关闭汞灯电源(注意:汞灯需使用半小时以上方可关闭,关闭半小时以后方可再次开启) 2. 将透射光强调到最小,透射光选择按钮按出 3. 关闭明场电源开关 4. 将镜头转到低倍镜,取出样品,若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头 5. 确认数据已经保存,关闭软件 6. 使用光盘拷贝数据(禁止使用移动储存设备拷贝数据) 7. 关闭电脑,登记使用时间、荧光数字等使用情况

倒置金相显微镜安全操作规程

倒置金相显微镜安全操作规程 1内容 本操作规程规定了本公司用于观察金相组织的徕卡倒置式金相显微镜DMILM的相关使用及保养方法,使相关员工能正确使用和维护本公司显微镜。 2范围 本操作规程适用于本公司检验员的操作。 3细则 3.1准备工作 1)检查倒置金相显微镜是否良好。 2)把显微镜放在平整的桌子上。 3)倒置金相显微镜构造如图1所示。 图1倒置金相显微镜 3.2使用 1)被测试样应干燥洁净,其观察面应平整光洁,不得有杂物、凹坑及明显的加工痕迹。 2)取下显微镜防尘罩,打开照明系统电源后,显微镜后部光源灯亮。取下显微镜载物台上的物镜保护盖,将试样平稳放在载物台上。 3)用显微镜直接观察时,调整双目镜的宽度,使双眼能看到同一视场。转动显微镜右侧与载物台相连的手柄,将试样被观察部位移动到视场下,缓慢转动粗调旋钮,当视场内出现模糊的图像时,停止粗调旋钮,改为转动微调旋钮,直到整个视场内出现清晰的图像。 4)转动显微镜底座右侧的照明系统电压调节旋钮,调整光源到适宜亮度。 5)如果要用不同放大倍数进行观察,可转动换物镜旋座到所需要的放大倍数的物镜。 6)如需要对试样组织尺寸进行测量,可通过左侧目镜的目镜测微尺进行尺寸测量。可通过旋转目镜调整微尺方向。 7)如要对试样组织拍照,可通过显微镜与电脑相连的数字摄像头进行拍摄取像,所使用的软件为Profound Iron & Steel 金相图像分析系统软件。 8)使用完毕,盖上物镜保护盖,关闭电源。长时间不使用,则盖上防尘罩。

3.3 Profound Iron & Steel 金相图像分析系统 3.3.1定标 第一次使用,需进行定标。定标就是得到图像像素和常用度量单位间的对应关系,步骤如下: a)打开显微镜。 b)将物台测微尺放于载物台上,打开Profound Iron & Steel 金相图像分析软件,点击图像快速采集按钮,即可观察到显微镜下的图像,使用显微镜调焦系统对图像进行调节,调整好后,点击“抓拍F8”按钮可摄取带有标尺的清晰图像。 c)单击关闭按钮关闭图像摄取窗口,单击“标定标尺”,出现对话框。 d)标尺方式选定“x向线段”,在对话框中输入标尺名称和标尺长度(比如在50×放大倍数下摄取的标尺图像,输入标尺名称为50×,以便于记忆),单位为“公制”。然后在所摄取标尺图像起始处按下鼠标左键,向标尺另一边移动鼠标,直到结束。然后输入选定的测微尺的实际长度,点击“保存标尺”按钮。则50倍放大倍数下的标尺就定好了。 e)如果再定其他倍数下的标尺,重复上述操作。 3.3.2图像处理 a)反色:以图像相反的颜色显示图像,即是对每个像素的像素值都发生变化,灰白图像黑白反转,以突出显示物体。 b)彩色灰度化:将彩色转变为灰色,显示成256级灰度图像。 c)对比度增强:单击该按钮弹出对话框,拖动滑块可调整图像的亮度和对比度。 d)直方图均衡:增强当前图像的对比度和显示动态的边界。 e)二值化:进行阀值分割,将灰度图像转化为二值图像,变成只有两个灰度级的图像,即0和1,1代表物体,0代表背景。 f)二值图像处理:如果初始的阀值分割不能够令人满意,对二值图像的某些形式的出来通常能提高其质量,以便更准确的测量和观察。本软件包括腐蚀、碰撞、开运算、闭运算、收缩、细化、抽骨架、剪枝、粗化、No Touch、填内孔、去孤点、取碎屑、去毛刺等二值图像处理功能。 g)编辑图像:编辑当前图像,对图像像素值直接进行修改,主要作用是孔洞填充、断点连接、分割物体。 h)标注:使用该功能对图像作标注,标注图像的文本信息或迭加标尺等(常用尺寸标注结果已储存,可在对话框“文件”直接打开)。 i)景深扩展:试样不平坦时,景深范围内的图像是清晰的,景深外是模糊的,这是光学系统的物理特征,不能通过调整显微镜来解决。景深扩展功能通过将同一视场不同聚焦面的图像序列进行合成,最终可得到该视场完整清晰的图像。 j)图像拼接:显微镜视野较小,为了得到较大区域的全貌图像,图像拼接功能可以把试样上数幅有关系的图像,通过自动搜索重合区域,拼接成一幅高分辨率的全貌图像。 3.3.3图像变换 a)裁剪:单击“专用”菜单下的“视场设置”,弹出对话框,选择矩形、圆形、椭圆形工具的一种,在图像上单击左键,图像上出现视场,按住左键任意移动视场,选择完毕后,单击“裁剪”按钮。 b)任意角旋转:单击该菜单,弹出对话框,在对话框中输入角度,点击确定,图像可旋转任意角度。 c)水平翻转:将图像水平翻转。

细胞培养传代冻存复苏操作规程(自编)

细胞培养程序 材料 A、仪器 1. 净化工作台, 2. 离心机, 3. 恒温水浴箱, 4. 冰箱(4℃) 5. 倒置相差显微镜, 6. CO2培养箱, 7. 振荡混合仪 8. 酶联免疫检测仪,9. 移液枪,10. 电磁力搅拌机,11. 微孔滤器 B、玻璃器皿 1. 吸管, 2. 小烧杯(100ml), 3. 废液缸, C、塑料器皿 1. 吸头, 2. 枪头, 3. 96孔培养板, 4. 15ml离心管, 5. 50ml离心管, 6. 胶塞, D、其他物品 1. 微量加样枪, 2. 红血球计数板, F、试剂 1. D-Hanks液, 2. 小牛血清, 3. RPMI1640, 4. 双抗(青霉素、链霉素), 5. 0.25%胰酶, 6.0.025% EDTA 7. 二甲基亚砜(DMSO), 8. MTT溶液:称取250mgMTT,放入小烧杯中,加50ml培养液或平衡盐溶液在电磁力搅拌机上搅拌30min,用0.22um的微孔滤器除菌,分装,4℃保存备用,两周内有效。 一、原代细胞培养或细胞株(系)复苏培养: (一)细胞原代培养 1.贴壁细胞培养法: 1)、组织块培养法 将所取得的组织用含青霉素、链霉素400U/ml和400ug/ml的生理盐水漂洗2此,5分钟/次。取出组织尽可能的取出液滴,置青霉素小瓶中,加两滴小牛血清,用剪刀尽可能将其剪碎,用吸管将其泥状的组织点种在培养瓶壁,倒置于37°、5%CO2条件下30分钟后将培养瓶正置,从培养瓶的一端缓缓加入完全培养液(小

牛血清15%、青霉素、链霉素各100U、100ug/ml),使组织块有培养液与其接触为准,轻轻放置于37°培养。待24小时候补液。 或小块放置后,轻轻翻转培养瓶,使瓶底朝上,然后于瓶内加入适量培养基盖好瓶塞,将瓶倾斜放置在37℃温箱内。培养2~4小时,待小块贴附后,将培养瓶缓慢翻转平放,静置培养,动作要轻,严禁摇动和来回振荡,以防由于冲动而使小块漂起而造成培养失败,若组织块不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。开始培养时培养基不宜多,以保持组织块湿润即可,培养24小时后再补液,培养3~5天时可换液,一方面补充营养,一方面去除代谢产物和漂浮小块所产生的毒性作用。 其他方法:消化分离法、器官培养略 2.悬浮细胞培养法 对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。 (二)细胞株(系)细胞复苏培养 细胞复苏的主要操作步骤 (1)佩戴眼镜和手套,从液氮罐中取出安瓿或冷冻管。 (2)迅速放入38℃水浴中,并不时摇动,在1分钟内使其完全融化。 (3) 然后在无菌下取出细胞。冻存管用75%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液。 (4)在1000r/min速度下离心5~10分钟,弃去上层液,加入适量培养液后接种于培养瓶中,接种浓度1×109/L,置37℃温箱静置培养,次日更换一次培养液,继续培养,观察生长情况。若细胞密度较高,及时传代。或无需离心直接将细胞加入瓶中,并加入培养基贴壁培养12~24小时后,充去上清,换入新鲜培养基继续培养。加入的培养液的量依冻存的细胞数量,如果冻存数量为106,则稀释10倍使细胞达到105即可。 注意事项 在细胞复苏操作时,应注意融化冻存细胞速度要快,可不时摇动安瓿或冷冻管,使之尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。这样复苏的冻存细胞存活率高,生

莱卡倒置显微镜使用

一、运行程序:打开显微镜电源后,双击打开软件 二、设定菜单栏禁止设置(非专业人员勿动) 三、采集图片: (一)采集基本设置 下有有三个设置参数:(Mic即microscope) 一)设定: 可进行物镜倍数切换,建议重低倍镜到高倍镜进行观察 BF:明场,PH:相差,DIC:,POL:,FLUO:荧光

Ap:孔径光阑Int.Fine:光强 荧光激发光选择:I3(GFP) 设置目镜与摄像头分光情况 可存储上面拍摄的参数,建议连续拍摄多个样品使用(如芯片) 二):

选择调焦(F精细,C粗调)后,把鼠标放在右侧,用鼠标滚动轮进行调焦(先粗调,后精细) 载物台移动调节快速/精确 图中+为现在拍摄位置,任意点击框中地方,进行快速切换拍摄位置 片子任意位置切换对比: 在预设位置上,下拉窗口中选择位置1,点击保存 更换位置后,下拉窗口中选择位置2,点击保存 拉窗口中选择位置1,点击,即可快速切换到位置1 (如此类推)

三) 以下不建议使用: 点击后→自动曝光→ (不能调节增益) 建议:不要使用自动曝光。 曝光时间是指从快门打开到关闭的时间间隔,在这一段时间内,物体可以在底片上留下影像,曝光时间是看需要而定的,没有长短好坏的说法只有需要的讲法。曝光时间越大,摄像头反应就越长。对于很弱的信号,曝光也不能无限增加,因为随着曝光时间增加,噪音也会积累。 增益:拍摄图片时,增益不能调,需要放到最小。增益稍大一些,图像的噪声就出来了。画质反而不好。增益越大噪音越大,同等质量下的图片信噪比越低,图像质量越差。 在不过曝的前提下,增加曝光时间可以增加信噪比,使图像清晰。(拍摄荧光时,用到该原理) 饱和度是指的色彩饱合度。适可而止。调小了没色,调大了也会有噪声。建议参数1.5 伽玛值的意义是增强亮部反差(伽玛值小于1)或者增强暗部反差(伽玛值大于1)。是一种非线性的亮度调整。即伽马调整是部分增强图片暗的部分和亮的部分的对比所以拍摄荧光照片时,将伽玛值调大会感觉能增加暗荧光的亮度。建议参数0.6/1 免疫组化拍摄方法: 1.选择BF,5X倍镜下观察,调焦 2.调节曝光时间,至适中(通过观察柱状图,为正态分布)。

眼科各项标准操作规程SOP

标准操作规程(SOP)目录

眼科专业SOP制定和管理的SOP SOP编号:SOP-YK-001-1页数:3 制定人:审核人:批准人: (签名、日期)(签名、日期)(签名、日期)生效日期:颁发日期: 审查修订登记:

Ⅰ目的:统一标准,明确职责,保障临床试验的运行条件,提高临床试验的运行质量。 Ⅱ范围:适用于眼科专业的临床试验的SOP的制定和管理。 Ⅲ规程: 1由眼科专业的负责人指定本专业人员完成专业的各项SOP的起草或修订。该人员必须参加过GCP的培训,并且具有本专业临床经验,从事临床工作3年以上。 2起草人或修订人按照GCP的要求,根据本专业的实际情况起草或修订SOP,修订后签字并注明日期。然后由眼科专业的负责人审核各专业的具体SOP、审核后签字并注明日期,最后由机构负责人批准、签字并注明日期。 3SOP制定后要有一周的审核时间。注意批准日期到生效日期中间有三个月的过渡期,以便相关人员学习掌握新的SOP。 4所有制定的SOP按统一格式制定,字体大小及序号使用规则参照机构SOP制定和管理的SOP。 5SOP文件编码原则参照机构SOP制定和管理的SOP。 6眼科专业标准操作规程的编码格式为:“SOP-YK-LL-××-##”,“YK”为眼科专业前两个字的汉语拼音的第一个字母(大写); “LL”为专业试验方案设计、急救预案或仪器管理和使用类的代码;“××”为本专业SOP的顺序号;##为修订的版本号。例如:眼科专业的第一版的第一个试验方案设计类的SOP的编号为:“SOP-YK-FASJ-001-01”;再如:“SOP-YK-JJYA-001-01”表示:眼科专业的修订的第三版的第一个急救预案SOP。 7专业试验方案设计、急救预案或仪器管理的使用类的代码:试验方案设计-FASJ;急救预案-JJYA;主要疾病—JB;仪器管理和

徕卡DMI3000B型倒置荧光显微镜标准操作程序

徕卡DMI3000B型倒置荧光显微镜标准操作规程 目的:建立徕卡DMI3000B型倒置荧光显微镜标准操作程序,规范徕卡DMI3000B型倒置荧光显微镜的操作。 范围:适用于徕卡DMI3000B型倒置荧光显微镜的操作工作。 责任:全体仪器使用人员、仪器责任人、仪器管理员均应对本程序的实施负责。 内容: 1系统组成:本系统由倒置显微镜、徕卡照相机、荧光发射器、电脑等组成。 2操作流程: 2.1按下接线板电源,打开计算机屏幕电源和主机箱电源,双击桌面LAS AF图标 进入程序。 2.2打开显微镜光源,如需使用荧光灯,打开荧光灯光源,在记录本上记录下荧光 灯使用时间。 2.3显微镜物镜放大倍数有5倍、10倍、20倍、40倍,旋转物镜下转盘改变放大倍 数。 2.4明场使用方法:将透射光装置的聚光镜转盘旋转至BF档。选择合适的物镜,调 节焦距,用明视光源强度旋转及透射光装置上的光圈调节光源强度。将滤色块放在第4或5档。 2.5相差使用方法:将透射光装置的聚光镜转盘转至PH1档(物镜为10×、20×)或 PH2档(物镜为40×时)。用明视光源强度旋转及透射光装置上的光圈调节光源强度。将滤色块放在第4或5档。(5×物镜无相差功能) 2.6荧光使用方法:放下明场遮拦,拉开荧光遮拦棒,旋转滤色块转盘,选择合适 的激发波长。用荧光光源视野调节旋钮和荧光光源光圈调节旋钮调节荧光的范围和强度。 2.7图像处理:在“摄取”菜单栏Micl卡片下根据所选的物镜倍数选择放大倍数。拉 开摄像头操纵杆,单击鼠标左键选择一块白色区域,单击鼠标右键,进行白平

衡。可以通过改变摄取菜单栏摄像头卡片下曝光,饱和,伽马和增益改变现实图像的效果。明场或者相差模式,建议将增益放在零。单击拍摄,新建自己的文件夹,保存图片。 2.8荧光拍摄完毕,推进荧光遮拦棒,看一下显微镜使用登记表。 2.8.1如果下一个使用登记时间小于或等于1个小时,不需要关闭荧光灯光源,记 录下荧光灯光源使用时间。将明场电源旋至最低。将物镜旋至空挡,关闭 应用程序。填写完整仪器使用记录。 2.8.2如果下一个使用登记时间大于1个小时,使用完毕荧光及时关闭荧光灯光 源,注意需长于半个小时,记录下荧光灯光源使用时间。将明场电源旋至 最低,关闭明场电源。将物镜旋至空挡,关闭应用程序,关闭电脑。填写 完整仪器使用记录。 3注意事项: 3.1必须经过仪器使用培训才可操作仪器;使用显微镜前,请与仪器负责人联系。 3.2使用显微镜前,请仔细阅读倒置荧光显微镜标准操作规程,第一次使用倒置荧 光显微镜者请主动告知仪器负责人并作使用登记。 3.3两次开启荧光灯光源的时间必须间隔半小时以上,打开荧光灯光源后,必须半 小时后方可关闭。 3.4倒置荧光显微镜的光纤线不可折叠!以防损坏。 3.5开机顺序为:参见使用指南1、2。请勿自行调节顺序。 3.6荧光发射强度开关不可频繁转动,如需调节荧光强度,请使用倒置荧光显微镜 左侧旋钮调节。 3.7倒置荧光显微镜荧光发射器强度旋钮,请勿旋转! 3.8倒置荧光显微镜图像处理软件“设定”卡片下内容请勿随意修改!如需修改,请 与设备负责人联系。 3.9倒置荧光显微镜图像处理软件中白平衡最多进行2次。 3.10倒置荧光显微镜图像处理软件默认存储文件夹“images”请勿删除!存储图片数据 请存储于此文件夹下或者自行建立新文件夹。 3.11关机顺序为:参见2.8。关闭显微镜电源前请将显微镜光源强度调至最低。3.12倒置荧光显微镜所在房间湿度不可超过70%。

倒置生物显微镜使用操作规程 1、倒置显微镜中最常用的观察方法就是

倒置生物显微镜使用操作规程 1、倒置显微镜中最常用的观察方法就是相差。由于这种方法不要求染色,是观察活细胞和微生物的理想方法。在此提供各种聚光器来满足需要,这种方法提供带有自然背景色的、高对比度的、高清晰度的图像。 2、开机 2.1 接连电源。 2.2 打开镜体下端的电控开关。 3、使用 3.1 准备 3.1.1 将待观察对象置于载物台上。旋转三孔转换器,选择较小的物镜。 3.1.2 观察,并调节铰链式双目目镜,舒适为宜。 3.2 调节光源 3.2.1 推拉调节镜体下端的亮度调节器至适宜。 3.2.2 通过调节聚光镜下面的光栅来调节光源的大小。 3.3 调节像距 转三孔转换器,选择合适倍数的物镜;更换并选择合适的目镜;同时调节升降,以消除或减小图像周围的光晕,提高了图像的衬度。 3.4 观察 通过目镜进行观察结果;调整载物台,选择观察视野。 4、关机 4.1 取下观察对象,推拉光源亮度调节器至最暗。 4.2 关闭镜体下端的开关,并断开电源。 4.3 旋转三孔转换器,使物镜镜片置于载物台下侧,防止灰尘的沉降。 5、日常维护及注意事项

5.1 所有镜头表面必须保持清洁,落在镜头表面的灰尘,可用吸耳球吹去,也可用 软毛刷轻轻的掸去掉。 5.2 当镜头表面沾有油污或指纹时,可用脱脂棉蘸少许无水乙醇和乙醚的混合液(3:7)轻轻擦拭。 5.3 不能用有机溶液清擦其它部件表面,特别是塑料零件,可用软布蘸少量中性洗涤剂清擦。 5.4 在任何情况下操作人员不能用棉团、干布块或干镜头纸擦试镜头表面,否则会刮伤镜头表面,严重损坏镜头,也不要用水擦试镜头,这样会在镜头表面残留一些水迹,因而可能滋生霉菌,严重损坏显微镜。 5.5 仪器工作的间歇期间,为了防止灰尘进入镜筒或透镜表面,可将目镜留在镜筒上,或盖上防尘塞,或用防尘罩将仪器罩住。 5.6 微镜尽可能不移动,若需移动应轻拿轻放,避免碰撞。 5.7 不允许随意拆卸仪器,特别是中间光学系统或重要的机械部件,以免降低仪器的使用性能。

Leica DM IL LED 倒置显微镜操作规程

Leica DM IL LED倒置显微镜操作规程 一、显微镜的用途 由于微生物体积微小,远远低于肉眼的观察极限。常以微米(um)或纳米(nm)来描述其大小。因此,要对它们进行观察必须借助显微镜放大系统。显微镜能将微小物体或物体的微细部分高倍放大。 二、显微镜的操作步骤 1、去掉防尘罩,插上电源插座(电源插座一般是不拔的),打开电源开关。 2、将待检标本置于载物台上(放置之前要检查物镜是否调的太高,要确保其低于载物台垫片圆孔中心)。 3、用10×物镜对焦点,根据不同倍数的物镜,选择相应的滤光片,再根据使用者的眼间距调节双目镜筒的间距。 4、调节显微镜灯光至适当强度,然后调节粗调旋钮至看到清晰图像后,再改用微调旋钮调节标本图像至最清晰。 5、低倍镜下观察完标本的整体状况后,可改用高倍镜进一步细致的观察标本的局部情况,一般用40×物镜。(注意:转换物镜前,要先旋转粗调旋钮使物镜稍微往下调低,再进行高倍和低倍物镜之间的转换。这样是为了防止物镜碰到载物台的下缘损伤物镜。) 6、观察结束后,先将显微镜灯光调至最暗,再关闭显微镜电源,最后一定要用防尘罩盖住显微镜。 三、Leica Application suite V3软件的使用 1、打开电脑,运行Leica Application suite V3软件。 2、在观察到所需的清晰图像后,拔出活动杆(此时目镜中就无法看到图像,只能在电脑显示器中看到图像),使光路通过CCD(电荷耦合元件)至显示器。 3、点击Leica Application suite V3软件菜单栏中的“获取”菜单,则可以观察到图像。此

时若感觉显示器中的图像不是很清楚,可以通过微调旋钮调节至最清楚。 4、当图像调节至最清晰时,在获取界面点击左下角的“获取图像”,则自动转换到了“浏览”菜单的界面。此时点击该界面左下角的“采集”图像会自动保存在该软件的默认文件夹下,但是这种情况数据容易丢失。我们可以在“我的电脑”中建立自己的文件夹,然后点击该界面右上角的“导出”图标,然后根据自己的习惯重命名,还可以选择图像的类型,保存至自己的文件夹随时备用。 5、还可以点击菜单栏中的“处理”、“分析”菜单,对图像进行后期处理。 6、还原活动杆,关闭软件。 四、注意事项 1、保持光学元件的清洁对于保证好的光学性能来说非常重要,当显微镜不用时,显微镜应当用仪器提供的防尘罩盖住。 2、显微镜若暂时不使用,可以将显微镜灯光调至最暗,不能频繁开关显微镜电源。 3、调焦时注意不要使物镜碰到试样,以免划伤物镜。 4、当载物台垫片圆孔中心的位置远离物镜中心位置时不要切换物镜,以免划伤物镜。 5、亮度调整切忌忽大忽小,也不要过亮,影响灯泡的使用寿命,同时也有损视力。 6、所有(功能)切换,动作要轻,要到位。 7、关机时要将亮度调到最小。 8、目镜和物镜若被不小心弄脏,可以用擦镜纸沾擦镜油或无水乙醇,轻轻拭擦,以免损伤目镜。 9、荧光灯泡的最佳使用期限是200小时,因此每次使用时请尽量缩短时间。 10、荧光光源关闭后,15分钟内不得再开启。 拟定者:林先钊审核者:苏雁2012.10.17

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